Protocol
Взрослый (3-4 месяцев) мышей-самцов на смешанной C57BL / 6 фоне были использованы в этом протоколе. Животных содержали на 12 ч циклом свет / темнота, и давали свободный доступ к пище и воде. Все процедуры, выполняемые в этом протоколе были проведены в соответствии с процедурами, утвержденными университета Институциональная комитета Drexel Уход за животными и использование.
1. Подготовка Хирургическая Площадь
- Лечить операционный стол с 70% этанола, а затем покрыть весь хирургический скамейки с впитывающие и организовать хирургических инструментов рядом с стереотаксической.
- Настройка стереотаксической оборудования без манипулятора. Упорядочить грелку на стереотаксической и установить до 37 ° C. Избегайте перегрева животного путем размещения небольшой кусочек бумажного полотенца или хирургического площадку между животным и грелку.
- Использование автоклавного ножницами, вырезать небольшие кусочки автоклавного Gelfoam в стерильную чашку Петри, содержащую 0,9% стерильного солевого раствора до REAду для использования.
Примечание: Поддержание стерильной рабочей среды с помощью автоклавного инструментов и стерильных хирургических материалов. Re-стерилизации хирургических инструментов во время процедуры или между животных путем погружения в шаровой стерилизатора в течение 10-15 сек, по мере необходимости. Поддержание чистые перчатки на протяжении всей процедуры, протирая руки с 70% этанола, в случае необходимости, для дезинфекции.
2. Prepping мышь для хирургии
- Удалить мыши из дома клетку и весят (г).
- Место мыши в ИФ индукции камеры и установленного кислорода до 2 л / мин и ИФ испаритель 5, чтобы побудить хирургической анестезии плоскости, около 3-5 мин. Монитор для замедления дыхания и иммобилизации. Убедитесь, что мышь полностью в отключке, используя палец щепотку рефлекс.
- Когда мышь полностью в отключке, место в стереотаксической рамы, закрепите нос в нос конуса, который прилагается с трубки к ИФ. Вставьте уха баров в ушной канал и затяните, чтобы глава является стабильной.
- Бритье головы от уха до уха, и от между глазами за ушами.
- Стерилизацию кожи с чередующимися салфетки изопропилового спирта и раствор Бетадин йода, 3 раза в каждом.
- Применить искусственные слезы обоих глаз, чтобы предотвратить их от высыхания во время хирургической процедуры.
3. Хирургические процедуры
- Монитор глубины наркоза, зажимая палец или хвост. Мышь в соответствующем хирургического плоскости, когда нет ответа, и дыхание медленно и ровно.
- Сделайте парасагиттальных разрез кожи от только позади глаз почти между ушами в одном, уверенным движением с использованием № 11 лезвие скальпеля. Перемещение кожу в сторону и закрепить правую сторону с кровоостанавливающего.
- Ясно череп вышележащих мембраны с помощью тупой стороны № 11 скальпеля и хлопка наконечником аппликаторы. При желании, протрите череп с ватной палочки, смоченной в 0,9% растворе. Дайте высохнуть полностью.
- НамING небольшой линейку, отметьте переднюю границу трепанации черепа на 1 мм каудально венечного шва, и к левому краю трепанации черепа в 1 мм латеральнее сагиттального шва (рисунок 1), с постоянным маркером. Затем отметьте право и хвостовой границы трепанации черепа в 4 мм от сагиттальной и корональной швов, соответственно (рисунок 1).
- Использование 0,5 мм сверло, начинают делать трепанацию черепа путем бурения медленно после постоянного маркера контуром. Будьте уверены, чтобы не пробить череп полностью. Слегка нажмите на изолированную часть теменной кости с № 5 щипцы, слабые места уступит давлению. Когда поредели кости достаточно слабой в течение периметру, кости картина готова для удаления.
Примечание: Если исследователь трудности опыты удаления костей в одной части, это говорит о том, что кости не достаточно разбавить в процессе бурения. Рассмотрим бурения череп далее в последующих животных в facilitaте просто удаление костного кусок. - Использование 10 мл шприц, снабженный иглой 23 G, применяют небольшое количество 0,9% физиологического раствора, чтобы впитать изолированный кости и просверленное область.
- Прикрепите манипулятором для стереотаксической техники. Прикрепите новый № 11 лезвие скальпеля к держателю зонда с острой стороной лезвия, обращенной рострально.
ПРИМЕЧАНИЕ: Несмотря на то, Ростральные и хвостовой ткани испытывают острые и тупые края лезвия, соответственно, механические повреждения, вызванное проникающим травмы сравнима по всей протяженности поражения. Мы не наблюдаем ни одного заметного различия в основных характеристик реактивного глиозом включая повышение экспрессии GFAP или пролиферации, между ростральных и хвостовой секций. - Ведение манипулятором из пути, осторожно поднимите изолированный кости, используя 5/45 угловые щипцы. Вставьте кончик пинцетом в сторону изолированного кости и лифтом, используя рычаги, чтобы снять кусок кости, оставленные в одном фулл движение.
ПРИМЕЧАНИЕ: Будьте осторожны, чтобы не ударить мозг или нарушить твердую мозговую оболочку под черепом. - Возьмите небольшой кусочек пропитанной рассасывающиеся гель пены и поставить на непокрытой мозга, чтобы предотвратить его от высыхания и впитать кровь, которая может присутствовать.
- После гель пена находится в месте, качели манипулятором на место и отрегулировать лезвие центре трепанации черепа над гель пены. Удалить гель пены и опустите лезвие, пока наконечник не коснется твердую мозговую оболочку, не прокалывая твердую мозговую оболочку. Отметить спинной / брюшные координаты с помощью нониуса на вертикальной руку стереотаксической.
- Использование манипулятора, медленно опустите лезвие точно 3 мм в мозг. Это достигается с помощью отметок шкалы штангенциркуля на манипулятора. Разрешить лезвие, чтобы остаться на месте в течение 5-10 сек. Перемещение стереотаксической руку с приложением лезвия ростральнее к хвосту три раза позволяющие лезвие, чтобы достичь ростральные и хвостовой границы трепанации черепа, прежде чем перейти к opposiте конец.
Примечание: Твердая не удаляется перед вставкой лезвие. В отличие от твердой мозговой оболочки крысы, которая ~ 80 мкм в толщину 7, твердая мозговая оболочка мыши значительно тоньше (толщиной всего несколько слоев клеток) и не вызывает заметное сопротивление скальпелем во время вставки. Использование нового скальпель лезвия для каждой мыши чтобы гарантировать, что каждое животное получает последовательное повреждение. - Медленно поднять руку стереотаксической, удаляя лезвие от мозга. После удаления лезвия, немедленно поместите другую часть Gelfoam на поверхности мозга, чтобы впитать лишнюю кровь или жидкость.
- Между тем, удалить стереотаксической руку и распоряжаться № 11 лезвие скальпеля. После того, как кровотечение остановилось, удалить Gelfoam.
- Закройте рану от ушивание кожи нерассасывающегося шва, таких как ethilon или проленовой. Швы должны быть удалены 9-10 дней после операции.
- Вернуться мышь, чтобы его клетку, и позволяют мыши медленно восстанавливаться на heatinг площадку и монитор для каких-либо признаков дистресса. Восстановление от изофлуораном-индуцированной анестезией, как правило, происходит в течение 2-5 мин после удаления из изофлуораном. Не оставляйте животное без присмотра, пока он не пришел в грудины recumbancy.
- Администрирование 0,5-1 мл подкожно лактат раствор Рингера для обеспечения гидратации.
4. Послеоперационный уход
- Внимательно следить не животных после операции до выздоровления от наркоза, прежде чем вернуться в колонию.
- Чтобы уменьшить боль и дискомфорт после операции, управлять 0,05-0,1 мг / кг бупренорфин инъекции провайдера сразу после процедуры.
- Соблюдайте животных в течение 2-3 дней после операции для тяжелых признаков бедствия, такие как ограниченных движений, отсутствие ухода, или потери веса. Эвтаназии животных, демонстрирующих либо из этих признаков дистресса и удалить из исследования.
- Чтобы изучить гистопатологию поврежденных тканей, эвтаназии животных СтэнDard внутрисердечной перфузии.
- Вкратце, анестезию животных с передозировкой кетамина / ксилазина, то внутрисердечно перфузии 15-20 мл 0,9% NaCl или до тех пор, пока печень очищается от крови, а затем 60 мл 4% параформальдегида в конце эксперимента.
- Проанализируйте мозги и пост-фикс для 2-4 часа в 4% параформальдегида до передачи 30% раствора сахарозы. Раздел мозги на криостата на 40-60 мкм, и процесс по стандартным гистологических или иммуногистохимических процедур, или, как описано в Гарсия 8,9.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Потому что животные переносят эту операцию, не требуют специальных послеоперационный уход, короткие или долгосрочные периоды времени выживания легко включены в исследование, в зависимости от необходимости исследовать острую или хроническую патологию после повреждения. Основные особенности реактивного глиозом, такие как позитивной регуляции GFAP и гипертрофии сомы, может наблюдаться в начале 2-3 дней после травмы. Пик фазы пролиферации реактивных астроцитов в дни 3-5 после травмы 10. Представительные результаты, показанные ниже, от животных, которые получили ножевое ранение поражения на 7 дней раньше.
Вообще морфология и цитоархитектуры переднего мозга после травмы переднего мозга колотой могут быть визуализированы Нисслю окрашивания (рис 2). Хотя трасса лезвие наиболее известных во всем центре поражения, нарушена кортикальной цитоархитектуры раскрывает ростральной и хвостовой степень поврежденного тпроблема. Реактивные астроциты могут наблюдаться с помощью иммуногистохимии для GFAP (рис 3). Следует отметить, что многие корковые астроциты не проявляют иммуногистохимическое детектируемые уровни GFAP в отсутствие травмы. Тем не менее, выражение GFAP резко активируется в полушарии ипсилатерального к травме, оставаясь при относительно низких уровнях в контралатеральной полушарии (рис 3), предполагая, что реактивные астроциты ограничены ипсилатеральном полушарии. Обратите внимание, что в то время как ткани ипсилатеральная коркового к поражению демонстрирует заметное положительную регуляцию GFAP, другие астроцитов маркеры, такие как S100β конститутивно выраженной в отсутствии травмы (рис 4), и поддерживать подобные уровни экспрессии следующие травмы (рис 4). В дополнение к повышенной экспрессии GFAP, реактивные астроциты пройти клеточную гипертрофию. Сотовые органы и процессы увеличиваются и показать интенсивное окрашивание для GFAP (Рисунок 3).
Распространение реактивных астроцитов можно наблюдать при введении аналога тимидина 5-бром-2'-дезоксиуридина (BrdU), или с помощью иммунологического окрашивания для пролиферативных маркеров Ki67 или PCNA. Мы регулярно управлять 200 мг / кг BrdU, IP, к животным в дни 3-5 после травмы, пик реактивной глиозом 10 (рисунок 3). Однако точная дозировка и сроки BrdU следует рассматривать независимо для каждого исследования, имея в виду, что BrdU будет постоянно помеченной клетки претерпевают пролиферацию, а также их потомства, в то время введения, но клетки, которые попадают в клеточный цикл, прежде чем BrdU начинается, или после введения BrdU является полным, не будут отмечены. На рисунке 4 показано, широкое сотрудничество между локализации GFAP и BrdU в 1 неделю после травмы, указывая, что многие реактивные астроциты распространение во времени курса введения BrdU. Обратите внимание, что прoliferating реактивные астроциты преимущественно локализована вблизи сердцевины поражения, в то время как реактивные астроциты локализуются дистально от сердцевины поражения в значительной степени непролиферативной (фиг.4).
Рисунок 1:. Схема черепа мыши, изображающие площади трепанации черепа Синие линии изображают начальные маркировке границ области, которая будет пробурена. Верхняя левая знаки на расстоянии 1 мм ниже или сбоку от корональных или сагиттальной швов, соответственно. Нижние и правый знаки оцениваются по 4 мм с фронтальной и сагиттальной швов, соответственно. Трепанация черепа осуществляется путем бурения круг в пределах обозначенных границ (пунктирная линия), создавая трепанации черепа, что примерно 3 мм в диаметре (пунктирная линия). Схема выполнена не в масштабе.
Рисунок 2: Нисслю окрашивание всей ростральной-каудальном степени объема поражения. (- С) Корональные кусочки пострадавших мозги 1 неделя после травмы, показывая полушария ипсилатерального поражения. Вставки изображают увеличенной в образах коробочной регионах. Трасса лезвие наиболее заметно в центре поражения, ~ 2,5 мм от брегмы (стрелка в В). Обратите внимание на разрушенный кортикальный цитоархитектуры (вкладки) в разделах передней (А) и задней (С) поражения центра. Масштабная линейка 500 мкм, вставка, 250 мкм. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.
Рисунок 3: сильный> Светлое иммуногистохимии для GFAP 1 неделю после травмы переднего мозга колотой. (A - B) малом увеличении изображения GFAP окрашивания в контралатеральной (А) и (В ипсилатерального) полушарий же среза ткани из травмированного животного. Поражение сайт показано на (B), и соответствующая область в неповрежденной контралатеральной полушарии показано на виде (А). Масштаб бар, 100 мкм. (C - D) большом увеличении изображения нормального (С) и (D реактивных астроцитов) из контралатеральной и ипсилатеральной полушарий, соответственно. Обратите внимание на резкое гипертрофию тела и процессов реактивного астроцитов клеток в (D), по сравнению с (С). Масштаб бар, 10 мкм.
825 / 52825fig4.jpg "/>
Рисунок 4: Реактивные астроциты пролиферируют после травмы переднего мозга колотой. (- B) иммунофлуоресцентного окрашивания для BrdU (красный) и GFAP (зеленый) в неповрежденной, управления (А) и травмированных (B) мозги, 1 недели после колотой травмы. (C - D) Immunofluroescent окрашивание BrdU (красный) и астроцитов маркер S100β (зеленый) в неповрежденную (C) и получили ранения (D) полушария, 1 неделю после колотой травмы. Животные получали BrdU в течение дня 3-5 после травмы. Следует отметить, что многие астроциты пролиферирующих в месте повреждения в поврежденной коре (Б и Г, вклейки, стрелки), в то время как астроциты в неповрежденной коры не пролиферирующих (А и С, вставки). Counterstaining с DAPI (синий). Масштабные баров, 100 мкм, вставка, 25 мкм.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Очень важно, что череп или основной твердая, не повреждены во время бурения. Используйте небольшое давление во время бурения для обеспечения череп не проколоты. Кроме того, следует позаботиться при подъеме черепа кусок, чтобы обеспечить твердую мозговую оболочку не стартовал с костью.
Травмы переднего мозга удар описано здесь моделям проникающей травмы ЦНС. Хотя менее клинически переводимые чем ЧМТ моделей, таких как FPI или ТПП, поражение переднего мозга модель удар служит полезным инструментом для широкого круга исследований, направленных на изучение различных биохимических, клеточных, молекулярных или события, инициированные дискретной ЦНС оскорбление. Несмотря на то, когнитивные нарушения были зарегистрированы в крысах, через 3 недели после травмы двусторонней колотой 11, следует отметить, что одностороннее повреждение ножом модель, как описано здесь, лучше всего подходит для исследований, направленных на решение клеточный ответ на повреждение. Фундаментальные аспекты различных процессов нейропатологических, такие как реактивный глиоз и образование рубцовой может быть легко обнаружен и исследован. В отличие от ИПИ или ТПП, которые производят диффузный и широко невропатологии, локализованный активации глиальных и патологии, облегчить сравнение внутри животного, между потерпевшими и неповрежденной полушарий. Кроме того, проникновение менингеальных клеток в ЦНС в месте повреждения представляет возможность исследовать взаимодействие между этими клетками и местных реактивных астроцитов. Действительно, такие взаимодействия имеют решающее значение в формировании рубцовой ткани, и было показано, что негативно регулировать разрешающие свойства реактивных астроцитов в регенерации аксонов 12.
Здесь мы используем стандартные процедуры иммуногистохимических, чтобы продемонстрировать некоторые из основных особенностей реактивной астроглиоза, такие как гипертрофия клеток органов и процессов, повышенной экспрессии GFAP и распространения травмы, вызванной. Обратите внимание, что, хотя полости не наблюдается у мышей 1-2 недель ВОЛСмычание эта процедура исследования на крысах сообщить формирование полости, 3 недели после травмы 11. Различия в невропатологии между мышами и крысами наблюдаются также в повреждений спинного мозга. В то время как у крыс, которые подвергаются травме спинного мозга экспонат кисты или образование полости в месте повреждения, такие полости не образуют у мышей 13,14.
Процедура проста, надежна, легко воспроизводимым, и требует минимального оборудования. Это может быть легко модифицирована для выполнения крыса или мышь исследования. В частности, использование этой модели с различными трансгенных линий мышей или в фармакологических исследований может обеспечить новый понимание механизмов, регулирующих реакцию ЦНС травмы. Размер поражений и тяжесть может быть изменен путем регулировки глубины лезвия и путешествия расстоянии стереотаксической руку держа нож, чтобы произвести дискретных проколы, а не продольные механические повреждения. Таким образом, удар модель травмы переднего мозга может служить отличным experimentaл платформа, с которой для изучения конкретных аспектов различных нейропатологических ответов травмы.
