Protocol
Este protocolo sigue las directrices del comité de ética de la investigación humanos local.
1. Preparación
- Programar la medición de la microcirculación de modo que no coincide con otros procedimientos tales como el muestreo de sangre. En recién nacidos a término que se realiza mejor después de comer. Esto evita que la agitación y facilitará la medición.
- Asegúrese de que una enfermera o un padre asiste para apoyar y consolar al neonato durante el examen, utilizando los principios del Programa de Evaluación del recién nacido 12 Individualizado de Atención y Desarrollo.
Nota: Aunque las mediciones pueden ser realizadas por una sola persona, es muy recomendable contar con una segunda persona ayudar. Uno sostiene la cámara y se centra en el recién nacido, mientras que la otra opera la computadora y el software. En nuestra experiencia, esto se traduce en imágenes de mayor calidad y una menor duración del procedimiento. - Si la condición clínica de los permisos de neonatos, coloque elneonato en posición supina. Microcirculatoria de formación de imágenes se puede realizar en posición prona, pero esto requiere más habilidad y paciencia.
- Asegúrese de que la temperatura del cuerpo del niño prematuro está dentro del rango apropiado (36.5 - 37.5 grados Celsius).
2. Procedimiento
- Instale el dispositivo a lo largo de la incubadora. Asegúrese de que la incubadora está a la altura adecuada.
- Ponga la tapa desechable en la cámara.
- Aplicar gel, aceite o solución salina en la punta de la sonda; esto ayudará a suavizar el contacto entre la sonda y la piel.
- Coloque la cámara en la parte ventromedial del lactantes parte superior del brazo. Para evitar enfoque artefactos, asegúrese de que la sonda es perpendicular a la piel. Esto puede requerir el reposicionamiento del brazo de los niños.
Nota: El lado ventromedial del brazo superior es la ubicación principal para medir la microcirculación cutánea. Este lugar tiene poco pelo lanugo y por lo tanto menos propenso a objetos es. Se llega a él con mayor facilidadsi el paciente se coloca en posición supina. - Para reducir al mínimo la longitud total del procedimiento, ganar tiempo mediante la búsqueda de la profundidad óptima de enfoque (Figura 3), mientras que la búsqueda de la ubicación con menor cantidad de los artefactos.
Nota: La profundidad de enfoque depende principalmente de la edad postnatal en lugar de la edad gestacional. La profundidad media de enfoque en la primera semana de vida es 0-80 micras. De aquí en adelante, debido a la maduración de la piel, la profundidad de enfoque aumenta rápidamente con valores promedio de 80 - 200 micras entre 1 - 4 semanas de edad postnatal (Figura 2). En los neonatos nacidos a término la profundidad media de enfoque es 80 a 160 micras, con el nacimiento. - Estabilizar la sonda para evitar artefactos de movimiento. Para ello, descansar el codo sobre la ventana de la incubadora y la muñeca al lado del recién nacido. Alternativamente, la posición de la sonda junto con el recién nacido sobre una almohada.
- Evitar artefactos de presión dejando que la cámara sólo tiene el más mínimo contacto con la piel. Artefactos de presión pueden ser recognized durante la captura de imágenes si hay flujo de ida y vuelta en los vasos o si los grandes buques no son perfundidos-mientras que hay un buen flujo en los vasos pequeños. Además, si el patrón de flujo es idéntico en toda la pantalla, tenga cuidado con los artefactos de presión.
- Grabar videos de una duración mínima de 5 seg.
- Después de una captura exitosa, mover la cámara a otro punto en la parte superior del brazo.
Nota: Se recomienda capturar un total de 5 - 10 vídeos 3 - 5 lugares diferentes, como algunos artefactos sólo se reconocen en el análisis fuera de línea, lo que significa que el vídeo en cuestión no se puede utilizar para el análisis. - Retire suavemente el gel, aceite o solución salina de la piel con una pequeña gasa.
3. Análisis Desconectado
- Recortar el vídeo si hay un movimiento significativo que impide el análisis. Vaya a la sección "Herramientas" y utilice el botón 'Editar'. Seleccione el intervalo de trama elegibles para el análisis y haga clic en el 'Recortar Video' button. Nota: Los videos son aceptables si el movimiento está dentro de la mitad de la vista de campo 13.
- Seleccione el vídeo recortada y estabilizarlo. Vaya a la sección "Herramientas" y utilice el botón "Análisis". Haga clic en el botón "Estabilizar '.
Nota: Todas las películas deben estabilizarse antes de que pueda llevarse a cabo el análisis automático. - Seleccione el vídeo estabilizado. Vaya a la sección "Análisis" y haga clic en el 'Detect' botón. Asegúrese de que se resaltan las opciones 'Capilares' y 'buques'.
- Después de la detección (Figura 4), haga clic en el botón 'De Backer' 'CNA' o para un informe completo de la microcirculación. Este informe incluye los parámetros más utilizados de resultado como la densidad total de buques (TVD), densidad de los vasos perfundidos (PVD) y proporción de vasos perfundidos (PPV).
Nota: Como alternativa, los videos pueden ser exportados fuera de línea para ser analizados de forma manual. Esta opción se puede encontrar en la sección 'Herramientas'. Senar la opción "Exportar" y haga clic en el botón 'AVA exportación ».
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Representative Results
Las figuras 1 y 2 muestran representante de imágenes fijas de vídeos de alta calidad MI. Estos ejemplos demuestran la diferencia en el grosor de la piel en los mismos lactantes entre 1 día (Figura 1) y 28 días (Figura 2) de la edad postnatal. El día 1, hay una iluminación brillante, el enfoque adecuado para con los vasos de micro y una mínima presencia de artefactos. El día 28 es más difícil encontrar el equilibrio adecuado entre el foco en los vasos micro y artefactos debido a la piel más gruesa. Tenga en cuenta que la estabilidad, la duración y los artefactos de presión no pueden ser juzgados por estas imágenes fijas. Esto debe tenerse en cuenta durante la adquisición de las imágenes o antes análisis fuera de línea.
Figura 1. MI del prematuro infantil 24 semanas de edad gestacional, Día 1. transcutánea MI de un bebé nacido a una edad gestacional de 24 semanas. La edad postnatal del bebé es 1 día. La profundidad de foco utilizado es de 40 micras. Por favor haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.
Figura 2. MI del prematuro infantil 24 semanas de edad gestacional, Día 28. transcutánea MI de un bebé nacido a una edad gestacional de 24 semanas. La edad postnatal del bebé es de 28 días. La profundidad de foco utilizado es de 160 micras. Por favor haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.
Figura 3. Diferencias es Focus Depth. Estas dos imágenes de la misma área exacta destacan la importancia de una adecuada profundidad de foco. De enfoque (izquierda) resultados inadecuados en la pérdida de visibilidad buque en comparación con el enfoque adecuado (derecha). Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.
Figura 4. Resultados de análisis fuera de línea automático. Esta figura muestra los resultados del análisis fuera de línea automático. Por favor haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.
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Discussion
En este manuscrito se describen y demuestran el enfoque para obtener imágenes de la microcirculación transcutánea en los recién nacidos prematuros. Visualizar este método ayudará a los investigadores a superar dos de los mayores retos en la investigación: la reproducibilidad y el tiempo y la naturaleza de trabajo intensivo de aprendizaje de nuevas técnicas. Esta técnica puede proporcionar información útil de la microcirculación periférica en recién nacidos prematuros de una manera no invasiva. Las mediciones seriadas pueden ayudar a los médicos a evaluar los efectos de las intervenciones terapéuticas. La microcirculación es la zona donde se produce el paso final de la cadena de transporte de oxígeno. Los estudios de observación han demostrado una relación entre el deterioro de la microcirculación con el tiempo y la presencia de infecciones bacterianas 14. Como deterioro de la microcirculación periférica es uno de los primeros signos de sepsis en neonatos prematuros, en general se formuló la hipótesis de que la microcirculación periférica puede ayudar a predecir el desarrollo desepticemia.
La calidad de las imágenes depende principalmente de las habilidades del operador. Aunque los últimos dispositivos de cámaras proveen mejores especificaciones técnicas y hardware, esto sigue siendo de importancia secundaria. Los operadores deben estar debidamente capacitados en las imágenes de la microcirculación. Ellos deben estar familiarizados con las recomendaciones de la conferencia de mesa redonda celebrada en Amsterdam en 2006 15 y con los criterios de calidad desarrollados por Massey et al 13. Estos seis criterios (iluminación, la duración, el enfoque, el contenido, la estabilidad, la presión) son la base de alta calidad y datos confiables. Operadores inexpertos son propensos a fallar en reconocer con frecuencia se producen artefactos de presión 16. Tenga en cuenta sin embargo, que estos estándares y recomendaciones de calidad se han redactado para la medición MI sublingual en adultos y no pueden ser extrapolados directamente a mediciones MI cutáneas en recién nacidos prematuros. Los criterios de calidad de la duración y el contenidoson por lo tanto más difícil de lograr.
También, es muy recomendable para realizar las mediciones con dos operadores y pedir una enfermera o de los padres a asistir. La cámara debe mantenerse constante, artefactos de presión deben ser evitados, el software debe ser operado y el bienestar del niño debe ser considerado. Sobre todo si el bebé se mueve mucho, esto es demasiado para un solo operador. Por lo tanto, es mejor tener una persona manejar la cámara y se centran en el área de medición y otra persona operar el software y comprobar los signos vitales del bebé. Naturalmente, además de los aspectos técnicos de la MI, la experiencia en el manejo (críticamente enfermos) recién nacidos prematuros es esencial para los operadores.
A pesar de su carácter no invasivo, MI todavía lleva una carga y los riesgos potenciales. Limitar la duración de las mediciones a un mínimo para evitar que la incubadora y por lo tanto la temperatura corporal cae demasiado. Aplique siempre una tapa protectora desechable en la cámaraantes de las mediciones. La función de esta tapa es doble: Protege la piel contra el calentamiento potencial de la punta de la sonda y sirve como una barrera artificial para prevenir la transmisión de bacterias. Además, el equipo de MI debe desinfectarse con regularidad.
Además, aplicar un poco de gel o cantidad de aceite en la piel y remover con cuidado después de la medición. Si mal utilizado, la combinación de aceite y la fototerapia terapéutico puede tener efectos devastadores en la piel. Aunque en su mayoría los niños casi no reaccionan a las mediciones, la inestabilidad cardiorrespiratoria no puede excluirse. Esta es la razón por la cual se recomienda tener el bebé con el apoyo de uno de los padres o la enfermera.
Después de la adquisición de datos, análisis fuera de línea de los videos se debe realizar de una manera estandarizada. El software comercial está disponible para analizar automáticamente los vídeos MI según las directrices 15. El análisis manual consta de tres pasos. En primer lugar, la mejora del contraste puede ser ap plegados con el fin de alcanzar el contraste óptimo. En segundo lugar, los videos deben ser estabilizados. Este paso será poner de manifiesto la importancia de la estabilidad durante las mediciones. Para la más mínima desviación puede hacer un video inutilizable para su análisis. En tercer lugar, los buques deben redactarse y el flujo deben ser categorizados. Tenga en cuenta que este paso final conlleva un alto riesgo de mala inter observador Variabilidad 17. Por lo tanto, el análisis fuera de línea manual se debe realizar solamente por investigadores entrenados. Hay dos métodos para informar sobre las medidas de resultado. El método convencional de análisis de la red capilar (CNA) refleja la longitud total de los buques dividido por el área de superficie medida (mm / mm 2). Alternativamente, el menos tiempo De Backer Score (DBS) se puede utilizar. En esta partitura, tres horizontales equidistantes y tres líneas verticales equidistantes se dibujan en la pantalla. Densidad de los vasos puede ser calculada como el número de buques que cruzan las líneas dividido por la longitud total de las líneas (N / mm).
_content "> Hay inconvenientes en el campo de la investigación de la microcirculación. La heterogeneidad de la microcirculación hace es complicado de establecer valores de referencia. Por lo tanto, la mayor parte de la investigación son los estudios observacionales o comparaciones entre los grupos. La evaluación bastante complejo de videos de la microcirculación y la interferencia humana subjetiva aumenta la posibilidad de una mala reproducibilidad (Van den Berg, 2015 17). Por eso es importante que el método de obtención de los vídeos ha sido estandarizada.Para un futuro próximo, los avances técnicos van a mejorar la investigación en cutánea MI. Un ejemplo es automatizado análisis informático de las imágenes de vídeo, que sustituirán a la evaluación humana relativamente subjetiva de microvasos y con ello descartar entre variabilidad del observador. Un buen ejemplo de estandarizar este campo de investigación es el uso de sensores de imagen inalámbricas, que miden la microcirculación en serie en la misma ubicación exacta. Esto hará que cutánea MImenos dependiente del operador.
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Disclosures
Los autores no tienen nada que revelar.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Cytocam | Braedius | http://www.braedius.com/magnoliaPublic/braedius/products.html | Other well known handheld microscopes to visualize the microcirculation are MicroScan (Microvision Medical) using SDF technique or the CytoScan (CytoMetrics) using OPS technique |
| Disposable Lens Cover | Glycocheck | http://www.glycocheck.com/lenscovers.php | |
| CCTools | Braedius | http://www.braedius.com/magnoliaPublic/braedius/products.html | Another well known offline analysis programme is AVA (Microvision medical). |
References
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