Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Medicine

Opprettelse av mage Adheranser i Mus

Published: August 27, 2016 doi: 10.3791/54450

Introduction

Abdominal adhesjoner er et skjema av arrvev som dannes i magen som respons på inflammasjon, typisk etter kirurgi eller intraabdominal infeksjon. Voksninger er en viktig årsak til kroniske magesmerter og infertilitet, og er den vanligste årsaken til tynntarmsobstruksjon en. Tilstedeværelsen av adhesjon gjør å utføre en andre bukoperasjon vanskeligere og øker sannsynligheten for komplikasjoner 2.

Til tross for mange års forskning, forblir mekanismene bak dannelsen av sammenvoksn dårlig forstått. Det er kjent at en første skade på peritoneal overflaten bevirker en utsondring av fibrin-rik væske, som deretter danner en propp som binder overflatene av tarm og bukveggen sammen tre. Senere, fibroblaster og andre celler vandrer inn i klebemidlet plass og utsondre bindevev 4. Over måneder til år vedheft modnes ved å utvikle blodårer og nerver

Flere kommersielle produkter finnes som er designet for å redusere dannelsen av sammenvoksninger etter abdominal kirurgi (f.eks Seprafilm). Alle disse produkter virke som mekaniske barrierer og stoppe adhesjonsdannelse ved å hindre fysisk kontakt mellom sløyfer av tarm og bukveggen 6,7. Til tross for bevis fra en kontrollert studie som en kirurgisk adhesjonsbarriere reduserer dannelsen av sammenvoksn 8, mange kirurger anekdotisk har vært fornøyd med effekten av mekanisk barriere produkter.

Foreløpig er det ingen legemiddelbasert anti-vedheft terapier, som gjenspeiler det faktum at de nøyaktige prosesser involvert i heft formasjon er dårlig forstått. Utvikling av en behandling som er spesielt rettet mot mobilnettet eller molekylære agenter involvert i dannelsen av sammenvoksninger vil kreve en bedre forståelse av de hendelser som er involvert i dannelsen av vedheft. flere gruppes har identifisert molekylære stier som kan være viktige for vedheft dannelse 9-11. Dyremodeller gir et flott miljø for å studere dannelsen av sammenvoksninger. Mange studier har blitt publisert som beskriver den kirurgiske etableringen av vedheft i flere dyr, særlig rotter og mus 6,12-14. Gitt vår erfaring med å studere fibrose hos mus og den store tilgjengeligheten av transgene mus og musebaserte antistoffer, valgte vi den musen som vår modell for studiet av sammenvoksninger. Heri, rapporterer vi den teknikken som vi har utviklet til reproduserbart og pålitelig skape abdominal sammenvoksninger i musen.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Følgende protokoll er godkjent av Stanford University Institutional Animal Care og bruk Committee (IACUC) og er i samsvar med alle institusjonelle etiske retningslinjer om bruk av forsøksdyr.

1. Opprettelse av mage Adheranser

  1. Start mus på antibiotika grøtdiett en uke før prosedyren.
  2. Autoklav kirurgiske instrumenter og pre-varm saltvann vanning løsning.
  3. Anesthetize musen med 2% inhalert isofluran.
  4. Ved hjelp av en hårklipper etterfulgt av en rask søknad (5-10 sek) av hårfjerningskrem agent, fjerne hår fra flertallet av overflaten av buken. Fjern grundig den riktige agenten ved å tørke forsiktig med våt gasbind og eventuelt ved forsiktig dunking den nedre halvdelen av musen i varmt vann. Tørke dyret.
  5. Plasser dyrets snute til narkosen nesen membran. Under hele operasjonen, nøye overvåke respiratory hastighet av dyret og titrere bedøvelse strømningshastigheten etter behov.
  6. Bruke en oppvarmingsanordning, slik som en varmepute eller en oppvarming lampe, for å hindre nedkjøling.
  7. Før prepping magen, feste mus med strimler av bånd som er lagt inn over og under magen for å hindre mus fra å forskyve seg under operasjonen. Desinfiser magen med betadine, og følg med 70% etanol. Omfatte så mye areal som mulig i prep, herunder hår på kantene av det barberte området. Plasser en steril drapere over musen. (Figur 1)
  8. Subkutant injisere 0,1 mg / kg buprenorfin, eller 3 ug for en 30 g mus.
  9. Gjør huden snittet.
    1. Starter i nedre magemidtlinjen, ta tak i huden med pinsett og gjøre et grunt vertikalt snitt i huden ved hjelp av skarp saks.
    2. Bær kutt overlegent til xyphoid med saksen. Vær nøye med å skrive inn bare huden.
  10. Som den abdominale muskulatur er now synlig dekker innvollene, ta tak i midtlinjen av muskulaturen med pinsett og veldig nøye lage et lite snitt på seg med skarp saks. Pass på at du ikke tilfeldigvis skjære i en abdominal organ.
  11. Etter inn i peritoneal plass med et lite kutt og ser muskuløs lag trekke bort fra abdominal organer, forlenge kutt overlegent og inferiorly ved å sette saksen i åpningen og nøye kutte i begge retninger. Utvid snittet fra xyphoid overlegent til over blæren inferiorly. (Figur 2)
  12. Nå som tarmen er utsatt, finn cecum og forsiktig exteriorize det. Unngå å ta tak i cecum med tann eller skarpe tang. I stedet bruke en atraumatiske tang for eksempel en Adson taggete tang.
  13. Slipes cecum med sandpapir.
    1. Forsiktig slipes hele overflaten av begge sider av cecum med 100 sandpapir for 30 - 60 sek til overflaten blir mindre skinnende og petechiae appear på overflaten. Hvis kirurgen er høyrehendt, hjelper det å orientere cecum med spissen vendt mot høyre, og legg cecum over kirurgens venstre pekefinger. (Figur 3)
    2. Utføre slipe forsiktig, da det er lett å tilfeldigvis forårsake perforering av den tynne cekale vegg. En liten mengde av kornethet skal kjennes som sandpapir beveges langs den cekale overflate. Dersom sandpapir er følte gjentatte ganger fanger på cecum, vil dette sannsynligvis føre til en tåre i cecal veggen. Se nøye for å sikre at partikler av sandpapir ikke løsne og forbli i magen, da dette kan føre til overdreven fremmedlegeme reaksjon.
    3. Hvis en rift i cecal veggen skjer, avslutte prosedyren og avlive dyret.
    4. Hvis en cecal blodåre blir skåret av sandpapir og forårsaker blødninger, hold trykket i opptil to minutter med gasbind. Men hvis blødningen vedvarer etter dette tidspunktet, plasserer en figur-of-åtte 7-0 monofilament sutur rundtpoenget med blødning. Dette vil pålitelig stoppe blødningen i nesten alle tilfeller. Pass på å ikke innlemme en stor mengde cecal veggen til sutur, da dette risikerer å forårsake nekrose av de involverte en del av veggen.
  14. Skade høyre mageveggen.
    1. Bruke en stripe av sandpapir for å slipe den peritoneal overflaten av muskel av høyre mageveggen. Være mer aggressive med sliping her enn på cecum og fortsetter til hele overflaten av høyre mageveggen vises roughed opp. Unngå sliping så hardt at huden blir synlig gjennom åpningene i muskellaget. (Figur 4)
    2. Ved hjelp av en Castro-Viejo nål driver, plasser mellom to og fire figur-av-åtte 4-0 silke masker inn i muskellaget av den høyre abdominale sideveggen. La halene ca 5 mm lange. Pass på å ikke tilfeldigvis fange tarmveggen til sutur. (Figur 5)
  15. Ved hjelp av en 10 ml sprøyte fylt mith varmet saltvann, vanne tarmen flere ganger. Direkte strøm av saltvann i bukhulen å vanne interiøret også. Hvis overflaten under musen blir gjennomvåt, beveger musen over eller erstatte overflate, for å unngå nedkjøling.
  16. Bruk en steril kompress plasseres over snittet for å suge opp overflødig vanning.
  17. Ta en klype stivelse og sprenge på overflaten av den høyre abdominale sideveggen og på begge sider av cecum. (Figur 6)
  18. Pass på at det ikke er noen aktiv blødning. Hvis det er, kan du bruke en gasbind svamp til å legge press direkte på det punktet av blødning til den stopper. Hvis blødningen ikke stopper lett, plassere en hemostatisk sutur som beskrevet ovenfor.
  19. Bruke den butte enden av tang og en finger, trykk forsiktig tarmen tilbake i bukhulen. Plasser cecum ved siden av suturene i den høyre abdominale sideveggen for å maksimere adhesjonsdannelse.
  20. Cmiste abdominal snitt.
    1. Bruke 6-0 absorberbare flettet sutur, plasserer en løpende søm i det muskulære laget på toppen av snittet.
    2. Kjør suturen ned mot bunnen av innsnittet, som knytter sammen muskellaget. Reis med ca 3 mm og ta 3 mm biter med hver ny søm. Pass på å ikke tilfeldigvis ta en bit av tarmen mens plassere sting.
    3. På bunnen av innsnittet, la en løkke av sutur fra den foregående bit, og bruke dette til å binde instrumentet sutur. Skjær sutur forlate 5 mm haler.
    4. Gjenta de ovennevnte tre trinn med 6-0 nylon monofilament sutur å lukke huden.
  21. Administrere en 20 ml / kg subkutan saltvann bolus (omtrent 0,5 ml for en 30 g mus).
  22. Ved hjelp av en tørr gasbind, tørke godt av hele dyret, som rygg pels tendens til å bli våt under vanning.
  23. Vikle en selvklebende bandasje rundt magen for å dekke såret. Pass på å ikke begrense enNimal ben eller puste mekanikere med dressing.
  24. Følg nøye med dyret som det gjenoppretter fra anestesi. Administrere buprenorfin hver 12 time i 2-3 dager etter inngrepet for smertekontroll.

2. Høsting Adhesjon Tissue

  1. Vent minst syv dager etter den første operasjonen. Igjen, autoklav kirurgiske instrumenter og bedøve musen med isofluran.
  2. Steril magen med betadine etterfulgt av 70% etanol. Barbere og fjerne håret ekstra hår fra høyre side av magen, slik at heft prøven inneholder huden ikke vil bli dekket i håret, noe som gjør histologi vanskeligere.
  3. Bruk en venstre paramedian snitt, siden tarmen er ofte fast til den opprinnelige snittet. Fra den nedre ende av magen, omtrent 5 mm til venstre for bunnen av den opprinnelige snitt, ta tak i huden med små tann pinsett og skåret inn i huden med en skarp saks. Utvide dette kuttet overlegenly til brystkasse. (Figur 7)
  4. Ved hjelp av saks, skåret i muskellaget og etter inn i peritoneal plass, strekker kuttet til toppen og bunnen av innsnittet. Det vil bli selvklebende vev forårsaker cecum og tynntarmen for å følge den høyre sidevegg av abdomen og eventuelt også til den opprinnelige snitt. (Figur 8)
  5. Ved hjelp av saksen og starter på kanten av snittet, over nivået for cecum, begynne å kutte inn i den abdominale veggen i en sirkel rundt området der tarmen er adherent.
  6. Vekslende over og under nivået av cecum, gradvis skjære hele veien rundt adhesjon og fullfører sirkelen, som gir en "øy" av hud og bukveggen vedheftende til tarmen. (Figur 9)
  7. Igjen ved hjelp av saks, skåret i tarmen og skille vedheftende del fra resten av tarmen, hvilket ga en sandwich av vev som består av hud og bukveggpå den ene side, tarm på den andre siden, og klebe vev som forbinder de to i mellom. (Figur 10)
  8. Eventuelt Bruk en spiss saks til kraftig skille huden fra bukveggen muskler. For histologi vurdere later huden festet, men for fordøyelse og celleisolasjon huden kan fjernes. Hvis vevet vil bli brukt for histologi, sørg for å fjerne så mye sutur materiale som mulig uten unødig forstyrre limet grensesnitt. For fordøyelse og celleisolasjon er det akseptabelt å la suturene på plass så lenge som vevet fordøye filtreres.
  9. Etter excising vedheft vev, avlive mus ved hjelp av en human måte godkjent av institusjonell bruk dyr komiteen.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

På syv dager etter operasjonen, cecum og eventuelt stigende tykktarm, lever, og ledd av tynntarm bør være tilhenger til høyresidig bukveggen. (Figur 8) skåret vev kan bygges og seksjonert og vil gi gode histologiske lysbilder. (Figur 11, 12)

Når prosedyren er utført på riktig måte, bør 100% av musene har betydelige sammenvoksninger på syv dager. Dødelighet bør være mindre enn 5%.

Figur 1
Figur 1: Forberedelse til kirurgi (a) Dyret er sikret med tape og magen preparert med Betadine (b) Betadine er klarert med en spritserviett og en steril drapere er plassert...om / filer / ftp_upload / 54450 / 54450fig1large.jpg "target =" _ blank "> Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Figur 2
Figur 2:.. Innsnitt Snittet bør strekke seg fra nivået av blæren til xyphoid Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Figur 3
Fig. 3: Slitasje av cecum (a) Drapering cecum over venstre pekefinger med spissen pekende mot høyre tillater bunnen av cecum som skal stabiliseres ved venstre tommel (b) En passende nivå av slipe forlater. cecum med en ru overflate som er mindre skinnende enn før, og med flere petechial interessante blødning. Ekstra forsiktighet bør tas samtidig sliping nær mesenteric side, som fartøyene her vil blø mest briskly. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Figur 4
Figur 4:. Slite av bukveggen innvoller blir feid til side og peritoneal overflaten av muskelen veggen er pusset til det vises grov. Den blodåre sett like over sandpapir i bukveggen blir ofte møtt, men vil ikke blø kraftig. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

1 "> Figur 5
Figur 5:.. Plassering av figur-of-åtte søm A silke figur-of-åtte sutur plassert inn i muskelen veggen, før du blir bundet Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Figur 6
Figur 6:. Anvendelse av stivelse Et lett lag av stivelse er drysset over mageveggen og tarm. To figur-of-åtte sting er sett i muskelen veggen. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Figur 7
Figur 7: Snitt for andre Surgery (a) Snittet er startet like til venstre for den opprinnelige snitt (b) Den nye innsnitt bør strekke seg fra nivået av blæren til brystkasse... Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Figur 8
Figur 8:. Adhesjonen Loops av tynntarmen (SB) er vedheftende til den høyre sidevegg og til hverandre. Den opprinnelige midtlinjesnitt, nå leget, blir sett (Inc). Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Figur 9
trong> Figur 9: excising Heft Tissue. (a) og (b) En "øy" av hud og bukvegg tilhenger til den underliggende tarm blir frigjort ved å kutte i en komplett sirkel rundt tilhenger området. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Figur 10
Fig. 10: prøven Skjæring på tvers av tarmen vil gi en sandwich av vev med tarm på den ene side (a) og hud på den andre siden (b). Bitene av sutur synlig bør fjernes hvis prøven skal brukes for histologi. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

jove_content "fo: keep-together.within-page =" 1 "> Figur 11
Fig. 11: Histologi A hematoxylin og eosin (H & E) beiset i en adhesjon på syv dager etter kirurgi viser hud og bukveggen (nederste) er festet via det klebende grensesnitt til cecum (øverst). På dette tidlige tidspunktet cecum er sannsynligvis levd opp til bukveggen hovedsakelig gjennom fibrin og andre molekyler, og betydelig arrvev har ennå ikke dannet. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Figur 12
Figur 12: Immunofluorescent Imaging En del av vedheft på syv dager etter operasjonen immunofluorescently farget for α-glatt muskulatur ac.tinn, viser sann farging av huden hårsekkene (til venstre) og cecal muskel veggen (i midten), og ikke-spesifikk farging av cecal luminal overflate (høyre). Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

De kritiske trinnene i denne fremgangsmåten er: grundig sliping cecum uten å forårsake perforering, plassere sting i mageveggen, og bruke riktig mengde stivelse. Bare gjelder sandpapir til cecum, eller til en liten bestemt del av tarmen. Bred bruk av sandpapir på store mengder tynntarm tendens til å forårsake betydelig ileus. Vær nøye med å slipes Blindtarm med nok kraft at overflaten blir ru, men ikke så mye at vegg tårer. Å finne denne balansen kan ta litt tid. Alltid håndtere tarmen forsiktig og unngå å bruke skarpe eller tann pinsett til å manipulere tarmen. Det er lett å tilfeldigvis forårsake blødninger ved å ta tak i tynntarm mesenteriet med pinsett eller ved å trekke i tarmen for hardt.

Hvis en rift oppstår i cecal vegg, bør fremgangsmåten bli avsluttet og dyret avlives. I vår erfaring, coecale tåre resulterer i død av dyret etter et par dager, selv om tåre er repaIRED godt. I tillegg vil slitasje av den cekale veggen forårsake søl av avføring som vil påvirke den inflammatoriske respons på en uforutsigbar måte.

Hemostase må være fullstendig ved slutten av prosedyren. Noen blødning fartøy vil gjenåpne og begynne å blø etter at det virker å ha stoppet. Når du er i tvil, plassere en absorberbare monofilament figur-of-åtte sutur rundt punktet for blødning. Denne type sutur er å foretrekke å silke eller flettet absorberbar sutur fordi den kan trekkes skjønt vevet med minimal motstand. Men vi har funnet at silke eller flettet absorberbar sutur er mest effektiv i mageveggen for indusering av adhesjon, som monofilament er mindre betennelses.

Anvendelse av stivelse ved slutten av fremgangsmåten bidrar til å øke dannelsen av adhesjoner, men vi har oppdaget at en overdreven mengde av stivelse vil forårsake en betennelsesreaksjon som fører til døden. Stivelsen bør bli stenket på lightly. Det bør ikke være så mye at det danner et fast lag.

Når først lære denne prosedyren, er det vanlig å miste flere mus. Etter vår erfaring er de vanligste dødsårsakene er dehydrering på grunn av tarmslyng forårsaket av altfor kraftig slitasje av tarmen, og sepsis skyldes intestinal perforasjon. Dødsfall forårsaket av blødning kan oppstå hvis fullstendig hemostase ikke oppnås ved slutten av operasjonen.

Hvis vedheft formasjonen er utilstrekkelig, vurdere å bruke mer aggressive slitasje av cecum og høyre sidevegg, noe mer stivelse, eller plassere flere sting på mageveggen. I vår erfaring, venter på mindre enn en uke før gjenåpning magen resulterer i mindre enn tilstrekkelig vedheft formasjon. På den annen side, hvis den dødelighet hos mus etter at operasjonen er høy, vurdere å bruke mindre aggressiv slitasje av cecum, inspisere nærmere for hemostase, og anvende mindre stivelse. Det er også viktig å følge nøyerespirasjonsfrekvens av musen under operasjonen. Når kirurgen gevinster erfaring med denne prosedyren, bør dødeligheten være mindre enn 10%.

Denne teknikken er konstruert for primært å danne adhesjon mellom cecum og den høyre abdominale sideveggen. Voksninger vil også ofte dannes mellom tynntarm, lever, og midtlinjesnitt. Ved hjelp av denne teknikken vil vanligvis ikke føre til sammenvoksninger på venstre side av abdomen. En begrensning ved denne teknikken er at adhesjon mellom tarmen og bukveggen er mer sannsynlig å danne enn adhesjon mellom sløyfer av tarmen. I tillegg, er det ikke trolig føre til en fullstendig frosset underliv full av klebemiddel vev, som ofte forekommer hos mennesker som har hatt flere operasjoner.

Som omtalt i innledningen, mange teknikker for fremstilling av abdominal adhesjoner hos mus og andre arter, særlig rotte, er blitt beskrevet i litteraturen 6,12-14. Det er langt færre publiserte protokollen, ls for etablering av adhesjoner hos mus. Vi spekulerer i at fordi etableringen av sammenvoksninger i mus er vanskeligere enn hos rotter, valgte de fleste etterforskere til å utvikle sin teknikk i rotte. Men på grunn av den større tilgjengelighet av transgene mus og anti-mus-antistoffer, tror vi at det er verdifullt å ha en robust modell for adhesjon oppretting i mus, til tross for den større tekniske vanskeligheter. Vi utviklet denne protokollen etter å ha prøvd mange av de publiserte rotte protokoller. Vi har funnet at fremgangsmåter for å lage sammenvoksninger i rotte, slik som bruk av elektrokirurgi på cecum, ofte føre til mus for å dø. Vi var ikke fornøyd med tettheten av sammenvoksninger produsert av teknikker som bruker et enkelt inngrep, som for eksempel å plassere sidevegg iskemiske knappene alene, eller bare skrapes cecum. Teknikken vi presenterer her representerer en kombinasjon av tiltak som vi har funnet, gjennom prøving og feiling, for å produsere voksn konsekvent samtidig minimere dødelighet.

innhold "> Fordi denne teknikken konsekvent fører lim vev for å danne mellom cecum og sideveggen, mener vi at det er ideelt å teste intervensjoner for å redusere heft formasjon. Også denne teknikken kan brukes til å utforske de molekylære stier og celletyper som er involvert i heft formasjon. Festet vev kan lett bli tatt ut og klargjort for histologi, og gir utmerkede histologiske bilder (Figurene 11, 12).

Noen forskere kan ønske en modell hvor voksninger danner mindre enn 100% av tiden. Utelate anvendelse av stivelse vil redusere adhesjonen frekvensen til omtrent 80%. Reduksjon av antallet silkesuturer er lagt inn i den høyre abdominale sideveggen vil redusere adhesjonen hastigheten ytterligere.

I vår erfaring, dag syv etter operasjonen er første gang et punkt der tarmen er konsekvent tilhenger til bukveggen. Imidlertid kan andre tidspunkter være mer relevant avhengigpå fokus for prosjektet. For eksempel kan forskere interessert i migrasjon av nøytrofile granulocytter og makrofager i vedheft plass vil høste vev i de fem første dagene etter operasjonen. På den annen side, avleiring av kollagen med fibroblastene finner sted i flere uker etter den første skade, og for dette vil det være mer hensiktsmessig å undersøke vev ved tidspunkter fordelt ut i flere uker etter operasjonen.

Kirurgisk luper er svært nyttig for forstørrelse av operasjonsområdet mens du utfører denne prosedyren. En operativ mikroskop kan også brukes, men begrenser kirurgens evne til å inspisere den operative feltet fra forskjellige vinkler. Fremgangsmåten kan også gjøres uten forstørrelse i det hele tatt.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Forfatterne hevder at de ikke har noen konkurrerende økonomiske interesser.

Acknowledgments

CDM ble støttet av American College of Surgeons (ACS) Resident forskningsstipend. MSH ble støttet av California Institute for Regenerative Medicine (CIRM) Klinisk Fellow trening stipend TG2-01159. MSH, HPL, og MTL ble støttet av American Society of Maxillofacial Surgeons (ASMS) / Maxillofacial Surgeons Foundation (MSF) Research Grant Award. HPL ble støttet av NIH stipend R01 GM087609 og en gave fra Ingrid Lai og Bill Shu ære for Anthony Shu. HPL og MTL ble støttet av Hagey Laboratory for Pediatric Regenerative Medicine og The Oak Foundation. MTL ble støttet av Gunn / Olivier Fund.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Fisherbrand Absorbent Underpads, 20" x 24" Fisher Scientific 14-206-62
Polylined Sterile Field, 18" x 24" Busse Hospital Disposables 696 Cut a rectangular hole of the appropriate size
Isothesia isoflurane Henry Schein  050033
Fisherbrand Sterile cotton gauze pad, 4" x 4" Fisher Scientific 22-415-469
Puralube petrolatum ophthalmic ointment, 1/8 oz. tube Dechra Veterinary Products NDC 17033-211-38
Nair depilatory cream Church & Dwight Co. 22339-05
Buprenex buprenorphine  0.3 mg/ml Reckitt Benckiser Pharmaceuticals Inc. NDC 12496-0757-5
1 cc insulin syringe, 27 G Becton Dickinson 329412
Povidone Iodine Prep Solution Medline MDS093944H
Webcol alcohol prep swabs Covidien 6818
General-Purpose Labarotory Labeling tape VWR 89097-912
BioGel PI surgical gloves Mölnlycke Health Care ALA42675Z
Micro Forceps with teeth Roboz RS-5150
Fine scissors- sharp Fine Science Tools 14060-09
Straight serrated forceps Fine Science Tools 11050-10
Castro-Viejo needle driver Fine Science Tools 12565-14
100 grit 1/4 sheet sandpaper ACE Hardware 1010446 Cut into strips
4-0 silk suture, 30", SH needle Ethicon K831
7-0 PDS II absorbable monofilament suture, 30", BV-1 needle Ethicon Z135 Usually comes double-armed. Cut the suture at the midway point to generate two usable sutures.
Rice starch MP Biomedicals 102955
0.9% Sodium Chloride Irrigation Baxter BHL2F7121 Warm to 37 °C prior to use
10 ml syringe Becton Dickinson 309604
6-0 Vicryl absorbable braided suture, 18", RB-1 taper needle Ethicon J212H
6-0 Ethilon nylon monofilament  suture, 18", P-3 needle,  Ethicon 1698G
Tegaderm Transparent Film Dressing Frame Style, 6 cm x 7 cm 3M 1624W Cut in half lengthwise

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Ellis, H., et al. Adhesion-related hospital readmissions after abdominal and pelvic surgery: a retrospective cohort study. Lancet. 353 (9163), 1476-1480 (1999).
  2. Brochhausen, C., et al. Current strategies and future perspectives for intraperitoneal adhesion prevention. J Gastrointest Surg. 16 (6), 1256-1274 (2012).
  3. diZerega, G. S., Campeau, J. D. Peritoneal repair and post-surgical adhesion formation. Hum Reprod Update. 7 (6), 547-555 (2001).
  4. Hellebrekers, B. W., Kooistra, T. Pathogenesis of postoperative adhesion formation. Br J Surg. 98 (11), 1503-1516 (2011).
  5. Herrick, S. E., et al. Human peritoneal adhesions are highly cellular, innervated, and vascularized. J Pathol. 192 (1), 67-72 (2000).
  6. Beyene, R. T., Kavalukas, S. L., Barbul, A. Intra-abdominal adhesions: Anatomy, physiology, pathophysiology, and treatment. Curr Probl Surg. 52 (7), 271-319 (2015).
  7. ten Broek, R. P., et al. Benefits and harms of adhesion barriers for abdominal surgery: a systematic review and meta-analysis. Lancet. 383 (9911), 48-59 (2014).
  8. Becker, J. M., et al. Prevention of postoperative abdominal adhesions by a sodium hyaluronate-based bioresorbable membrane: a prospective, randomized, double-blind multicenter study. J Am Coll Surg. 183 (4), 297-306 (1996).
  9. Cassidy, M. R., Sherburne, A. C., Heydrick, S. J., Stucchi, A. F. Combined intraoperative administration of a histone deacetylase inhibitor and a neurokinin-1 receptor antagonist synergistically reduces intra-abdominal adhesion formation in a rat model. Surgery. 157 (3), 581-589 (2015).
  10. Thaler, K., et al. Coincidence of connective tissue growth factor expression with fibrosis and angiogenesis in postoperative peritoneal adhesion formation. Eur Surg Res. 37 (4), 235-241 (2005).
  11. Hong, G. S., et al. Effects of macrophage-dependent peroxisome proliferator-activated receptor gamma signalling on adhesion formation after abdominal surgery in an experimental model. Br J Surg. 102 (12), 1506-1516 (2015).
  12. Whang, S. H., et al. In search of the best peritoneal adhesion model: comparison of different techniques in a rat model. J Surg Res. 167 (2), 245-250 (2011).
  13. Buckenmaier, C. C. 3rd, Pusateri, A. E., Harris, R. A., Hetz, S. P. Comparison of antiadhesive treatments using an objective rat model. Am Surg. 65 (3), 274-282 (1999).
  14. Rajab, T. K., et al. An improved model for the induction of experimental adhesions. J Invest Surg. 23 (1), 35-39 (2010).

Tags

Medisin anatomi kirurgi mus abdominal adhesjon liten tarmobstruksjon fibrose arrdannelse
Opprettelse av mage Adheranser i Mus
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Marshall, C. D., Hu, M. S., Leavitt, More

Marshall, C. D., Hu, M. S., Leavitt, T., Barnes, L. A., Cheung, A. T. M., Malhotra, S., Lorenz, H. P., Longaker, M. T. Creation of Abdominal Adhesions in Mice. J. Vis. Exp. (114), e54450, doi:10.3791/54450 (2016).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter