Die Wirkung von Genen und Umwelt auf den sozialen Raum von Drosophila melanogaster kann durch ein leistungsfähiges, aber einfaches analytisches Paradigma quantifiziert werden. Wir zeigen hier verschiedene Faktoren, die diesen sozialen Raum beeinflussen können und daher bei der Gestaltung von Experimenten in diesem Paradigma berücksichtigt werden müssen.
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In diesem Artikel
Zusammenfassung
Zusammenfassung
Die hier beschriebene sozialen Raum Test kann verwendet werden, um soziale Interaktionen von Drosophila melanogaste r quantifizieren - oder andere kleine Insekten - auf einfache Weise. Wie wir früher gezeigt 1, in einem zweidimensionalen Raum, wir zuerst zwingen die entfernt, um eine feste Gruppe zu bilden, anschließend so ihre bevorzugte Abstand voneinander einnehmen. Nachdem die Fliegen angesiedelt haben, messen wir den Abstand zum nächsten Nachbarn (oder sozialer Raum), die Verarbeitung ein statisches Bild mit kostenlosen Online-Software (ImageJ). Die Analyse der Abstand zum nächsten Nachbarn ermöglicht es den Forschern, die Auswirkungen der genetischen und Umweltfaktoren auf die soziale Interaktion zu bestimmen, bei der Kontrolle für potenzielle Störfaktoren. Diverse Faktoren wie Steigfähigkeit, Tageszeit, Geschlecht und Anzahl der Fliegen, können soziale Abstand von Fliegen zu ändern. Wir schlagen daher vor, eine Reihe von experimentellen Kontrollen, diese verwirrende Auswirkungen zu mildern. Dieser Test kannfür wenigstens zwei Zwecke verwendet werden. Erstens können die Forscher bestimmen, wie ihre Lieblingsklimaverschiebung (wie Isolation, Temperatur, Spannung oder Toxine) werden soziale Abstand 1,2 auswirken. Zweitens können die Forscher die genetischen und neuronalen Grundlagen von dieser Grundform des Sozialverhaltens 1,3 zu sezieren. Insbesondere haben wir es als ein diagnostisches Werkzeug, um die Rolle von orthologen Genen vermutlich im Sozialverhalten in anderen Organismen, wie zum Beispiel Kandidatengene für Autismus bei Menschen 4 einbezogen werden studieren.
Einleitung
Soziale Interaktionen sind entscheidend für die richtige Entwicklung und Gesundheit von Personen innerhalb einer Gruppe als Ganzes, und kann auf zahlreiche Arten von Menschen (Homo sapiens) zu einfacheren Organismen wie Fruchtfliegen (Drosophila melanogaster) 5,6 beobachtet werden. Akustische, visuelle, Geruchs-, Tast- oder gustation: Eine individuelle Fruchtfliege oder Mensch haben gemeinsame Mittel zur sensorischen Informationen, die während dieser Interaktionen, sei es zu verarbeiten. Wir und andere Hypothese ist, dass es ein möglicherweise freigegebenen neurocircuitry Basiswert Verhaltensreaktionen auf soziale Interaktionen, und dass ....
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Protokoll
1. Geräte und Reagenzien Erstellt In-house (siehe Liste der Materialien für Others)
- Bereiten Sie eine Drosophila kalten Narkosegerät wie zuvor beschrieben, 8.
- Bereiten Sie eine Fliege Aspirator wie zuvor beschrieben 13.
- Bereiten sozialen Raum Kammern und Inhaber.
- Bestellen oder Glasscheiben und Acrylabstandshalter, um die sozialen Raum Kammern erstellen. Jeder Sozialraumkammer besteht aus zwei quadratischen Glasscheiben (17,6 cm x 17,6 cm, mit einer Dicke von 0,3 cm), zwei rechtwinkligen Dreiecks Acryldistanzstücke (mit einer Höhe von 16,5 cm, einer Basis von 8,9 cm, mit einer Dicke von 0,3 cm ) u....
