Introduction
В последние годы технология колонки для высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) значительно продвинулся вперед; пиковые мощности значительно увеличились во многом благодаря использованию меньшего размера частиц и более эффективных частиц ядра оболочки. Поскольку разделений , как правило , более эффективны, поток-на эффект наблюдается увеличение чувствительности , так как пики теперь острее и , следовательно , выше 1-8.
Тем не менее, радиальная кровать гетерогенность по-прежнему является ограничивающим фактором при выполнении всех столбцов, но это не новая история, так как хроматографы знали это в течение многих лет. Колонка кровати неоднородны как в радиальном направлении 9-12, а вдоль колонны оси 10,12-15. Стенка эффект особенно является важным фактором , способствующим утрате 7,16-18 эффективности разделения. Shalliker и Ритчи 7 недавно рассмотрели аспекты колонки кровати неоднородности и , следовательно , это не обязательно должен быть discussed здесь дальше. Несмотря на то, достаточно сказать, что, что изменение в колонке плотности кровати упаковки и эффекты стены приводят к искажению растворенного вещества пробки, таким образом, что полосы элюирования через колонку в пробках , которые напоминают частично заполненных миски , а не тонких плоских твердых дисков 7, которые обычно изображается в основных текстах обучения. Когда эксперименты были проведены таким образом, что растворенное вещество миграции через слой может быть визуализированы штепсельные профили внутри колонны были частично полым и секция хвостохранилища группы в значительной степени стена компонент образца пробки. Конечным результатом является то, что она занимает гораздо больше пластин , чтобы отделить эти «частично полые» пробки , чем требовалось бы , если диски были твердыми и плоскими 12,14,17. Для преодоления полосы уширения вопросов , связанных с настенными эффектов и изменения радиальной плотности упаковки, новая форма технологии колонки известной как технологии активного потока (AFT) был разработан 7,19. Цель этой конструкции былочтобы удалить стенные эффекты через физическое разделение элюирующего растворителя вдоль области стенки, от подвижной фазы при элюировании в радиальном центральной части колонны 19. Есть два основных типа AFT колонн; Параллельные сегментированные Flow (PSF) колонны и занавес Flow (CF) колонки 7. Поскольку этот протокол направлен на использование и оптимизации колонн CF, PSF столбцы не будут обсуждаться.
Завесой (CF)
Завесой (CF) форматы колонки используют AFT концевые фитинги на обоих входе и выходе из колонки. AFT концевые фитинги состоят из кольцевого фритты, расположенной внутри мультипортовой штуцером. Фритты состоит из трех частей: пористый радиальную центральную часть, выровненную с центральным портом концевой заделки, пористой внешней части, которая совмещена с периферийным портом (ами) концевой заделки и непроницаемым кольцом, разделяет две пористые участки, предотвращающие любые крест-Flow между радиальными центральных и внешних областях фритты 19. Рисунок 1 иллюстрирует конструкцию AFT фритту и рисунке 2 показан формат столбца CF. В этом режиме работы (CF) образец впрыскивается в радиальном центральный порт входного патрубка, в то время как дополнительный подвижной фазы вводится через периферическую порт входа к «занавесом» миграции растворенных веществ через радиальный центральной области колонка. Следовательно, образец поступает в слой в радиальном центральной зоне колонны с внешней области колонны, имеющей состав подвижной фазы передается только через него. Исследования показали , что объемное отношение скорости потока около 40:60 (центральный: периферийный порт) для входного конца облегающие колонки 4,6 мм внутренний диаметр (ID) оптимальна 6,7,16. AFT выходе из колонки CF позволяет регулировать центральной и периферической потока их относительной части и может изменяться почти любой желаемой ратиO через управление давлением. Оптимизация колонки CF может значительно улучшить различные функциональные аспекты технологии колонки, такие как эффективность разделения или чувствительности обнаружения. Таким образом , а 'стена-меньше "," бесконечномерным диаметр "или" виртуальной "столбец устанавливается 6,10,18,20. Целью колонн CF является активно управлять миграцией образца через колонку, чтобы предотвратить образца от проникновения в область стенки. Таким образом, концентрация растворенного вещества при выходе на детектор максимизируется, повышающий чувствительность примерно в 2,5 раза больше , чем в обычном формате колонки при использовании ультрафиолетового (УФ) обнаружения 16, и еще больше при использовании масс - спектрометрического обнаружения 6.
Столбцы CF идеально подходят для низких образцов концентрации, так как чувствительность обнаружения увеличивается. Кроме того, они идеально подходят в сочетании с скорость потока ограниченных детекторов, таких как масс - спектрометр (MS) 6.FT колонке в формате Идентификатор 4,6 мм, например, может быть настроен, чтобы поставить один и тот же объем растворителя к детектору в качестве стандартного 2,1 мм колонки формата ID при работе при тех же линейных скоростей, путем регулировки выхода центрального потока до 21%. Точно так же в кормовой части колонна также может быть настроен, чтобы поставить ту же нагрузку объема на детектор в качестве столбца Идентификатор 3,0 мм, путем регулировки выхода из центрального потока до 43%. На самом деле любой "виртуальной" формат столбца может быть получен в соответствии с аналитическим требование 6,18,22. С помощью этих специально разработанные концевые фитинги на входе и на выходе гарантирует, что истинная стенка менее колонна установлена.
Есть два способа установки растворителя систему доставки в центральных и периферийных портов на входе:. Системы 6 сплит-потока и два насоса системы 6,7 Рисунок 3 иллюстрирует каждый из этих ИБП множество системных CF.
Сплит - система потока
яна системы с разделенным потоком (рис 3А) поток насоса приводит к инжектору расщепляется предварительно инжектор с использованием нулевого мертвого объема тройник, где один поток поток подвижной фазы соединен с инжектором, который затем соединяли с центральный порт впускного конца закрывающейся колонны. Второй поток поток подвижной фазы перепускных каналов инжектора и соединен с периферийным портом на входе колонки. Во время разделения потока, процент потока потока доводят до 40:60 ( в центре: периферические) до того , как линии подключены к колонке, т.е. от инжектора до центра и насоса к периферийным.
Система Два насоса
Столбец CF требует двух потоков потока на входном конце закрывающейся колонны. В зависимости от типа автоматического пробоотборника / инжекторе ВЭЖХ приборов, сплит-капельнице вверх может оказаться невозможным, и поэтому CF может затем быть достигнуто с помощью 2 -х насосов (фигура 3В 21), Каждый насос выделяется и соединен либо с центральной или периферической порта и скорость потока устанавливается на составляет 40% от потока для центрального порта и 60% для периферийного порта. Например, если общая скорость потока 1,0 мл мин -1, центральный расход насоса устанавливается на 0,4 мл мин -1 и периферийная насос установлен на 0,6 мл мин - 1.
Выбор режима работы, который в значительной степени зависит от ВЭЖХ-измерительных приборов и хроматографического режиме работы. Например, в некоторых автоматических пробоотборников изменение давления между положением нагрузки образца и образца впрыснуть положение может произойти срыв отношение разделения потока и, следовательно, в этом случае сдвоенный насос установить будет рекомендовано для обеспечения оптимальной производительности CF. Независимо от растворителя системы доставки, созданной выбранной для входного отверстия колонны CF, оптимизация на выходе CF остается тем же самым. Выпускная центральный порт колонны CF прикреплен к детектору видимой области ультрафиолетового (УФ-Вид) с помощью SmaIчтобы объем возможной насосно-компрессорных труб, чтобы свести к минимуму последствия после колонки мертвого объема. Так, CF столбцы эмулировать узок туннелем колонны, мертвый объем между выходе из колонки и детектора отрицательно сказывается на эффективности разделения колонны CF. Крайне важно, чтобы обеспечить наименьшее количество объема трубопровода между центральным отверстием и UV-VIS детектора, чтобы свести к минимуму влияние мертвого объема, таких как полосы расширения, потери эффективности и чувствительности. Следовательно, использование узкого внутреннего диаметра трубки (0,1 мм ID) рекомендуется легко разрешить корректировки давления без добавления нежелательного мертвого объема. НКТ также прилагается к периферийному порту и направляется в отходы. При выходе из колонки CF, коэффициент сегментации может быть отрегулирован на любом соотношении, которое соответствует цели аналитика. Когда CF ID 4,6 мм используется, например, часто бывает удобно установить соотношение либо как 43:57 или 21:79 (в центре): периферическая эмулировать 'виртуальную' 3,0 мм колонки удостоверения личности или 2,1 мм столбец ID,С уважением. Таким образом, производительность сепарации легко скамейка обозначенным. Отношение сегментации измеряется путем взвешивания количества потока, выходящего из детектора, который подключен к центральному порту и потока выходящего из периферийного порта в течение периода времени. Процент потока через каждый из портов, то можно определить и соотношения можно регулировать путем изменения длины трубки, присоединенные или с помощью трубки, которая имеет различный внутренний диаметр (ID).
