Abstract
Luktesans er sterkt konservert blant arter, og er nødvendig for reproduksjon og overlevelse.
Hos mennesker er luktesans også en av sansene som er berørt med aldring, og er en sterk prediktor for neurodegenerative sykdommer. Dermed er luktesans testing brukes som en ikke-invasiv diagnostisk metode for å detektere nevrologiske underskudd tidlig. For å forstå mekanismene bak lukte nettverk mottakelighet, har lukte forskning på gnagere steget i det siste tiåret.
Her presenterer vi en meget enkel, effektiv og reproduserbar tid olfaktoriske testmetoden av medfødt luktoppfatning og sensitivitet i mus uten behov for noen før mat eller vann begrensning. Testene utføres i et kjent miljø til musene, krever bare de luktene og en 2 min sesjon odoranten eksponering. Analysen er utført, post-hoc, ved hjelp av IT-baserte kommandoer på ImageJ og kan være, derforGjennomført fra begynnelse til slutt med en forsker.
Denne protokollen krever ingen spesiell maskinvare eller oppsett og er indisert for ethvert laboratorium interessert i å teste luktesansning og følsomhet.
Introduction
Luktesans er en av de mest utviklede og viktige sensoriske funksjoner hos pattedyr. Fall lukte aktivitet kan påvirke matinntak, sosial atferd og, i verste fall, selv overlevelse. Hos mennesker er lukte forverring aldersavhengig 1 og regnes som en sterk prediktor for nevrologiske lidelser 2-6. Lukte identifisering test utviklet av University of Pennsylvania representerer i dag en av de mest brukte, ikke-invasive og kvantifiserbare, diagnostiske tester som kan vurdere tidlige nevrologiske underskudd 7 og forutsi med stor sannsynlighet progresjon av demens 8,9.
Tilgjengeligheten av luktsystemet og prominence av luktesansen hos gnagere, har utløst en intens linje med forskning adressering mekanismene bak lukte funksjoner 10. Vi har tidligere vist at tap av funksjon av signale recepteller Notch1 påvirker lukte unngåelse 11. I denne protokollen bruker vi mus mangler signalanlegget ligand, Jagged1, i nevroner eller gliaceller å studere lukte ytelse.
Medfødt luktesans er definert av tre parametere som persepsjon, diskriminering mellom lukt og lukt følsomhet 4. Olfactory testing i gnagere kan gjøres på en rekke måter, og noen Adferdsstudier gjøre bruk av olfactometers, som gir lukt til dyret ved en bestemt dampkonsentrasjoner og i et nøyaktig tidsrom 12-14. Likevel er dette instrumentering dyrt og kan være tilgjengelig bare i spesialiserte anlegg. I vårt arbeid, gir vi en enkel, hurtig og reproduserbar olfactory testprotokoll, som utføres ved hjelp av flyktige dufter. Testene beskrevet tiltak oppfatningen til en tiltrekkende eller frastøtende lukt og vurdere diskriminering mellom duft og vann 11,15,16. Ved å bruke samme oppsett, we kan også måle følsomheten for lukt ved forskjellige konsentrasjoner 16,17. Den post-hoc datastøttet videobehandling, inspirert av arbeidet til side og kolleger 18, gir deg resultater uten behov for eksperimentell blinding og åpner for en enkelt person å gjennomføre hele eksperimentet.
Denne protokollen er ment å gi en mulighet for å studere olfactory oppførsel i mus.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Alle dyr prosedyrer er i samsvar med EU-direktiv 2010/63 / EU om beskyttelse av dyr som brukes til vitenskapelige formål og er godkjent av den lokale Animal Care Committee (Fribourg, Sveits).
1. Animal Forberedelse
- Forsøksdyr
- Utføre eksperimenter på voksne mannlige villtype- og transgene mus (C57BL / 6 bakgrunn) på 3-5 måneders alder. De tre grupper av mus tilsvarer vill typen kull kontroller (gruppe A, Jagged1 FLOX / FLOX 19) og to betingede KO mus linjer (gruppe B, Jagged1ncKO og C, Jagged1gcKO).
- Hus mus under standard laboratorieforhold i et ventilert rom, med en 12-timers kontrollert mørk / lys syklus og gi mat og vann ad libitum.
2. Forsøksoppsett
- Eksperimentell arena
- For den eksperimentelle arena, bruke en ren sterilisert mus bur (36 cm lengde x 20,5 cm bredde x 13,5 cm høyde) (figur 1A).
- Tilordne hver mus til en nummerert bur med friskt sengetøy, 3 cm høy. Hvis bur blir brukt om igjen, som i lukt sensitivitet test, ta følgende forholdsregler for å unngå krysskontaminering mellom lukt og mus.
- Marker vannsiden.
- Rengjør smalere veggene av bur med to tissuepapirer sprayet med 70% etanol, en for hver side.
- Hoper seg opp bur ifølge genotypen til musene og lagrer midlertidig under en laminær hette.
- Kamera
- Montere et kamera på en tilpasset stativ med mål på 58 cm fra bunnen av buret (figur 1A). Fikse posisjonen til Tripod og buret og avgrense med karakterer for å tillate kameraet til å være sentrert på toppen av buret.
- Spille inn videoklipp på 320 piksler x 240 piksler, 15,08 bilder per sekund som MOV-filer.
- Lukt
- Suspendere scents, når angitt, i oppløsningsmidler er de oppløselige i hvilke.
- For preferanse testbruk peanøttsmør. Resuspender peanøttsmør i jordnøttolje (10% w / v).
- For å unngå bruk test rent 2-metylsmørsyre (2-MB) syre (98%).
- For sensitiviteten testen, bruker kvinnelig urin fra samme mus koloni og bakgrunn (C57BL / 6).
- Samle urinen for bekvemmelighet 1-2 dager før luktetesten. Beherske og hold musa under panseret med buken over buret rutenettet. Under buret gitter plassere en petriskål av plast for å samle dråper urin.
- Samle urin fra hver kvinne i en 1,5 ml tube og bland alle urinprøver for å normalisere for variasjon mellom dyr. Oppbevar ved -20 ° C inntil bruk.
- På dagen for forsøket tines, urin og utfør fire fortynninger i dobbelt destillert vann ved en fortynningsfaktor på 10 (1:10, 1: 100, 1: 1000, 1: 10.000).
3. Olfactory Testing
Merk: I denne protokollen lukt er bevisst valgt som oppfattes som sterke tiltreknings (peanøttsmør og kvinnelig urin) eller sterk frastøtende (2 MB acid) 15. Det er viktig å utføre preferanse og følsomhetstester til hyggelige lukt før unngåelsestest for å eliminere muligheten for interferens med lukte oppførsel. Men for enkelthets skyld, i dette papir, og preferanse unngåelsestest vil bli beskrevet under både den oppfatning test. Hver atferds sesjon starter med en tilvenning fase.
- Tilvenning Phase
- Plasser dyret i den rene tildelt buret og la den utforske i 5 min (figur 1B). Da miljøet i den eksperimentelle buret er kjent for hjemmeburet, er denne korte tid nok til å gi rom for tilvenning.
- Hvis følsomheten testen er fullført på en dag, utføre tilvenning bare én gang før applikasjonern av høyeste fortynnet lukt. Dersom sensitivitetstesten er utført på forskjellige dager, på hver dag en tilvenning fase på en ny ren bur er nødvendig.
- Perception Test
- Etter tilvenning, aktivere kameraet og umiddelbart pipette 60 mL av behagelig duft (peanøttsmør) og 60 mL av nøytral duft (vann fra springen) på motstående vegger i buret på ca 10 cm fra bunnen (figur 1C).
- La musa utforske lukt i 2 min (figur 1D). Deretter slår du av kameraet.
- På dette punktet, fortsette med neste mus med start fra tilvenning fase. Utfør unngåelsestest på nøyaktig samme måte ved å bruke 60 ul av frastøtende lukt (2-MB syre) og 60 ul vann.
- Sensitivitet test
- Evaluere tiltrekningen terskelen til hannmus til økende konsentrasjoner av kvinnelig urin i følgende rekkefølge: 1: 10000; 1: 1000; 1: 100; 1:10 og ren urin.
- Etter tilvenning, eksponere hver mus til høyeste fortynning pipetteres av eksperimentator som tidligere beskrevet i 3.2.1.
- Spill den utforskende oppførsel av urin kontra vann, innen 2 min tidsramme på et videokamera. Etter at alle mus kullene blir testet for den høyeste fortynning (1: 10.000), utsettes for en høyere konsentrasjon av urin, som angitt ovenfor.
4. Post-hoc dataanalyse
Merk: Alle atferdstestene beskrevet behandles post hoc følge dataanalyse instruksjoner.
- Åpne MOV filer i ImageJ for Windows-systemer
- Installere Quick Time for Java ved hjelp av tilpassede innstillinger fra http://www.apple.com/quicktime/download.
- Installere Quick Time plugin fra ImageJ hjemmeside (http://rsb.info.nih.gov/ij/plugins/qt-capture.html).
- Importere QTJava.zip (C: Program Files QuickTime QTSystem) inn i biblioteket extension av ImageJ (.ImageJ jre lib ext).
- Kopier også QTJava.zip i plugins mappen og endre navnet som QTJava.jar.
- Installer de seks skript festet i makroer mappen (ImageJ plugins Macros).
- Åpne ImageJ og kompilere og kjøre Quick Time plugin, deretter tett ImageJ.
- Gjenåpne ImageJ og åpne MOV-filen ved hjelp Fil> import> med Quick Time.
- Video Adjustment
- Når videoen filen åpnes i ImageJ, klippe video for å oppnå en konstant 2 min leting fra tiden eksperimentator har pipetteres de odorants inn i buret (T0). Identifiser ramme som tilsvarer den T0 og fjerne tidligere rammer bruker trinn på 1 (ImageJ bilde Stacks ToolsSlice fjerner). Bruk samme kommando for å slette alle rammene som overstiger 2 min leting.
- Pass på at buret er sentrert og om nødvendig bruke bildet> Transform> Roter kommandoen for å justere den.
- Video Processing
Merk: Videobehandling er fullt datastøttet og bruker makroer kommandoer som følger dette papiret.- For å begrense området på buret av en 127 piksler x 218 piksler størrelse kjøre Trinn 1 makro fra Plugin> Makroer> Kjør kommando. Flytt fast rektangel over buret (Figur 2, trinn 1).
- Beskjære område av buret på regionen av interesse (ROI) ved hjelp av trinn 2 makro (figur 2, trinn 2).
- Bruk Trinn 3 makro til å trekke musen bildet fra bakgrunnen ved å tilordne en terskel signal, despeckling og filtrering av signalet varians. Utgangsverdiene i Z-aksen plottet indikerer middelverdien grå verdier, svarende til intensiteten av musen beveger seg i skyggen ROI av "vannkammeret" i løpet av 2 min leting. Kopiere resultatene i et regneark navngitt i henhold til ROI i et regneark (Figur 2, trinn 3).
- Bruk Trinn 4 makro tiltrekke gjennomsnitts grå verdier av musen i ROI "lukt kammer". Kopiere resultatene i et regneark navngitt i henhold til ROI i samme regneark som i 4.3.3 (Figur 2, trinn 4).
- For ytterligere å begrense analyse av musebevegelse i ROI "vann omkretsen" bruke trinn 5 makro. Kopier resultat på regnearket med navnet i henhold til ROI i samme regneark som i 4.3.3 (Figur 2, trinn 5).
- Slik begrenser analysen av musen bevegelse i ROI "lukt perimeter" bruke Trinn 6 makro. Kopier resultat på regnearket med navnet i henhold til ROI regnearkfilen som i 4.3.3 (Figur 2, trinn 6).
- Behandle alle videoer og sjekk for konsistens i antall bilder per dyr. Her, ta opp alle dyr for 1810 rammer som tilsvarer en 2 min leting økt.
- For hvert dyr og for hver ROI slags rammer med midlere grå values større enn 0. Divide antall bilder av verdiene som tilsvarer 1 sekund og få sekundene tilbrakt i hver ROI.
5. Statistisk analyse
- For hver test verifisere homogenitet varians innen grupper / genotyper av Bartletts test ved hjelp av formelen tilgjengelig på http://www.real-statistics.com/one-way-analysis-of-variance-anova/homogeneity-variances/.
- I tiltrekning og unngåelsestest, for å utføre sammenligninger mellom de tider brukt med vann versus lukt i en gruppe ved hjelp av et ikke-retningsbestemt Student t-test forutsatt lik eller ulik varians, avhengig av resultatene av Bartlett test. Sammenlign ganger brukt med lukt trekkes av tiden med vann mellom genotyper av enveis ANOVA med Bonferroni post-hoc test.
- I sensitivitetstesten analysere sammenligninger av tidsbruk med lukt trekkes fra tid tilbrakt med water blant grupper på et bestemt fortynninger av urin av enveis ANOVA med Bonferroni post-hoc test. Sammenlign følsomhet blant grupper til voksende luktkonsentrasjoner av 2-Way ANOVA med repetisjoner med Bonferroni post-hoc test.
- Interaksjon mellom genotyper og behandlinger i tiltrekningen og unngåelse test er undersøkt av to-veis ANOVA med Bonferroni post-hoc test.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Oppfatningen test måler tiltrekning til peanøttsmør og unngåelse til 2 MB syre. Tre grupper av mus er testet og tidsbruk i "lukt perimeter" er kvantifisert i forhold til vann. I preferansetesten, viser kontrollgruppen En vesentlig preferanse til lukt sammenlignet med vann (t 8 = 2,52, p <0,05). På den annen side, gruppe B ikke viser noen vesentlig tiltrekning til peanøttsmør og tilbringer mer tid med vann (6 t = 3,22, p <0,05). Dermed oppfører det seg annerledes enn kontrollgruppen A (F 1,7 = 26,39, p <0,005). I tillegg viser gruppe C ingen diskriminering og tilbringer omtrent samtidig med vann og peanøttsmør (t 8 = 0,78, p = 0,45). I det hele, de tre gruppene oppfører seg annerledes (2,9 F = 19,83, p <0,005), og det er en signifikant interaksjon mellom genotypen og behandling (peanøttsmør og vann) (2,1 F = 4,90, p <0,005) ( Som svar på to-MB-syre viser kontrollgruppen en unngå refleks, og som et resultat bruker mer tid med vann (t 8 = 2,67, p <0,05). Tilsvarende viser gruppe B en uttalt unngåelse refleks til 2-MB-syre (6 t = 3,71, p <0,01). På den annen side, gruppe C diskriminerer ikke mellom de to lukt og tilbringer sammenlign ganger med 2-MB-syre og vann (8 t = 2,2, p = 0,6) (figur 3B). I det hele tatt, sammenligning av unngåelsesresponsen de tre gruppene ikke viser et signifikant forskjellig oppførsel (F 2, 9 = 0,76, p = 0,49) som et resultat er det ingen interaksjon mellom behandling og genotype (F 1, 2 = 0,52, p = 0,63). I olfactory sensitivitet test til kvinnelig urin, viser kurven preferanse til urin på ulike konsentrasjoner versus vann (Preference index = tidsbruk med urin trekkes av tidsbruk med vann). I ther testen ser vi at kontrollgruppen A har en attraksjon terskelen til urin ved en fortynning på 1: 1000 og viser økende tiltrekning til urin med økende konsentrasjoner. Gruppe B og C viser et 100 ganger høyere terskel for tiltrekning (01:10) sammenlignet med gruppe A (2,9 F = 4,78, p <0,05). Gruppe B og C visningssammenlignfølsomhetskurver (F 1,19 = 0,36, p = 0,55). Sammenligning av følsomhet blant grupper, viser det seg at gruppen A har høyere følsomhet for kvinnelig urin sammenlignet med gruppe B og C (F 2,19 = 7,12, p <0,01) (figur 4). 
Figur 1: Illustrasjon av oppsett brukes til å utføre olfactory tester. (A) kameraet over buret. (B) Mus blir plassert i et bur for en 5 minutters periode tilvenning. (C) Den odoranter blir pipettert på veggen av buret. (D) Den utforskende aktivitet av en odorant versus vann blir testet i en 2 min vindu. 
Figur 2:.. Arbeidsflyt av datastøttet videobehandling ved hjelp av makroer kommandoer i ImageJ Eksempelet viser til en mus fra gruppe A utsatt for urin på en 1:10 fortynning Klikk her for å se en større versjon av dette tallet. 
Figur 3:. Representative resultatene av olfactory preferanse og unngåelse tester Musene av de tre gruppene (n = 5 for gruppe A, n = 4 for gruppe B og n = 5 for gruppe C) har vært utsatt for (A) peanut menter og (B) 2-MB-syre i en 2 min utforskning økt. Den totale tid på å utforske lukt (svarte sirkler) versus vann (grå sirkler) er representert. Signifikante forskjeller i lukte atferd blant gruppene er indikert med svarte horisontale barer og stjerner. Signifikante forskjeller i sniffing ganger mellom lukt og vann innenfor grupper er vist med grå strekene og stjerner. * P <0.05, ** p <0,01, *** p <0,01 (grå strekene, t-test, svart horisontal bar, enveis ANOVA). Feilfelt er standard feil av gjennomsnittet (SEM). 
Figur 4:. Representative resultater av følsomhetstester til økende konsentrasjoner av kvinnelig urin Preferansen indekskurve, gitt av undersøkelsestids med urin ved forskjellige konsentrasjoner trekkes av tiden med vann, viser at gruppeA (n = 5) har den høyeste følsomhet for urin sammenlignet med gruppe B (n = 4) og C (n = 5). * P <0,05 (svarte vannrette streker, enveis ANOVA). Feilfelt er SEM.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Testene er foreslått i denne protokollen tillater å vurdere ulike sider ved medfødt lukte adferd hos mus: persepsjon til lukt, diskriminering mellom lukt versus vann og følsomhet for lukt. Denne protokollen kan anvendes på enhver lukt i henhold til preferanse og unngåelse skala tidligere vist 15. Siden protokollen er basert på utforskende aktivitet, er det viktig at musene ikke viser noen motor svekkelse eller angst som kan påvirke deres bevegelse og påvirker lukte leting. De tester som er beskrevet er beregnet for voksne mannlige mus, men de kan tilpasses til å undersøke luktesans også hos voksne kvinner eller eldre mus.
Før du starter en slik studie som undersøkte luktesans hos mus er det viktig å ta hensyn til følgende aspekter: 1) utfører hver test med et intervall på minst tre dager. Unngåelse bør testes som sist for å minimere forstyrrelser av lukte minne 20; 2) utføre experiments på samme tid på dagen, gjerne sent på ettermiddagen, når musene er i sin aktive syklus 21 og bruker en nedtonet lyskilde. I tillegg planlegger lukte testing ved definerte ganger kontroller for mulige biologiske endringer i olfactory funksjoner 22; 3) før du starter å unngå testen, som bruker avstøtende odorants, for eksempel syrer, ta med ett bur på den tiden i forsøks suite og holde buret under en laminær hette. Dette trinn er viktig for å unngå tilvenning for odoranten og oppnå en mer homogen reaksjon i den samme gruppe; 4) midlertidig separere mus som er testet inntil alle mus av det samme buret er eksponert for odoranten, for å minimalisere forurensning odoranten; 5) bruke dyr av samme stamme, ettersom forskjellige stammer kan oppføre seg på en heterogen måte når de utsettes for en odorant 23; 6) experimenter skal bære en frakk til alle tider og bytte hansker mellom dyr for å hindre lukt blanding; 7)Etter pipettering av operatøren skal bevege seg sakte bort fra buret i en avstand på 1,3 meter for å forhindre tilbakevise stimulering til musene i løpet av lete olfactory; 8) mus som viser gjennomsnitts gråtoneverdier bare i ett kammer skal være utelukket fra undersøkelsen, da mus forventes å utforske begge kamre i forskjellig grad.
Metoden er beskrevet gir flere fordeler i forhold til andre protokoller: det er ekstremt enkelt å sette opp, bruker billige materialer, er det av rask ferdigstillelse og tar nytte av åpen kildekode programvare, for eksempel ImageJ. I tillegg gir vi makroer som er klare til å bli installert og som kan være skredder brukes og tilpasses enhver arena og mer enn 2 lukt utkant. Det må bemerkes at det kun tid brukt i den tildelte lukt perimeter er et mål på lukte aktivitet. Mens tiden i hvert kammer gir en avlesning av utforskende aktivitet av musen, og er bare en grov estimering av lukte atferd. Som med andre metoder, kan statistisk styrke oppnås ved å øke antall dyr per gruppe.
I forhold til lukte testing med olfactometers, som kan styre automatisk for damptrykk og leveringstid 12-14, er den foreslåtte protokollen mindre kontrollert. Ikke desto mindre er alle lukt anvendt i like store volumer, i definert avstand og i samme tidsvindu. Således, å holde disse variablene konstant, i dette teste en olfactometer er ikke nødvendig. Det er en annen potensiell begrensning for denne protokollen består i den tid som kreves for justering og skjæring av hver video for å oppnå et fast antall rammer. Likevel kan den samme datamaskin-assistert analyse også brukes på mer sofistikerte oppsett med lukt porter levere lukt til bestemte tider. I dette tilfellet, kan videoen cutting stilles automatisk.
I forhold til andre protokoller som bruker bomull pads jegmpregnated med lukt å teste attraksjon og unngåelse gir den foreliggende protokoll ytterligere informasjon om lukte diskriminering mellom en roman lukt og en nøytral lukt (vann) 15,16 i ett eksperimentell økt. Videre gjør protokollen krever eksperimentelle blindende og kan i sin helhet utføres av en enkelt experimenter med objektiv dataassistert analyse.
Disse enkle tester kan brukes for å overvåke progresjonen av neural underskudd i Alzheimers eller Parkinsons sykdom og musemodeller for å undersøke mekanismer for olfactory overføring.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Mouse cage | Italplast (Italy) | 1144B | 36 cm length x 20.5 cm width x 13.5 cm height |
| Chipped wood bedding | Abedd (Austria) | LTE E-001 | 3 cm high |
| Peanut butter | Migros (Switzerland) | NA | 1:10 |
| 2-Methylbutyric | Sigma Aldrich (Switzerland) | W269514 | Pure |
| Female urine from fertile females of same mouse strain | NA | NA | Dilution series |
| Camera | Olympus (US) | Camedia C-8080 | MOV files |
| Quicktime for Java (Windows) | Apple (USA) | NA | video plugin for visualizing MOV files |
| ImageJ for Windows | NIH (USA) | NA | Video Processing/Analysis |
References
- Doty, R. L., Kamath, V. The influences of age on olfaction: a review. Cognitive Science. 5, 20 (2014).
- Mesholam, R. I., Moberg, P. J., Mahr, R. N., Doty, R. L. Olfaction in neurodegenerative disease: a meta-analysis of olfactory functioning in Alzheimer’s and Parkinson’s diseases. Archives of Neurology. 55 (1), 84-90 (1998).
- Moberg, P. J., et al. Olfactory Dysfunction in Schizophrenia: A Qualitative and Quantitative Review. Neuropsychopharmacology. 21 (3), 325-340 (1999).
- Kovács, T. Mechanisms of olfactory dysfunction in aging and neurodegenerative disorders. Ageing Research Reviews. 3 (2), 215-232 (2004).
- Barrios, F. A., et al. Olfaction and neurodegeneration in HD. Neuroreport. 18 (1), 73-76 (2007).
- Doty, R. L. Olfaction in Parkinson’s disease and related disorders. Neurobiology of Disease. 46 (3), 527-552 (2012).
- Doty, R. L., Shaman, P., Dann, M. Development of the University of Pennsylvania Smell Identification Test: a standardized microencapsulated test of olfactory function. Physiology & Behavior. 32 (3), 489-502 (1984).
- Devanand, D. p, et al. Olfactory Deficits in Patients With Mild Cognitive Impairment Predict Alzheimer’s Disease at Follow-Up. American Journal of Psychiatry. 157 (9), 1399-1405 (2000).
- Conti, M. Z., et al. Odor Identification Deficit Predicts Clinical Conversion from Mild Cognitive Impairment to Dementia Due to Alzheimer’s Disease. Archives of Clinical Neuropsychology. 28 (5), 391-399 (2013).
- Keller, A., Vosshall, L. B. Better Smelling Through Genetics: Mammalian Odor Perception. Current opinion in neurobiology. 18 (4), 364-369 (2008).
- Brai, E., et al. Notch1 activity in the olfactory bulb is odour-dependent and contributes to olfactory behaviour. European Journal of Neuroscience. 40 (10), 3436-3449 (2014).
- Larson, J., Hoffman, J. S., Guidotti, A., Costa, E. Olfactory discrimination learning deficit in heterozygous reeler mice. Brain Research. 971 (1), 40-46 (2003).
- Alonso, M., et al. Olfactory Discrimination Learning Increases the Survival of Adult-Born Neurons in the Olfactory Bulb. The Journal of Neuroscience. 26 (41), 10508-10513 (2006).
- Wesson, D. W., Keller, M., Douhard, Q., Baum, M. J., Bakker, J. Enhanced urinary odor discrimination in female aromatase knockout (ArKO) mice. Hormones and behavior. 49 (5), 580-586 (2006).
- Kobayakawa, K., et al. Innate versus learned odour processing in the mouse olfactory bulb. Nature. 450 (7169), 503-508 (2007).
- Witt, R. M., Galligan, M. R., Despinoy, J., Segal, R. Olfactory Behavioral Testing in the Adult Mouse. Journal of Visualized Experiments JoVE. (23), (2009).
- Lee, A. W., Emsley, J. G., Brown, R. E., Hagg, T. Marked differences in olfactory sensitivity and apparent speed of forebrain neuroblast migration in three inbred strains of mice. Neuroscience. 118 (1), 263-270 (2003).
- Page, D. T., et al. Computerized assessment of social approach behavior in mouse. Frontiers in Behavioral Neuroscience. 3, 48 (2009).
- Nyfeler, Y., et al. Jagged1 signals in the postnatal subventricular zone are required for neural stem cell self-renewal. Embo J. 24 (19), Available from: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?cmd=Retrieve&db=PubMed&dopt=Citation&list_uids=16163386" 3504-3515 (2005).
- Tong, M. T., Peace, S. T., Cleland, T. A. Properties and mechanisms of olfactory learning and memory. Frontiers in Behavioral Neuroscience. 8, (2014).
- Steinlechner, S. Chapter 2.12 - Biological Rhythms of the Mouse. The Laboratory Mouse (Second Edition). , Available from: http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/B9780123820082000179 383-407 (2012).
- Corthell, J., Stathopoulos, A., Watson, C., Bertram, R., Trombley, P. Olfactory Bulb Monoamine Concentrations Vary with Time of Day. Neuroscience. 247, 234-241 (2013).
- Lehmkuhl, A. M., Dirr, E. R., Fleming, S. M. Olfactory assays for mouse models of neurodegenerative disease. Journal of Visualized Experiments: JoVE. (90), e51804 (2014).