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Ergebnisse
Der soziale Raum Kammer kann als Werkzeug verwendet, um das Sozialverhalten von Drosophila melanogaster zu quantifizieren. Acrylabstandshaltern und Glasscheiben zusammengeklemmt, um eine innere Dreiecks Arena, die einen zweidimensionalen Bereich, in dem Fliegen können stabile Gruppen ohne die Anwesenheit von vielen potentiell verwirrende Cues Formular bilden. Beim Fliegen auf die vertikale Arena übertragen, werden sie von herunter abgegriffen erschreckt, und sie durch eine Escape-Verhalten zu reagieren: negativ.......
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Diskussion
In diesem Protokoll wurde ein detailliertes Verfahren für die Quantifizierung von sozialen Raum beschrieben. Einige wichtige Schritte, um das Experiment zu gewährleisten erfolgreich sind: 1) immer Schutzhandschuhe verwenden bei der Reinigung und die Einrichtung der Vorrichtung, die eigenen Öle und Düfte aus der Innenkammer der Vorrichtung zu halten, 2) sicherzustellen, Fliegen werden mindestens einen Tag gesammelt, bevor das Experiment damit die möglichen Auswirkungen von kaltem Narkose zu verringern, 3) 2 h vor dem Exp.......
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Offenlegungen
Die Autoren erklären, dass sie keine konkurrierenden finanziellen Interessen haben.
Danksagungen
Die Autoren danken Dr. Tadmiri Venkatesh für seine Ermutigung, dieses Manuskript vorzubereiten, Dova Brenman und Selwyn Chui für ihre konstruktiven Kommentare, Elyssa Burg und Wayne Rasband für das Design des Makros in ImageJ für alle Zwischenfliegenabstände und für die nächsten Nachbarabstände. Die Autorinnen und Autoren danken auch den Gutachterinnen und Gutachtern für ihre konstruktiven Kommentare.
A.A.A., M.C.C. und A.F.S waren für das Forschungsdesign verantwortlich; S.N.J., A.A.A., M.N., Z.R. und A.J.M. führten die Experimente durch. A.A.A., M.N., A.J.M. und M.C.C und A.F.S. analysierten die Daten; A.R.M. und A.F.S. schrieben das Manu....
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Materialien
| Name | Unternehmen | Katalognummer | Kommentare |
|---|---|---|---|
| Stereo-Zoom-Mikroskop | Nikon | SMZ-645 | Jedes andere Standard-Zielfernrohr für die Handhabung von Fliegen würde funktionieren |
| Kleine Pinsel | zum Schieben von Fliegen | ||
| Jazz-mix | Fisher | 33545 | jedes andere Standard-Drosophila-Futter würde funktionieren |
| Mini-Wecker Timer/Stoppuhr | |||
| Sharpie-Stifte | |||
| Klebeband | |||
| Mittelgroße Heftklammern | Klammern | , um die Kammern zusammenzuhalten: 1-1/4" (32 mm) mittlere Clips mit 5/8" Kapazität | |
| 707161 | , um die Kammern in einer vertikalen Ausrichtung zu halten | ||
| Bürettenklemmen | Carolina | 707362 | |
| Digitalkamera | Nikon | Coolpix S8000 | So nehmen Sie die Standbilder auf |
| Kleines Lineal | um das Bild | ||
| Trifold-Brett und weiße Bankabdeckung | , um einen weißen Hintergrund und ein homogenes Licht zu schaffen. | ||
| Pounding Pad | Jedes Mauspad funktioniert. | ||
| Prism 6 | GraphPad Software Inc. | Prism 6 für Mac OS X | Jede statistische Analysesoftware mit t-Test, Einweg und zwei ANOVA funktioniert |
Referenzen
- Simon, A. F., et al. A simple assay to study social behavior in Drosophila.: measurement of social space within a group. Genes Brain Behav. 11, 243-252 (2012).
- Kaur, K., Simon, A. F., Chauhan, V., Chauhan, A.
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Nachdrucke und Genehmigungen