Это видео протокол подробно описываются процедуры эксплуатации и оптимизации колонки CF для расширения хроматографического производительности.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Внимание: Пожалуйста , обратитесь к паспорте безопасности (MSDS) для всех материалов и реагентов перед использованием (т.е. паспорт безопасности для метанола). Обеспечивать использование всех соответствующих правил безопасности при работе с растворителями и высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) элюент. Обеспечить надлежащее использование технических средств контроля ВЭЖХ, аналитического баланса и детектора измерительных приборов, а также обеспечить использование средств индивидуальной защиты (защитные очки, перчатки, лабораторный халат, полные штаны длины, и закрытую обувь).
Примечание: Этот протокол содержит инструкции о том, как использовать столбец CF в системе ВЭЖХ в сочетании с УФ-детектором-Вис. Протокол был написан в предположении читатель имеет базовые знания и опыт в области хроматографии.
1. Настройка инструмента высокоэффективной жидкостной хроматографии
Примечание: Этот раздел может быть изменен в соответствии с потребностями аналитиков, т.е. выбор растворителей, длина волны детектора и скорости потока , чтоподходят к образцу интереса.
- Подготовка ВЭЖХ - прибор с 100% сверхчистой воды (например, Milli-Q воды) для линии А и 100% метанола для линии В качестве подвижной фазы и произвести чистку насосов согласно требованию производителя.
- Установите детектор UV-VIS до 254 нм.
- Выберите либо разделенный поток режим предварительного впрыска установка, или двойной подачи насоса настройки. Для режима разделенного потока перейдите к шагу 2 для работы в режиме двойного насоса перейдите к шагу 3.
Настройка системы 2. Разделение потока
- Отсоедините линию насоса от инжектора клапана автоматического пробоотборника.
- Прикрепите тройник к линии насоса.
- Прикрепите 15 см кусок трубы 0,13 мм идентификатора для каждого порта тройника.
- Подключите одну трубку от тройника к инжектору клапан автоматического пробоотборника.
- Установите насос до 1,0 мл мин -1.
- Перед подключением линии насоса к впускному отверстию колонны УТС, мелодией соотношение сегментации потока до 40%: 6 0% (центральная линия: периферийная линия) следующим образом в шаге 2.7.
- Настройка коэффициента впуска CF по системе разделенного потока
- Измерьте массу двух пустых сосудов сбора с использованием аналитических весов и маркировать один сборный резервуар центральный и другой периферийный (один для линии от автоматического пробоотборника к центру порта и один для линии от тройника к периферийному порту) ,
- В течение 1,0 мин, собирают выход щего подвижной фазы от линии, поступающей из инжектора (в точке, который будет подключен к колонне) в накопительную емкость, масса которой была измерена в 2.7.1.
- Повторное взвешивание сборный резервуар на аналитическом масштабе и определить массу подвижной фазы, собранной.
- Повторите шаги 2.7.2 на 2.7.3 для элюента, покидающего линию от тройника, который должен быть подключен к периферийному порту.
- Определить процент потока (мл мин -1) от каждой линии потока в соответствии со следующими уравнениями:
1 "SRC =" / файлы / ftp_upload / 53471 / 53471eq1.jpg "/> - Отрегулируйте коэффициент расхода до 40%: 60% (± 2%) (линия от инжектора до центрального порта: линии от тройника к периферийному порту). Если линия от инжектора к проценту центрального потока порта превышает 40%, увеличение перепада давления за счет уменьшения внутреннего диаметра трубы, или увеличение его длины. Если линия от инжектора к проценту центрального потока порта составляет менее 40%, увеличение внутреннего диаметра трубы или уменьшить длину трубки.
- После того, как отношения потока настроены повернуть насос стекать.
- Подключите линию от инжектора к центральному отверстию впускного отверстия колонны и линии от тройника к периферийному порту впускного отверстия колонны.
- Медленно сползать скорость потока до 1,0 мл мин -1 при 100% линии В.
- Уравновешивают колонку (4,6 мм Длина ID х 100 мм), позволяя100% -ном растворе метанола (линия В) , подвижная фаза протекает через колонку со скоростью 1,0 мл мин -1 в течение 10 мин. На этот раз масштабируется в соответствии с размерами других столбцов пользователь может прибегнуть.
- Для настройки выходного отверстия CF перейдите к шагу 4. 'подстройка CF потока на выходе ".
3. Настройка системы двух насосов
- Подключение системы ВЭЖХ насоса к форсунке, а затем подключить линию от инжектора до центрального впускного отверстия колонны.
- Подключение дополнительного насоса непосредственно к впускному периферийного порта колонны. Обратите внимание, что этот второй насос обходит инжектор.
- Рампа скорость потока системы насоса , прикрепленного к центральному порту до 0,4 мл мин -1 (представитель 40% от общей скорости потока 1,0 мл мин -1) при 100% -ном растворе метанола (линия В).
- В то же время , как на стадии 3.3, сползать скорость потока периферийного насоса до 0,6 мл мин -1 (представитель 60% от общей скорости потока1,0 мл мин -1) при 100% -ном растворе метанола (линия В).
- Равновесие колонку (4,6 мм Длина ID х 100 мм), позволяя 100% -ном растворе метанола (линия В) подвижной фазы протекать через колонку со скоростью 1,0 мл мин -1 в течение 10 мин. На этот раз масштабируется в соответствии с размерами других столбцов пользователь может прибегнуть.
- Для настройки выходного отверстия CF перейдите к шагу 4. 'подстройка CF потока на выходе ".
4. Настройка CF выходе потока
- Подключите центральный выпускной канал для UV-VIS детектора с использованием 15 см кусок трубы 0,13 мм идентификатора.
- Подключение 15 см кусок трубы идентификатора 0,13 мм к периферийному выходному отверстию колонны CF.
- Взвесьте массы двух пустых сосудов сбора на аналитических весах и маркировать одно судно центральной и другого периферийного оборудования.
- В течение 1,0 мин, собирают выход щего подвижной фазы от UV-VIS детектора (центрального потока) в ярлыке сосуд для сбора центральной, масса которого была измерена в 4.2.
- Повторное взвешивание сборный резервуар, содержащий собранный элюент на аналитическом уровне и определить массу подвижной фазы, собранной.
- Повторите шаги 4.4 до 4.5 для элюента, покидающего линию от порта периферийного выпускного.
- Определить процент потока от каждой линии потока в соответствии со следующими уравнениями:
- Отрегулируйте соотношение потока до 21%: 79% (± 2%) (центральный поток на выходе из УФ-Vis: периферический поток на выходе из линии). Если центральный процент потока от УФ-Vis находится выше 21%, увеличение перепада давления за счет уменьшения внутреннего диаметра трубки, присоединенные к выходу из UV-VIS детектора, или увеличение его длины. Если центральный процент потока от УФ-Вис находится ниже 21%, увеличение внутреннего диаметра трубки, присоединенные к выходу из UV-VIS детектора, или уменьшить длину трубки. Каждый раз, когда длина трубки была изменена, повторшаги 4.3 до 4.7.
Примечание: В столбце CF в режиме 'виртуального' 2,1 мм внутр готова к анализу.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
AFT колонны были разработаны с использованием специализированной конструкции фриттиванного (рисунок 1) в колонке мультипортовый концевой арматурой , чтобы преодолеть кровать гетерогенность колонки и повышения эффективности разделения. Межлабораторная исследование по эффективности разделения МВ хроматографических колонок (рисунок 2) проводили с двойной насосной системой , созданной (рис 3B) , как описано в разделе 3 данного протокола 23. Три теста компонента смесь анализировали при помощи "виртуальной" 2,1 мм внутр где 21% от центрального выпускного потока колонны CF был направлен на детектор. Разделение трехкомпонентной испытательной смеси иллюстрирует улучшенную производительность с точки зрения эффективности и чувствительности, рулевой колонки относительно CF стандартных колонок. Три компонента теста смесь содержала Фенетол, бутилбензол и pentylbenzene и анализировали на обычных 4,6 и 2,1 мм внутр колоннами и 4.6 мм ID CF колонки с коэффициентом сегментации 22:78 (центра: периферийный) для эмуляции 2,1 мм ID (рисунок 4). Эффективность разделения была оценена с точки зрения подсчета пластины (N), а также чувствительность. Использование колонки CF для анализа показали более низкий предел обнаружения (рисунок 5) и увеличение чувствительности (цифры 4 и 6) по сравнению с обычными колонки анализов. Было также установлено , что независимо от того, в лаборатории или типа системы ВЭЖХ , который используется, результат эффективности разделения на колонке CF была относительно же, все что приводит к повышению эффективности разделения при использовании CF - хроматографические колонки 23.
Рисунок 1. Иллюстрация потока активной технологии колонны конечного закрывающейся конструкции фритты. OAD / 53471 / 53471fig1large.jpg "целевых =" _blank "> Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть увеличенную версию этой фигуры.
Рисунок 2. AFT колонка -. CF формат колонки Пожалуйста , нажмите здесь , чтобы посмотреть увеличенную версию этой фигуры.
Рисунок 3. Набор из CF потока на входе колонки в программе настройки системы (A) разделенного потока и (В) настройки системы 2 насоса. Пожалуйста , нажмите здесь , чтобы посмотреть увеличенную версию этой фигуры.
/53471fig4.jpg "/>
Рисунок 4. Типичная разделение трех компонентов испытуемой смеси , полученной с использованием системы Окончательный 3000. (А) Обычные 4,6 мм колонка ID, (б) Обычные 2,1 мм колонка ID, колонка (с) с завесой работает с сегментацией розеткой 22% отношение. Растворенные вещества: (I) Фенетол, (II) Бутилбензольная и (III) pentylbenzene. Эта цифра была взята из 23. Пожалуйста , нажмите здесь , чтобы посмотреть увеличенную версию этой фигуры.
Рисунок 5. Профили элюирования зонные бутилбензола на пределе обнаружения на (а) обычной колонны, и (б) поток занавес колонки система:. Shimadzu со скоростью 2,0 мл / мин, 5 мкл инъекции, обнаружение при 254 нм. Эта цифра была получена из
Рисунок 6. Сравнение в элюции профилей бутилбензола , полученных в системе Окончательный 3000. (А) обычный 4,6 мм колонка ID, (б) обычный 2,1 мм колонка ID, (в) колонка с завесой с сегментацией розеткой 22% отношение. Эта цифра была взята из 23. Пожалуйста , нажмите здесь , чтобы посмотреть увеличенную версию этой фигуры.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Это исследование включало в межлабораторный анализ хроматографических колонок CF, чтобы проверить аналитические показатели с точки зрения эффективности и чувствительности. Колонна CF была создана с двойной насосной системы, как описано в разделе «3. Двойная насосная система создана ', чтобы получить отношение потока 40:60 (центра: периферические) на входе колонки CF. 40:60 (центр: периферический) отношение потока было достигнуто путем установки скорости потока каждого насоса к значению, которое составляет 40% и 60% от общего расхода потока, соответственно. Выходе из колонки CF настраивалась на "виртуальной" столбец с идентификатором 2,1 мм, следуя процедуре, описанной в разделе "4. Настройка CF потока на выходе ". Образец смеси , содержащей Фенетол, бутилбензол и pentylbenzene использовали в качестве тест - стандарта для сравнения эффективности разделения между колонки 4,6 мм внутр CF (22:78) , и обычных 4,6 и 2,1 мм колонн ID. Фиг.4 представляет накладку chromatograpHIC разделение анализируемой смеси проводится с использованием каждой из трех колонок. Основное различие наблюдается в этом рисунке является значительное увеличение в ответ сигнала для разделения полученного с использованием колонки CF. Отклик сигнала для 4,6 и 2,1 мм внутр обычные колонны были практически идентичны, как и ожидалось, как хроматографические условия масштабируется, чтобы соответствовать поверхности поперечного сечения колонн.
Линейность и пределы обнаружения были также оценены между CF и обычных режимах работы, где были подготовлены и проанализированы в повторах на различных системах ВЭЖХ с различными скоростями потока серия стандартов. Независимо от того, который использовали ВЭЖХ системы и при какой скорости потока исход анализа был по существу то же самое, когда отклик сигнала для CF всегда была значительно больше, чем другие обычные столбцы. получает ответный сигнал, как правило, были между 1,7 и 2,8 раза больше, чем обычные столбцы. 5-кратныйповышение точности измерений (то есть, относительное стандартное отклонение - РСД%) от высоты пика на самой низкой стандартной серии наблюдалась для режима CF работы на уровне 22% по сравнению с обычным Идентификатор столбца 2,1 мм. CF улучшает точность измерений пиковой нагрузки из-за увеличения чувствительности, полученной в результате CF. Чем больше Отклик сигнала ниже значение RSD. Таким образом, как следствие улучшение сигнала отклика пика точности также улучшается, а также эффективность выше, поэтому полосы хвост меньше и, следовательно, пик интеграции является более точным. Пределы содержания и количественной оценки с использованием колонн CF с соотношением сегментации на выходе из 22:78 (центр: периферические). Также были улучшены до 2,3 раза по сравнению с обычными 2,1 мм Идентификатор столбца 23 Рисунок 5 иллюстрирует ближний предел обнаружения для ответа бутилбензола пик при условиях муковисцидозом и обычных условиях.
Важным аспектом в комЗаготовку между CF и обычных столбцов , которые не видны на фиг.4 , является уменьшение пикового объема для аналитов в образцах в условиях муковисцидозом. На рисунке 4 представлены пики по времени, тем не менее, так как в режиме CF только часть общий поток используется, ширина пика может быть отрегулировано по отношению к объему. 6 дано сравнение профиля бутилбензол элюирования относительно пикового объема для CF (22:78) , эмулирующий 'виртуального' 2,1 мм внутренний диаметр, обычный 4,6 - мм колонка с ID и обычный 2,1 мм ID объем пик между CF и обычных мм колонн 2.1 была почти идентична, однако, объем пик обычной колонки 4,6 мм была приблизительно в 5 раз больше, чем оба обычных 2,1 мм и CF (22:78) , Важно отметить, что снижение пиковой громкости в режиме CF не приводило к уменьшению сигнала отклика, а увеличение почти в 3 раза, чем у обычных колонн regardlESS внутреннего диаметра 23. Хотя снижение пикового объема не может быть важным для обнаружения UV-VIS, то же самое нельзя сказать, для процессов обнаружения, скорость потока зависит или ограничена, например, масс-спектрометр или испарительного детектора света рассеяния.
Недостатком CF режима работы, как у более узкой скуки обычных колонн является его восприимчивость к воздействию после колонки мертвого объема, что может значительно ухудшить производительность сепарации, вызывая расширение полосы и затухание интенсивности сигнала. Тем не менее, мертвый объем на входе менее важна. Таким образом, из-за ухода с трубкой после колонны необходимо для обеспечения оптимальной производительности разделения CF. CF-хроматографии является достаточно новой формой технологии колонки, которая имеет большой потенциал в будущих приложениях. Например, введение низкой концентрации образца в центре колонны CF, является "занавесками" стенкой (периферический) Подвижная фаза согласованностьрейтинг образца в центре колонны CF, и, таким образом, максимизируя отклик сигнала. При выходе только центральный поток , содержащий «концентрированная» образец берется к детектору, обеспечивая увеличение чувствительности, идеально подходит для анализа высокоскоростных используя высокие скорости потока на поток ограниченных детекторов , таких как MS 6.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| HPLC instrument | |||
| Additional Pump | Required if 2 pump CF system set up is to be used. | ||
| Curtain Flow HPLC column | Thermo Fisher Scientific | Not Defined | Soon to be commercialized |
| Methanol | Any brand | HPLC Grade | |
| PEEK tubing | Any brand | Various lengths and i.d. | |
| PEEK tube cutter | Any brand | ||
| Analytical Scale Balance | Any brand | ||
| Stop watch | Any brand | ||
| Eluent collection vessels | Any brand | 1-2 ml sample vials can be used as eluent collection vessels | |
| T-piece | Any brand |
References
- Camenzuli, M., et al. The use of parallel segmented outlet flow columns for enhanced mass spectral sensitivity at high chromatographic flow rates. Rapid Commun. Mass Sp. 26 (8), 943-949 (2012).
- Camenzuli, M., Ritchie, H. J., Ladine, J. R., Shalliker, R. A. Enhanced separation performance using a new column technology: Parallel segmented outlet flow. J. Chromatogr. A. 1232 (0), 47-51 (2012).
- Camenzuli, M., Ritchie, H. J., Shalliker, R. A. Gradient elution chromatography with segmented parallel flow column technology: A study on 4.6mm analytical scale columns. J. Chromatogr. A. 1270 (0), 204-211 (2012).
- Camenzuli, M., Ritchie, H. J., Shalliker, R. A. Improving HPLC separation performance using parallel segmented flow chromatography. Microchem. J. 111 (0), 3-7 (2013).
- Camenzuli, M., et al. Parallel segmented outlet flow high performance liquid chromatography with multiplexed detection. Anal. Chim. Acta. 803 (0), 154-159 (2013).
- Kocic, D., et al. High through-put and highly sensitive liquid chromatography-tandem mass spectrometry separations of essential amino acids using active flow technology chromatography columns. J. Chromatogr. A. 1305 (0), 102-108 (2013).
- Shalliker, R. A., Ritchie, H. Segmented flow and curtain flow chromatography: Overcoming the wall effect and heterogeneous bed structures. J. Chromatogr. A. 1335 (0), 122-135 (2014).
- Shellie, R., Haddad, P. Comprehensive two-dimensional liquid chromatography. Anal. Bioanal. Chem. 386 (3), 405-415 (2006).
- Abia, J. A., Mriziq, K. S., Guiochon, G. A. Radial heterogeneity of some analytical columns used in high-performance liquid chromatography. J. Chromatogr. A. 1216 (15), 3185-3191 (2009).
- Knox, J. H., Laird, G. R., Raven, P. A. Interaction of radial and axial dispersion in liquid chromatography in relation to the "infinite diameter effect". J. Chromatogr. A. 122 (0), 129-145 (1976).
- Miyabe, K., Guiochon, G. Estimation of the column radial heterogeneity from an analysis of the characteristics of tailing peaks in linear chromatography. J. Chromatogr. A. 830 (1), 29-39 (1999).
- Shalliker, R. A., Scott Broyles, B., Guiochon, G. Axial and radial diffusion coefficients in a liquid chromatography column and bed heterogeneity. J. Chromatogr. A. 994 (1-2), 1-12 (2003).
- Gritti, F., Guiochon, G. Effects of the thermal heterogeneity of the column on chromatographic results. J. Chromatogr. A. 1131 (1-2), 151-165 (2006).
- Shalliker, R. A., Wong, V., Broyles, B. S., Guiochon, G. Visualization of bed compression in an axial compression liquid chromatography column. J. Chromatogr. A. 977 (2), 213-223 (2002).
- Tallarek, U., Albert, K., Bayer, E., Guiochon, G. Measurement of transverse and axial apparent dispersion coefficients in packed beds. AICHE J. 42 (11), 3041-3054 (1996).
- Camenzuli, M., Ritchie, H. J., Ladine, J. R., Shalliker, R. A. Active flow management in preparative chromatographic separations: A preliminary investigation into enhanced separation using a curtain flow inlet fitting and segmented flow outlet. J. Sep. Sci. 35 (3), 410-415 (2012).
- Shalliker, R. A., Broyles, B. S., Guiochon, G. Physical evidence of two wall effects in liquid chromatography. J. Chromatogr. A. 888 (1-2), 1-12 (2000).
- Shalliker, R. A., Camenzuli, M., Pereira, L., Ritchie, H. J. Parallel segmented flow chromatography columns: Conventional analytical scale column formats presenting as a 'virtual' narrow bore column. J. Chromatogr. A. 1262 (0), 64-69 (2012).
- Camenzuli, M., Ritchie, H. J., Ladine, J. R., Shalliker, R. A. The design of a new concept chromatography column. Analyst. 136 (24), 5127-5130 (2011).
- Foley, D., et al. Precision and Reliability: an Intercontinental Study of Curtain Flow Chromatography. Thermo Scientific. , (2013).
- Pravadali-Cekic, S. Multidimensional Approaches for the Analysis of Complex Samples using HPLC. University of Western Sydney. , PhD thesis (2014).
- Soliven, A., et al. Improving the performance of narrow-bore HPLC columns using active flow technology. Microchem. J. 116 (0), 230-234 (2014).
- Foley, D., et al. Curtain flow chromatography ('the infinite diameter column') with automated injection and high sample through-put: The results of an inter-laboratory study. Microchem. J. 110 (0), 127-132 (2013).
