Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Bioengineering

Endotel Hücre yakalama ve Saklanmasına İlişkin ferromanyetik Bare Metal Stent

Published: September 18, 2015 doi: 10.3791/53100

Summary

Hedeflerimiz, tasarlamak, üretmek ve endotel hücre yakalama için ferromanyetik stent test edildi. On stent kırığı için test edildi ve 10 daha fazla stent muhafaza manyetik için test edildi. Nihayet, 10 stent in vitro test edildi ve 8 daha stent hücre yakalama ve tutma göstermek için 4 domuzlarda implante edildi.

Abstract

Kardiyovasküler stentlerin hızlı endotelizasyonunun stent trombozu azaltmak ve kanama riskini azaltabilir, anti-trombosit tedavisi önlemek için gereklidir. Süper paramanyetik demir oksit nanopartiküller (casus) ile işaretlenmiş endotel hücreleri akıbet (EOC) yakalamak ve korumak için manyetik kuvvetler kullanarak fizibilite önceden gösterilmiştir. Ancak bu teknik, hızlı endotelizasyon kanıtlamak için in vitro ve in vivo test ardından manyetik ve biyo-uyumlu bir malzemeden, mekanik olarak işlevsel bir stent geliştirilmesini gerektirmektedir. Biz bilgisayar destekli tasarım (CAD) kullanarak 2205 dubleks paslanmaz çelikten zayıf ferromanyetik stent geliştirdi ve tasarımı daha da sonlu elemanlar analizi (FEA) kullanılarak rafine edilmiştir. Stentin nihai tasarım, mekanik kıvırma ve genişleme sırasında malzemenin kırılma sınırının altında bir ana zorlanma sergiledi. Yüz stent imal edildi ve bunların bir alt kümesi mekanik test, ret kullanılmıştırained manyetik alan ölçümleri, in-vitro hücre yakalama çalışmaları ve in vivo implantasyon çalışmaları. On stent onlar arızasız döngüsünü sıkma ve genişleme sürdürülebilir olmadığını doğrulamak için dağıtım için test edildi. Başka bir 10 stentler, güçlü bir neodimyum mıknatıs kullanarak mıknatıslanmamış ve bunların muhafaza manyetik alan ölçüldü. Stentler muhafaza manyetizma eden in vitro çalışmalarda spion etiketli EOC yakalamak için yeterli olduğunu göstermiştir. Spion etiketli EOC yakalama ve tutma 1 manyetize stent ve 4 domuz her 1 olmayan manyetize edilmiş kontrol stent implante büyük hayvan modellerinde doğrulanmıştır. Stentli arterler 7 gün sonra eksplante ve histolojik olarak incelendi. Bu çalışmada geliştirilen zayıf manyetik stentler çeken ve hızlı iyileşmeyi teşvik edebilir spion etiketli endotel hücrelerini tutabilen idi.

Protocol

Tüm hayvan çalışmaları Mayo Clinic Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi (IACUC) tarafından onaylanmıştır.

