Protocol
Bu protokol, yerel insan araştırma etik komitesinin kuralları izler.
1. Hazırlık
- Böyle kan örneği gibi diğer prosedürler ile örtüşmemektedir böylece mikrosirkülatuar ölçümü programlayın. Yenidoğanlarda en iyi beslendikten sonra yapılır. Bu ajitasyon önler ve ölçüm kolaylaştıracaktır.
- Bir hemşire ya da ebeveyn desteklemek ve Yenidoğan Bireyselleştirilmiş Gelişimsel Bakım ve Değerlendirme Programı 12 prensiplerini kullanarak, muayene esnasında yenidoğan teselli katılır emin olun.
Not: Ölçümler tek bir kişi tarafından yapılabilir olsa da, son derece ikinci bir kişinin yardımı olması tavsiye edilir. Bir kamera tutan ve diğer bilgisayar ve yazılım çalışır iken yenidoğanda odaklanmıştır. Bizim tecrübelerimize göre, bu yüksek kaliteli görüntüler ve prosedür kısa süreli sonuçlanır. - Yenidoğan izinlerinin klinik durumu, koyarsanızyatar pozisyonda yenidoğan. Mikrosirkülasyonda görüntüleme yüzükoyun pozisyonda yapılabilir, ancak bu daha fazla beceri ve sabır gerektirir.
- (- 37.5 santigrat derece 36.5) erken bebeğin vücut ısısı uygun aralığında olduğundan emin olun.
2. Prosedür
- Inkübatör boyunca cihazı takın. Inkübatör doğru yükseklikte olduğundan emin olun.
- Kameradaki tek kullanımlık kap koyun.
- Probunun ucu üzerinde jel, petrol ya da tuzlu su uygulamak; Bu prob ve cilt arasındaki teması pürüzsüz yardımcı olacaktır.
- Bebekler üst kol ventromedial tarafındaki kamera yerleştirin. Odak-eserler önlemek için, prob cilde dik olduğundan emin olun. Bu bebekler kol yeniden konumlandırılması gerekebilir.
Not: Üst kol ventromedial tarafı deri mikrodolaşımı ölçmek için birincil konumdur. Bu konum küçük lanugo saçları vardır ve bu nedenle daha az eğilimli eserler etmektir. Bu en kolay ulaşılırHasta sırt üstü yatar pozisyonda konumlandırılmıştır. - Prosedürün toplam uzunluğu en aza indirmek için, en az eserler ile yerini ararken (Şekil 3) odak derinliği optimum bularak zaman kazanmak.
Not: odak derinliği, öncelikle doğum sonrası yaş yerine gebelik yaşı daha bağlıdır. 80 mikron - yaşamın ilk haftasında odak ortalama derinliği 0'dır. 1 arası 200 mikron - - postnatal yaş 4 hafta (Şekil 2) Bundan sonra, cildin olgunlaşması nedeniyle, odak derinliği hızla 80 ortalama değerleri ile artar. Doğumda 160 mikron - terim doğan yenidoğanlarda odak ortalama derinliği 80. - Hareket eserler önlemek için prob stabilize. Bunu yapmak için, inkübatör penceresinde dirsek ve yenidoğanda yanında bilek dinlenme. Alternatif olarak, bir yastık üzerinde yenidoğanda yanında probu yerleştirin.
- Kamerayı sağlayarak basınç eserler kaçının, sadece cilt ile ufak temas var. Basınç eser r olabilir,görüntü yakalama sırasında ecognized orada damarlarda geri ve ileri akışı veya büyük damarlar ise küçük damarlarda iyi akış varken perfüze olmayan varsa. Ayrıca akım paterni tam ekran boyunca aynı ise, basınç eserler sakının.
- 5 saniyelik bir asgari süre için Video kaydetme.
- Başarılı bir yakalanmasından sonra, üst kol üzerinde başka bir noktaya kamera taşımak.
Not: Toplam 5 yakalamak için tavsiye edilir - Bazı eserler yalnızca söz konusu video analizi için kullanılabilir olmadığı anlamına gelir çevrimdışı analiz, bedelleri olarak, 5 farklı yerlerde - 3 10 videolar. - Yavaşça küçük bir gazlı bez ile deriden jel, yağ ya da tuzlu su çıkarmak.
3. Çevrimdışı Analizi
- Analizini engellemektedir önemli bir hareket varsa video kırpmak. "Araçlar" bölümüne gidin ve tuşuna 'Editör' kullanın. Analiz için uygun çerçeve aralığını seçin ve 'Crop Video' b tıklayınbasıp bırakın. Not: Hareket alanı görünümünde 13 ½ içinde ise Videoları kabul edilir.
- Kırpılmış bir video seçin ve stabilize. "Araçlar" bölümüne gidin ve tuşuna 'Analiz' kullanın. 'Stabilize' butonuna tıklayın.
Not: Otomatik analiz yapılabilir önce tüm filmler stabilize edilmelidir. - Stabilize videoyu seçin. Bölüm 'Analiz' gidin ve 'Algıla' düğmesini tıklatın. Seçenekleri 'Kılcal' ve 'Gemiler' vurgulanır emin olun.
- Algılama (Şekil 4) sonra, tam bir mikrosirkülatuar raporu için 'CNA' veya 'De Backer' düğmesine tıklayın. Bu rapor en çok kullanılan sonuç toplam damar yoğunluğu (TVD) gibi parametreleri, perfüze damar yoğunluğu (PVD) ve perfüze damarları (PPV) oranını içermektedir.
Not: Alternatif olarak, videolar çevrimdışı elle analiz edilecek ihraç edilebilir. Bu seçenek bölüm 'Araçlar' bulunabilir. Seseçeneği 'Export' seçebiliyor- ve 'AVA ihracat' düğmesine tıklayın.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Hala Şekil 1 ve 2 temsilcisi, yüksek kaliteli MI videoları görüntüler. Bu örnekler, doğum sonrası yaşlı (Şekil 2) bir gün 1 (Şekil 1) ve gün 28 arasında aynı bebeklerde cilt kalınlığı farkı göstermektedir. 1. gün, mikro damarların ve eserler minimal varlığı parlak aydınlatma, yeterli odak vardır. Günde 28 nedeniyle kalın cilde mikro damarları ve eserler odaklanmak arasındaki doğru dengeyi bulmak daha zordur. Bu kararlılık, süresi Not ve basınç eserler bunlar hala görüntülere karar alınamaz. Bu görüntülerin elde esnasında veya çevrimdışı analizden önce dikkat edilmelidir.
Erken Bebek Resim 1. MI 24 Hafta Gebelik Yaşı, Gün 1. Transkutanöz M24 haftalık gebelik haftasında doğmuş bir bebeğin ben. Bebeğin doğum sonrası yaşı 1 gündür. Odak kullanılan derinliği 40 mm. Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.
Şekil 2. MI Erken Bebek 24 Haftalık Gebelik Yaşı, 24 haftalık bir gebelik haftasında doğmuş bir bebeğin Günü 28. Transkutanöz MI. Bebeğin doğum sonrası yaşı 28 gündür. Odak derinliği kullanılan 160 mm. Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.
3. Farklılıklar Şekil Odak Depth. aynı bölgede bu iki görüntü yeterli odak derinliği önemini vurgulamaktadır. Yeterli odak (sağda) ile karşılaştırıldığında damar görüş kaybı yetersiz odak (solda) ile sonuçlanır. Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.
Şekil Otomatik Çevrim Analizi 4. Sonuçları. Bu rakam, otomatik çevrimdışı analiz sonuçlarını gösterir. Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Bu yazıda tarif ve prematüre yenidoğanlarda Transkütan mikrosirkülatuar görüntüleme yaklaşımı göstermektedir. Tekrarlanabilirlik ve saati ve yeni teknikler öğrenme emek yoğun niteliği: Bu yöntemi görselleştirme araştırmacılar araştırma büyük zorluklardan iki üstesinden yardımcı olacaktır. Bu teknik bir non-invaziv bir şekilde erken doğan bebeklerde periferik mikrodolaşımında yararlı bilgiler sağlayabilir. Klinisyene yardımcı olabilecek Seri ölçümler terapötik müdahalelerin etkilerini değerlendirir. Mikrosirkülasyon oksijen taşıma zincirinin son adım oluşur alandır. Gözlem çalışmaları mikrosirkulasyonu zamanla bozulma ve bakteriyel enfeksiyonların 14 varlığı arasında bir ilişki olduğunu göstermiştir. Periferik mikrodolaşımında bozulma, erken doğan bebeklerde sepsis ilk işaretlerinden biri olarak, genellikle periferik mikrosirkülasyon gelişimini tahmin yardımcı olabilir sürülmüştürsepsis.
Görüntülerin kalitesi esas operatörün becerilerine bağlıdır. En son kamera cihazları daha iyi teknik özelliklere ve donanım sağlamasına rağmen, bu ikincil öneme devam etmektedir. Operatörler düzgün mikrosirkulasyonu görüntüleme konusunda eğitilmelidir. Onlar 2006 15 ve Massey ark 13 tarafından geliştirilen kalite kriterlerine Amsterdam'da düzenlenen yuvarlak masa toplantısında tavsiyeleri aşina olmalıdır. Bu altı kriter (aydınlatma, süresi, odak, içerik, stabilite, basınç) yüksek kaliteli ve güvenilir verilerin temelidir. Deneyimsiz operatörler sıkça tanıyan 16 eser basınç meydana başarısız muhtemeldir. Bu kalite standartları ve öneriler erişkinlerde dilaltı MI ölçümü için kaleme alınmış ve doğrudan erken doğan bebeklerde deri MI ölçümleri çıkarım edilemeyeceğini ancak unutmayın. Süresi ve içeriği kalite ölçütlerigerçekleştirmek için, bu nedenle daha zordur.
Ayrıca, son derece iki operatörle ölçümler yapmak ve katılmak için bir hemşire veya ebeveyn sormak tavsiye edilir. Kamera sabit tutulmalı, basınç eserler yazılım çalıştırılmalıdır ve bebeğin esenliği göz önüne alınmalıdır, kaçınılmalıdır. Bebek çok hareket, özellikle bu bir operatör için çok fazla. Bu bir kişinin kamera idare ve ölçüm alanı ve başka bir kişiye odaklanmak yazılımı çalıştırmak ve bebeğin vital bulguları kontrol etmesi dolayısıyla daha iyidir. Doğal olarak, MI teknik yönlerini yanı sıra, (kritik hasta) erken yenidoğan ele deneyim operatörleri için çok önemlidir.
Onun non-invaziv bir karakter olmasına rağmen, MI hala potansiyel bir yük ve riskler taşır. Kuvöz ve böylece vücut ısısı çok fazla düştüğünü önlemek için minimum ölçümlerin süresini sınırlandırın. Daima kamerada atılabilir koruma kapağını uygulamakölçümlerden önce. Bu kapağın işlevi iki yönlüdür: Bu prob ucunun olası ısınma cildi korur ve bakteri bulaşmasını önlemek için yapay bariyer görevi görür. Buna ek olarak, MI ekipmanı düzenli olarak dezenfekte edilmelidir.
Ayrıca, cilt üzerinde jel veya yağ sadece küçük bir miktar uygulayın ve nazikçe ölçümden sonra çıkarın. Yanlış ise, petrol ve tedavi fototerapi karma ciltler üzerinde yıkıcı etkileri olabilir. Çoğunlukla bebekler pek ölçümlere tepki olsa da, kardiyo-solunum istikrarsızlık göz ardı edilemez. Bu bir ebeveyn veya hemşire tarafından desteklenen bebek tavsiye ederiz nedenidir.
Veri toplama sonra, videoları çevrimdışı analiz standart bir şekilde yapılmalıdır. Ticari yazılım otomatik kurallarına 15'e göre MI videoları analiz için kullanılabilir. Manuel analiz üç basamaktan oluşur. İlk olarak, kontrast ap olabilir Optimal kontrast ulaşmak için uğraşıyorlardı. İkincisi, videolar stabilize edilmelidir. Bu adım, ölçümler sırasında istikrarın önemine getirecektir. Ufak sürüklenme analiz için bir video kullanılamaz hale getirebilir. Üçüncü olarak, kaplar çizilmelidir ve akış kategorize gerekir. Bu son adım yoksul arası gözlemci riski yüksek 17 değişkenliği taşıdığını unutmayın. Manuel çevrimdışı analiz nedenle sadece eğitimli araştırmacılar tarafından yapılmalıdır. Sonuç ölçütleri bildirdiği için iki yöntem vardır. Kılcal ağ analizi geleneksel yöntem (CNA) ölçülen yüzey alanı (mm / mm 2) bölünmesiyle damarların toplam uzunluğu yansıtır. Seçenek olarak ise, De Backer ölçeği (DBS) daha az zaman kullanılabilir. Bu skorla üç eşit mesafede yatay ve üç eşit uzaklıkta dikey çizgiler ekranda çizilir. Gemi yoğunluğu hatları (n / mm) 'nin toplam uzunluğuna bölünmesiyle hatları geçen kapların sayısı hesaplanabilir.
_content "> referans değerleri kurmak için karmaşık yapar mikrodolaşımında mikrodolaşım. heterojenlik araştırma alanına dezavantajları vardır. Bu nedenle, araştırmanın en gruplar arasında gözlemsel çalışmalar veya karşılaştırmalar bulunmaktadır. mikrosirkulasyonu videoları ve subjektif insan müdahalesi oldukça karmaşık değerlendirme . zavallı tekrarlanabilirlik (Van den Berg, 2015 17) olasılığını artırır O elde videoları yöntemi standardize olması önemlidir.Yakın gelecek için, teknik gelişmeler deri MI araştırma artıracaktır. Bir örnek mikrodamarlar nispeten subjektif insan değerlendirmesini yerini ve böylece arası gözlemci değişkenlik ekarte edecek video görüntüleri, bilgisayar analizi otomatiktir. Araştırmanın bu alanı standardize etmek iyi bir örnek seri aynı yerde mikro dolaşımı ölçmek kablosuz görüntüleme sensörleri kullanımıdır. Bu deri MI yapacakdaha az operatör bağımlı.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Yazarlar ifşa hiçbir şey yok.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Cytocam | Braedius | http://www.braedius.com/magnoliaPublic/braedius/products.html | Other well known handheld microscopes to visualize the microcirculation are MicroScan (Microvision Medical) using SDF technique or the CytoScan (CytoMetrics) using OPS technique |
| Disposable Lens Cover | Glycocheck | http://www.glycocheck.com/lenscovers.php | |
| CCTools | Braedius | http://www.braedius.com/magnoliaPublic/braedius/products.html | Another well known offline analysis programme is AVA (Microvision medical). |
References
- Groner, W., et al. Orthogonal polarization spectral imaging: a new method for study of the microcirculation. Nat Med. 5 (10), 1209-1212 (1999).
- Goedhart, P. T., Khalilzada, M., Bezemer, R., Merza, J., Ince, C. Sidestream Dark Field (SDF) imaging: a novel stroboscopic LED ring-based imaging modality for clinical assessment of the microcirculation. Opt Express. 15 (23), 15101-15114 (2007).
- Sherman, H., Klausner, S., Cook, W. A. Incident dark-field illumination: a new method for microcirculatory study. Angiology. 22 (5), 295-303 (1971).
- Trzeciak, S., et al. Early microcirculatory perfusion derangements in patients with severe sepsis and septic shock: relationship to hemodynamics, oxygen transport, and survival. Ann Emerg Med. 49 (1), 88-98 (2007).
- Sakr, Y., Dubois, M. J., De Backer, D., Creteur, J., Vincent, J. L. Persistent microcirculatory alterations are associated with organ failure and death in patients with septic shock. Crit Care Med. 32 (9), 1825-1831 (2004).
- De Backer, D., et al. Microcirculatory alterations in patients with severe sepsis: impact of time of assessment and relationship with outcome. Crit Care Med. 41 (3), 791-799 (2013).
- Buijs, E. A., et al. Early microcirculatory impairment during therapeutic hypothermia is associated with poor outcome in post-cardiac arrest children: A prospective observational cohort study. Resuscitation. , (2013).
- Genzel-Boroviczeny, O., Christ, F., Glas, V. Blood transfusion increases functional capillary density in the skin of anemic preterm infants. Pediatr Res. 56 (5), 751-755 (2004).
- Ergenekon, E., et al. Peripheral microcirculation is affected during therapeutic hypothermia in newborns. Arch Dis Child Fetal Neonatal Ed. 98 (2), F155-F157 (2013).
- Schwepcke, A., Weber, F. D., Mormanova, Z., Cepissak, B., Genzel-Boroviczeny, O. Microcirculatory mechanisms in postnatal hypotension affecting premature infants. Pediatr Res. , (2013).
- van Elteren, H. A., Ince, C., Tibboel, D., Reiss, I. K., de Jonge, R. C. Cutaneous microcirculation in preterm neonates: comparison between sidestream dark field (SDF) and incident dark field (IDF) imaging. J Clin Monit Comput. , (2015).
- Als, H., et al. Individualized Behavioral and Environmental Care for the Very-Low-Birth-Weight Preterm Infant at High-Risk for Bronchopulmonary Dysplasia - Neonatal Intensive-Care Unit and Developmental Outcome. Pediatrics. 78 (6), 1123-1132 (1986).
- Massey, M. J., et al. The microcirculation image quality score: development and preliminary evaluation of a proposed approach to grading quality of image acquisition for bedside videomicroscopy. J Crit Care. 28 (6), 913-917 (2013).
- Weidlich, K., et al. Changes in microcirculation as early markers for infection in preterm infants--an observational prospective study. Pediatr Res. 66 (4), 461-465 (2009).
- De Backer, D., et al. How to evaluate the microcirculation: report of a round table conference. Crit Care. 11 (5), R101 (2007).
- Sallisalmi, M., Oksala, N., Pettila, V., Tenhunen, J. Evaluation of sublingual microcirculatory blood flow in the critically ill. Acta Anaesthesiol Scand. 56 (3), 298-306 (2012).
- van den Berg, V. J., et al. Reproducibility of microvascular vessel density analysis in Sidestream dark-field-derived images of healthy term newborns. Microcirculation. 22 (1), 37-43 (2015).
