Summary
इस कागज का वर्णन कैसे चूहों में कार्डियोपल्मोनरी बाईपास प्रदर्शन करने के लिए । इस उपन्यास मॉडल को अंग क्षति में शामिल आणविक तंत्र की जांच की सुविधा मिलेगी ।
Abstract
लंबे समय तक कार्डियोपल्मोनरी बाईपास के रूप में हृदय के हस्तक्षेप के दौरान और अधिक आवश्यक हो जाता है, एक बढ़ती नैदानिक मांग प्रक्रिया अनुकूलन के लिए उठता है और लंबे समय तक extracorporal संचलन से उत्पन्न अंग नुकसान को कम करने के लिए. इस पत्र के लक्ष्य के लिए एक माउस में कार्डियोपल्मोनरी बाईपास के एक पूरी तरह कार्यात्मक और नैदानिक प्रासंगिक मॉडल का प्रदर्शन किया गया । हम डिवाइस डिजाइन, छिड़काव सर्किट अनुकूलन, और microsurgical तकनीकों पर रिपोर्ट । यह मॉडल एक तीव्र मॉडल है, जो कई रक्त चित्र की आवश्यकता के कारण अस्तित्व के साथ संगत नहीं है । क्योंकि चूहों के लिए उपलब्ध उपकरणों की सीमा के (उदा, मार्करों, नॉकआउट, आदि), इस मॉडल अंग क्षति के आणविक तंत्र में जांच की सुविधा और अन्य के संबंध में कार्डियोपल्मोनरी बाईपास का प्रभाव होगा comorbidities.
Introduction
क्लिनिक में कार्डियोपल्मोनरी बाईपास (CPB) की शुरूआत के बाद से, यह हृदय शल्य चिकित्सा में एक आवश्यक भूमिका निभाई है1। आधुनिक कार्डियक सर्जरी में, लंबे समय तक CPB व्यापक महाधमनी पुनर्निर्माण और संयुक्त प्रक्रियाओं प्रदर्शन करने के लिए आवश्यक है । हालांकि तकनीकी प्रगति जबरदस्त है, extracorporal संचलन का उपयोग अंतर और पश्चात प्रणालीगत और स्थानीय अंग क्षति के साथ जुड़ा हुआ है2,3।
बड़े पशु मॉडल शारीरिक प्रक्रियाओं4,5पर CPB की भूमिका की जांच करने के लिए विकसित किया गया है । हालांकि इन मॉडलों CPB जुड़े जटिलताओं में से कुछ में अंतर्दृष्टि प्रदान की है, वे बहुत ही महंगा है और आणविक उपकरण (जैसे, एंटीबॉडी) बहुत सीमित हैं । एक अधिक लागत कुशल विकल्प छोटे जानवरों में विकसित किया गया है । उनके विकास के बाद से, कई अध्ययनों चूहों और खरगोशों में एक CPB मॉडल का अनुकूलन करने के लिए आयोजित किया गया है5,6,7,8,9. इन मॉडलों pathophysiological रोग प्रक्रियाओं की माप के लिए एक अच्छा आधार प्रदान; तथापि, वे अभी भी सेलुलर और विनोदी इम्यूनोलॉजी प्रासंगिक एंटीबॉडी और रिएजेंट की कमी के कारण की जांच करने के लिए अपर्याप्त हैं । इससे शोध के इस क्षेत्र में उनकी भूमिका बिगड़ती है ।
हमने हाल ही में CPB का एक माउस मॉडल विकसित किया है । कारण माउस की एक विस्तृत विविधता-विशिष्ट रिएजेंट और आनुवंशिक रूप से संशोधित चूहों, माउस मॉडल सामांय में शारीरिक, आणविक, और प्रतिरक्षा अनुसंधान के लिए पसंद के मॉडल है10,11। इसलिए, हमारे मॉडल विभिन्न comorbidities के संबंध में CPB के अध्ययन की सुविधा के रूप में वहाँ नैदानिक प्रासंगिक रोगों के साथ कई चूहों उपभेदों उपलब्ध हैं12,13. तदनुसार, इस पत्र में वर्णन, विस्तार से, कैसे चूहों में CPB प्रदर्शन करने के लिए । ऑक्सीजन और hemodynamic मापदंडों गहरी श्वसन और संचार की गिरफ्तारी के बाद बारीकी से निगरानी कर रहे हैं ।
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Protocol
- प्लेस 50-60 8-सेमी लंबी एक ट्यूब में समानांतर में propylene खोखले फाइबर और दोनों पक्षों पर एक टी अनुकूलक के साथ कनेक्ट । खोखले फाइबर और टी अनुकूलक के बाहरी शाखा के बीच अंतरिक्ष गोंद के साथ भरें ।
- गोंद के लिए सख्त करने के लिए ंयूनतम 24 एच अनुमति देते हैं । खोखले टी अनुकूलक से बाहर का विस्तार एक मानक microtome का उपयोग और कनेक्शन साइटों पर सिलिकॉन ट्यूब खींचने के लिए ।
- एक 27 जी धातु सुई डालें (एक 26G branule से) & #160 में एक 2 Fr टुकड़े प्रवेशनी. एक खुर्दबीन (8-12X आवर्धन) के तहत एक शल्य ब्लेड और सूक्ष्म कैंची का प्रयोग करें प्रवेशनी के बाहर तीसरे के भीतर प्रत्येक के बारे में तीन से चार fenestrations बनाने के लिए इष्टतम शिरापरक वापसी प्रवाह को आश्वस्त ।
- जब पूरा हो जाए तो तार हटा दें । कुंद विच्छेदन और संरचनाओं के reकर्षण के लिए कपास झाड़ू का प्रयोग करें । उपयोग धुंध झाड़ू (5 x 5 सेमी 2 ) ऊतक निर्जलीकरण को रोकने के लिए अतिरिक्त तरल पदार्थ सोख करने के लिए ।
- भड़काने की मात्रा तैयार करें । पूरा करने के लिए, हेपरिन के 30 IU प्रति मिलीलीटर भड़काना समाधान और २.५% v/v के एक ८.४% समाधान के लिए NaHCO 3 के बफ़रिंग के लिए जोड़ें । इस समाधान को 4 & #176 पर संग्रहीत करना; C जब तक उपयोग किया गया.
- भरें CPB सर्किट (यानी , पम्प, हवा बिछाकर, टयूबिंग और दोनों cannulas) के साथ ८५० & #181; L भड़काना समाधान via शिरापरक प्रवेशनी. एक बार भर, जब तक पशु cannulation के लिए तैयार है CPB घूम रखो ।
- संज्ञाहरण प्रशासन के लिए, २.५% v/वी isoflurane/ऑक्सीजन मिश्रण के तहत एक प्रेरण कक्ष में पशु जगह है । पैडल वापसी पलटा, पूंछ चुटकी पलटा, और आँख पलक पलटा का आकलन करके उचित संज्ञाहरण की पुष्टि करें । नेत्र सूखापन से बचने के लिए पशु चिकित्सा नेत्र मरहम लागू करें ।
- जगह तापमान विनियमन समारोह के साथ एक वार्मिंग पैड पर पशु । एक जांच के साथ शरीर के तापमान को मापने के मलाशय डाला और डेटा अधिग्रहण प्रणाली से जुड़े ।
- पूर्ण संज्ञाहरण के बाद प्राप्त की है, intubate पशु orotracheally एक 20G प्लास्टिक braunule का उपयोग कर, यह मौखिक रूप से डालने और यह दृश्य नियंत्रण में श्वासनली में धकेलने । एक माउस वेंटीलेटर से जुड़े एक isoflurane vaporizer का उपयोग यांत्रिक वेंटिलेशन शुरू. पशु वजन के आधार पर, वेंटिलेशन को समायोजित करें ताकि २५०-३५० & #181; L की एक ज्वार की मात्रा हासिल की है ।
- को पूरा analgesia, इंजेक्षन करने के लिए 5 मिलीग्राम/किलो पशु bodyweight carprofen चमड़े के नीचे । यह अनुशंसा की जाती है कि isoflurane एकाग्रता १.३-२.५% ऑक्सीजन में के बीच रखा जाए । Isoflurane एकाग्रता मैंयुअल रूप से प्रक्रिया के मंच के आधार पर समायोजित किया जा सकता है ।
- पूर्ण संज्ञाहरण और इंटुबैषेण के बाद हासिल की है, तेज ठीक कैंची, एक कुंद फैशन में अलग मांसपेशियों के साथ गर्दन को एक midline त्वचा चीरा प्रदर्शन, और सही jugular नस और छोड़ दिया मन्या धमनी का पर्दाफाश. तैयारी के दौरान, coagulate छोटे एक पशु चिकित्सा coagulator द्विध्रुवी संदंश से जुड़े का उपयोग करने के लिए ंयूनतम रक्त की कमी सुनिश्चित जहाजों ।
- jugular वाहिकाओं की तैयारी के बाद, कपाल ligate के बाहर खंड छोड़ आम मन्या धमनी के अपने विभाजन 8-0 रेशम टांके का उपयोग करने के लिए.
- एक सिलिकॉन कनेक्टर का उपयोग कर धमनी बहिर्वाह टयूबिंग के लिए एक 27 जी प्रवेशनी के बाहर का अंत कनेक्ट (०.५ mm आईडी, 1 मिमी आयुध डिपो), जगह 8-0 रेशम टांका धमनी के समीपस्थ खंड में समुद्री मील, और प्रवेशनी की नोक मन्या धमनी में डालें । प्रवेशनी टिप के सही स्थान के बाद
- , प्रवेशनी टिप अग्रिम इतना है कि यह महाधमनी आर्क को समीपस्थ 3-4 mm देता है । 8-0 सिल्क समुद्री मील के साथ सुरक्षित द्वारा प्रवेशनी टिप ठीक करें ।
- microsurgical संदंश और कैंची का उपयोग कर, कुंद और तेज विच्छेदन प्रदर्शन, ऊतक की तैयारी बाद में sternocleidomastoid मांसपेशी को कुंद द्वारा सही jugular नस बेनकाब, हंसली के करीब है, और बाहर के अंत में एक 8-0 रेशम गाँठ जगह और एक 8-0 समीपस्थ अंत में पाश.
- jugular नस के बाहर के छोर के बंधाव के बाद, सही jugular नस और सही atrium और सुरक्षित सिल्क गाँठ का उपयोग करने की दिशा में शिरापरक प्रवेशनी की नोक जगह है । इष्टतम शिरापरक वापसी के लिए, यह सही निलय में शिरापरक टिप अग्रिम आवश्यक हो सकता है ।
- एक बार सही प्रवेशनी स्थिति हासिल की है, हेपरिन नस में सीधे नसों में इंजेक्शन के माध्यम से पशु bodyweight के प्रति ग्राम jugular के २.५ IU जोड़कर प्रणालीगत heparinization बाहर ले ।
- वास्तविक समय इनवेसिव दबाव की निगरानी के लिए, बाईं ऊरु धमनी cannulate । कमर क्षेत्र बेनकाब और धीरे 25X आवर्धन के तहत ऊरु नस और ऊरु तंत्रिका से आम ऊरु धमनी अलग ।
- Ligate ऊरु धमनी के बाहर का हिस्सा है । अस्थायी रूप से एक स्लिप-गाँठ के साथ समीपस्थ भाग करना और पूर्वकाल दीवार पर एक छोटा सा चीरा का उपयोग कर माइक्रो-संदंश.
- बाद में, डालें एक 1 Fr प्रवेशनी ऊरु धमनी में और यह एक रेशम 10-0 टांका के साथ सुरक्षित । इस प्रवेशनी रक्त गैस विश्लेषण के लिए रक्त के नमूनों को निकालने के लिए प्रयोग किया जाता है ।
- धमनी और शिरापरक cannulas के सफल स्थान के बाद, पंप पर मोड़ द्वारा कार्डियोपल्मोनरी बाईपास शुरू । CPB के शुरू करने के लिए इंटुबैषेण से समय लगभग ४५ मिनट की एक प्रवाह की दर का उपयोग शुरू ०.५ मिलीलीटर/मिनट, प्रणालीगत दबाव माप पर निर्भर करता है, और 2 मिनट के भीतर रक्त के प्रवाह में वृद्धि करने के लिए पूर्ण प्रवाह (4-6 मिलीलीटर/
- पूर्ण निगरानी के तहत, तीव्र कैंची manubrium से शुरू करने और caudal दिशा में 5 मिमी जा रहा का उपयोग कर एक ऊपरी sternotomy प्रदर्शन करते हैं । रक्तस्राव से बचने के लिए तुरंत स्टर्नल किनारों को Coagulate । सही मन्या धमनी को कपाल दिशा में खींच कर महाधमनी चाप बेनकाब. इष्टतम नियंत्रण के लिए
- , circumferentially थाइमस और आसपास के ऊतकों से महाधमनी चाप मुक्त करने के लिए clamping की सुविधा । आरोही महाधमनी के चारों ओर एक 8-0 सिल्क लूप रखें । cardioplegia के लिए क्रॉस दबाना जगह करने के लिए, बेहतर आरोही महाधमनी बेनकाब करने के लिए कपाल दिशा में सिल्क लूप खींचो ।
- के लिए रक्त गैस विश्लेषण (BGA), का उपयोग करें ग्लास केशिका ट्यूबों ६०-९० & #181 इकट्ठा करने के लिए, ऊरु धमनी कैथेटर के माध्यम से एल धमनी रक्त.
- सिलिकॉन टयूबिंग पर एक छोटे से दबाना का उपयोग करें और कैथेटर से टयूबिंग अलग । जारी दबाव धीरे दबाना पर केशिका ट्यूब का नियंत्रण भरने की अनुमति देने के लिए ।
- कैथेटर के लिए सिलिकॉन ट्यूब फिर से अनुलग्न करें । निम्न समय बिंदुओं पर माप के लिए रक्त गैस विश्लेषक में केशिका ट्यूबों डालें:
सेकम (BGA1) के साथ CPB की दीक्षा के बाद 10 मिनट
CPB के 25 मिनट के बाद और श्वसन की गिरफ्तारी के 15 मिन (BGA2)
के बाद CPB के ४० मिनट और श्वसन की गिरफ्तारी के 30 मिनट के बाद BGA3 (
) CPB के ५५ मिनट के बाद, श्वसन के ४५ मिन, और कार्डियक गिरफ्तारी के 20 मिनट (BGA4)
- के तहत स्थिर CPB प्रवाह, initia ते श्वास रोक वेंटिलेशन.
- वेंटिलेशन की समाप्ति के बाद, वार्मिंग पैड सेट करने के लिए 28 & #186; ग और & #160; विषय को शुरू करने के लिए पशु ठंडा 28 & #186; सी सांस की गिरफ्तारी के पहले 20 मिनट के भीतर शरीर का तापमान ठंड खारा में लथपथ धुंध का उपयोग कर ।
- एक बार शरीर का तापमान 28 & #186; सी हासिल की है, और सांस की गिरफ्तारी के 30 मिनट के एक कुल के बाद, CPB सर्किट में ७.४५% KCl समाधान के ०.३ मिलीलीटर cardioplegia. आरंभ करने के लिए प्रशासन महाधमनी के पार clamping के लिए
- , बेहतर प्रदर्शन के लिए कपाल दिशा में पहले से रखा रेशम पाश (कदम ३.१०) खींचो और महाधमनी के आरोही भाग पर एक माइक्रो serrefine दबाना जगह है ।
- ६० मिनट श्वसन गिरफ्तारी और कार्डियक गिरफ्तारी के 30 मिनट की कुल प्रदर्शन । हृदय की reperfusion आरंभ करने के लिए आरोही महाधमनी से माइक्रो-serrefine दबाना निकालें । इसके साथ-साथ, पुनः हवादार और गरम पशु को ३७ & #176; C.
- के बाद reperfusion पूरा हो गया है और पशु normothermia पहुंच गया है, बंद पंप मोड़ द्वारा CPB को समाप्त करने और शारीरिक माप ( जैसे शरीर का तापमान, ईसीजी, और इनवेसिव रक्तचाप) की निगरानी के लिए जारी 20 मिनट के लिए. प्रयोग के अंत में
- , पूर्ण संज्ञाहरण के तहत पशु exsanguinate (5% isoflurane) और आगे विश्लेषण के लिए रक्त और अंगों को इकट्ठा < सुप वर्ग = "xref" > १४ .
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Representative Results
इस प्रोटोकॉल छिड़काव सर्किट, शल्य चिकित्सा प्रक्रियाओं, और एक माउस के CPB के दौरान शारीरिक मापदंडों की निगरानी का वर्णन है । जब एक पर्याप्त रूप से कुशल microsurgeon द्वारा प्रदर्शन किया, परिणाम लगातार और reproducibly प्राप्त कर रहे हैं ।
पर्याप्त ऊतक छिड़काव बनाए रखने के लिए, मतलब धमनी दबाव हमेशा ४० और ६० mmHg के बीच CPB रक्त प्रवाह को समायोजित करने और अतिरिक्त मात्रा के जोड़ने के द्वारा रखा जाता है । पशु के वजन पर निर्भर करता है, इसकी मात्रा की स्थिति, और शरीर का तापमान, extracorporal रक्त प्रवाह के बीच २.३-६.५ मिलीलीटर बनाए रखा है/प्रयोग के दौरान मात्रा घटाने के सुधार सर्किट के लिए भड़काना समाधान के ०.१ मिलीलीटर के जोड़कर हासिल की है दौरान CPB. प्रणालीगत पीएच स्थिरीकरण ८.४ mmol/L के NaHCO2को जोड़कर प्राप्त किया जाता है । वायु embolization के जोखिम को कम करने के लिए सभी तरल पदार्थ हवा फँसाने जलाशय के माध्यम से प्रशासित रहे हैं ।
शारीरिक मापदंडों चार अलग समय अंक (चित्रा 1) और एक प्रतिनिधि सफल CPB प्रक्रिया से माप में BGA का उपयोग कर मूल्यांकन किया गया तालिका 1में प्रस्तुत कर रहे हैं ।
हेमाटोक्रिट माप सर्किट (तालिका 1) को भड़काना मात्रा के अलावा के कारण hemodilution दिखा. वहां था, तथापि, हीमोग्लोबिन के स्तर के रूप में रक्त आधान के लिए कोई ज़रूरत नहीं प्रयोग के दौरान (तालिका 1) के दौरान पर्याप्त स्तर पर बनाए रखा गया था. प्रणालीगत धमनी पीओ2, ऑक्सीजन संतृप्ति, पीसीओ2 समाप्ति मान सूक्ष्म oxygenator (तालिका 1) के उत्कृष्ट कार्य मान्य । पीसीओ2 निश्वासन फियो2 ०.८ पर एक ऑक्सीजन/हवा के मिश्रण का उपयोग इष्टतम था ।
BGA भी CPB के दौरान पशु की चयापचय स्थिति में अंतर्दृष्टि प्रदान की है । वेंटिलेशन के साथ CPB की दीक्षा के बाद, धमनी पीएच ऊंचा था (तालिका 1). इस आशय अक्सर कम है एक बार श्वसन गिरफ्तारी शुरू की है । प्रयोग के दौरान पीएच में क्रमिक कमी को देखा गया (तालिका 1) । धमनी पीएच और स्तनपान कराने के निरंतर buffering के लिए आवश्यक था की भरपाई दाखवते ।
चित्र 1 : प्रायोगिक समयरेखा. इंटुबैषेण, वेंटिलेशन, श्वसन गिरफ्तारी, CPB, कार्डियक गिरफ्तारी, reperfusion, शीतलक/री-वार्मिंग, और BGA नमूना अंक के समय । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।
| BGA1 | BGA2 | BGA3 | BGA4 | |
| हीमोग्लोबिन (g/dl) | ८.९ | ६.८ | ६.८ | ५.६ |
| हेमाटोक्रिट | २७.५ | २१.२ | २१.३ | १७.७ |
| pO2 (mmHg) | ५०८ | ५०६ | ५०४ | २७१ |
| pCO2 (mmHg) | २४.५ | २०.३ | 20 | ३६.४ |
| sO2 (%) | १०० | १०० | १०० | १०० |
| पीएच | ७.५६ | ७.६५ | ७.३६ | ७.३२ |
| स्तनपान कराने वाली (mmol/ | २.६ | ३.१ | 3 | ६.९ |
तालिका 1: प्रतिनिधि BGA एक माउस में एक सफल CPB से परिणाम. एक प्रयोग के पाठ्यक्रम पर चार अलग समय अंक पर लिया BGA ।
चित्र 2 : माउस में CPB सर्किट के योजनाबद्ध आरेख. एक शिरापरक प्रवेशनी (नीला) सही jugular नस और बाईं मन्या धमनी के माध्यम से प्रवेशनी में एक धमनी महाधमनी (लाल) के माध्यम से अवर वेना कावा में रखा गया है. Oxygenated रक्त हवा के माध्यम से पंप है-छोड़ मन्या धमनी में जलाशय बिछाकर । ईसीजी इलेक्ट्रोड चमड़े के नीचे रखा जाता है, शरीर का तापमान गुदा मापा जाता है, और दबाव ऊरु धमनी के माध्यम से निगरानी की जाती है । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।
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Discussion
हम एक माउस में CPB के एक पूरी तरह से कार्य नैदानिक-प्रासंगिक मॉडल विकसित किया है । हृदय रोग होने चूहों के तीस से अधिक उपभेदों के साथ, हमारे मॉडल CPB से संबंधित नए संभावित प्रोटोकॉल के विकास के लिए एक प्रारंभिक बिंदु हो सकता है. इसके अलावा, माउस की बहुतायत के कारण विशिष्ट रिएजेंट और नॉकआउट-बाहर चूहों, इस मॉडल केवल CPB के मौजूदा चूहे मॉडल की जगह नहीं कर सकते हैं, लेकिन आणविक CPB में शामिल तंत्र के विच्छेदन से संबंधित अंग क्षति की सुविधा होगी । तारीख करने के लिए, CPB cannulation तकनीक में microsurgical चुनौतियों के कारण चूहों में लागू नहीं किया गया है, के रूप में अच्छी तरह के रूप में एक सूक्ष्म oxygenator एक पर्याप्त छोटी भड़काना मात्रा होने के विकास सहित तकनीकी चुनौतियों । लगभग ९० ट्रेल्स और एक अनुभवी microsurgeon के मेहनती काम के लिए एक स्थिर मॉडल को प्राप्त करने की जरूरत थी । CPB मशीन के 15 प्रोटोटाइप पर अलग रोलर पंप, टयूबिंग, और विविध जलाशयों का परीक्षण किया गया और लगातार सुधार हुआ । वर्तमान परिणामों को प्राप्त करने के लिए विभिन्न oxygenators के 10 से अधिक संस्करणों का निर्माण और परीक्षण किया गया । हमारे उपंयास मॉडल extracorporal संचलन के मौजूदा चूहे मॉडल सेटअप का एक पूरा नया स्वरूप की आवश्यकता है । सबसे पहले, हम छोटी संभव माइक्रो-oxygenator का निर्माण करने की अनुमति भड़काना संस्करणों & #60; ०.३ मिलीलीटर । oxygenator एक औंधा प्रणाली का उपयोग कर बदल दिया गया था, जहां रक्त खोखले फाइबर के माध्यम से बहती है और नहीं उन दोनों के बीच, भड़काना मात्रा में एक महत्वपूर्ण कमी के लिए अनुमति दी ।
हमारे मॉडल के विकास के दौरान हम कई तकनीकी कठिनाइयों का सामना करना पड़ा । हमारी पहली प्रोटोटाइप सर्किट 6 मिलीलीटर तक की बड़ी भड़काने की मात्रा की आवश्यकता है । यह 4 जी के नीचे हीमोग्लोबिन मान के साथ चरम hemodilution के परिणामस्वरूप/डीएल और हेमाटोक्रिट मूल्यों के लगभग 15. BGA के बावजूद अच्छा ऑक्सीजन हम प्रक्रिया के दौरान तेजी से कार्डियक गिरफ्तारी के लिए अग्रणी hypoxemia के संकेत मनाया दिखा । उचित ऊतक ऑक्सीजन प्राप्त करने के क्रम में, हेमाटोक्रिट मूल्यों 25 से ऊपर होना चाहिए । टयूबिंग आकार का समायोजन करके, रोलर पंप के डिजाइन में फेरबदल, एक लघुकृत हवा बिछाकर उत्पादन, और अनुकूलन शिरापरक और धमनी cannulas, भड़काना मात्रा काफी कम हो गया था & #60; ०.९ मिलीलीटर ।
4-6 मिलीलीटर के पर्याप्त छिड़काव प्रवाह के बावजूद, पर्याप्त शिरापरक वापस प्रवाह प्रदान करना आवश्यक है । सही atrium में शिरापरक प्रवेशनी की नियुक्ति या, और भी बेहतर, सही निलय में, इस समस्या को दूर । छिड़काव प्रवाह में वृद्धि या तो शिरापरक प्रवेशनी या overperfusion तरल पदार्थ और ऊतक शोफ के नुकसान से संबंधित चूसने की ओर जाता है । माउस, जो एक तेजी से चयापचय है में सह2 प्रतिधारण से बचने के लिए, हमने पाया है कि फियो पर oxygenator के माध्यम से ऑक्सीजन की आपूर्ति रखते हुए2 ८०% के प्रवाह के साथ ६०० मिलीलीटर/
एक और मुद्दा एक मुठभेड़ कर सकते है interstitium को intravascular मात्रा के क्रमिक नुकसान है, महसूस दोहराने मात्रा प्रतिस्थापन हर 30-40 मिनट । hydroxyethyl स्टार्च युक्त इलेक्ट्रोलाइट समाधान के hyperosmolarity (वह) intravascular मात्रा घटाने से बचाता है, लेकिन जब विशेष रूप से इस्तेमाल किया, इसकी उच्च चिपचिपापन CPB के दौरान प्रणालीगत दबाव में एक भारी वृद्धि का कारण बनता है । यह oxygenator में रिसाव और धमनी प्रवेशनी को समीपस्थ टयूबिंग की ओर जाता है । इसलिए, hyperosmolarity और उदारवादी चिपचिपाहट के बीच एक संतुलन प्राप्त करने के लिए, वह एक 1:1 मिश्रण युक्त समाधान और एक और isotonic संतुलित तरल पदार्थ के लिए इष्टतम होना पाया गया ।
रोलर पंप के ड्राइविंग इलेक्ट्रॉनिक्स इस प्रकार छोटे व्यास ट्यूबों के भीतर पर्याप्त प्रवाह की अनुमति रोटेशन की गति को बढ़ाने के लिए संशोधित किया गया । मजबूत सक्शन रोलर पंप द्वारा उत्पादित के तहत, यह सूक्ष्म हवा शिरापरक प्रणाली में बुलबुले के लिए विशिष्ट है । ०.१५ मिलीलीटर से नीचे भड़काना मात्रा के साथ एक लघुकृत हवा बिछाकर इस समस्या का समाधान किया । अतिरिक्त मात्रा के ०.१ मिलीलीटर जोड़ने और शिरापरक प्रवेशनी के सही स्थान की जांच के अलावा CPB प्रवाह को कम करने सर्किट में हवा शल्यता का सफाया ।
एक उपंयास कार्डियोपल्मोनरी बाईपास मॉडल की तकनीकी व्यवहार्यता का परीक्षण करने के लिए, एकाधिक रक्त नमूने की आवश्यकता है । रक्त की अधिक से अधिक ०.२ मिलीलीटर हटाने आमतौर पर एक स्वस्थ माउस के लिए घातक है । ऑक्सीजन और hemodynamic स्थिरता को आश्वस्त करने के लिए, हमारे प्रयोग में रक्त के नमूने की मात्रा इस मूल्य से परे थी और प्रयोग के अंत में लगभग ०.९ मिलीलीटर तक पहुंच गया । फिर भी, स्थिर ऑक्सीजन और hemodynamic मापदंडों रक्त मूल्यों में लगातार कमी के बावजूद मनाया गया । इसलिए, हमारे प्रारंभिक व्यवहार्यता मॉडल मुख्य रूप से एक तीव्र, गैर अस्तित्व प्रोटोकॉल के रूप में बनाया गया था । अब हम एक ंयूनतम इनवेसिव अस्तित्व मॉडल है कि, आवश्यकता से, कम रक्त नमूना होगा विकसित कर रहे हैं ।
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Disclosures
लेखकों का खुलासा करने के लिए कुछ नहीं है ।
Acknowledgments
लेखकों को कोई पावती नहीं है ।
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Sterofundin | B.Braun Petzold GmbH | PZN:8609189 | priming volume, 1:1 with Tetraspan |
| Tetraspan 6% HES Solution | B. Braun Melsungen AG | PZN: 05565416 | priming volume, 1:1 with Sterofundin |
| Heparin Natrium 25.000 | Ratiopharm GmbH | PZN: 3029843 | 2.5 IU per ml of priming solution |
| NaHCO3 8,4% Solution | B. Braun Melsungen AG | PZN: 1579775 | 3% in priming solution |
| KCL 7.45 % Solution | B. Braun Melsungen AG | PZN: 2418577 | 0.1 mL for cardioplegia |
| Carprofen | Zoetis Inc., USA | PZN:00289615 08859153 | 5 mg/kg/BW |
| 1 Fr PU Catheter | Instechlabs INC., USA | C10PU-MCA1301 | carotid artery |
| 2 Fr PU Catheter | Instechlabs INC., USA | C20PU-MJV1302 | jugular vein |
| Vasofix Safety catheter 20G | B.Braun Medical | 4268113S-01 | orotracheal intubation |
| 8-0 Silk suture braided | Ashaway Line & Twine Mfg. Co., USA | 75290 | ligature |
| Isoflurane | Piramal Critical Care Deutschland GmbH | PZN:9714675 | narcosis |
| CLINITUBES blood capillaries | Radiomed GmbH | 51750132 | blood sampling 60 - 95 microliter |
| Spring Scissors - 6mm Blades | Fine Science Tools GmbH | 15020-15 | instruments |
| Spring Scissors - 2mm Blades | Fine Science Tools GmbH | 15000-03 | instruments |
| Halsted-Mosquito Hemostat | Fine Science Tools GmbH | 13009-12 | instruments |
| Dumont #55 Forceps | Fine Science Tools GmbH | 11295-51 | instruments |
| Castroviejo Micro Needle Holder - 9cm | Fine Science Tools GmbH | 12060-02 | instruments |
| Micro Serrefines | Fine Science Tools GmbH | 18555-01 | instruments |
| Bulldog Serrefine | Fine Science Tools GmbH | 18050-28 | instruments |
| MiniVent Ventilator for Mice (Model 845) | Harvard Apparatus | 73-0044 | mechanical ventilation |
| Isoflurane Vaporizer Drager 19.1 | Drägerwerk AG & Co. KGaA | anesthesia 1.3 - 2.5% | |
| PowerLab data acquisition device 4/35 | ADInstruments Ltd, New Zealand | PL3504 | invasive pressure, ECG, temperature |
| ABL 800 Flex | Radiometer GmbH | blood gas analysis | |
| NMRI mice | Charles River Laboratories | Crl:NMRI(Han) | male, 30 - 35 g, 12 weeks old, housed at least 1 week before the experiment |
References
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- Goto, T., Maekawa, K. Cerebral dysfunction after coronary artery bypass surgery. J. Anesth. 28 (2), 242-248 (2014).
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