Травма ЦНС вызывает сложную реакцию, что является динамичным и многоклеточные 6. В дополнение к реактивных астроцитов, микроглии мобилизовать быстро фагоцитируют мусор и инициировать за и противовоспалительные сигнальных каскадов 15-18. Активированные микроглии и макрофаги вторжение вырабатывать цитокины и хемокины, создавая неблагоприятные условия для нормального функционирования клеток и выживания 19-21. Внеклеточного матрикса (ECM) молекулы, такие как сульфат хондроитина протеогликан (CSPG), изготавливаются из различных типов клеток, в том числе реактивных астроцитов и фибробластов, и создать враждебную среду для регенерации и структурной реорганизации на выживание нейронов 22,23. Здесь мы показываем, некоторые из главных особенностей реактивной астроглиоза, которые происходят следующие травмы переднего мозга ножевое. Положительная регуляция промежуточного Filaments, такие как GFAP астроцитов, пролиферации и образования рубцовой глиальных, с последующей реконструкции тканей легко оценивается с помощью стандартных процедур иммуногистохимии.
Следует отметить, что, хотя некоторые особенности реактивного глиозом данном случае подчеркивается, реактивная глиоз сильно зависит контекст, с различными функциями и профилей экспрессии генов, которые возникают в зависимости от конкретного триггера 24. Тем не менее, ряд принципиальных свойств, касающихся реагирования ЦНС травмы и попытки ремонта могут быть смоделированы и изучены в отношении переднего мозга колотой поврежденного ткани. Действительно, было показано, что целевой абляцию пролиферирующих реактивные астроциты после травмы переднего мозга удар приводит к увеличению инфильтрации лейкоцитов в ЦНС и повышенной нейрональной дегенерации, демонстрируя нейропротекторного свойства реактивных астроцитов 2. Совсем недавно, реактивные астроциты изоляции после проникающего колото поражения, бут не неинвазивным травмы, продемонстрировать потенциал нервной стволовых клеток в пробирке 25,26. Таким образом, передний мозг удар является мощным модели повреждения для изучения широкий спектр биохимических, клеточных и молекулярных событий, вызванных повреждением центральной нервной системы. Легкость и простота этой модели повреждения будет способствовать дальнейшие исследования, которые могут привести к новым проникновением в ответ на повреждение ЦНС и ремонт механизмов.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Stereotax | Harvard Apparatus | 726049 | |
| High speed micro drill | Harvard Apparatus | 724950 | |
| stainless steel scalpel blade, #11 | MedVet | JOR581S | |
| 5/45 angled forceps | Fine Science Tools | 11251-35 | |
| Gelfoam sponge 12 cm x 7 mm | Fisher | NC9841478 | |
| Rb anti-GFAP | DAKO | Z033429-2 | Dilution - 1:20,000 (bright-field); 1:1,000 (fluorescence) |
| Shp anti-BrdU | Abcam | ab1893 | Dilution - 1:20,000 (bright-field); 1:500 (fluorescence) |
| Biotinylated goat anti-rabbit | Vector Laboratories | BA-1000 | Dilution - 1:400 (bright-field) |
| Biotinylated rabbit anti-sheep | Vector Laboratories | BA-6000 | Dilution - 1:400 (bright-field) |
| Alexafluor 488 goat anti-rabbit | Life Technologies | A-11008 | Dilution - 1:400 (bright-field) |
| Alexafluor 568 donkey anti-sheep | Life Technologies | A-21099 | Dilution - 1:1,000 (fluorescence) |
| DAPI Nucleic Acid Stain | Life Technologies | D3571 | Dilution - 1:1,000 (fluorescence) |
| Cresyl Violet Acetate | Sigma Aldrich | C5042-10G | Dilution - 1% (bright-field) |
References
- Hamby, M. E., Sofroniew, M. V. Reactive astrocytes as therapeutic targets for CNS disorders. Neurotherapeutics. 7 (4), 494-506 (2010).
- Bush, T. G., et al. Leukocyte infiltration, neuronal degeneration, and neurite outgrowth after ablation of scar-forming, reactive astrocytes in adult transgenic mice. Neuron. 23 (2), 297-308 (1999).
- Faulkner, J. R., et al. Reactive astrocytes protect tissue and preserve function after spinal cord injury. The Journal of neuroscience : the official journal of the Society for Neuroscience. 24 (9), 2143-2155 (2004).
- Okada, S., et al. Conditional ablation of Stat3 or Socs3 discloses a dual role for reactive astrocytes after spinal cord injury. Nature Medicine. 12 (7), 829-834 (2006).
- Voskuhl, R. R., et al. Reactive Astrocytes Form Scar-Like Perivascular Barriers to Leukocytes during Adaptive Immune Inflammation of the CNS. Journal of Neuroscience. 29 (37), 11511-11522 (2009).
- Burda, J. E., Sofroniew, M. V. Reactive Gliosis and the Multicellular Response to CNS Damage and Disease. Neuron. 81 (2), 229-248 (2014).
- Maikos, J. T., Elias, R. A., Shreiber, D. I. Mechanical properties of dura mater from the rat brain and spinal cord. Journal of neurotrauma. 25 (1), 38-51 (2008).
- Garcia, A. D., Doan, N. B., Imura, T., Bush, T. G., Sofroniew, M. V. GFAP-expressing progenitors are the principal source of constitutive neurogenesis in adult mouse forebrain. Nat Neurosci. 7 (11), 1233-1241 (2004).
- Garcia, A. D., Petrova, R., Eng, L., Joyner, A. L. Sonic hedgehog regulates discrete populations of astrocytes in the adult mouse forebrain. J Neurosci. 30 (41), 13597-13608 (2010).
- Amat, J. A., Ishiguro, H., Nakamura, K., Norton, W. T. Phenotypic diversity and kinetics of proliferating microglia and astrocytes following cortical stab wounds. Glia. 16 (4), 368-382 (1996).
- Hozumi, I., et al. Administration of prosaposin ameliorates spatial learning disturbance and reduces cavity formation following stab wounds in rat brain. Neuroscience letters. 267 (1), 73-76 (1999).
- Ness, R., David, S. Leptomeningeal cells modulate the neurite growth promoting properties of astrocytes in vitro. Glia. 19 (1), 47-57 (1997).
- Byrnes, K. R., Fricke, S. T., Faden, A. I. Neuropathological differences between rats and mice after spinal cord injury. Journal of magnetic resonance imaging : JMRI. 32 (4), 836-846 (2010).
- Steward, O., et al. Genetic approaches to neurotrauma research: opportunities and potential pitfalls of murine models. Experimental neurology. 157 (1), 19-42 (1999).
- Davalos, D., et al. ATP mediates rapid microglial response to local brain injury in vivo. Nature neuroscience. 8 (6), 752-758 (2005).
- Hanisch, U. -K., Kettenmann, H. Microglia: active sensor and versatile effector cells in the normal and pathologic brain. Nature neuroscience. 10 (11), 1387-1394 (2007).
- Neumann, H., Kotter, M. R., Franklin, R. J. M. Debris clearance by microglia: an essential link between degeneration and regeneration. Brain. 132 (2), 288-295 (2008).
- Nimmerjahn, A. Resting Microglial Cells Are Highly Dynamic Surveillants of Brain Parenchyma in Vivo. Science. 308 (5726), 1314-1318 (2005).
- Horn, K. P., Busch, S. A., Hawthorne, A. L., van Rooijen, N., Silver, J. Another Barrier to Regeneration in the CNS: Activated Macrophages Induce Extensive Retraction of Dystrophic Axons through Direct Physical Interactions. Journal of Neuroscience. 28 (38), 9330-9341 (2008).
- Ip, C. W. Immune Cells Contribute to Myelin Degeneration and Axonopathic Changes in Mice Overexpressing Proteolipid Protein in Oligodendrocytes. Journal of Neuroscience. 26 (31), 8206-8216 (2006).
- Perry, V. H. Contribution of systemic inflammation to chronic neurodegeneration. Acta neuropathologica. 120 (3), 277-286 (2010).
- McKeon, R. J., Jurynec, M. J., Buck, C. R. The chondroitin sulfate proteoglycans neurocan and phosphacan are expressed by reactive astrocytes in the chronic CNS glial scar. Journal of Neuroscience. 19 (24), 10778-10788 (1999).
- Silver, J., Miller, J. H.
- Zamanian, J. L., et al.
- Buffo, A., et al. Origin and progeny of reactive gliosis: A source of multipotent cells in the injured brain. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 105 (9), 3581-3586 (2008).
- Sirko, S., et al. Reactive glia in the injured brain acquire stem cell properties in response to sonic hedgehog. [corrected]. Cell stem cell. 12 (4), 426-439 (2013).
