Biology

אימונוהיסטוכימיה על סעיפים פרפין של האפידרמיס עכבר באמצעות נוגדנים פלורסנט

Published: January 8, 2008 doi: 10.3791/552

Tammy-Claire Troy¹, Azadeh Arabzadeh², Adebola Enikanolaiye², Nathalie Lariviere², Kursad Turksen²

¹Chronic Disease Program, Ottawa Health Research Institute, ²Department of Cellular and Molecular Medicine, Ottawa Health Research Institute

Summary

אנו מתארים שיטה אמינה עבור immunolocalization בתוך האפידרמיס שונה עבור שני חלקים קפואים פרפין שאנו משתמשים מאוד שגרתי במעבדה שלנו.

Abstract

ב האפידרמיס, אימונוהיסטוכימיה הוא אמצעי יעיל לאיתור חלבונים ספציפיים לתא הביטוי היחסי, כלומר את שכבות הבסיס, suprabasal, ואת השכבה הקרנית. לוקליזציה מדויק בתוך האפידרמיס של חלבון מסוים מעניק רמזים לעבר תפקיד פונקציונלי שלה בתוך האפידרמיס. בפרק זה אנו מתארים שיטה אמינה immunolocalization בתוך האפידרמיס שונה לשני חלקים קפואים פרפין שאנו משתמשים מאוד שגרתי במעבדה שלנו. סעיפים פרפין בדרך כלל לספק מורפולוגיה הרבה יותר טוב, ולכן, תוצאות משופרות ותמונות, אך לא כל הנוגדנים יעבוד עם קיבעון את הטיפול הקשה המעורבים בעיבוד שלהם. לפיכך, פרוטוקול עבור חתך קפוא כלולה גם. בתוך חתך פרפין, שני הפרוטוקולים קיבעון מתוארים (Bouin ושל paraformaldehyde); הבחירה של מקבע יהיה קשור ישירות מפרטים הנוגדנים והן עשויות לחייב שיטה אחרת לתקן.