Introduction
Los aerogeles son una clase de materiales porosos que se puede preparar usando una variedad de precursores que van desde inorgánico (tal como sílice, titania, zirconia y otros), sintéticos (tales como formaldehído resorcinol, poliuretano y otros) o biopolímeros (polisacáridos, proteínas y otros ) 2. Lo que los diferencia de los materiales porosos convencionales es su capacidad de poseer simultáneamente todas las tres características; es decir, el área de superficie de alta y ultra baja densidad y distribución de tamaño de poro mesoporoso (es decir, tamaños de poro de 2-50 nm). Con las características antes mencionadas, los aerogeles se aplican ampliamente en los campos de aislamiento, la biomedicina, la catálisis, adsorción y absorción de aplicaciones, productos farmacéuticos y nutracéuticos 2. Teniendo en cuenta las posibilidades anteriores, la producción de sistemas de gel biopolímero y su posterior transformación de los aerogeles se abre una multitud de oportunidades hacia un alto valor añadido a base de biomateriales. Tal esfuerzo se recoge en este estudio utilizando pectina amidada como un ejemplo.
Los aerogeles se producen típicamente por la técnica de sol-gel. Los geles son sistemas que comprenden líquido atrapado en una matriz y se pueden preparar por unión covalente, iónica, pH inducida, cruz térmica o crio vincular 3. Para este sistema específico, utilizamos reticulación iónica, es decir, un catión bivalente (por ejemplo, calcio) para reticular las cadenas de biopoliméricos juntos. Para llevar a cabo la reticulación iónica controlable de biopolímeros tales como pectina o alginato amidado, se puede utilizar el método de difusión o el método de ajuste interno 4. En el método de difusión, la gelificación se produce en primer lugar en la capa exterior, seguido por la propagación de difusión, como los cationes de la solución se difunden exterior en una pectina amidada o de gotas de alginato o capa 4. En el método de ajuste interno, la forma insoluble del agente de reticulación se dispersa homogéneamente en el SOLUTIO biopolímeron y cationes son liberados mediante el inicio de un cambio de pH 4,5,6. Sin embargo, ambas técnicas se enfrentan a un problema con respecto a la homogeneidad de la gel final cuando se produce en losa o forma monolítica. Este trabajo demuestra el uso de CO 2 a alta presión (5 MPa) para la producción de hidrogeles pectina amidada hacer aún más trabajos anteriores sobre geles de alginato 3,7. En breve, es una técnica de gelificación ajuste interno que utiliza CO a presión 2 para reducir el pH en lugar de ácidos débiles para producir geles homogéneos. Con un aumento en la presión, la solubilidad del dióxido de carbono en agua aumenta acompañada de una disminución del pH a 3,0 8. Esto hace que el carbonato de calcio para solubilizar, la liberación de los iones de calcio. Los iones de calcio se reticulan con el biopolímero pectina amidada para producir hidrogeles. Geles homogéneos estable por debajo de las concentraciones de biopolímero muy bajas (0,05% en peso) pueden ser producidos usando esta técnica 7.
como Gelation se lleva a cabo en un medio acuoso, se requiere cambio de disolvente a un disolvente orgánico debido a una brecha de miscibilidad en el sistema de CO 2 / agua. alcoholes Típicamente bajo peso molecular (metanol / etanol / isopropanol) y cetonas (acetona) se pueden utilizar para el proceso de intercambio de disolvente. Sin embargo, el remojo directa en un baño con etanol puro o en otros solventes orgánicos conduce a la contracción irreversible significativa. Para evitar este inconveniente, intercambio de disolvente se realiza por etapas 5,9. Cuando la concentración de disolvente en el interior del gel alcanza> 98%, el disolvente orgánico se seca con CO2 supercrítico (12 MPa) dejando tras de un aerogel.
Protocol
1. Preparación de la solución de pectina amidada
- Mezclar 20 g de pectina amidada con 980 g de agua (2,0%). El grado de amidación es 25% en peso.
- Homogeneizar la solución con un agitador de alta velocidad (10.000 rpm) durante 2 minutos para obtener una solución viscosa homogénea.
- Medir el pH utilizando tiras de pH o pH-metro. Si el pH es inferior a 6,5, se valora con NaOH 0,5 M para neutralizar la solución (a pH 7,0).
- Añadir carbonato de calcio en una proporción de 0,1825 g por gramo de pectina amidada seco (q = 1). "Q" indica el grado de reticulación.
- Para 1 kg de solución de pectina amidada 2,0% en peso, añadir 3,65 g de carbonato de calcio (q = 1) 7 por 20,0 g de pectina seca.
- Para una mayor reticulación, añadir 0,3650 g de carbonato de calcio por gramo de pectina amidada seco (q = 2).
2. Producción de hidrogeles
- Homogeneizar la mezcla de carbonato de pectina / calcio amidado usando el homogeneizador de alta velocidad (10.000 rpm) para obtener unadispersión homogénea blanco.
- Transferir la suspensión en moldes de polipropileno abiertos o platos de Petri de vidrio.
- Coloque los moldes en el autoclave de alta presión. Sellar el autoclave.
- Presurizar el autoclave con CO gaseoso 2 hasta 5 MPa a temperatura ambiente. Consulte la Gurikov et al. 7 para más información. Mantener la presión durante 24 horas.
- despresurizar lentamente el autoclave a 0,2 MPa / min.
- Abrir el autoclave y retirar los moldes. Retire los hidrogeles de los moldes al traspasarlas. Si es necesario, use una espátula.
3. Procedimiento de intercambio de disolvente
- Preparar 10 g de 10:90 (w / w) de etanol / agua por gramo de mezcla de hidrogel.
- Sumergir los hidrogeles en el 10:90 (w / w) mezcla de etanol / agua durante 12 horas.
- Continuar este proceso con concentraciones crecientes de etanol, es decir, de 10:90 (w / w) mezcla de etanol / agua a 30:70 (w / w) de etanol / agua mezcla. Después de 12 horas, traslado al 5Doce y cincuenta (w / w) mezcla de etanol / agua, después a 70:30 (12 horas), a continuación, 90:10 (12 hr) y una solución de etanol y después a 100% (12 h).
- Remojar el gel adicionalmente en etanol puro de manera que la concentración final en el interior del gel es más de 98% (w / w). Medir la concentración utilizando el medidor de densidad. Alcogel está ahora listo para CO2 supercrítico secado.
4. La producción de aerogeles por CO2 supercrítico secado
- Colocar las muestras en el mismo autoclave de alta presión utilizado para la preparación del hidrogel (véase el paso 2.3).
- Llenar el autoclave con etanol adicional (2-10% del volumen de autoclave) para evitar la evaporación del disolvente prematura de los geles. no se requiere la inmersión completa de gel en el disolvente.
- Sellar el autoclave. Encender la calefacción en autoclave. Ajuste la temperatura de trabajo del autoclave a 323 K. presurizar el autoclave con dióxido de carbono a 12 MPa utilizando un compresor o bomba.
- Periódicamente reemplazar el CO2en el interior del autoclave 10,11 con fresco CO 2 manteniendo la presión constante. Se requieren 6-7 volúmenes de residencia durante un periodo de 6 horas. Consulte la Gurikov et al. 7 para más información.
- despresurizar lentamente el autoclave a 0,2 MPa / min.
- Abrir el autoclave y recoger el aerogel. Almacenar el aerogel en un desecador o un recipiente sellado.
Representative Results
Los hidrogeles típicos obtenidos después de la etapa de gelificación con un mayor grado de reticulación (q = 2) (como se indica en la sección Protocolo 2) se muestran en la Figura 1. Las muestras de la izquierda (muestra A y B) son el 2% en peso y 1% en peso geles de pectina obtenidos por gelificación inducida por CO2. Al disminuir la concentración de biopolímero (0,5% en peso o inferior), los geles se vuelven transparentes (muestra C). Una mayor reducción en la concentración de biopolímero (0,25%) también produce hidrogeles estables (muestra D), pero estos geles son muy frágiles y pueden romperse durante la manipulación. Las burbujas observadas dentro de los hidrogeles se crean durante la despresurización cuando el CO2 disuelto sale del sistema de agua de gel debido a la disminución de la solubilidad del CO2.
Las características de aerogel pectina amidada se presentan en la Tabla 1. Los aerogeles obtenidos son ultra-poroso con baja den sidad (tan bajo como 0,013 g / cm 3) mide como la relación entre la masa del aerogel y su volumen. El área superficial se mide mediante la adsorción de nitrógeno. Para aerogeles de pectina, se produjo una superficie específica entre 350 - 500 m 2 / g. El volumen de poros de tamaños de poro en el rango de 4 a 150 nm se mide por el modelo de Kelvin de llenado de poros usando nitrógeno (método BJH). El volumen de poros para los aerogeles de pectina amidada fue entre 3-7 cm 3 / g para tamaños de poros entre 4 y 150 nm.
Figura 1. Los hidrogeles de pectina amidada con mayor grado de reticulación (q = 2) Arriba a la izquierda: 2% en peso (muestra A);. arriba a la derecha: 1% en peso (muestra B); abajo a la izquierda: 0,5% en peso (muestra C); abajo a la derecha: 0,25% en peso (muestra D). Los geles se vuelven transparentes con la disminución de la concentración de biopolímero. Las burbujas se producen durante CO 2 despresurización.https://www.jove.com/files/ftp_upload/54116/54116fig1large.jpg "target =" _ blank "> Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.
| Concentración de pectina [% en peso] | La reticulación grado q | Densidad aparente [g / cm3] | Superficie específica [m 2 / g] | El volumen específico de poro [cm 3 / g] | Tamaño de poro medio (diámetro) [nm] |
| 2.00 | 1 | 0,081 | 502 | 4.1 | 14 |
| 1.00 | 1 | 0,044 | 491 | 7.1 | 27 |
| 0.50 | 1 | 0,035 | 357 | 3.8 | 27 |
| 0.25 | 1 0,013 | 335 | 4.9 | 41 | |
| 2.00 | 2 | 0,069 | 447 | 3.1 | 13 |
| 1.00 | 2 | 0,048 | 441 | 3.6 | 26 |
| 0.50 | 2 | 0,030 | 429 | 5.8 | 25 |
| 0.25 | 2 | 0,017 | 347 | 5.0 | 24 |
Tabla 1. Características de los aerogeles de pectina amidada.
Discussion
Mediante el uso de la técnica de gelificación inducida por CO 2, se puede eliminar la necesidad de sustitutos químicos (por ejemplo, ácido acético o glucono delta-lactona (GDL)) requerida para inducir la reticulación del biopolímero. Las áreas superficiales de los aerogeles de pectina amidada están en los intervalos superiores de valores de la literatura 5, sin embargo, los volúmenes de poros son mucho mayores que las que se presentan en la literatura 5. Volúmenes de poro más altos también se observaron para los aerogeles de alginato preparadas por el CO 2 gelificación inducida 7. Sin embargo, queda por verificar si la razón de este alto volumen de poros (4-150 nm de poro rango de tamaño) se debe a la técnica de gelificación o una propiedad inherente de los biopolímeros anteriormente no abordados en la literatura. Aerogeles pectina han sido reportados en la literatura que poseen propiedades 12 y aerogeles de alginato preparadas por esta técnica superinsulating también poseen conductividades térmicas en el rango superinsulating3,7. Por lo tanto, los aerogeles de pectina amidada producidos por esta técnica también se pueden prever que poseen propiedades superinsulating.
La tasa de despresurización en la Sección 2 del Protocolo es un paso importante en la preparación de hidrogel. despresurización rápida puede conducir a una mayor macroporosidad de los geles. Este fenómeno se puede aplicar para aplicaciones de ingeniería de tejidos, donde la macroporosidad del material con la interconectividad es una característica importante para el crecimiento y proliferación de células 13,14. Además, el grado de reticulación en el Protocolo Sección 1 juega un papel importante en la sinéresis y la propiedad de hinchamiento de los hidrogeles pectina amidada. Esto es similar a los hidrogeles de alginato cuyo comportamiento de hinchamiento está influenciada por la concentración de agente de reticulación, así 15. De esta manera aerogeles hechas por la pectina amidada también pueden ajustarse para poseer propiedades superabsorbentes similares a los reportados para los aerogeles de alginato 16.
<clase p = "jove_content"> Mediante el uso de la gelificación inducida por CO 2 teniendo en cuenta pectina amidada (o alginato) como el sistema primario, aún más la diversidad puede ser incorporado en los aerogeles mediante la introducción de diferentes agentes transversal y combinaciones de biopolímero que une. Varios carbonatos de metales (por ejemplo, zinc, níquel, cobalto, cobre, estroncio, bario) se podría utilizar para reticulación 3, donde los cationes pueden ser liberados por disminución del pH en un medio acuoso con CO a presión 2 (3-5 MPa). Sin embargo, las sales insolubles de algunos de estos cationes no podrán formar dispersiones estables para las concentraciones de biopolímero más bajos y pueden asentarse en la parte inferior que conduce a geles no homogéneas. Este es un problema general con el método de ajuste de gelificación interna que incluye CO 2 gelificación inducida por 3 y por lo tanto, la facilidad de uso de la técnica para una aplicación debe ser evaluada en una base de caso por caso.Varias mezclas preparadas usando bio soluble en aguapolímeros tales como almidón, carragenina, metilo y carboxi metil celulosa, goma de gelano, la lignina, gelatina y otros; polímeros sintéticos solubles en agua tales como polietilenglicol (PEG), alcohol polivinílico (PVA), Pluronic P-123 y otros; y soluble en agua precursores inorgánicos tales como silicato de sodio pueden ser también mezclados con pectina amidada para producir aerogeles híbridos similares a alginato 2 con propiedades sintonizables.
Como supercrítico CO 2 de secado (SCCO 2 de secado) es un paso por excelencia en aerogel producción, cualquier combinación de etapas de pre-procesamiento, tales como intercambio de disolvente y el secado utilizando CO 2 17,18 o gelificación, intercambio de disolvente y el secado utilizando CO 2 7 podría proporcionar una ventaja clara de procesamiento. La ventaja se concibe como integrado proceso de un solo recipiente: donde dispersiones de biopolímero se pueden convertir en aerogeles de biopolímeros utilizando CO 2 como el principal medio de procesamiento en una sola autoclave. porciertas aplicaciones farmacéuticas, también se puede prever la realización de una de cuatro pasos: la gelificación, de intercambio de disolvente, el secado supercrítico y activo proceso de componente de carga 5,19 en un solo autoclave usando CO 2 como el medio de procesamiento. Es necesaria para la liberación dirigida de fármacos 20 post tratamiento como capa protectora de aerogeles cargadas con el fármaco en ciertos casos.
Para concluir, el presente trabajo demuestra el uso de CO 2 a presión para la gelificación de sistemas basados en pectina amidada. Además, se prevé el uso de CO a presión 2 como un medio común para precursor a la conversión de producto para aplicaciones de destino en una única autoclave.
Disclosures
Los autores declaran que no tienen intereses financieros en competencia.
Acknowledgments
El apoyo financiero de la DFG (proyectos SM 82 / 13-1) Se agradece.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Equipment | |||
| Ultraturrax homogenizer | IKA, Germany | T 25 Digital | |
| Polypropylene molds | TH. Geyer, Germany | 9,033,201 | |
| High pressure autoclave | Ernst Haage, Germany | custom made | Setup constuction done in-house |
| Compressor | Andreas Hofer | MKZ 185-40 | Setup constuction done in-house |
| Nitrogen adsorption | Quantachrome | Nova 4000e | |
| Density meter | Anton Paar | DMA 4000 | |
| Chemicals | |||
| Amidated pectin | Herbstreith and Fox, Germany | CU 025 | CAS # 56645-02-4; provided by company for research purposes |
| Sodium Hydroxide | Sigma Aldrich, Germany | S8045 | CAS # 1310-73-2; required only in case the pectin solution needs to be neutralized to pH 6.5-7.5 |
| Calcium carbonate | Magnesia GmbH, Germany | 4421 Calcium carbonat, leicht, präzipitiert, EP, E170 | CAS # 471-34-1 |
| Ethanol, 99.8% | Sigma Aldrich, Germany | 32205 | CAS # 64-17-5 |
| Carbon dioxide, 99.9% | AGA Gas GmbH, Germany | CAS # 124-38-9; in-house tank available (3 ton) | |
| Deionised Water | CAS # 7732-18-5; available in-house (6.4-7.0 pH) |
References
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