इंट्रॉरेकल इंजेक्शन की Published: July 18, 2017 doi: 10.3791/54649

DOI

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Karishma Gupta¹, Shannon B Donnola¹, Zhina Sadeghi³, Lan Lu^1,3, Bernadette O. Erokwu¹, Michael Kavran¹, Adonis Hijaz³, Chris A. Flask^1,2,4

¹Department of Radiology, Case Western Reserve University, ²Department of Pediatrics, Case Western Reserve University, ³Department of Urology, Case Western Reserve University, ⁴Department of Biomedical Engineering, Case Western Reserve University

Introduction

कृत्रिम मॉडल का उपयोग कई मानव रोगों के अध्ययन के लिए किया गया है, जिसमें पैयलोफोर्तिस और मूत्र पथ के संक्रमण (यूटीआई) शामिल हैं। यूटीआई एक वैश्विक स्वास्थ्य समस्या है, और सभी उम्र के बच्चों, पुरुषों और महिलाओं को प्रभावित कर सकता है। ^{1 , 2 , 3} यूटीआई के प्रारंभिक अभिव्यक्ति में सिस्टिटिस शामिल होता है, और अगर मूत्रवाहिनी के साथ संक्रमण बढ़ता है, तो गुर्दा की संक्रमण (पायलोफोर्तिस) का पालन हो सकता है। इसी समय, दुनियाभर में 400 मिलियन लोगों को मधुमेह का प्रसार करीब आ रहा है। ^{4 , 5} महत्वपूर्ण रूप से, यूटीआई की घटनाएं उन रोगियों में 4 गुना अधिक बढ़ सकती हैं जो मोटापे या टाइप 2 डायबिटीज मेल्लिटस हैं, जिसके परिणामस्वरूप आवर्ती यूटीआई संक्रमण (आरयूटीआई), सेप्सिस, पैरेनफोर्तिस से गुर्दे की फाइब्रोसिस और मूत्राशय की शिथिलता का खतरा बढ़ जाता है। ^{6 , 7 , 8} कृंतकयूटीआई का अध्ययन करने में मॉडल महत्वपूर्ण हैं, क्योंकि वर्तमान एंटीबायोटिक चिकित्सा यूटीआई रोगियों के एक सबसेट में केवल एक निरंतर, रोकथामपूर्ण प्रतिक्रिया का उत्पादन करती है। नैदानिक ​​यूटीआई देखभाल में सुधार करने के लिए, महत्वपूर्ण कदम रुतआई और इसकी पैथोफिज़ीयोलॉजिकल प्रक्रियाओं को तीव्र संक्रमण से फाइब्रोसिस को सूजन और टाइप 2 डायबिटीज मेलेटस के प्रभाव को समझना है।

पशु मॉडल को सुधारने का लक्ष्य उन तकनीकों का विकास करना है जो रोग की प्रगति और चिकित्सीय हस्तक्षेप का अधिक सटीक मूल्यांकन करने की अनुमति देते हैं। गुर्दा की क्षति, एंटीबायोटिक उपचार के प्रभाव, और यूटीआई के प्राकृतिक पाठ्यक्रम के अन्य पहलुओं का अध्ययन करने के लिए चूहों और / या चूहों में पैयलोफोर्तिस को प्रेरित करने के लिए कई अलग-अलग दृष्टिकोण लगाए गए हैं। प्रतिगामी यूटीआई स्थापित करने के लिए एक आम तरीका ट्रांस्वार्थ्रैथल कैथीटेराइजेशन है। ^{10 , 11 , 12 , 13 <}/ Sup> इस पद्धति में मूत्रमार्ग के माध्यम से बैक्टीरिया का उपयोग एनेस्थेटेड पशुओं के मूत्राशय में किया गया है। हालांकि इस तकनीक ने मानव प्येलोोनफ्राइटिस को समान रूप से समझाया है, पायलोनफ्राइटिस संक्रमण की वास्तविक घटनाएं और परिमाण कई कारकों के कारण बेहद परिवर्तनीय हो सकती है, जिसमें सहज या यूरेनट्रिक रिफ्लेक्स या मूत्राशय की कमी के दौरान या उसके तुरंत बाद इनोक्यूलेशन के बाद आवाज उठाई जा सकती है। ¹¹ परिणामस्वरूप, आरोही पैयेलोफोराइटिस संक्रमण को प्रेरित करने में प्रयोगात्मक परिवर्तनशीलता इस मॉडल की उपयोगिता को गुर्दे की संक्रमण के साथ-साथ चिकित्सीय रणनीतियों के अध्ययन के लिए सीमित कर सकती है।

यह रिपोर्ट एक सर्जिकल प्येलोोनफ्राइटिस चूहे मॉडल का वर्णन करती है जहां ई। कोली सीधे चूहे के गुर्दे में अंतःक्षिप्त होती है। इस चूहे के मॉडल के आक्रामक होने के बावजूद, ई। कोलाई की मात्रा गुर्दे को मुहैया कराई जा सकती है ताकि एक मजबूत किडनी संक्रमण और सूजन को सक्षम किया जा सके। ¹⁴ इस प्रक्रिया के तहत, हम भी वर्णन करते हैंकैसे इन प्रेरित गुर्दे की संक्रमण vivo चुंबकीय अनुनाद इमेजिंग (एमआरआई) के साथ लंबे समय तक निगरानी की जा सकती है।

Protocol

केस वेस्टर्न रिजर्व विश्वविद्यालय में अनुमोदित संस्थागत पशु देखभाल और उपयोग समिति (आईएसीयूसी) प्रोटोकॉल के अनुसार सभी जानवरों का अध्ययन किया गया। नीचे दी गई शल्य प्रक्रिया की अवधि लगभग 45-60 मिनट है एमआरआई प्रक्रिया प्रत्येक समय बिंदु के लिए लगभग 15 मिनट है।

1. संज्ञाहरण

1. आइसोफ्लुरेन चैंबर में एनेस्थेटिज़ेस एसिस्टेटिज्ड ऑक्सीजन के साथ मिश्रित 2% आईसोफ्लुरेन पर इंजेक्शन लगाने से पहले इंटैक्टेबल एनस्थेसिया इंट्रा-पेरीटोनियल के लिए पशु से निपटने और संयम की सुविधा प्रदान करता है।
2. Isoflurane के संपर्क में 3-5 मिनट के बाद, जांच लें कि जानवर का संवेदनाहट है और पैर की चोंच का कोई जवाब नहीं दर्शाता है।
3. एक्सलैनीन और केटामाइन के मिश्रण के एक अंतर-पेरीटोनियल इंजेक्शन के साथ आगे की तरफ चूहे: 75 मिलीग्राम / किलोग्राम केटामाइन / 10 मिलीग्राम / किलोग्राम xylazine। इंट्रा-पेरीटोनियल इंजेक्शन करते समय, आंतों या अन्य महत्वपूर्ण अंगों के कुछ हिस्सों को पक्का नहीं किया गया है यह सुनिश्चित करने के लिए सुई को वापस खींचें।
4. मैंसामयिक दर्द से राहत प्रदान करने के लिए चीरा के स्थल पर 2 मिलीग्राम / किग्रा बुप्पवाइनाइन का घुटन निकालना

2. सर्जिकल एरिया की तैयारी

1. सर्जरी के लिए उपयोग किए जाने से पहले शल्य चिकित्सा उपकरणों और आपूर्ति को निर्वहन करना और बांझपन के लिए सर्जिकल पैड पर लगा देना। अधिकांश उपकरणों और आपूर्ति को आटोक्लेव किया जा सकता है और पुनः उपयोग किया जा सकता है।
2. सभी सर्जिकल प्रक्रियाओं के लिए बाँझ दस्ताने का उपयोग करें
3. जानवर के दाहिनी ओर से फर को दाढ़ी बनाने के लिए एक बिजली के रेजर का उपयोग करें चीर की पिंजरे के नीचे से हिंद पैर के शीर्ष पर जानवर को शेक के लिए बड़े बाल मुक्त क्षेत्र प्रदान करने के लिए दाढ़ी।
4. आस-पास के क्षेत्रों से कीटाणुरहित क्षेत्र को अलग करने के लिए जानवर को एक बाँझ शल्य-पैड पर रखें।
5. पोविइडोन आयोडीन या बीटाडीन जैसे कीटाणुनाशक त्वचा से साफ़ करें। सर्जिकल साइट के केंद्र में स्क्रबिंग प्रारंभ करें और एक परिपत्र तरीके से बाहर जाएं पॉवीडोन आयोडीन या बीटाडिन के एक नए पोंछे के साथ कम से कम तीन बार दोहराएं। शल्यचिकित्सा साइट को 70% अल्कोहल के साथ साफ़ करें जब तक कि त्वचा स्पष्ट नहीं हो, क्योंकि आयोडीन अवशोषित होने पर जहरीले हो सकता है।

3. सर्जिकल प्रक्रिया

1. सड़न रोकने की स्थिति के तहत इस प्रक्रिया को बनाए रखें
2. बाएं पार्श्व decubitus स्थिति में ऊष्मा गरम बिस्तर पर anesthetized जानवर की स्थिति ऊपर की ओर का सामना करना पड़ सामने।
   नोट: हाइपोथर्मिया को रोकने के लिए जानवरों के मुख्य शरीर के तापमान को 35-37 डिग्री सेल्सियस पर बनाए रखने के लिए देखभाल की जानी चाहिए। इस गर्मी के बिस्तर को निष्फल भी होना चाहिए क्योंकि सड़न रोकने की स्थिति बनाए रखने के लिए आवश्यक है।
3. रिब पिंजरे के लिए लग रहा है, और रिब पिंजरे के निचले भाग में शुरू होने वाले बाँझ आकार के 10 स्केलपेल ब्लेड का उपयोग करके 2-3 सेंटीमीटर सही पृष्ठीय रेट्रोपरिटोनोनियल चीरा बनाना।
4. चीरा के किसी भी किनारे के साथ लंबे समय तक बाँझ धुंध रखें।
5. पेट की गुहा को कल्पना और पहुंचने के लिए, चमड़े के नीचे के ऊतकों, वसा और मांसपेशियों को काटकर रखें। घुमावदार मेमो कैंची का उपयोग गहरा पैंट के लिए अनुमति देंघावों में कटौती और मोटी ऊतकों को काट दिया।
6. यकृत स्पष्ट रूप से दिखाई देने और पहुंचने के बाद, यकृत ऊपर की तरफ वापस लेने के लिए कुंद संदंश का उपयोग करें।
7. दूसरी ओर कुंद संदंश की एक और जोड़ी का उपयोग करना, सही गुर्दा का पर्दाफाश करें ताकि वह पेट की गुहा के बाहर बैठे हों।
8. स्थिति में गुर्दे को पकड़ने के लिए बाएं हाथ की सूचक उंगली और अंगूठे का प्रयोग करें। दाहिने हाथ से, धीरे-धीरे और लगातार 0.1 मिलीलीटर यूटीआई ^{8 9} ई। कोलाई समाधान (1 x 10 ⁸ -1 x 10 ^{9 के} बीच एकाग्रता) एक बाँझ सिरिंज से गुर्दे के पेड़ (जो कि एक सफेद बुलबुले के रूप में दिखाई देता है) में इंजेक्षन ¹⁵
   नोट: संदर्भ ¹⁵ में वर्णित के अनुसार बैक्टीरियल टिटर तैयार करें।
9. पेरिटोनियम में इनोकुल्कम के बहिर्वाह को रोकने के लिए सुई पर शोषक हेस्टेटेट की एक पट्टी रखें। धीरे से सुई को रेनल श्रोणि से बाहर खींचें।
   नोट: देखभाल को दूर करने के लिए ले जाया जाना चाहिए, जिससे आसपास के ऊतकों को प्रभावित नहीं किया जा सकता है, जिसके परिणामस्वरूप ऑफ-टैक्स्ट संक्रमित होते हैंऑन और / या जटिलताओं
10. उदर गुहा में इसे वापस करने से पहले सामान्य खारा के साथ गुर्दे को अच्छी तरह से कुल्ला करने के लिए एक बड़ी सिरिंज का उपयोग करें।

4. सिवर्स

नोट: सिसारे जो ऊतकों में दफन हो जाएंगे, उन्हें 4-0 गैर-अवशोषित लेटे हुए सिवर्स होना चाहिए। अवशोषित या मोनोफिलामेंट साउचर्स का इस्तेमाल शरीर के सतहों के लिए किया जा सकता है।

1. रक्त के प्रवाह की रोकथाम को रोकने के लिए संभवतः टिशू किनारे के समान और सुराख़ों को रखें; आमतौर पर बढ़त से 0.3 सेमी से अधिक नहीं आवश्यक है।
2. त्वचा को समझो और इसे ठीक से दांतेदार संदंश की एक जोड़ी का उपयोग करके थोड़ा उलट कर, और त्वचा को छेदने की तैयारी में सुई धारक को घुमाएगी।
3. सुई को घुमाने के लिए और त्वचा के माध्यम से इसे पारित करने के लिए कलाई को शांत करके त्वचा की पूरी मोटाई के माध्यम से सुई को चलाएं।
4. इस प्रक्रिया को प्रक्रिया के दौरान व्यक्तिगत रूप से त्वचा की बढ़त के लिए दोहराएं।
5. कसऊतक के किनारों का विरोध करने के लिए पर्याप्त sutures। किसी भी कड़ी से रक्त की आपूर्ति, धीमी गति से घाव भरने में बाधा आती है और इसके परिणामस्वरूप भंग हो सकता है।
6. चौकोर समुद्री मील का उपयोग करके सीवन को टाई, जैसे कि यह एक साधारण बाधित सिलाई था, सिवाय इसके कि केवल छोटी किनारा काटा जाता है, 3-4 मिमी पूंछ के बारे में छोड़ दिया जाता है।
7. पहली सिलाई बंद हो जाने के बाद, पहले से 3 मिमी की दूसरी सिलाई को तैयार करने के लिए तैयार रहें और चलने वाले सिवनी को जारी रखें।
8. चीरा के अंत तक पहुंचने के बाद, आखिरी सिलाई को पूरी तरह से खींचें नहीं। इसके बजाय, सिरों के बंद होने के अंतराल अंत को टाई करने के लिए सुई धारक के साथ यहां लूप का उपयोग करें जो कि छोटे किनारा के रूप में है।
9. उपकरण संबंधों का उपयोग करते हुए, स्क्वायर समुद्री डाकू का उपयोग करके सीवन को टाई। इससे नतीजे समाप्त होने पर पूरी तरह गाँठ से 3 किस्में निकलती हैं।

5. पशु वसूली

1. एनेस्थेसिया को रिवर्स करने के लिए सर्जरी के बाद इंट्रा-पेरिटाइन में 2.1 मिलीग्राम / किग्रा यौमिंइन इंजेक्ट करें। ए3-5 घंटे के बाद निमितीय सर्जरी प्रक्रिया से पूरी तरह से ठीक होने की संभावना है।
2. जानवर को एक हीटिंग पैड (हाइपोथर्मिया से बचने के लिए) और सर्जरी के बाद शोषक नरम बिस्तर पर रखें।
3. मौखिक या पैरेन्टेरल तरल पदार्थों के साथ रीहायड्रेशन प्रदान करें जब तक कि ये सामान्य भोजन (24 घंटे के भीतर) वापस लौटा सकें। निर्जलीकरण प्रभावों को सीमित करने के लिए सर्जरी के तुरंत बाद लगभग 0.6 मिलीलीटर सामान्य खारा समाधान peritoneally इंजेक्षन।
4. आईएसीयूसी अनुमोदित पशु देखभाल और उपयोग प्रोटोकॉल में वर्णित के रूप में analgesia प्रदान करें। दर्द प्रबंधन के लिए 5 मिलीग्राम / किग्रा कारप्रोफेन उपमाक्षकों से इंजेक्षन करें।
5. सूजन, एक्सयूडेट, दर्द, या डेहिस्केंस के लिए नियमित रूप से चीरों की निगरानी करें।

6. चुंबकीय अनुनाद इमेजिंग के माध्यम से सत्यापन

1. उच्च क्षेत्र छोटे पशु एमआरआई स्कैनर्स पर आई एन वीवो एमआरआई प्रयोगों का संचालन करें।
2. ऑक्सीजन में 3% isoflurane के साथ संज्ञाहरण प्रेरित करें और एमआरआई स्कैनर में isocenter पर सही किडनी के साथ पशु की स्थिति और उचितरेडियोफ्रीक्वेंसी का तार खाया एक नाकसीन के माध्यम से इमेजिंग प्रक्रिया में लगातार 1-2% आईसोफ्लुरेन संज्ञाहरण के साथ जानवरों को प्रदान करें।
   नोट: चित्रा 1 में दिखाए गए विवो एमआरआई चित्रों के लिए, एक चूहा-आकार का वॉल्यूम कॉइल (आंतरिक व्यास = 72 मिमी) का उपयोग किया गया था।
3. प्रत्येक जानवर की श्वसन दर (40-60 साँस / मिनट) और मुख्य शरीर के तापमान (35 ± 1 डिग्री सेल्सियस) को बनाए रखने के लिए पशु निगरानी और नियंत्रण प्रणाली का उपयोग करें।
4. उच्च संकल्प प्राप्त करने के लिए एक बहु-टुकड़ा, मल्टी-इको स्पीन गूंज एमआरआई अधिग्रहण का प्रयोग करें, दोनों संक्रमित और नियंत्रण गुर्दे की अक्षीय टी 2-भारित छवियां। विशिष्ट एमआरआई अधिग्रहण पैरामीटर दोहराव का समय है = 5000 मिसे, गूंज समय = 40 मिसे, टुकड़ा मोटाई = 2.0 मिमी, विमान में स्थानिक संकल्प = 200 माइक्रोन, 3 संकेत औसत, और 8 मिनट का एक अधिग्रहण समय।

Representative Results

मेडिकल इमेजिंग तकनीक यूटीआई और चिकित्सीय प्रभावकारिता को आकस्मिक रूप से आकलन करने का अवसर प्रदान करती है। इसलिए, एमआरआई का उपयोग 1-2 x 10 ⁷ यूटीआई ⁸ 9 ई। कोलाई के इंजेक्शन के बाद तीव्र श्वसन संक्रमण को शामिल करने और सर्जरी से पहले और बाद में गुर्दे में परिवर्तन की कल्पना करने के लिए किया गया था। चित्रा 1 ए-बी गुर्दे की संक्रमण के एक उत्तरोत्तर बढ़ते क्षेत्र (पीले तीर) दिखाती है। दिनों 1 और 4 के बाद संक्रमण में प्रत्येक जानवर के लिए प्राप्त एमआरआई छवियों की मदद से तीव्र पेयेलोोनफ्राइटिस संक्रमण के विकास की विशेषता है।

चित्रा 1: एएक्सियल टी 1-वेटेड एमआरआई ई। कोली से प्रेरित मूत्राशय के मॉडल से पीलेनफ्राइटिस का मॉडल ( ए ) 1 दिन और ( बी ) 4 दिन बाद संक्रमण (पीले तीर)।

Discussion

कृन्तकों (यानी चूहों और चूहों) में तीव्र पाइलोफोर्तिस बढ़ते हुए ट्रांटोरेथ्रल कैथीटेराइजेशन द्वारा उत्पादित किया जा सकता है। ^{16 , 17 , 18} यह ट्रान्स्वायरथ्रल संक्रमण पद्धति फायदेमंद है कि यह गैर-इनवेसिव है और आरोही संक्रमण के मानव पथोफिजियोलॉजी को नकल करता है। ^{17 , 18 , 1 9 , 20} हालांकि, इस पद्धति को अनियमित संक्रमण दर और चर ई। कोली से शारीरिक रूप से शारीरिक और शारीरिक प्रभावों की वजह से गुर्दे की खुराक से ग्रस्त किया जा सकता है जैसे कि voiding और शारीरिक भिन्नता ¹¹ फियरर एट अल (1 9 71) ई। कोलाई के मूत्राशय में लगाए जाने के बाद 6 40 (15%) चूहे के गुर्दे में पाइलोफोर्तिस के सबूत दिखाते हैं। ¹⁵ इसके अलावा, ई। कोलाई के दोहराया अंतःकरण को एक सप्ताह में कई बार आवश्यक होता थापेटीफोर्फिसिस का उत्पादन करें ^{15 , 1 9}

इस रिपोर्ट में, हम एक वैकल्पिक कृंतक प्येलोोनफ्राइटिस मॉडल का वर्णन करते हैं जो शल्यचिकित्सा से सीधे ईकोली को रेनल श्रोणि में पेश करता है। पैयेलोफोराइटिस तकनीक के सर्जिकल मॉडल का प्राथमिक लाभ में 1 एक्स 10 ⁸ - 1 एक्स 10 ^{9 के} बीच ई। कोलाई एकाग्रता के साथ-साथ एक ही शारीरिक स्नायु साइट पर सही बैक्टीरिया का इंजेक्शन जानवर। ¹⁵ यह सीधा इंजेक्शन भाटा के लिए अधिक विश्वसनीय संक्रमण प्रदान करने के साथ-साथ इंजेक्शन खुराक के अधिक सटीक निर्धारण की आवश्यकता को टाल जाता है। कुल मिलाकर, यह सर्जिकल प्येलोोनफ्रिटिस मॉडल अध्ययन के लिए एक वैकल्पिक विकल्प प्रदान करता है जिसके लिए मूत्रमार्ग के रिफ्लक्स के न्यूनतम प्रभाव के साथ संगत, प्रतिलिपि बनाने योग्य संक्रमण की आवश्यकता होती है।

इस सर्जिकल तकनीक की सफलता का अनुकूलन में शामिल हैं:1) श्वसन गति को सीमित करने के लिए और पर्याप्त कार्य समय की अनुमति देने के लिए एक गहरी संज्ञाहरण प्राप्त करना; 2) गैर-प्रीपेड क्षेत्रों से प्रदूषण को रोकने के लिए शल्य चिकित्सा चीरा के क्षेत्र को शेविंग करना; 3) संदूषण की शुरूआत रोकने के लिए नसबंदी; 4) ई। कोलाई की एक ज्ञात खुराक के चूहों की गुर्दे की सूजन में सावधानीपूर्वक इंजेक्शन; 5) गुर्दे के बाद इंजेक्शन की पूरी तरह खारा कुल्ला; 6) सूअरों के माध्यम से घाव किनारों के करीब सन्निकटन; और 7) हाइपोथर्मिया और प्रणालीगत दुष्प्रभाव जैसे इंट्रा-ऑपरेटिव और पोस्ट-ऑपरेटिव जटिलताओं की निगरानी। यद्यपि जानवरों के आराम को बढ़ाने के लिए एक हीटिंग पैड का इस्तेमाल किया गया था, लेकिन इस प्रोटोकॉल को मुख्य शरीर के तापमान को बनाए रखने के लिए एक गुदा तापमान संवेदक का उपयोग करके और अनुकूलित किया जा सकता है। एक सफल अस्तित्व की सर्जरी हासिल करने में एक महत्वपूर्ण कदम उचित संज्ञाहरण और पशु श्वसन की निगरानी है। ऐसा करने में विफलता जानवरों के संज्ञाहरण के स्तर को स्थिर करने और अत्यधिक की वजह से अवांछित चोट को सीमित करने के लिए विस्तारित सर्जिकल समय में परिणामप्रस्ताव। कार्यक्षेत्र के समझौताग्रस्त बाँझपन और / या ई। कोलाई बैक्टीरिया के साथ पेरिटोनियम के अनपेक्षित संक्रमण भी सर्जिकल मॉडल से संबंधित सामान्य जटिलताएं हैं। इसलिए, शल्य चिकित्सा उपकरण को आटोक्लेव करने के लिए पर्याप्त तैयारी, पूरे कार्यक्षेत्र को बाँधने के लिए, और अतिरिक्त ई को सीमित करने के लिए प्रक्रियात्मक प्रयास । कोलाई संक्रमण सभी पशु मृत्यु दर को कम करने में मदद करते हैं और साथ ही गलत संक्रमण के परिणाम भी।

गुर्दे में ई। कोलाई के प्रत्यक्ष इंजेक्शन के लाभ के बावजूद, पैयेलोफोराइटिस के इस सर्जिकल मॉडल में ट्रांसवायर्थथल डिलिवरी पद्धति की तुलना में कई सीमाएं भी हैं। प्रत्यक्ष सर्जिकल इंजेक्शन दृष्टिकोण का उपयोग करने के लिए सबसे बड़ी कमी तकनीक की अंतर्निहित आक्रमण है। हालांकि, उचित बाँझ तकनीक के कार्यान्वयन के साथ मृत्यु दर काफी कम है और पर्याप्त दर्द प्रबंधन, हीटिंग पैड के माध्यम से तापमान नियंत्रण, और नरम, शोषक बिस्तर के बाद सर्जरीशीघ्र वसूली सुनिश्चित करें इसके अतिरिक्त, नसबंदी के लिए शल्य चिकित्सा उपकरण आटोक्लेव करना, नसबंदी के लिए एक अत्यंत विश्वसनीय और लागत प्रभावी विधि है। समग्र सर्जिकल समय प्रतिबद्धता आमतौर पर 1 घंटे से कम है। इसके अलावा, एनेस्थेसिया का प्रशासन, साथ ही साथ शरीर के वजन में कैलिब्रेट किए गए दर्द और दवाओं के स्थानीय और प्रणालीगत वितरण सटीक खुराक वितरण और विषय सुरक्षा सुनिश्चित करता है। सर्जिकल मॉडल में एक और संभावित सीमा यह है कि छोटी शारीरिक संरचनाओं के कारण चूहों में सर्जिकल तकनीक अधिक मुश्किल होती है। ट्रांसवरथल विधि के विपरीत, जो दोनों चूहों और चूहों में लागू किया जा सकता है, सर्जिकल मॉडल के लिए चूहे मॉडल का प्रयोग करने की आवश्यकता से अध्ययन की समग्र लागत बढ़ जाती है और विभिन्न आनुवंशिक परिवर्तनों के अध्ययन पर बाधाएं आ सकती हैं जो कि अधिक आसानी से उपलब्ध हो सकती हैं और माउस मॉडल में लागत प्रभावी जैसा कि ऊपर उल्लेख किया गया है, सर्जिकल विधि की एक और महत्वपूर्ण सीमा यह है कि यह मानवीय प्येलोोनफ्राइटिस का प्रतिनिधित्व नहीं करता हैनिकटता के रूप में transurethral विधि

इस बीच, हमने मूत्र संक्रमणों को ट्रैक करने के लिए एमआरआई तकनीकों का इस्तेमाल किया था जैसा कि चित्रा 1 में दिखाया गया है, एमआरआई स्कैनिंग समय के साथ गुर्दे की संक्रमण को अनजाने में मॉनिटर करने की क्षमता प्रदान करता है। ई। कोलाई संक्रमण पर नज़र रखने के लिए एक वैकल्पिक दृष्टिकोण बैक्टीरिया के फ्लोरोसेंट लेबलिंग के माध्यम से है। ^{11 , 18} हालांकि, ऊतक द्वारा हल्की अवशोषण के कारण फ्लूसेन्सेंट इमेजिंग इस चूहा मॉडल में कम प्रभावी है (चूंकि माउस मॉडल के विपरीत) बहुत कम पता लगाने की संवेदनशीलता है। इसलिए, एमआरआई अपने प्रारंभिक चरणों में ई। कोलाई संक्रमण को ट्रैक करने और तीन आयामों में संक्रमण की सीमा पर क्षेत्रीय जानकारी प्रदान करने के लिए एक अधिक संवेदनशील साधन प्रदान करता है।

यूटीआई / तीव्र पेयोनोफ्राइटिस पैथोफिजियोलॉजी के तंत्र, और गुर्दे की फाइब्रोसिस की प्रगति खराब समझी जाती है। संक्रमित एजेंट, इसके तहतImmunological मेजबान प्रतिक्रिया झूठ बोल रही है, और भड़काऊ प्रतिक्रियाओं एक अभिन्न भूमिका निभाते हैं, लेकिन प्रत्येक का महत्व अज्ञात है। इस प्रत्यक्ष इंजेक्शन प्रक्रिया का उपयोग करके गुर्दे के जीवाणुओं को लक्षित डिलीवरी में सुधार के लिए कृंतक मॉडल में तीव्र पैयेलोफोराइटिस की प्रजनन क्षमता बढ़ने की क्षमता है, और संभवतः यूटीआई के उपचार के लिए शुरुआती चरण के चिकित्सकीय हस्तक्षेप का आकलन करने के लिए संभव है। इस पद्धति को शुरू में गुर्दे में जीवाणुओं के वितरण का अनुकूलन करने के लिए एक दृष्टिकोण के रूप में विकसित किया गया था, लेकिन अन्य अभिकर्मकों और रोगजनकों के वितरण के लिए भी आवेदन किया गया है। इस पद्धति में इसी तरह सिस्टिटिस, पैयलोफेफिटिस, यूटीआई, और मधुमेह की किडनी रोग के अध्ययन के लिए लाभ की पेशकश कर सकते हैं।

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
Absorbing Pad	Fisher	14-127-47
Sterile Cotton Gauze Pad	Fisher	22-415-469
Latex Surgical Gloves	Henry Schein Animal Health	21540
Curved Mayo Scissors	Fisher	S17341
Straight Blunt Foreceps	Fisher	08-895
Scalpel Handle	Fisher	08-913-5
Sterile Scalpel Blades	Fisher	53220
1 ml Luer-Lok Syringe	BD Biosciences	309628	For bacterial injections
20 ml Luer-Lok Syringe	BD Biosciences	301031	For saline wash
Hemostat	Seneca Medical	240267
23 G 3/4 in. Needle	BD Biosciences	305143
30 G 1 in. Needle	BD Biosciences	305128
U-100 Insulin Syringe	Exel International	25846	For medication injections
Isoflurane	Henry Schein Animal Health	050033
Xylazine	Henry Schein Animal Health	33197	Inject IP
Ketamine	Patterson Vetrinary	07-881-9413	Inject IP
Yohimbine (Atipamezole)	Patterson Vetrinary	07-867-7097	Inject IP after surgery
Bupivacaine (Marcaine)	Patterson Vetrinary	07-890-4584	Inject SQ at site of incision
4-0 Chromic Gut Suture	Ethicon Inc.	U203H
4-0 Braided Vicryl Suture	Ethicon Inc.	J304H
1 ml SubQ Syringe	BD Biosciences	309597
E. coli  UTI89 or CFT073	ATCC	700928
Surgicel Absorbable Hemostat	Ethicon Inc.	ETH1951CS
Biospec 9.4T MRI	Bruker	94/20 USR