Summary
Protocol
Protocollo per la dissezione dell'ovaio Drosophila
- Alimentazione vola con lievito 1-2 giorni prima del loro dissezione per ingrassare le ovaie.
- Anestetizzare vola utilizzando flusso di anidride carbonica.
- Utilizzando un paio di pinzette, selezionare una mosca femmina.
- Immergere al volo femminile in PBS 1X.
- Prendete al volo al suo torace inferiore con un paio di pinzette.
- Tug dolcemente al basso ventre con un altro paio di pinzette fino a quando gli organi interni dell'addome sono esposti.
- Cercare la coppia di ovaie e staccarlo da altri organi (ad esempio l'intestino).
- A parte i stuzzicare ovarioles (se ovaie sono da utilizzare per immunocolorazione o ibridazione in situ).
- Mantenere le ovaie in gelide PBS 1X mentre dissezione al volo successivo.
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Discussion
Qui mostriamo un metodo di dissezione ovaie in Drosophila. Come metodo di coltura del diversi tipi di cellule presenti nelle ovaie Drosophila è stato ancora definito, questo è un metodo rapido per ottenere il tessuto ovarico Drosophila. In sostanza, abbiamo dimostrato che la dissezione Drosophila ovaie comporta una semplice a due o tre fasi. Il successivo trattamento di questi ovaie sezionato dipendono gli esperimenti a valle che verrà eseguita.
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Materials
Name | Type | Company | Catalog Number | Comments |
Forceps | Tool | Sigma-Aldrich | T43537 | |
Glass dissecting dish | Tool | Pyrex | 7220-85 |
References
- Costa, A., et al. The Drosophila fragile X protein functions as a negative regulator in the orb autoregulatory pathway. Dev Cell. 8, 331-342 (2005).
- Tan, L., et al. An autoregulatory feedback loop directs the localized expression of the Drosophila CPEB protein Orb in the developing oocyte. Development. 128, 1159-1169 (2001).