Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Journal Behavior
Click here for the English version

Behavior

اختبار كائن رواية الاعتراف للتحقيق في التعلم والذاكرة في الفئران

Published: August 30, 2017 doi: 10.3791/55718
Automatic Translation
1
1Pharmacological Sciences, Icahn School of Medicine at Mount Sinai

Summary

اختبار التعرف على الكائن (ORT) مقايسة بسيطة وفعالة لتقييم التعلم والذاكرة في الفئران. يرد أدناه وصف المنهجية.

Abstract

اختبار التعرف على الكائن (ORT) مقايسة سلوكية استخداماً لتحقيق الجوانب المختلفة للتعلم والذاكرة في الفئران. العلاج باﻹماهة الفموية بسيطة إلى حد ما ويمكن أن تكتمل على مدى 3 أيام: يوم التعود والتدريب اليوم، والاختبار. أثناء التدريب، مسموح بالماوس لاستكشاف الكائنات المتطابقة 2. في يوم الاختبار، يتم استبدال أحد الكائنات التدريب مع كائن جديد. نظراً لأن الفئران قد تفضيل الفطري للجدة، إذا كان الماوس تسلم الكائن مألوفة، أنها سوف تنفق معظم وقتها في الكائن رواية. بسبب هذا التفضيل الفطري، ليست هناك حاجة للتعزيز الإيجابي أو السلبي أو الجداول الزمنية للتدريب منذ فترة طويلة. بالإضافة إلى ذلك، يمكن أيضا تعديل العلاج باﻹماهة الفموية للعديد من التطبيقات. فترة الاستبقاء يمكن اختصارها لفحص الذاكرة على المدى القصير، أو إطالة مدة التحقيق في الذاكرة على المدى الطويل. يمكن استخدام التدخل الدوائي في أوقات مختلفة قبل التدريب وبعد التدريب، أو قبل استدعاء للتحقيق في مختلف مراحل التعلم (أي، اقتناء، توطيد المبكر أو المتأخر، أو الإشارة). عموما، العلاج باﻹماهة الفموية هو اختبار الإجهاد منخفضة نسبيا، وتتسم بالكفاءة للذاكرة في الفئران، وهو مناسبة للكشف عن التغيرات العصبية بعد المعالجات الدوائية أو البيولوجية أو الجينية.

Introduction

اختبار الاعتراف الكائن (ORT)، يعرف أيضا باسم الكائن رواية الاعتراف باختبار (NOR)، وسيلة سريعة وفعالة نسبيا لاختبار مختلف مراحل التعلم والذاكرة في الفئران. أنه كان وصف الناصر وديلاكور في عام 1988 وتستخدم أساسا في الفئران1؛ ومع ذلك، منذ ذلك الحين، لقد كان نجاح تطويعها للاستخدام في الفئران2،3،،من45،،من67. الاختبار يعتمد على عدد قليل من ثلاث دورات: الدورة التعود واحد ودورة تدريبية واحدة، ودورة اختبار واحد. ويتضمن التدريب ببساطة البصرية استكشاف اثنين من الكائنات المتطابقة، حين الدورة اختبار ينطوي على الاستعاضة عن أحد الكائنات التي بحثت سابقا مع كائن رواية. للقوارض تفضيل فطرية للجدة، القوارض أن يتذكر وجوه مألوفة سوف تنفق المزيد من الوقت في استكشاف8،،من7الكائن رواية9.

والميزة الرئيسية العلاج باﻹماهة الفموية على اختبارات الذاكرة القوارض الأخرى أنها تعتمد على نزعة طبيعية للقوارض لاستكشاف الجدة8. ولذلك، ليس هناك حاجة للعديد من الدورات التدريبية أو أي التعزيز الإيجابي أو السلبي لتحفيز السلوك. وهذا يعني أن العلاج باﻹماهة الفموية مرهقة أقل بكثير، بالنسبة إلى سائر الاختبارات10،11،،من1213،،من1415، ويتطلب إلى حد كبير اختبارات وقتاً أقل لتشغيل من أخرى يشيع استخدام الذاكرة، مثل المتاهة المائية موريس أو المتاهة بارنز، التي يمكن أن تصل إلى أسبوع أو أكثر. ونتيجة لذلك، شروط العلاج باﻹماهة الفموية أوثق تشبه تلك المستخدمة في دراسة الإدراك البشري، زيادة صلاحية الإيكولوجية للاختبار على مدى العديد من اختبارات الذاكرة القوارض الأخرى. وبالمثل، نظراً لأن العلاج باﻹماهة الفموية مهمة التذكير مرئي بسيط، أنه تم بنجاح تكييف للاستخدام في العديد من الأنواع، بما في ذلك البشر والرئيسيات غير البشرية، لتقييم الجوانب بين الأنواع المختلفة للذاكرة التصريحية 2،16 ،17. أخيرا، يمكن بسهولة تعديل العلاج باﻹماهة الفموية لدراسة مختلف مراحل التعلم والذاكرة (أي، واقتناء، وتوطيد أو نذكر)، لتقييم أنواع مختلفة من الذاكرة (مثلاً، الذاكرة المكانية)، أو لتقييم الأداء المختلفة الفواصل (أي، الذاكرة القصيرة الأجل على المدى الطويل مقابل ).

براعة العلاج باﻹماهة الفموية منبرا لتطبيقات البحوث التي لا حصر لها. ويمكن إجراء دراسات استخدام عوامل دوائية لعرقلة أو تعزيز الذاكرة. اختلاف وقت الدواء قبل أو بعد التدريب أو قبل الاختبار يمكن التلميح بالعصبية الكامنة وراء الآليات التي تؤدي إلى تعطل أو تعزيز الذاكرة6،،من1819، 20-على نحو مماثل، يمكن أن يكون أوبتوجينيتيك التكنولوجيا المستخدمة في هذه نفس النقاط الزمنية المختلفة لإلقاء نظرة على العصبية التنشيط/تثبيط يسهم مراحل مختلفة من التعلم والذاكرة. العلاج باﻹماهة الفموية أيضا مناسبة لتقييم الاختلافات في الحيوانات المحورة وراثيا، وفي دراسات الآفة، أو في نماذج الأعصاب أو في الشيخوخة الدراسات21،،من2223،24، 25 , 26 , 27 , 28-ويمكن تغيير الفترة الزمنية بين التدريب والاختبار، والمعروفة باسم فترة الاستبقاء، لتقييم أي من هذه التغييرات في الأجلين القصير والطويل الذاكرة26. وفي نهاية المطاف، العلاج باﻹماهة الفموية يمكن استخدامها كأداة لدراسة التغييرات الدوائي والوراثية والعصبية للتعلم والذاكرة، أو يمكن استخدام هذه الأدوات لدراسة الأساس للتعلم والذاكرة في العلاج باﻹماهة الفموية.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

جميع الإجراءات هنا قدمت إلى ووافقت عليها "العناية بالحيوان" واستخدام اللجنة وأجريت في اتباع المبادئ التوجيهية للمعاهد الوطنية للصحة-

1-تحديد الكائن والإعداد التجريبية

  1. تحديد الكائنات المختلفة ما يكفي للتمييز بسهولة بالفئران، ولكن لها نفس درجة التعقيد (الملمس، الشكل، الزخرفة اللون، والسطوع، و إلخ) بغية التقليل إلى أدنى حد من أي احتمال الناجمين عن تفضيل الكائن الذي قد تحيز النتائج (انظر 2010 الناصر لوصف شامل ل اختيار كائن 7)-
    1. الاختبار للتمييز والتفضيل الفطري (راجع الخطوات 2 & 3)-
    2. الكائنات استخدام الماوس الحجم أو أكبر قليلاً فقط لتشجيع الاستكشاف ( الشكل 1). للحد من تفضيل المستحث، التأكد من وجود الفئران قادرة على تسلق على الكائنات أو أي كائن، على الرغم من القدرة على تسلق على كائن قد يزيد الاهتمام بالاستكشاف (الوقت المستهلك يجلس فقط على كائن غير مقتطع الوقت استكشاف.)
      3. وقد
    3. على الأقل 2 نسخة من كل كائن. ومع ذلك، لتقليل احتمال رائحة العظة أثناء الاختبار، يكون مالا يقل عن 3 لكل كائن، التكرارات للتدريب والآخر لاختبار-
    4. استخدام كائنات مصنوعة من مواد غير كسر، كفقدان كائن الواجبة للتلف أثناء التجريب يمكن أن تتداخل مع استمرار التجارب، ويحتمل أن يسبب ضررا أو أذى للحيوان.
    5. دقة تنظيف الكائنات قبل وبين استخدام (الإيثانول المجلد/المجلد 70% من المناسب)-
  2. لتقليل إجهاد الإضاءة الساطعة، واستخدام الإضاءة منتشر، منخفضة، مع مركز المتاهة مضيئة حوالي 20 لوكس. استخدام درجة حرارة ورطوبة مماثلة لظروف السكن العادية. إذا كانت الفئران التي يتم نقلها من غرفة سكن إلى غرفة مختلفة للتجربة، تأقلم الفئران إلى غرفهم جديدة على الأقل 1 ساعة قبل الاستخدام كل يوم-
  3. الفئران المقبض جيدا قبل التدريب. نظراً لأن الاختبار يعتمد على الميل الطبيعي للقوارض لاستكشاف الجدة، تقليل أي الإجهاد أو القلق من المعالجة التي قد تتداخل مع الرغبة في استكشاف على الساحة، وبعد ذلك، الكائنات. ومن الناحية المثالية، التعامل مع الفئران 1-2 مرة/يوم على الأقل 1 دقيقة, 1 إلى 2 أسابيع قبل اختبار 15 ، 29-
  4. للساحة الرئيسية، استخدام دائرة مربعة (حوالي 40 سم × 40 سم × 40 سم) من الأبيض أو الأسود، غير المسامية من البلاستيك، ويتناقض إلى لون الماوس. بدلاً من ذلك، استخدم محرر ساحة جولة تحديداً، وعند استخدام الفئران حريصة أن يجوز الجلوس في زوايا ساحة مربعة، قد يكون من الأفضل لتشجيع السلوك الاستكشافي 18 ، 30 ساحة جولة.
    1. يوم التدريب، وضع الكائنات المتطابقة 2 على قطري (أي واحد في الزاوية NW وواحدة في الزاوية سراج الدين). إذا كانت الكائنات خفيفة جداً ويمكن نقلها عن طريق الماوس، ثبتت لهم للكلمة. قابل للإزالة تصاعد أعمال المعجون جيدا.
    2. لاختبار اليوم، استخدام نسخة 3 rd لكل كائن بمكان واحد مألوفة وكائن رواية واحدة على نفس قطري كتدريب اليوم ( الشكل 2).
    3. موازنة استخدام كل مجموعة من الكائنات حيث يستخدم كل كائن على قدم المساواة ككائن مألوفة ككائن جديد. كما أن موازنة موقع الكائن الرواية إلى كل من 4 أركان على الساحة. ومن المؤكد أن ملاحظة يستخدم فيها قطري للحيوان الذي بحيث قطري المستخدمة في التدريب اليوم هي نفسها التي استخدمت في اليوم اختبار لكل الماوس.
    4. دقة تنظيف الجهاز والكائنات لإزالة رائحة العظة قبل وبين استخدام (الإيثانول المجلد/المجلد 70% من المناسب)-
  5. مكان الكاميرا علوية مباشرة من أجهزة العرض الأمثل للاستكشاف. فقط استخدام البرمجيات مع الكشف عن نقاط الآنف لتحليل دقيق. إذا كان استخدام البرمجيات، التقاط صورة خلفية مع الكائنات في المكان قبل البدء. في البرنامج، تعيين منطقة الاستكشاف أن يكون حوالي 2-3 سم حول الكائن.
  6. للحد من تدخل المجرب وسجل المحاكمة ونقاط عليه في وقت لاحق. أعمى هداف الظروف التجريبية. إذا كان التسجيل يدوياً أثناء التجربة، ضمان أن المجرب أكثر من 1 متر من الساحة، وغير مرئية للماوس-
    ملاحظة: أي وقت الماوس تنفق يجلس على الكائن بدون بيبرس النشطة التي تجتاح أو استنشاق لا يعتبر الوقت الاستكشاف.
    7. استكشاف
  7. تعريف عندما الماوس ' الضوضاء s أشار نحو الكائن وحدود 2-3 سم من الكائن، مع بيبرس النشطة التي تجتاح أو استنشاق. لا تحسب أي وقت يجلس على الكائن بدون إشارة إلى الاستكشاف النشط.

2. تجارب رائدة اللازمة

    1. من الاختبار لتفضيل المستحث للتعود، إزالة الماوس من قفصة المنزل ووضعه في وسط الساحة مفتوحة. تسمح الماوس لاستكشاف بحرية للحد الأدنى 5
      2. ضع
    2. "في تدريب اليوم" (T1)، كائنات مختلفة 2 في الأرباع المعاكس الجهاز، (أي، شمال غرب وزوايا سراج الدين). إزالة الماوس من قفصة المنزل ووضعه في وسط الساحة مفتوحة. السماح بالتنقيب مجاناً للحد الأدنى 10
    3. حساب مؤشر التمييز. إذا لم يكن هناك أي تفضيل المستحث، يجب أن يكون الفهرس التمييز في أو بالقرب من الصفر. لا ينبغي أن تستخدم أي الكائنات التي تظهر تفضيل للعلاج باﻹماهة الفموية.
  2. اختبار لقدرة التمييز
    1. للتعود، إزالة الماوس من قفصة المنزل ووضعه في وسط الساحة مفتوحة. تسمح الماوس لاستكشاف بحرية للحد الأدنى 5
    2. "في الدورة التدريبية" (T1)، وضع الكائنات المتطابقة 2 في الأرباع المعاكس. ضع الماوس في وسط الساحة والسماح بالماوس لاستكشاف للحد الأدنى 10
    3. "في اختبار الدورة" (T2)، ضع واحدة من الكائن المستخدمة أثناء T1 والكائن رواية واحدة في الأرباع المعاكس (أي الأسلحة النووية وزوايا سراج الدين). ستين دقيقة بعد T1، ضع الماوس في وسط الساحة والسماح بالتنقيب مجاناً للحد الأدنى 10
    4. حساب مؤشر التمييز. على فترات استبقاء 60 دقيقة، يجب أن يكون الفهرس التمييز أعلاه 0.25.

3. الإجراء التجريبي

    1. من التعود إزالة الماوس من قفصة المنزل ووضعه في وسط الساحة مفتوحة وفارغة. تسمح مجاناً لاستكشاف الساحة لمدة 5 دقائق. مرة القفص منزل فارغ، حفظها من أجل استخدامها كقفص عقد في اليوم التالي-
    2. في نهاية مدة 5 دقائق، إزالة الماوس ووضعه في قفص القابضة. لا يعود الماوس إلى قفصة الأصلي، أو قد يؤثر هذا على سلوك الفئران المتبقية لفحصها.
    3. دقة تنظيف الجهاز بين الفئران باستخدام الإيثانول المجلد/المجلد 70%-
      ملاحظة: أثناء عملية تعود، السلوك مثل القلق ويمكن تقييم بحساب الوقت الذي يقضيه في المركز (انظر بروت & بيلزونج 2003 31). وهذا متري مفيدة عند النظر في طول الفترة الزمنية ل T1. ارتفاع القلق الفئران قد يحتاج إلى دورة 10 دقيقة للوصول إلى معيار الحد الأدنى من الاستكشاف.
  2. التدريب (T1)
    1. مكان اثنين من الكائنات المتطابقة في الأرباع المعاكس على الساحة (أي الزاوية شمال وغرب الزاوية).
    2. ح 24 بعد التعود، إزالة الماوس من قفصة المنزل ووضعه في وسط الساحة، مسافة واحدة من الكائنات المتطابقة 2-
    3. السماح بالتنقيب مجاناً للحد أدنى لمدة 5 دقائق. في حالة استخدام سلالة فئران التي تعرف بقلة النشاط الحركي أو الاستكشاف، (أي، معظم أجهزة الماوس لا تصل إلى حد أدنى من 20 s الاستكشاف لكلا الكائنين قبل 5 دقيقة، كما لوحظ في التجارب الرائدة أو الأدب)، تمديد المحاكمة إلى 10 دقيقة لكل هيئة التصنيع العسكري (ه) في الفوج.
    4. في نهاية المحاكمة، إزالة الماوس ووضعه في قفص القابضة. مرة القفص منزل فارغ، حفظه للاستخدام كالقفص إجراء التجارب اليوم.
    5. دقة تنظيف الجهاز وكائنات بين الفئران باستخدام الإيثانول المجلد/المجلد 70%-
  3. الاختبار (T2)
    1. مكان كائن واحد المستخدمة أثناء T1 (أي، الكائن مألوفة) والكائن رواية واحدة في الأرباع الآخر من الساحة. استخدام نفس المواقع المستخدمة أثناء T1 لكل الماوس.
      2. إزالة الماوس من قفصة منزل
    2. في T1 إلى T2 الفاصل الزمني لاختيار، ووضعه في مركز الساحة، مسافة واحدة من دراية ورواية كائن.
      ملاحظة: في فترات استبقاء من ح 24، معظم أجهزة الماوس لن تكون قادرة على التمييز بين الكائن على دراية ورواية (عادة-0.2 < d2 < 0.2، مقارنة بإيجابية التحكم 32). إذا كان اختبار لآثار nootropic، استخدم هذه النقطة الزمنية للتحقيق لتعزيز الذاكرة. للتحقيق للعجز في الذاكرة، استخدام فترة استبقاء أقصر من أي مكان بين 20 دقيقة إلى ح 4، اعتماداً على سلالة الماوس-
    3. السماح بالتنقيب مجاناً لمدة 10 دقائق. في نهاية المحاكمة، إزالة الماوس ووضعه في قفص القابضة.
  4. لكل من T1 و T2، نقاط في أول 5 دقائق. إذا كان الماوس لا تفي الوقت استكشاف الحد الأدنى من 20 ثانية لكلا الكائنين، مواصلة التهديف في الماضي 5 دقائق حتى استكشاف إجمالي يتجاوز 20 س.

4. تحليل بيانات

    1. من معايير الاستبعاد خلال التدريب (T1) واختبار (T2)، حساب الوقت الإجمالي الاستكشاف لكلا الكائنين لكل دورة (e1 و e2). ينبغي أن تصل إلى معظم أجهزة الماوس لاستكشاف الحد أدنى إجمالي لكل الكائنات من 20 ثانية بمقدار 5
    2. وقت تمديد T1 و T2 إلى 10 دقيقة لسلالات فئران التي استكشاف متدنية ولا تفي بهذا المعيار الأدنى خلال 5 دقائق، كما لوحظ أثناء الاختبار التجريبي-
    3. نقاط السلوك لمدة 5 دقائق أو بعد 5 دقائق حتى تصل إلى معيار الحد الأدنى 20 s-
    4. إذا الفئران لا تصل إلى حد أدنى 20 s من الاستكشاف لكلا الكائنين T1 أو T2 في 10 دقيقة، تستبعد من التحليل، كما أنه لا يمكن تأكيد أنها أنفقت استكشاف الوقت ما يكفي تعلم تميز-
  2. المطلقة مقابل "التحليل النسبي"
    ملاحظة: يمكن رؤية الصيغ المختلفة للتحليل وعلاقتها ببعضها البعض في الجدول 1. هاء-1
    1. حساب كوقت الاستكشاف التام أثناء التدريب 2 كائنات متماثلة، حيث a1 و a2 هي كائنات متطابقة.
      e1 = a1 + a2
      2. هاء-2
    2. حساب الوقت الاستكشاف التام أثناء اختبار للكائن الكائن المألوفة (أ) والرواية (ب)-
      e2 = + ب
    3. D1 حساب أنها مجرد الوقت الذي يقضيه استكشاف الرواية كائن ناقص الوقت أمضى استكشاف كائن مألوف. قياس التمييز المطلق (d1) لا يأخذ في الاعتبار الاختلافات في وقت استكشاف بين الفئران أو معاملة الجماعات، على الرغم من أن في ظروف معينة، قد يكون من تدبير أكثر حساسية 2-
      d1 = ب-أ
    4. حساب d2 كالوقت الذي يقضيه استكشاف رواية كائن ناقص الوقت أمضى استكشاف كائن مألوفة مقسوماً على مجموع استكشاف الوقت. التدبير الأكثر استخداماً هو قيمة تمييز نسبي غالباً ما يشار إلى مؤشر التمييز (d2)، الذي لا يتأثر بالخلافات في وقت الاستكشاف. وهذا يعني أن كافة القيم سوف تقع بين-1 و + 1.
      d2 d1/e2 =
      5. وبدلاً من ذلك، حساب
    5. على الاعتراف أو تفضيل مؤشر (d3) 3. هذا هو الوقت الذي يقضيه استكشاف كائن رواية مقسوماً على إجمالي الوقت. وهذا يعني سوف تسقط جميع القيم بين 0 و 1. كثيرا ما مضروبة في 100 واستخدامها كقيمة النسبة المئوية-
      d3 = ب/e2 * 100
  3. التحليل الإحصائي
    1. باستخدام قيم التمييز يعني لكل مجموعة وتحديد أداء الذاكرة باستخدام ANOVA أحادي الاتجاه. لمزيد من التحليل، إجراء مقارنات ذات اتجاهين وظيفة المخصص مع المعالجة مقابل حالة السيارة ومجموعات المراقبة الإيجابية/السلبية.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

إعداد تجريبية عامة للعلاج باﻹماهة الفموية يظهر في الشكل 2. يتم وضع الفئران (T0) يوم على التعود على الساحة فارغة لأدنى 5 أربع وعشرين ساعة في وقت لاحق، يتم وضعها مرة أخرى في الدائرة مع كائنات متماثلة 2 الفئران ويسمح باستكشاف بحرية لمدة تصل إلى 10 دقائق (T1). في اختبار اليوم (T2)، الفئران مرة أخرى وضعت في الساحة، ولكن مع واحدة مألوفة وكائن رواية واحدة، ويسمح باستكشاف لمدة تصل إلى 10 دقائق. فترة الاستبقاء، الوقت بين T1 و T2، يمكن أن تتغير، تبعاً للأهداف النهائية للتجربة. في بيانات تمثيلية، نظراً لأن من المتوقع مثبطات لتعزيز الذاكرة، اختبرت الفئران ح 24 بعد T1، وقتاً في المركبة التي ينبغي أن تظهر الفئران المعالجة أي تمييز.

أظهرت مثبطات 2 فوسفوديستريس لتعزيز التعلم والذاكرة في العلاج باﻹماهة الفموية. بالمقارنة مع المركبات، خليج إدارة مثبطات PDE2 60-7550 أو ND7001 تعزز إلى حد كبير الذاكرة بطريقة تعتمد على الجرعة، عند النظر إلى 30 دقيقة قبل التدريب (T1)6 (الأرقام 3a و 3 (ب)). عندما تدار في نقاط زمنية مختلفة بالنسبة للتدريب والاختبار، مثبط PDE2 خليج 60-7550 يعزز إلى حد كبير الذاكرة عندما تعطي 30 دقيقة قبل التدريب وبعد التدريب مباشرة، و 30 دقيقة قبل استدعاء (4b4a الأرقام و ). وهذا يوحي بأن تثبيط PDE2 يعزز الذاكرة أثناء اقتناء أو آليات الدمج المبكر وأثناء استدعاء6. وكانت الفئران المستخدمة في هذه التجربة تجربة الفئران الذكور السذاجة الممثل المدني الدولي، 6-8 أسابيع من العمر.

عند النظر في تصميم التجربة، وهناك عدد من العوامل التي يجب النظر فيها. سلالة الماوس يمكن أن تؤثر إلى حد كبير الوقت الاستكشاف وفترة الاستبقاء للتمييز الإيجابي الكائن. Sık وزملاؤه تحليل عدد من سلالات شائعة الاستخدام، بما في ذلك C57BL والسويسرية، بالب/ج والفئران 129/Sv30. أنها أظهرت أن هناك فارق كبير في مجموع الوقت الاستكشافية بين السلالات، مع السويسري وبالب/c أعلى الوقت الاستكشافية و C57BL و 129/sv مع أدنى وقت الاستكشافية. وهذا يؤثر على قيمة التمييز المطلق (d1). بالإضافة إلى ذلك، فترة الاستبقاء يظهر انخفاضا كبيرا مع مرور الوقت، مع الفئران 129/Sv وجود القيمة d2 أقل من أربع سلالات في ح 1 (الشكل 5). ويمكن لسلالة 129/Sv، بسبب المستوى المتدني للاستكشاف، وليس بالضرورة على عدم الاعتراف. تجدر الإشارة إلى أن في هذه الدراسة، استخدم الباحثون أقصر T1 و T2 (3 دقيقة كل محاكمة)، مما أسفر عن اثنين فقط من أربع سلالات التوصل إلى s 20 الحد الأدنى من الوقت لاستكشاف المقترح هنا. وكثيراً ما يعتبر هذا المعيار الأدنى الحد الأدنى من الوقت اللازم للتعلم واستكشاف الكائنات4. الدراسة المذكورة هنا يوضح أهمية وجود معيار الحد أدنى.

Figure 1
رقم 1: نموذج الكائنات للاستخدام في العلاج باﻹماهة الفموية. الكائنات المستخدمة في لويبتوو وآخرون بسيطة إلى حد ما، ولكن قد يميز بعض ميزات6. جميع البنود هي أكبر قليلاً من ماوس عادي ويمكن أن تكون ارتفعت بسهولة. سيظهر من اليسار إلى اليمين هي مكبرة تذوق بيرة رأسا وكتلة إنشاء لعبة مع الشريط للنسيج ووضع كيس من الثلج وكتلة إنشاء لعبة مع مرفق عين بارزة. كانت تمسك الكائنات للكلمة مع المعجون تصاعد القابلة للإزالة، حتى لا لنقل أو نصيحة أثناء الاستكشاف. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

Figure 2
رقم 2: الإعداد التجريبية للعلاج باﻹماهة الفموية. العلاج باﻹماهة الفموية يقام على مدى 3 أيام. اليوم الأول هو التعود (T0)، يسمح فيها بماوس استكشاف مجال مفتوح للتدريب (T1)، الحد الأدنى 5 2 يوم في التي وضعت الماوس يسمح لاستكشاف الساحة مع كائنات متماثلة 2 على طول قطري. اختبار (T2) تجري ح 24 بعد T1 (يمكن إجراء هذا الفاصل الزمني للاحتفاظ أقصر أو أطول، تبعاً للظروف التجريبية). ويسمح الفئران لاستكشاف على الساحة مع واحدة من الأشياء المألوفة وكائن رواية واحد، توضع على طول قطري. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

Figure 3
رقم 3: تعزيز الذاكرة في العلاج باﻹماهة الفموية تعتمد على الجرعة. () خليج 607550) و (ب) ND7001، عندما تعطي 30 دقيقة قبل التدريب، وتحسين الذاكرة بطريقة تعتمد جرعة عند النظر، كما يتضح من زيادة في مؤشر التمييز (d2). أشرطة تمثل وسائل ± S.E.M.؛ n = 10-18 كل مجموعة. p = 0.05، * ف < 0.05، * * ف < 0.01، * * * ف < 0.001 مقابل مركبة. تم نسخ هذا الرقم من لويبتوو et al., 20166 مع إذن نوع من العلم سبرينغر ووسائط الإعلام التجارية. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

Figure 4
الشكل 4: تثبيط PDE2 خلال اقتناء أو توطيد المبكر نذكر تعزز إلى حد كبير الذاكرة في العلاج باﻹماهة الفموية. () خليج 607550 (3 مغ/كغ) إلى حد كبير تحسين الذاكرة عند النظر إلى 30 دقيقة قبل التدريب (شراء). (ب) تعزيز خليج 607550 (3 مغ/كغ) تعطي فورا بعد التدريب (توطيد) أو 30 دقيقة قبل الاختبار (أذكر) إلى حد كبير من الذاكرة، كما يتضح من زيادة في مؤشر التمييز (d2). تمثل الأشرطة يعني ± S.E.M.؛ n = 10-18 كل مجموعة. * ف < 0.05، * * ف < 0.01، * * * ف < 0.001 مقابل مركبة. تم نسخ هذا الرقم من لويبتوو et al., 20166 مع إذن نوع من العلم سبرينغر ووسائط الإعلام التجارية. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

alt=
الرقم 5: سلالة تعتمد الفروق في الذاكرة عبر فترات الاستبقاء. أداء C57BL والسويسرية، بالب/ج والفئران 129/Sv على مؤشر التمييز النسبي (d2) في مهمة التعرف على كائن في تأخيرات مختلفة. جميع سلالات التمييز بين الكائنات في فترة 1-ح، ولكن ليس في الفاصل الزمني ح 4 و 24. وتمثل القيم يعني (±S.E.M.). المنطقة الواقعة بين الخطوط المنقطة تشير إلى S.E.M.-مجموعة المجموعة الافتراضية (يعني: 0, S.E.M.: 0.06). تم نسخ هذا الرقم من Şık et al. 200330 مع إذن نوع من السفير.

استكشاف التمييز
e1 = a1 + a2 d1 = ب-
هاء-2 = + ب d2 = d1/e2
d3 = ب/e2 * 100

الجدول 1: الصيغة لتحليل البيانات العلاج باﻹماهة الفموية. هاء-1 الوقت الاستكشاف التام أثناء التدريب. a1 و a2 هو الوقت في كل كائن متطابقة أثناء T1. هو e2 الاستكشاف مجموع الوقت أثناء الاختبار، حيث هو كائن مألوفة و ب هو موضوع الرواية.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

العلاج باﻹماهة الفموية طريقة فعالة ومرنة لدراسة التعلم والذاكرة في الفئران. عند إعداد تجربة، من المهم النظر في عدد من المتغيرات التي قد تؤثر على النتيجة. كما ورد في نتائج تمثيلية، سلالة الماوس سوف تؤثر على كل فاصل الوقت والاحتفاظ بالاستكشاف. انخفاض في وقت الاستكشاف قد تحرف أو قناع يؤدي تمييز مطلق تحليل2،،من35،30،32. قد يكون بعض سلالات فئران قيم التمييز أقل في فترات الاستبقاء أقصر، مثل ح 1 أو 4، التي يمكن أن تخفي النتائج إذا كانت تبحث عن ضعف الذاكرة. بدلاً من ذلك، قد يكون بعض سلالات قيم عالية التمييز في الاحتفاظ بفواصل زمنية أطول، مثل ح 24، الذي قد يخفي آثار ذاكرة تعزيز4،،من530. بالإضافة إلى الاختلافات السلالة، عوامل بيولوجية أخرى مهمة للنظر فيها، بما في ذلك العمر والجنس والحالات المرضية (راجع مراجع للمزيد من القراءة20،،من2122،23 ،24). ولذلك، يجب النظر بعناية في فترة الاستبقاء، وتحليلاً للوقت بالطبع ضروري المحتمل لتحديد الفاصل الزمني الأكثر ملاءمة. وأخيراً، من المهم أيضا بعناية تقييم الكائنات المستخدمة في التحليل7. وينبغي اختبار أولى لاستبعاد أي تفضيل الكائن وتستخدم دائماً في طريقة وازنت لتقليل أي تفضيل الكائن المستحث.

في حين العلاج باﻹماهة الفموية إلى حد ما بسيطة وسريعة لاستخدام، لها حدود. لأن هناك دورة تدريبية واحدة فقط، فإنه لا يمكن لتحليل الاختلافات المحتملة في معدل التعلم. ومع ذلك، نظراً للتدريب، وأذكر واحد فقط في كل دورة، أنها تسمح لدراسة المراحل الفردية للتعلم والذاكرة، مثل توحيد أو التذكير. بالإضافة إلى ذلك، مجموعة الأحجام اللازمة لتحقيق دلالة إحصائية مع السلطة المناسبة يميل إلى أن يكون إلى حد ما يجب استبعاد عالية (غالباً 15-20 الفئران/المجموعة)، وفي كثير من الأحيان، من الفئران 2 أو أكثر نظراً إلى الافتقار إلى استكشاف كافية خلال T1، T2، أو كليهما. ومع ذلك، الوقت اللازم لتنفيذ المقايسة قصيرة جداً بالمقارنة مع غيرها من اختبارات ذاكرة، مما يسمح لأعلى من الناتج الإجمالي. ومن حيث علم الأعصاب الذي يكمن وراء العلاج باﻹماهة الفموية، خلافا لبعض الاختبارات الأخرى من الذاكرة، والذي يمكن أن يعزى الواضح لمنطقة واحدة من المخ، يبدو العلاج باﻹماهة الفموية لجعل استخدام عدد قليل من مناطق الدماغ ونظم العصبي، بما في ذلك الحصين وبيريرهينال المناطق16،17،،من3334،35،36،37،،من3839. هذا يجعل من الصعب احتمال تفسير، من حيث علم الأعصاب الأساسية، ولكن كما يوفر منطقة غنية للبحث لزيادة فهم.

أثناء تشغيل العلاج باﻹماهة الفموية، قد تنشأ بعض القضايا، مثل الافتقار إلى استكشاف بين سلالات معينة أو مجموعات من الفئران، تفضيل كائن الفطري مما أدى إلى انحراف الأداء، أو عدم وجود تأثير بسبب نقطة في وقت الذي اخترته غير صحيح. ولذلك، من المهم جداً لتشغيل تجارب رائدة لتحديد وتصحيح أي إمكانات القضايا. بعض سلالات فئران بأعلى مستويات القلق، الذي يحتمل أن يؤثر النشاط الحركي و/أو الوقت استكشاف الفطرية. زيادة عدد حالات التعرض أو مدة التعرض إلى الساحة قبل التدريب قد يساعد في خفض القلق وتشجيع استكشاف30. لتعود فترة أطول، زيادة استكشاف لمرتين كل يوم لمدة 5 دقائق في كل مرة (فاصل ح 6) لمدة 3 أيام. إذا كانت الفئران لا تصل إلى معيار الحد الأدنى من 10 دقيقة، مرة أخرى، قد تكون الفئران حريصة، في أي عملية تعود حالة الوقت و/أو معالجة ينبغي زيادة لجميع الفئران. قد تكون أسباب أخرى للقلق من الضغوطات في غرفة السكن أو في الغرفة التجريبية التي ينبغي تناولها (الضوضاء والروائح الكريهة، ودرجة الحرارة، والإضاءة، إلخ.). إذا كان يتم استبعاد الإجهاد والقلق، الفئران ببساطة قد لا تكون مهتمة في الكائنات المختارة، التي ينبغي أن تستخدم حالة الكائنات الجديدة. عند تقييم ضعف الذاكرة، إذا كانت الفئران التحكم هي لا تميز بين الكائنات في الفاصل الزمني الذي اخترته، اختر فاصل زمني أقصر للاحتفاظ بها. عند تقييم تعزيز الذاكرة، إذا كانت الفئران التحكم هي التمييز بين الكائنات، اختر فاصل زمني أطول للاحتفاظ بها. في حالة استخدام عوامل دوائية مع أي تأثير، دورة وقت قد تستعمل لتحديد ما إذا كان فعالاً في مرحلة مختلفة من التعلم (مثلاً، اقتناء أو توطيد المبكر أو المتأخر أو التذكير).

أهمية تشغيل التجارب الرائدة لا على القول. التصميم التجريبي غير سليمة قد تؤدي إلى نتائج إيجابية كاذبة أو سلبية كاذبة. إذا كان لدى الفئران تفضيل مستحث لكائن معين، وهذا سيؤدي إلى الفئران أنفاق المزيد من الوقت في ذلك الكائن المفضل، تغيير النموذج ومنع التعبير عن التعلم أو الذاكرة تماما. بالإضافة إلى ذلك، بعض سلالات من الفئران أو الفئران مع بعض الطفرات الوراثية قد تضاءلت قدراته البصرية، التي يمكن أن تؤثر على القدرة على التمييز، مستقلة عن أي تغييرات المعرفي. ولذلك، ينبغي اختبار الفئران في المدى القصير وقت نقطة (أي، 1 ساعة أو أقل)، النقطة التي تسمح قدراتهم المعرفية التمييز.

تعديل مشترك واحد للعلاج باﻹماهة الفموية استخدام موقع رواية، بدلاً من كائن جديد. يسمح هذا التقييم للمزيد من الذاكرة تعتمد مكانياً. أثناء T2، بدلاً من استبدال كائن مألوفة مع كائن رواية، نقل أحد الكائنات المألوفة إلى موقع جديد داخل الساحة. وهذا يتطلب إضافة الرموز المكانية حول الساحة. وينبغي استخدام الأشكال البسيطة، كبيرة أو أنماط (مثلاً، ورقة 8 "x 12" بيضاء مع خطوط سميكة سوداء 4 "؛ ورقة 8" x 12 "بيضاء مع دائرة كبيرة، وأسود). إذا كان ذلك ممكناً، استخدم الستائر لتطويق المتاهة. ستائر تصغير غرفة خارجية من الإشارات التي يمكن تغيير طوال فترة التجربة، والسماح لموضع العظة المتاهة متسقة وقابلة للتكرار. الإعداد والتحليل المتبقية مماثلة. يمكن أن تبقى جميع المعادلات للتحليل نفسه، سوبينج في الوقت الذي يقضيه في الموقع رواية للوقت الذي يقضيه في رواية الكائن. شبيه العلاج باﻹماهة الفموية، زيادة في الوقت الذي يقضيه في الكائن في الموقع الجديد بالنسبة للكائن في نفس المكان مؤشر للذاكرة.

من المهم ملاحظة أن نظم البرمجيات المتاحة حاليا قد لا تكون مثالية للتهديف الاستكشاف. أولاً، أنها تتطلب الكشف عن 3 نقاط (الآنف والجسم، والذيل) من أجل التعرف بشكل صحيح عند الآنف بالقرب من الكائن، وليس كافة حزم برامج تأتي مع الكشف عن 3 نقاط. وثانيا، الفئرانأحياناً الجلوس في أو بالقرب من الكائن دون الاستكشاف النشط للكائن (كما لاحظت عدم وجود vibrissae تجتاح)، والبرنامج ليس قادراً على إجراء مثل هذا التمييز. ولذلك، يوصي بتسجيل الفيديو، ويكون لهم سجل جهة طريق مجرب أعمى في وقت لاحق.

التطبيقات المستقبلية العلاج باﻹماهة الفموية هي إلى حد ما بعيدة المدى. وهناك فرصة كبيرة لتشريح الشلالات الجزيئية و/أو العصبية الدوائر المعنية في مختلف مراحل التعلم والذاكرة (مثلاً، اقتناء، توطيد المبكرة والمتأخرة). يمكن أيضا استخدامه كشاشة للمخدرات نووتروبيك المحتملة، أو عند البحث عن علاجات لاضطرابات الأعصاب. كما قد يكون من المفيد في تحديد دور مختلف الطفرات الوراثية في التعلم والذاكرة. بسبب السهولة النسبية في الاستخدام، وعدم وجود ظروف ضاغطة للفئران، وطول المقايسة قصيرة إلى حد ما، يمكن أن يكون خطوة أولى قوية في تحديد التغيرات المعرفية أو أداة أساسية للتحليل. وعموما، تتعدد تطبيقاتها المحتملة.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

ليس له علاقة بالكشف عن صاحب البلاغ.

Acknowledgments

وأيد العمل المذكورة والمنشورة سابقا مقدم البلاغ منحة من "المعهد الوطني للصحة العقلية" (MH088480). المؤلف يود أن يشكر لها معلمة السابق، الدكتور جيمس أودونيل على دعمه في هذا المشروع. يتم دعم هذا المنشور بمنحه مقدمة من "المعهد الوطني للصحة" (T32 DA007135).

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Open Field Box Panlab/Harvard Apparatus LE800SC Available in grey, white, or black
ANY-maze Stoelting Co. 60000 Behavior tracking system
EthoVisionXT 12 Noldus Behavior tracking system; requires 3 point tracking
Video Camera Any Video camera should be mounted directly overhead of the apparatus
70% Ethanol  Fisher Scientific BP2818-4 Prior to starting testing and in between trials, each object should be carefully cleaned. The floor and walls of the apparatus should also be cleaned. 

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Ennaceur, A., Meliani, K. A new one-trial test for neurobiological studies of memory in rats III. Spatial vs. non-spatial working memory. Behav. Brain Res. 51 (1), 83-92 (1988).
  2. Akkerman, S., et al. Object recognition testing: methodological considerations on exploration and discrimination measures. Behav. Brain Res. 232 (2), 335-347 (2012).
  3. Antunes, M., Biala, G. The novel object recognition memory: neurobiology, test procedure, and its modifications. Cogn. Process. 13 (2), 93-110 (2012).
  4. Leger, M., et al. Object recognition test in mice. Nat. Protoc. 8 (12), 2531-2537 (2013).
  5. van Goethem, N. P., et al. Object recognition testing: Rodent species, strains, housing conditions, and estrous cycle. Behav. Brain Res. 232 (2), 323-334 (2012).
  6. Lueptow, L. M., Zhang, C. -G., O'Donnell, J. M. Cyclic GMP-mediated memory enhancement in the object recognition test by inhibitors of phosphodiesterase-2 in mice. Psychopharmacology (Berl). , (2015).
  7. Ennaceur, A. One-trial object recognition in rats and mice: Methodological and theoretical issues. Behav. Brain Res. 215 (2), 244-254 (2010).
  8. Berlyne, D. Novelty and curiosity as determinants of exploratory behavior. Br. J. Psychol. 41 (1-2), 68-80 (1950).
  9. Ennaceur, A., Delacour, J. A new one-trial test for neurobiological studies of memory in rats I. Behavioral-data. Behav. Brain Res. 31 (1), 47-59 (1988).
  10. Aguilar-Valles, A., et al. Analysis of the stress response in rats trained in the water-maze: differential expression of corticotropin-releasing hormone, CRH-R1, glucocorticoid receptors and brain-derived neurotrophic factor in limbic regions. Neuroendocrinology. 82 (5-6), 306-319 (2005).
  11. Anisman, H., Hayley, S., Kelly, O., Borowski, T., Merali, Z. Psychogenic, neurogenic, and systemic stressor effects on plasma corticosterone and behavior: Mouse strain-dependent outcomes. Behav. Neurosci. 115 (2), 443-454 (2001).
  12. Kim, J. J., Diamond, D. M. The stressed hippocampus, synaptic plasticity and lost memories. Nat. Rev. Neurosci. 3 (6), 453-462 (2002).
  13. Willner, P. Validity, reliability and utility of the chronic mild stress model of depression: a 10 year review and evaluation. Psychopharmacology (Berl). 134, 319-329 (1997).
  14. Leussis, M. P., Bolivar, V. J. Habituation in rodents: A review of behavior, neurobiology, and genetics. Neurosci. Biobehav. Rev. 30 (7), 1045-1064 (2006).
  15. Hurst, J. L., West, R. S. Taming anxiety in laboratory mice. Nat. Methods. 7 (10), 825-826 (2010).
  16. Dere, E., Huston, J. P., De Souza Silva, M. A. The pharmacology, neuroanatomy and neurogenetics of one-trial object recognition in rodents. Neurosci. Biobehav. Rev. 31, 673-704 (2007).
  17. Winters, B. D., Saksida, L. M., Bussey, T. J. Object recognition memory: Neurobiological mechanisms of encoding, consolidation and retrieval. Neurosci. Biobehav. Rev. 32, 1055-1070 (2008).
  18. Rutten, K., et al. Time-dependent involvement of cAMP and cGMP in consolidation of object memory: studies using selective phosphodiesterase type 2, 4 and 5 inhibitors. Eur. J. Pharmacol. 558 (1-3), 107-112 (2007).
  19. Prickaerts, J., De Vente, J., Honig, W., Steinbusch, H. W. M., Blokland, A. cGMP, but not cAMP, in rat hippocampus is involved in early stages of object memory consolidation. Eur. J. Pharmacol. 436 (1-2), 83-87 (2002).
  20. Bertaina-Anglade, V., Enjuanes, E., Morillon, D., Drieu la Rochelle, C. The object recognition task in rats and mice: A simple and rapid model in safety pharmacology to detect amnesic properties of a new chemical entity. J. Pharmacol. Toxicol. Methods. 54 (2), 99-105 (2006).
  21. Li, S., Wang, C., Wang, W., Dong, H., Hou, P., Tang, Y. Chronic mild stress impairs cognition in mice: From brain homeostasis to behavior. Life Sci. 82 (17), 934-942 (2008).
  22. Frick, K. M., Gresack, J. E. Sex Differences in the Behavioral Response to Spatial and Object Novelty in Adult C57BL/6 Mice. Behav. Neurosci. 117 (6), 1283-1291 (2003).
  23. Grayson, B., Leger, M., Piercy, C., Adamson, L., Harte, M., Neill, J. C. Assessment of disease-related cognitive impairments using the novel object recognition (NOR) task in rodents. Behav. Brain Res. 285, 176-193 (2015).
  24. Tuscher, J. J., Fortress, A. M., Kim, J., Frick, K. M. Regulation of object recognition and object placement by ovarian sex steroid hormones. Behav. Brain Res. 285, 140-157 (2015).
  25. Balderas, I., Moreno-Castilla, P., Bermudez-Rattoni, F. Dopamine D1 receptor activity modulates object recognition memory consolidation in the perirhinal cortex but not in the hippocampus. Hippocampus. 23 (10), 873-878 (2013).
  26. Akkerman, S., Blokland, A., Prickaerts, J. Mind the gap: delayed manifestation of long-term object memory improvement by phosphodiesterase inhibitors. Neurobiol. Learn. Mem. 109, 139-143 (2014).
  27. Domek-Łopacińska, K., Strosznajder, J. B. The effect of selective inhibition of cyclic GMP hydrolyzing phosphodiesterases 2 and 5 on learning and memory processes and nitric oxide synthase activity in brain during aging. Brain Res. 1216, 68-77 (2008).
  28. Reneerkens, O., et al. Inhibition of phoshodiesterase type 2 or type 10 reverses object memory deficits induced by scopolamine or MK-801. Behav. Brain Res. 236 (1), 16-22 (2013).
  29. Deacon, R. M. J. Housing, husbandry and handling of rodents for behavioral experiments. Nat. Protoc. 1 (2), 936-946 (2006).
  30. Şık, A., van Nieuwehuyzen, P., Prickaerts, J., Blokland, A. Performance of different mouse strains in an object recognition task. Behav. Brain Res. 147 (1-2), 49-54 (2003).
  31. Prut, L., Belzung, C., Rabelias, U. F., Psychobiologie, E. The open field as a paradigm to measure the effects of drugs on anxiety-like behaviors a review. Eur. J. Pharmacol. 463, 3-33 (2003).
  32. Akkerman, S., Prickaerts, J., Steinbusch, H. W. M., Blokland, A. Object recognition testing: statistical considerations. Behav. Brain Res. 232 (2), 317-322 (2012).
  33. Balderas, I., Rodriguez-Ortiz, C. J., Bermudez-Rattoni, F. Retrieval and reconsolidation of object recognition memory are independent processes in the perirhinal cortex. Neuroscience. 253, 398-405 (2013).
  34. de curtis, M., Pare, D. The rhinal cortices: a wall of inhibition between the neocortex and the hippocampus. Prog. Neurobiol. 74 (2), 101-110 (2004).
  35. Brown, M. W., Barker, G. R. I., Aggleton, J. P., Warburton, E. C. What pharmacological interventions indicate concerning the role of the perirhinal cortex in recognition memory. Neuropsychologia. 50 (13), 3122-3140 (2012).
  36. Moore, S. J., Deshpande, K., Stinnett, G. S., Seasholtz, A. F., Murphy, G. G. Conversion of short-term to long-term memory in the novel object recognition paradigm. Neurobiol. Learn. Mem. 105, 174-185 (2013).
  37. Suzuki, W. A. The anatomy, physiology and functions of the perirhinal cortex. Curr. Opin. Neurobiol. 6, 179-186 (1996).
  38. Wan, H., Aggleton, J. P., Brown, M. W. Different contributions of the hippocampus and perirhinal cortex to recognition memory. J. Neurosci. 19 (3), 1142-1148 (1999).
  39. Warburton, E. C., Brown, M. W. Findings from animals concerning when interactions between perirhinal cortex, hippocampus and medial prefrontal cortex are necessary for recognition memory. Neuropsychologia. 48 (8), 2262-2272 (2010).

Tags

السلوك، 126 مسألة، السلوك، اختبار التعرف على الكائن، الاعتراف برواية كائن، اختبار موقع الكائن، الإدراك، التعلم والذاكرة، والعلاج من تعاطي المخدرات، الفئران المعدلة وراثيا
اختبار كائن رواية الاعتراف للتحقيق في التعلم والذاكرة في الفئران
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Lueptow, L. M. Novel Object… More

Lueptow, L. M. Novel Object Recognition Test for the Investigation of Learning and Memory in Mice. J. Vis. Exp. (126), e55718, doi:10.3791/55718 (2017).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter