Introduction
הידבקויות בטן הן סוג של רקמה צלקתית היוצרות בבטן בתגובה לדלקת, בדרך כלל לאחר ניתוח או זיהום intraabdominal. הידבקויות הם גורם עיקרי של כאבי בטן כרוניים פוריות, והם הגורם השכיח ביותר של חסימה קטן מעי 1. הנוכחות של הידבקויות ומאפשרת לבצע פעולת בטן שנייה קשה יותר ומגדילה את הסיכון לסיבוכים 2.
למרות שנים של מחקר, המנגנונים להיווצרות הידבקויות להישאר ממעטים להבין. זה ידוע כי פגיעה ראשונית אל פני שטח הצפק גורמת דיות של נוזל הפיברין-עשיר, אשר לאחר מכן יוצר קריש שקושר את פני השטח של מעי ואת דופן הבטן יחד 3. מאוחר יותר, פיברובלסטים ותאים אחרים נודדים לחלל דבק ומפרישי רקמת חיבור 4. במהלך חודשים ארוכים ואף שנתי ההידבקות מתבגרת על ידי פיתוח כלי דם ועצבים מוצרים מסחריים קיימים מספר אשר נועדו להפחית את היווצרות הידבקויות לאחר ניתוח בטן (למשל, Seprafilm). כל המוצרים הללו לשמש מחסומים מכניים לעצור היווצרות הידבקות על ידי מניעת מגע פיזי בין לולאות של המעי ואת 6,7 דופן הבטן. למרות ראיות מניסוי מבוקר מחסום הידבקות כירורגית מפחית את היווצרות של הידבקויות 8, רבים המנתחים כאנקדוטה התאכזבו עם האפקטיביות של מוצרי מחסום מכני. כיום אין טיפולים אנטי הידבקות מבוססת תרופה, אשר משקף את העובדה כי התהליכים המדויקים המעורבים ביצירת הדבקה הם הבינו היטב. פיתוח טיפול שמתמקד במיוחד סוכנים הסלולר או המולקולריים המעורבים ביצירת הידבקויות ידרוש הבנה טובה יותר של האירועים שבהם מעורבים היווצרות של הידבקות. בקבוצה קיים מספרהים זיהה מסלולים מולקולריים כי עשוי להיות חשוב עבור היווצרות הידבקות 9-11. במודלים של בעלי חיים לספק סביבה מעולה עבור חקר היווצרות הידבקויות. מחקרים רבים פורסמו המתאר ויצירה כירורגית של הידבקות בכמה חיות, בפרט חולדה ועכבר 6,12-14. בהינתן הניסיון שלנו עם לומד פיברוזיס העכבר ואת הזמינות הרחבה של עכברים טרנסגניים ונוגדנים מבוססי עכבר, בחרנו את העכבר כמודל שלנו לחקר הידבקויות. בזאת, אנו מדווחים על טכניקה שפיתחנו כדי reproducibly ומהימנה ליצור הידבקויות בטן בתוך העכבר.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
הפרוטוקול הבא אושר על ידי הטיפול בבעלי החיים מוסדי אונ' סטנפורד ועדת שימוש (IACUC) ואת עומד בכל ההנחיות האתיות המוסדיות לגבי השימוש בבעלי חיים למחקר.
1. יצירת הידבקויות בטן
- הפעל את העכבר על דיאטה צ'או אנטיביוטי שבוע לפני ההליך.
- חיטוי מכשירי ניתוח טרום חם פתרון ההשקיה המלוחה.
- להרדים את העכבר באמצעות 2% isoflurane בשאיפה.
- באמצעות גוזז שיער ואחריו יישום מהיר (5 - 10 שניות) של סוכן מקריח, להסיר את השיער מן הרוב של פני השטח של הבטן. ביסודיות להסיר את סוכן המקריח ידי מנגב בעדינות עם גזה רטובה, לחלופין, על ידי הטבילה בעיון את החצי התחתון של העכבר לתוך מים חמים. ביסודיות לייבש את החיה.
- מניחים את האף של בעל החיים לתוך חרטומו הרדמה. במהלך הניתוח כולו, בזהירות לפקח על rשיעור espiratory של החיה לכייל את קצב זרימת ההרדמה כנדרש.
- השתמש במכשיר התחממות, כגון כרית חימום או מנורת חימום, כדי למנוע היפותרמיה.
- לפני prepping הבטן, לאבטח את העכבר עם רצועות של סרט להציב מעל ומתחת הבטן כדי למנוע את העכבר מן הסטה במהלך הניתוח. לחטא את הבטן עם בבטאדין, ולאחר מכן פעל עם 70% אתנול. כלול כמו הרבה שטח ככל האפשר הכנה, כולל השיער על הקצוות של האזור המגולח. מניחים וילון סטרילי על העכבר. (איור 1)
- תת עורי להזריק 0.1 מ"ג / ק"ג עצירות, או 3 מיקרוגרם עבור עכבר 30 גרם.
- הפוך את החתך בעור.
- החל קו אמצע הבטן התחתון, לתפוס את העור עם מלקחיים ולעשות חתך אנכי רדוד בעור באמצעות מספריים חדים.
- Carry הקיצוץ superiorly אל xyphoid עם המספריים. תשמור על עצמך כדי להזין רק את העור.
- ככל השרירים בבטן הוא now גלוי מכסה את הקרביים, לתפוס את קו האמצע של השרירים עם מלקחיים ובזהירות מאוד לעשות חתך קטן לתוכו באמצעות מספריים חדים. ודא שלא לחתוך בטעות לתוך איבר בטן.
- לאחר הזנת שטח הצפק עם חתך קטן רואה את השכבה השרירית להתרחק אברי בטן, להאריך את החתך superiorly ו inferiorly על ידי החדרה המספרית לתוך הפתח והחיתוך בזהירות בשני הכיוונים. הרחב את החתך מן xyphoid superiorly אל מעל השלפוחית inferiorly. (איור 2)
- עכשיו כי קרבים נחשפים, לאתר את cecum בעדינות exteriorize זה. הימנע לתפוס את cecum עם מלקחי שיניים או חדים. במקום להשתמש במלקחיים atraumatic כגון מלקחיים משוננים Adson.
- לגרד את cecum עם נייר זכוכית.
- בעדינות לגרד את פני השטח של שני הצדדים של cecum עם 100 נייר זכוכית חצץ עבור 30 - 60 שניות עד פני השטח הופך פחות appea מבריק petechiaer על פני השטח. אם המנתח הוא ימני, זה עוזר לכוון את cecum עם הקצה מול ימינה לעטוף את cecum על אצבע המורה השמאלית של המנתח. (איור 3)
- בצע את המלטש בעדינות, כפי שהוא קל לגרום ניקוב בטעות של קיר cecal הדק. כמות קטנה של חוליות אמורה להרגיש כמו הנייר הזכוכית מועברת על פני שטח cecal. אם נייר זכוכית מורגשת לתפוס שוב ושוב על cecum, זה צפוי להביא דמעה בקיר cecal. צפה בקפידה על מנת להבטיח כי חלקיקים של נייר זכוכית לא לעקור ולהישאר בבטן, מכיוון שהדבר עלול לגרום לתגובה גוף זר מוגזמת.
- אם דמעה בקיר cecal מתרחשת, לסיים את ההליך להרדימו.
- אם כלי דם cecal הוא טעון על ידי נייר הזכוכית וגורמים לדימום, להחזיק לחץ עד שתי דקות עם גזה. עם זאת, אם הדימום נמשך אחרי הפעם, במקום תפר הספרה שמונה 7-0 monofilament סביבנקודת הדימום. זה יעצור את הדימום באופן מהימן כמעט בכל המקרים. יש להיזהר שלא לשלב כמות גדולה של קיר cecal לתוך התפר, כמו זה סיכוני גרימת נימק של חלק המעורב של הקיר.
- לפצוע את דפנות בטן התקינות.
- השתמש ברב של נייר זכוכית כדי לגרד את פני השטח הצפק של השריר של דפנות בטן התקינות. להיות יותר אגרסיביים עם מלטש כאן מאשר על cecum ולהמשיך עד פני השטח של דפנות תקין בטן מופיע מחוסל. הימנע מלטש כל כך קשה כי העור גלוי דרך פתחים בשכבת השרירים. (איור 4)
- שימוש נהג מחט קסטרו-Viejo, למקם בין שתיים לארבע הספרה שמונה 4-0 תפרים משי לתוך שכבת השרירים של דפנות בטן תקין. השאר את הזנבות באורך 5 מ"מ. יש להיזהר שלא לתפוס מעי קיר בטעות לתוך התפר. (איור 5)
- באמצעות מזרק 10 מ"ל מלא wה- i חמם מלוח, להשקות את המעיים כמה פעמים. כוון את הזרם של מי מלח לתוך חלל הבטן כדי להשקות את פן גם כן. אם השטח מתחת העכבר הופך ספוג, להזיז את העכבר מעל או להחליף את השטח, כדי למנוע היפותרמיה.
- השתמש גזה סטרילי להציב על החתך כדי לספוג השקיה עודפת.
- קח קמצוץ של עמילן ומפזר אותו על פני השטח של הדפנות התקינים בטן על שני הצדדים של cecum. (איור 6)
- ודא כי אין דימום פעיל. אם יש, להשתמש בספוג גזה להפעיל לחץ ישיר על נקודת הדימום עד שייעצר. אם הדימום לא נעצר בקלות, למקם תפר עוצר דמום כמתואר לעיל.
- שימוש בקצה הקהה של מלקחי אצבע, בעדינות לדחוף את המעיים בחזרה לתוך חלל הבטן. מקם את cecum ליד התפרים בתוך דפנות הבטן הנכונות על מנת למקסם את היווצרות הידבקות.
- Cלאבד את החתך בבטן.
- באמצעות 6-0 תפר קלוע נספג, במקום תפר רץ לתוך השכבה השרירית בראש החתך.
- הפעל את התפר למטה לכיוון חלק התחתון של החתך, וקירוב השכבה השרירית. מסעות בכ -3 מ"מימ ולקחת 3 ביסים מ"מ עם כל תפר חדש. תשמור על עצמך לא לקחת בטעות ביס של מעי תוך שימת תפרים.
- בתחתית החתך, לעזוב לולאה של תפר מהנשיכה הקודמת ולהשתמש זה מכשיר לקשור התפר. חותך את התפר עוזב 5 מ"מ זנבות.
- חזור על שלושת השלבים לעיל עם תפר 6-0 ניילון monofilament כדי לסגור את העור.
- לנהל 20 מ"ל / בולוס מלוחים תת עורית ק"ג (בערך 0.5 מ"ל עבור עכבר 30 גרם).
- באמצעות גזה יבשה, לייבש את החיה כולה ביסודיות, כמו הפרווה הגבה נוטה להירטב במהלך השקיה.
- רופף לעטוף דבק ההלבשה סביב הבטן כדי לכסות את החתך. יש להיזהר שלא להגביל אהרגליים או מכניקת נשימה של nimal עם הרוטב.
- בזהירות לפקח על בעלי החיים כפי שהוא מתאושש מן ההרדמה. נהל עצירות כל 12 שעות במשך 2-3 ימים לאחר ההליך לשליטה בכאב.
2. רקמות קציר הדבקה
- חכה לפחות שבעה ימים לאחר הניתוח הראשוני. שוב, חיטוי מכשירי ניתוח להרדים את העכבר עם isoflurane.
- לעקר את הבטן עם בבטאדין ואחריו אתנול 70%. להתגלח את שער שיער נוסף מהצד הימני של הבטן, כך דגימת ההידבקות המכילה עור לא תהיה מכוסית בשיער, מה שהופך היסטולוגיה יותר קשה.
- השתמש חתך paramedian עזב, מאז מעי לעתים קרובות דבוק החתך המקורי. החל בקצה התחתון של הבטן, כ -5 מ"מימ מהשמאל בתחתית החתך המקורי, לתפוס את העור עם מלקחיים קטנים שיניים וחותכים את העור עם מספריים חדים. הרחב זה לחתוך מעולהly אל בית החזה. (איור 7)
- בעזרת מספריים, לחתוך לתוך שכבת השרירים ואחרי הכניסה למקום הצפק, להאריך את לחתוך את החלק העליון והתחתון של החתך. תהיינה רקמות דבקות בגרימת cecum ואת המעי דק לדבוק דפנות ימין של הבטן ואולי גם החתך המקורי. (איור 8)
- בעזרת מספריים והחל מ קצה של החתך, מעל לרמה של cecum, להתחיל לחתוך לתוך דופן הבטן במעגל מסביב לאזור שבו המעי הוא חסיד.
- לסירוגין מעל ומתחת לרמה של cecum, בהדרגה לחתוך את כל הדרך סביב ההידבקות לסגור את המעגל, מניב "אי" של עור חסיד דופן בטן אל המעי. (איור 9)
- שוב באמצעות מספריים, לחתוך לתוך המעי ולהפריד החלק חסיד משאר המעי, מניב כריך של רקמות שמורכבת העור דופן הבטןמצד אחד, מעי בצד השני, ורקמות דבקות מחבר בין שני שביניהם. (איור 10)
- לחלופין, להשתמש במספריים מחודדים כדי להפריד את העור בצורה חדה מן השריר בדופן בטן. עבור היסטולוגיה לשקול לעזוב את העור המצורף, אבל לבידוד עיכול תא העור ניתן להסיר. אם הרקמה ישמש היסטולוגיה, הקפד להסיר חומר תפר ככל האפשר מבלי להפריע ממשק דבק יתר על המידה. לעיכול לצינוק מקובל להשאיר את התפרים במקום כל עוד הרקמה לעכל מסונן.
- לאחר מוציא רקמות הידבקות, להרדים את העכבר באמצעות שיטה הומנית שאושרה על ידי ועדת השימוש בבעלי חיים המוסדית שלך.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
בשבעה ימים לאחר ניתוח, את cecum ואולי עולה מעי גס, כבד, ולולאות של מעי דק אמורים להיות חסיד אל דופן הבטן הימנית צדדית. (איור 8) רקמת ניכרת יכול להיות מוטבעת מחולק ויניב שקופיות היסטולוגית מעולות. (איור 11, 12)
כאשר ההליך מבוצע כראוי, 100% של עכברים צריכים הידבקויות משמעותיות בשבעה ימים. תמותה צריכה להיות פחות מ -5%.
איור 1: הכנה לניתוח (א) החיה אובטח עם הקלטת ואת הבטן prepped בבטאדין (ב) בבטאדין נוקתה עם ספוגית אלכוהול וילון סטרילי הושם...om / קבצים / ftp_upload / 54,450 / 54450fig1large.jpg "target =" _ blank "> לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.
איור 2:.. חתך החתך צריך להאריך מרמת שלפוחית xyphoid אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.
איור 3:. שחיקה של cecum (א) כורך את cecum על אצבע המורה השמאלית עם הקצה מצביע ימינה מאפשרת בבסיס cecum להיות מיוצב על ידי האגודל השמאלי (ב) רמה מתאימה של מלטש עוזבת את. cecum עם משטח מחוספס פחות הוא מבריק יותר מבעבר, ועם כמה נקודות petechial לדימום. טיפול נוסף יש לנקוט בעת מלטש ליד בצד mesenteric, כמו הכלי כאן ידמם הכי בזריזות. אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.
איור 4:. שחיקה של הבטן וול הקרבי נסחפים צידת השטח הצפק של קיר השריר הוא שייף עד להופעתה מחוספסת. כלי הדם לראות בדיוק מעל נייר הזכוכית בדופן הבטן נתקל בו לעתים קרובות אבל לא לדמם משמעותי. נא ללחוץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.
איור 5:.. מיקום של האיור-של-שמונה תפר תפר משי ספרת שמונה להציב לתוך קיר השריר, לפני היותו כבול אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.
איור 6:. Application עמילן שכבה האור של עמילן בזוק מעל דפנות המעי הבטן. שתי דמות של ושמונה תפרים נראים בקיר השריר. אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.
איור 7חתך עבור הניתוח השני (א) החתך התחיל רק בצד השמאל של החתך המקורי (ב) החתך החדש אמור להאריך מרמת שלפוחית בית החזה:... נא ללחוץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של נתון זה.
איור 8:. הידבקות לולאות של מעי דק (SB) הן חסיד אל הדפנות התקינים וזה לזה. חתך קו האמצע המקורי, עכשיו נרפא, נתפס (Inc). נא ללחוץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.
איור 10:. הדגימה וחוצת המעי תניב כריך של רקמות עם מעי בצד אחד (א) ו- עור בצד השני (ב). פיסות תפר גלוי להסירו אם הדגימה היא לשמש עבור היסטולוגיה. אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.
איור 11:. היסטולוגיה hematoxylin ו eosin (H & E) מוכתם סעיף של הידבקות בשבעה ימים לאחר עור מראה ניתוח בדופן בטן (תחתונה) המחוברים באמצעות הממשק הדבק אל cecum (למעלה). בנקודת זמן מוקדמת זו את cecum היא דבקה צפוי דופן הבטן בעיקר באמצעות הפיברין ומולקולות אחרות, ו רקמת צלקת משמעותית טרם נוצר. נא ללחוץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.
איור 12: הדמית Immunofluorescent קטע ההידבקות בשבעה ימים לאחר הניתוח מוכתם immunofluorescently עבור ac שריר α-חלקה.פח, מראה מכתים האמיתי של זקיקי העור השיער (משמאל) וקיר שריר cecal (באמצע), ו מכתים הלא ספציפית של פני השטח luminal cecal (מימין). נא ללחוץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
השלבים הקריטיים בהליך זה הם: ביסודיות ששרטו את cecum מבלי לגרום ניקוב, צבת תפרים בתוך דפנות הבטן, וליישם את הכמות הנכונה של עמילן. רק להחיל נייר זכוכית אל cecum, או לחלק מסוים קטן של המעי. שימוש רחב של נייר זכוכית על כמויות גדולות של מעי דק נוטה לגרום ileus משמעותי. תשמור על עצמך כדי לגרד את cecum עם מספיק כוח שהמשטח הופך מחוספס, אבל לא עד כדי כך את דמעות הקיר. מציאת איזון זה יכול לקחת קצת זמן. תמיד טפל המעי בזהירות ולהימנע באמצעות מלקחיים חדים או שיניים לתמרן מעי. זה קל לגרום בטעות דימום על ידי גרירה לפדר המעי הדק עם מלקחיים או על ידי משיכת המעי מדי בכוח.
אם דמעה מתרחשת בקיר cecal, ההליך צריך להסתיים ואת החיה מורדמת. מניסיוננו, תוצאות מדמיעות cecal במוות של החיה לאחר כמה ימים, גם אם הקריעה היא RepaIRED היטב. בנוסף, דמעה של קיר cecal תגרום שפיכת השרפרף שתשפיע על התגובה הדלקתית באופן בלתי צפוי.
המוסטאסיס חייב להיות שלם בסוף ההליך. כמה כלי דימום יהיה לפתוח מחדש ולהתחיל לדמם לאחר שנראה כי הפסיק. במקרה של ספק, להציב monofilament נספגים הספרה שמונה תפר סביב נקודת דימום. סוג של תפר זה עדיף על משי או קלוע תפר נספג כי זה יכול להיות משך אף הרקמה עם התנגדות מינימלית. עם זאת מצאנו כי משי או קלוע תפר נספג הוא יעיל ביותר דפנות בטן גרימת הידבקויות, כפי monofilament הוא פחות דלקתי.
יישום של עמילן בסוף ההליך מסייע להגדיל את ההיווצרות של הידבקויות, אך גילינו כי כמות מוגזמת של עמילן תגרום תגובה דלקתית שגורמת למוות. העמילן צריך להיות מפוזר על lightly. לא צריך להיות עד כדי כך הוא יוצר שכבה מוצקה.
כאשר הראשון ללמוד הליך זה, מקובל להפסיד עכברים מספר. מניסיוננו הגורמים השכיחים ביותר למוות הם התייבשות עקב ileus נגרמת על ידי שחיקה נמרץ מדי של מעי, ואלח-דם עקב ניקוב מעיים. מוות שנגרם על ידי דימום יכול להתרחש אם המוסטאסיס מלא אינו מושג בסוף הניתוח.
אם היווצרות הידבקות אינה מספקת, לשקול שימוש שחיקה אגרסיבית יותר של cecum ואת הדפנות ימניות וסיים יותר עמילן, או צבת תפרים יותר על דפנות בטן. מניסיוננו, מחכה פחות משבוע לפני פתיחתו מחדש את תוצאות הבטן בתוך פחות היווצרות הדבקה נאותה. מצד השני, אם שיעור התמותה של עכברים לאחר הניתוח הוא גבוה, שקול להשתמש שחיקה פחות אגרסיווי של cecum, בוחן מקרוב יותר עבור המוסטאסיס, ומיישום עמילן פחות. כמו כן, חשוב לעקוב אחר בזהירותשיעור הנשימה של העכבר במהלך הניתוח. לאחר הניסיון הרווחי מנתח עם הליך זה, תמותה צריכה להיות פחות מ -10%.
טכניקה זו נועדה ליצור הידבקויות בעיקר בין cecum ואת דפנות בטן התקינות. הידבקויות גם יהוו לעתים קרובות בין המעי הדק, הכבד, ואת חתך קו האמצע. באמצעות טכניקה זו בדרך כלל לא לגרום הידבקויות בצד השמאלי של הבטן. הגבלה של טכניקה זו היא כי הידבקויות בין מעי דופן בטן נוטות יותר יוצר יותר הידבקויות בין הלולאות של מעי. בנוסף, הוא אינו צפוי לגרום רקמות מלאות של דבק בטן קפוא לחלוטין, אשר נתפסה לעתים קרובות אצל בני אדם שעברו מספר ניתוחים.
כפי שנאמר במבוא, טכניקות רבות להפקת הידבקויות בטן בעכברים ומינים אחרים, במיוחד עכברוש, תוארו בספרות 6,12-14. ישנם הרבה פחות שפורסם protoco ls ליצירת הידבקויות בעכברים. אנו משערים כי בגלל יצירת הידבקויות בעכברים היא יותר קשה מאשר אצל חולדות, רוב החוקרים בחרו לפתח את הטכניקה שלהם בחולדה. עם זאת, בגלל הזמינות הגדולה יותר של עכברים טרנסגניים ונוגדנים אנטי עכבר, אנו מאמינים כי הוא יקר להם מודל חזק ליצירת הדבקה בעכברים, למרות הקושי הטכני יותר. פתחנו פרוטוקול זה לאחר שניסה רב של פרוטוקולי עכברוש שפורסם. מצאנו כי שיטות ליצירת הידבקויות בחולדה, כגון שימוש electrocautery על cecum, לעתים קרובות לגרום עכברים למות. לא היינו מרוצים צפיפות של הידבקויות המיוצר על ידי טכניקות שמשתמשות התערבות יחיד, כגון הצבת כפתורים איסכמי דפנות לבד, או רק abrading cecum. הטכניקה אנו מציגים כאן מייצג שילוב של התערבויות שמצאנו, באמצעות ניסוי וטעייה, לייצר הידבקויות בעקביות תוך מזעור התמותה.
תוכן "> מכיוון טכניקה זו גורמת רקמות דבקות בעקביות כדי ליצור בין cecum ואת הדפנות, אנו מאמינים כי הוא אידיאלי להתערבויות בדיקה נועדו להפחית היווצרות הידבקות. כמו כן טכניקה זו יכולה לשמש כדי לחקור את המסלולים המולקולריים סוגי תאים, כי הם המעורבים ביצירת הדבקה. הרקמה הדבקה ניתן נכרת בקלות והתכוננו היסטולוגיה, והתשואות תמונות היסטולוגית מעולה (איורים 11, 12).כמה חוקרים אולי רוצים מודל שבו הידבקויות מהוות פחות מ 100% מהזמן. השמטת יישום של עמילן תפחית את שיעור הדבקה על כ -80%. צמצום מספר תפרי משי להציב לתוך הדפנות התקינים בטן יפחית את שיעור הידבקות נוספת.
מניסיוננו, יום השבעה לאחר הניתוח הוא נקודת הזמן הראשונה שבה המעי הוא חסיד בעקביות אל דופן הבטן. עם זאת, בנקודות זמן אחרות עשויות להיות רלוונטיות יותר בהתאםעל המוקד של הפרויקט. לדוגמא, חוקרים מעוניינים בהגירת נויטרופילים מקרופאגים לחלל הידבקות מומלץ למסוק רקמה בחמישה הימים הראשונים שלאחר ניתוח. מנגד, בתצהיר של קולגן על ידי פיברובלסטים מתרחש במשך שבועות לאחר הפציעה הראשונית, ועל כך הוא יהיה יותר מקום לבחון רקמות בנקודות זמן בפיסוק במשך כמה שבועות לאחר הניתוח.
כירורגיים כירורגי הם מאוד מועילים עבור הגדלה של השדה כירורגי בעת ביצוע הליך זה. מיקרוסקופ ניתוח יכול לשמש גם, אך מגביל את היכולת של המנתח כדי לבדוק את שדה הניתוח מזוויות שונות. ההליך יכול להיעשות גם ללא גדלה בכלל.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
החוקרים מצהירים כי אין להם אינטרסים כלכליים מתחרים.
Acknowledgments
CDM נתמכה על ידי איגוד המנתחים האמריקאי (ACS) מלגת מחקר תושב. MSH נתמכה על ידי המכון בקליפורניה רפואה רגנרטיבית (CIRM) מענק הכשרה עמית קליני TG2-01159. MSH, פורמייקה, ו MTL נתמכו על ידי האגודה האמריקנית של ולסת המנתחים (Asms) / ולסתות קרן המנתחים (MSF) מענק מחקר פרס. HPL נתמכה על ידי מענק NIH R01 GM087609 ואת מתנת אינגריד Lai וביל שו לכבוד אנתוני שו. HPL ו MTL נתמכו על ידי המעבדה Hagey עבור רפואה רגנרטיבית Pediatric וקרן אלון. MTL נתמכה על ידי קרן גאן / אוליבייה.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Fisherbrand Absorbent Underpads, 20" x 24" | Fisher Scientific | 14-206-62 | |
| Polylined Sterile Field, 18" x 24" | Busse Hospital Disposables | 696 | Cut a rectangular hole of the appropriate size |
| Isothesia isoflurane | Henry Schein | 050033 | |
| Fisherbrand Sterile cotton gauze pad, 4" x 4" | Fisher Scientific | 22-415-469 | |
| Puralube petrolatum ophthalmic ointment, 1/8 oz. tube | Dechra Veterinary Products | NDC 17033-211-38 | |
| Nair depilatory cream | Church & Dwight Co. | 22339-05 | |
| Buprenex buprenorphine 0.3 mg/ml | Reckitt Benckiser Pharmaceuticals Inc. | NDC 12496-0757-5 | |
| 1 cc insulin syringe, 27 G | Becton Dickinson | 329412 | |
| Povidone Iodine Prep Solution | Medline | MDS093944H | |
| Webcol alcohol prep swabs | Covidien | 6818 | |
| General-Purpose Labarotory Labeling tape | VWR | 89097-912 | |
| BioGel PI surgical gloves | Mölnlycke Health Care | ALA42675Z | |
| Micro Forceps with teeth | Roboz | RS-5150 | |
| Fine scissors- sharp | Fine Science Tools | 14060-09 | |
| Straight serrated forceps | Fine Science Tools | 11050-10 | |
| Castro-Viejo needle driver | Fine Science Tools | 12565-14 | |
| 100 grit 1/4 sheet sandpaper | ACE Hardware | 1010446 | Cut into strips |
| 4-0 silk suture, 30", SH needle | Ethicon | K831 | |
| 7-0 PDS II absorbable monofilament suture, 30", BV-1 needle | Ethicon | Z135 | Usually comes double-armed. Cut the suture at the midway point to generate two usable sutures. |
| Rice starch | MP Biomedicals | 102955 | |
| 0.9% Sodium Chloride Irrigation | Baxter | BHL2F7121 | Warm to 37 °C prior to use |
| 10 ml syringe | Becton Dickinson | 309604 | |
| 6-0 Vicryl absorbable braided suture, 18", RB-1 taper needle | Ethicon | J212H | |
| 6-0 Ethilon nylon monofilament suture, 18", P-3 needle, | Ethicon | 1698G | |
| Tegaderm Transparent Film Dressing Frame Style, 6 cm x 7 cm | 3M | 1624W | Cut in half lengthwise |
References
- Ellis, H., et al. Adhesion-related hospital readmissions after abdominal and pelvic surgery: a retrospective cohort study. Lancet. 353 (9163), 1476-1480 (1999).
- Brochhausen, C., et al. Current strategies and future perspectives for intraperitoneal adhesion prevention. J Gastrointest Surg. 16 (6), 1256-1274 (2012).
- diZerega, G. S., Campeau, J. D. Peritoneal repair and post-surgical adhesion formation. Hum Reprod Update. 7 (6), 547-555 (2001).
- Hellebrekers, B. W., Kooistra, T. Pathogenesis of postoperative adhesion formation. Br J Surg. 98 (11), 1503-1516 (2011).
- Herrick, S. E., et al. Human peritoneal adhesions are highly cellular, innervated, and vascularized. J Pathol. 192 (1), 67-72 (2000).
- Beyene, R. T., Kavalukas, S. L., Barbul, A. Intra-abdominal adhesions: Anatomy, physiology, pathophysiology, and treatment. Curr Probl Surg. 52 (7), 271-319 (2015).
- ten Broek, R. P., et al. Benefits and harms of adhesion barriers for abdominal surgery: a systematic review and meta-analysis. Lancet. 383 (9911), 48-59 (2014).
- Becker, J. M., et al. Prevention of postoperative abdominal adhesions by a sodium hyaluronate-based bioresorbable membrane: a prospective, randomized, double-blind multicenter study. J Am Coll Surg. 183 (4), 297-306 (1996).
- Cassidy, M. R., Sherburne, A. C., Heydrick, S. J., Stucchi, A. F. Combined intraoperative administration of a histone deacetylase inhibitor and a neurokinin-1 receptor antagonist synergistically reduces intra-abdominal adhesion formation in a rat model. Surgery. 157 (3), 581-589 (2015).
- Thaler, K., et al. Coincidence of connective tissue growth factor expression with fibrosis and angiogenesis in postoperative peritoneal adhesion formation. Eur Surg Res. 37 (4), 235-241 (2005).
- Hong, G. S., et al. Effects of macrophage-dependent peroxisome proliferator-activated receptor gamma signalling on adhesion formation after abdominal surgery in an experimental model. Br J Surg. 102 (12), 1506-1516 (2015).
- Whang, S. H., et al. In search of the best peritoneal adhesion model: comparison of different techniques in a rat model. J Surg Res. 167 (2), 245-250 (2011).
- Buckenmaier, C. C. 3rd, Pusateri, A. E., Harris, R. A., Hetz, S. P. Comparison of antiadhesive treatments using an objective rat model. Am Surg. 65 (3), 274-282 (1999).
- Rajab, T. K., et al. An improved model for the induction of experimental adhesions. J Invest Surg. 23 (1), 35-39 (2010).
