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Medicine

बाएं आलिंद, महाधमनी, और फेफड़े के धमनी की murine इकोकार्डियोग्राफी

Published: February 20, 2017 doi: 10.3791/55214

Summary

निम्नलिखित प्रोटोकॉल के अधिग्रहण और वाम अलिंद मात्रा (लव), महाधमनी (एओ) व्यास, और फेफड़े के धमनी (पीए) व्यास चूहों में प्राप्त करने के लिए इस्तेमाल किया एचोकर्दिओग्रफिक छवियों के विश्लेषण के लिए कार्यप्रणाली का वर्णन है। इस तकनीक में एक गैर इनवेसिव, गैर टर्मिनल प्रक्रिया है कि हृदय समारोह के मूल्यांकन की अनुमति देता है।

Abstract

वर्तमान कार्यप्रणाली अन्वेषक कैसे उपाय और इकोकार्डियोग्राफी के माध्यम से बाएं निलय डायस्टोलिक दबाव में पुरानी उन्नयन के एक किराए के रूप में लव का उपयोग करने के लिए, साथ ही चूहों में महाधमनी और पीए व्यास की माप प्राप्त करने के लिए सिखाता है।

चूहों की तुलना में उम्र के 10 घ पुराने वर्तमान तकनीक का उपयोग का विश्लेषण किया जा सकता है। सेट-अप, छवि अधिग्रहण, और छवि विश्लेषण: तकनीक 3 मुख्य कदम से बना है। सेट-अप कदम, माउस 1% isoflurane साथ anesthetized हो रही यह शेविंग, और एक गर्म ईकेजी बोर्ड जहां छवि अधिग्रहण जगह ले जाएगा करने के लिए एक लापरवाह स्थिति में यह टेप के होते हैं। छवि अधिग्रहण कदम हृदय संरचनाओं की पहचान करने के लिए सीखने और अपने संवाददाता जांच और अक्ष के साथ सभी आवश्यक छवियों को प्राप्त करने के क्रम में मात्रा और व्यास की गणना करने में सक्षम होना करने के लिए होते हैं। छवि विश्लेषण कदम पहले से अधिग्रहीत छवियों कंप्यूटर सॉफ्टवेयर की सहायता से मापने के होते हैं।

Introduction

वर्तमान कार्यप्रणाली अन्वेषक को मापने और isoflurane के तहत चूहों में लव, महाधमनी व्यास और 2 डी इकोकार्डियोग्राफी के साथ पीए व्यास का उपयोग करने के लिए कैसे सिखाता है। संरक्षित इंजेक्शन फ्रैक्शन (HFpEF) बुजुर्ग लोगों में हृदय गति रुकने से उन 80 साल में 10% तक प्रभावित करता है और महत्वपूर्ण रुग्णता और मृत्यु दर में पुराने 1 और परिणाम है। उल्लेखनीय मृत्यु दर भी पल्मोनरी उच्च रक्तचाप (पीएच), एक घातक बीमारी प्रक्रिया है, जिसमें ऊपर उठाया फेफड़े के धमनी दबाव के एक्सर्शनल श्वास कष्ट, प्रगतिशील सही दिल की विफलता है, और अक्सर मौत का कारण HFpEF के रूप में इसी तरह के लक्षण के साथ पेश करने से होते हैं। 2 दोनों HFpEF और पीएच की बढ़ती व्यापकता एक तरीका है कि एक गैर इनवेसिव, गैर टर्मिनल दृष्टिकोण में सही मूल्यांकन और murine मॉडल में हस्तक्षेप की निगरानी के लिए अनुमति देता है के विकास के लिए की जरूरत को दर्शाता है।

वेंट्रिकुलर-कला में परिवर्तन के माध्यम से डायस्टोलिक समारोह के एक गिरावट की ओर जाता एजिंगerial stiffening, संवहनी रोग, सूजन 3, बिगड़ा कैल्शियम विनियमन 4, β एड्रीनर्जिक जवाबदेही में कमी आई है, और शारीरिक deconditioning उत्पादन सक्रिय आराम धीमा और निष्क्रिय कठोरता में वृद्धि हुई। समय के साथ इस वृद्धि एल.वी. भरने के दबाव और ला के प्रतिपूरक वृद्धि की ओर जाता है। 5

हालांकि इस तरह के वाल्वुलर रोग (माइट्रल ऊर्ध्वनिक्षेप या एक प्रकार का रोग) और infiltrative प्रक्रियाओं के रूप में अन्य etiologies ला 1 में दबाव और मात्रा में उन्नयन का कारण है, कार्डियोलोजी के यूरोपीय सोसायटी एल.वी. समारोह की एक noninvasive प्रतिबिंब के रूप में ला आकार के अलावा समर्थन करता है। 6

ला मात्रा और डायस्टोलिक समारोह की आक्रामक उपायों के बीच सह-संबंध चूहों में अध्ययन किया गया है। ला मात्रा समारोह में अंतर के साथ सहसंबद्ध दोनों के लिए आयु समूहों के भीतर invasively चुना गया 14- और 31 महीने की उम्र में मीटरबर्फ। 14 महीने की उम्र में चूहों में, ला मात्रा डायस्टोलिक समारोह के तीन मानक आक्रामक उपायों के साथ सहसंबद्ध -dP / dtmin (2 आर = .5, पी <0.05), ताउ (विश्राम का समय लगातार, (2 आर = .6, पी <0.05), और बाएं निलय अंत डायस्टोलिक प्रेशर (आर 2 = .25, पी <0.05)। 31 महीने की उम्र में चूहों, ला मात्रा और -dP / dtmin (2 आर = 0.92, पी के बीच सह-संबंध के लिए < 0.05) और LVEDP (2 आर = 0.61, पी <0.05) स्पष्ट थे, हालांकि ताउ के साथ संबंध कम स्पष्ट था। इसलिए, ला मात्रा डायस्टोलिक हानि न केवल समूहों में लेकिन आयु समूहों के भीतर के साथ वृद्धि हुई है। 7

बार-बार आकलन के साथ उनकी असंगति के कारण कैथेटर तकनीक का उपयोग कर, हृदय प्रदर्शन का मूल्यांकन करने के लिए हालांकि कठोर और विश्वसनीय, सीमित हैं murine मॉडल में हृदय समारोह का अध्ययन। ऐसे एमआरआई और 3 डी इकोकार्डियोग्राफी भी हो सकता है के रूप में आक्रामक उपायों के 8 अल्टरनेटिव्स2 डी एचोकर्दिओग्रफिक तकनीकों की तुलना में ज्यादा सटीक है, लेकिन वे और अधिक महंगे हैं; 2 डी इकोकार्डियोग्राफी ला मात्रा मूल्यांकन के लिए पर्याप्त माना जाता है। 9, 10

ला मात्रा और इकोकार्डियोग्राफी के साथ पीए व्यास का आकलन है कि मॉडल ला दबाव या उन लोगों से लव में कोई परिवर्तन के साथ पीए व्यास में वृद्धि हुई है, जिसके परिणामस्वरूप जहां पल्मोनरी धमनी और बाएं आलिंद दोनों के रूप में विस्तार फेफड़े के धमनी के विरोध में प्राथमिक बढ़ जाती है उत्पादन के बीच भेदभाव की अनुमति देता है दिल की बाईं ओर ऊंचा भरने के दबाव का नतीजा है। यह दृष्टिकोण Scalia एट अल द्वारा लिया गया था। जो पता चला है कि लोगों में, वाम अलिंद अनुपात एचोकर्दिओग्रफिक पल्मोनरी धमनी (ePLAR) एक पैरामीटर सही पूर्व फेफड़े केशिका उच्च रक्तचाप और बाद capillaryhypertension के साथ रोगियों के बीच अंतर करने के लिए है। 1 1

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Protocol

सभी जानवरों को चिकित्सा के Baylor कॉलेज में देखभाल और प्रयोगशाला पशु के उपयोग के लिए स्वास्थ्य गाइड के राष्ट्रीय संस्थानों के दिशा निर्देशों के अनुसार देखभाल कर रहे थे।

1. सेट-अप

  1. एचोकर्दिओग्रफिक प्रणाली चालू करें। प्रदर्शित किया ड्रॉप डाउन मेनू से "कार्डिएक माप" का चयन करके सॉफ्टवेयर शुरू और "आरंभ करना" पर क्लिक करें।
  2. स्क्रीन के ऊपरी भाग पर "नया" बटन पर क्लिक करें एक नए अध्ययन शुरू करते हैं और अध्ययन में माउस की जनसांख्यिकीय जानकारी दर्ज करें। उदाहरण के लिए माउस आईडी, लिंग, जन्म तिथि के साथ ही ऑपरेटर अध्ययन कर के नाम के लिए।
  3. "अस्थायी पर / बंद" बटन पर क्लिक करके तापमान नियंत्रित ईकेजी बोर्ड चालू करें। यह ऊपर और नीचे तीर का उपयोग कर 39 डिग्री सेल्सियस के तापमान को निर्धारित करें।
  4. संज्ञाहरण कक्ष की स्थापना शुरू करने के लिए, पहले सुनिश्चित करें कि ऑक्सीजन और isoflurane स्तरों वितरण प्रणाली में से प्रत्येक में उचित कर रहे हैं।
  5. तापमान नियंत्रित ईकेजी बोर्ड पर एक लापरवाह स्थिति में माउस प्लेस और बोर्ड पर संवाददाता ट्रांसड्यूसर तत्व करने के लिए प्रत्येक पंजा टेप। वैकल्पिक रूप से, ट्रांसड्यूसर क्रीम का उपयोग करें संकेत सुधार होगा।
  6. माउस की आँखों पर कृत्रिम आँसू नेत्र स्नेहक मरहम लागू सूखापन को रोकने के लिए।
  7. एक बार माउस ईकेजी बोर्ड को टेप किया जाता है, एक ईकेजी की निगरानी के निचले हिस्से में अनुरेखण निरीक्षण करते हैं। पूरे अध्ययन के दौरान दिल दर पर नज़र रखने के लिए सबसे अच्छा परिणाम सुनिश्चित करने के लिए। 400 धड़क रहा है की एक दिल दर / मिनट आदर्श है। इस सीमा से नीचे दिल की दर isoflurane प्रभाव की सलाह दे सकते।
  8. ऑक्सीजन प्राप्त यकीन है कि माउस रहता बनाओ औरचेहरे नकाब से isoflurane।
  9. माउस के पूर्वकाल छाती और पेट के ऊपरी हिस्से क्षेत्र से शरीर फर दाढ़ी बनाने के लिए एक बिजली के रेजर का प्रयोग करें। लोमनाशक क्रीम का प्रयोग करें यदि आवश्यक हो तो आगे फर हटाने सुनिश्चित करने के लिए।
  10. माउस के सीने में ट्रांसड्यूसर जेल के एक उदार राशि रखो।

2. छवि अधिग्रहण

  1. बाएं आलिंद माप
    1. ईकेजी बोर्ड के नीचे संभाल लगाएँ। जंगम ईकेजी बोर्ड जिसमें माउस रखा गया था के कोण समायोजित करने के लिए संभाल का प्रयोग करें। एक्स अक्ष और वाई अक्ष के साथ 0 डिग्री कोण के साथ 45 डिग्री कोण - एक से 30 ईकेजी बोर्ड का समायोजन करके शुरू करो। लेखकों "लापरवाह" स्थिति के रूप में इसे देखें। बाएं आलिंद माप अधिग्रहण के सभी के लिए इस स्थिति का प्रयोग करें।
    2. एचोकर्दिओग्रफिक चल हाथ दबाना में 25 मेगाहर्ट्ज सिर स्कैन एक लंबे अक्ष दृश्य में रखें। कार्डिएक मापन फ़िल्टर और एचोकर्दिओग्रफिक प्रणाली में 2 डी बी मोड का चयन करने के लिए सुनिश्चित करें।
    3. सूचना है कि गूंजcardiographic सेट एक्स और वाई अक्ष समायोजन torques कि दक्षिणावर्त या वामावर्त ले जाया जा सकता है। उन्हें बारी बारी से महाधमनी बहिर्वाह पथ के स्तर पर दिल की लंबी अक्ष दृश्य पाने के लिए और एक 5 फिल्म रिकॉर्डिंग प्राप्त करने के लिए। एचोकर्दिओग्रफिक प्रणाली के कीबोर्ड पर "सिने स्टोर" बटन दबाने से स्कैन मोल। इस का प्रयोग करें ला के सुपीरियर अवर माप की गणना करने के लिए।
    4. फिल्म अधिग्रहण के बाद, एचोकर्दिओग्रफिक प्रणाली के कीबोर्ड पर "एम मोड" बटन दबाकर एम मोड के लिए एचोकर्दिओग्रफिक दृश्य स्विच।
    5. एक बाण के दृश्य और एक कर्सर का निरीक्षण करें। कर्सर रखें, ताकि यह महाधमनी बहिर्वाह पथ के स्तर पर पूरे ला शामिल हैं। इस नए विचार के 3 छवियों मोल। एचोकर्दिओग्रफिक प्रणाली के कीबोर्ड पर "फ्रेम की दुकान" बटन दबाने से स्कैन मोल। इस का प्रयोग करें ला के पूर्वकाल पीछे माप की गणना करने के लिए।
    6. "बी-मोड" दबाकर बी मोड पर लौटें लेकिन एचोकर्दिओग्रफिक प्रणाली के कीबोर्ड पर टन।
    7. सेट 90 डिग्री दक्षिणावर्त की चल हाथ दबाना घुमाएँ। यह एक छोटी अक्ष दृश्य में सिर स्कैन की स्थापना की जाएगी।
    8. वाई अक्ष टोक़ का उपयोग intraarticular पट पाते हैं। आलिंद की दीवार कल्पना करने के लिए सुनिश्चित करें। एक 5 फिल्म रिकॉर्डिंग मोल। एचोकर्दिओग्रफिक प्रणाली के कीबोर्ड पर "सिने स्टोर" बटन दबाने से स्कैन मोल। इस का प्रयोग करें ला के Medio पार्श्व माप की गणना करने के लिए।

आकृति 1
चित्रा 1: "लापरवाह" स्थिति। "लापरवाह" की स्थिति में एक माउस के प्रतिनिधित्व। लगभग 30 - एक्स अक्ष के साथ 45 डिग्री के कोण और वाई अक्ष के साथ 0 डिग्री कोण। इस स्थिति में बाएं आलिंद माप के सभी प्राप्त करने के लिए प्रयोग किया जाता है।टी = "_blank"> यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

  1. महान जहाजों मापन
    1. 30 मेगाहर्ट्ज सिर स्कैन के लिए 25 मेगाहर्ट्ज सिर स्कैन आदान प्रदान से जारी रखें। जंगम हाथ दबाना से 25 मेगाहर्ट्ज सिर स्कैन निकालें और बजाय 30 मेगाहर्ट्ज सिर स्कैन जगह है। चयन करने के लिए पेट की माप फ़िल्टर और एचोकर्दिओग्रफिक प्रणाली में 2 डी बी मोड सुनिश्चित करें।
    2. ईकेजी बोर्ड के नीचे संभाल लगाएँ। जंगम ईकेजी बोर्ड जिसमें माउस झूठ का कोण समायोजित करने के लिए हैंडल का प्रयोग करें। एक्स अक्ष और वाई अक्ष के साथ 60 डिग्री कोण के साथ एक 5 डिग्री कोण को ईकेजी बोर्ड का समायोजन करके शुरू करो। महाधमनी और फेफड़े के धमनी माप के अधिग्रहण के लिए इस podition का प्रयोग करें। "खड़े-अप" स्थिति के रूप में इस पर देखें।
    3. एचोकर्दिओग्रफिक सेट में एक्स और वाई अक्ष समायोजन torques का प्रयोग, महाधमनी बहिर्वाह पथ के स्तर पर दिल की लंबी अक्ष दृश्य पाने के लिए और एक 5 फिल्म रिकॉर्डिंग के अधिग्रहण। मोल वेंई एचोकर्दिओग्रफिक प्रणाली के कीबोर्ड पर "सिने स्टोर" बटन दबाने से स्कैन। इस का प्रयोग करें महाधमनी व्यास की गणना करने के लिए।
    4. फिल्म अधिग्रहण के बाद, सेट 90 डिग्री दक्षिणावर्त की चल हाथ दबाना घुमाएगी। यह एक छोटी अक्ष दृश्य में सिर स्कैन की स्थापना की जाएगी।
    5. वाई अक्ष टोक़ का उपयोग करते हुए अपने विभाजन के स्तर पर पल्मोनरी धमनी का पता लगाने और एक 5 फिल्म रिकॉर्डिंग के अधिग्रहण। एचोकर्दिओग्रफिक प्रणाली के कीबोर्ड पर "सिने स्टोर" बटन दबाने से स्कैन मोल। इस का प्रयोग करें पल्मोनरी धमनी व्यास की गणना करने के लिए।
      ध्यान दें: शोधकर्ता पल्मोनरी धमनी की सही पहचान सुनिश्चित करने के लिए एक उपकरण के रूप में डॉपलर इमेजिंग का उपयोग कर सकता है। अगर वांछित, एक बार कदम को पूरा 2.2.5 प्रेस एचोकर्दिओग्रफिक प्रणाली डॉपलर इमेजिंग प्राप्त करने के कीबोर्ड पर "पीडब्लू" बटन। लक्षण फेफड़े लहर ट्रेसिंग में देखा जाता है, तो शोधकर्ता आश्वस्त किया जा सकता है कि सही स्थान की पहचान की थी।
  2. >

    चित्र 2
    चित्रा 2: "स्थायी-अप" स्थिति। "स्थायी-अप" की स्थिति में एक माउस के प्रतिनिधित्व। लगभग एक्स अक्ष के साथ 5 डिग्री कोण और वाई अक्ष के साथ एक 60 डिग्री के कोण। इस स्थिति में महाधमनी और फेफड़े के धमनी व्यास प्राप्त करने के लिए प्रयोग किया जाता है। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

    चित्र तीन
    चित्रा 3: फेफड़े के धमनी डॉपलर। विशेषता पल्मोनरी धमनी डॉपलर इमेजिंग। शोधकर्ता एक उपकरण के रूप में डॉपलर इमेजिंग का उपयोग पल्मोनरी धमनी की सही पहचान सुनिश्चित करने के लिए कर सकता है।blank "> यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

    3. बाद की प्रक्रिया जानवरों की वसूली

    1. सुरक्षित रूप से ईकेजी बोर्ड से माउस को दूर करने के लिए, माउस के सीने से जेल को हटाने और पांव से टेप निकालें।
    2. संज्ञाहरण और ऑक्सीजन वितरण प्रणाली को बंद कर दें। अपने पिंजरे के लिए माउस लौटें और जब तक यह पर्याप्त होश आ गया है स्टर्नल लेटना बनाए रखने के लिए माउस छोड़ पहुंच से बाहर नहीं है।

    4. छवि विश्लेषण

    1. छवि स्थानांतरण
      1. एक कंप्यूटर में एचोकर्दिओग्रफिक प्रणाली में एकत्र छवियों को स्थानांतरित करने के लिए एक यूएसबी फ्लैश ड्राइव का प्रयोग करें। एचोकर्दिओग्रफिक प्रणाली में एक यूएसबी पोर्ट में यूएसबी फ्लैश ड्राइव डालें।
      2. अध्ययन का नाम (ओं) पर क्लिक करके हस्तांतरण करने के लिए अध्ययन या पढ़ाई का चयन करें।
      3. स्क्रीन के ऊपरी भाग पर स्थित बटन "करने के लिए कॉपी" पर क्लिक करें। फाइल और निर्देशिका एप्लिकेशन को दिखा एक नई विंडोकान। निर्देशिका यूएसबी फ्लैश ड्राइव सिर्फ डाला करने के लिए इसी का चयन करें और क्लिक करें "ठीक है"।
      4. एचोकर्दिओग्रफिक सिस्टम से यूएसबी फ्लैश ड्राइव निकालें और कंप्यूटर में एक यूएसबी पोर्ट में डालने के विश्लेषण के लिए इस्तेमाल किया जाएगा।
      5. एचोकर्दिओग्रफिक सॉफ्टवेयर लॉन्च। पर क्लिक करें स्क्रीन के ऊपरी भाग पर स्थित बटन "की नकल से"। फाइल और निर्देशिका दिखा एक नई विंडो का निरीक्षण करें। अध्ययनों का चयन निर्देशिका यूएसबी फ्लैश ड्राइव सिर्फ डाला करने के लिए इसी से नकल की है और क्लिक करें "ठीक" किया जाना है।
      6. फाइल को कॉपी करने के बाद, उन्हें अध्ययन सूची में निरीक्षण करते हैं। जैसा कि इसके नाम पर एक अध्ययन, डबल क्लिक करें का विश्लेषण शुरू करते हैं और ऑपरेटर विश्लेषण के नाम का चयन करने के लिए।
    2. बाएं आलिंद विश्लेषण
      नोट: सभी के लिए निम्नलिखित आलिंद माप मुद्दे पर जहां शोधकर्ता ला मापने के लिए करना चाहता है के रूप में पी-लहर का चयन करने के लिए एक गाइड के रूप में ईकेजी का उपयोग करें। यह जब वें पूर्व आलिंद संकुचन समय से मेल खाती हैई ला इसकी सबसे बड़ी क्षमता पर है।
      1. बाएं आलिंद (चरण 2.1.3) के सुपीरियर अवर आयाम को इसी फिल्म क्लिप का चयन करें। निर्धारित बनाने के लिए पूर्व आलिंद संकुचन समय एक गाइड के रूप में उपयोग करते हुए ईकेजी। इस तरह गुहा इसकी सबसे बड़ी क्षमता पर मापा जाता है।
      2. स्क्रीन के शीर्ष पर उपकरण पट्टी से, "उपकरण" और फिर "माप" पर क्लिक करें। एक नई विंडो खुलकर आएगी। "रैखिक दूरी की माप उपकरण" आइकन (यह विंडो के बाएँ ऊपरी कोने पर पहले आइकन से मेल खाती है) पर क्लिक करें। अपने सबसे बड़े व्यास में गुहा को मापने।
      3. छवि के बाएं आलिंद (चरण 2.1.5) के पूर्वकाल पीछे आयाम करने के लिए इसी का चयन करें। निर्धारित बनाने के लिए पूर्व आलिंद संकुचन समय एक गाइड के रूप में उपयोग करते हुए ईकेजी। इस तरह गुहा इसकी सबसे बड़ी क्षमता पर मापा जाता है। मापने के लिए यह कदम 4.2.2 दोहराएँ।
      4. छवि के बाएं आलिंद (चरण 2.1.8) का Medio पार्श्व आयाम करने के लिए इसी का चयन करें। पूर्व आलिंद contrac निर्धारित बनाने के लिएtion समय एक गाइड के रूप में उपयोग करते हुए ईकेजी। इस तरह गुहा इसकी सबसे बड़ी क्षमता पर मापा जाता है। एक विकर्ण फैशन में विरोध दीवार के लिए अंतरा अलिंदीय पटल से गुहा को मापने। मापने के लिए यह कदम 4.2.2 दोहराएँ।
        नोट: दोहराएँ कदम 4.2.1 4.2.4 के माध्यम से कम से कम 3 बार और त्रुटि को कम करने के लिए औसत मूल्यों का अधिग्रहण।
    3. महान जहाजों विश्लेषण
      नोट: सभी के लिए निम्नलिखित महान जहाजों माप मुद्दे पर जहां शोधकर्ता को मापने के लिए करना चाहता है के रूप में क्यूआर जटिल होने के बाद एक समय का चयन करने के लिए एक गाइड के रूप में ईकेजी का उपयोग करें। इस मुद्दे पर जहां महान जहाजों उनकी सबसे बड़ी क्षमता पर हैं से मेल खाती है।
      1. महाधमनी (चरण 2.2.3) के लिए इसी फिल्म क्लिप का चयन करें। ईकेजी का उपयोग कर क्यूआर के बाद एक बिंदु निर्धारित करते हैं। एक 90 डिग्री के कोण पर व्यास को मापने के लिए एक संदर्भ के रूप में पोत दीवार का उपयोग कर। इसे दोहराने कदम 4.2.2 को मापने के लिए
      2. पल्मोनरी धमनी (चरण 2.2.5) के लिए इसी फिल्म क्लिप का चयन करें। क्यू के बाद एक बिंदु निर्धारितईकेजी का उपयोग कर रुपये। एक 90 डिग्री के कोण पर व्यास को मापने के लिए एक संदर्भ के रूप में पोत दीवार का उपयोग कर। फेफड़े के धमनी विभाजन ऊपर एक विमान का चयन करें। मापने के लिए यह कदम 4.2.2 दोहराएँ।

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Representative Results

ला मात्रा और इकोकार्डियोग्राफी के साथ पीए व्यास का आकलन जहां फेफड़े के धमनी प्रतिरोध के परिणाम उन जहां पल्मोनरी धमनी और वाम अलिंद इज़ाफ़ा दोनों पर ऊंचा भरने के दबाव का परिणाम होते हैं से लव में कोई बदलाव के साथ वृद्धि हुई पीए व्यास में वृद्धि हुई मॉडल के बीच भेदभाव की अनुमति देता है दिल की बाईं तरफ। दो pathophysiologies में मतभेद छवियां प्रदर्शित 4 चित्र में दिखाए जाते हैं। ला और पीए की छवियाँ युवा, हाइपोक्सिया प्रेरित फेफड़े के उच्च रक्तचाप और उम्र से संबंधित एल.वी. डायस्टोलिक रोग से कर रहे हैं। पल्मोनरी उच्च रक्तचाप मॉडल एक 4 सप्ताह की अवधि में बाएं आलिंद मात्रा में परिवर्तन के बिना पीए व्यास में वृद्धि का विकास। इसकी तुलना में, पुराने जानवरों को उनके फेफड़े के धमनी व्यास और बाएं आलिंद मात्रा ड्राइव दबाव की है कि पिछड़े प्रचार सुझाव इस समूह में पीए व्यास में वृद्धि दोनों में वृद्धि का विकास।


चित्रा 4: ला सुपीरियर अवर और एक सामान्य माउस, एक पल्मोनरी उच्च रक्तचाप मॉडल माउस और उम्र से जुड़े एल.वी. diastolic में शिथिलता के साथ एक पुराने माउस पर पीए व्यास। छवियाँ (ए) और (बी) के एक 15 सप्ताह पुरानी सामान्य माउस के साथ क्रमश: ला सुपीरियर-हीन और पीए व्यास दिखा। छवियाँ (सी) और (डी) एक 15 सप्ताह पुरानी पल्मोनरी उच्च रक्तचाप मॉडल माउस के साथ क्रमश: ला सुपीरियर-हीन और पीए व्यास दिखा। फेफड़े के उच्च रक्तचाप चार सप्ताह के लिए 10% हाइपोक्सिया के लिए जोखिम के प्रेरित किया गया था और फिलीस्तीनी अथॉरिटी सिस्टोलिक दबाव सही दिल कैथेटर अध्ययन के द्वारा 75% की वृद्धि हुई थी। कृपया पीए व्यास में अंतर ध्यान दें। छवियाँ (ई) और (एफ) ऊंचा एल.वी. अंत डायस्टोलिक दबाव के साथ एक 21 महीने पुरानी माउस के साथ क्रमश: ला सुपीरियर-हीन और पीए व्यास दिखा। भरने दबाव wके रूप में पुराने चूहों में लगभग 300% की वृद्धि हुई। कृपया ध्यान दें कि दोनों ला और पीए व्यास 15 सप्ताह पुरानी चूहों की तुलना में बड़े होते हैं। मिलीमीटर में इकाइयों के पैमाने। मार्कर "Δ" ईकेजी, जिस पर दिखाया छवि प्राप्त हुई थी में बिंदु को दर्शाता है। ला एसआई: बाएं आलिंद सुपीरियर-हीन, PA: फेफड़े के धमनी। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

परिणाम यह आवश्यक है में सटीकता सुनिश्चित करने के लिए कि माप हृदय चक्र में अपनी उचित समय पर लिया जाता है। जब लव मापने, शोधकर्ता सभी तीन उपायों के लिए अपनी सबसे बड़ी क्षमता पर आलिंद को मापने के लिए करना चाहता है, इस आलिंद संकुचन से पहले का मतलब है। ला उपांग सुपीरियर अवर ध्यान में रखते हुए किसी भी चूहों में देखा जाता है, लेखकों जब माप कर रही है इसे नजरअंदाज करने की सलाह देते हैं। जब महान जहाजों शोधकर्ता वान मापनेटीएस उनकी सबसे बड़ी क्षमता पर उन्हें मापने के लिए, क्यूआर के बाद या बस के बाद निलय वाहिकाओं में रक्त पंप है, जिसका अर्थ है। आंकड़े 5 9 शो एक ही पशु, ईकेजी पर अलग अलग समय बिंदुओं पर मापा करने के लिए इसी छवियों के माध्यम से एक सही और गलत माप के बीच मतभेदों को वर्णन करने के लिए।

शोधकर्ता अब लंबोतरा अंडाकार 9 के सूत्र का उपयोग लव गणना कर सकते हैं, 10 निम्न उदाहरण के रूप में:

(4 * π * सुपीरियर अवर आयाम * पूर्वकाल पीछे आयाम * Medio पार्श्व आयाम) / (3 * 2 * 2 * 2)

चित्रा 5 में, एक "सही" माप है कि एक गाइड के रूप में ईकेजी का उपयोग कर यह सुनिश्चित करने के शोधकर्ता गुहा की सबसे बड़ी क्षमता पर मापने है प्राप्त है। इस मामले में टीवह अटरिया इसकी सबसे बड़ी क्षमता पर जब सिर्फ पी-लहर पर मापा जाता है। (एसी)। "गलत" माप है कि पी-लहर के अलावा अन्य किसी भी बिंदु पर प्राप्त की है। यह बाएं आलिंद अनुबंध या भरता है के रूप में छोटे आयाम दे जाता है। (बी, डी)। चित्रा 6 में, एक "सही" माप है कि एक गाइड के रूप में ईकेजी का उपयोग कर यह सुनिश्चित करने के शोधकर्ता गुहा की सबसे बड़ी क्षमता पर मापने है प्राप्त है। इस मामले में अटरिया जब सिर्फ पी-लहर पर मापा इसकी सबसे बड़ी क्षमता पर है (ला (1))। "गलत" माप है कि पी-लहर के अलावा अन्य किसी भी बिंदु पर प्राप्त की है। यह बाएं आलिंद अनुबंध या भरता है के रूप में छोटे आयाम दे जाता है। (ला (2))। चित्रा 7 में, एक "सही" माप है कि एक गाइड के रूप में ईकेजी का उपयोग कर यह सुनिश्चित करने के शोधकर्ता गुहा की सबसे बड़ी क्षमता पर मापने है प्राप्त है। जब सिर्फ पी-लहर पर मापा अटरिया इसकी सबसे बड़ी क्षमता पर है। (एसी)। "गलत" माप है कि प्राप्त हैपी-लहर के अलावा अन्य किसी भी बिंदु पर एड। (बी, डी)। * लेखकों लगता है कि सिने ला की सीमा निर्धारित करने के लिए अत्यंत उपयोगी है। शोधकर्ता हृदय चक्र के दौरान ला चाल देखने के लिए सक्षम होना चाहिए। चित्रा 8 में, एक "सही" माप है कि एक गाइड के रूप में ईकेजी का उपयोग कर यह सुनिश्चित करने के शोधकर्ता पोत की सबसे बड़ी क्षमता पर मापने है प्राप्त है। इस मामले में महाधमनी इसकी सबसे बड़ी क्षमता सिर्फ क्यूआर परिसर के बाद कम है। (एसी)। "गलत" माप है कि है कि अभी क्यूआर परिसर के बाद के अलावा अन्य किसी भी बिंदु पर प्राप्त की है। यह महाधमनी अनुबंध या भरता है के रूप में छोटे आयाम दे जाता है। (बी, डी)। 9 चित्रा में, एक "सही" माप है कि एक गाइड के रूप में ईकेजी का उपयोग कर यह सुनिश्चित करने के शोधकर्ता पोत की सबसे बड़ी क्षमता पर मापने है प्राप्त है। इस मामले में फेफड़े के धमनी इसकी सबसे बड़ी क्षमता सिर्फ क्यूआर परिसर के बाद कम है। (एसी)। "गलत" माप है कि किसी भी पी में प्राप्त की हैoint सिर्फ क्यूआर परिसर के बाद के अलावा अन्य। यह फेफड़े के धमनी अनुबंध या भरता है के रूप में छोटे आयाम दे जाता है। (बी, डी)।

चित्रा 5
चित्रा 5: ला सुपीरियर अवर माप। छवियाँ (ए) और (बी) एक ही माउस नमूना के अनुरूप हैं। मिलीमीटर में इकाइयों के पैमाने। छवि (सी) छवि के ईकेजी (ए) के निचले सही टुकड़ा से मेल खाती है। पैमाने पर नहीं। छवि (डी) छवि (बी) के ईकेजी के निचले सही टुकड़ा से मेल खाती है। पैमाने पर नहीं। मार्कर "Δ" छवियों में (सी) और (डी) पर ध्यान दें। मार्कर "Δ" ईकेजी, जिस पर दिखाया छवि प्राप्त हुई थी में बिंदु को दर्शाता है। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

चित्रा 6
चित्रा 6: ला पूर्वकाल पीछे माप। बाएं आलिंद के एम मोड देखें। छवि आदेश पूर्वकाल पीछे मापन प्राप्त करने के लिए बाएं आलिंद के एक एम मोड दृश्य से मेल खाती है। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

चित्रा 7
चित्रा 7: ला Medio पार्श्व माप। इमेजिस (ए) और (बी) एक ही माउस नमूना के अनुरूप हैं। मिलीमीटर में इकाइयों के पैमाने। (सी) के ईकेजी (ए) का एक टुकड़ा से मेल खाती है। पैमाने पर नहीं। (डी) के ईकेजी (बी) का एक टुकड़ा से मेल खाती है। ऐसा नहीं हैपैमाने। मार्कर "Δ" छवियों में (सी) और (डी) पर ध्यान दें। मार्कर "Δ" ईकेजी, जिस पर दिखाया छवि प्राप्त हुई थी में बिंदु को दर्शाता है। एल.वी.: बाएं वेंट्रिकल, आरए: सही आलिंद, ला: बाएं आलिंद। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

आंकड़ा 8
8 चित्रा: महाधमनी माप। इमेजिस (ए) और (बी) एक ही माउस नमूना के अनुरूप हैं। मिलीमीटर में इकाइयों के पैमाने। (सी) के ईकेजी (ए) का एक टुकड़ा से मेल खाती है। पैमाने पर नहीं। (डी) के ईकेजी (बी) का एक टुकड़ा से मेल खाती है। पैमाने पर नहीं। मार्कर "Δ" छवियों में (सी) और (डी) पर ध्यान दें। मार्कर "Δ" ईकेजी में बिंदु को दर्शाता है, जिस परदिखाया छवि प्राप्त हुई थी। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

9 चित्रा
चित्रा 9: फेफड़े के धमनी माप। छवियाँ (ए) और (बी) एक ही माउस नमूना के अनुरूप हैं। मिलीमीटर में इकाइयों के पैमाने। (सी) के ईकेजी (ए) का एक टुकड़ा से मेल खाती है। पैमाने पर नहीं। (डी) के ईकेजी (बी) का एक टुकड़ा से मेल खाती है। पैमाने पर नहीं। मार्कर "Δ" छवियों में (सी) और (डी) पर ध्यान दें। मार्कर "Δ" ईकेजी, जिस पर दिखाया छवि प्राप्त हुई थी में बिंदु को दर्शाता है। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

reproducibility और इस तकनीक की निरंतरता को प्रदर्शित करने के लिए, लेखकों दो उदाहरण उनके अपने काम से प्राप्त करते हैं। पहले एक पुराने चूहों कि आधारभूत इकोकार्डियोग्राफी और बाद में इकोकार्डियोग्राफी एक सप्ताह बाद कराना पड़ा 19 महीने के एक समूह को प्रस्तुत करता है। लेखक के रूप में पहले से वर्णित बाएं आलिंद और महान वाहिकाओं के लिए माप एकत्र की है और निम्नलिखित परिणाम प्राप्त की। बाईं ओर ग्राफ प्रत्येक व्यक्ति के माउस के बाएं आलिंद मात्रा लंबोतरा अंडाकार सूत्र 9, 10 उपयोग कर की गणना से पता चलता है। दाईं ओर ग्राफ प्रत्येक व्यक्ति के माउस के पल्मोनरी धमनी व्यास से पता चलता है। डेटा केवल कुछ प्रतिशत की भिन्नता देखी गई।

चित्रा 10
चित्रा 10: बाएं आलिंद मात्रा और फेफड़े के धमनी व्यास दो बाद गधे पर essments। (ए) 2 के बाद के आकलन पर छह से 19 महीने पुरानी चूहों का मिमी ³ में बाएं आलिंद मात्रा दिखाता है। (बी) एक ही 19 महीने पुराने चूहों के समूह का मिमी में फेफड़े के धमनी व्यास से पता चलता है। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

एक दूसरा उदाहरण के रूप में, लेखकों वर्तमान में एक ही 21 महीने पुरानी दो अलग शोधकर्ताओं द्वारा एक ही दिन में प्राप्त कर लिया माउस के दो छवियों। पहले दो पैनलों # 1 शोधकर्ता और दूसरा दो पैनलों द्वारा अधिग्रहीत छवियों के अनुरूप शोधकर्ता # 2 द्वारा अधिग्रहीत छवियों के अनुरूप हैं। कृपया ध्यान दें कि "समय हासिल मुआवजा" में अंतर माप को प्रभावित नहीं करता। यह उदाहरण क्यूआर में सही बिंदु का चयन करते समय, गुहा आकार को मापने के रूप में पहले से वर्णित का काफी महत्व प्रदर्शित करता है।

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चित्रा 11: ला सुपीरियर अवर और एक ही 19 महीने पुरानी दो अलग शोधकर्ताओं द्वारा अधिग्रहीत माउस के पीए व्यास। (ए) बाएं आलिंद सुपीरियर अवर व्यास से पता चलता है। (बी) एक ही माउस के पीए व्यास से पता चलता है। दोनों छवियों को एक ही दिन में एक ही अनुसंधानकर्ता द्वारा हासिल किया गया। (सी) बाएं आलिंद सुपीरियर अवर व्यास से पता चलता है। (डी) एक ही माउस के पीए व्यास से पता चलता है। दोनों छवियों को एक ही दिन पर एक दूसरे अनुसंधानकर्ता द्वारा हासिल किया गया। मिलीमीटर में इकाइयों के पैमाने। मार्कर "Δ" ईकेजी, जिस पर दिखाया छवि प्राप्त हुई थी में बिंदु को दर्शाता है। ला एसआई: बाएं आलिंद सुपीरियर अवर। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

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Discussion

वहाँ तीन महत्वपूर्ण कदम सफलतापूर्वक लव, महाधमनी और पीए व्यास को मापने के लिए कर रहे हैं। सेट-अप के दौरान यह पूरी तरह से छाती पर फर दूर करने के लिए महत्वपूर्ण है; ऐसा करने के लिए विफलता छवि गुणवत्ता के साथ हस्तक्षेप का परिणाम देगा। छवि के दौरान अधिग्रहण कदम यह उनके इसी जांच और फिल्टर के साथ प्रत्येक छवि प्राप्त करने के लिए महत्वपूर्ण है, क्योंकि फ्रेम प्रति सेकंड की जांच से बदलती हैं जांच के लिए: कि 25 मेगाहर्ट्ज और कार्डिएक फ़िल्टर लव के मूल्यांकन के लिए 30 मेगाहर्ट्ज और मूल्यांकन के लिए पेट फ़िल्टर है महाधमनी और पीए व्यास की। अगर माउस वसा की एक बड़ी राशि है या यह मुश्किल के लिए एक अच्छा खिड़की पाने के लिए एक पसली में आता है अगर शोधकर्ता गरीब छवि अधिग्रहण से कभी-कभी सीमित किया जा सकता है। छवि के दौरान विश्लेषण कदम यह प्रतिनिधि परिणाम खंड में वर्णित के रूप में अपने अधिकतम क्षमता पर गुहाओं को मापने के लिए महत्वपूर्ण है। मार्गदर्शन के रूप में ईकेजी का प्रयोग करें।

इकोकार्डियोग्राफी ऑपरेटर निर्भर होने के लिए जाना जाता है। इस तकनीक की आवश्यकता हैहृदय की शरीर रचना विज्ञान और अच्छी छवि अधिग्रहण के लिए एचोकर्दिओग्रफिक खिड़कियों के साथ ही साथ परिचय अध्ययन के समय को कम करने के लिए। परिचय इस तरह के हृदय की दर और रक्तसंचारप्रकरण समझौते की मंदी के रूप में isoflurane के लंबे समय तक इस्तेमाल से निकाली गई जटिलताओं को रोकने के लिए प्रासंगिक हो जाता है। इसे रोकने के लिए, जानवर की करीब से निगरानी अध्ययन के दौरान ऊपर 400 धड़कता / मिनट दिल की दर को बनाए रखने के द्वारा यह सुनिश्चित किया जाना चाहिए।

इस तकनीक के कई फायदे अन्य उपलब्ध तकनीकों की तुलना में चूहों में हृदय समारोह का मूल्यांकन करने के लिए प्रदान करता है। आक्रामक कैथीटेराइजेशन की तुलना में यह एक गैर इनवेसिव, गैर टर्मिनल तकनीक है कि सीरियल माप की अनुमति देता है; एमआरआई की तुलना में यह सस्ता और तेज 8 है। 2 डी इकोकार्डियोग्राफी के माध्यम से लव और पीए व्यास को मापने के लिए इस नई तकनीक पर नजर रखने के हस्तक्षेप और हृदय विज्ञान में आगे अनुसंधान के लिए दरवाजे खोलता है।

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Materials

Name Company Catalog Number Comments
Vevo 770 high-resolution in vivo micro-imaging system Visual Sonics Vevo 770-120 Echocardiographic Equipment
707B RMV (Real time MicroVisualization) 30 MHz Scanhead with encapsulated transducer  Visual Sonics 707B-256 Real Time Microvisualization Scanhead
710B RMV (Real time MicroVisualization) 25 MHz Scanhead with encapsulated transducer  Visual Sonics 710B-159 Real Time Microvisualization Scanhead
Vevo integrated rail system including physiological monitoring unit  Visual Sonics
Inhalation Anesthesia System VetEquip VE2627 Anesthesia System
Isofluorane Henry Schein 50033
Electric razor  Wahl General supply
Hair removal cream Nair General supply
Transductor cream Parker
Transductor gel Parker
Standard Gauze pads   McKeeson General supply
Tape Durapore General supply
Nose cone  For anesthesia delivery
Water 
Vet eye ointment  Puralube General supply  To prevent dryness 
Cotton tipped applicators  General supply
USB Flash Drive General supply

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References

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चिकित्सा अंक 120 इकोकार्डियोग्राफी murine बाएं आलिंद पल्मोनरी धमनी diastolic में शिथिलता दिल की विफलता उम्र बढ़ने पल्मोनरी उच्च रक्तचाप गैर इनवेसिव
बाएं आलिंद, महाधमनी, और फेफड़े के धमनी की murine इकोकार्डियोग्राफी
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Granillo, A., Pena, C. A., Pham, T., More

Granillo, A., Pena, C. A., Pham, T., Pandit, L. M., Taffet, G. E. Murine Echocardiography of Left Atrium, Aorta, and Pulmonary Artery. J. Vis. Exp. (120), e55214, doi:10.3791/55214 (2017).

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