Summary
신뢰할 수 있고 정확한 결과 평가는 임상 적 치료에 대한 임상 치료의 번역을위한 열쇠입니다. 현재의 논문은 돼지 급성 심근 경색 모델에서 심장 성능과 손상의 세 가지 임상 적으로 일차 결과 변수를 평가하는 방법에 대해 설명합니다.
Introduction
서방 세계 1 명 2 % - 감소 구혈률 (HFrEF) 심장 장애는 약 1에 영향을 미치는 모든 심부전의 경우 약 50 %를 차지한다. 그것의 가장 일반적인 원인은 급성 심근 경색 (AMI)입니다. AMI 후 급성 사망률이 증가 된 인식과 개선 된 치료 방법으로 크게 감소함에 따라, 강조는 만성 후유증으로 이동했다; 가장 눈에 띄는 존재 HFrEF 2,3. 함께 의료 비용 4가 증가함에 따라, 심부전 성장 전염병 이전 5 바와 같이 AMI 후 부작용 리모델링 높은 병진 돼지 모델에서 연구 될 수있는 신규의 진단 및 치료에 대한 필요성을 강조한다.
불리한 개조 모두, 결정 (예를 들면, 경색 크기) 및 관능 평가 (예를 들어, 심장 초음파) 종종 REL의 필요성을 나타내는 새로운 치료제의 효능을 시험에 사용iable과 상대적으로 저렴한 방법. 현재 연구의 목적은 급성 심근 경색의 돼지 모델에서 효능 시험에 중요한 안정적인 결과 측정을 도입함으로써 이러한 요구를 충족하는 것이다. 이러한 위험 (AAR), 3 차원 경식도 심 초음파 (3D-TEE) 상세한 입장 기반 압력 - 볼륨 (PV) 루프 획득에 지역 관련 경색 크기 (IS)를 포함한다.
경색 크기는 AMI 6 후 이상 반응 리모델링과 생존의 주요 결정 요인이다. 가역적으로 부상 심근을 회수 및 경색 크기를 제한 할 수 있습니다 허혈성 심근의 재관류가, 재관류 자체가 산화 스트레스의 발생과 과도한 염증 반응을 통해 추가 피해를하지만 (허혈 - 재관류 손상 (IRI)) 7. 따라서, IRI는 유망한 치료 대상으로 확인되었습니다. 경색 크기를 감소시키는 신규 한 치료제의 능력과 관련하여 평가 경색 크기에 의해 정량화위험 지역 (AAR)에. 큰 AAR 더 큰 절대 경색 크기 리드로 AAR 정량은 동물 모델의 관상 해부학 개체 간 변동을 보정하기 위해 필수적이다. 경색 크기를 직접 심장 성능 및 심근 수축력에 관련되기 때문에, AAR의 변화는 치료 방법 (8)에 관계없이 결과 측정 연구에 영향을 미칠 수있다.
세 가지 차원 경식도 심 초음파 (3D-TEE)는 심장 기능이 비 침습적으로 측정 할 수있는 임상 적 적용, 가장 중요한, 안전하고 신뢰할 수있는 저렴한 방법입니다. 흉부 심장 초음파 (TTE) 이미지 돼지 9 2D 흉골 장기 및 단기 축보기에 한정되는 반면, 3D-TEE는 좌심실의 완전한 3 차원 이미지를 얻기 위해 사용될 수있다. 따라서, 이러한 수정 된 심슨의 규칙 10 좌심실 (LV) 볼륨의 수학 근사값을 필요로하지 않습니다. 후자는 CORR 하회ectly 인해 원통 형상 (11)의 부족 LV 개장 후 LV 볼륨을 추정. 그것은 본 모델 (12) 심장 보호 효과를 발휘하는 것으로 관찰되었다 외과 적 개입을 필요로하지 않기 때문에 또한, 3 차원 초음파 검사 TEE은 심 외막 위에 바람직하다. 심근 기능의 평가 2D-TEE의 사용 13,14 전에 설명 하였지만, 심실 기하 구조에 대한 제한은 2D-TTE에서 관찰 된 것과 유사하며 LV 리모델링의 정도에 의존한다. 따라서, 큰 경색 (및 심부전의 확률이 높은) 일수록 차원 측정이 부정확 기하학적 가정하여 결함되고 3D 기법이 높을 필요가있다.
그럼에도 불구하고, 대부분의 이미징 양식은 심근의 고유의 기능적 특성을 평가하는 능력에 제한됩니다. PV는 관련 추가 정보를 제공 루프 및 인수 그러므로상세히 설명.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
모든 동물 실험은 대학 의료 센터 위트 레흐트의 동물 실험에 대한 윤리위원회 (위트레흐트, 네덜란드)의 승인을하고 '실험 동물의 관리 및 사용에 대한 가이드'에 부합했다.
주 :이 프로토콜은 폐쇄 상자 풍선 흡장 현재 원고의 일부가 아닌 다른 곳에서 5 상세히 설명 수행. 즉, 돼지 (60-70kg)는 좌전 하행 동맥 (LAD)의 중앙부의 75 분 인 transluminal 풍선 폐색을 실시한다.
모두, 입체 경식도 심장 초음파 (3D-TEE) 및 압력 체적 (PV) 루프 측정 기준, 단기 및 장기 추적에서 수행 될 수있다. 이러한 측정으로 인해이 단계에서 자주 부정맥에 심근 경색 후 첫 시간에 신뢰할 수없는 것으로 간주되어 있습니다. 경색 크기 (IS)와 면적에서 위험 (AAR) 측정 preferabl 있습니다미세 혈관 및 보조 심근 흉터 담화의 변화가 덜 신뢰할 수있는 결과 절정에 달하다 때문에, - (72 시간 24) 15, 16, Y는 단기 추시 평가했다. 경색 크기 염색은 높은 재현성 및 비교적 저렴한 간주 2,3,5- 트리 페닐 테트라 졸륨 클로라이드 (TTC) (주의, 자극)을 사용하여 수행된다. TTC는 colorlessly 식염수에 용해하는 백색 분말이다. 다양한게나 제와 접촉하면, 그것은 벽돌 붉은 색으로 변환된다. 이에 따라, 그것은 가능한 (적색)과 죽은 심근 조직 (흰색) 사이의 구별. 모두 침습적 및 비 침습적 경색 크기 결정에 대한 개요, 독자들은이 주제 (17)에 종합적인 검토에 관한 것이다.
그림 1은 마취, 수술 준비와 본 연구에 사용 된 일차 결과 측정을 포함하는 타임 라인을 보여줍니다.
1. 약물 치료 및 마취
- 동물이 먹지 않도록 또는절차에 앞서 적어도 5 시간 동안 음료. 전처리 마취 및 수술후 통증 치료 프로토콜이 다른 5 상세히 설명되었다.
- 즉, 낮에는 수술 전에 buprenorfine 패치는 (5 μg의 / HR) 이레 수술후 통증을 제한하는 활성 피부에 도포된다. 수술 당일, 0.4 ㎎ / ㎏ 미다 졸람, 10 ㎎ / ㎏ 케타민과 0.014 ㎎ / ㎏ 아트로핀의 근육 내 주사에 의해 진정 돼지. 15 분 - 약 10 기다립니다. 귀 정맥 중 하나에 18 G 캐 뉼러를 삽입하고 마취를 유도하기 위해 5 ㎎ / ㎏ 티 오펜 탈 나트륨을 관리 할 수 있습니다.
- 기관 내 튜브 (- 70kg (60)의 돼지 용 크기 8.5)를 사용하여 돼지를 삽관. 필요한 경우, 풍선 환기 (주파수 12 / 분)를 수행하여 수술실에 돼지 전송.
- 동작 극장에 도착하면, FIO이 0.50, 10 ㎖ / kg 호흡량을 연속하여 12 / min의 빈도로 기계적 양압 환기를 시작할호 기말 이산화탄소 분압 기록.
- 미다 졸람의 조합 (0.5 ㎎ / ㎏ / 시간), 펜타닐 (2.5 μg의 / kg / 시간) 및 pancuronium (0.1 ㎎ / ㎏ / 시간)의 연속 정맥 주입에 의해 균형 마취를 시작합니다.
- 각막 반사를 테스트하고 호흡 패턴을 모니터링하여 마취를 확인합니다 (예를 들어, 기계 환기와 함께 자발적 호흡이 불완전한 마취를 나타낸다). 동물이 마취 상태에서 건조를 방지하기 위해 눈에 수의사 연고를 사용합니다.
2. 3D 경식도 심 초음파 (TEE)
- 5는 심 초음파 기계에 ECG 리드에 심장 박동 모니터링 및 데이터 수집을 허용하기 위해, 동물을 연결합니다.
- 오른쪽 측면 위치에있는 동물을 놓습니다. 확인 프로브가 운영 조각을 잠금 해제하여 끝에서 직선 유연합니다.
- 돼지의 입을 열고 조심스럽게 식도 에코 프로브를 삽입합니다. 필요한 경우, visua에 대한 후두경을 사용하여사용 효율. Zenker 게실 (18)을 닮은, 정상 해부학 적 인두 주머니에서 끝나는 않도록주의하십시오.
- (주둥이의 끝에서 측정) 60cm - 50에 대한 프로브를 삽입합니다. 천천히 프로브를 회전 중심 (그림 2A - B)를 시각화하는 왼쪽 외측 위치로 머리를 휘어. 모든 벽이 명확하게 볼 수 있습니다 있는지 확인합니다.
- 도 2c에 도시 된 바와 같이 좌심실이 수직 이미지를 표시하기 위해 심 초음파 기기의 디스플레이에 "3D 전체 볼륨"옵션을 사용하여 -. D를 그런 다음 "FV 수신 거부 볼륨"을 선택하여 획득되는 섹터 폭을 극대화 할 수 있습니다. 일시적으로 전체 볼륨 측정을 얻기 위해 기계 환기를 눌러 "획득"을 해제 전환하여 환기를 일시 중지합니다.
- 에코 획득 한 후, 끝이 운영 조각을 잠금 해제하여 유연해야합니다. 그런 다음 천천히 동물에서 프로브를 제거합니다.
참고 : 일을 방치하지 마십시오이 충분한 의식을 회복 한 전자 동물 무인까지 흉골 드러 누움을 유지합니다. 완전히 회복 될 때까지 다른 동물의 회사에 수술을 한 동물을 반환하지 않습니다. - 이전 19 설명 된대로 검증 된 소프트웨어와 함께 오프라인 분석을 수행합니다.
3. 입학 기반 압력 볼륨 루프 취득
- 프리 소크 0.9 % 식염수 실험 20 중에 적절한 수분을 최소화 기준 압력 편차를 확보하기 위해 20 분 이상 동안 (37 ℃ 실온)에서 7 F 테트라 극성 어드미턴스 카테터의 센싱 팁.
- 섹션 1에 설명 된대로 약물과 마취를 관리 할 수 있습니다.
- 수술 준비를 수행하고 이전에 5 바와 같이 혈관 액세스 권한을 얻을 수 있습니다.
- 즉, 면도 목을 청소합니다. 요오드 2 %로 수술 영역을 소독 및 멸균 수술 드레이프와 돼지의 비 멸균 부분을 커버한다.
- 하다목에 중간 절개는 경동맥과 경정맥을 노출. 경동맥에 8 F 칼집과 경정맥에 9 F 칼집을 넣습니다.
- 경정맥의 9 F 칼집을 통해 스완 - 간즈 (SG) 카테터를 삽입하고 카테터의 끝에서 풍선을 팽창에 의해 작은 폐동맥에 쐐기. 폐의 주변부에 적절한 배치 한 후, 풍선을 수축. 외부 심장 출력 장치에 SG를 연결합니다.
- 가장 근위 진출 지점과 루멘에 연결되는 주입구 0.9 % 멸균 식염수를 함유하는 20 ㎖ 주사기 첨부. 5 ml의 0.9 % 식염수 (실온)의 빠른 주입에 의한 심 박출량을 측정하고 박출량 (SV)을 계산하기 위해 심장 박동을 구하십시오. 이 과정을 세 번 반복하고 평균 SV를 계산합니다.
주 : 심 박출량은 스튜어트 해밀턴 thermodilution 방정식을 사용하여 계산 (자동)이고, 온도의 변화에 기초실온 식염수 (21)의 주입시 폐동맥. - 되어있는 SG 카테터를 제거합니다. 대정맥의 경정맥과 위치를에서 9 F 칼집을 통해 8 F 포가티 카테터를 삽입합니다.
- 팁은 0.9 % 생리 식염수를 유지하면서 "과정"및 "미세"버튼을 사용하여 PV 루프 카테터의 압력 신호를 보정한다. 이어서 입력 시스템에 측정 된 SV.
- 경동맥에서 8 F 칼집을 통해 PV 루프 카테터를 발전 투시에서 좌심실 (LV)에서 끝을 중심으로.
- 압력 신호에 대한 원시 전도 신호를 플롯에 의해 가장 큰 적절하게 배치 세그먼트를 선택합니다. 압력 전도성 루프는 사각형 모양의 있는지 확인합니다. 위상 신호는도 3 및도 5 사이의 값을 갖는 동 트레이스를 표시 할 것으로 예상된다. 환기를 일시 정지 기준이 볼륨에 컨덕턴스를 변환 스캔 수행합니다.
- 하여 기준 데이터를 수락신호가 (아무 부정맥) 안정 할 때 "계속"을 누르면 심장 박동이 적절하게 시스템 (20)에 의해 감지되는 ECG 또는 압력 도출 심장 박동수 및 최종 수축기 (ES) / 최종 이완기 (ED) 전도와 동일하다.
주 : 후자는 압력 신호에 대한 원시 신호 컨덕턴스 플로팅 실시간 컨덕턴스에 스캔 기준으로부터 유도 ES / ED 컨덕턴스 값을 비교함으로써 확인할 수있다. 상기 요구 사항이 충족되지 않으면 상기 절차를 반복한다.
- 하여 기준 데이터를 수락신호가 (아무 부정맥) 안정 할 때 "계속"을 누르면 심장 박동이 적절하게 시스템 (20)에 의해 감지되는 ECG 또는 압력 도출 심장 박동수 및 최종 수축기 (ES) / 최종 이완기 (ED) 전도와 동일하다.
- 환기를 일시 중지하여 무호흡 동안 연속 12 비트 - 10를 기록하여 기준 압력 볼륨 루프를 획득.
- 전술 한 바와 같이 연속 된 12 비트 - 예압을 감소시키고 열을 기록 투시 하에서 포가티 카테터 팽창. 확인 수축기 혈압> 60 mmHg로 유지하고 더 부정맥 측정을 방해하지 않습니다.
- 포가티 및 PV 루프 카테터를 제거합니다. 동맥 pressur 기록 유지이전과 PV 루프 카테터를 제거하는 동안 전자 압력 드리프트 (즉, 생체 전후 절차 적 기준 압력 차)를 보정 가능하게한다.
참고 :이 흉골 드러 누움을 유지하기 위해 충분한 의식을 회복 할 때까지 무인 동물을 두지 마십시오. 완전히 회복 될 때까지 다른 동물의 회사에 수술을 한 동물을 반환하지 않습니다. - 기하학적 측정 및 검증 소프트웨어 (22)와 기능 매개 변수의 오프라인 분석을 수행합니다.
위험 (AAR) 및 경색 크기 4. 지역 정량 (IS)
- 50 ml의 0.9 % 식염수 (독성주의 23) 1.00 g 에반스 블루를 녹여 각각 20 ㎖로 두 개의 50 ㎖ 루어 락 주사기를 작성하고 30 ml의 2 % 에반스 블루 용액을 실온에서 보관하십시오.
참고 : 흄 후드에서 작업 및 방진 마스크를 착용 유해 분진 및 사용 장갑과 접촉 FR을 방지하기 위해 보호 안경에 대한 노출을 제한하는옴 피부와 눈. - 비슷한주의 사항 촬영, 37 ° C 0.9 % 식염수에 1 % 2,3,5- 트리 페닐 tetrazoliumchloride (TTC) (주의, 자극)을 용해하고 37 ℃에서 보관하십시오.
- 수술 모두 경동맥 동맥에 혈관 액세스를 얻기 위해 동물을 준비합니다. 생체 에반스 블루 주입 (5)의 효과를 직접 시각화를 허용하는 흉골 절개를 수행합니다.
- 7 F와 각각의 경동맥의 8 F 도입기 칼집을 넣습니다. 대안 적으로, 하나의 경동맥 모두 도입기 시스 삽입 또는 양쪽 안내 카테터 중 하나의 대퇴 동맥 중 하나를 사용한다.
- 각각 카테터를 안내 7 F JL4과 8 F JL4에 두 개의 표준 Y-커넥터를 연결합니다. 대퇴 접근, 오른쪽 관상 동맥 (RCA) 왼쪽 주요 관상 동맥에 대한 JL4 (LCMA)에 대한 JR4를 사용합니다. 모두 Y-커넥터 10cm 확장과 함께 추가로 3 웨이 탭을 연결합니다.
- 100 IU / kg 헤파린을 관리 할 수 있습니다. 8 F JL4 안내 캘리포니아의 위치를이 도입부의 덮개 중 하나를 통해 주관 동맥의 소공에 theter.
- 0.014 "가이드 와이어를 사용하여 LCMA 카테터를 통해 관상 동맥 확장술 카테터를 발전 관상 동맥 폐색이 MI 유도 동안 수행 된 사이트에 풍선을 배치합니다. 아직 팽창하지 마십시오.
- 두 번째 도입기 시스를 통해 RCA의 소공에서 두 번째로 8 F JL4 안내 카테터를 놓습니다.
- 올바른 모두 안내 카테터의 위치 및 관상 동맥에 풍선, 사용 전후 및 LAO 30 ° 뷰를 확인하기 위해 투시하에 조영제를 주입하여 관상 동맥 조영술 (CAG)을 수행합니다.
- 30 ㎖ (LCMA) 및 안내 카테터에 Y-커넥터에 연결된 각각의 세 방향 탭 20 ㎖ (RCA) 2 % 에반스 블루를 포함하는 두 개의 50 ㎖ 주사기를 연결합니다.
- 풍선을 부풀려 및 CAG에 의해 관상 동맥의 폐색을 확인합니다. 때만 벌룬 완전히 차단하는 조영제의 통과를, 에반스 블루 (D)를 삽입너희 풍선이 팽창하면서 모두 안내 카테터 (5 ㎖ / s의)를 통해.
- 에반스 블루 직접 주입 종료 후, 심장의 경색되지 않은 부분에서 9 V 배터리를 배치하여 심실 세동을 유도한다.
- 압력을 해제하고 있는지 흡입 장치가 혈액의 배출을 허용하는 데 사용할 수 있습니다 만들 수있는 대정맥 정맥을 절개.
- , 풍선을 수축 모두 안내 카테터와 함께 철회 및 주변 세포막을 해부하여 심장 이식편. 대형 선박 (즉, 대동맥, 폐동맥 / 정맥)을 통해 잘라 가로가 완료 외식 수 있습니다. 신속하게 외부 표면에 0.9 % 식염수를 사용하여 심장 충치에 혈액과 불필요한 염료를 씻어 내십시오.
- 조심스럽게 좌심실를 해부하고, 방실 (AV) 홈에 평행 한 평면에서의 기반이 정점에서 5와 동일한 10mm 두께의 섹션에 상처를합니다.
- 별도로 주변 광 조건에서 다섯 조각의 양쪽을 촬영,같은 수 에반스 블루 세척은 다음 단계에서 발생할 수있다. 교정의 경우, 통치자가 이미지에 있는지 확인합니다.
- 동일 염색에 대한 5 분 후 주위 부분을 회전, 37 ° C에서 1 % TTC 용액에 10 분 동안 품어.
- 또, 별도로 주변 광 조건에서 다섯 조각의 양면을 촬영하고 통치자가 교정에 대한 이미지 시각화되어 있는지 확인합니다.
- 모든 조각의 무게를. 분석 (5)에 적합한 소프트웨어를 사용. ImageJ에 (버전 1.47)를 사용하는 경우, "직선"버튼을 클릭합니다. 이제 이미지 (예를 들어, 5cm)에 눈금자를 사용하여 알려진 거리와 직선을 그립니다. > "알려진 거리를" "규모 설정"및 상자에 거리를 입력 - "분석"을 클릭합니다. 이 절차는 길이의 SI 단위 (픽셀) 거리의 교정 할 수 있습니다.
- 은 "다각형 선택"버튼을 사용하면, 본 메신저에서 좌심실 심근에 해당하는 전체 영역을 선택나이, 클릭 "분석"- 측정을 취득> "측정"을. 심근의 각 조각의 양쪽 모두에 대해이 절차를 수행하고 조각 당 평균.
- 다섯 조각의 총 중량에 비례 한 조각의 중량을 곱함으로써, 모든 슬라이스 이러한 측정의 평균.
- 위험 (AAR) 및 경색 크기 (IS)에 영역 유사한 측정을 수행합니다. 나누기 / AAR, AAR / LV IS 및 LV / IS 및 각각의 결과를 측정 (5)를 얻기 위해 100 %를 곱.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
3D 경식도 심 초음파
경식도 심장 초음파 3 차원 (3D-TEE)는 글로벌 심장 기능 평가에 사용될 수있다. AMI 후, 글로벌 심장 기능 건강 기준 값과 다릅니다. 특히, 좌심실 구혈률 (LVEF)는 재관류 일주 (N = 10) (GPJ 반 후트 2015 년) 후 37 ± 6 %, 59 ± 4 %에서 감소한다. 최종 이완기 볼륨이 두 시점 사이에 차이가없는 반면 박출량 (74 ± 11 47 ± 8 ml의에)에 수축 기말 용적 (51 ± 7 82 ± 13 ml의에) 및 감소의 증가도 관찰된다 ((125) ) 14 129 ± 13 ml에 ±. 대표 이미지 1 주일 그림 3에 표시됩니다 심근 경색 (허혈 - 재관류) 후. 우리의 풍부한 경험, 우리는 TEE 관련된 합병증이 발생하지 않았습니다.
1 "> 입학 기반 압력 볼륨 루프 :"유지 - together.within 페이지를 = FO "t압력 - 체적 (PV) 루프 글로벌 심장 기능 및 특정 극한 심근 근육 특성 평가를 모두 사용할 수있다. 이전의 성과 측정은 쉽게도 4A의 그래프에서 계산 EDV (오른쪽 아래), ESV (왼쪽 상단)과 LVEF ((EDV - ESV) / EDV × 100 %)을 포함 할 수있다. 모두, ESV 및 EDV는 좌심실 구조에 대한 중요한 정보를 제공하고 LVEF는 좌심실의 펌프 기능을 결정하는 중요한 척도이다. 이전의 연구에 비해 입원 기반의 PV는 AMI (24)의 돼지 모델에서 금 표준 심장 자기 공명 영상 (CMRI)에 반복합니다. 팔주 후, PV 루프 측정은 크게 두 ESV 및 EDV을 과대 평가. 그러나 LVEF에 대해서는, 유의 한 차이가 PV 루프와 CMRI 사이에서 관찰되지 않았다. 또한, 두 기술niques는 EDV과 LVEF의 상당히 좋은 상관 관계를 보였다.
(; EDPVR ESPVR) 25 PV 루프에서 고유 심장의 성능을 위해, 다른 측정 등 최종 수축과 이완 기말 압력 볼륨 관계로 유도 될 수있다. 프리로드 감소 및 수축기 및 이완기 기능 매개 변수의 예와 대표 PV 루프 이미지는 그림 (b)에 표시됩니다. ESPVR의 기울기는 감소 수축력을 나타내는 감소. PV 루프로부터 유도 될 수있는 부가 가치 기능 파라미터들은 표 1에 제시되어있다.
경색 크기 / 리스크 정량화에서 지역
뒤 첫 번째 중격 먼저 대각선 지점에 직접 원위부, 왼쪽 전방의 폐쇄 하행 동맥 (LAD) -; 여성 Dalland의 재래종 돼지 (70kg 60 6 개월)에서링 75 분, 좌심실 (LV) 22 ± 2 %의 위험 (AAR) 영역 리드 (N = 5) (GHJM Ellenbroek, 2015). 경색 크기가 좌심실 16 ± 2 % 및 AAR 73 ± 7 %를 구성한다. 이것은 상당히 큰 / AAR은 큰 경색 크기와 환자의 작은 경색 크기와 환자보다 심부전의 개발 경향만큼 위해 선택되었다. 허혈 75 분 적용한 경우 돼지에서 가장 큰 치료 효과 따라서 얻을 수있다. 또한, 큰 경색 크기 때문에, 심장 기능이 저하뿐만 아니라 기능 개선을 허용한다. 인덱스 허혈 짧은 기간이 적용되면, 심장 경색 크기가 낮고 함수 기능 개선 매우 작은 창을 허용하는, 단지 약간 손상된다. (5) 클리어 있도록 TTC 및 에반스 블루 염색의 대표적인 예를 나타낸다 3 영역의 확인 시험 1) 원격 심근 2) AAR, 3) 심근 경색 <./ P>
실험 프로토콜의 그림 1. 타임 라인.이 타임 라인 사용 된 돼지 AMI 모델에서 가장 중요한 실험 단계에 대한 개요를 제공합니다. 마취의 적절한 유도는 각 측정하기 전에 필요합니다. 시간 표시는 각각의 진행에 따라 관찰 될 수있다. 72시간 - 경색 크기는 바람직하게는 24 일 후에 평가한다. 3D-TEE 및 PV 루프 데이터 수집은 기준선과 장단기 후속으로 수행 될 수있다. AMI 후 첫 번째 시간, 부정맥이 자주 크게 심장 혈류 역학을 방해하기 때문에 안정적인 데이터 수집을 방지 할 수 있습니다. AMI : 급성 심근 경색; 3D-TEE : 세 가지 차원 경식도 심 초음파; PV 루프 :. 압력 볼륨 루프 더 큰 버전?을 보려면 여기를 클릭하십시오이 그림의 N.
도 2 위치 및 3D TEE 이미지 획득. 전후방 (A) 및 식도의 3D-TEE 프로브 포지셔닝 mediolateral (B) X 선 영상. 이미지 수집은 좌심방, 좌심실과 대동맥 (C)과 좌심방과 좌심실 (D) 모두의 수직 이미지의 정확한 시각화에 따른다. 3D-TEE :. 세 가지 차원 경식도 심 초음파 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
그림 좌심실 3. 전체 볼륨 3D-TEE 이미지. (A, B). 좌심실의 다수의 단면 영상 (D)의 확대 예 (C)의 하단 패널에 표시된다. 3D-TEE :. 세 가지 차원 경식도 심 초음파 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
베이스 라인에서와 심근 경색 후 그림 4. 압력 볼륨 루프 이미지. 가사 중 대표적인 태양 광 루프 이미지 (예., 일시 중지 환기)베이스 라인 (파란색)과 팔주에서 AMI 후(적색) (A). EDV 및 ESV 및 SV의 감소를 증가 LVEF (%)의 감소를 나타내는 관찰 될 수있다. 프리로드 감소와 PV 루프 이미지는 고유 심근 함수 매개 변수 (B)을 평가하는 데 사용됩니다. 베이스 라인에 비해 경색 심근는 ESPVR (직선 파란색과 빨간색 선)에서 유래 수축의 감소를 보여줍니다. PV 루프 : 압력 볼륨 루프; AMI : 급성 심근 경색; EDV : 이완 기말 용적 SV : 박출량; LVEF : 좌심실 구혈률; ESPVR :. 최종 수축기 압력 볼륨 관계 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
그림 5. 경색 크기와 면적에서 위험 염색. 경색 크기와 면적에서 위험 염색 오의 대표 이미지3 일 동안 급성 심근 경색 (75분) 이후의 재관류 후 좌심실 바. (출혈성) 경색 조직을 관찰 할 수있는 경계 영역이 빨간색으로 염색되는 반면, 갈색 장미 빛과 회색 - 흰색. 블루 스테인드 영역은 원격 심근를 나타냅니다 주변. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
| 볼륨 매개 변수 | 압력 매개 변수 | 로드 독립적 인 매개 변수 | 다른 | |||
| 수축기 | 이완기 | 수축기 | 이완기 | 수축기 | 이완기 | 다른 |
| ESV | EDV | ESP | EDP | ESPVR | EDPVR | HR |
| DP / DT | DP / DT | E 말이지 | PRSW | SW | ||
| 파생 상품 | τ (타우) | ESV100 | PRSW | |||
| LVEF, SV, CO | PHT | E a를 | DP / DV | |||
압력 볼륨 루프로부터 유도 될 수있다 1. 가치 기능 파라미터 도표. 볼륨 압력과 로딩 독립 파라미터로 분류는,이 테이블은 루프 PV로부터 유도 가장 일반적으로 사용되는 (수축기 및 이완기) 파라미터를 설명한다. PV 루프 : 압력 - 볼륨루프; ESV : 수축 기말 용적 EDV : 이완 기말 용적 LVEF : 좌심실 구혈률; SV : 박출량; CO : 심 박출량; ESP : 최종 수축기 혈압; DP / DT : 압력의 유도체 τ (타우) : isovolumic 휴식 상수; PHT : 압력 하프 타임; ESPVR : 최종 수축기 압력 볼륨 관계; E 에스 : 최종 수축기 elastance; ESV100 : 압력 (100 mmHg로) 보정 수축 기말 용적 E의 A : 동맥 elastance; EDPVR : 이완 기말 압력 볼륨 관계; PRSW는 : recruitable 스트로크 작업을 미리로드; HR : 심장 속도; SW : 행정 업무; DP / DV : EDPVR 슬로프 (실 강성).
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
심장 재 형성은 주로 심근 경색 크기에 의존하고, 심근 경색의 품질 6,26 수리. 표준화 된 방식으로 전자를 평가하기 위해, 본 원고 검증 광범위 8,16,27,28 사용 된 생체 TTC 염색법과 조합 에반스 블루의 생체 내 주입 우아한 방법을 제공한다. 이 방법은 16 AAR 관련된 위험 (AAR)의 영역의 정량 경색 크기 허용한다. 이 심근 구멍을 요구하지 않는 한 유두근 - malpositioning 함께 - 현재의 접근 방식은 AAR, 경색 영역 또는 염료로 확산의 위험을 감소시킨다. 또한, 정확, 부정확하고 때때로 심근 손상을 줄 수 있으므로 관상 동맥의 외부 결찰 필요가 없다. 상행 대동맥 (29) <의 LV 크로스 클램핑에 카테터 기반 에반스 블루 주입을 결합하는 다른 방법,/ SUP>, 다른 이유로 바람직하지 않다. 클램핑는 LV에 에반스 블루 주입을 방해, 카테터를 안내 좌심실을 폐색. 또한, 압축 및 견인 힘은 LCMA 카테터 및 관동맥 풍선 malpositioning 부정확 AAR 측정 될 수 있습니다. LAD의 풍선 폐색이 LCMA에 카테터 위치를 안내 필요하기 때문에 또한, 좌심실에서 관상 동맥 충전은 관상 동맥에 LV에서 에반스 블루 항목을 방지, 제한됩니다.
그러나, 심근 구멍과 상행 대동맥 교차 클램핑 우수하지만,이 논문에서 제시 한 기술은 몇 가지주의 사항이 필요합니다. 로 장애물 안내 카테터를 통해 완전히 폐색 (중 하나) 관상 동맥을 방지 할 필요가있다. 이 워시 아웃 속도 및 압력을 모니터링함으로써 제어 될 수있다, 일반적으로 약간의 관상 소공으로부터 안내 카테터 후퇴를 방지 할 수있다. 불가피한 경우 GUID 시간을 단축보내고 카테터 프로토콜의 다른 부분에 의해 제조 가능한 관상 동맥에 위치된다. 또한, 풍선이 완전히 에반스 블루 주입하기 전에 대상 혈관을 폐색해야합니다.
에반스 블루 주입이 완료되면, VF를 유도하고 AAR에 에반스 블루 확산을 방지하기 위해 수축 풍선 카테터 탈퇴 전에 혈압을 해제 대정맥 정맥 절개. 케어는 부드럽게 단단히 LAD와 LCX 모두에서 에반스 블루의 확산을 허용, 관상 소공의 안내 카테터의 위치를주의해야한다. 관상 동맥에 제한된 흐름이 전신 순환에 에반스 블루 워시 아웃으로 이어질 수 있기 때문에 또한, 에반스 블루 주입 속도가 너무 높은해서는 안됩니다. 선택적 관상 동맥에 주입되지만, 전신 순환에 에반스 블루 확산을 완전히 방지 할 수 없다. 따라서, 다른 비 심장 조직의 조직 학적 분석 (예를 들어, spleeN, 신장은) 여전히 문제가 될 수 있습니다. AAR에 동시 TTC 공동 주입하기 전에 설명하지만, TTC는 풍선에 의해 방해 AAR의 부분에 도달하지 않는 한, 우리의 의견으로는 바람직하지 않다되었습니다. 또한, 이전의 분석 TTC는 경색 부분에 잔류 intravasal 혈액과 반응하여 비 경색 AAR 30의 적색과 중첩 할 수 있음을 보여준다. 이 기술의 미래의 애플리케이션은 체순환으로 혈액 흐름을 방해하여 비 심장 조직을 보호 할 수 있었다. 이는 대퇴 접근법을 통해 하강 흉부 대동맥 풍선 폐색에 의해 달성 될 수있다.
지금까지 심 초음파는 심장 혈관 연구에서 임상 치료 및 다양한 동물 모델 모두에서 심장 기능 평가를위한 초석이 남아있다. 그러나, 재래종 돼지의 가슴 모양, 흉부 심 초음파 (TTE)가 LV 9의 2 차원 장기 짧은 축보기로 제한됩니다. 따라서, 심장 volu저와 LVEF는 원통형 왼쪽 심실의 형태 (10)을지지 수정 된 심슨의 규칙, 같은 수학 근사치로 추정되어야한다. 그러나 MI 후 좌심실 재 형성의 결과로, 심장 크기가 변경됩니다. 따라서, 이러한 특정 형상 가정은 측정 (31)의 정확성 및 신뢰성을 감소 할 수 없다.
이 문제는 전체 좌심실 3D 이미지를 획득하기 위해 3 차원 초음파 검사를 사용하여 해결 될 수있다. 돼지에서 심 외막 3 차원 심 초음파에 의한 LVEF의 평가는 골드 표준 CMRI 24, 32와 우수한 상관 관계를 보여줍니다. 그러나,이 기준 측정을위한 AMI 유도 전에 수술을 필요로한다. 에 관계없이 접근, subxiphoidal 접근 대 즉, 열린 가슴, 심 외막 심 초음파에 대한 침습 수술은 12,33,34 심장 보호 것으로 나타났다. 병용 유착이 심 외막 echocardiogra를 렌더링 resternotomy를 방해폐쇄 가슴 AMI model.To의 기준 측정을위한 바람직하지 않은 PHY는 이러한 단점을 방지, 심장의 3D 이미지 3D 경식도 심 초음파 (3D-TEE)를 통해 얻을 수있다. 이 기술은 널리 사용, 휴대용 및 직렬 측정 및 전체 좌심실 용적의 시각화 수 있습니다. 또한, 신뢰성 비교적 저렴하고 안전하다.
이 부드럽게 식도 파열로 이어질 수 너무 많은 압력을 Zenker 게실에서 끝나는 및 적용하기 때문에, 입과 식도에 TEE 프로브를 삽입하는 것이 중요합니다. 위장과 심장의 해부학 적 관계는 남자와 다르다 때문에 또한, 돼지의 3D-TEE 지역 측정 (예를 들어, 변형, 조직 도플러 영상)을 허용하지 않고 볼륨 측정으로 제한됩니다. 원고에 제시된 데이터, AMI 후 EDV 칠일의 상승은 확인되지 않는다. 더 긴 추적 관찰 기간은 광범위하게 advers를 구동하는 데 필요한전자 리모델링, 몇 주에 증가 EDV로 이어지는 후속 11.
종래의 초음파 검사 달리, 어드미턴스 기반 PV 적당히 기준선 35 LV 볼륨 양을 과대 평가와 추적 루프 (24) 8 주 후. 그럼에도 불구하고, 상당히 좋은 상관 관계와 CMRI와 계약의 높은도 발견되었습니다. AMI 후 PV 루프 측정 몇 주베이스 라인에 비해 덜 정확하지만, LV 크기 및 파생 상품 본 계약 (LVEF)은 심장 기능 (35)의 종합 평가에 유용하다.
또한, PV 루프는 ESPVR 같은 고유 심근 속성에 대한 자세한 정보를 제공합니다. TTE와 TEE에서 지역 기능 측정 제한 및 심 외막 심 초음파 검사는베이스 라인에서 바람직하지 않다 때문에, PV 루프는 고유 심근 기능의 평가를위한 우아하고 안전한 기술을 제공합니다. ESPVR 경사의 감소 및 전형적인들 모두,V 0 hift 다른 치료법과 비교하기 위해 사용될 수있다. 이 고전적인 기능은 팬 허혈에서 생체 송곳니 마음의 고통에서 확인됩니다. 따라서, 지역 허혈 모델에서, AMI 모델처럼, 이러한 특정 특성은 심실 리모델링 및 지역 허혈이 가장 중요한 25,36,37있는 많은 요인에 기인 할 수있는, 항상 존재하지 않습니다.
적절한 데이터 수집의 경우, PV 루프를 취득 할 때 볼륨에 전도성을 변환하는 경우에는 부정맥이 존재하지 있는지 확인하는 것이 중요합니다. 부정맥이있는 경우는 심근을 자극하지 않도록 상기 PV 루프 카테터 재배치. 항 부정맥 약물의 투여 (예를 들어, 150-300 mg을 아미오다론)도 도움이 될 수 있습니다. 급성 심근 경색으로 인해 자주 부정맥 (예를 들어, 조기 심실 단지, bigemini)에 신뢰할 수 없습니다 후 단 몇 시간 내에 그 PV 루프 취득을 확인합니다. </ P>
약간 전진 또는 또한 PV 루프의 모양을 개선하는 데 도움이 될 수 LV로 또는 근육 벽에서 PV 루프 카테터를 후퇴. PV 루프 카테터 위치를 변경 한 후, 항상 가장 적절하게 배치 세그먼트가 선택되어 있는지 다시 확인.
결론적으로, 현재의 용지 진행 심부전 전염병의 부담을 감소시킬 새로운 치료법에 대한 평가의 추가 값을 갖는 전술 AMI 돼지 모델에서 심장 평가를위한 세 가지 방법을 소개한다.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 3-dimensional Transesophageal Echocardiography | |||
| iE33 ultrasound device | Philips | - | |
| X7-2t transducer | Philips | - | |
| Aquasonic® 100 ultrasound transmission gel | Parker Laboratories Inc. | 01-34 | Alternative product can be used |
| Battery handle type C (laryngoscope handle) | Riester | 12303 | |
| Ri-Standard Miller blade MIL 4 (laryngoscope blade) | Riester | 12225 | |
| Qlab 10.0 (3DQ Advanced) analysis software | Philips | - | |
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Pressure-volume loop acquisition | |||
| Cardiac defibrillator | Philips | ||
| 0.9% Saline | Braun | ||
| 8 F Percutaneous Sheath Introducer Set | Arrow | CP-08803 | Alternative product can be used |
| 9 F Radifocus® Introducer II Standard Kit | Terumo | RS*A90K10SQ | Alternative product can be used |
| 8 F Fogarty catheter | Edward Life Sciences | 62080814F | Alternative product can be used |
| 7 F Criticath™ SP5107H TD catheter (Swan-Ganz) | Becton Dickinson (BD) | 680078 | Alternative product can be used |
| Ultraview SL Patient Monitor and Invasive Command Module (external cardiac output device) | Spacelabs Healthcare | 91387 | Alternative product can be used |
| ADVantage system™ | Transonic SciSense | - | |
| 7 F Tetra-polar admittance catheter (7.0 VSL Pigtail / no lumen) | Transonic SciSense | - | |
| Multi-channel acquisition system (Iworx 404) | Iworx | - | |
| Labscribe V2.0 analysis software | Iworx | - | Alternative product can be used |
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Infarct size / area-at-risk quantification | |||
| Diathermy | - | Alternative product can be used | |
| Lebsch knife | - | Alternative product can be used | |
| Hammer | - | Alternative product can be used | |
| Bone marrow wax | Syneture | Alternative product can be used | |
| Klinkenberg scissors | - | Alternative product can be used | |
| Retractor | - | Alternative product can be used | |
| Surgical scissors | - | ||
| 7 F Percutaneous Sheath Introducer Set | Arrow | CP-08703 | Alternative product can be used |
| 8 F Percutaneous Sheath Introducer Set | Arrow | CP-08803 | Alternative product can be used |
| 7 F JL4 guiding catheter | Boston Scientific | H749 34357-662 | Alternative product can be used |
| 8 F JL4 guiding catheter | Boston Scientific | H749 34358-662 | Alternative product can be used |
| COPILOT Bleedback Control Valves | Abbott Vascular | 1003331 | Alternative product can be used |
| BD Connecta™ | Franklin Lakes | 394995 | Alternative product can be used |
| Contrast agent | Telebrix | ||
| Persuader 9 Steerable Guidewire 9 (0.014", 180 cm, straight tip), hydrophilic coating | Medtronic Inc. | 9PSDR180HS | Alternative product can be used |
| SAPPHIRE™ Coronary Dilatation Catheter (PTCA balloon suitable for the size of the particular coronary artery (2.75 - 3.25 mm)) | OrbusNeich | 103-3015 | Alternative product can be used |
| Evans Blue | Sigma-Aldrich | E2129-100G | Toxic. Alternative product can be used |
| 2,3,5-triphenyl-tetrazolium chloride (TTC) | Sigma-Aldrich | T8877-100G | Irritant. Alternative product can be used |
| 9 V Battery | - | - | |
| Ruler | - | - | |
| Photocamera | Sony | - | |
| ImageJ | National Institutes of Health | - | Alternative product can be used |
References
- Mosterd, A., Hoes, A. W. Clinical epidemiology of heart failure. Heart. 93 (9), 1137-1146 (2007).
- Nichols, M., et al. European Cardiovascular Disease Statistics. , Brussels. (2012).
- Krumholz, H. M., et al. Reduction in Acute Myocardial Infarction Mortality in the United States. JAMA. 302 (7), 767-773 (2010).
- Go, A. S., et al. Heart disease and stroke statistics - 2013 update: A Report from the American Heart Association. Circulation. 127 (1), (2013).
- Koudstaal, S., et al. Myocardial infarction and functional outcome assessment in pigs. J. Vis. Exp. (86), e51269 (2014).
- Chareonthaitawee, P., Christian, T. F., Hirose, K., Gibbons, R. J., Rumberger, J. A. Relation of initial infarct size to extent of left ventricular remodeling in the year after acute myocardial infarction. J. Am. Coll. Cardiol. 25 (3), 567-573 (1995).
- Yellon, D. M., Hausenloy, D. J. Myocardial reperfusion injury. N. Engl. J. Med. 357 (11), 1221-1235 (2007).
- Suzuki, Y., Lyons, J. K., Yeung, A. C., Ikeno, F. In vivo porcine model of reperfused myocardial infarction: In situ double staining to measure precise infarct area/area at risk. Catheter Cardiovasc. Interv. 71 (1), 100-107 (2008).
- Weidemann, F., et al. Myocardial function defined by strain rate and strain during alterations in inotropic states and heart rate. Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 283 (2), H792-H799 (2002).
- Mercier, J. C., et al. Two-dimensional echocardiographic assessment of left ventricular volumes and ejection fraction in children. Circulation. 65 (5), 962-969 (1982).
- De Jong, R., et al. Cardiac Function in a Long-Term Follow-Up Study of Moderate and Severe Porcine Model of Chronic Myocardial Infarction. Biomed. Res. Int. 2015, 1-11 (2015).
- Van Hout, G. P. J., et al. Invasive surgery reduces infarct size and preserves cardiac function in a porcine model of myocardial infarction. J. Cell. Mol. Med. , 2655-2663 (2015).
- Meybohm, P., et al. Assessment of left ventricular systolic function during acute myocardial ischemia: A comparison of transpulmonary thermodilution and transesophageal echocardiography. Minerva Anestesiol. 77 (2), 132-141 (2011).
- Gruenewald, M., et al. Visual evaluation of left ventricular performance predicts volume responsiveness early after resuscitation from cardiac arrest. Resuscitation. 82 (12), 1553-1557 (2011).
- Bolli, R., Becker, L., Gross, G., Mentzer, R., Balshaw, D., Lathrop, D. A. Myocardial protection at a crossroads: The need for translation into clinical therapy. Circ. Res. 95 (2), 125-134 (2004).
- Timmers, L., et al. Exenatide reduces infarct size and improves cardiac function in a porcine model of ischemia and reperfusion injury. J. Am. Coll. Cardiol. 53 (6), 501-510 (2009).
- Csonka, C., et al. Measurement of myocardial infarct size in preclinical studies. J. Pharmacol. Toxicol. Methods. 61 (2), 163-170 (2010).
- Law, R., Katzka, D. A., Baron, T. H. Zenker's Diverticulum. Clin. Gastroenterol. Hepatol. 12 (11), 1773-1782 (2014).
- Philips Healthcare. QLAB 10.0 Quick Card: 3DQ and 3DQ Adv measurements guide. , (2013).
- Transonic. ADV500 Pressure-Volume Measurement System Use and Care Manual, version 5. , (2006).
- Schramm, W. Is the cardiac output obtained from a Swan-Ganz catheter always zero? J. Clin. Monit. Comput. 22 (6), 431-433 (2008).
- iWorx. LabScribe 3: Software Manual for Pressure-Volume Analyses. , (2014).
- Hueper, W. C., Ichniowski, C. T. Toxicopathologic studies on the dye T-1824. Arch. Surg. 48 (1), 17-26 (1944).
- Van Hout, G. P. J., et al. Admittance-based pressure-volume loops versus gold standard cardiac magnetic resonance imaging in a porcine model of myocardial infarction. Physiol. Rep. 2 (4), 1-9 (2014).
- Burkhoff, D., Mirsky, I., Suga, H. Assessment of systolic and diastolic ventricular properties via pressure-volume analysis: a guide for clinical, translational, and basic researchers. Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. Heart Circ. Physiol. 289 (2), H501-H512 (2005).
- Frangogiannis, N. G. The inflammatory response in myocardial injury, repair, and remodelling. Nat. Rev. Cardiol. 11 (5), 255-265 (2014).
- Fishbein, M., et al. Early phase acute myocardial infarct size quantification: validation of the triphenyl tetrazolium chloride tissue enzyme staining technique. Am. Heart. J. 101 (5), 593-600 (1981).
- Arslan, F., et al. Treatment with OPN-305, a humanized anti-toll-like receptor-2 antibody, reduces myocardial ischemia/reperfusion injury in pigs. Circ. Cardiovasc. Interv. 5 (2), 279-287 (2012).
- Meyns, B., Stolinski, J., Leunens, V., Verbeken, E., Flameng, W. Left ventricular support by Catheter-Mountedaxial flow pump reduces infarct size. J. Am. Coll. Cardiol. 41 (7), 1087-1095 (2003).
- Khalil, P. N., et al. Histochemical assessment of early myocardial infarction using 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride in blood-perfused porcine hearts. J. Pharmacol. Toxicol. Methods. 54 (3), 307-312 (2006).
- Gardner, B. I., Bingham, S. E., Allen, M. R., Blatter, D. D., Anderson, J. L. Cardiac magnetic resonance versus transthoracic echocardiography for the assessment of cardiac volumes and regional function after myocardial infarction: an intrasubject comparison using simultaneous intrasubject recordings. Cardiovasc. Ultrasound. 7, 38 (2009).
- Santos-Gallego, C., et al. 3D-Echocardiography Demonstrates Excellent Correlation With Cardiac Magnetic Resonance for Assessment of Left Ventricular Function and Volumes in a Model of Myocardial Infarction. J. Am. Coll. Cardiol. 59 (13), E1564 (2012).
- Keith Jones,, W,, et al. Peripheral nociception associated with surgical incision elicits remote nonischemic cardioprotection via neurogenic activation of protein kinase C signaling. Circulation. 120, Suppl 1. S1-S9 (2009).
- Gross, G. J., Baker, J. E., Moore, J., Falck, J. R., Nithipatikom, K. Abdominal Surgical Incision Induces Remote Preconditioning of Trauma (RPCT) via Activation of Bradykinin Receptors (BK2R) and the Cytochrome P450 Epoxygenase Pathway in Canine Hearts. Cardiovasc. Drugs Ther. 25 (6), 517-522 (2011).
- Van Hout, G. P. J., de Jong, R., Vrijenhoek, J. E. P., Timmers, L., Duckers, H. J., Hoefer, I. E. Admittance-based pressure-volume loop measurements in a porcine model of chronic myocardial infarction. Exp. Physiol. 98 (11), 1565-1575 (2013).
- Sunagawa, K., Maughan, W. L., Burkhoff, D., Sagawa, K. Left ventricular interaction with arterial load studied in isolated canine ventricle. Am. J. Physiol. 245 (5 Pt 1), H773-H780 (1983).
- Steendijk, P., Baan, J., Der Velde, E. T. V. an, Baan, J. Effects of critical coronary stenosis on global systolic left ventricular function quantified by pressure-volume relations during dobutamine stress in the canine heart. J. Am. Coll. Cardiol. 32 (3), 816-826 (1998).
