Introduction
Aerogel is een klasse van poreuze materialen die kunnen worden bereid met behulp van verschillende precursors variërend van anorganisch (zoals silica, titaanoxide, zirkoniumoxide en anderen), kunststof (zoals resorcinol formaldehyde, polyurethaan en anderen) of biopolymeren (polysachariden, proteïnen en anderen ) 2. Welke hen onderscheidt van de conventionele poreuze materialen is hun vermogen om gelijktijdig alle drie kenmerken bezitten; namelijk groot oppervlak, ultra-lage dichtheid en mesoporeuze poriëngrootteverdeling (dwz poriegrootten 2-50 nm). Met de eerdergenoemde kenmerken worden aerogels schaal toegepast op het gebied van isolatie, medische biologie, katalyse, adsorptie en absorptie toepassingen, farmaceutische producten en nutraceuticals 2. Rekening houdend met deze mogelijkheden, de productie van biopolymeer gel en hun daaropvolgende omzetting in aerogels opent tal van mogelijkheden aan hoge toegevoegde waarde biobasismaterialen. Zo'n poging wordt opgenomen in dit onderzoek gebruikt geamideerde pectine als voorbeeld.
Aërogels worden typisch geproduceerd door de sol-gel techniek. Gels zijn systemen bestaande uit vloeibare ingevangen in een matrix en kunnen worden bereid door covalente, ionische, pH geïnduceerde, thermische of cryo verknopende 3. Voor deze specifieke systeem, maken we gebruik van ionische verknoping, dat wil zeggen, een bivalent kation (bijvoorbeeld calcium) aan biopolymere ketens elkaar verknopen. Om controleerbare ionische crosslinking van biopolymeren zoals geamideerd pectine of alginaat uitvoert, kan men de diffusie methode of de methode interne instelling 4 gebruiken. In de diffusiemethode, gelering optreedt eerst in de buitenste laag, gevolgd door diffusie propagatie, zoals de kationen diffunderen vanuit de oplossing in een geamideerd pectine of alginaat druppel of laag 4. In de interne instelmethode is de onoplosbare vorm van de crosslinker homogeen gedispergeerd in het biopolymeer solution en kationen worden vrijgegeven door het initiëren van een pH-verandering 4,5,6. Echter, beide technieken geconfronteerd met een probleem met betrekking tot de homogeniteit van de uiteindelijke gel indien zij in plaat of monolithische vorm. Dit werk demonstreert het gebruik van hoge druk CO 2 (5 MPa) voor de productie van geamideerde pectine hydrogels bouwen verder op eerdere werken over alginaatgels 3,7. Kortom, het een intern instelling gelering techniek die druk CO 2 gebruikt om de pH in plaats van zwakke zuren verlagen homogene gels. Met een toename van de druk, de oplosbaarheid van kooldioxide in water stijgt gepaard met een verlaging van de pH tot 3,0 8. Hierdoor calciumcarbonaat oplosbaar, loslaten van de calciumionen. De calciumionen verknopen met de geamideerde pectine biopolymeer hydrogelen verkregen. Stabiele homogene gels tot zeer lage biopolymeer concentratie (0,05 gew%) worden geproduceerd met behulp van deze techniek 7.
zoals gelation vindt plaats in een waterig medium, wordt oplosmiddeluitwisseling een organisch oplosmiddel vereist wegens een mengbaarheid gat in het CO 2 / watersysteem. Typisch laagmoleculaire alcoholen (methanol / ethanol / isopropanol) en ketonen (aceton) kan worden gebruikt voor de oplosmiddel uitwisseling. Echter direct onderdompelen in een bad met zuiver ethanol of andere organische oplosmiddelen leidt tot aanzienlijke irreversibele krimp. Om dit nadeel te voorkomen, wordt stapsgewijs oplosmiddel uitwisseling uitgevoerd 5,9. Wanneer het oplosmiddel concentratie in de gel> 98% bereikt, wordt het organische oplosmiddel gedroogd met superkritisch CO2 (12 MPa) met achterlating van een aërogel.
Protocol
1. Bereiding van Geamideerde Pectine voorraadoplossing
- Meng 20 g geamideerd pectine met 980 g water (2,0 gew%). De amideringsgraad is 25 gew%.
- Homogeniseren van de oplossing met een hoge snelheid menger (10.000 rpm) gedurende 2 min tot een homogene viskeuze oplossing te verkrijgen.
- Meet de pH met behulp van pH strips of pH meter. Als de pH lager dan 6,5, titreer met 0,5 M NaOH oplossing (tot pH 7,0) geneutraliseerd.
- Voeg calciumcarbonaat in een verhouding van 0,1825 g per gram droge geamideerd pectine (q = 1). "Q" duidt de mate van verknoping.
- Voor 1 kg 2,0 gew% geamideerd pectine oplossing, voeg 3,65 g calciumcarbonaat (q = 1) 7 per 20,0 g droog pectine.
- Voor grotere verknoping, voeg 0,3650 g calciumcarbonaat per gram droge geamideerd pectine (q = 2).
2. Productie van Hydrogels
- Homogeniseer de geamideerde pectine / calciumcarbonaat mengsel met behulp van de hoge snelheid homogenisator (10.000 rpm) om een te verkrijgenwitte homogene dispersie.
- Breng de suspensie in open polypropyleen gietvormen of glazen petrischaaltjes.
- Plaats de vormen in de hoge druk autoclaaf. Sluit de autoclaaf.
- Druk van de autoclaaf met gasvormig CO 2 tot 5 MPa bij kamertemperatuur. Raadpleeg Gurikov et al. 7 voor meer informatie. Handhaaf de druk gedurende 24 uur.
- drukloos langzaam de autoclaaf bij 0,2 MPa / min.
- Open de autoclaaf en verwijder de mallen. Verwijder de hydrogelen uit de vorm door ze om. Gebruik indien nodig een spatel.
3. Solvent Exchange Procedure
- Bereid 10 g 10:90 (w / w) ethanol / watermengsel per gram hydrogel.
- Dompel het hydrogels in 10:90 (w / w) ethanol / water mengsel gedurende 12 uur.
- Herhaal dit proces met toenemende concentraties ethanol, dwz van 10:90 (w / w) ethanol / watermengsel tot 30:70 (w / w) ethanol / watermengsel. Na 12 uur, transfer naar 500:50 (w / w) ethanol / water mengsel, vervolgens 70:30 (12 uur), vervolgens 90:10 (12 uur) en vervolgens tot 100% ethanoloplossing (12 uur).
- Laat de gel verder in zuivere ethanol zodat de uiteindelijke concentratie in de gel is meer dan 98% (w / w). Meet de concentratie met de dichtheidsmeter. De Alcogel is nu klaar voor superkritisch CO2 drogen.
4. Productie van Aerogels door superkritisch CO 2 Drogen
- Plaats de monsters in dezelfde hogedrukautoclaaf gebruikt hydrogel preparaat (zie stap 2,3).
- Vul de autoclaaf met extra ethanol (2-10% van de autoclaaf volume) om voortijdige oplosmiddelverdamping uit de gels. Volledige onderdompeling van gel in het oplosmiddel is niet vereist.
- Sluit de autoclaaf. Schakel de autoclaaf verwarmen. Stel de autoclaaf werktemperatuur tot 323 K. Breng het autoclaaf met kooldioxide tot 12 MPa met behulp van een compressor of pomp.
- Periodiek worden vervangen de CO 2binnen de autoclaaf 10,11 verse CO 2 waarbij de druk constant. 6-7 residence volumes dienen gedurende 6 uur. Raadpleeg Gurikov et al. 7 voor meer informatie.
- drukloos langzaam de autoclaaf bij 0,2 MPa / min.
- Open de autoclaaf en het verzamelen van de aerogel. Bewaar de aerogel in een exicator of een verzegelde container.
Representative Results
De typische hydrogels verkregen na gelering stap met hogere verknopingsgraad (q = 2) (zoals beschreven in protocol punt 2) getoond in figuur 1. De monsters links (monster A en B) zijn de 2 gew% en 1 gew% pectine gels verkregen door CO 2 geïnduceerde gelering. Door verlaging van de biopolymeer concentratie (0,5 gew% of minder), de gels transparant worden (monster C). Verdere verlaging van de biopolymeer concentratie (0,25 gew%) levert ook stabiele hydrogels (monster D) maar deze gels zijn zeer kwetsbaar en kunnen openbarsten bij het hanteren. De belletjes waargenomen binnen de hydrogels worden tijdens drukverlaging bij de opgeloste CO 2 laat de gel watersysteem vanwege de verminderde CO 2 oplosbaarheid.
Het geamideerde pectine aerogel kenmerken zijn weergegeven in tabel 1. Het verkregen aerogel is uiterst poreus lage den sity (zo laag als 0,013 g / cm 3) gemeten als de verhouding tussen de massa van de aërogel en het volume. Het oppervlak wordt gemeten volgens de stikstofadsorptiemethode. Voor pectine aerogels, het gaf een specifiek oppervlak van 350 - 500 m 2 / g. Het porievolume van poriën in het traject 4-150 nm wordt gemeten door het Kelvin model van porievulling gebruik van stikstof (BJH-methode). Het poriënvolume van het geamideerde pectine aerogels was tussen 3-7 cm 3 / g voor poriegroottes tussen 4 en 150 nm.
Figuur 1. Geamideerde pectine hydrogels met een hogere verknopingsgraad (q = 2) Linksboven: 2 wt% (Monster A). Rechtsboven: 1 gew% (Monster B); linksonder: 0,5 gew% (Monster C); rechtsonder: 0,25 gew% (Monster D). Gels worden transparant met afnemende biopolymeerconcentratie. De belletjes worden geproduceerd tijdens CO 2 drukverlaging.https://www.jove.com/files/ftp_upload/54116/54116fig1large.jpg "target =" _ blank "> Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.
| Pectine concentratie [wt%] | Verknopingsgraad q | Bulk dichtheid [g / cm3] | Specifiek oppervlak [m2 / g] | Specifieke poriënvolume [cm 3 / g] | Gemiddelde poriegrootte (diameter) [nm] |
| 2.00 | 1 | 0,081 | 502 | 4.1 | 14 |
| 1.00 | 1 | 0,044 | 491 | 7.1 | 27 |
| 0.50 | 1 | 0,035 | 357 | 3.8 | 27 |
| 0.25 | 1 0,013 | 335 | 4.9 | 41 | |
| 2.00 | 2 | 0,069 | 447 | 3.1 | 13 |
| 1.00 | 2 | 0,048 | 441 | 3.6 | 26 |
| 0.50 | 2 | 0,030 | 429 | 5.8 | 25 |
| 0.25 | 2 | 0.017 | 347 | 5.0 | 24 |
Tabel 1. Kenmerken van het geamideerde pectine aerogels.
Discussion
Via de CO 2 geïnduceerde gelering techniek kan men de noodzaak van chemische vervangingsmiddelen (bijvoorbeeld azijnzuur of glucono-delta-lacton (GDL)) vereist voor het induceren van de verknoping van het biopolymeer elimineren. De oppervlakten van het geamideerde pectine aerogel is in de hogere bereiken van literatuurwaarden 5 echter de poriënvolumes zijn veel hoger dan die welke in de literatuur 5. Grotere poriënvolume werden ook waargenomen voor alginaat aërogels bereid door CO 2 geïnduceerde gelering 7. Echter nog worden nagegaan of de reden voor deze hoge poriënvolume (4-150 nm poriegrootte bereik) is het gevolg van de gelering techniek of een inherente eigenschap van de biopolymeren niet eerder in de literatuur behandeld. Pectine aerogels zijn gemeld in de literatuur te bezitten superisolerende eigenschappen 12 en alginaat aerogels bereid door deze techniek ook beschikken over thermische geleidbaarheid in de superisolerende range3,7. Daarom kan de geamideerde pectine aerogels door deze techniek ook te overwegen superisolerende eigenschappen bezitten.
De snelheid van drukverlaging in Protocol Deel 2 is een belangrijke stap in de hydrogel voorbereiding. Snelle drukverlaging kan leiden tot verhoogde macroporositeit van de gels. Dit fenomeen kan worden toegepast voor weefselregeneratie toepassingen waarbij macroporositeit van het materiaal met interconnectiviteit is een belangrijk kenmerk voor de groei en proliferatie van cellen 13,14. Daarnaast is de verknoping graad in Protocol Deel 1 speelt een belangrijke rol in de synerese en zwelling eigendom van de geamideerde pectine hydrogels. Dit is vergelijkbaar met alginaat hydrogelen waarvan zweigedrag wordt beïnvloed door de crosslinker concentratie en 15. Daarbij aerogels door geamideerd pectine kan ook worden afgestemd op superabsorberend eigenschap vergelijkbaar met die van alginaat aërogels 16 bezitten.
<p class = "jove_content"> Met behulp van de CO 2 geïnduceerde gelering overweegt geamideerd pectine (of alginaat) als het primaire systeem, kan verder diversiteit in de aerogels worden opgenomen door de invoering van verschillende verknopingsmiddelen en biopolymeer combinaties. Verscheidene metaalcarbonaten (bijvoorbeeld zink, nikkel, kobalt, koper, strontium, barium) kunnen worden gebruikt voor verknoping 3, waarbij kationen kunnen worden vrijgegeven door pH-verlaging in waterige media onder druk staande CO 2 (3-5 MPa). Evenwel onoplosbare zouten van sommige kationen geen stabiele dispersies lagere concentraties en biopolymeer kunnen vestigen op de bodem leidt tot inhomogene gels. Dit is een algemeen probleem met de interne instelling geleren methode met inbegrip van CO 2 geïnduceerde gelering 3 en daardoor moet de techniek van de bruikbaarheid voor een toepassing worden beoordeeld op een geval tot geval basis.Verschillende mengsels bereid met behulp van water oplosbare biopolymeren zoals zetmeel, carrageenan, methylcellulose en carboxymethylcellulose, gellangom, lignine, gelatine en andere; water oplosbare synthetische polymeren zoals polyethyleenglycol (PEG), polyvinylalcohol (PVA), Pluronic P-123 en andere; en in water oplosbare anorganische precursors zoals natrium- silicaat kan ook worden gemengd met geamideerde pectine hybride aerogels Soortgelijke alginaat 2 met instelbare eigenschappen te produceren.
Als superkritisch CO 2 drogen (SCCO 2 drogen) is een typische stap in aerogel productie, een combinatie van pre-processing stappen, zoals het oplosmiddel uitwisseling en het drogen van het gebruik van CO 2 17,18 of geleren, oplosmiddel uitwisseling en het drogen van het gebruik van CO 2 7 zou kunnen bieden een duidelijk voordeel verwerking. Het voordeel wordt voorzien als een geïntegreerd pot: wanneer biopolymeer dispersies kunnen worden omgezet in biopolymeer aerogels behulp CO 2 als het primaire productiemiddel medium in een autoclaaf. Voorbepaalde farmaceutische toepassingen, kan men ook voor ogen het uitvoeren van een vier stappen: geleren, oplosmiddel uitwisseling, superkritisch drogen en actieve component laden 5,19 proces in één autoclaaf met behulp van CO 2, zoals de verwerking medium. Nabehandeling zoals beschermende bekleding van geneesmiddel geladen aerogels in sommige gevallen noodzakelijk is voor gerichte geneesmiddelafgifte 20.
Tot slot, het huidige werk toont het gebruik van onder druk CO 2 voor het geleren van geamideerd pectine gebaseerde systemen. Bovendien wordt het gebruik van onder druk staand CO2 als gemeenschappelijk medium voor precursor productgroep conversie voor doeltoepassingen in een autoclaaf voorzien.
Disclosures
De auteurs verklaren dat ze geen concurrerende financiële belangen.
Acknowledgments
Financiële steun van DFG (projecten SM 82 / 13-1) is dankbaar erkend.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Equipment | |||
| Ultraturrax homogenizer | IKA, Germany | T 25 Digital | |
| Polypropylene molds | TH. Geyer, Germany | 9,033,201 | |
| High pressure autoclave | Ernst Haage, Germany | custom made | Setup constuction done in-house |
| Compressor | Andreas Hofer | MKZ 185-40 | Setup constuction done in-house |
| Nitrogen adsorption | Quantachrome | Nova 4000e | |
| Density meter | Anton Paar | DMA 4000 | |
| Chemicals | |||
| Amidated pectin | Herbstreith and Fox, Germany | CU 025 | CAS # 56645-02-4; provided by company for research purposes |
| Sodium Hydroxide | Sigma Aldrich, Germany | S8045 | CAS # 1310-73-2; required only in case the pectin solution needs to be neutralized to pH 6.5-7.5 |
| Calcium carbonate | Magnesia GmbH, Germany | 4421 Calcium carbonat, leicht, präzipitiert, EP, E170 | CAS # 471-34-1 |
| Ethanol, 99.8% | Sigma Aldrich, Germany | 32205 | CAS # 64-17-5 |
| Carbon dioxide, 99.9% | AGA Gas GmbH, Germany | CAS # 124-38-9; in-house tank available (3 ton) | |
| Deionised Water | CAS # 7732-18-5; available in-house (6.4-7.0 pH) |
References
- Kistler, S. S. Coherent expanded-aerogels. J. Phys. Chem. 36 (1), 52-64 (1932).
- Aerogels Handbook. Aegerter, M. A., Leventis, N., Koebel, M. M. , Springer. New York, NY. (2011).
- Raman, S. P., Gurikov, P., Smirnova, I. Hybrid alginate based aerogels by carbon dioxide induced gelation: Novel technique for multiple applications. J. Supercrit. Fluids. 106, 23-33 (2015).
- Draget, K. I., Skjåk-Bræk, G., Smidsrød, O. Alginate based new materials. Int. J. Biol. Macromol. 21 (1), 47-55 (1997).
- García-González, C. A., Alnaief, M., Smirnova, I. Polysaccharide-based aerogels-Promising biodegradable carriers for drug delivery systems. Carbohydr. Polym. 86 (4), 1425-1438 (2011).
- Alnaief, M., Alzaitoun, M. A., García-González, C. A., Smirnova, I. Preparation of biodegradable nanoporous microspherical aerogel based on alginate. Carbohydr. Polym. 84 (3), 1011-1018 (2011).
- Gurikov, P., Raman, S. P., Weinrich, D., Fricke, M., Smirnova, I. A novel approach to alginate aerogels: carbon dioxide induced gelation. RSC Adv. 5, 7812-7818 (2015).
- Meyssami, B., Balaban, M. O., Teixeira, A. A. Prediction of pH in model systems pressurized with carbon dioxide. Biotechnol. Prog. 8 (2), 149-154 (1992).
- Subrahmanyam, R., Gurikov, P., Dieringer, P., Sun, M., Smirnova, I. On the Road to Biopolymer Aerogels-Dealing with the Solvent. Gels. 1 (2), 291-313 (2015).
- García-González, C. A., Camino-Rey, M. C., Alnaief, M., Zetzl, C., Smirnova, I. Supercritical drying of aerogels using CO2: Effect of extraction time on the end material textural properties. J. Supercrit. Fluids. 66, 297-306 (2012).
- Özbakır, Y., Erkey, C. Experimental and theoretical investigation of supercritical drying of silica alcogels. J. Supercrit. Fluids. 98, 153-166 (2015).
- Rudaz, C., et al. Aeropectin: Fully Biomass-Based Mechanically Strong and Thermal Superinsulating Aerogel. Biomacromolecules. 15 (6), 2188-2195 (2014).
- Quraishi, S., et al. Novel non-cytotoxic alginate-lignin hybrid aerogels as scaffolds for tissue engineering. J. Supercrit. Fluids. 105, 1-8 (2015).
- Martins, M., et al. Preparation of macroporous alginate-based aerogels for biomedical applications. J. Supercrit. Fluids. 106, 152-159 (2015).
- Davidovich-Pinhas, M., Bianco-Peled, H. A quantitative analysis of alginate swelling. Carbohydr. Polym. 79 (4), 1020-1027 (2010).
- Mallepally, R. R., Bernard, I., Marin, M. A., Ward, K. R., McHugh, M. A. Superabsorbent alginate aerogels. J. Supercrit. Fluids. 79, 202-208 (2013).
- Porta, G. D., Del Gaudio, P., De Cicco, F., Aquino, R. P., Reverchon, E. Supercritical Drying of Alginate Beads for the Development of Aerogel Biomaterials: Optimization of Process Parameters and Exchange. Ind. Eng. Chem. Res. 52 (34), 12003-12009 (2013).
- Brown, Z. K., Fryer, P. J., Norton, I. T., Bridson, R. H. Drying of agar gels using supercritical carbon dioxide. J. Supercrit. Fluids. 54 (1), 89-95 (2010).
- Betz, M., García-González, C. A., Subrahmanyam, R. P., Smirnova, I., Kulozik, U. Preparation of novel whey protein-based aerogels as drug carriers for life science applications. J. Supercrit. Fluids. 72, 111-119 (2012).
- Antonyuk, S., Heinrich, S., Gurikov, P., Raman, S., Smirnova, I. Influence of coating and wetting on the mechanical behaviour of highly porous cylindrical aerogel particles. Powder Technol. 285, 34-43 (2015).
