Summary
Мантия клеточная лимфома (мкл) трудно лечить расстройство клетки B и одинаково трудно создать модель мыши ксенотрансплантата первичных MCL для изучения и разработки терапии. Здесь мы описываем успешное создание MCL ксенотрасплантатов в мышей, чтобы помочь понять ее базовой биологии.
Abstract
Лимфоциты являются ключевыми игроками в циркуляции иммунных клеток и они главным образом проживает и проживают в лимфоидных органов. В то время как нормальные клетки B только размножаются простимулировано Т-лимфоцитов, онкогенные клетки B выжить и расширять автономно в нишах не определен орган. Мантия клеточная лимфома (мкл) является одно такое расстройство клетки B, где медиана выживаемости больных составляет 4-5 лет. Это предусматривает необходимость эффективных механизмов, которые блокируются для того чтобы увеличить выживание самонаведения и приживления этих клеток и продолжительности жизни пациентов. Таким образом усилия по разработке ксенотрансплантата мыши модель для изучения эффективности терапии MCL, блокируя самонаведения механизм в естественных условиях имеет первостепенное значение. Развитие животных получателей для клеток человека ксенотрансплантации тест ранней стадии лекарств давно осуществляется, как соответствующих доклинических мыши модели имеют решающее значение для экрана новых терапевтических агентов. Это животное модель разработана чтобы избежать человека трансплантата и создать модель для заболеваний человека, и это может быть чрезвычайно полезным инструментом для изучения прогрессирования заболевания лимфомы различных типов и выполнить Доклинические испытания кандидат препаратов для гематологических злокачественных новообразований, как ПДК. Мы создали модель ксенотрансплантата мыши, которая будет служить отличным ресурсом для изучения и разработать новые терапевтические подходы для мкл.
Introduction
Лимфоцитов по своей природе играют важную роль в иммунной наблюдения, и лимфоцитов торговля является важнейшим шагом в монтаж антигена специфический иммунитет1,2. Этот процесс включает в себя миграцию наивные Т-лимфоцитов из тимуса в поток крови и оттуда вторичных лимфоидных органов, включая лимфатические узлы, патчи Пейера в или селезенки, где они встречаются родственных антигены. Лимфоциты продифференцировать в костном мозге и мигрируют как наивный клетки в фолликулах вторичных лимфоидных органов3. Некоторые из этих клеток B связывания антигена с их рецепторов и активируются Т-клеток. Пролиферации и дифференцировки клеток этих B толкает неактивированные, наивный B клеток в зоне мантии фолликула. Активированные клетки затем могут дифференцироваться в памяти B клеток, которые патрулируют тело, или перерастет иммуноглобулинов, секретирующих плазматических клеток, которые мигрируют в костного4.
MCL происходит, когда наивный B лимфоцитов в зоне мантии превратить в опухоль. Эти лимфомы клетки находятся в микроокружения лимфоидных органов и размножаться независимо от управления конкретными Т-лимфоцитов. Однако на определенном этапе плотности они вырваться из этой ниши и рециркуляции в кровоток в поисках ниши в других органах. Учитывая сложность молекул клеточной адгезии и распущенности chemokines и их рецепторов плохо понимается и таким образом препятствует терапии механизм этой сотовой оборота в естественных условиях . Новые методы необходимы для эффективно блокировать этот процесс миграции для предотвращения клетки лимфомы B от достижения новых микросреды.
MCL является одним из самых трудных для лечения B-клеток злокачественных опухолей. Развития неопластических фенотип MCL является результатом многоступенчатое Каскад, характеризуется приобретения уникальные биологические свойства. На момент постановки диагноза большинство пациентов (70%) уже присутствует с диссеминированной, с большинством случаев, экспонируется экстранодальных причастности селезенки, костного мозга или желудочно-кишечного тракта5,6. В больных рецидив, устойчивостью опухолей в течение нескольких лет является общим, даже несмотря на то, что обычные химиотерапии побуждает высокие ремиссии курсы в краткосрочной перспективе7,8. Здесь мы представляем новую модель болезнь, которая может помочь понять распространение MCL и ее базовой биологии: мы создали человека модель мыши ксенотрансплантата MCL, которая возникла из первичного опухолевых клеток больных. Мы надеемся, что эта модель будет способствовать развитию терапевтических стратегий борьбы против распространения MCL и возможно предоставить новые клинические перспективы для оптимального диагностики и лечения рецидивирующего больных.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Образцы крови человека были использованы в соответствии с процедурами, утвержденными местной этики и эксперименты над людьми комитетов больницы Университета Женевы.
Животных процедуры были выполнены в соответствии с институциональной этического Комитета животных, уход в Женеве, Швейцария и кантональная служба ветеринарного (номер авторизации: GE/26/15).
1. Подготовка первичных периферической крови мононуклеаров (получения), градиент плотности разделения
Примечание: 3-5 мл периферической крови был получен от пациентов с ПДК в лейкозных фазе. Диагноз был учрежден по данным стандартных диагностических критериев для проточной цитометрии (CD5 +, CD23−, CD200 +, моноклональных клетки B населения) и впоследствии подтверждено присутствие транслокация t(11;14) и Гиперэкспрессия циклин D1. Во всех случаях, моноклональных клетки B составляли до > 90% населения всего B клеток. Остальные клетки были главным образом клетки T и моноцитов.
- Развести 5 мл (1:1) мкл крови с 5 мл среды Розуэлл парк Мемориальный институт 1640 (RPMI) (рис. 1A).
- Инвертируйте градиент СМИ плотность (Таблица материалов) несколько раз перед использованием для обеспечения тщательного перемешивания.
- Добавьте 5 мл градиента плотности СМИ в 15 мл пластиковых пробирок с помощью пипетки Аспиратор.
- Аккуратно слой разбавленной крови над СМИ градиента плотности в 15 мл пластиковых пробирок с помощью аспиратор (крови коэффициент плотности градиента СМИ должен быть 2:1, например, 10 мл крови по 5 мл градиента плотности СМИ). Следует позаботиться не смесь два слоя (Рисунок 1B, C).
- Центрифуга образца на 400 x g 40 мин при комнатной температуре с тормозами центрифуги, выключен.
- Аккуратно с помощью стерильные пипетки Пастера, аспирационная средний слой (беловатые, тонкие кольцо отмеченные стрелки (рис. 1 d, E)) содержащий мононуклеарных клеток и передавать их в чистую пробирку.
- Стиральная мононуклеарных клеток
- Рассчитайте объем передаваемых клеток подвеска и добавить в него 3 тома из стерильных 1 x фосфатный буфер (PBS) с 1% бычьим сывороточным альбумином (БСА).
- Смешайте подвеска, закупорить вверх и вниз несколько раз.
- Центрифуга для подвески на 400-500 x г за 10-15 мин при комнатной температуре.
- Выбросите супернатант для получения гранул клеток и повторите шаг мыть.
- Удалить супернатант и Ресуспензируйте клетки в желаемый объем, например, 1 или 2 мл ФСБ.
- Подсчитать количество ячеек счетчик автоматизированной клеток или вручную с помощью Горяева (Нойбауэр палата).
2. обогащение клеток в клетки B негативный выбор
- Разбавьте клетки в PBS в конечной концентрации 50 х 106 клеток/мл.
- Передать 5 мл круглая труба полистирола нижней клетки. Добавить 100 мкл антител коктейль из комплекта обогащения клетки B 2 мл суспензии клеток и осторожно перемешать, закупорить вверх и вниз (рис. 2-1).
- Инкубируйте клетки при комнатной температуре в течение 10 мин.
- Кратко вихревые магнитные частицы предусмотрено в комплект клетки B обогащение 30 s (Рисунок 2-2). Добавьте 150 мкл магнитных частиц в 2 мл образца.
- Проинкубируйте образцы для еще 5 мин при комнатной температуре.
- Довести объем образца до 2,5 мл с ПБС, содержащий 2% плода телячьей сыворотки (FCS) и 1 мм Этилендиаминтетрауксусная кислота (ЭДТА). Трубка в магнит и инкубировать трубки для еще 3-5 мин (Рисунок 2-3).
- Подобрать магнит с трубки в месте и в одно непрерывное движение, сцеживаться трубку так, что подвеска обогащенных клеток собирается в свежий трубку (рис. 2-4). Подсчет ячеек счетчик автоматизированной клеток или вручную с помощью Горяева для получения общей доходности B клеток.
Примечание: Как правило, урожайность-~ 105 B клеток/мл для нормальной клетки B и 5-50 x 106 клеток/мл для мкл. - Подтверждает чистоту обогащения клетки B
- Взять ~ 50 000 ячеек и инкубировать клетки с анти CD19/CD20 антител (1:20 разрежения) и антитела анти CD45 в сочетании с различными флуорохромов (1:10 разрежения) при комнатной температуре 15-30 мин.
- Вымойте с 1 мл раствора 1 x PBS + 1% BSA, центрифуга клетки на 400-500 x g 5 мин и Ресуспензируйте клетки в ~ 200 мкл PBS.
- Приобрести образцы клетки, проточной цитометрии и анализировать за чистоту B клеток. Чистота является в основном > 90% этим методом (рис. 3).
3. Разработка модели мыши ксенотрансплантата
- Приостановите ~ 40-60 x 106 клеток в 150-200 мкл ПБС (объем, необходимый для внедрения на мышь).
- Внутривенно вводить 150 мкл суспензии клеток (и.в.) в каждой хвост Вену 6-7 неделя старый иммунодефицитных NOD scid гамма (ГЯП) мышей независимо от пола (рис. 4A).
- Разрешить мышей развивать людской лимфомы ~ 10 недель.
Примечание: Основной людской лимфомы клетки занять гораздо больше времени, чтобы развиваться опухоли, по сравнению с людской лимфомы клеточных линий (~ 3 недели). - Когда животные начинают проявлять симптомы роковой болезни как потеря веса, снижение активности, задних конечностей паралич, взъерошенные волосы, и т.д., пожертвовать мышей CO2 удушья после пункции сердца сердца для получения крови.
- Сбор различных органов как костного мозга, селезенки и печени путем рассечения мышей и собирать периферической крови, опираясь кровь от сердца во время жертвоприношения для анализа приживления опухоли (рис. 4В -F).
4. химеризма анализ опухолевых клеток, прижившимися в различных органах
- После сбора различных органов, их обработки, механических потрясений для создания единого клеточных суспензий после Лизис эритроцитов (РБК), используя 200 мкл 1 x аммония хлорид калия буфер для крови и костного мозга, 500 мкл для селезенки и 2 мл для печени .
- Граф и пятна с помощью специфических антител человека клетки B, т.е., анти CD19, анти CD20 и анти CD45 клетки.
Примечание: ГЯП мышей не хватает клетки B и следовательно для анализа, клетки запятнаны с маркерами конкретных B клеток человека. - Анализируйте клетки, полученные от каждого органа подачей cytometry, стробирования на лимфоцитов (CD19 +, CD20 +, CD45 +).
- Количественно прижившимися опухолевых клеток в различных органах, полученных от MCL вводят мышей, основанный на закрытом клетки, как указано в шаге 4.3 (Рисунок 4 g).
Примечание: См. Таблицу материалов для деталей.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Рукопись описывает оптимизированный протокол для успешного развития ксенотрансплантата мыши модели для приживления MCL клеток. Подготовка населения чистой ячейки (в этом случае клетки мкл), очень важно развивать успешный MCL ксенотрасплантатов. Рисунок 1 представляет препаративные шаги для изоляции мононуклеарных клеток из крови MCL пациента, градиент плотности разделения. Для получения чистого B клеток с помощью комплекта обогащения отрицательные клетки B для получения чистого клеток населения для инъекций ксенотрансплантата в мышей далее обрабатываются мононуклеарных клеток. Следует позаботиться о том, для получения максимальной чистоты для того чтобы иметь успешный MCL приживления. Чистота, полученные с помощью этого метода является обычно > 90%. Остальные клетки были главным образом клетки T (данные не отображаются) и моноцитов.
Рисунок 2 представляет различные этапы очистки протокола клетки B, как описано в разделе методы. Обогащенный клетки далее анализируются их чистоту проточный цитометр, с использованием различных маркеров (CD45, CD19, CD20, CD23, CD200, CD5, Каппа и лямбда). Последовательная память, как показано на рисунке 3 позволяет, характеризующие MCL клеток: выбираются CD45 +, CD19 +, CD20 +, CD5 +, CD23− и CD200−. Компенсация за многоцветной окраски была проведена с использованием единого окрашенных элементов управления для каждого из флуорохромов, используются, согласно стандарта цитометрии set-up.
Рисунок 3E Г представляет типичная точка участок B клеток до и после обогащения. В этом случае > 95% обогащенных клеток с помощью этого комплекта являются клетки B. Клетки подвешены в PBS в концентрации 40-60 × 106 клеток в 150-200 мкл PBS как упомянуто в протоколе. Они были немедленно вводили и.в. к ГЯП мышей. После 10 недель > 90% лимфомой вводят развитых животных показывает признаки неизлечимой болезни (потеря веса, взъерошенные волосы, снижение активности и т.д.). После того, как жертву, селезенки и печени удаляются и обработаны для получения одного клеточных суспензий механического нарушения (Рисунок 4 d, F); кровь тщательно обращается пункции сердца сердца и костного обрабатывается путем разрезания обоих концах бедренной кости и промывки его, используя шприц 2 мл заполнены RPMI среднего или PBS (рис. 4 c). Клетки далее обрабатываются с использованием определенных маркеров B клеток человека как CD19/CD20 и CD45 проточной цитометрии. Мы использовали B клеток человека определенных маркеров здесь, потому что штамм получателя мыши (ГЯП) клетки B. Рисунок 4B - F представляет коллекции органов после жертвоприношения и шаги по дальнейшей обработки. В рисунке 4 gпредставлена степень приживления MCL клетки, полученные из двух пациентов. После этой техники можно сравнить приживления шаблон в различных органах и между пациентами.
Рисунок 1: изоляции получения из цельной крови. Кровь из больного MCL разбавленных 1:1 в среде RPMI (A) и тщательно помещены поверх слоя плотность градиента СМИ (B) без смешивания крови в СМИ это плотность градиента (C). Центрифугирование в 400 x g 45 мин отделяет мононуклеарных клеток, которые отображаются в виде беловатого кольцо (стрелка указывает слоя мононуклеарных клеток) (D). Этот слой накапаны мягко без смешивания с другими слоями в чистую пробирку для дальнейшей обработки (E). Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.
Рисунок 2: обогащение B клеток от получения. Получения изолируются плотность градиентного центрифугирования промывают дважды с PBS. Используя отрицательные B мобильный комплект для обогащения и следуя производителя протокол, чисто населения клетки B получается (4в1–). Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.
Рисунок 3: анализ СУИМ MCL клеток и чистоту B клеток до и после обогащения. MCL мононуклеаров характеризуются анализ СУИМ, с использованием различных маркеров как CD45, CD19, CD20, CD23, CD200, CD5, Каппа и лямбда. Клетки, которые являются позитивными для CD45, CD19, CD20, CD5 и отрицательной CD23 и CD200 являются выбран (FA–). G представляет популяции клеток после обогащения с помощью комплекта негативный выбор, по сравнению с E, которая находится перед обогащением. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.
Рисунок 4: ГЯП мышей как гранулы ксенотрансплантата модель для приживления MCL клеток. B клеток, полученных от пациентов, MCL вводили и.в. через боковые хвост вен ГЯП мышей (A). После позволяя несколько дней опухоль привить, мышей были принесены в жертву и расчлененный (B) для сбора различных органов как костного мозга (C), селезенка (D), периферической крови (E) (нарисованный пункции сердца сердца), и печень (F). Эти органы были дальнейшую обработку и проанализированы подачей cytometry на наличие клеток. G представляет шаблон приживления MCL клеток в различных органах, производные от MCL вводят ГЯП мышей. Отображаются результаты из двух пациентов. Данные отображаются как означает ± SEM, n = 3. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Клинические испытания для препаратов, которые находятся в продвинутой стадии развития, но не может использоваться для обнаружения наркотиков. Давно предпринимались усилия по разработке животных получателей для клеток человека ксенотрансплантации для того чтобы проверить ранней стадии наркотиков. Здесь мы представляем животных модель, которая избегает человеческих трансплантата и может создать модель для заболеваний человека, таких как ПДК. Это в настоящее время состояние искусства ксенотрансплантата модель для изучения механизмов приживления человека опухоли и опухоли. Здесь мы используем ГЯП мышей, один из самых иммунной несовершенным мыши моделей на сегодняшний день для того, чтобы добиться большего успеха приживления лимфомы. ГЯП мышей не зрелые клетки T, B клеток и NK клеток. Они также имеют нарушения цитокина сигнализации и дефекты в врожденный иммунный ответ.
Подготовка лимфоцитов из первичного образца MCL, градиент плотности является важным шагом для удаления другие типы ячеек, как красных кровяных клеток и тромбоцитов. Традиционно плотность градиентного центрифугирования позволяет успешно изоляции лимфоцитов. Дальнейшая обработка этих лимфоцитов обогатить популяции клеток B достигается с помощью комплекта для обогащения клетки B после протокол, как описано в этой рукописи. Следует позаботиться о том, для достижения высокой чистоты популяций лимфоцитов B достичь оптимального приживления лимфоидные клетки. MCL клетки вводят внутривенно (по крайней мере 40-60 x 106 клеток/мышь) через боковые хвост ключе и мышей было разрешено развивать лимфомы до 10 недель. Мышей были внимательно рассмотрены каждый день для симптомов болезни, в том числе, потеря веса, трепал волос, снижение активности, задних конечностей паралич, и т.д. анализ различных органов как селезенки, печени, костного мозга и крови методом проточной цитометрии показали MCL приживления. Недавно было показано, что первичный MCL клетки угодный костного мозга и селезенки мышей облученного ГЯП в 20 недель инъекций9. Независимые от этот вывод, мы успешно разработали наш собственный ксенотрансплантата модель первичной MCL с более быстрого образования опухоли.
Эта модель мыши ксенотрансплантата может стать чрезвычайно полезным инструментом для изучения прогрессирования заболевания лимфомы различных типов. Ксенотрансплантата модели также предоставляют мощные инструменты для выполнения Доклинические испытания препаратов кандидата для гематологических злокачественных опухолей как MCL, однако, с определенными ограничениями, например, доминирующей клон, присутствующих на рецидивов у пациента не обязательно клон новые ксенотрансплантации10. Это может быть вызвано различными селективного давления, что гранулы ксенотрансплантата проходит в различных хост-систем. Состав кроветворных в этот штамм не полностью повторить человека кроветворения, таким образом, ограничивая долгосрочного поддержания клеток человека. Преимущества в использовании человека опухоли ксенотрасплантатов переопределяет ограничения как результаты получены в течение нескольких недель от биопсии опухоли человека относительно ответа на терапию. Наркотиков ответы не часто коррелируют с клинической деятельности больных11 когда как ксенотрасплантатов используются линии клеток человека вместо клетки первичной опухоли, но они помогают сформировать основу для возможных лечебных ответов. Использование первичных опухолей как ортотропной ксенотрансплантата имеет значение сильнее прогнозирования реакции, особенно, когда дозировка клинически значимых наркотиков используются11,12,13. Самонаведения лимфоидные клетки их ниши является важной предпосылкой для того, чтобы выжить и установить приживления опухоли. Этот процесс регулируется majorly через лимфатическую систему, и запись циркулирующих лимфоцитов через высокие эндотелиальные венулы поддерживает лимфоцитов гомеостаза в лимфатических узлах.
Циркуляцию лимфоцитами через лимфатические узлы требует пересечения эндотелиальной барьеры и миграции хемотаксического срабатывает клетки согласованного взаимодействия с различными сцепления молекул. Таким образом ориентация молекул, которые управляют самонаведения лимфоциты для их выживания ниши может представлять новую стратегию лечения B-клеточные лимфомы, как они ведут себя аналогично нормальные лимфоциты. Нашей целью было ориентироваться в молекуле джем-C, соединительной Межмицеллярная молекула, которая присутствует на MCL. Эта модель ксенотрансплантата будет использоваться для изучения терапевтического эффекта джем-C антител на самонаведения и приживления первичных лимфоидных клеток для их выживания ниши. Недавно мы показали влияние JAM-C антител в мышей, которые получил MCL клеточной линии, Jeko-114. Это антитело имел блокирующий эффект на самонаведения клеток Jeko-1, а также при приеме в регулярных интервалах, он эффективно предотвратить приживления клеток Jeko-1. В дополнение к его влияние на самонаведения антитела лечение искоренить прижившимися в большинстве органов испытания в этой мыши14лимфомы.
В свете научных и клинических вопрос решается эти xenografted опухоли представляют в настоящее время, интересная модель для изучения терапевтических результатов MCL.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Авторы заявляют, что они не имеют никаких финансовых интересов.
Acknowledgments
Эта работа была поддержана Ligue Genevoise le против рака, доктор Fondation Dubois Ferriere Дину-Lipatti, Oncosuisse КПС-OCS, OCS-02260-08-2008 и 2914-02-2012 и Швейцарский национальный грант фонда науки 31003A_156760 и 310030-153456.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Ficoll-paque media | GE Healthcare | 17-1440-02 | for separation of mononuclear cells |
| RPMI Medium 1640 | Gibco-Life technologies | 61870-010 | for dilution of blood sample |
| Phosphate Buffered Saline (PBS) | Sigma-Aldrich | D8537 | washing of cells |
| Bovine Serum Albumin (BSA) | Sigma-Aldrich | A8412 | for preparation of PBS with 1% BSA used in washing cells during isolation |
| CD19-APC700 | Beckman Coulter | B49212 | human pan-B cell marker |
| CD20-APC | Beckman Coulter | A21693 | human pan-B cell marker |
| CD20-ECD | Beckman Coulter | IM3607 | human pan-B cell marker |
| CD5-PC 5.5 | Beckman Coulter | PN A70203 | human T cell marker |
| CD23-PE | Pharmingen | 555711 | Cell surface protein typically absent in MCL |
| CD45 KO | Beckman Coulter | B36294 | Pan-leucocyte marker |
| CD200-PE | Pharmingen | 552475 | Cell surface protein typically absent in MCL |
| NOD scid gamma (NSG) mice | Charles River Laboratories | 5557 | used to develop MCL xenografts in this study |
| Easy sep Human B cell enrichment kit | Stem cell technologies | 19054 | used to enrich B cells to obtain pure cells for injecting into mice |
| FACS | Beckman Coulter | Navios | used to characterize MCL sample and to study the organs for MCL engraftment |
| 1X ammonium chloride potassium buffer | red blood lysis buffer (NH4Cl 8,024 mg/l; KHCO3 1,001 mg/l; EDTA.Na2·2H2O 3.722 mg/l ) |
References
- Baggiolini, M., Dewald, B., Moser, B.
- Baggiolini, M.
- Janeway, C. A., Travers, P., Walport, M., Shlomchik, M. J. Immunobiology: The Immune System in Health and Disease. , 5th edition, (2001).
- De Silva, N. S., Klein, U. Dynamics of B cells in germinal centres. Nat Rev Immunol. 15 (3), 137-148 (2015).
- Cohen, P. L., Kurtin, P. J., Donovan, K. A., Hanson, C. A. Bone marrow and peripheral blood involvement in mantle cell lymphoma. Br. J. Haematol. 101, 302-310 (1998).
- Meusers, P., Hense, J., Brittinger, G. Mantle cell lymphoma: diagnostic criteria, clinical aspects and therapeutic problems. Leukemia (Baltimore). 11 (Suppl 2), S60-S64 (1997).
- Herrmann, A., et al. Improvement of overall survival in advanced stage mantle cell lymphoma. J Clin Oncol. 27 (4), 511-518 (2008).
- Martin, P., et al. Intensive treatment strategies may not provide superior outcomes in mantle cell lymphoma: overall survival exceeding 7 years with standard therapies. Ann Oncol. 19 (7), 1327-1330 (2008).
- Iyengar, S., et al. Characteristics of human primary mantle cell lymphoma engraftment in NSG mice. Br J Haematol. 173 (1), 165-169 (2016).
- Klco, J. M., et al. Functional heterogeneity of genetically defined subclones in acute myeloid leukemia. Cancer cell. 25 (3), 379-392 (2014).
- Kerbel, R. S. Human tumor xenografts as predictive preclinical models for anticancer drug activity in humans: better than commonly perceived-but they can be improved. Cancer Biol Ther. 2 (4 Suppl 1), S134-S139 (2003).
- Johnson, J. I., et al. Relationships between drug activity in NCI preclinical in vitro and in vivo models and early clinical trials. Br. J. Cancer. 84, 1424-1431 (2001).
- Scholz, C. C., Berger, D. P., Winterhalter, B. R., Henss, H., Fiebig, H. H. Correlation of drug response in patients and in the clonogenic assay with solid human tumour xenografts. Eur. J. Cancer. 26, 901-905 (1990).
- Doñate, C., Vijaya Kumar, A., Imhof, B. A., Matthes, T. Frontline Science: Anti-JAM-C therapy eliminates tumor engraftment in a xenograft model of mantle cell lymphoma. J Leukoc Biol. 100 (5), 843-853 (2016).
