Summary
Artrose (OA) eller degenerative joint sykdom, er en ødeleggende tilstand som er forbundet med smerter som fortsatt bare delvis kontrollert av tilgjengelige smertestillende. Dyremodeller blir utviklet for å forbedre vår forståelse av OA-relaterte smertemekanismer. Her beskriver vi metodikken for monoiodoacetate modell av OA smerte i musen.
Abstract
En viktig symptom på pasienter med artrose (OA) er smerte som er utløst av perifere samt sentrale endringer innenfor smerte veier. De nåværende behandlinger for OA smerte som NSAIDS eller opiater er verken tilstrekkelig effektive eller blottet for skadelige bivirkninger. Dyremodeller av OA blir utviklet for å forbedre vår forståelse av OA-relaterte smertemekanismer og definere nye farmakologiske mål for terapi. For tiden tilgjengelige modeller av OA i gnagere omfatter kirurgiske og kjemiske intervensjoner i en kneleddet. Den monoiodoacetate (MIA) modell har blitt en standard for modellering felles avbrudd i OA i både rotter og mus. Modellen, som er enklere å utføre i rotte, innebærer injeksjon av MIA i et kneledd som induserer rask smerte-lignende responser i den ipsilaterale lem, hvis nivå kan kontrolleres ved injeksjon av forskjellige doser. Intraartikulær injeksjon av MIA forstyrrer chondrocyttransplantasjon glykolyse ved å hemme glyceraldehyd-3-fosfatase-dehydrogenase og resulterer i kondrocytt død, neovaskularisering, subkondrale ben-nekrose og sammenbrudd, samt betennelse. De morfologiske endringer av artikulære brusk og ben avbrudd er representative for noen aspekter av pasientens patologi. Sammen med leddskade, MIA injeksjon induserer referert mekanisk følsomhet i ipsilaterale hind labb og vektbærende underskudd som er målbare og kvantifiserbare. Disse adferdsendringer ligner noen av symptomene rapportert av pasientpopulasjonen, for derved å validere MIA injeksjon i kneet som et nyttig og relevant preklinisk modell av OA smerte.
Målet med denne artikkelen er å beskrive metodikken for intraartikulære injeksjoner av MIA og atferds opptak av den tilhørende utvikling av overfølsomhet med tanke på å fremheve de nødvendige skritt for å gi konsistente og pålitelige opptak.
Introduction
Klinisk, osteoartritt (OA), eller degenerative leddsykdommer, er en smertefull og svekkende tilstand kjennetegnet ved et progressivt tap av leddbrusk, mild inflammasjon av vev i og rundt ledd, og noen ganger dannelse av osteophytes og bein cyster. Pasienter med OA rapporterer vedvarende smerter en og vise økt følsomhet for trykk og skadelige stimuli i leddgikt felles 2-4. I dag er det ingen kur for OA med tilgjengelige terapeutiske tilnærminger og analgetika er foreskrevet for å lindre smerter forbundet med denne tilstanden, med en viss grad av suksess fem. Men fortsatt OA smerte blir utviklet en klinisk emisjons- og dyremodeller av OA å forbedre vår forståelse av OA-relaterte smertemekanismer og avsløre nye mål for terapi.
Det er flere dyremodeller av OA tilgjengelig med forskjellige egenskaper seks. Kirurgiske metoder, som f.eks fremrekorsbånd tran, kan utnyttes. Men de omfatter dyktige kirurgiske inngrep og er hovedsakelig utført i rotte, mens destabilisering av medial menisk (DMM) anvendes i musen. Spontan utvikling av OA forekommer i marsvin og spontan felles degenerering er blitt rapportert i C57 svarte mus fra 3 til 16 måneders alder 7,8. Spontane OA modeller har ikke innebære noen intervensjon for å indusere tilstand, men de har iboende variabilitet, og som sådan, medføre større tall og koster 9,10. Kjemisk indusert modeller, på den annen side, krever mye mindre invasive prosedyrer enn kirurgiske modeller, og som sådan, er enklere å implementere og tillater studiet av OA-lesjoner på forskjellige stadier. Disse modellene har en enkel injeksjoner i kneet av inflammatoriske midler, immuntoksiner, collage, papain eller monoiodoacetate, noe som kan være giftig hvis de unnslippe felles plass. Av alle kjemiske modeller av OA, er MIA den mest brukte, particularly å teste effekten av farmakologiske stoffer til å behandle smerte, som denne modellen genererer en reproduserbar, robust og rask smerte-lignende fenotype som kan graderes ved å endre MIA dosering 11-15.
Intraartikulær injeksjon av MIA hos gnagere reproduserer OA-lignende lesjoner og funksjonssvikt som kan analyseres og kvantifiseres. MIA er en inhibitor av glyseraldehyd-3-fosfatase, forstyrre cellulær glykolyse og til slutt resulterer i celle-død 16,17. Intraartikulær injeksjon av MIA fører chondrocyttransplantasjon celledød, som fører til brusk degenerasjon og påfølgende subchondral bein endringer som for eksempel utseende av bein osteofytter 18,19.
Som nytten av MIA i rotte har blitt beskrevet før 20, i denne artikkelen fokuserer vi på metodikken i MIA-indusert OA i mus som denne modellen blir i økende grad brukt med tilgjengeligheten av knock-out mus. Vi beskriver en prosedyre for injecsjon av svært små volumer i kneet og metoder for måling av følsomhet for skadelige og ikke-skadelige stimuli i baklemmene.
Fordelingen av metodikken vil bidra til å redusere variabilitet, og som sådan, raffinere modellen og redusere antall dyr som trengs for studien.
Protocol
Prosedyrer som involverer dyr fag har blitt godkjent av den etiske komiteen ved Kings College London og er i samsvar med britiske hjemmekontoret forskriften (Dyr vitenskapelige prosedyrer Act 1986).
1. intraartikulær injeksjon av Monoiodoacetate i Knee
- Hus 8 -. 10 uker gamle mus i grupper på fem under ett 12 timers lys / mørke syklus (lysene på ved 7:00) med mat og vann ad libitum La musene akklimatisere for en uke før du starter eksperimentet.
- Tilfeldig og bur mus i grupper på 5. Bruk dyrenumre som koder til blind eksperimentator til behandlinger. Bruk kroppsvekt som parametere for randomisering.
- På dagen for injeksjon, ferskt fremstille oppløsningen av monoiodoacetate i sterilt saltvann (0,9% NaCl) ved de ønskede konsentrasjoner. Bruk sterilt saltvann til injeksjon i en separat gruppe av kontrollmus. Den høyeste anbefalte dosen av MIA er 1 mg i 10 mL.
Forsiktig: Monoiodoacetate er very giftig. Derfor er det anbefalt at hansker og masken brukes ved håndtering av pulver og fremstilling av oppløsningen. Oppløsningen bør være sterilfiltrert med et 0,22 um filter. - Bedøve mus ved hjelp av et anestesi vogn ved først å plassere dem i et kammer å levere 2% isofluran i O 2 blanding (strømningshastighet 1,5 l / min) og deretter overføre mus til nesekonusen delen, som også leverer den 2% isofluran-O 2 blanding , og som sådan, opprett anestesi under injeksjon. Plasser dyrlege salve på øynene for å unngå deres uttørking mens under anestesi. Bruk kirurgisk kjole, hansker og maske mens du utfører injeksjonsprosedyren.
- Bekreft anestesi ved å sjekke dyrets manglende respons på en klype stimulans på bakpotene.
- Når dyret er under narkose, legg den på ryggen. Trim og tørk området rundt kneleddet med alkohol. Povidon-jod, eller klorheksidin kan anvendes i tillegg feller desinfeksjon. Patellarsenen (hvit linje under patella) blir synlig.
- For å stabilisere injeksjonsstedet, holde kneet fremdeles, i en bøyd stilling, ved å plassere pekefingeren under kneleddet og tommelen over den fremre overflate av ankelleddet. Joint preferanse er ikke nødvendig.
- For å finne den nøyaktige injeksjonsstedet, kjøres en 26 G nål festet til en sprøyte horisontalt langs kneet (for ikke å stikke hull på huden med spissen) inntil den finner spalten under patella. Påfør lett trykk for å markere området og deretter løfte nålen og sprøyten vertikalt for injeksjon. Sett nålen i det markerte området, gjennom patellarsenen, vinkelrett på tibia. Ingen motstand skal kjennes.
- Bruk tommelen som en guide og injisere overfladisk til området for innreise. Etter injeksjon, massere kne for å sikre jevn fordeling av oppløsningen. Kast nålen umiddelbart i skarps bin.
- Plasser mus tilbake til et rent hjem bur på en oppvarmet matte og tillate dem å gjenopprette. Hold konstant årvåkenhet på dyrene før de gjenvinne egnet bevissthet, som er målt ved dem gjenvinne sternal recumbency. Når dyrene er gjenopprettet, tilbake til buret sitt.
Merk: Det er foreslått for beste praksis og opplæring som et fargestoff er brukt og umiddelbare post-mortem disseksjon utført for å bekrefte riktig lokalisering av injeksjon.
2. Måling av mekaniske Overfølsomhet (allodyni)
Merk: Statiske mekaniske abstinens terskler blir vurdert ved å bruke von Frey hår til plantar overflaten av hind labben.
- Ta med mus til atferds rommet og la uhemmet dyr akklimatisere i akryl avlukker (8 cm x 5 cm x 10 cm) på toppen av en netting rutenettet.
- Tog mus ved håndtering og to timer tilvenning til de avlukker for to dager før von Frey hår søknaden forå begrense stress og bevegelse og under påføring av von Frey hår. På testdager, tilvenne dyr til avlukkene i opptil 60 minutter før testing. Bruk kjoler, hansker og masker i alle atferdseksperimenter.
- Påfør kalibrerte von Frey hår (fleksible nylonfibre med økende diameter som utøver definert nivåer av kraft som kalibrert fra produksjonsbedrift og uttrykt som gram (g)) til plantar overflaten av bakpoten til fiber svinger. Bruk 0,008, 0,02, 0,04, 0,07, 0,16, 0,4, 0,6, og 1,0 g fibrene under testing.
- Holde hvert hår i stedet for 3 sekunder eller inntil labb er trukket tilbake, idet sistnevnte avgrenser en positiv respons. Starter med en stimulus styrke på 0,07 g, gjelder hår i henhold til "opp-ned metoden" 21: mark som X en tilbaketrekking respons og O et fravær av respons. Påfør i stigende rekkefølge av makt, opptil 1 g (cut-off force), til et svar er oppdaget.
- Re-test labben ved å gjentatrinn 2.2.1, som starter med det filament som utøver en kraft under den som produserte et uttak.
- Deretter gjelder de resterende filamenter sekvensielt, med synkende makt, til det ikke uttak skjer. Søke på nytt filamenter i stigende rekkefølge inntil en respons er observert. Fortsette inntil en sekvens av seks responser oppnås (f.eks OXOXOX), for å oppnå den 'k' verdi ved å henvise til tabellverdier 21.
- Uttrykke paw abstinens verdier som 50% labb abstinens terskler i gram. Bruk formelen (10 [Xr + K δ]) / 10000 hvor Xr = verdi på siste von Frey filament som brukes i sekvensen (i log enheter), k = tabellverdi, og δ = bety forskjellen på kreftene mellom fibrene. Der ingen respons blir oppdaget, kan du bruke den maksimale responsen av en g 21,22.
- Ved å følge fremgangsmåten beskrevet ovenfor (2.2.1-2.2.4), vurdere mekaniske terskler for begge bakpoter før injeksjon mol MIAn som utgangsverdier. Etter injeksjon, vurdere terskler for ipsilaterale og kontralaterale poter med jevne dagers intervaller i flere uker etter MIA for å fastslå utvikling av mekanisk allodyni.
Merk: For eksempel rapporterer vi terskler målt 0, 3, 5, 7, 10, 14, 21, og 28 dager etter MIA injeksjon. Dyrene anses allodynic når de viser en reaksjon på 0,1 g eller mindre. Normale reaksjoner faller innenfor 0,6 til 1 g rekkevidde.
3. Måling av vekt bærende Deficit
Merk: Endringer i vektbærende måles ved hjelp av en vekt incapacitance tester.
- Trene hver mus til å gå inn i et pleksiglass kammer på apparatet og sitte i venteboksen. Plasser musen foran holde boksen, løft inngangen opp 45 °, og la musen til å gå inn og lukke boksen. La dyrene å bevege seg fritt før de vedtar en sittestilling. Denne treningen tar minst to dager, og garanterer at dyret er stille og ikke leaning på hver side av kammeret. Kalibrere instrumentet før bruk med en 100 g sjekk vekt (eller i henhold til utstyr instruksjon).
- Kontroller at hver bakfot er plassert på den aktuelle innspillingen pad 11. Varigheten av hver måling tar 1 sek, i henhold til produsentens anvisninger.
- Samle tre målinger av vekten båret på hver bakpote fra opptaksplaten for hvert opptak og bruke gjennomsnittsverdien til å beregne forskjellen i vekten som bæres av ipsilaterale og kontralaterale poter. Express verdier som forskjellen mellom kontralaterale og ipsilaterale potene i gram.
- Vurdere vektbærende endringer før MIA injeksjon som utgangsverdier. Så, for å gjenta vurderinger med jevne mellomrom over flere uker fastslå utviklingen av gate endringer. For eksempel rapporterer vi terskler, målt på 0, 3, 5, 7, 10, 14, 21, og 28 dager etter injeksjonen MIA.
Merk: En normal vekt bearing verdi på 50% representerer en lik vektfordeling på tvers ipsilaterale og kontralaterale bakben. Dyr ansett overfølsom skjermen en vektbærende endring på ca 45%. Målinger av mekaniske terskler og vektbærende underskudd kan utføres i den samme mus, som heller ikke sluttpunkt påvirker den andre. For farmakologisk vurdering, bør hver gruppe dyr testes til faste tider etter dosering i tråd med den farmakokinetiske profilen av det sammensatte brukt.
Representative Results
Vi har nylig rapportert at injeksjon av 0,5 til 1 mg MIA i muse kneleddet induserer referert mekanisk overfølsomhet (allodyni) i ipsilaterale bakfot og vektbærende underskudd i opp til fire uker, selv om sykdomsangrep er doseavhengig 23.
Dataene rapportert i figur 1 utgjør et eksempel på tidsforløpet av MIA-indusert mekanisk overfølsomhet i ipsilaterale bakpoter etter en rekke forskjellige doser injisert i kneet. Spesielt, den laveste dosen av MIA (0,5 mg / mus) induserte en 50% reduksjon av terskler i forhold til injeksjon av saltvann på dag 10, og terskler ble redusert til 70% av de i saltløsningskontrollene 28. dag etter injeksjonen. Den mellomliggende dose på 0,75 mg av MIA resulterte i en gradvis reduksjon i terskler som var 80% lavere enn saltvann kontrollgrenser på dag 10 og holdt lav inntil dag 28. Den høyeste dose på 1 mg MIA var assosiert med et skiltificant fall i terskel på dag 5, og en ytterligere reduksjon på dag 10, som ble opprettholdt opp til dag 28.
Dataene rapportert i figur 2 gir eksempler på vektbærende endringer som er forbundet med MIA injeksjon i kneledd. I dette sett av eksperimenter, mens 0,5 mg MIA dose, førte ikke til signifikante endringer i vekt som bærer i løpet av 28 dagers varighet av studien, resulterte i 0,75 mg MIA dose i en betydelig reduksjon i vekten som bæres av den ipsilaterale pote fra dag 10 utover. Spesielt vektbærende asymmetri forbundet med 0,75 mg av MIA kan gi variable og inkonsistente resultater mellom studier 23. I stedet, den dose på 1 mg MIA vanligvis induserer reproduserbar vektbærende asymmetri, og dataene i figur 2 viser signifikant reduksjon av vekten som bæres på den ipsilaterale bakpote fra dag 3 til slutten av observasjonsperioden. Som forventet, Saline-behandlede dyr viste ingen vektbærende endringer.
Figur 1. Utvikling av mekaniske allodyni Post MIA Injection. Paw abstinens terskler for ipsilaterale og kontralaterale bakpotene ble vurdert før og etter injeksjon av MIA (0,5, 0,75 og 1 mg / mus) og saltvann (0,9% NaCl), n = 8 - 10 mus / gruppe. * P <0,05, ** p <0,01, *** p <0,001 sammenlignet med saltvann-behandlede gruppe; Toveis gjentatte målinger ANOVA etterfulgt av Student Newman-Keuls post hoc test. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Figur 2. Utvikling av vektbærende Deficits Post MIA-injeksjon. Endringer i kroppsvektfordeling mellom de to baklemmene ble beregnet som [(vekt bæres på ipsilateral pote / summen av vekten båret på ipsilaterale og kontralaterale poter) x 100] ble undersøkt før og etter injeksjon av MIA ( 0,5, 0,75 og 1 mg / mus) og saltvann (0,9% NaCl), n = 8 - 10 mus / gruppe. * P <0,05, ** p <0,01, *** p <0,001 sammenlignet med saltvann-behandlede gruppen. Toveis gjentatte målinger ANOVA etterfulgt av Student Newman-Keuls post hoc test. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Discussion
Med denne metoden, vil vi beskrive en foretrukket fremgangsmåte for indusering av OA-lignende smerte i mus ved en intra-artikulær injeksjon av MIA i et kneledd og vurdering av sensitiviteten til ikke-giftige og skadelige stimuli i baklemmene. MIA injeksjon er assosiert med vedvarende smerter atferd, nemlig endret bakben vektbærende og utvikling av referert mekanisk overfølsomhet (allodyni). Slike statiske målinger kan suppleres med ganganalyse på en tredemølle eller ved catwalk analyse i fritt bevegelige dyr. MIA modeller er lydhør overfor vanlige smertestillende behandling 24, noe som indikerer at de kan være nyttig for kresne terapeutiske tilnærminger. Mens injeksjon av MIA er ikke teknisk vanskelig, kan det felles kapsel gjennombores under injeksjonen, noe som resulterer i lekkasje av MIA utenfor kapselen, og påfølgende feil å indusere toksisitet av kondrocytter. Faktisk kan systemisk injeksjon av MIA være dødelig hos gnagere ennd mulige effekter av MIA på vev og andre enn chondrocytes celler kan forvirre resultater, foruten å være uønsket. Som sådan, må det understrekes at stor forsiktighet må gis til injeksjonen av MIA, som det er en kritisk komponent i modellen, og trygghet må gis at injeksjonen skjer i det artikulære plass. Denne protokollen bidrar til å oppnå det.
Protokollen beskrevet her tar sikte på å sikre dyrene gir konsekvent smertelignende responser i hele testperioden. Også, de tillater justering av sykdommens alvorlighetsgrad ved å endre dosen av MIA anvendes til å indusere patologien 15,23. Den raske induksjon av både sykdomstilstand og smerte-lignende oppførsel tillate betimelig evaluering av smertemodifiser forbindelser. Dette er en fordel over eksisterende kirurgisk og spontant utvikle modeller av OA, som kan ta lengre tid å utvikle overfølsomhet. Også, særlig for de spontane modellene, sykdommen Pathollogi ikke manifestere seg i alle dyr (ca. 20 - 80% 7), mens den MIA-modellen er assosiert med signifikant forekomst av respondere. Videre spontane modeller er ikke egnet for målinger av endringer i vektbelastning, som OA utvikler seg i begge knærne. Når du vurderer atferdsmålinger, dyrene må holdes rolig og avslappet under vurderingene. Dette oppnås, som beskrevet i protokollen, med tidlig trening før innspillingen målinger og ved gjentatt håndtering, noe som gjør at dyrene til å bli kjent med eksperimentator. Et viktig poeng å redusere stress er å bruke samme eksperimentator for atferds test hele, som konstant endring vil forårsake problemer som tidligere er nevnt. Som enhver modell, MIA modell av OA bærer begrensninger, for eksempel hurtigheten av leddforstyrrelser, som ikke ligner den langsomme utvikling av OA patologi hos pasienter. En måte å løse dette problemet ville være å utfylle denne modellen med en surgical modell av OA. Bruken av MIA kjemisk modellen i forbindelse utvikling tillater bruk av forebyggende og terapeutiske protokoller over utvikling og vedlikehold av OA-lignende smerter. Til slutt ville MIA modellen utfyller studier av fenotypiske trekk av knock-out mus, bidrar til ytterligere å forstå OA sykdommen.
Acknowledgments
JSV er støttet av et samarbeids tilskudd til MM av Europakommisjonen (GAN 603 191-PAINCAGE).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Monoiodoacetate | Sigma-Aldrich | I-2512-25G | ≥ 98% purity |
| 0.9% Saline | Mini-Plasco basic | 365 4840 | |
| Isoflurane | Merial | DNI 4090/1 | |
| 26 G Needle | Fisher Scientific | 12947606 | |
| 50 μl Hamilton Syringe | Sigma-Aldrich | 20701 | |
| Von Frey Hairs | Linton Instruments | NC 122775-99 | |
| Incapacitance tester | Linton Instruments | Delivery on Request | |
| Testing Cage Rack | Ugo Basile | 37450 | |
| Compact Anesthetic system | Vet-Tech | AN001B | |
| Medical O2 | BOC | 101-F | |
| Aldasorbers | Vet -Tech | AN006A |
References
- Farrell, M., Gibson, S., McMeeken, J., Helme, R. Pain and hyperalgesia in osteoarthritis of the hands. J. Rheumatol. 27 (2), 441-447 (2000).
- Kuni, B., Wang, H., Rickert, M., Ewerbeck, V., Schiltenwolf, M. Pain threshold correlates with functional scores in osteoarthritis patients. Acta. Orthop. 86 (2), 215-219 (2015).
- Wylde, V., Hewlett, S., Learmonth, I. D., Dieppe, P. Persistent pain after joint replacement: prevalence, sensory qualities, and postoperative determinants. Pain. 152 (3), 566-572 (2011).
- Wylde, V., Palmer, S., Learmonth, I. D., Dieppe, P. Test-retest reliability of Quantitative Sensory Testing in knee osteoarthritis and healthy participants. Osteoarthr. Cartil. 19 (6), 655-658 (2011).
- Hunter, D. J. Pharmacologic therapy for osteoarthritis--the era of disease modification. Nat. Rev. Rheumatol. 7 (1), 13-22 (2011).
- Lampropoulou-Adamidou, K., et al. Useful animal models for the research of osteoarthritis. Eur. J. Orthop. Surg. Traumatol. 24 (3), 263-271 (2014).
- Yamamoto, K., Shishido, T., Masaoka, T., Imakiire, A. Morphological studies on the ageing and osteoarthritis of the articular cartilage in C57 black mice. J. Orthop. Surg. (Hong Kong). 13 (1), 8-18 (2005).
- Huebner, J. L., Hanes, M. A., Beekman, B., TeKoppele, J. M., Kraus, V. B. A comparative analysis of bone and cartilage metabolism in two strains of guinea-pig with varying degrees of naturally occurring osteoarthritis. Osteoarthr. Cartil. 10 (10), 758-767 (2002).
- Thysen, S., Luyten, F. P., Lories, R. J. Targets, models and challenges in osteoarthritis research. Dis Model Mech. 8 (1), 17-30 (2015).
- Longo, U. G., et al. Osteoarthritis: new insights in animal models. Open. Orthop. J. 6, 558-563 (2012).
- Bove, S. E., et al. Weight bearing as a measure of disease progression and efficacy of anti-inflammatory compounds in a model of monosodium iodoacetate-induced osteoarthritis. Osteoarthr. Cartil. 11 (11), 821-830 (2003).
- Pomonis, J. D., et al. Development and pharmacological characterization of a rat model of osteoarthritis pain. Pain. 114 (3), 339-346 (2005).
- Schuelert, N., McDougall, J. J. Grading of monosodium iodoacetate-induced osteoarthritis reveals a concentration-dependent sensitization of nociceptors in the knee joint of the rat. Neurosci. Lett. 465 (2), 184-188 (2009).
- Vonsy, J. L., Ghandehari, J., Dickenson, A. H. Differential analgesic effects of morphine and gabapentin on behavioural measures of pain and disability in a model of osteoarthritis pain in rats. Eur. J. Pain. 13 (8), 786-793 (2009).
- Im, H. J., et al. Alteration of sensory neurons and spinal response to an experimental osteoarthritis pain model. Arthritis Rheum. 62 (10), 2995-3005 (2010).
- Sabri, M. I., Ochs, S. Inhibition of glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase in mammalian nerve by iodoacetic acid. J. Neurochem. 18 (8), 1509-1514 (1971).
- van der Kraan, P. M., Vitters, E. L., van de Putte, L. B., van den Berg, W. B. Development of osteoarthritic lesions in mice by 'metabolic' and 'mechanical' alterations in the knee joints. Am. J. Pathol. 135 (6), 1001-1014 (1989).
- Guingamp, C., et al. Mono-iodoacetate-induced experimental osteoarthritis: a dose-response study of loss of mobility, morphology, and biochemistry. Arthritis Rheum. 40 (9), 1670-1679 (1997).
- Janusz, M. J., et al. Moderation of iodoacetate-induced experimental osteoarthritis in rats by matrix metalloproteinase inhibitors. Osteoarthr. Cartil. 9 (8), 751-760 (2001).
- Marker, C. L., Pomonis, J. D. The monosodium iodoacetate model of osteoarthritis pain in the rat. Methods Mol. Biol. 851, 239-248 (2012).
- Chaplan, S. R., Bach, F. W., Pogrel, J. W., Chung, J. M., Yaksh, T. L. Quantitative assessment of tactile allodynia in the rat paw. J. Neurosci. Methods. 53 (1), 55-63 (1994).
- Dixon, W. J. Efficient analysis of experimental observations. Ann. Rev. Pharmacol. Toxicol. 20, 441-462 (1980).
- Ogbonna, A. C., Clark, A. K., Gentry, C., Hobbs, C., Malcangio, M. Pain-like behaviour and spinal changes in the monosodium iodoacetate model of osteoarthritis in C57Bl/6 mice. Eur. J. Pain. 17 (4), 514-526 (2013).
- Fernihough, J., Gentry, C., Malcangio, M., Fox, A., Rediske, J., Pellas, T., Kidd, B., Bevan, S., Winter, J. Pain related behaviour in two models of osteoarthritis in the rat. Pain. 112 (1-2), 83-93 (2004).
