Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Journal Medicine
Click here for the English version

Medicine

Fare Ortotopik Hind Ekstremite nakli

Published: February 12, 2016 doi: 10.3791/53483
Automatic Translation
*1, *1, *2, 3, 4, 1, 1, 1, 1
1Department of Plastic and Reconstructive Surgery, Vascularized Composite Allotransplantation (VCA) Laboratory, Johns Hopkins University School of Medicine, 2Department of Visceral, Transplant and Thoracic Surgery, Innsbruck Medical University, 3Center for Vascularized Composite Allotransplantation, Department of Plastic and Reconstructive Surgery, Chang Gung Memorial Hospital and School of Medicine, 4Department of General, Visceral and Transplant Surgery, Charite Berlin
* These authors contributed equally

Summary

Süper mikrovasküler anastomoz olmayan bir dikiş manşet tekniği uygulayarak fare ortotopik arka uzuv nakli için bu yeni model, vaskülarize kompozit doku yamasında (VCA) ile ilgili in vivo mekanik immünolojik araştırmalar için güçlü bir araç sağlar.

Protocol

Bütün deneyler Bakım ve Ulusal Sağlık Enstitüsü (NIH) Laboratuvar Hayvanları Kullanım Kılavuzu uyarınca yapılmıştır ve Johns Hopkins Üniversitesi Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi (JHUACUC) tarafından onaylanmıştır. Belirli prosedürler onaylı ACUC protokol MO13M108 altında gerçekleştirildi.

1. Donör Operasyonu

  1. her cerrahi işlem öncesinde farmakolojik formülasyon için uygun zaman noktasında analjezi yönetmek. 0.1 mg buprenorfin subkutan / kg BW 1 saat önce cilt kesisi ile onaylanan hayvan bakımı ve kullanımı protokol kullanımı başı olarak.
  2. izofluran ile sakin donör% 4 bir izofluran buharlaştıncıya bağlı bir bölme yoluyla uygulanan; Bir burun konisi ile% 2 sedasyon ve anestezi korumak. prosedürün başlatılması öncesinde anestezi derinliği izlemek için ayak tutam çekilme yansıma gerçekleştirin.
  3. maskeler, tek kullanımlık izolasyon önlük ve eldiven giyin.
  4. Cerrahi ar Tıraşea,% 10 Povidon özellikle arka bacak ve kasık ve hazırlık içinde - İyot.
  5. steril bir alan drape, otoklava aletleri ve yüksek büyütme mikroskobu (40X) kullanın.
  6. orta uyluk bölgesine proksimale makas kullanılarak kasık deri kesi yapmak ve çevresel fare vücudun geri kalanından arka ekstremite ayırmak için kesi bağlayın.
  7. Belirlemek ve femoral arter, ven ve sinir teşrih. forseps ve mikro-makas kullanılarak her üç yapıları ayırın.
  8. Vasküler pedikül disseke edildikten sonra mikro makas kullanarak inguinal ligament seviyesinde gemileri bölün.
  9. Sonraki, makas kullanılarak donör hayvandan grefti ayırmak için orta uyluk düzeyinde proksimale bireysel ventral (gracilis ve medial uyluk kasları) ve dorsal kas gruplarını 20 bölünmeye devam.
  10. femur transect ve makas kullanılarak femur şaftının orta kesilir.
  11. izofluran doz aşımı fol tarafından hayvan Euthanizeservikal dislokasyon ile izin verilmelidir. kalp atışı ve solunum durması onaylayın.
  12. bir şırınga üzerine monte edilmiş bir 33 G iğne kullanılarak temizleme ile heparinize 2 ml (30 IE) soğuk (4 ° C) tuzlu su ile uzvu yıkayın (Malzeme Tablo).
  13. sırasıyla, femoral ven ve arter üzerinde bir poliimid manşet yerleştirin.
  14. içerlek kadar 4 ° C'de petri ve mağaza ıslak pamuk gazlı bez, yerine greft sarın.

2. Alıcı Operasyonu

  1. Arka bacak çıkarılması
    1. her cerrahi işlem öncesinde farmakolojik formülasyon için uygun zaman noktasında analjezi yönetmek. onaylanmış hayvan bakım ve kullanım protokolü kullanımı Buprenorfin SC 1 saat önce cilt kesisi 0.1 mg / kg BW başı olarak.
    2. izofluran ile sakin donör% 4 bir izofluran buharlaştıncıya bağlı bir bölme yoluyla uygulanan; Bir burun konisi ile% 2 sedasyon ve anestezi korumak. borç izlemek için ayak tutam çekilme yansıma gerçekleştirinprosedürünün başlamasından önce anestezi H.
    3. anestezi altında iken kuruluğunu önlemek için fare gözleri veteriner merhem kullanın.
    4. Özellikle,% 10 Povidon ile arka uzuv ve kasık ve hazırlık cerrahi alan tıraş - İyot.
    5. orta uyluk bölgesine proksimale makas kullanılarak kasık deri kesi yapmak ve çevresel fare vücudun geri kalanından arka ekstremite ayırmak için kesi bağlayın.
    6. forseps ve mikro-makas kullanılarak her üç yapıların belirlenmesi ve femoral arter, ven ve sinir incelemek ve ayırın.
    7. Vasküler pedikül disseke sonra, inguinal ligament seviyesinde femoral damarlar kelepçe.
    8. yüzeyel epigastrik arter düzeyinde uzak gemileri kesin.
    9. Sonraki, yerli arka li ayırmak için proksimal orta uyluk düzeyinde bireysel ventral (gracilis ve medial uyluk kasları) ve dorsal kas gruplarını 20 bölünmeye devammakas kullanılarak alıcı hayvanlardan mb.
    10. makas kullanarak femur şaft ortasında femur transect.
    11. Diseksiyon sitenin kanama ve böylece alıcı kan kaybını önlemek için önceden kesilen uyluk kasları dağlamak.
  2. aşılama
    1. ılık serum fizyolojik (37 ° C) ile ameliyat alanını sulama ve daha önce 0.3 ml ılık tuzlu enjekte edilerek ve ameliyat sonrası sıvı kaybını en aza indirmek.
    2. Alıcının ve greft femur kemiği hizalayarak ve bir intramedüller rod olarak 20 G spinal iğne kullanarak bağlayın tarafından yerli arka bacak doğru anatomik pozisyonunu yansıtacak şekilde greft yerleştirin.
    3. Coapt emilebilir sütür materyali (6-0 polisorb) kullanılarak ventral ve dorsal kas gruplarını.
    4. olmayan dikiş manşet tekniği kullanılarak femoral damarlar bağlayın; manşetler önce geminin üzerine monte üzerinde ayrıntılı olarak, graf uçları geminin alıcı tarafını çekint. Bir 10-0 Naylon sütür kullanın ve manşet üzerine alıcı gemi düzeltmek için bir çevresel kravat gerçekleştirin.
    5. Sonraki mandalları. Bu aşamada görsel manşet rotasyon ve gemilerin yanlış dönme ve bükülmesini önlemek için en uygun konumlandırma doğrulayın.
    6. kas alıcı verici arayüzü ve kemik uçlarında özel bir odaklanma ile elektro koter kullanılarak titiz hemostaz gerçekleştirin.
    7. emilmeyen Naylon dikişler (6-0 etilon) kullanarak cilt kapatın.
    8. hayvan bir ısıtma lambası altında kafes içinde kurtarmak için izin vererek normotermik koşulları kurmak. konut tesisine dönmeden önce en az 4 saat süreyle düzenli izleme devam edin.
    9. 3 gün boyunca 0.1 mg / kg SC 6-8 saat arasında bir dozda buprenorfin ile ameliyat sonrası analjezi sağlar.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Olmayan bir ameliyat dikiş ipliği manşon tekniğiyle bir fare modelinde vaskülarize kompozit allotransplantasyon ve ototransplantasyon gerçekleştirme Şekil 1 'de gösterildiği gibi, çok iyi ve uzun süreli greft ve hayvan yaşam elde sağlar. Ayrıca, vaskülarize kompozit kademeli allogreft reddinin tekrarlanabilir sonuçlar elde etmek için güvenilir bir yöntem temsil allotransplantasyon Şekil 2'de gösterilen görüntü ile belirtildiği gibi. reddi daha bu fare modelinde allograft reddinin tekrarlanabilir dinamiklerini (Şekil 3) altını uygulanan hayvanlardan elde edilen dokuların H & E histolojisi.

Şekil 1
Bir Fully H2-eşleşmeyen Fare Gerginlik Kombinasyon Şekil 1. Allogreft Survival [C57BL6 (H2K b) içine Balb / c (H2K d)]. Tüm Singeneik naklinde iken9 gün - karıncaların (n = 10), uzun süreli, muamele edilmemiş allograft (n = 10) akut içerisinde itiraz 8 arasında ortalama kabul edilmiştir. Banff kriterlerine göre cilt ret 3. sınıf Bu çalışmada tam ret kabul edildi. Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.

şekil 2
Şekil 2. Klinik Reddetme Özellikleri ve Fare Ortotopik Hind Ekstremite nakli bir tam H2-eşleşmeyen [C57BL6 (H2K b) içine Balb / c (H2K d)] Dinamikleri. (A) Klinik Sınıf 0, (B) Klinik 1. Sınıf ( C) costimul ile tedavi edilen klinik sınıf 2, (D), klinik sınıf 3, ve (E) klinik sınıf 4 reddi, (F), uzun vadeli hayatta allogreft (POD 100)tirme blokajı (antiCD40 mAb + CTLA4lg) esaslı rejim. Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.

Şekil 3,
Şekil 3. POD 8 yanı sıra on Deri ve kas bir singenik nakli (A) ve allojenik Nakli (B) H & E Boyama POD 8 bir singenik nakli (C) ve allojenik Nakli içinde Kapkaççı Deri ve Kası H & E Boyama (D ) (Ölçek çubuğu:. 0.1 mikron) bu rakamın daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen buraya tıklayınız.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Vaskülarize Kompozit allotransplantasyon, bu tür yıkıcı doku defektlerinin rekonstrüksiyonu için üst ekstremite ve yüz naklinin olarak, geleneksel rekonstrüktif prosedürlere amendable değil hastalar için geçerli bir tedavi seçeneği olarak ortaya çıkmıştır. Rekonstrüktif mikrocerrahi alanında teknik gelişmeler yanı sıra güçlü bağışıklık baskılayıcı ve solid organ transplantasyonu, bağışıklık düzenleyici tedaviler ile geniş bir deneyim, şimdi bu eşsiz hasta popülasyonunda 3,21 uzun vadeli allogreft sağkalımı sağlar. Ancak, allogreft bakım ve yaşam için gerekli olan uzun süreli bağışıklık önemli yan etkileri hala artırılması değil rekonstrüktif yöntemleri 3,22,23 hayat kurtarıcı bu hayatın geniş bir uygulama sınırlamak. Ayrıca, katı organ nakilleri aksine VCA'ların başarısı, motor fonksiyon hem kas innerve yeniden yanı şekilde allogreft içine alıcı sinirleri zamanında rejenerasyon bağlıdırdokunma ve sıcaklık hissi için duyusal bileşenlerin işlevini yeniden kazanmak için. Immunolojik açıdan bakıldığında, transplantasyon tıbbın her gibi, rekonstrüktif naklinde herkesin ortak hedefi uzun vadeli bakım immünsupresyon 23 gerek kalmadan bir allogreftin kabulü için izin operasyonel hoşgörü bir devlet elde etmektir. Bu bağlamda, bir fare, bir sağlam bağışıklık sisteminin belirli tolerans Alloantijen elde yollarını araştırmak için nakil immünoloji araştırma in vivo model sisteminde ana temsil şekilde gelişmiştir. Ayrıca, fare H2 kompleksi yakından insan MHC kompleksi andırıyor. Böylece, doğuştan ve genotip fare soyları tamamen allojenik gerilme kombinasyonuna genden gelen mismatching Alloantijen çeşitli derecelerde kullanılarak ilgili ve ilişkili olmayan yaşam ve kadavra donör ayarları klinik senaryoları modellemek için izin verir. Transgenik hayvanların ve spesifik nakavt hayvanların elde hazır mevcut ilaveten tümseçici aktivasyonu veya hücre veya protein bileşenlerinin tükenmesi olasılığını sağlayarak rolleri ve bağışıklık kabul ve ret bireysel moleküler yollar ve düzenleyici mekanizmaların etkilerinin akımları incelenmesi. Bu teşhis ve tedavi edici ajanlar (örn., Antikorlar) benzersiz in vitro fare sistemi için geliştirilmiş geniş bir durumu ile paralel ve in vivo olarak 24 çalışmalarıdır. Genel olarak, bu yönleri fare sistemi temel nakli immünoloji araştırmaları için "altın standart" olun.

Son zamanlarda Brandacher ark tarafından gözden olarak VCA için açıklanan çeşitli 13,16,18,20,25,26 küçük ve büyük hayvan 14,27-29 modelleri olmasına rağmen. 30 sadece çok az aslında temel mekanik immünolojik araştırmalar 16 için geçerlidir , 24,30. Nedeniyle fare femoral arter ve ven küçük damar çapı, gelişmiş cerrahi ve süper-mi gerektirircrosurgical eğitim ve beceri ortotopik arka uzuv naklinin temel bileşeni olarak başarılı anastomoz uygulamak için. Anatomik yapıların titiz ve dikkatli bir diseksiyon önce yayınlanmış modeller 20,31,32 gibi bu modelde olduğu gibi kritik alakalı iken, manşet tekniği alt milimetre gemilerin 16,25 ve dikiş anastomoz kıyasla daha az dik bir öğrenme eğrisi göstermiştir titiz günlük uygulama ile bir kaç ay eğitim elde edilebilir. bizim deneyime dayalı, eğitimsiz bir microsurgeon yüksek başarı oranları ile bu modeli gerçekleştirmek için yeterli ve güvenilir becerileri kazanmaları için 30 -50 usul girişimleri gerekir. Deneyimli ve eğitimli microsurgeon için 15-30 girişimleri modelinde Burada sunulan prosedür karmaşıklığı daha da bu yaklaşım sınırlı damar uzunluğu ve dolayısıyla diseksiyon gerektirmesi ile yansıtılır azaltılmış bu manşet tabanlı fare arka uzuv nakli ana yeterli olacaktır. Biz t alarak bulunduO inguinal ligament donör damarları ve manşet tekniği geçerli olmak üzere kapsamlı bir ek uzunluğu gerektirir ortak fikri rağmen, yeterli uzunlukta sağlayan yüzeysel epigastrik damarların seviyesinde alıcı gemiler. Örneğin, bir daha önce yayınlanmış bir yaklaşım popliteal damar 32 seviyesinde iliak damarlarının ve alıcı kaplar, dış düzeyinde hasat donör kaplara gerekliliğini açıklar. Ayrıca, manşet tekniği ile, anastomoz performans sütür tekniği ile karşılaştırıldığında daha az zaman gerektirir ve genel azaltılmış çalışma süresi yol açar. Deneyimli ellerde, hem donör ve alıcı prosedürleri 90 dakika ortalama içinde tamamlanabilir. Bu alıcı anestezi süresi başarısı ve perioperatif hayatta kalmak için önemli bir belirleyici olduğunu genişletilmiş olan daha önce bildirilen yöntemlere kıyasla önemli bir gelişmedir; İki cerrahın gerekliliği bir önkoşul 31-33 yaklaşım yapma.Ayrıca, anastomoz ayrıca katkıda kanama hiçbir minimal ölçüde kan kaybı azalır ve bu modelde 33 başarı için başka belirleyici olarak daha önce açıklandığı gibi, böylece alıcılar sıvı resüsitasyon ihtiyacı azaltır. Son olarak, manşet tekniği 11-0 mikro-dikiş materyali yüksek maliyetleri ile karşılaştırıldığında önemli bir maliyet avantajı ile bir yöntem temsil eder. Böylece, sigara dikiş manşet tekniği yatan protokolün en kritik adımı temsil etmektedir. Tung tarafından şık bir çalışmada, et al., Çeşitli miyokard ve vaskülarize kasık deri flebi dahil osteomyocutaneous flep açıklanan fare femur damar pedikül 32 kapalı tabanlı edilmiştir. Burada sunulan yöntem, tüm fare arka bacak nakli odaklanmaktadır ederken, sunulan ilkeler kolayca tercüme ve diğer çeşitli anatomik flep tasarımlar kullanılabilir. Kayda değer bir gerçektir önceki yazarlar automutilation rapor ederken buya da bu bizim deneyim gözlenmemiştir ameliyat sonrası sağkalım 31,32 sırasında önemli bir komplikasyon olarak greft otofaji. Ayrıca, hızlı iyileşme ve besleme ve damat hayvanın yeteneği sınırlı bozulma nakledilen bacak ortotopik içerlek sadece asgari alıcı morbidite uğratan altını çiziyor.

Bu videonun yayında açıklanan model ayrıca daha önce yayınlanmış tekniklere göre fare ayarına farklı avantajlar getirmektedir. Grubumuz 16 tarafından, daha önce rapor edildiği gibi, her şeyden önce, manşon tekniğinin arka bacak allograft ortotopik transplantasyon için izin veren bir lümen çapına 1'den küçük milimetre olan damarlarda kullanılabilir. Bu yaklaşım, hem immünolojik hem de VCA 16,25 ilgili sinir rejenerasyonu fonksiyonel çalışmalarda Birleştirilen Bu model kullanılarak için bir temel sağlar. Sinir rejenerasyonu f önem taşıyorrekonstrüktif transplantasyon ield, bu başarı öncelikle fonksiyonel ve estetik kusurların restorasyonu ile belirlenir dışı hayat kurtarıcı prosedürleri gibi.

Arka bacak kaynaklanan bir osteomyocutaneous flep heterotopik ek cerrah 15 mevcut ek bir modeldir. Bununla birlikte, bu yaklaşımda, çiviler ve ayak arasında tüysüz deri gibi potansiyel ilgi yapıları, cerrahi olarak çıkarılması, bir anatomik değiştirilmemiş arka bacak allograft ortotopik transplantasyon ile karşılaştırıldığında bu yöntemin çok yönlülüğünü sınırlar. Bu yapılar elde allogreft 34 mekanik stres vermekten hastalarda, tipik olmayan reddedilmesi süreçlerinin hedef olarak tarif edilmiştir gibi bu rekonstrüktif nakli özellikle ilgi çekicidir. vaskülarize kemik canlı kemik iliği içeren ve bir Constantl olduğu gibi vaskülarize kompozit doku allogreft doğasında benzersiz kemik bileşeni,y bileşenleri ve donör bağışıklık sisteminin öncüleri kaynağını yenilemek. Bu dikkatli bir konakçı hastalığı (GVHD) için olası bir kaynak olarak kabul edilmiştir, ancak bu, hem hayvan modellerinde 35,36 hem de insanlarda 37 gözlenmemiştir. 36 öncesi ve klinik çalışmalarda 38-40 gösterildiği gibi aksine çok aslında, donör kemik iliği transplantasyonu ile organ transplantasyonu kombinasyonu veya seçilen kemik iliği kaynaklı hücre ürünlerinin transfüzyon aslında immünsüpresyonun miktarı 21 ihtiyaç konusunda avantajlı etkiler göstermektedir ; Bazı protokoller bile ilaç tabanlı immünosupresyon 41 için gerek kalmadan operasyon toleransı göstermiştir.

Alıcı kombinasyonları (Şekil 1) yanı sıra gösterildiği gibi greft accepta bir iyi karakterize desenleri - Bu yayında gösterilen modeli ve metodoloji% 100 uzun süreli hayvan sinjenik donör hayatta kalma vermiştirallojenik gerilme kombinasyonları nce ve ret Şekil 2 ve 3'te belirtilen. Ayrıca, VCA içinde ret görünür bir birincil hedef olarak cilt, insan VCA için olanlar ile ilişkilendirilmesi ret 4 farklı klinik senaryolar çoğaltılabilir modelini izler tarafından belirtildiği gibi Banff 2007 çalışma sınıflandırma cilt içeren, VCA 42 bu model özellikle çevrilebilir adrestir. Böylece, her şeyden önce rekonstrüktif transplantasyon için bu son derece güvenilir fare modeli, klinik VCA translati- etkisi ile tanısal ve girişimsel çalışmalar için imkanlar açılır genetik olarak tanımlanmış kendilenmiş ve transgenik fare suşlarının çok yönlü bir immünolojik model sistem kullanılabilirliğini tanıtır.

açıklanan tekniği mastering başlamadan önce temel mikrocerrahi becerileri ihtiyacı bu modele bir sınırlama olarak kabul edilebilir, ancak herhangi bir fare mikrocerrahi modeli aynı ana engeldir. Pers, bu video protokolü esas vaskülarize kompozit alotransplantasyon için in vivo model bir murin mikrovasküler anastomoz için alternatif bir yaklaşım görmüş microsurgeon sağlamak için tasarlanmıştır. Model ayrıca sağlam bir vaskülarize kemik iliği bileşeninin nakli, hem de sinir rejenerasyonu araştırma fonksiyonel modelinin kullanılmasına olanak sağlar.

Sonuç olarak, VCA herhangi bir yönü ile ilgili temel mekanik kapı yanı sıra translasyonel araştırma açar olmayan bir dikiş manşet tekniği kullanılarak ortotopik arka uzuv nakli için bir roman, çok yönlü ve güvenilir fare modeli kurdu.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Acknowledgments

Bu eser Ödülü No. W81XWH-13-2-0053 altında, AFIRM II çabayı desteklemek için Kara, Deniz, NIH, Hava Kuvvetleri, VA ve Sağlık İşleri tarafından desteklenmiştir. ABD Ordusu Tıbbi Araştırma Toplama Etkinliği, 820 Chandler Street, Fort Detrick MD 21702-5014 ödüllendirme ve yönetmek edinme bürosu oldu. Görüşler, yorumlar, sonuçlar ve öneriler yazara aittir ve ille de Savunma Bakanlığı tarafından onaylanmış değildir.

Yazarlar bu çalışma sırasında mükemmel veteriner destek için Jessica Izzi, DVM, Caroline Garrett, DVM ve Julie Watson, DVM'yi teşekkür etmek istiyorum.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Suture, 6-0 Nylon MWI 31849
Suture, 6-0 Polysorb MWI 72667
Suture, 10-0 Nylon Aero Surgical TK-107038
Polyimide Tubing, Size 25 Vention Medical 141-0023
Polyimide Tubing, Size 27 Vention Medical 141-0015
Microvascular Clamps (Single) Synovis 00396
Microvascular Clamps (Double) Synovis 00414
Micro-Scissors Synovis SAS-18
Micro-Forceps Synovis FRS-15 RM-8
Micro-Dilators Synovis FRS-15 RM-8d.1
Micro-Needledriver Synovis C-14
Micro-Clamp Applicator Synovis CAF-4
Micro-Flushing Needle Hamilton 10MM, 30°, 33G
Lactated Ringers Solution Fisher Scientific NC9968051
Buprenorphine DEA Number required; Obtained from hosptial pharmacy.
Enrofloxacin; Baytril Bayer Health Care 186599
Heparin Obtained from hosptial pharmacy

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Khalifian, S., et al. Facial transplantation: the first 9 years. Lancet. , (2014).
  2. Petruzzo, P., Dubernard, J. M. The International Registry on Hand and Composite Tissue allotransplantation. Clin. Transpl. , 247-253 (2011).
  3. Shores, J. T., Brandacher, G., Lee, W. A. Hand and Upper Extremity Transplantation: An Update of Outcomes in the Worldwide Experience. Plast. Reconstr. Surg. , (2014).
  4. Levi, D. M., et al. Transplantation of the abdominal wall. Lancet. 361, 2173-2176 (2003).
  5. Strome, M., et al. Laryngeal transplantation and 40-month follow-up. N.Engl.J. Med. 344, 1676-1679 (2001).
  6. Rose, K. G., Sesterhenn, K., Wustrow, F. Tracheal allotransplantation in man. Lancet. 1, 433 (1979).
  7. Hofmann, G. O., et al. Allogeneic vascularized transplantation of human femoral diaphyses and total knee joints--first clinical experiences. Transplant. Proc. 30, 2754-2761 (1998).
  8. Hu, W., et al. A preliminary report of penile transplantation. Eur. Urol. 50, 851-853 (2006).
  9. Brannstrom, M., et al. Livebirth after uterus transplantation. Lancet. , (2014).
  10. Sarhane, K. A., et al. Diagnosing skin rejection in vascularized composite allotransplantation: advances and challenges. Clin. Transplant. 28, 277-285 (2014).
  11. Schneeberger, S., Khalifian, S., Brandacher, G. Immunosuppression and monitoring of rejection in hand transplantation. Tech. Hand Up. Extrem. Surg. 17, 208-214 (2013).
  12. Lee, W. P., et al. Relative antigenicity of components of a vascularized limb allograft. Plast. Reconstr. Surg. 87, 401-411 (1991).
  13. Sucher, R., et al. Hemiface allotransplantation in the mouse. Plast. Reconstr. Surg. 129, 867-870 (2012).
  14. Ibrahim, Z., et al. A modified heterotopic swine hind limb transplant model for translational vascularized composite allotransplantation (VCA) research. J Vis Exp. , (2013).
  15. Oberhuber, R., et al. Murine cervical heart transplantation model using a modified cuff technique. J Vis Exp. , (2014).
  16. Sucher, R., et al. Mouse hind limb transplantation: a new composite tissue allotransplantation model using nonsuture supermicrosurgery. Transplantation. 90, 1374-1380 (2010).
  17. Maglione, M., et al. A novel technique for heterotopic vascularized pancreas transplantation in mice to assess ischemia reperfusion injury and graft pancreatitis. Surgery. 141, 682-689 (2007).
  18. Sucher, R., et al. Orthotopic hind-limb transplantation in rats. J Vis Exp. , (2010).
  19. Zou, Y., Brandacher, G., Margreiter, R., Steurer, W. Cervical heterotopic arterialized liver transplantation in the mouse. J. Surg. Res. 93, 97-100 (2000).
  20. Zhang, F., et al. Development of a mouse limb transplantation model. Microsurgery. 19, 209-213 (1999).
  21. Schneeberger, S., et al. Upper-extremity transplantation using a cell-based protocol to minimize immunosuppression. Ann. Surg. 257, 345-351 (2013).
  22. Azari, K., Brandacher, G. Vascularized composite allotransplantation. Curr Opin Organ Transplant. 18, 631-632 (2013).
  23. Pomahac, B., Gobble, R. M., Schneeberger, S. Facial and hand allotransplantation. Cold Spring Harb. Perspect. Med. 4, (2014).
  24. Chong, A. S., Alegre, M. L., Miller, M. L., Fairchild, R. L. Lessons and limits of mouse models. Cold Spring Harb. Perspect. Med. 3, a015495 (2013).
  25. Lin, C. H., et al. The neck as a preferred recipient site for vascularized composite allotransplantation in the mouse. Plast. Reconstr. Surg. 133, 133e-141e (2014).
  26. Shapiro, R. I., Cerra, F. B. A model for reimplantation and transplantation of a complex organ: the rat hind limb. J. Surg. Res. 24, 501-506 (1978).
  27. Leto Barone, A. A., et al. The gracilis myocutaneous free flap in swine: an advantageous preclinical model for vascularized composite allograft transplantation research. Microsurgery. 33, 51-55 (2013).
  28. Mathes, D. W., et al. A preclinical canine model for composite tissue transplantation. J. Reconstr. Microsurg. 26, 201-207 (2010).
  29. Barth, R. N., et al. Prolonged survival of composite facial allografts in non-human primates associated with posttransplant lymphoproliferative disorder. Transplantation. 88, 1242-1250 (2009).
  30. Brandacher, G., Grahammer, J., Sucher, R., Lee, W. P. Animal models for basic and translational research in reconstructive transplantation. Birth Defects Res C Embryo Today. 96, 39-50 (2012).
  31. Foster, R. D., Liu, T. Orthotopic hindlimb transplantation in the mouse. J. Reconstr. Microsurg. 19, 49 (2002).
  32. Tung, T. H., Mohanakumar, T., Mackinnon, S. E. Development of a Mouse Model for Heterotopic Limb and Composite-Tissue Transplantation. J. Reconstr. Microsurg. 17, 267-274 (2001).
  33. Zhang, F., Shi, D. Y., Kryger, Z., Moon, W. Development of a mouse limb transplantation model. Microsurgery. 19 (5), 209-213 (1999).
  34. Schneeberger, S., et al. Atypical acute rejection after hand transplantation. Am. J. Transplant. 8, 688-696 (2008).
  35. Mathes, D. W., et al. Stable mixed hematopoietic chimerism permits tolerance of vascularized composite allografts across a full major histocompatibility mismatch in swine. Transpl. Int. 27, 1086-1096 (2014).
  36. Yamada, Y., et al. Use of CTLA4Ig for induction of mixed chimerism and renal allograft tolerance in nonhuman primates. Am. J. Transplant. 14, 2704-2712 (2014).
  37. Sachs, D. H., Kawai, T., Sykes, M. Induction of tolerance through mixed chimerism. Cold Spring Harb. Perspect. Med. 4, a015529 (2014).
  38. Kawai, T., et al. HLA-mismatched renal transplantation without maintenance immunosuppression. N. Engl. J. Med. 358, 353-361 (2008).
  39. Kawai, T., Sachs, D. H. Tolerance induction: hematopoietic chimerism. Curr Opin Organ Transplant. 18, 402-407 (2013).
  40. Kawai, T., Sachs, D. H., Sykes, M., Cosimi, A. .B. HLA-mismatched renal transplantation without maintenance immunosuppression. N. Engl. J. Med. 368, 1850-1852 (2013).
  41. Leventhal, J., et al. Chimerism and tolerance without GVHD or engraftment syndrome in HLA-mismatched combined kidney and hematopoietic stem cell transplantation. Sci. Transl. Med. 4, 124-128 (2012).
  42. Cendales, L. C., et al. The Banff 2007 working classification of skin-containing composite tissue allograft pathology. Am. J. Transplant. 8, 1396-1400 (2008).

Tags

Tıp Sayı 108 Fare Vaskülarize Kompozit allotransplantasyon Hind Ekstremite nakli İmmünoloji Sigara sütür Manşet Tekniği
Fare Ortotopik Hind Ekstremite nakli
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Furtmüller, G. J., Oh, B.,… More

Furtmüller, G. J., Oh, B., Grahammer, J., Lin, C. H., Sucher, R., Fryer, M. L., Raimondi, G., Lee, W. P. A., Brandacher, G. Orthotopic Hind Limb Transplantation in the Mouse. J. Vis. Exp. (108), e53483, doi:10.3791/53483 (2016).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter