Introduction
заболевания коронарной артерии и их осложнения являются одной из основных причин смерти во всем мире. Современные терапевтические стратегии сосредоточены на восстановлении кровотока, либо путем растягивать суженного сосуда, либо путем создания байпас. Аортокоронарное шунтирование (АКШ) с использованием аутотрансплантатов вены была впервые описана в 1968 году и был усовершенствован на протяжении многих лет. Помимо реваскуляризация левой передней нисходящей коронарной артерии, подкожную вену кабелепроводы чаще всего используется 1. Тем не менее, привитой проходимость остается ахиллесовой пятой подкожных венозных шунтов (SVG). Через год после операции, привитой проходимость составляет 85%, снизившись до 61% после того, как десять лет 2,3. Отсчет патофизиологические механизмы и причины потери проходимости SVG поэтому является важной задачей.
Это видео демонстрирует вены модель интерпозиция крысы исследовать вены потери трансплантата. Общие цели этого метода, чтобы изучить основные pathobiologicalи -physiological процессы при прогрессирования заболевания и разработать подходящую модель для лекарственного средства или терапевтического тестирования вариант. Пересаживая поверхностной эпигастральной вены в артериальной системе, эта модель точно имитирует клиническую установку аортокоронарное шунтирование. Хирургическая травма, ишемия, и напряжение стенки являются важными триггерами патологических изменений сосудов и имитированы в описанной модели.
Различные модели и виды доступны для исследования вен трансплантата потери проходимость. Большие модели животных, таких как свиньи, овцы 4 5, 6 собак и обезьян 7, напоминают человеческий сосуд и анатомических структур и , таким образом , позволяют комплексные терапевтические стратегии, такие как обводной стентирования или новых хирургических методов, которые будут проверены 8. Тем не менее, специальный корпус, оборудование и персонал требуется. Кроме того, высокая стоимость и необходимость дополнительной анестезиолога во время операции препятствуют их широкому применению. Smвсе животные, включая крыс, просты в обращении, не требуют специального корпуса, и имеют управляемые расходы. По сравнению с моделями мыши 9,10, модели крысы имеют преимущество лучшей работоспособностью и , следовательно , меньшую вариабельность в результатах. Крысы являются физиологически и генетически более похожи на людей , чем у мышей 11,12. Кроме того, большинство мышей дикого типа только развивают ограниченную myointima 13, которые делают модели мыши , склонных к ошибкам II типа. Гистологию главных жилок мыши, например нижней полой вене, только состоит из нескольких слоев клеток и делает ранней оценки трудной 13. Еще одним недостатком является небольшое количество доступной для последующего анализа после восстановления трансплантата ткани.
Модель, описанная в этом видео является воспроизводимой, недорогой и легко выполнять, и она может быть установлена быстро и надежно. Это особенно хорошо подходит для оценки дорогостоящих экспериментальных терапевтических агентов, таких как вирусные векторыдля генной терапии, в экономической моды.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Животные получали гуманного ухода в соответствии с Руководством по Принципам лабораторных животных, подготовленный Институтом лабораторных животных ресурсов и опубликованных Национальным институтом здравоохранения. Все протоколы животных были утверждены ответственным местным органом власти ( "АМТ für Gesundheit унд Verbraucherschutz, Hansestadt (Управление по здравоохранению и защите прав потребителей) Гамбург").
1. Уход за животными
- Получить крыс Льюиса (LEW / CRL) крыс и ROSA / трансгенных крыс люциферазы-LEW весом 300-350 г из Института лабораторных животных.
- Держите крыс в обычных условиях в вентилируемых шкафах и кормить их стандартной чау крысы и автоклавного воды вволю.
- Выполните привитой трансплантация с помощью ROSA / люциферазы-LEW трансгенных крыс в качестве доноров, так и сингенных крыс LEW / CRL как получателей.
2. Подготовка доноров Rat
- Используйте Inductионной камеры к анестезировать крысы с изофлуран (2,5-3%).
- Поместите крысу на его спине и поддержания анестезии с лицевой маски, покрывающей рот и нос. Проверить наличие достаточной глубины анестезии, зажимая задние ноги и проверяя отсутствие рефлексов. Нанесите мазь ветеринара для глаз, чтобы предотвратить сухость под наркозом.
- Спред задние ноги и зафиксировать их положение с помощью липкой ленты.
- Бритье паховой волос с триммером волос и дезинфицировать всю область с помощью повидон-йода с последующим 80% этанола. Повторите шаг дезинфекции два раза.
ПРИМЕЧАНИЕ: Хирургический область, марля, и хирургические инструменты должны быть стерилизованы. Поддерживать стерильное поле в течение всей процедуры и износа одноразового использования, стерильные хирургические перчатки, маски и шапочки. - Под микроскопом выполняют вертикальный разрез вдоль линеа inguinalis. Используйте два пинцета, чтобы аккуратно отделить подкожные ткани и подвергать поверхностной эпигастральной вены от его OriGin на бедренную вену. Тщательно изолировать поверхностный эпигастрии вены от окружающих тканей.
- Прекратить кровоток в поверхностных эпигастральной вены с использованием двух микро зажимов.
- Урожай приблизительно от 0,5 до 1 см сегмент вены, осторожно поднимая изолированную вену с пинцетом и резки через сосуд с microscissors. Оставьте микро зажимы на пне судна, чтобы предотвратить потерю крови. Поместите удаленную часть вены на стерильную марлю. Аккуратно поместите 30 G иглу внутрь одного конца заготовленной вену и промойте сосуд с гепарином (50 ед / мл).
Примечание: Ручка вены с осторожностью и во избежание повреждения во время подъема, резки и гиперемии. Убедитесь в том, чтобы очистить трансплантата с правильным количеством гепарина. - Держите сегмент сосуда в 1% лидокаина на льду до трансплантации в крысу реципиента, чтобы предотвратить спазм сосудов.
- Эвтаназии доноров крыс путем увеличения анестезии до 5% изофлуран. Через 2-3 мин, оран живота вдоль белой линии, вырезать через диафрагму, и удалить сердце, чтобы остановить циркуляцию.
3. Подготовка крысы-реципиента
- Обезболить и зафиксировать крысы-реципиента таким же образом, как донор крысы.
- Бритье медиальной стороны ног с триммером волос и продезинфицировать три раза с использованием повидон-йода и 80% этанола.
- Мониторинг глубины анестезии и убедитесь, что достаточно проверив отсутствие рефлексов при зажимая задние ноги.
- Выполните медианный бедренной кости надрез от колена до паховой складки. Под микроскопом, используют 2 щипцов для отделения бедренной артерии от его окружения.
- Используйте микро зажимы, чтобы остановить поток крови. Поместите проксимальный зажим первой, а затем дистальный зажим.
- Вырежьте короткий отрезок зажатом бедренной артерии с microscissors и выбросьте его. Сократите оставшийся обрубок с артериальной microscissors, создавая зазор, который1-2 мм больше, чем вены трансплантата. Промойте артериальную культю с гепарином, используя иглу 30 G.
ПРИМЕЧАНИЕ: Если адвентиции немного выступает за пределы культи сосуда, используйте пинцет, чтобы вытащить его слегка над концом сосуда и удалить часть. - Поместите заготовленную вену с шага 2.8 между артериальных пней и отрегулируйте длину таким образом, чтобы он соответствовал соответствующим образом в зазор. Обратите внимание на направление вены.
- Выполните проксимального анастомоза первым использованием 10-0 проленовой швом. Проведение одиночных стежков в порядке , показанном (рис 1D). Начните с швом на каждой боковой стороне перед добавлением еще три наложения швов на брюшной стороне. Затем поместите три шва на спинной стороне сосуда для завершения анастомоза.
- Соедините дистальных сосуды с трансплантатом, используя ту же технику, что и для проксимального анастомоза, описанной в пункте 3.8. Опять же, начните с швом на каждой боковой стороне, а затем поместить три наложения швов на вентральной ИДСе и спинной стороне.
- Загрузка двух 1-мл шприцы с фибринового клея компонента 1 и 2. Осторожно поднимите трансплантат с пинцетом и падение приблизительно 100 мкл фибринового клея компонента 1 под трансплантат, а затем компонента 2.
ПРИМЕЧАНИЕ: Убедитесь, что компоненты 1 и 2 применяются в соотношении 1: 1. - Поместите трансплантата обратно в его положение и уронить дополнительные 100 мкл компонентов 1 и 2 на верхней части трансплантата. Убедитесь, что клей охватывает как трансплантат и анастомоза с целью предотвращения анастомоза недостаточности и чрезмерного вздутие вены трансплантата.
- Осторожно откройте дистальный зажим, после чего проксимальный.
- Подтвердите успешную операцию по проверке для видимого импульса в пересаженной вены и дистальной артерии трансплантата.
- Удалить излишки клея, который препятствует закрытие кожи. Используйте пинцет, чтобы поднять отвержденного клея и удалить излишки с microscissors. Закройте слои кожи с 5-0 PROLENE швами.
- Вводят 4-5 мг / кг подкожно Carprofen, прежде чем разрешить крыса, чтобы проснуться. Не оставляйте животное без присмотра, пока он не пришел в сознание достаточное для поддержания грудины лежачее. Держать животное в одной клетке, пока она не будет полностью восстановлена.
- Добавить метамизол в питьевой воде (50 мг Метамизол на 100 мл) в качестве обезболивающего для следующих 3-х дней и следить за животное в день.
4. Дуплекс сонография
Примечание: Используйте duxplex сонография для визуализации кровотока неинвазивно у крыс 14.
- Анестезировать крысу в индукционной камере (изофлурановым 2%). Поместите крысу на его спине и поддержания анестезии с лицевой маской, покрывающей нос.
- Используйте машинки для стрижки волос и крем для удаления волос для удаления волос вокруг области бедра.
- Применение ультразвука гель на бедро. Убедитесь, что нет воздушных пузырьков. Приобретать дуплексных изображений сонография с использованием MS 400 преобразователя (центральная частота: 30 MГц) с частотой кадров 230-400 кадров / сек.
5. Гистологическое
Примечание: Урожай и окрасить сосуд с окрашивании трихромом Массона для морфометрического анализа 15.
- Закрепить заготовленную сосуд в 4% параформальдегид в течение ночи и обезвоживают его в возрастающих концентрациях этанола. Вставить образец в парафин и разрезать его на 5 мкм ломтики толщиной с использованием микротома.
Примечание: параформальдегид является токсичным и должны быть обработаны с особой тщательностью. - Deparaffinize слайды перед тем окрашивания их с трихромом окрашивания раствором. Обезвоживают слайды окрашивали, очистить их с помощью ксилола и смонтировать их в монтажной среде. После сушки слайды, просмотреть образцы с помощью микроскопа.
6. биолюминесценции томография (BLI)
ПРИМЕЧАНИЕ: Послеоперационный лоскут отслежены с течением времени в естественных условиях путем измерения биолюминесцентного сигнала 16.
- Растворить 1 г D-люциферин калия соли в 22 мл PBS и вводят его внутрибрюшинно в крыс (375 мг / кг массы тела). Подождите 15 минут для люциферин циркулировать в животных.
- Поместите крысу в режиме реального времени системы биолюминесцентная количественной оценки и получить доступ к сигнал биолюминесценции.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Модель интерпозиция крысы вены подходит для изучения развития myointima гиперплазии и недостаточности вен трансплантата. Животные хорошо восстановиться после операции и показать превосходное физическое состояние после завершения его эксплуатации. На рисунке 1 показаны основные хирургические действия. После разреза кожи вдоль линеа inguinalis, эпигастральной поверхностных вен и бедренной артерии идентифицированы (рисунок 1А). Заготовка трансплантата следует проводить осторожно, не повреждая трансплантат (рис 1B), так как это может привести к преждевременному выходу из строя трансплантата и потери проходимости. После размещения трансплантата у животного - реципиента (рис 1C), анастомоз стежки выполняются в порядке , показанном на рисунке 1D. Заполненный венозная интерпозиция трансплантат появляется бледно (рис 1E) и должен стать красным и показать пульсацию после реперфузии (рис 1F).
Успешные Integrati на вены в артерию и трансплантата проходимость бедренной кости после трансплантации может быть подтверждена неинвазивно с помощью дуплексной сонографии (рисунок 2А). Пересаживая вену Люк-положительной крысы в сингенных Люк-отрицательной крысы, визуализация биолюминесценции может быть использован для контроля присутствия трансплантата в течение долгого времени (Фигура 2В).
Myointima гиперплазия развивается постепенно в трансплантат с течением времени. Гистологическое окрашивание с трихромом Массона демонстрирует myointima образование внутри внутренней упругой пластинки (рис 2С). Расчет полостной облитерации, (деления площади поперечного сечения просвета по площади в пределах внутренней упругой пластинки) показал постепенную потерю трансплантата проходимость с 7-го дня до 28-й день после операции, тем самым подтверждая воспроизводимые динамику myointima гиперплазии в этой модели крыс (рис 2D).
Re 1 "SRC =" / файлы / ftp_upload / 54839 / 54839fig1.jpg "/>
Рисунок 1: Подробная схема хирургической процедуры. (А) Анатомия паховой области. (B) Сбор эпигастральной поверхностных вен трансплантата. (C) Размещение трансплантата вены между артериальных культей животного-реципиента. (D) Порядок анастомоза стежков. (Е) после сайта венозной конструкции трансплантата. (F) сайта после реперфузии венозной разъединению трансплантата. Черные стрелки отмечают эпигастральной поверхностной вены. Строка Scale = 5 мм. Пожалуйста , нажмите здесь , чтобы посмотреть увеличенную версию этой фигуры.
Рисунок 2: Характеристика животной модели. (A) Дуплекс - сонография венозной интерпозицией прививать IMMED iately после трансплантации (0дн) и 28 дней после операции (28д). (B) BLI от Luc-позитивных трансплантатов , пересаженных в Luc-отрицательных крыс при 0 и 28 дней после операции. (C) Типичные сечения привитые собирают через 7 дней, 14, 21, и 28 и окрашивали трихромом Массона. (Верхняя панель: Шкалы = 400 мкм; Нижняя панель: Шкалы = 100 мкм) (D) люминал облитерации в процентах рассчитывается путем деления числа новых внутренний просвет от бывшего просвета. Межгрупповые различия были оценены односторонним дисперсионным анализом (ANOVA) с тестом ретроспективном Бонферрони. р <0,01. Столбики ошибок являются стандартное отклонение (SD). Пожалуйста , нажмите здесь , чтобы посмотреть увеличенную версию этой фигуры.
_upload / 54839 / 54839Sup1.jpg "/>
Справочная Файл 1: Схематическое изображение хирургической процедуры. Вертикальный разрез вдоль белой линии inguinalis осуществляется на донорной крысы, подвергая нижней эпигастральной вены. Кровоток останавливается с двумя микро зажимами, и сегмент вены длиной 0,5-1,0 см собирают. У крыс-реципиента, медиана бедренной кости разрез выполняется, подвергая бедренной вены, артерии и нерв. После зажима бедренную артерию, сегмент сосуда удаляется и заменяется заготовленной вены трансплантата. Пожалуйста , нажмите сюда , чтобы просмотреть файл Supplemental 1 (или щелкните правой кнопкой мыши , чтобы загрузить).
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Это видео демонстрирует вены модель интерпозиция крысы исследовать вены потери трансплантата и разрешить для исследования лежащих в основе патологических процессов и тестирования новых лекарств или терапевтических возможностей.
Обезболивание является одним из важнейших аспектов хирургических процедур. Непрерывная система ингаляционного наркоза рекомендуется, так как это безопасный и простой метод, особенно во время длительных операций. Это может иметь большое значение на этапе обучения, когда операция занимает более 1 ч.
Что касается хирургической процедуры, очень важно , чтобы не повредить вены трансплантата во время уборки и имплантации 17. Захватывающий адвентиции сосуда может предотвратить повреждение вены трансплантата и избежать последующего образования тромба и отторжения трансплантата. Привитые проходимость можно определить сразу после того, как вены строительства трансплантата путем наблюдения кровотока и пульсации в прививке вен или Количесл артерии, а также с помощью дуплексного ультразвукового сканирования.
Другим важным аспектом процедуры является предотвращение чрезмерного вздутие вены трансплантата. Внезапное воздействие на вены трансплантата к системе артериального давления приводит к росту напряженности стенки, последующая чрезмерной растяжению, а также изменения в структуре потока. Они являются источниками тромбоза, недостаточности анастомоза и преждевременному выходу из строя трансплантата. Поддерживая вены трансплантата с фибринового клея может предотвратить бесконтрольное раздувание и защитить интиму и средств массовой информации от механического разрушения. Рассасывающиеся охватывает коллаген являются альтернативой фибринового клея и может быть использован в качестве перивенозной охватывает 18.
Самым важным шагом в рамках этого протокола, несомненно, является анастомоз между трансплантатом вены и артерии. Необходимо соблюдать осторожность, чтобы не проколоть две стенки сосуда, так как это приведет к сужению анастомоза, что может привести к преждевременному выходу из строя трансплантата. Кроме того, специальные attentioп должно быть уделено локализации швами. Конгруэнтность позиций шовных в артерию и вену обеспечивает трансплантата проходимость и предотвращает недостаточность. Чтобы облегчить это, шовный материал может быть выполнен в порядке , показанном на рис 1D.
Степень технической сложности можно рассматривать как ограничение техники, так как начинающий должен сначала ознакомиться с микрохирургической оборудованием и малыми размерами анатомических структур. Тем не менее, другие модели, используемые демонстрируют те же трудности, и мы считаем, что это видео поможет начинающим хирургам освоить эту технику в течение короткого времени.
Многочисленные мелкие животные модели венозной недостаточности трансплантата были описаны в литературе. Тем не менее, большинство моделей только обеспечивают очень небольшое количество ткани для анализа 13. Преимуществом этого метода является сравнительно большое количество ткани, которая может быть получена. Один трансплантат можно разделить на несколько частей Ае используются для различных анализов, тем самым уменьшая количество экспериментальных животных, необходимых.
Последние достижения в области цинкового пальца технологии нуклеазы позволило поколение нокаутных крыс 19. При выборе подходящих крыс нокаут-трансплантат потери проходимость могут быть изучены в различных болезненных состояниях. Например, у крыс нокаута ренина могут быть использованы для изучения гипертензии 20. Эти генетические фоны могут быть объединены с этой моделью на животных, чтобы собрать информацию о механизмах вены отторжения трансплантата в различных условиях или о влиянии определенных генов в развитии myointima гиперплазии.
В заключение отметим, что модель, описанная в этом видео является воспроизводимой, недорогой и легко выполнять, и она может быть установлена быстро и надежно. Myointima гиперплазии, которая является основной причиной выхода из строя вены трансплантата, быстро развивалась в течение четырех недель, в результате чего прогрессивным полостной облитерации. Успешно прошел испытания лечениеПараметры в этой модели могут быть дополнительно подтверждены в крупных животных моделях.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Acknowledgments
Авторы благодарят Christiane Pahrmann за техническую помощь. Это исследование было профинансировано Deutsche Stiftung FUER Herzforschung (F / 28/14). DW была поддержана награду путешествия из Международного общества сердца и легких трансплантологии. ТД получил Else Kröner Превосходства стипендией от Else-Kroner-Fresenius-Stiftung (2012_EKES.04). SS получил исследовательские гранты от Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG; DE2133 / 2-1, TD и SCHR992 / 3- 1, SCHR992 / 4-1, SS).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Rat LEW/Crl | Charles River | Stock number 004 | |
| Rat LEW-Tg(Gt(ROSA)26Sor- 1 luc)11Jmsk |
Institute of laboratory animals, Kyoto University, Japan | NBPR rat number 0299 | http://www.anim.med.kyoto-u.ac.jp/NBR/ |
| PFA 4% | Electron Microscopy Sciences | #157135S | 20% |
| hair clipper | WAHL | 8786-451A ARCO SE | |
| Forene | AbbVie | PZN 10182054 Art.Nr.: B506 | Isoflurane |
| microsurgical clamp | Fine Science Tools | 18055-04 | Micro-Serrefine - 4 mm |
| clamp applicator | Fine Science Tools | 18056-14 | |
| hair removal creme | Rufin cosmetic | 27618 | |
| Povidone-Iodine | Betadine Purdue Pharma | NDC:67618-152 | |
| 10-0 Ethilon suture | Ethicon | 2814G | |
| 5-0 prolene suture | Ethicon | EH7229H | |
| Rimadyl | Pfizer | 400684.00.00 | Carprofen |
| Novaminsulfon | Ratiopharm | PZN 03530402 | Metamizole |
| Heparin | Rotexmedica | PZN: 3862340 | 25.000 I.E./ ml |
| Xylocain 1% | AstraZeneca | PZN: 1137907 | Lidocain |
| EVICEL | J&J Med.Ethicon Biosur | PZN 7349697 Art. Nr.:EVK01DE | fibrin glue |
| NaCl 0.9% | B.Braun | PZN 06063042 Art. Nr.: 3570160 | |
| Vevo 770 high-resolution in vivo micro-imaging system | VisualSonics | duplex sonography | |
| Ecogel 100 ultrasound gel | Eco-med | 30GB | |
| D-Luciferin Firefly, potassium salt | Biosynth | L-8220 | |
| PBS pH 7.4 | Gibco | 10010023 | |
| Xenogen Ivis 200 | Perkin Elmer | bioluminescence imaging | |
| Weigerts iron hematoxylin Kit | Merck | 1.15973.0002 | Trichrome staining |
| Resorcine-Fuchsine Weigert | Waldeck | 2.00E-30 | Trichrome staining |
| Acid Fuchsin | Sigma-Aldrich | F8129-25G | Trichrome staining |
| Ponceau S solution | Serva Electrophoresis | 33427 | Trichrome staining |
| Azophloxin | Waldeck | 1B-103 | Trichrome staining |
| Molybdatophosphoric acid hydrate | Merck | 1.00532.0100 | Trichrome staining |
| Orange G | Waldeck | 1B-221 | Trichrome staining |
| Light Green SF | Waldeck | 1B-211 | Trichrome staining |
| Vitro-Clud | Langenbrinck | 04-0001 | |
| Glacial Acetic Acid | Sigma-Aldrich | 537020 | |
| 37% HCl | Sigma-Aldrich | H1758 | |
| Xylene | Th. Geyer | 3410 | |
| Paraffin | Leica biosystems | REF 39602004 | |
| Ethanol absolute | Th. Geyer | 2246 | |
| Ethanol 96% | Th. Geyer | 2295 | |
| Ethanol 70% | Th. Geyer | 2270 | |
| Slide Rack | Ted Pella | 21057 | |
| Staining dish | Ted Pella | 21075 | |
| Bepanthen Eye and Nose ointment | Bayer | 1578675 | Eye ointment |
References
- Sabik, J. F., 3rd, Understanding saphenous vein graft patency. Circulation. 124, 273-275 (2011).
- Goldman, S., et al. Long-term patency of saphenous vein and left internal mammary artery grafts after coronary artery bypass surgery: results from a Department of Veterans Affairs Cooperative Study. J Am Coll Cardiol. 44, 2149-2156 (2004).
- Fitzgibbon, G. M., et al. Coronary bypass graft fate and patient outcome: angiographic follow-up of 5,065 grafts related to survival and reoperation in 1,388 patients during 25 years. J Am Coll Cardiol. 28, 616-626 (1996).
- O'Brien, J. E., et al. Wound healing around and within saphenous vein bypass grafts. J Thorac Cardiovasc Surg. 114, 38-45 (1997).
- El-Kurdi, M. S., et al. Ovine femoral artery bypass grafting using saphenous vein: a new model. J Surg Res. 193, 458-469 (2015).
- Yuda, A., et al. Angiotensin II receptor antagonist, L-158,809, prevents intimal hyperplasia in dog grafted veins. Life Sci. 68, 41-48 (2000).
- McCann, R. L., Hagen, P. O., Fuchs, J. C. Aspirin and dipyridamole decrease intimal hyperplasia in experimental vein grafts. Ann Surg. 191, 238-243 (1980).
- Thomas, A. C. Animal models for studying vein graft failure and therapeutic interventions. Curr Opin Pharmacol. 12, 121-126 (2012).
- Hu, Y., Xu, Q. New mouse model of vein bypass graft atherosclerosis. Heart Lung Circ. 11, 182-188 (2002).
- Salzberg, S. P., et al. Increased neointimal formation after surgical vein grafting in a murine model of type 2 diabetes. Circulation. 114, I302-I307 (2006).
- Abbott, A. Laboratory animals: the Renaissance rat. Nature. 428, 464-466 (2004).
- Lindblad-Toh, K. Genome sequencing: three's company. Nature. 428, 475-476 (2004).
- Yu, P., Nguyen, B. T., Tao, M., Campagna, C., Ozaki, C. K. Rationale and practical techniques for mouse models of early vein graft adaptations. Journal of vascular surgery. 52, 444-452 (2010).
- Olver, D. T., Lacefield, J. C., Shoemaker, K. J. Evidence of bidirectional flow in the sciatic vasa nervorum. Microvascular research. 94, 103-105 (2014).
- Stubbendorff, M., et al. Inducing myointimal hyperplasia versus atherosclerosis in mice: an introduction of two valid models. Journal of visualized experiments : JoVE. , (2014).
- Conradi, L., et al. Immunobiology of fibrin-based engineered heart tissue. Stem cells translational medicine. 4, 625-631 (2015).
- Dashwood, M. R., Tsui, J. C. 'No-touch' saphenous vein harvesting improves graft performance in patients undergoing coronary artery bypass surgery: A journey from bedside to bench. Vascular Pharmacology. 58, 240-250 (2013).
- Bekler, H. I., Rosenwasser, M. P., Akilina, Y., Bulut, G. The use of an absorbable collagen cover (NeuraWrap) improves patency of interpositional vein grafts. Acta orthopaedica et traumatologica turcica. 44, 157-161 (2010).
- Geurts, A. M., et al. Knockout rats via embryo microinjection of zinc-finger nucleases. Science. 325, 433 (2009).
- Moreno, C., et al. Creation and characterization of a renin knockout rat. Hypertension. 57, 614-619 (2011).
