Мантия клеточная лимфома (мкл) трудно лечить расстройство клетки B и одинаково трудно создать модель мыши ксенотрансплантата первичных MCL для изучения и разработки терапии. Здесь мы описываем успешное создание MCL ксенотрасплантатов в мышей, чтобы помочь понять ее базовой биологии.
Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.
Методическая статья
Опухоль приживления в гранулы ксенотрансплантата мыши модель человека Мантия клеточная лимфома
В этой статье
Краткое содержание
Аннотация
Лимфоциты являются ключевыми игроками в циркуляции иммунных клеток и они главным образом проживает и проживают в лимфоидных органов. В то время как нормальные клетки B только размножаются простимулировано Т-лимфоцитов, онкогенные клетки B выжить и расширять автономно в нишах не определен орган. Мантия клеточная лимфома (мкл) является одно такое расстройство клетки B, где медиана выживаемости больных составляет 4-5 лет. Это предусматривает необходимость эффективных механизмов, которые блокируются для того чтобы увеличить выживание самонаведения и приживления этих клеток и продолжительности жизни пациентов. Таким образом усилия по разработке ксенотрансплантата мыши модель для изучения эффективности терапии MCL, блокируя самонаведения механизм в естественных условиях имеет первостепенное значение. Развитие животных получателей для клеток человека ксенотрансплантации тест ранней стадии лекарств давно осуществляется, как соответствующих доклинических мыши модели имеют решающее значение для экрана новых терапевтических агентов. Это животное модель разработана чтобы избежать человека трансплантата и создать модель для заболеваний человека, и это может быть чрезвычайно полезным инструментом для изучения прогрессирования заболевания лимфомы различных типов и выполнить Доклинические испытания кандидат препаратов для гематологических злокачественных новообразований, как ПДК. Мы создали модель ксенотрансплантата мыши, которая будет служить отличным ресурсом для изучения и разработать новые терапевтические подходы для мкл.
Введение
Лимфоцитов по своей природе играют важную роль в иммунной наблюдения, и лимфоцитов торговля является важнейшим шагом в монтаж антигена специфический иммунитет1,2. Этот процесс включает в себя миграцию наивные Т-лимфоцитов из тимуса в поток крови и оттуда вторичных лимфоидных органов, включая лимфатические узлы, патчи Пейера в или селезенки, где они встречаются родственных антигены. Лимфоциты продифференцировать в костном мозге и мигрируют как наивный клетки в фолликулах вторичных лимфоидных органов3. Некоторые из этих клеток B связывания антигена с их рецепторов и активируются Т-клеток.....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Протокол
Образцы крови человека были использованы в соответствии с процедурами, утвержденными местной этики и эксперименты над людьми комитетов больницы Университета Женевы.
Животных процедуры были выполнены в соответствии с институциональной этического Комитета животных, уход в Женеве, Швейцария и кантональная служба ветеринарного (номер авторизации: GE/26/15).
1. Подготовка первичных периферической крови мононуклеаров (получения), градиент плотности разделения
Примечание: 3-5 мл периферической крови был получен от пациентов с ПДК в лейкозных фазе. Диагноз был учрежден по данным стандартных диаг....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Результаты
Рукопись описывает оптимизированный протокол для успешного развития ксенотрансплантата мыши модели для приживления MCL клеток. Подготовка населения чистой ячейки (в этом случае клетки мкл), очень важно развивать успешный MCL ксенотрасплантатов. Рисунок 1 представляет препаративные шаги для изоляции мононуклеарных клеток из крови MCL пациента, градиент плотности разделения. Для получения чистого B клеток с помощью комплекта обогащения отрицательные клетки B дл.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Обсуждение
Клинические испытания для препаратов, которые находятся в продвинутой стадии развития, но не может использоваться для обнаружения наркотиков. Давно предпринимались усилия по разработке животных получателей для клеток человека ксенотрансплантации для того чтобы проверить ранней стадии наркотиков. Здесь мы представляем животных модель, которая избегает человеческих трансплантата и может создать модель для заболеваний человека, таких как ПДК. Это в настоящее время состояние искусства ксенотрансплантата модель для изучения м.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Раскрытие информации
Авторы заявляют, что они не имеют никаких финансовых интересов.
Благодарности
Эта работа была поддержана Ligue Genevoise le против рака, доктор Fondation Dubois Ferriere Дину-Lipatti, Oncosuisse КПС-OCS, OCS-02260-08-2008 и 2914-02-2012 и Швейцарский национальный грант фонда науки 31003A_156760 и 310030-153456.
....Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Материалы
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| Ficoll-paque media | Healthcare | 17-1440-02 | для разделения мононуклеарных клеток |
| RPMI Medium 1640 | Gibco-Life technologies | 61870-010 | для разведения образца крови |
| Фосфатно-солевой буфер (PBS) | Sigma-Aldrich | D8537 | промывка клеток |
| бычьей сывороткой альбумином (BSA) | Sigma-Aldrich | A8412 | для приготовления PBS с 1% БСА, используемого в промывке клеток при выделении |
| CD19-APC700 | Beckman Coulter | B49212 | маркер пан-В клеток |
| человека CD20-APC | Beckman Coulter | A21693 | маркер пан-В клеток |
| человека CD20-ECD | Beckman Coulter | IM3607 | маркер пан-В клеток человека |
| CD5-PC 5.5 | Beckman Coulter | PN A70203 | маркер Т-клеток человека |
| CD23-PE | Pharmingen | 555711 | Белок клеточной поверхности, обычно отсутствует у мышей MCL |
| CD45 KO | Beckman Coulter | B36294 | Пан-лейкоцитарный маркер |
| CD200-PE | Pharmingen | 552475 | Белок клеточной поверхности, обычно отсутствует у |
| мышей MCL NOD scid gamma (NSG) | River Laboratories | 5557 | использован для разработки ксенотрансплантатов MCL в этом исследовании |
| Easy sep Набор для обогащения В-клеток человека | Технологии стволовых клеток | 19054 | используются для обогащения В-клеток с целью получения чистых клеток для введения мышам |
| FACS | Beckman Coulter | Navios | используется для характеристики образца MCL и для изучения органов для приживления MCL |
| 1X хлорид аммония калий буфер | для лизиса красной крови (NH4Cl 8,024 мг/л; KHCO3 1 001 мг/л; ЭДТА. Na2· 2H2O 3,722 мг/л ) |
Ссылки
- Baggiolini, M., Dewald, B., Moser, B. Human chemokines: an update. Annu Rev Immunol. 15, 675-705 (1997).
- Baggiolini, M. Chemokines and leukocyte traffic. Nature. 392, 565-568 (1998).
- Janeway, C. A., Travers, P., Walport, M., Shlomchik, M. J.
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Перепечатки и разрешения