Bir 2205 Paslanmaz Çelik Stent 1. Tasarımı ve Analizi

  1. CAD kullanarak çıplak metal stent Tasarımı
    1. Stent payanda kalınlığına eşit et kalınlığına sahip 'ekstrüde patron / baz' özelliği seçerek haddelenmiş oyuk bir silindir yapın.
    2. Haddelenmiş silindir teğet farklı bir skeç düzlemde bir stent desen tasarlayın. Haddelenmiş oyuk silindirin çevresini maç düz desen genişliğini olun.
    3. Şal özelliğini kullanarak boş silindirin üzerine düz desen tasarımı aktarın.
    4. Kendi özgün biçiminde ve aynı zamanda FEA için ihraç edilecek ACIS biçiminde bir bölümünü kaydedebilirsiniz.
  2. Stent modelleri için sonlu elemanlar analizi
    1. Daha fazla analizi kullanılmıştır için FEA yazılımının bir parçası modülüne ACIS formatında kaydedilen katı geometri İthalatolduğunu.
    2. FEA yazılımının bir parçası modelleyici içinde stent koaksiyal 2 analitik silindir Model. Dış silindir kıvırma simüle etmek için stent çapından bir başlangıç ​​çapı daha büyük olan ve iç silindir enflasyonu bir balon simüle etmek için 1 mm'lik bir başlangıç ​​çapına sahiptir.
    3. Above monte montaj modelleyicinin 'örneklerini' ağaç öğesi üzerine çift tıklayın göreli konumları parçaları söyledi.
    4. Indirgenmiş entegrasyonu ile 20 düğüm hexahedral elemanı olarak eleman türünü belirtin, FEA yazılımı örgü modülünü kullanın eleman boyutunu belirtin ve stent örgü.
    5. Stent ve model ağacı 'etkileşim özelliklerinin' sırasıyla iki silindir arasındaki sürtünmesiz sert kontakt çiftleri belirleyin.
    6. Stent modeline 2205 paslanmaz çelikten elasto-plastik gerilme-deformasyon davranışını atayın.
    7. Öncelikle c taklit 1 mm dış silindir kıvrım için sınır şartları tanımlayınstentin Rimping. Kıvrılmış stentin gevşeme simüle etmek için dış silindiri çıkartın. Genişleme simüle etmek için 3 mm iç silindir genişletin ve nihayet, stent geri tepme simüle etmek için iç silindir çıkarın.
    8. 'Analiz' modeli ağaç kaleminde ayrılan işlemci ve RAM miktarı sayısı dahil simülasyon parametreleri tanımlayın ve simülasyon çalıştırın.
    9. Simülasyon tamamlandıktan sonra, ana suşları incelemek için sonuçlar Sonuç dosyası (filename.odb) ve post-process açın ve iteratif malzeme hatası sınırından daha az% 20 anapara gerginlik elde etmek için stent tasarımını geliştirmek .

Sıkma ve Genişleme 2. Stent İmalatı ve Test

  1. Stent fabrikasyon
    1. Böyle Pioneer Eylem Hassas Ürünler olarak bir hassas işleme şirketi de silah sondaj ve hassas taşlama çubuk stok malzeme ile 2205 paslanmaz çelik borular elde etmek,OH.
    2. Lazer kesim ve elektro böyle Waukegan, IL Laserage Technology Corporation olarak stent kesme şirkete hassas taşlanmış tüpleri ve düz model stent tasarımı aktarın.
    3. Başka bir 10 dakika boyunca, bir baz (% 10 NaHCO 3), ardından 10 dakika boyunca kuvvetli bir asit (50% HCI) bunları batırmak suretiyle elektro-stent yüzey pasifleştirilmesi. DİKKAT: Uygun koruyucu ekipman ve davlumbaz altında kimyasal anlaştım. Son olarak, bir etil alkol ve deiyonize su ile stent yıkayın. Bu işlem, asit temizleme adlandırılır.
  2. Kıvırma ve genişleme için imal stent Testi
    1. Aracı Sıkma bir el kullanarak üç katlı balonu üzerine stenti kıvırın. Stent ve sıkma aracı üç katlı balon tutun. Radyal balon kıvrılır edilecek stent deforme için kolu basın.
    2. Üniforma sıkma için bir mikroskop ve bağlı yapıda başarısızlık herhangi bir işaret kullanılarak kıvrımlı stent inceleyinplastik deformasyona.
    3. Su ile üç katlı balon basınç ile 3 mm tasarlanmış çapa genişletin. Mikroskobik kırıklar ve uniform genişleme için genişletilmiş stentler inceleyin.

Tutulan Manyetik Alan için Stent 3. Karakterizasyonu

Not: 2 inç çapında ve 1 inç yüksekliğinde plastik bir silindir mıknatıs bu çalışmada kullanılmıştır. Mıknatıs kutupları ekseni boyunca hizalanır. Mıknatısın yüzey manyetik akı yoğunluğu yaklaşık T. 1

  1. Güçlü neodimyum mıknatıs kullanarak taban tabana veya eksenel stent çekmek. Mıknatıslanma yaklaşık 1 dakika boyunca güçlü mıknatıs yakın stent tutun.
  2. Taban tabana manyetize veya eksenel ve mıknatısla manyetik alan çizgileri boyunca kendi ekseni ile silindirik yüzeye sonraki stent tutun edilecek manyetik alan çizgileri boyunca çapı düz yüzeylerinden birine stent tutun. Tutulan manyetik fielstentin d, en az 24 saat süre ile stabil olabilir, ama manyetizasyon sonra mümkün olan en kısa sürede stent bulunmuştur.
  3. Cam mandreller üzerine tek tek stent monte edin ve daha sonra manyetik sondalama fikstür hassas aynasının cam millerini monte edin. Manyetik mikrosensor prob tam XYZ manyetik sondalama fikstür montajını aşamaları kullanarak yüzeyi (Şekil 4) dokunmadan stent yakın yerleştirilmiş olabilir.
  4. Uzakta stent manyetik mikrosensor bazal okuma ölçün ve sonra manyetik sondalama fikstür XYZ aşamalarını kullanarak prob konumlandırarak stent yüzeyine muhafaza manyetik alan ölçer.

4. Manyetik Hücre Yakalama Çalışmaları

  1. Elde edilmesi hücreleri, floresan boya ile spion ve boyama ile markalama
    1. 5,7 anlatıldığı gibi domuz periferik kandan endotel hücreleri akıbet (EOC) türevi. Unti T-75 balonuna Kültürl yaklaşık% 80 konfluent (5x10 6 6 8x10 için hücre).
    2. 10 nm çapında manyetit (Fe 3 O 4) 8,9 de tarif edildiği gibi 50 nm kalınlığında bir poli (laktik-ko-glikolik asit) (PLGA) Kabuk ile çevrili temel olarak SPIONs sentezleme.
    3. 37 o C'de 16 saat süre ile hücre kültür ortamında 200 ug / ml bir konsantrasyonda spion türetilen EOC inkübe
    4. Yavaşça hücre kültür ortamı aspire. Yavaşça, şişeye, fosfat tamponlu salin (PBS), 10 ml ekleyerek sallanan ve PBS aspire hücreleri yıkayın.
    5. Deneyler sırasında görselleştirmek için floresan boya (CM-DII) olan hücreleri leke. Bu 5 ul / ml arasında bir konsantrasyonda, hücre kültür ortamı 10 ml boya eklenmesi ve 37 ° C sıcaklıkta 30 dakika için hücreler ile inkübe edilerek, üretici talimatlarına göre yapılır.
    6. Aşama 4.1.4 gibi hücrelerin PBS ile yıkayın ve 37 ° C'de 5 dakika süreyle% 0.25 tripsin-EDTA çözeltisi 3 ml inkübeşişeden hücreler kaldırın.
    7. 5 dakika bir hücre tanesinin meydana getirmek üzere, 500 xg PBS ile bir 15 mL konik tüp üst hücre süspansiyonu kapalı transferi ve santrifüjlenir.
    8. 1-2x10 6 hücre / ml'lik bir konsantrasyonda PBS içinde hücre pelletini yeniden askıya ve birkaç kez ve konik tüp üzerinden pipetleme ile iyice karıştırın.
  2. In vitro hücre çalışmaları
    1. Tasarım ve fabricate (örneğin, 3D baskı) sadece cam lamel yüzeyi üzerinde stenti tutmak için basit bir fikstür.
    2. Elektromanyetik degausser kullanarak bir stent manyetikliğini ya da güçlü bir neodimyum mıknatıs kullanarak taban tabana veya eksenel bir stent çekmek.
    3. Eksenel manyetize ya taban tabana manyetize ya da olmayan manyetize kontrol stentler içeren çanak içine PBS içinde asılı spion etiketli EOC pipetle. Resim ters bir floresan mikroskobu kullanılarak hemen floresan PBS içinde süspansiyon haline getirilmiş EOC olan stent.
In-vivo Hayvan Araştırmaları

  1. Stent implantasyonu
    1. 4 sağlıklı Yorkshire domuz periferik kan Draw - 5,7 açıklandığı gibi 3 hafta önce sırasıyla implantasyonu stent ve kültür EOC için - yaklaşık 50 kg ağırlığındaki.
    2. (Günlük aspirin 325 mg ve klopidogrel 75 mg) ameliyat 3 gün önce başlayan anti-trombosit ilaç yönetmek.
    3. Stent yerleştirme gününde, kas içi Telazol, Xylazine ve Atropin ile domuz uyutmak (5 / 2-3 / 0,05 mg / kg sırasıyla) uygulanabilir kurumsal hayvan bakımı ve kullanımı kurallarda belirtildiği gibi.
    4. Entübe ve 1-2,5% İsofluranın anestezi inhalasyon üzerine domuz yerleştirin.
    5. Domuz ventral boyun bölgesini Tıraş ve genel steril şartlarda prosedürü yürütmek.
    6. İmplant manyetize 1 ve standart kalp kateterizasyonu tekniği kullanılarak sağ koroner artere (RCA) içine 1 olmayan manyetize stent.
      1. CatheteHayvanların haklara ait eğitimli girişimsel kardiyoloji tarafından yapılmalıdır. 9 Fransız kılıf ile sağ karotis arter erişin.
      2. Hedef koroner arterin cannulate ve skopi görüntüler elde etmek için iyotlu kontrast boya enjekte edilir.
      3. Arterdeki bir 0.014 inçlik standart koroner kılavuz teli yerleştirin. Balon Advance ve bu kılavuz teli kullanarak stent ve 3-3.5 mm çapında bir kap içinde stent dağıtın.
    7. Tel balonu üzerinde kullanılarak implante stent RCA proksimal içindeki kan akışını tıkamak ve 2 dakikalık bir süre boyunca merkezi bir kateter yardımı ile PBS 4 ml süspansiyon haline spion ile etiketlenmiş yaklaşık 2x10 6 otolog EOC sağlar.
    8. Ek tıkanıklığı 2 dakika sonra RCA kan akışını geri yükleyin.
    9. Ayılma odasına hayvan aktarın ve bilinci yerine kadar yakından hayvan izleyin.
    10. Anti-trombosit ilaç yönetmek devam (aspirin 325 mg ve klopidogrel 75 mg) Kurban kadar ameliyat sonrası.
  2. Stent eksplant ve histoloji
    1. Daha önce açıklandığı gibi ilk hayvan anestezi ile hayvanlar ameliyat sonrası 7 gün Euthanize ve daha sonra damardan uygulanan kurumsal hayvan bakımı ve kullanım yönergelerine uygun olarak sodyum pentobarbital (100 mg / kg) bir öldürücü dozunu.
    2. Cerrahi stent arter segmentleri hasat. 30 dakika en az% 10 formalin tamponu içinde eksplante arterleri düzeltildi. Daha histolojik analiz için formalinle tampon örnekleri bırakın.
    3. Metal stent ile histoloji yapabilen tesislere sabit numune Outsource. Bu işlem sırasında, numune, metilmetakrilat katıştırmak çapraz kesit ve demir parçacıkları Prusya mavisi boyası ile Mallory'nin boyama tekniği kullanılarak histolojik olarak değerlendirildi.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

FEA (Şekil 1) dayalı iteratif stent tasarımı kıvrım ve% 30 nihai gerginlik daha azdır% 20 anapara zorlanma ile genişletebilirsiniz stent gösterdi. Sıkma ve genişleme testi (Şekil 2) kırık bulgusuna rastlanmadı. Deforme stentin Resimleri FEA hesaplanan deformasyonlar iyi anlaşmayı gösterdi ve aynı zamanda mikroskopi resimler hiçbir kırıklarına (Şekil 3) gösterdi. Muhafaza manyetik alan ölçümleri (Şekil 4 ve 5) beklendiği gibi, Spion etiketli hücreler tercihen eksenel manyetize stentler bükülmüş segmentlere çekti ve daha muntazam taban tabana manyetize stent (Şekil 6) düz kesimlere çekti. Histoloji görüntüleri 7 gün implantasyon döneminde (Şekil 7) sırasında stent EOC cazibe ve tutma kanıtlayan stent dikmeler yakın demir boyanma gösterdi.

"> figür 1
Şekil 1. Stent modelleme ve analiz akış şeması. Şematik bir 2205 paslanmaz çelik stent uygulanan bir adım adım süreci gösteren bilgisayar destekli modelleme ve sonlu eleman analizini göstermektedir. Uthamaraj ve ark Modifiye. Yeniden baskı izni ile 2014 6.

Şekil 2,
Şekil 2. Paslanmaz çelik stent sıkma gibi kesme genişleme. Lazer kesim ve elektro stent), b) üç katlı balon kateter üzerine oturtulmuş, ve c) üç katlı balon kullanarak 3 mm genişletilmiş. Uthamaraj ve ark Modifiye. Yeniden baskı izni ile 2014 6.

Şekil 3,
Şekil 3. stentin g> mikroskobik inceleme. Işık mikroskopi görüntü FEA simülasyon ile karşılaştırılmıştır genişletilmiş stenti kullanıldı.

Şekil 4,
Şekil 4. Manyetik prob ölçüm sahne kurulumu. XYZ aşamaları ve dönme aşamaları manyetik alan ölçümleri sırasında stent ve manyetik probu yerleştirilmesi için monte edilmiştir.

Şekil 5,
Şekil 5. Manyetik stent saha ölçüm bölgeleri ve ölçüm değerleri. Görüntü eksenel manyetize ve tabana manyetize konfigürasyonlarda 2205 stent ölçülen korudu manyetik alanları gösterir. Uthamaraj ve ark Modifiye. Yeniden baskı izni ile 2014 6.


(A) olmayan manyetize stent, (B), diyametrik olarak manyetize edilmiş stent ve (C) eksenel olarak mıknatıslanmış stent hücre yakalama gösteren 2205 paslanmaz çelik stentlerin Şekil 6. In-vitro hücre yakalama çalışmaları. Floresan mikroskobu ve görüntüler. Uthamaraj ve ark Modifiye. Yeniden baskı izni ile 2014 6.

Şekil 7,
Şekil dikme ve yakın mavi demir boyama ile (A), manyetik stentin stent koroner arter segmentlerinin histolojik kesitlerin 7. Görüntüler (B) dikmeye yakın hiçbir mavi lekelenme gösteren manyetik olmayan kontrol stent. Numuneler Mallory'nin boyama kullanılarak boyandı demir partikülleri s ile tekniğiPrusya mavisi boyası ile tained. "*" Sembolü stent payanda yerleri gösterir. Uthamaraj ve ark Modifiye. Yeniden baskı izni ile 2014 6.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Biz çıplak metal stent olarak işlev görebilir ve casus etiketli endotel hücrelerini çekebilecek bir manyetik stent geliştirdi. Manyetik stent kapsayan önceki çalışmalarda, araştırmacılar nedeniyle ferromanyetik stent 5,10-14 olmayışı manyetik malzemelerden yapılmış nikel kaplamalı ticari stent ve bobinler veya kafesleri kullandık. Diğer gruplar da nanoparçacık yüklü endotel hücrelerini 3 hedefleme için piyasada mevcut 304 kalite paslanmaz çelik stent paramanyetik doğasını kullandık. Stent alan hastalar ve paramanyetik stentler çekmek ve manyetik nanopartiküller 3,5 korumak için harici bir manyetik alan ihtiyacı Nikel kaplamalar alerjik olabilir. Bu nedenle, tasarımı ve fonksiyonel bir ferromanyetik stent geliştirilmesi, hücre dağıtım uygulamaları gibi diğer klinik uygulamalara 10,15-20 için çok önemlidir. 2205 paslanmaz çelik - - Bu çalışma için seçilen malzemenin dubleks doğa w yaparferromanyetik Eakly. Örneğin 316L paslanmaz çelik (% 70) 6,21,22 olarak stent yapmak için kullanılan diğer paslanmaz çeliklere kıyasla Buna ek olarak, 2205 paslanmaz çelik% 30 daha düşük bir nihai yük vardır.

2205 Paslanmaz çelik bu yeni uygulama dayanarak, bu çalışmada sunulan protokol, tasarım, üretim ve zayıf manyetik stent test etmek yöntemlerini açıklar. İlk olarak, basit bir stent tasarım modeli bir kılavuz olarak var olan bir stent modeli kullanılarak geliştirilmiştir. FEA simülasyon sonuçları malzemenin ana suş daha az% 20 maksimum asal suşu elde etmek için stent eğik kesimleri eklenmesi gerekli malzeme önerdi. Nihai stent tasarımı 90 um dikme kalınlığı vardı. İkinci olarak, üretilen stentler manyetize edilmiş ve bunların muhafaza manyetik alanlar ölçüldü. 2205 paslanmaz çelik stentin muhafaza manyetik alan şiddeti, uygulanan manyetik alanın yönüne bağlıdır 23 üzerinde yapılan manyetik ölçüm deneyleri ile teyit edilmiştir. Manyetize stentler kontrolü, sigara mıknatıslanmamış stentler için 10 mg a kadar göre 100-750 mg aralığında tutulan bir manyetik alan göstermiştir. Son olarak, büyük hayvan implantasyon çalışmaları BMS çekmek ve kan akışı implantasyon sonrası geri bile spion etiketli endotel hücrelerini korumak için kullanılabilir 2205 paslanmaz çelikten imal gösterdi. Histoloji ve böylece implantasyon 7 gün sonra, hücre yakalama ve tutma kanıtlayan, manyetize stentin stent dikmeler yakın mavi demir boyaması varlığını gösterdi.

Bizim çalışmamızda kullanılan CAD ve FEA uygun tasarımı ve benzeri balon genişletilebilen stentler analizi için uygulanabilir. Geçerli protokol, 1.2.5, 1.2.6, 1.2.7 ve sınır koşulları ve malzeme özelliği atama kurmak için kritik olan ve düzgün bir stent tasarımı için gerekli olan adımları yineleyin. Büyük hayvanlarda implante manyetize 2205 paslanmaz çelik stentler Elde edilen hücre yakalama ve tutma gösterdi. 5.1.7 Adımları ve 5.1.8 de mıknatıslanmış stentler üzerinde uygun hücre tohumlama elde etmek için kritik öneme sahiptir. Buna ek olarak, bir 2 dakika süresince manyetik stent tıkanması implant yerine hücre giriş eden sunulan çalışma özgüdür.

Bu çalışmada geliştirilen stentler hızla endoteliyalize ve kısa vadeli implantasyonu dayanabilmesi, ancak stentler uzun vadeli implantasyonu dayanabilir eğer belli değildir. Bugüne kadar, ferromanyetik malzemeler yaygın klinik uygulamalar için kendi sınırlarını anlamak için çalışılmamıştır. Ancak, bizim 7 gün domuz implantasyon verileri 2205 paslanmaz çelik iyi kan ve doku uyumu olduğunu gösterdi. Bu çalışmada sunulan yöntemler do not, kan 24-28 manyetik malzeme yorgunluğu testi veya uzun süreli etkileşimi olarak stent gelişmiş mekanik testler için teknikler arayabilir. Buna ek olarak, 2205 paslanmaz çelikten zayıf ferromanyetik doğası manyetik etiketli hücreleri yakalamak mümkün, ama daha güçlü manyetik özelliklere sahip yeni bir malzeme hücre yakalama artırabilir. Daha fazla araştırma da ferromanyetik malzemelerin biyouyumluluk ve uzun vadeli güvenliğini incelemek için gereklidir. Bu çalışmada kullanılan endotel hücreleri, aşırı büyüme izole edilmesi ve endotelial hücreler sonucudur 5,7 karakterize etmek gösterdi, daha önce yayınlanan protokolü izlenerek elde edilmiştir. Bu çalışmada ayrıca hayvanların küçük sayısına göre sınırlı kalmıştır.

Özet olarak, stent hızlı endotelizasyon, çünkü en uygun uygulama araçları ve endotelyal hücrelerin zayıf yapışma kullanılamamasıdır tarihine sınırlıdır. Bu çalışmada geliştirilen ferromanyetik stentlerAyrıca manyetik etiketli endotel hücrelerini yakalamak için yeterli tutulan manyetik alan sağlarken bir BMS olarak işleyen avantajı var. Uzun süreli implantasyon etkileri devam eden çalışmaların bir parçası olarak, stentler daha sıkı mekanik ve biyolojik olarak uyumlu test yaptırmak gerekiyor. Endotel hücre yakalama ve tutma ve bu çalışmada sunulan yöntemlerin yeteneğine sahip fonksiyonel ferromanyetik stent gelecek stent geliştirme ve test için kullanılabildiği gibi, bu çalışmada geliştirilen stent büyük söz gösterir.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
2205 Stainless steel Carpenter Technology Corporation Round bar stock material
Abaqus Dassault systems Software
Atropine Prescription drug.
Clopidogrel Commercial name: Plavix. Prescription drug.
CM-DiI Life Technologies V-22888 Molecular Probes, Eugene, OR
Endothelial growth medium-2 Lonza CC-3162
Hand Held Crimping tool Blockwise engineering M1-RMC
Hydrochloric acid (HCl) Sigma Aldrich MFCD00011324 CAUTION: wear proptective equipment and handle under fume hood
Isoflurane anesthesia Piramal Critical Care, Inc. 
Ethyl alcohol Sigma Aldrich MFCD00003568
NdFeB magnet 2" Dia x 1" thick Amazing magnets D1000P Axially magnetized disc magnet with poles on flat faces
Over-The-Wire trifold balloon Any commercially available OTW trifold balloon can be used
Phosphate buffered saline Life Technologies 10010-023 Commonly known as PBS
Sodium Bicarbonate (NaHCO3) Sigma Aldrich MFCD00003528
Sodium pentobarbital Zoetis Commercial Name: Sleepaway (26%), FatalPlus, Beuthanasi.  Controlled substance to be ordered only by licensed veternarian
SolidWorks Dassault systems Software
SpinTJ-020 micro sensor MicroMagneitcs Sensible Solutions Long probe STJ-020 microsensor
SPION Mayo Clinic Nanoparticles synthesized internally (Ref: Lee, S. J. et al. Nanoparticles of magnetic ferric oxides encapsulated with poly(D,L latide-co-glycolide) and their applications to magnetic resonance imaging contrast agent. J Magn Magn Mater 272, 2432-2433, doi:DOI 10.1016/j.jmmm.2003.12.416 (2004))
Telazol Zoetis Controlled substance to be ordered only by licensed veternarian
Trypsin EDTA Life Technologies 25200-056 Gibco, Grand Island, NY
Xylazine Bayer Animal Health Commercial name: Rompun. Controlled sunstance to be ordered only by a licensed veternarian

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Garg, S., Serruys, P. W. Coronary stents: current status. J Am Coll Cardiol. 56, 1-42 (2010).
  2. Austin, D., et al. Drug-eluting stents versus bare-metal stents for off-label indications: a propensity score-matched outcome study. Circ Cardiovasc Interv. 1 (1), 45-52 (2008).
  3. Polyak, B., et al. High field gradient targeting of magnetic nanoparticle-loaded endothelial cells to the surfaces of steel stents. P Natl Acad Sci USA. 105 (2), 698-703 (2008).
  4. Tassiopoulos, A. K., Greisler, H. P. Angiogenic mechanisms of endothelialization of cardiovascular implants: a review of recent investigative strategies. J Biomat Sci-Polym E. 11 (11), 1275-1284 (2000).
  5. Pislaru, S. V., et al. Magnetic forces enable rapid endothelialization of synthetic vascular grafts. Circulation. 114, I314-I318 (2006).
  6. Uthamaraj, S., et al. Design and validation of a novel ferromagnetic bare metal stent capable of capturing and retaining endothelial cells). Ann Biomed Eng. 42 (12), 2416-2424 (2014).
  7. Gulati, R., et al. Diverse origin and function of cells with endothelial phenotype obtained from adult human blood. Circ Res. 93 (11), 1023-1025 (2003).
  8. Lee, S. J., et al. Nanoparticles of magnetic ferric oxides encapsulated with poly(D,L latide-co-glycolide) and their applications to magnetic resonance imaging contrast agent. J Magn Magn Mater. 272 (3 Special Issue), 2432-2433 (2004).
  9. Lee, S. J., et al. Magnetic enhancement of iron oxide nanoparticles encapsulated with poly(D,L-latide-co-glycolide). Colloid Surface A. (1-3), 255-251 (1016).
  10. Forbes, Z. G., et al. Locally targeted drug delivery to magnetic stents for therapeutic applications. Computer Architectures for Machine Perception, 2003 IEEE International Workshop on. , 1-6 (2003).
  11. Rathel, T., et al. Magnetic Stents Retain Nanoparticle-Bound Antirestenotic Drugs Transported by Lipid Microbubbles. Pharm Res-Dordr. 29 (5), 1295-1307 (2012).
  12. Gunn, J., Cumberland, D. Stent coatings and local drug delivery - state of the art. Eur Heart J. 20 (23), 1693-1700 (1999).
  13. Lu, A., Jia, G., Gao, G., Wang, X. The effect of magnetic stent on coronary restenosis after percutaneous transluminal coronary angioplasty in dogs. Chin Med J (Engl. 114 (8), 821-823 (2001).
  14. Kempe, H., Kempe, M. The use of magnetite nanoparticles for implant-assisted magnetic drug targeting in thrombolytic therapy. Biomaterials. 31 (36), 9499-9510 (2010).
  15. Chorny, M., et al. Targeting stents with local delivery of paclitaxel-loaded magnetic nanoparticles using uniform fields. P Natl Acad Sci USA. 107 (18), 8346-8351 (2010).
  16. Polyak, B., Friedman, G. Magnetic targeting for site-specific drug delivery: applications and clinical potential. Expert Opin Drug Del. 6 (1), 53-70 (2009).
  17. Liu, J. Y., et al. Magnetic stent hyperthermia for esophageal cancer: an in vitro investigation in the ECA-109 cell line. Oncol Rep. 27 (3), 791-797 (2012).
  18. Gunn, J., Cumberland, D. Does stent design influence restenosis. Eur Heart J. 20 (14), 1009-1013 (1999).
  19. Aviles, M. O., et al. In vitro study of ferromagnetic stents for implant assisted-magnetic drug targeting. J Magn Magn Mater. 311 (1), 306-311 (2007).
  20. Mardinoglu, A., et al. Theoretical modelling of physiologically stretched vessel in magnetisable stent assisted magnetic drug targeting application. J Magn Magn Mater. 323 (3-4), 324-329 (2011).
  21. Liu, Z. Y., et al. Stress corrosion cracking of 2205 duplex stainless steel in H2S-CO2 environment. J Mater Sci. 44 (16), 4228-4234 (2009).
  22. Alverez-Armas, I., Degallaix-Moreuill, S. Duplex stainless steels. , Wiley-ISTE. (2009).
  23. Tefft, B. J., et al. Magnetizable Duplex Steel Stents Enable Endothelial Cell Capture. Ieee T Magn. 49 (1), 463-466 (2013).
  24. Pelton, A. R., et al. Fatigue and durability of Nitinol stents. J Mech Behav Biomed Mater. 1 (2), 153-164 (2008).
  25. Knowles, M., et al. Finite element analysis of a balloon-expandable stent and superior mesenteric arterial wall interaction. J Vasc Surg. 60 (6), 1722-1723 (2014).
  26. Veeram Reddy, S. R., et al. A novel biodegradable stent applicable for use in congenital heart disease: bench testing and feasibility results in a rabbit model. Catheter Cardiovasc Interv. 83 (3), 448-456 (2014).
  27. Shellock, F. G. MR imaging of metallic implants and materials: a compilation of the literature. AJR Am J Roentgenol. 151 (4), 811-814 (1988).
  28. Lopic, N., et al. Quantitative determination of magnetic force on a coronary stent in MRI. J Magn Reson Imaging. 37 (2), 391-397 (2013).

Tags

Biyomühendislik Sayı 103 Manyetik stent hızlı iyileşme endotelizasyonunun CAD FEA 2205 paslanmaz çelik kardiyovasküler stentler
Endotel Hücre yakalama ve Saklanmasına İlişkin ferromanyetik Bare Metal Stent
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Uthamaraj, S., Tefft, B. J.,More

Uthamaraj, S., Tefft, B. J., Hlinomaz, O., Sandhu, G. S., Dragomir-Daescu, D. Ferromagnetic Bare Metal Stent for Endothelial Cell Capture and Retention. J. Vis. Exp. (103), e53100, doi:10.3791/53100 (2015).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter