Summary
다음 프로토콜은 마우스의 왼쪽 심방 볼륨 (LAV), 대동맥 (아오) 직경 및 폐 동맥 (PA) 직경을 얻기 위해 사용 심 초음파 이미지의 수집 및 분석을위한 방법을 설명합니다. 이 기술은 심폐 기능 평가를 할 수있는 비 침습적 비 단자 절차이다.
Abstract
본 방법은 측정과 심 초음파를 통해 좌심실 이완기 혈압 만성 고도의 대리로 LAV를 사용뿐만 아니라 쥐의 대동맥 및 PA 직경의 측정 값을 얻을하는 방법을 조사 가르친다.
연령 10 세 이상 D 마우스는 본 기술을 이용하여 분석 될 수있다. 셋업, 영상 획득 및 이미지 분석 :이 기술은 3 가지 주요 단계로 구성된다. 셋업 단계는 1 % 이소 플루 란 마취 마우스를 가져 오는을 면도하고, 이미지 수집이 수행하는 가열 EKG 보드에 앙와위에서 테이핑으로 구성되어 있습니다. 이미지 획득 단계는 심장 구조를 식별하기 위해 학습 및 볼륨 및 직경을 계산할 수하기 위해 그 상대 프로브 축에 필요한 모든 이미지를 얻기로 구성되어 있습니다. 이미지 분석 단계는 컴퓨터 소프트웨어의 도움으로 미리 획득 한 이미지를 측정하는 구성.
Introduction
본 방법은 측정 및 이소 플루 란에서 마우스에 2 차원 심 초음파와 LAV, 대동맥 직경 PA 직경을 사용하는 방법을 연구자을 가르친다. 노인의 보존 구혈률 (HFpEF)와 심장 마비 그 팔십년에서 최대 10 %에 영향을 미치는 중요한 이환율과 사망률 1 이전 결과. 상당한 사망률은 폐 고혈압 (PH), 폐동맥 압력이 운동시 호흡 곤란, 진보적 인 오른쪽 심장 마비, 종종 죽음으로 이어질 상승하는 HFpEF과 유사한 증상으로 제시하는 교활한 질병 과정에서 발생한다. 이 HFpEF 및 PH 양의 증가 유병률은 비 침습이 아닌 단말 접근 정확한 평가 뮤린 모델에서 중재 모니터링 할 수있는 방법의 개발에 대한 필요성을 의미.
심실 기술의 변화를 통해 이완기 기능의 저하에 리드를 노화erial 보강, 혈관 장애, 염증 (3), 장애인 칼슘 규제 4, β 아드레날린 응답 성을 감소하고, 생산 물리적 deconditioning 활성 휴식을 둔화 및 수동 강성을 증가했다. 시간이 지남에 따라이 증가 LV 충전 압력과 LA의 보상 확대로 이어집니다. (5)
이러한 판막 부전 (승모판 폐쇄 부전 또는 협착) 및 침윤성 프로세스와 같은 다른 병인이 LA 1 압력과 부피 상승의 원인이 있지만, 심장의 유럽 사회는 좌심실 기능의 비 침습적 반사로 LA 크기의 추가를 지원합니다. 6
LA 볼륨과 이완기 기능의 침략 조치 사이의 상관 관계는 쥐에서 연구되고있다. 기능의 차이와 상관 LA 볼륨이 모두 연령 그룹 내에서 침습적 결정 14- 31 개월 된 m얼음. 14 개월 된 쥐에서 LA 볼륨 이완기 기능의 세 가지 표준 침습적 방법과 상관 -dp / dtmin (R 2 = 0.5, P <0.05), 타우 (휴식의 시간 상수 (R 2 = 0.6, P <0.05), 좌심실 끝 확장기 혈압 (R 2 = 0.25, P <0.05). 31 개월에서 오래된 마우스, LA 볼륨과 -dp / dtmin (R 2 = 0.92, P 사이의 상관 관계에 대한 < 타우와의 관계가 덜 분명하지만 0.05), LVEDP (R 2 = 0.61, p <0.05) 알 수 있었다. 따라서, LA 볼륨 그룹간에하지만 연령 그룹 내에서뿐만 아니라 이완기 장애로 증가했다. (7)
때문에 반복 평가와의 호환성을 제한하는 엄격하고 믿을 수 있지만, 심장 성능을 평가하기 위해 카테터 기술을 사용하여 쥐 모델에서 심장 기능의 연구. 이러한 MRI 및 3D 심장 초음파 검사도 할 수있다 등의 침습적 인 방법 8 대안2D 심 초음파 기술보다 더 정확하지만, 그들은 더 비싸다; 2 차원 심 초음파는 LA 볼륨 평가에 적합한 것으로 간주됩니다. 9 10
심 초음파와 LA 볼륨과 PA 직경의 평가는 폐 동맥과 왼쪽 아트리움 모두로 확대 곳과는 LA의 압력 또는 LAV에 변화와 PA 직경의 증가의 결과로 폐동맥 저항의 차 증가 생산 모델 사이의 차별을 할 수 있습니다 심장의 좌측 높은 충전 압력의 결과. 이 방법은 스칼리아 등의 알에 의해 촬영됐다. 사람, 왼쪽 심방 비율에 심 초음파 폐 동맥 (ePLAR)이 정확하게 사전 폐 모세 혈관 고혈압 및 사후 capillaryhypertension 환자를 구별 할 수있는 매개 변수임을 보여 주었다 사람. (11)
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Protocol
모든 동물은 의학의 베일러 대학의 실험실 동물의 관리 및 사용에 대한 건강 가이드의 국립 연구소의 지침에 따라 마음에 든다고했다.
1. 셋업
- 심 초음파 시스템을 켭니다. 표시 드롭 다운 메뉴에서 "심장 측정"을 선택하여 소프트웨어를 시작하고 "초기화"를 클릭합니다.
- 화면 상단의 "새"버튼을 새로운 연구의 클릭을 시작하고 연구 마우스의 인구 통계 학적 정보를 입력합니다. 예를 들어, 마우스 ID, 성별, 생년월일뿐만 아니라 연구를하고 운영자의 이름.
- "온도 ON / OFF"버튼을 클릭하여 온도 조절 EKG 보드의 전원을 켭니다. 위쪽 및 아래쪽 화살표를 사용하여 39 ° C의 온도로 설정합니다.
- 마취 실을 설정하는 시작하려면 먼저 산소와 이소 플루 란 수준이 전달 시스템의 각각에 적합한 있는지 확인하십시오.
- 온도 제어 EKG 보드에 부정사 위치에 마우스를 놓고 보드의 대응 변환 소자에 각각의 발을 테이프. 선택적으로, 상기 신호를 향상시키기 위해 변환기 크림을 사용한다.
- 건조 함을 방지하기 위해 마우스의 눈에 인공 눈물 안과 윤활유 연고를 적용합니다.
- 마우스는 EKG 보드 녹화되면, 모니터의 하부에 트레이싱 EKG를 관찰한다. 최상의 결과를 보장하기 위해 전체 연구 전반에 걸쳐 심장 박동을 모니터링합니다. 400 비트의 심장 박동수 / 분 이상이다. 이 범위 아래 심장 비율은 이소 플루 란 효과를 제안 할 수 있습니다.
- 확실히 마우스를 유지합니다 산소를 수신하고,얼굴 마스크에 의해 이소 플루 란.
- 마우스의 전방 흉부와 상복부 영역에서 몸의 털을 면도하는 전기 면도기를 사용합니다. 더 모피 제거를 보장하기 위해 필요한 경우 제모 크림을 사용합니다.
- 마우스의 가슴에 트랜스 듀서 젤의 관대 한 금액을 넣습니다.
2. 이미지 인식
- 왼쪽 아트리움 측정
- 심전도 보드 아래에있는 손잡이를 찾습니다. 마우스를 위치시킨 가동 EKG 기판의 각도를 조절 핸들을 사용한다. X 축 및 Y 축 방향을 따라 0 ° 각도 45 °의 각도 - 30에 EKG 기판을 조정함으로써 시작한다. 저자는 "부정사"위치로 참조하십시오. 왼쪽 아트리움 측정 취득 모두를위한이 위치를 사용합니다.
- 긴 축보기에서 심 초음파 가동 암 클램프에서 25 MHz의 스캔 헤드를 놓습니다. 심 초음파 시스템의 심장 측정 필터 및 2D B-모드를 선택해야합니다.
- 에코는 것을 알cardiographic 세트는 시계 방향 또는 반 시계 방향으로 이동할 수 있습니다 X와 Y 축 조정 토크가 있습니다. 대동맥 유출 기관의 수준에서 마음의 긴 축보기를 얻을하고 5 초 동영상 촬영을 취득을 돌립니다. 심 초음파 시스템의 키보드의 "시네 저장"버튼을 눌러 스캔을 획득. 라의 우수한 - 열등 측정을 계산하는 데 사용합니다.
- 영화 인수 한 후, 심 초음파 시스템의 키보드의 "M 모드"버튼을 눌러 M-모드로 심 초음파보기를 전환 할 수 있습니다.
- 시상보기 및 커서를 관찰한다. 이 대동맥 유출 기관의 수준에서 전체 LA를 포함하도록 커서를 놓습니다. 이 새로운보기 3 이미지를 획득. 심 초음파 시스템의 키보드의 "프레임 저장"버튼을 눌러 스캔을 획득. 라의 전후방 측정을 계산하는 데 사용합니다.
- 은 "B-모드"를 눌러 B 모드로 돌아하지만, 심 초음파 시스템의 키보드 톤.
- 세트 시계 방향으로 90 °의 가동 암 클램프를 회전합니다. 이 짧은 축보기에서 스캔 헤드를 설정합니다.
- Y 축 토크를 사용하여 관절 격벽을 찾기. 심방의 벽을 시각화해야합니다. 5의 동영상 촬영을 취득. 심 초음파 시스템의 키보드의 "시네 저장"버튼을 눌러 스캔을 획득. 라의 메디 오 - 측면 측정을 계산하는 데 사용합니다.
그림 1 : "부정사"위치. 은 "부정사"위치에서 마우스의 표현입니다. 약 30 - X 축을 따라 45 ° 각도와 Y 축의 각도를 0 °. 이 위치는 좌심방 측정 모두를 취득하기 위해 사용된다.t = "_ 빈">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
- 큰 용기 측정
- 30 MHz의 스캔 머리를 25 MHz의 스캔 헤드를 교환하여 계속합니다. 가동 암 클램프에서 25 MHz의 스캔 헤드를 제거하고 대신 30 MHz의 스캔 헤드를 배치합니다. 심 초음파 시스템의 복부 측정 필터 및 2D B-모드를 선택해야합니다.
- 심전도 보드 아래에있는 손잡이를 찾습니다. 마우스가 놓여있는 가동 EKG 기판의 각도를 조절 핸들을 사용한다. X 축 및 Y 축 방향의 60 °의 각도에 따라서 5 ° 각도로 EKG 기판을 조정함으로써 시작한다. 대동맥과 폐동맥 측정의 취득이 podition을 사용합니다. "서 업"위치로이를 참조하십시오.
- 심 초음파 세트의 X 및 Y 축의 조정 토오크를 사용하여 대동맥 유출 기관의 수준에서 심장의 장축보기를 얻을 및 5의 동영상 녹화를 획득. 일 획득전자 심 초음파 시스템의 키보드의 "시네 저장"버튼을 눌러 스캔합니다. 대동맥 직경을 계산하기 위해 사용합니다.
- 영화 인수 한 후, 세트 시계 방향으로 90 °의 가동 암 클램프를 회전합니다. 이 짧은 축보기에서 스캔 헤드를 설정합니다.
- Y 축 토크를 사용하여 그 분기점의 높이에서 폐동맥을 찾아 5의 동영상 녹화를 획득. 심 초음파 시스템의 키보드의 "시네 저장"버튼을 눌러 스캔을 획득. 폐 동맥의 직경을 계산하기 위해 사용합니다.
주 : 연구원은 폐 동맥의 정확한 식별을 보장하기 위해 도구로 도플러 영상을 사용할 수 있습니다. 원하는 경우, 단계를 한번 눌러 2.2.5 도플러 이미지를 획득하는 심 초음파 시스템의 키보드의 "PW"버튼을 완료한다. 특성 폐 파 트레이싱이 볼 경우, 연구원은 정확한 위치가 확인 된 것을 안심 할 수 있습니다.
> - 안전하게 EKG 보드에서 마우스를 제거하려면 마우스의 가슴에서 젤을 제거하고 사지에서 테이프를 제거합니다.
- 마취와 산소 전달 시스템의 전원을 끕니다. 그 케이지에 마우스를 반환하고 흉골 드러 누움을 유지하기 위해 충분한 의식을 회복 할 때까지 마우스를 방치하지 않습니다.
- 이미지 전송
- 컴퓨터에 심 초음파 시스템에서 수집 한 영상을 전송하는 USB 플래시 드라이브를 사용한다. 심 초음파 시스템의 USB 포트에 USB 플래시 드라이브를 삽입합니다.
- 연구 이름 (들)을 클릭하여 전송하기 위해 연구 또는 연구를 선택합니다.
- 화면 상단에있는 버튼을 "로 복사"를 클릭합니다. 파일 앱 것이다 디렉토리를 보여주는 새로운 창귀. 방금 삽입 한 USB 플래시 드라이브에 해당하는 디렉토리를 선택하고 "OK"를 클릭합니다.
- 심 초음파 시스템에서 USB 플래시 드라이브를 분리 및 분석에 사용하는 컴퓨터의 USB 포트에 삽입한다.
- 심 초음파 소프트웨어를 실행합니다. 화면 상단에있는 버튼을 "복사"를 클릭합니다. 파일 및 디렉토리를 보여주는 새 창을 준수하십시오. 선택 연구는 삽입 된 USB 플래시 드라이브에 해당하는 디렉토리에서 복사하고 "확인"을 클릭합니다.
- 파일을 복사 한 후, 연구 목록을 관찰합니다. 그 이름에 대한 연구, 더블 클릭을 분석 시작 운영자 분석의 이름을 선택합니다.
- 왼쪽 아트리움 분석
참고 : 다음의 모든 심방 측정이 연구원은 LA를 측정하고자하는 지점으로 P 파를 선택하는 가이드로 EKG를 사용하십시오. 이 때 제 사전 심방 수축 시간에 대응전자 LA는 최대 용량이다.- 왼쪽 아트리움 (단계 2.1.3)의 우수한 - 열등 차원에 해당하는 무비 클립을 선택합니다. 가이드로 EKG를 사용하여 미리 심방 수축 시간을 결정한다. 이 방법은 캐비티는 가장 큰 용량을 측정한다.
- 화면 상단에있는 도구 모음에서 "도구"를 선택한 다음 "측정"을 클릭합니다. 새 창이 나타납니다. 은 "선형 거리 측정 도구"아이콘 (이 창의 왼쪽 상단 모서리에있는 첫 번째 아이콘에 해당)을 클릭합니다. 가장 큰 직경의 구멍을 측정합니다.
- 왼쪽 아트리움 (단계 2.1.5)의 전방 - 후방 치수에 대응하는 이미지를 선택합니다. 가이드로 EKG를 사용하여 미리 심방 수축 시간을 결정한다. 이 방법은 캐비티는 가장 큰 용량을 측정한다. 측정하기 위해이 단계 4.2.2를 반복합니다.
- 왼쪽 아트리움 (단계 2.1.8)의 메디 오 - 측면 치수에 대응하는 이미지를 선택합니다. 사전 심방 contrac를 결정가이드로 EKG를 사용하여 기 시간. 이 방법은 캐비티는 가장 큰 용량을 측정한다. 대각선 방식으로 반대 벽에 심방 중격에서 공동을 측정합니다. 측정하기 위해이 단계 4.2.2를 반복합니다.
주 : 반복 4.2.1 4.2.4 통해 적어도 세 번 단계 및 오류를 최소화하기 위해 평균값을 획득.
- 큰 선박 분석
참고 : 다음의 모든 큰 혈관 측정은 연구자가 측정하고자하는 지점으로 QRS 군 후 시간을 선택 가이드로 EKG를 사용하십시오. 이것은 큰 용기가 최대 용량에있는 점에 해당한다.- 대동맥 (단계 2.2.3)에 해당하는 무비 클립을 선택합니다. 심전도를 사용하여 QRS 후 시점을 결정합니다. 참고로 혈관 벽을 이용하여 90 ° 각도로 직경을 측정한다. 그것을 단계를 반복 4.2.2 측정하기
- 폐 동맥 (단계 2.2.5)에 해당하는 무비 클립을 선택합니다. 질문 후 시점을 결정심전도를 이용하여 RS. 참고로 혈관 벽을 이용하여 90 ° 각도로 직경을 측정한다. 폐 동맥 분기 위의 평면을 선택합니다. 측정하기 위해이 단계 4.2.2를 반복합니다.
그림 2 : "서 업"위치. 은 "서 업"위치에서 마우스의 표현입니다. 대략 X 축 방향 5도 각도와 Y 축 방향의 60 °의 각도. 이 위치는 대동맥 및 폐동맥 직경을 얻기 위해 사용된다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
그림 3 : 폐 동맥 도플러. 특성 폐 동맥 도플러 영상. 연구원은 폐 동맥의 정확한 식별을 보장하기 위해 도구로 도플러 영상을 사용할 수 있습니다."빈>이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
3. 포스트 절차 동물 복구
4. 이미지 분석
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Representative Results
심 초음파와 LA 볼륨과 PA 직경의 평가는 폐 동맥과 왼쪽 심방 확대가에 높은 충전 압력의 결과 모두 어디 그에서 LAV의 변화에 따라 증가 PA 직경에 폐동맥 저항의 결과를 증가 모델 사이의 차별을 할 수 있습니다 심장의 왼쪽. 두 pathophysiologies의 차이를 표시하는 이미지는 그림 4에 표시됩니다. 라와 PA의 이미지는 젊은, 저산소증에 의한 폐 고혈압과 연령 관련 좌심실 이완기 기능 장애에서이다. 폐동맥 고혈압 모델은 4 주 동안 좌심방 용적 변화없이 PA 직경의 증가를 개발한다. 이에 비해, 기존 동물은 폐 동맥 직경 구동이 그룹 PA 직경의 증가를 압력의 역방향 전파 제안 좌심방 부피 모두의 증가를 개발한다.
그림 4 : 나이 관련 LV 이완기 기능 장애를 가진 일반 마우스, 폐 고혈압 모델 마우스와 오래 된 마우스에 LA 우수한 - 열등 및 PA 직경. 사진 (A) 및 (B)는 각각 15 주령 정상 마우스 LA 페리 열등한 및 PA 직경을 나타낸다. 이미지 (C) 및 (D)는 각각 15 주령 폐 고혈압 모델 마우스 LA 페리 열등한 및 PA 직경을 나타낸다. 폐 고혈압은 4 주 동안 10 %의 저산소증에 대한 노출에 의해 유도하고 PA 수축기 압력 우심 카테터 연구에서 75 % 증가 하였다. PA 직경의 차이를주의하시기 바랍니다. 이미지 (E) 및 (F)는 각각 상승 LV 끝 확장기 압력으로 21 개월 마우스의 LA 우수한 - 열등 및 PA 직경을 보여줍니다. w 충전 압력로 이전 마우스에서 거의 300 % 증가했다. 라와 PA 직경 모두 15 주 된 쥐에 비해 큰 있습니다. 밀리미터 단위를 확장 할 수 있습니다. 마커 "Δ"는 표시된 화상을 얻었다되는 EKG에서의 시점을 나타낸다. LA SI : 왼쪽 아트리움 우수한 - 열등, PA : 폐동맥. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
측정은 심장주기에 자신의 적절한 타이밍에서 촬영된다는 사실 필요가있다 결과의 정확성을 보장합니다. LAV를 측정 할 때, 연구자는 세 가지 조치에 대한 최대 용량의 중앙 홀을 측정하고 싶어,이 심방 수축하기 전에 의미한다. 라의 부속물이 우수한 - 열등보기에서 마우스에서 볼 경우, 저자는 측정을 할 때 그것을 무시하는 것이 좋습니다. 연구자가 완 큰 혈관을 측정 할 때TS는 QRS 후에하거나 심실이 혈관에 혈액을 펌핑 한 후 의미, 자신의 가장 큰 용량을 측정합니다. 심전도의 서로 다른 시점에서 측정 된 동일 동물에 대응하는도 9의 이미지를도 5는 정확하고 잘못된 측정 간의 차이를 설명한다.
연구원은 이제 늘어난 타원 (9)의 공식을 사용하여 LAV를 계산할 수 있습니다, 다음 예제와 같이 10 :
(4 * π * 우수한 - 열등 차원 * 전방 - 후방 치수 * 메디 오 - 측면 치수) / (3 * 2 * 2 * 2)
그림 5에서, "올바른"측정은 연구자가 공동의 가장 큰 용량으로 측정되어 있는지 확인하기 위해 가이드로 EKG를 사용에 의한 것입니다. 이 경우 t에서그냥 P 파에서 측정했을 때 그는 심방는 최대 용량이다. (A, C). 에 "잘못된"측정은 P 파가 아닌 다른 지점에서 얻은 것이다. 이 좌심방 계약 또는 채우기로 작은 크기를 제공하는 경향이있다. (B, D). 그림 6에서, "올바른"측정은 연구자가 공동의 가장 큰 용량으로 측정되어 있는지 확인하기 위해 가이드로 EKG를 사용에 의한 것입니다. 단지 P 파를 측정 할 때이 경우에, 심방이 최대 용량에있다 (LA (1)). 에 "잘못된"측정은 P 파가 아닌 다른 지점에서 얻은 것이다. 이 좌심방 계약 또는 채우기로 작은 크기를 제공하는 경향이있다. (LA (2)). 그림 7에서, "올바른"측정은 연구자가 공동의 가장 큰 용량으로 측정되어 있는지 확인하기 위해 가이드로 EKG를 사용에 의한 것입니다. 그냥 P 파에서 측정 할 때 심방는 최대 용량이다. (A, C). 에 "잘못된"측정은 얻을 것입니다는 P 파가 아닌 다른 지점에서 에디션. (B, D). * 저자는 시네은 LA의 한계를 결정하는 매우 도움이된다 생각합니다. 연구원은 심장주기에 걸쳐 LA의 움직임을 볼 수 있어야합니다. 그림 8에서, "올바른"측정은 연구자가 용기의 최대 용량에서 측정되어 있는지 확인하기 위해 가이드로 EKG를 사용에 의한 것입니다. 이 경우 대동맥 단지 QRS 복합체 후의 최대 용량이다. (A, C). 에 "잘못된"치수는 단지 QRS 복합체 후 그 이외의 점에서 얻어지는 점이다. 또한 대동맥 수축 또는 채워질 작은 크기를 제공하는 경향이있다. (B, D). 그림 9에서, "올바른"측정은 연구자가 용기의 최대 용량에서 측정되어 있는지 확인하기 위해 가이드로 EKG를 사용에 의한 것입니다. 이 경우 폐동맥 단지 QRS 복합체 후의 최대 용량이다. (A, C). 에 "잘못된"측정은 어떤 P 얻어지는 것을다만 QRS 복합체 후 이외 OINT. 이는 폐동맥 계약 또는 채워질 작은 크기를 제공하는 경향이있다. (B, D).
그림 5 : LA 우수한 - 열등 측정. 사진 (A) 및 (B)는 동일한 마우스 시험편에 대응한다. 밀리미터 단위를 확장 할 수 있습니다. 콘텐츠 (C)는 이미지 EKG (A)의 우측 단편에 대응한다. 확장 할 수 없습니다. 이미지 (D)는 영상 (B)의 EKG의 우측 단편에 대응한다. 확장 할 수 없습니다. 이미지에 마커 "Δ"(C)와 (D)를 참고. 마커 "Δ"는 표시된 화상을 얻었다되는 EKG에서의 시점을 나타낸다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
그림 6 : LA 전방 - 후방 측정. 왼쪽 아트리움의 M 모드보기. 이미지는 전후방 측정을 얻기 위해 좌측 심방의 M 모드 뷰에 대응한다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
그림 7 : LA 메디 오 - 측면 측정. 이미지 (A) 및 (B)는 동일한 마우스 시험편에 대응한다. 밀리미터 단위를 확장 할 수 있습니다. (C)는 EKG의 (A)의 단편에 상응한다. 확장 할 수 없습니다. (D)는 EKG의 (B)의 단편에 상응한다. 하지에규모. 이미지에 마커 "Δ"(C)와 (D)를 참고. 마커 "Δ"는 표시된 화상을 얻었다되는 EKG에서의 시점을 나타낸다. LV : 왼쪽 심실, RA : 오른쪽 심방, LA : 왼쪽 심방. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
그림 8 : 대동맥 측정. 이미지 (A) 및 (B)는 동일한 마우스 시험편에 대응한다. 밀리미터 단위를 확장 할 수 있습니다. (C)는 EKG의 (A)의 단편에 상응한다. 확장 할 수 없습니다. (D)는 EKG의 (B)의 단편에 상응한다. 확장 할 수 없습니다. 이미지에 마커 "Δ"(C)와 (D)를 참고. 마커 "Δ"는 EKG의 점을 의미하는도시 된 화상이 얻어졌다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
그림 9 : 폐 동맥 측정. 사진 (A) 및 (B)는 동일한 마우스 시험편에 대응한다. 밀리미터 단위를 확장 할 수 있습니다. (C)는 EKG의 (A)의 단편에 상응한다. 확장 할 수 없습니다. (D)는 EKG의 (B)의 단편에 상응한다. 확장 할 수 없습니다. 이미지에 마커 "Δ"(C)와 (D)를 참고. 마커 "Δ"는 표시된 화상을 얻었다되는 EKG에서의 시점을 나타낸다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
재현성이 기술의 일관성을 설명하기 위해 저자는 자신의 작업에서 파생 된 두 가지 예를 제공합니다. 첫 번째 19 개월 그룹 일주일 후에베이스 라인 심장 초음파 검사 및 후속 심장 초음파 검사를 시행 이전 마우스를 제공합니다. 저자는 전술 한 바와 같이 좌심방 큰 선박에 대한 측정 값을 수집하고, 다음의 결과를 얻었다. 왼쪽 그래프는 늘어난 타원 식 (9), (10)을 이용하여 계산 각각 마우스의 왼쪽 아트리움 볼륨을 보여줍니다. 오른쪽 그래프는 각 마우스의 폐 동맥의 직경을 보여줍니다. 데이터는 단지 몇 퍼센트의 변화를 나타냈다.
이 이후의 엉덩이에 왼쪽 아트리움 볼륨 및 폐 동맥 직경 : 그림 10 essments. (A) 2 이후의 평가에 여섯 19 개월 마우스의 mm³에서 좌심방 볼륨을 보여줍니다. (B)는 동일한 19 개월 된 마우스 군 mm의 폐동맥 직경을 나타낸다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
두 번째 예로서, 본 저자 두 개의 서로 다른 연구자들에 의해 같은 날 인수 같은 21개월 된 마우스의 두 이미지. 처음 두 패널은 연구원 # 2에 의해 취득 된 화상에 대응 연구원 # 1 및 두 번째 패널에 의해 취득 된 화상에 대응한다. "시간 이득 보상"의 차이가 측정에 영향을 미치지 않음을 유의하시기 바랍니다. 이 예는 전술 한 바와 같이, 캐비티의 크기를 측정하면서 QRS의 적절한 지점 선택의 중요성을 보여준다.
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그림 11 : 두 개의 서로 다른 연구자에 의해 취득 된 동일한 19 개월 마우스의 LA 우수한 - 열등 및 PA 직경. (A) 좌심방 우수한 - 열등 직경을 보여줍니다. (B)는 동일한 마우스 PA 직경을 나타낸다. 두 이미지가 같은 날 같은 연구자에 의해 인수되었다. (C)은 좌심방 우수한 - 열등 직경을 보여줍니다. (D)는 같은 마우스의 PA 직경을 보여줍니다. 두 이미지는 같은 날에 두 번째 연구에 의해 취득 하였다. 밀리미터 단위를 확장 할 수 있습니다. 마커 "Δ"는 표시된 화상을 얻었다되는 EKG에서의 시점을 나타낸다. LA SI : 왼쪽 아트리움 우수한-열등한. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
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Discussion
성공적으로 LAV, 대동맥 및 PA 직경을 측정하는 세 가지 중요한 단계가 있습니다. 셋업 동안 완전히 가슴의 털을 제거하는 것이 중요하다; 이렇게하는 실패는 이미지 품질과의 간섭 발생합니다. 즉, 25 MHz 및 심장 필터 LAV의 평가 및 30 MHz 및 평가를위한 복부 필터입니다 : 이미지 중 취득 초당 프레임이 프로브 프로브 다를대로 해당 프로브와 필터를 각각의 이미지를 획득하는 것이 중요 단계 대동맥 및 PA 직경. 마우스가 지방의 큰 금액을 가지고 또는 리브하게되면 어려운 좋은 창을 얻을 경우 연구원은 가난한 이미지 수집에 의해 때때로 제한 될 수 있습니다. 이미지 분석 동안은 대표 결과 섹션에 기술 된 바와 같이 최대 용량에서 공동을 측정하는 중요한 단계. 지도로 심전도를 사용합니다.
심장 초음파 검사는 운영자 의존하는 것으로 알려져있다. 이 기술은 필요뿐만 아니라 최상의 이미지 수집을위한 심장 해부학 및 심 초음파 창문 익숙해은 연구의 시간을 줄일 수 있습니다. 익숙해은 심박수 및 혈역학 적 타협의 둔화로 이소 플루 란의 장기간 사용에서 파생 된 합병증을 방지하기 위해 관련된다. 이를 방지하기 위해 동물의 근접 모니터링 연구 내내 400 비트 / 분 상기 심박수를 유지함으로써 보장되어야한다.
이 기술은 마우스의 심장 기능을 평가하기 위해 사용 가능한 다른 기술에 비해 많은 장점을 제공한다. 침윤성 도관에 비해 그 일련의 측정을 가능하게하는 비 침습적, 비 종단 기술이다; MRI 비교는 저렴하고 8 빠르다. 2 차원 심 초음파를 통해 LAV와 PA의 직경을 측정하는이 새로운 기술은 모니터 개입 및 심폐 과학 분야의 추가 연구에 문을 엽니 다.
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Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Vevo 770 high-resolution in vivo micro-imaging system | Visual Sonics | Vevo 770-120 | Echocardiographic Equipment |
| 707B RMV (Real time MicroVisualization) 30 MHz Scanhead with encapsulated transducer | Visual Sonics | 707B-256 | Real Time Microvisualization Scanhead |
| 710B RMV (Real time MicroVisualization) 25 MHz Scanhead with encapsulated transducer | Visual Sonics | 710B-159 | Real Time Microvisualization Scanhead |
| Vevo integrated rail system including physiological monitoring unit | Visual Sonics | ||
| Inhalation Anesthesia System | VetEquip | VE2627 | Anesthesia System |
| Isofluorane | Henry Schein | 50033 | |
| Electric razor | Wahl | General supply | |
| Hair removal cream | Nair | General supply | |
| Transductor cream | Parker | ||
| Transductor gel | Parker | ||
| Standard Gauze pads | McKeeson | General supply | |
| Tape | Durapore | General supply | |
| Nose cone | For anesthesia delivery | ||
| Water | |||
| Vet eye ointment | Puralube | General supply | To prevent dryness |
| Cotton tipped applicators | General supply | ||
| USB Flash Drive | General supply |
References
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