Introduction
Koronar sykdommer og deres komplikasjoner er blant de viktigste årsakene til dødsfall på verdensbasis. Nåværende terapeutiske strategier fokusere på å reetablere blodstrømmen, enten ved å utvide det innsnevrede kar eller ved å lage en bypass. Koronar bypass pode (CABG) ved hjelp vene autografts ble først beskrevet i 1968 og har blitt videreutviklet gjennom årene. Bortsett fra revaskularisering av den venstre fremre nedstigende koronararterie, blir saphenous vein ledninger som brukes mest en. Men pode patency forblir akilleshæl av saphenous vene grafts (SVG). Ett år etter operasjonen, er pode patency 85%, slippe til 61% etter ti år 2,3. Avsløring de patofysiologiske mekanismer og årsaker til SVG patency tap er derfor en viktig oppgave.
Denne videoen viser en rotte vene inter modell for å undersøke blodåre graft tap. De overordnede målene for denne metoden er å utforske den underliggende pathobiologicalog fysiologisk prosesser i løpet av sykdomsprogresjon og å utvikle en egnet modell for medikament eller terapeutisk alternativ testing. Ved å transplantere den overfladiske magesekkens blodåre i den arterielle systemet, denne modellen etterligner klinisk setting av koronar bypass pode. Kirurgisk traume, ischemi, og veggen stress er viktige triggere for patologiske vaskulære endringer og blir etterlignet i modellen beskrevet.
Ulike modeller og arter er tilgjengelige for å undersøke blodåre graft blodtapet. Store dyremodeller, for eksempel griser 4, sauer 5, hunder 6, og aper 7, ligner menneskelige fartøy og anatomiske strukturer og dermed muliggjøre komplekse terapeutiske strategier, for eksempel bypass stenting eller nye kirurgiske teknikker, for å bli testet åtte. Imidlertid er spesiell bolig, utstyr og personale nødvendig. I tillegg er høye kostnader og behovet for en ekstra anestesi under operasjonen hemme deres bredere anvendelse. Smalle dyr, inkludert rotter, er lette å håndtere, ikke krever spesiell bolig, og har håndterbare kostnader. Sammenlignet med musemodeller 9,10, rottemodeller har fordelen av bedre brukbarhet og derfor mindre variabilitet i utfallet. Rotter er fysiologisk og genetisk mer lik mennesker enn mus 11,12. I tillegg er de fleste villtype mus bare utvikle begrenset myointima 13, som gjør musemodeller utsatt for type II feil. Den histologi av hovedmuse årer, som vena cava inferior, bare består av noen få cellelag og gjengir tidlig evaluering vanskelig 13. En ytterligere ulempe er den lille mengden av vev tilgjengelige for etterfølgende analyse etter pode utvinning.
Modellen som er beskrevet i denne video er reproduserbar, billig og lett å utføre, og det kan etableres raskt og pålitelig. Det er spesielt egnet for evaluering av dyre eksperimentelle terapeutiske midler, så som virale vektorerfor genterapi, på en økonomisk måte.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Dyr mottatt human behandling i samsvar med Guide for prinsippene for forsøksdyr, utarbeidet av Institutt for laboratorie Animal Resources og publisert av National Institutes of Health. Alle dyr protokoller ble godkjent av den ansvarlige kommunen ( "Amt für Gesundheit und Verbraucherschutz, Hansestadt (Kontor for helse og forbrukervern) Hamburg").
1. Animal Care
- Skaff Lewis rotter (LEW / CRL) rotter og Rosa / luciferase-LEW transgene rotter som veide 300-350 g fra Institutt for forsøksdyr.
- Hold rottene under vanlige betingelser i ventilerte skap og mate dem standard rottemat og autoklaveres vann ad libitum.
- Utfør en pode transplantasjon ved hjelp av ROSA / luciferase-LEW transgene rotter som givere og syngene LEW / CRL rotter som mottakerne.
2. Utarbeidelse av Donor Rat
- Bruk en Induction kammer til bedøver en rotte med isofluran (2,5-3%).
- Plasser rotte på ryggen og vedlikeholde anestesi med en ansiktsmaske som dekker munn og nese. Sjekk for tilstrekkelig dybde av anestesi ved å knipe bakbeina og verifisere fravær av reflekser. Påfør litt dyrlege salve til øynene for å hindre tørrhet mens under anestesi.
- Spre bakbena og fikse sin posisjon ved hjelp av tape.
- Barbere lyske håret med et hår trimmer og desinfisere hele området ved hjelp av povidon-jod etterfulgt av 80% etanol. Gjenta desinfeksjon trinn to ganger.
MERK: Den kirurgiske området, gasbind, og kirurgiske instrumenter bør steriliseres. Opprettholde et sterilt felt gjennom hele prosedyren og slitasje engangsbruk, sterile kirurgiske hansker, masker og hetter. - Under et mikroskop, utføre en vertikal snitt langs linea inguinalis. Bruk to pinsett til å forsiktig skille subcutaneous vev og utsett overfladisk magesekkens blodåre fra sin origin på lårvenen. isolere den overfladiske magesekkens blodåre nøye fra omkringliggende vev.
- Stopp blodstrømmen i den overfladiske magesekkens blodåre ved hjelp av to mikro klemmer.
- Høste en ca 0,5 til 1 cm segment av venen ved forsiktig å løfte det isolerte vene med pinsett og å skjære gjennom karet med microscissors. La mikroklemmene på fartøyet stubben for å forhindre tap av blod. Plasser fjernet stykke blodåre på steril kompress. Nøye en 30 G nål inne i den ene enden av høstet venen og skylle beholderen med heparin (50 enheter / ml).
MERK: Håndter vene med forsiktighet og unngå skader under løfting, skjæring, og rødme. Sørg for å skylle pode med riktig mengde heparin. - Holde fartøyet segmentet i 1% lidokain på is inntil transplantasjon inn i mottakeren rotte for å hindre at et fartøy krampe.
- Avlive donor rotte ved å øke anestesi til 5% isofluran. Etter 2-3 min, opno buken langs linea alba, skjære gjennom mellomgulvet, og fjern hjertet til å stoppe sirkulasjon.
3. Utarbeidelse av mottaker Rat
- Bedøve og fikse mottakeren rotte på samme måte som donor rotte.
- Barbere den mediale siden av bena med et hår trimmer og desinfisere tre ganger ved hjelp av povidon-jod og 80% etanol.
- Overvåke anestesidybden og sikre at det er tilstrekkelig ved å bekrefte fravær av reflekser når klyping bakbena.
- Utfør en median femoral snitt fra kneet til lyske fold. Under et mikroskop ved å bruke 2 tang for å skille lårarterien fra omgivelsene.
- Bruk mikroklemmer for å stoppe strømmen av blod. Plasser den proksimale klemme først, etterfulgt av den distale klemmen.
- Skjær ut et kort segment av klem lårarterie med microscissors og kast den. Forkorte rester arteriell stubbe med microscissors, og skaper et gap som er1-2 mm større enn venen pode. Skyll arteriell stubbe med heparin ved hjelp av en 30 G nål.
MERK: Hvis adventitia stikker litt utenfor fartøyet stubben, bruker tang for å trekke det noe over enden av beholderen og fjerne et stykke. - Plasser høstet venen fra trinn 2.8 mellom de arterielle stubber og justere lengden, slik at den passer hensiktsmessig inn i spalten. Legg merke til at retningen av venen.
- Utfør proksimale anastomose først med en 10-0 prolene sutur. Gjennomføre enkle masker i rekkefølgen vist (figur 1D). Start med en sutur på hver lateral side før du legger tre sting på ventral side. Deretter plasserer tre masker på ryggsiden av beholderen for å fullføre anastomose.
- Kobler de fjerntliggende fartøy med pode ved hjelp av samme teknikk som for den proksimale anastomose som er beskrevet i trinn 3,8. Igjen, start med en sutur på hver lateral side, og deretter plassere tre sting på ventral side og dorsalsiden.
- Legg inn to 1-ml sprøyter med fibrin lim komponent 1 og 2. Løft forsiktig pode med pinsett og slippe ca 100 mL fibrin lim komponent 1 under pode, etterfulgt av komponent 2.
MERK: Pass på at komponenter 1 og 2 skal anvendes på en 1: 1-forhold. - Sett pode tilbake i sin stilling og slippe ytterligere 100 ul av komponenter 1 og 2 på toppen av transplantatet. Være sikker på at limet omfatter både pode og den anastomose for å hindre anastomotisk insuffisiens og over-distensjon av venen pode.
- Åpne forsiktig den fjerne klemmen, etterfulgt av den proksimale.
- Bekreft en vellykket operasjon ved å se etter en synlig puls i det transplanterte venen og distal lunge pode.
- Fjern dreven lim, som hindrer huden nedleggelse. Bruk pinsett til å løfte herdet lim og fjerne overflødig med microscissors. Lukk huden lag med 5-0 prolene sting.
- Sprøyt 4-5 mg / kg Carprofen subkutant før slik at rotta å våkne. Ikke la dyret uten tilsyn før det har gjenvunnet nok bevissthet til å opprettholde sternal recumbency. Holde dyret i en enkelt merd før det er fullt restituert.
- Legg metamizol til drikkevann (50 mg metamizol per 100 ml) som smertestillende medikamenter for følgende 3 dager og overvåke dyret daglig.
4. Duplex Sonografi
MERK: Bruk duxplex sonography å visualisere blodstrømmen ikke-invasiv hos rotter 14.
- Bedøver en rotte i en induksjonskammeret (isofluran 2%). Plasser rotte på ryggen og opprettholde anestesi med en ansiktsmaske som dekker nesen.
- Bruk hårklippemaskiner og hårfjerningskrem for å fjerne hår rundt området av låret.
- Påfør ultralyd gel til låret. Pass på at det ikke er luftbobler. Acquire duplex sonography bilder ved hjelp av en MS 400 svinger (senter frekvens: 30 MHz) med en bildefrekvens på 230-400 bilder / sek.
5. Histopatologi
MERK: Harvest og beis fartøyet med Masson er Trichrome farging for morfometrisk analyse 15.
- Fest høstet fartøyet i 4% paraformaldehyde natten og tørke den i økende konsentrasjoner av etanol. Embed prøven i parafin og skjær den i 5 mikrometer tykke skiver med en mikrotom.
MERK: Paraformaldehyde er giftig og må behandles med forsiktighet. - Deparaffinize lysbildene før farging dem med Trichrome fargeløsning. Dehydrere de fargede lysbilder, fjerne dem med xylen, og montere dem i monteringsmedium. Etter tørking lysbildene, se prøvene med et mikroskop.
6. Bioluminesens Imaging (BLI)
MERK: postoperativ pode ble sporet over tid in vivo ved å måle bioluminescent signal 16.
- Oppløs 1 g D-Luciferin kaliumsalt i 22 ml PBS og injisere det intraperitonealt i rotter (375 mg / kg kroppsvekt). Vent i 15 min for luciferin for å sirkulere i dyret.
- Plasser rotte i en real-time bioluminescent kvantifisering system og få tilgang bioluminescence signal.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Rotte vene inter modellen er egnet for å studere utviklingen av myointima hyperplasi og vene pode svikt. Dyr komme godt fra operasjonen og viser utmerket fysisk form etter operasjonen. Figur 1 viser de viktigste operasjonstrinn. Etter at huden snitt langs LINEA inguinalis er magesekkens overfladiske venen og lårarterie identifisert (figur 1A). Høsting av graftet bør utføres omhyggelig, uten å skade implantatet (figur 1B), da dette kan føre til tidlig svikt pode og åpenhet tap. Etter plassering av graft i resipienten dyr (figur 1C), blir anastomose masker utføres i den rekkefølge som er vist i figur 1D. Den ferdige venøs inter pode ser blek (figur 1E) og skal bli rød og viser pulse etter reperfusjon (figur 1F).
De vellykkede INTEGRATI på av venen inn i den femorale arterien og pode åpenhet etter transplantasjon kan bekreftes ikke-invasiv måte ved hjelp av tosidig Sonografi (figur 2A). Ved å transplantere venen av en Luc-positive rotte i en syngene Luc-negative rotte, kan bioluminesens bilde brukes til å overvåke pode tilstedeværelse over tid (figur 2B).
Myointima hyperplasi utvikler seg progressivt i transplantatet over tid. Histologisk farging med Masson er Trichrome demonstrerer myointima dannelse inne i innvendig elastisk lamina (figur 2C). Beregningen av luminal utslettelse, (dividere tverrsnittsarealet av lumen med arealet innenfor den indre elastiske lamina) viste et gradvis tap av graft blod fra dag 7 til dag 28 etter operasjonen, noe som bekrefter de reproduserbare dynamikken i myointima hyperplasi i dette rottemodell (figur 2D).
re en "src =" / files / ftp_upload / 54839 / 54839fig1.jpg "/>
Figur 1: detaljert plan for den kirurgiske prosedyren. (A) Anatomy av lyskeområdet. (B) Innhøstings magesekkens overfladisk blodåre graft. (C) Plassere venen pode mellom arterielle stumper mottakeren dyret. (D) Order of anastomose masker. (E) Side etter venøs pode konstruksjon. (F) Side etter reperfusjon av venøs inter pode. Svarte piler markere magesekkens overfladisk blodåre. Den Scale bar = 5 mm. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Figur 2: Karakterisering av det dyremodell. (A) Duplex sonography av en venøs inter pode immed iately etter transplantasjon (0d) og 28 dager etter operasjonen (28 d). (B) BLI fra Luc-positive grafts transplantert inn Luc-negative rotter ved 0 dager og 28 dager etter operasjonen. (C) Representative pode tverrsnitt høstet etter dager 7, 14, 21, og 28 og farget med Masson er Trichrome. (Øvre panel: Skala bar = 400 mikrometer, Nedre panel: Skala bar = 100 nm) (D) Luminal utslettelse i prosent er beregnet ved å dele den nye innvendige lumen fra de tidligere lumen. Intergruppeforskjeller ble vurdert av enveis variansanalyse (ANOVA) med Bonferroni post-hoc test. p <0,01. Feilstolpene er standardavviket (SD). Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
_upload / 54839 / 54839Sup1.jpg "/>
Supplemental Fil 1: Skjematisk illustrasjon av den kirurgiske prosedyren. En loddrett snitt langs linea inguinalis er utført på donor rotte, utsette den nedre epigastriske vene. Blodstrømmen er stoppet med to mikro klemmer, og en vene segment 0,5-1,0 cm lang er høstet. I mottakeren rotter, blir en median femoral innsnitt utført, utsette den femorale vene, arterie, og nerve. Etter fastklemming av lårarterie, er et fartøy segment fjernet og erstattet av det høstede vein graft. Klikk her for å se Supplemental File en (eller høyreklikk for å laste ned).
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Denne videoen viser en rotte vene inter modell for å undersøke blodåre graft tap og å tillate for utforskning av de underliggende patologiske prosesser og utprøving av nye medikamenter eller terapeutiske muligheter.
Anestesi er en viktig del av kirurgiske prosedyrer. En kontinuerlig inhalative anestesi system anbefales, da dette er en trygg og enkel metode, spesielt under langvarig drift. Dette kan være av stor betydning under treningsfasen, når operasjonen tar mer enn en time.
Med hensyn til den kirurgiske prosedyren, er det viktig ikke å skade venen pode under innhøstingen og implantasjon 17. Gripende adventitia av fartøyet kan hindre skader på venen pode og unngå påfølgende trombedannelse og pode svikt. Graft åpenhet kan bestemmes umiddelbart etter blodåre graft konstruksjon gjennom observasjon av blodstrøm og pulsering i venen pode eller distal arterie, samt gjennom duplex sonografi.
Et annet viktig aspekt ved fremgangsmåten er for å forhindre over-distensjon av venen pode. Plutselige eksponering av venen pode til den arterielle trykksystem fører til økt vegg spenning, påfølgende over-distensjon, og forandringer i strømningsmønsteret. Dette er kilder til trombose, anastomotic insuffisiens, og tidlig graft svikt. Støtte venen pode med fibrin lim kan forhindre ukontrollert ballong og beskytte intima og media fra mekanisk ødeleggelse. Absorberbare kollagen deksler er et alternativ til fibrin lim og kan anvendes som perivenøs dekker 18.
Den mest kritiske trinnet i denne protokollen er utvilsomt anastomose mellom venen pode og arterien. Forsiktighet må utvises for ikke å gjennombore de to vegger av beholderen, da dette vil føre til innsnevring av anastomosen, noe som kan resultere i tidlig svikt av transplantatet. I tillegg spesiell attention må betales til lokalisering av sting. Congruency av sutur stillinger i arterie og vene sikrer pode patency og hindrer insuffisiens. For å lette dette, kan sting utføres i rekkefølgen som vises i figur 1D.
Graden av tekniske problemer kan ses på som en begrensning av teknikken, fordi en nybegynner må først bli kjent med mikrokirurgisk utstyr og de små størrelsene på de anatomiske strukturer. Men andre modeller som brukes stille de samme problemene, og vi tror at denne videoen vil hjelpe uerfarne kirurger å mestre denne teknikken i løpet av kort tid.
Mange små dyremodeller for venøse pode svikt er beskrevet i litteraturen. Men de fleste modeller bare gi meget små mengder av vev for analyse 13. En fordel ved denne fremgangsmåte er den forholdsvis store mengder av vev som kan oppnås. Man pode kan deles i flere deler ennd brukes for forskjellige analyser, og dermed redusere antall forsøksdyr som kreves.
Nylige fremskritt i sink-finger nuklease teknologi aktivert generering av knockout rotter 19. Ved å velge egnede knock-out rotter, kan pode patency tap bli studert i ulike sykdomstilstander. For eksempel kan renin knockout rotter anvendes for å studere hypertensjon 20. Disse genetiske bakgrunn kan kombineres med denne dyremodell for å fange opp informasjon om mekanismene for blodåre graft svikt i ulike settinger eller om virkningen av visse gener i utviklingen av myointima hyperplasia.
Konklusjonen er at den modell som er beskrevet i denne video er reproduserbar, billig og lett å utføre, og det kan etableres raskt og pålitelig. Myointima hyperplasi, som er den viktigste årsaken til blodåre graft svikt, utviklet seg raskt over fire uker, noe som resulterer i progressiv luminal utslettelse. Vellykket testet behandlingalternativer i denne modellen kan bli ytterligere bekreftet i store dyremodeller.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Acknowledgments
Forfatterne takker Christiane Pahrmann for henne teknisk assistanse. Denne studien ble finansiert av Deutsche Stiftung fuer Herzforschung (F / 28/14). DW ble støttet av Travel Award fra International Society for hjerte- og lungetransplantasjon. TD fikk Else Kröner Excellence Stipend fra Else-Kröner-Fresenius-Stiftung (2012_EKES.04). SS mottatt forskningsmidler fra Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG, DE2133 / 2-1, TD og SCHR992 / 3- 1, SCHR992 / 4-1, SS).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Rat LEW/Crl | Charles River | Stock number 004 | |
| Rat LEW-Tg(Gt(ROSA)26Sor- 1 luc)11Jmsk |
Institute of laboratory animals, Kyoto University, Japan | NBPR rat number 0299 | http://www.anim.med.kyoto-u.ac.jp/NBR/ |
| PFA 4% | Electron Microscopy Sciences | #157135S | 20% |
| hair clipper | WAHL | 8786-451A ARCO SE | |
| Forene | AbbVie | PZN 10182054 Art.Nr.: B506 | Isoflurane |
| microsurgical clamp | Fine Science Tools | 18055-04 | Micro-Serrefine - 4 mm |
| clamp applicator | Fine Science Tools | 18056-14 | |
| hair removal creme | Rufin cosmetic | 27618 | |
| Povidone-Iodine | Betadine Purdue Pharma | NDC:67618-152 | |
| 10-0 Ethilon suture | Ethicon | 2814G | |
| 5-0 prolene suture | Ethicon | EH7229H | |
| Rimadyl | Pfizer | 400684.00.00 | Carprofen |
| Novaminsulfon | Ratiopharm | PZN 03530402 | Metamizole |
| Heparin | Rotexmedica | PZN: 3862340 | 25.000 I.E./ ml |
| Xylocain 1% | AstraZeneca | PZN: 1137907 | Lidocain |
| EVICEL | J&J Med.Ethicon Biosur | PZN 7349697 Art. Nr.:EVK01DE | fibrin glue |
| NaCl 0.9% | B.Braun | PZN 06063042 Art. Nr.: 3570160 | |
| Vevo 770 high-resolution in vivo micro-imaging system | VisualSonics | duplex sonography | |
| Ecogel 100 ultrasound gel | Eco-med | 30GB | |
| D-Luciferin Firefly, potassium salt | Biosynth | L-8220 | |
| PBS pH 7.4 | Gibco | 10010023 | |
| Xenogen Ivis 200 | Perkin Elmer | bioluminescence imaging | |
| Weigerts iron hematoxylin Kit | Merck | 1.15973.0002 | Trichrome staining |
| Resorcine-Fuchsine Weigert | Waldeck | 2.00E-30 | Trichrome staining |
| Acid Fuchsin | Sigma-Aldrich | F8129-25G | Trichrome staining |
| Ponceau S solution | Serva Electrophoresis | 33427 | Trichrome staining |
| Azophloxin | Waldeck | 1B-103 | Trichrome staining |
| Molybdatophosphoric acid hydrate | Merck | 1.00532.0100 | Trichrome staining |
| Orange G | Waldeck | 1B-221 | Trichrome staining |
| Light Green SF | Waldeck | 1B-211 | Trichrome staining |
| Vitro-Clud | Langenbrinck | 04-0001 | |
| Glacial Acetic Acid | Sigma-Aldrich | 537020 | |
| 37% HCl | Sigma-Aldrich | H1758 | |
| Xylene | Th. Geyer | 3410 | |
| Paraffin | Leica biosystems | REF 39602004 | |
| Ethanol absolute | Th. Geyer | 2246 | |
| Ethanol 96% | Th. Geyer | 2295 | |
| Ethanol 70% | Th. Geyer | 2270 | |
| Slide Rack | Ted Pella | 21057 | |
| Staining dish | Ted Pella | 21075 | |
| Bepanthen Eye and Nose ointment | Bayer | 1578675 | Eye ointment |
References
- Sabik, J. F., 3rd, Understanding saphenous vein graft patency. Circulation. 124, 273-275 (2011).
- Goldman, S., et al. Long-term patency of saphenous vein and left internal mammary artery grafts after coronary artery bypass surgery: results from a Department of Veterans Affairs Cooperative Study. J Am Coll Cardiol. 44, 2149-2156 (2004).
- Fitzgibbon, G. M., et al. Coronary bypass graft fate and patient outcome: angiographic follow-up of 5,065 grafts related to survival and reoperation in 1,388 patients during 25 years. J Am Coll Cardiol. 28, 616-626 (1996).
- O'Brien, J. E., et al. Wound healing around and within saphenous vein bypass grafts. J Thorac Cardiovasc Surg. 114, 38-45 (1997).
- El-Kurdi, M. S., et al. Ovine femoral artery bypass grafting using saphenous vein: a new model. J Surg Res. 193, 458-469 (2015).
- Yuda, A., et al. Angiotensin II receptor antagonist, L-158,809, prevents intimal hyperplasia in dog grafted veins. Life Sci. 68, 41-48 (2000).
- McCann, R. L., Hagen, P. O., Fuchs, J. C. Aspirin and dipyridamole decrease intimal hyperplasia in experimental vein grafts. Ann Surg. 191, 238-243 (1980).
- Thomas, A. C. Animal models for studying vein graft failure and therapeutic interventions. Curr Opin Pharmacol. 12, 121-126 (2012).
- Hu, Y., Xu, Q. New mouse model of vein bypass graft atherosclerosis. Heart Lung Circ. 11, 182-188 (2002).
- Salzberg, S. P., et al. Increased neointimal formation after surgical vein grafting in a murine model of type 2 diabetes. Circulation. 114, I302-I307 (2006).
- Abbott, A. Laboratory animals: the Renaissance rat. Nature. 428, 464-466 (2004).
- Lindblad-Toh, K. Genome sequencing: three's company. Nature. 428, 475-476 (2004).
- Yu, P., Nguyen, B. T., Tao, M., Campagna, C., Ozaki, C. K. Rationale and practical techniques for mouse models of early vein graft adaptations. Journal of vascular surgery. 52, 444-452 (2010).
- Olver, D. T., Lacefield, J. C., Shoemaker, K. J. Evidence of bidirectional flow in the sciatic vasa nervorum. Microvascular research. 94, 103-105 (2014).
- Stubbendorff, M., et al. Inducing myointimal hyperplasia versus atherosclerosis in mice: an introduction of two valid models. Journal of visualized experiments : JoVE. , (2014).
- Conradi, L., et al. Immunobiology of fibrin-based engineered heart tissue. Stem cells translational medicine. 4, 625-631 (2015).
- Dashwood, M. R., Tsui, J. C. 'No-touch' saphenous vein harvesting improves graft performance in patients undergoing coronary artery bypass surgery: A journey from bedside to bench. Vascular Pharmacology. 58, 240-250 (2013).
- Bekler, H. I., Rosenwasser, M. P., Akilina, Y., Bulut, G. The use of an absorbable collagen cover (NeuraWrap) improves patency of interpositional vein grafts. Acta orthopaedica et traumatologica turcica. 44, 157-161 (2010).
- Geurts, A. M., et al. Knockout rats via embryo microinjection of zinc-finger nucleases. Science. 325, 433 (2009).
- Moreno, C., et al. Creation and characterization of a renin knockout rat. Hypertension. 57, 614-619 (2011).
