Summary
Atenção sustentada, ou monitorar continuamente situações para eventos intermitentes e imprevisíveis, é um aspecto crítico da cognição. Aqui detalhamos como teste de atenção sustentada em ratos utilizando câmaras operante de touchscreen. Vamos demonstrar o desempenho comparável em ratos machos e fêmeas, tornando esta tarefa útil para estudar a atenção em ambos os sexos.
Abstract
Atenção sustentada é a capacidade de monitorar eventos imprevisíveis e intermitentes durante um período prolongado de tempo. Este processo de atenção subserves outros aspectos da cognição e é interrompido em certo neurológico, neuropsiquiátricos e doenças neurodegenerativas. Assim, é clinicamente importante identificar mecanismos que prejudicam e melhorar a atenção sustentada. Tais mecanismos são frequentemente descobertos usando modelos de roedores. Portanto, foram desenvolvidos vários procedimentos de comportamento para os aspectos de atenção sustentada de teste para os roedores. Um, primeiro descrito por McGaughy e Sarter (1995), chamado a tarefa de atenção sustentada (SAT), treina ratos para distinguir entre o sinal (ou seja, breve apresentação de luz) e ensaios não-sinal. Os sinais são curtos e, portanto, requerem atenção cuidadosa para ser percebida. Demandas de atenção podem ser aumentadas ainda mais através da introdução de um distrator (por exemplo, houselight a piscar). Modificamos a esta tarefa para câmaras operante touchscreen, que são configurados com uma tela sensível ao toque em uma parede que pode apresentar estímulos e respostas de registro. Aqui detalhamos nosso protocolo para sab em câmaras de touchscreen. Além disso, apresentamos as medidas padrão de desempenho em ratos Sprague-Dawley machos e fêmeas. Desempenho comparável sobre esta tarefa em ambos os sexos destaca seu uso para estudos de atenção, especialmente porque mais pesquisadores estão incluindo roedores femininas em seu projeto experimental. Além disso, a fácil implementação do SAT para as câmaras cada vez mais popular touchscreen aumenta sua utilidade.
Introduction
Distúrbios variando de atenção e hiperatividade (TDAH) a esquizofrenia, a doença de Alzheimer, compartilhar deficiências de atenção como um recurso1,2,3. Déficits na atenção sustentada — a capacidade de monitorar continuamente uma situação para eventos intermitentes e imprevisíveis — são particularmente perturbador, porque atenção sustentada é crucial para a atenção selectiva e dividida, assim como outros cognitivo processos de4,5. Mesmo em pessoas saudáveis, dificuldades em sustentar a atenção negativamente afeta a cognição, prejudicando o diário função6. Assim, a compreender a base Neurobiológica da atenção sustentada e como torna-se prejudicado pode levar a intervenções para melhorar a cognição que beneficiaria muitas pessoas.
A fim de delinear circuitos e processos moleculares que contribuem para a adequada contra atenção interrompida, muitos pesquisadores se transformaram em modelos animais não-humanos, onde a manipulação de populações de células específicas e processos moleculares durante a atenção tarefas é possível. O esforço tem levado ao desenvolvimento de uma variedade de tarefas de atenção operante que pode avaliar a capacidade de sustentar a atenção7,8,9,10. Um tal paradigma, desenvolvida pela McGaughy e Sarter (1995), é conhecida como a tarefa de atenção sustentada (SAT). Roedores treinados em SAT devem distinguir julgamentos de sinal, em que uma luz de sinal pisca brevemente, de ensaios não-sinal. Demandas de atenção podem ser aumentadas através da introdução de um distrator visual (piscando houselight)10. Os parâmetros críticos para avaliar a atenção no SAT estão bem documentados e esta tarefa foi validada em ratos machos e fêmeas e camundongos de11,10,12. Uma versão ainda foi adaptada para os seres humanos, destacando o utilitário translacional de SAT13. O uso desta tarefa importante, ajudou a implicar o sistema de corticopetal do prosencéfalo basal na atenção sustentada4. Especificamente, neurônios colinérgicos do núcleo basalis de Meynert (NBM) / substância inominata (SI) região do prosencéfalo basal que projetam para o córtex pré-frontal são críticos para hits, que são respostas precisas sobre sinal ensaios14, 15. Em contraste, os neurônios gabaérgica nesta região são pensados para mediar o desempenho durante a corretas rejeições (CRs), que são respostas precisas em ensaios não-sinal16. Uma vez que o circuito básico para esta tarefa foi criado, fatores que modulam este circuito para prejudicar a atenção, variando de hormônios do estresse a proteínas neurotóxicas foram identificados17,18. Coletivamente, estes estudos destacam-se o utilitário de SAT.
Uma limitação à implementação SAT no laboratório é que o procedimento original requer operante câmaras permanentemente configuradas para a tarefa, com uma luz de painel de centro e duas patilhas extensíveis, um designado para sucessos e outro para CRs10. Em um julgamento de sinal, o luz do painel acende-se brevemente e estendem para indicar uma janela de resposta s 4 alavancas. Durante essa janela, pressionando a alavanca sucesso designada, então, o rato recebe uma recompensa (comida ou água). Prensas de alavanca incorreto em ensaios de sinal, conhecidos como misses, não são recompensadas. Em ensaios não-sinalizado, a luz do painel permanece desligado e, em seguida, alavancas são estendidas. Enquanto um CR é recompensado, prensas de alavanca incorreto em ensaios não-sinalizado, conhecidos como alarmes falsos, não são recompensadas. Uma falha ao fazer qualquer resposta durante a janela de resposta conta como uma omissão. Para expandir a disponibilidade do SAT, modificamos recentemente a tarefa para câmaras operante touchscreen, em que uma parede é um ecrã táctil que pode tanto exibir estímulos visuais e nariz-poke registro respostas19. Câmaras de touchscreen estão se tornando populares por causa de sua versatilidade para executar uma variedade de tarefas (por exemplo, emparelhado associada aprendizagem, aprendizagem de reversão, etc.) com um pedaço de equipamento20. Semelhante a outros procedimentos de touchscreen20,21,22, nossa adaptação do SAT requer o uso de uma capa de touchscreen de plástico opaco, chamado uma máscara, com furos desviá-la. Um buraco central, circular permite a apresentação de um sinal através da apresentação de um estímulo branco na tela por trás disso, e duas áreas de resposta quadrados, um designado para sucessos e outra para o CRs, permitir que o rato fazer toque respostas19. Nas câmaras tradicionais, a janela de resposta de 4-s é normalmente indicada com a apresentação das alavancas, mas um estudo anterior demonstrou que um tom também pode ser usado para sinalizar a janela de resposta23. Em touchscreen SAT, da mesma forma sinalizarmos a janela de resposta com um tom breve. Outros parâmetros de formação (por exemplo, o número de ensaios, intervalo de intertrial, etc.) são mantidos semelhantes entre o tradicional e touchscreen SAT. Anteriormente avaliamos o desempenho entre as versões tradicionais e tela sensível ao toque do SAT e achei que era comparável, sugerindo que touchscreen SAT é uma forma válida para medir a atenção sustentada19. A modificação de touchscreen torna SAT mais versátil porque pode agora ser adaptada para uso difundido nas caixas operante de touchscreen.
O presente protocolo detalha como executar touchscreen SAT no laboratório. Os horários de treinamento foram ligeiramente alterados do nosso relatório anterior da tarefa19 para otimizar o tempo de aquisição em ratos fêmeas, que, ao contrário dos machos, teve dificuldade, avançando através as programações anteriores24. Resultados ilustrando desempenho típico em ratos machos e fêmeas são incluídos, juntamente com dicas para resolução de problemas com a tarefa.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
todos os experimentos foram conduzidos em conformidade com as diretrizes do National Institutes of Health e foram aprovados pelo Comitê de cuidados e uso do templo Universidade institucional Animal. Este protocolo foi desenvolvido com adulto (~ 60 dias de idade ao iniciar o estudo) ratos Sprague-Dawley machos e fêmeas (Charles River).
1. materiais para Touchscreen SAT
- certifique-se de que um cubículo de atenuação do som envolve cada câmara de ecrã táctil e que câmaras estão equipadas com uma casa luz, gerador de Tom, câmera posicionada acima da câmara e uma pelota dispensador com área de recompensa alimentador (que pode ser iluminada) na parede em frente à tela sensível ao toque.
- Usar uma área de recompensa do alimentador com uma grande abertura se implantes cânula ou eletrodos são planejados. Use pelotas de recompensa de 45 mg que têm sido peneiradas com uma peneira para reduzir a poeira, que pode obstruir o alimentador.
- Caber cada câmara com uma máscara de acrílico preta (matte grosso, de 3,175 mm) para limitar áreas de resposta na tela sensível ao toque. Preparar a máscara com uma abertura do círculo central (28,58 mm de diâmetro, 107,95 mm do fundo, centrado entre a esquerda e direita) para o estímulo de luz e duas áreas de resposta quadrados (28,57 x 28,57 mm) cada um posicionado abaixo e fora do centro (um 85.73 mm do lado esquerdo e um 85.73 mm do lado direito e ambos 34,93 mm do fundo). Uma representação da máscara pode ser encontrada na publicação, mechas, et al 19.
- colocar a máscara na frente da tela sensível ao toque com acabamento fosco, posicionado no sentido da câmara de.
2. projeto de agenda para Touchscreen SAT
Nota: O abaixo o protocolo fornece detalhes sobre como definir os parâmetros para a formação e programações de teste para touchscreen SAT. Todos esses horários também estão disponíveis mediante pedido. A tabela 1 mostra os parâmetros de programação.
- Nariz Poke Shaping parâmetros.
- Definir o programa para que não os sinais são apresentados e o houselight permanece fora de
- Definir a área de recompensa de alimentador para iluminar para indicar a presença de um sedimento e para esta luz desligar após recuperação da pelota, conforme determinado pelo raio infravermelho Porto alimentador.
- Conjunto de programa para que o nariz-pokes em qualquer área de resposta são recompensados com pelotas de alimento em uma agenda de reforço (FR1) 1 ratio fixo (ou seja, cada resposta apropriada é recompensado). No entanto, definir o programa para que se o lado diferencial para nariz-pokes é cinco ou maior, o rato deve picar o lado não-favorecido para receber uma recompensa para evitar o desenvolvimento de um viés de lado.
- Definir a sessão se encerre após 40 min ou 120 pokes recompensados. Avançar temas para agenda de treinamento 1 se completam 120 nariz-pokes em 40 min por dois dias consecutivos.
- Descrição de parâmetros compartilhados para treinamento de programação 1, 2 do cronograma de treinamento e Sáb
- Horários de treinamento do programa para que o houselight continua a aumentam as demandas de atenção.
- Programa de cada sessão para que consiste de 162 ensaios que podem ser divididos em três blocos de 54 ensaios por bloco, com o intervalo de intertrial (ITI), fixado em 9 ± 3 s.
- Garantir que sinal e ensaios não-sinal são pseudorandomized de tal forma que o mesmo número de sinal e ensaios não-sinal ocorre em cada um dos três blocos.
- Definir o programa para entregar uma pelota de comida e acender a luz de porta comida automaticamente no início de cada sessão. Quando uma interrupção de feixe infravermelho indica que o rato tenha retirado sua cabeça da área de recompensa, definir o programa para desligar a luz de porta de comida e começar o primeiro ITI.
- Após cada julgamento (isto é, sinal ou não-sinal), definir o programa para indicar a janela de resposta de 4-s com um 200 ms, 70 dB Tom (3 kHz).
- Se o rato responde corretamente, definir o programa para iniciar o ITI quando o rato remove sua cabeça da área de recompensa. Se o rato responde incorretamente, defina o ITI para começar após a resposta. Se o rato omite (i.e., faz sem resposta), defina o ITI para começar após o término da janela de resposta.
- Para contrabalançar, desenvolver duas versões desses horários, o primeiro com a área de direito de resposta designada para hits (versão A) e o segundo com a área de resposta esquerdo designada por hits (versão B).
- Parâmetros de programação de treinamento 1.
- Definir todas as durações de sinal de 500 ms.
- nos testes de sinal, de definir o programa para simultaneamente iluminar a área de resposta designada por sucessos em 50% de intensidade, juntamente com o sinal, desenhar o rato ' s atenção para a área correta resposta.
- Manter a área designada para apagado em ensaios não-sinal correto rejeições.
- Configurar o programa para que respostas incorretas desencadear ensaios de correção, na qual o tipo de julgamento anterior (ou seja, sinal ou não-sinal) é apresentado novamente. Certifique-se de que uma resposta correta ou quatro respostas incorretas consecutivas termina a série de ensaios de correção. Não contam ensaios de correção para os 162 julgamentos totais necessários para a conclusão da tarefa.
- Avançar temas para formação horário 2 se eles têm pelo menos 70% de hits, rejeições correta de pelo menos 70% e menos de 20% de omissões por três dias consecutivos.
- Parâmetros de treinamento agenda 2.
- Definir todas as durações de sinal de 500 ms.
- ao contrário 1 cronograma de treinamento, definir o programa para manter a área de resposta para hits apagadas nos testes de sinal de.
- Ao contrário 1: programação de treinamento, não tem o programa executar ensaios de correção.
- Manter todos os outros parâmetros a mesma programação de treinamento 1.
- Avançar temas para SAT, se eles têm pelo menos 70% de hits, rejeições correta de pelo menos 70% e menos de 20% de omissões por três dias consecutivos.
- Parâmetros SAT.
- Set três durações de sinal: 500 ms, 50 ms e 25 MS.
- definir o programa para apresentar os sinais variáveis em forma de números pseudoaleatórios, tal que os três durações de sinal são apresentadas um número igual de vezes durante cada um dos três blocos julgamento.
- Definir critérios de desempenho, como pelo menos 70% atinge a duração do sinal de 500 ms, rejeições correta de pelo menos 70% e menos de 20% de omissões por três dias consecutivos.
| fase de formação | Max. Ensaios | duração de sinal (ms) | condições especiais | critérios | mediana dias por fase |
| nariz forma Poke | 120 | Eventos | Houselight em | 120 ensaios em 40 minutos | machos: 2, fêmeas: 2 |
| formação programação 1 | 162 | 500 | Houselight; Ensaios de correção; Janela de resposta aceso em 50% durante os ensaios de sinal | > 70% Hits, > 70% CR, < omissões de 20% durante 3 dias consecutivos | machos: 19, fêmeas: 25 |
| formação horário 2 | 162 | 500 | Houselight na | > Hits de 70%, > 70% CR, < 20% omissões durante 3 dias consecutivos | machos: 13, fêmeas: 21 |
| sentou-se | 162 | 500, 50, 25 | Houselight na | > 70% chega às 500 ms, > 70% CR, < omissões de 20% para 3 dias consecutivos | machos: 18, fêmeas: 12 |
tabela 1: horários de treinamento e tempo médio de aquisição para cada horário.
- distrator Sáb
- Manter os parâmetros para os blocos 1 e 3 idêntico ao Sáb
- o houselight do programa para que ela pisca com uma frequência de 0,5 Hz durante o bloco 2.
- Ao analisar dados, comparar o desempenho entre os blocos 1, 2 e 3 para analisar o desempenho antes, durante e após o Distrator dentro da mesma sessão.
- Programa de extração de dados.
- Extrair os seguintes dados para o SAT e distrator SAT discriminada por bloco experimental e cada sinal duração (para VI e hits por cento):
- calcular a porcentagem de acertos, dividindo o número de acertos pelo número combinado de hits e misses e, em seguida, mu ltiplying por 100.
- Calcular a porcentagem de rejeições corretas dividindo o número de rejeições corretos pelo número combinado de rejeições corretas e falsos alarmes e então multiplicar por 100.
- Calcular o índice de vigilância (VI), uma medida global do desempenho atenção, usando a seguinte fórmula:
onde h e f são a proporção de hits no sinal ensaios e falsos alarmes em ensaios não-sinal, respectivamente. Os valores de intervalo de VI de -1 a + 1, com um valor de 0 indica que o rato é incapaz de distinguir entre o sinal e ensaios não-sinal. Não incluem ensaios omitidos na medida VI. - Calcular a porcentagem de omissões por determinação da percentagem de ensaios onde não ocorreu nenhuma resposta.
- Extrair os seguintes dados para o SAT e distrator SAT discriminada por bloco experimental e cada sinal duração (para VI e hits por cento):
onde h e f são a proporção de hits no sinal ensaios e falsos alarmes em ensaios não-sinal, respectivamente. Os valores de intervalo de VI de -1 a + 1, com um valor de 0 indica que o rato é incapaz de distinguir entre o sinal e ensaios não-sinal. Não incluem ensaios omitidos na medida VI.3. Procedimento para ratos correndo em Touchscreen SAT
- Considerações sobre o ciclo de luz/escuro reversa
Nota: podemos testar nossos ratos durante seu ciclo escuro, mas veja a seção de discussão para considerações sobre teste no ciclo de luz.- Para testes durante o ciclo escuro, começar comportamento testando pelo menos 30 min após o início do ciclo escuro.
- Assim que o equipamento estiver configurado, mantenha o comportamental e teste quarto na escuridão durante todo o treinamento de procedimentos para evitar interferência com os ratos ' ciclo de sono/vigília.
- Cobrir gaiolas de rato com toalhas pretas durante o transporte para minimizar a exposição à luz.
- Usar faróis com luzes vermelhas ligadas para o trabalho de mãos-livres no escuro, sem interromper o ciclo luz/escuridão.
- Os procedimentos de restrição alimentar e cronograma atribuição
- Don equipamento de protecção adequado (EPI; por exemplo, luvas, máscara, touca, jaleco, tampas da sapata, etc.) antes de tratamento dos ratos.
- Quando ratos chega à sala de colônia, casa ratos individualmente ou em grupos. A maioria dos ratos em nossos estudos eventualmente são implantados com cânulas, que necessita de habitação individual.
- Lidar com ratos diariamente por 5 min por dia, 5 dias antes do início do estudo.
- Antes da restrição alimentar, gravar cada rato ' s alimentação livre de peso e calcular o seu peso-alvo em 85% do seu peso alimentação livre.
- Alimentos restringir ratos por 3 dias antes início moldar.
- Antes de moldar, pre-expor ratos 15 pelotas de recompensa de comida na sua gaiola casa.
- Após a restrição alimentar inicial, ajustar quantidades de comida diária conforme necessário para manter o desempenho na tarefa de atenção e ~ 85% de cada rato ' s grátis-alimentação peso corporal permitindo para ganho de peso ligeiro ao longo do tempo (ver diretrizes 25). Antes de iniciar uma nova agenda, restringir mais do que o habitual para aumentar a motivação de ratos.
- Sobre os dias da semana quando ratos não executar comportamento, aumentar seu alimento pelo menos 1,0 g de make-up para as calorias que eles teriam recebido enquanto sendo recompensado durante a tarefa comportamental.
- Gravar cada rato ' peso s após sua sessão é concluída.
- Não alimentar ratos até pelo menos 30 min depois de concluir sua sessão para evitar uma associação entre a cessação de testes comportamentais e hora de comer. Ratos são grupo alojado, alimentar cada rato separadamente por 1h, se colocar ratos de volta para a condição de habitação grupo.
- Antes do início do estudo, atribuir aleatoriamente cada rato para uma das duas versões dos horários de treinamento (A ou B) e mantê-las na sua versão designada durante todo o treinamento e os procedimentos de SAT.
- Daily executando o procedimento
- Don EPI apropriado.
- Poder-se câmaras operante e o computador.
- Verificar que os dispensadores de pelota estão cheios de pelotas e que a máscara é inserida na frente da tela sensível ao toque.
- , Certifique-se que cada caixa está funcionando corretamente, verificando-se que o alimentador corretamente é distribuição alimentar e a tela, luzes, e Tom estão trabalhando. Um cronograma de teste de caixa simples pode ser escrito para o efeito e a nossa é disponível mediante pedido.
- Carregar o horário correto em cada caixa, prestando atenção para a versão apropriada (ou seja,, A ou B). Informações relevantes sobre o animal de entrada ID, sexo, condição experimental, as iniciais do usuário e outras notas se necessário (por exemplo, 1 dia de infusão).
- Recuperar ratos do quarto de colônia e colocá-los na caixa apropriada.
- Iniciar a sessão.
- Desempenho do relógio através da câmera de vídeo set-up no início da sessão durante alguns minutos para assegurar que tudo está funcionando corretamente. Verificar periodicamente o desempenho.
- Uma vez que uma sessão está completos, gravar dados de resumo (por exemplo, acessos por cento, por cento CRs, omissões por cento) e quaisquer problemas no caderno.
- Limpe cada câmara com 10% de etanol e substituir a roupa de cama entre as séries de animais.
- Depois de executar o conjunto final de ratos para o dia, limpe as câmaras completamente com 10% de etanol, garantindo que a grade de piso é tão limpa quanto possível e substituir a roupa de cama.
- Backup de dados em um servidor de nuvem e extrair todos os dados críticos.
- Poder material.
- Executar animais ao mesmo tempo nas mesmas caixas de cada dia.
- Executar ratos 5-6 dias por semana (corremos nossos ratos 6 dias por semana).
4. Solução de problemas do comportamento
Nota: é normal para um desempenho a cair quando os ratos são uma transição para a próxima fase de modelagem (ou seja, forma do nariz Poke para treinamento agenda 1, formação programação 1 para 2 de cronograma de treinamento, Programação de treinamento 2 para SAT). No entanto, se o desempenho não melhorar ao longo do tempo, ou se um rato estava realizando bem e então de repente para um bom desempenho, mais muitas vezes o problema é com restrição alimentar.
- Questões de restrição alimentar Troubleshooting
- se a restrição alimentar é uma questão de suspeita, cuidado com o rato executar a tarefa para ajudar a diagnosticar onde reside o problema e verificar os números de omissão, particularmente entre a sessão.
- Se um rato tem altas omissões, especialmente se eles aumentam no bloco 3 e senta calmamente na caixa, não realizando, reducalimento diário e quantidade de 1G e monitorar a situação para determinar se o desempenho é melhor.
- Se um rato tem altas omissões, impacientemente pokes a tela e corre para a frente e para trás para a porta ao longo da sessão, aumentar a quantidade de comida diária por 1G e monitorar a situação para determinar se o desempenho é melhor.
- Em casos onde é difícil de dizer se um rato é over - ou desnutridos, aumentar a quantidade de comida para 2 dias e monitorar o desempenho. Se o desempenho não melhora, ou fica pior, diminuir a quantidade de comida para 2 dias e monitora o desempenho do
- se o desempenho não melhorar depois de ajustar a restrição alimentar, se mover o rato para uma mais fácil programado como próximo detalhado.
- Solução de problemas desempenho em diferentes horários de treinamento
Nota: soltar um rato baixo desempenho se seu tempo de aquisição for superior a dois desvios-padrão acima o número médio de dias que leva um animal de seu mesmo sexo para atingir os critérios em que horário. Nós fizemos sugestões com base em nossos dados para cortes para ratos Sprague-Dawley, mas esses números podem precisar ser ajustada para diferentes cepas.- 1 de programação de treinamento: para programação de treinamento 1, soltar Sprague-Dawley machos se eles não podem adquirir após 36 dias e soltar as fêmeas se eles não adquiriram depois de 48 dias.
- 2 do cronograma de treinamento: se um rato ' s desempenho na formação horário 2 estagna abaixo critérios para 12 dias seguidos e uma questão de restrição de alimentos tem sido excluída, mova o rato para treinamento agenda 1 por um período mínimo de 5 dias ou até que ele atinja os critérios. Se o rato não atinge os critérios na formação programação 1 depois de 12 dias, solte o rato do estudo. Se o rato passa 1 cronograma de treinamento e é movido de volta para 2 programação de treinamento, mas não melhora após 36 e 42 dias para machos e fêmeas, respectivamente, depois de inicialmente começar 2 programação de treinamento, em seguida, solte o rato do estudo.
- SAT: se um rato ' s desempenho em sab estagna abaixo critérios para 12 dias seguidos e uma questão de restrição de alimentos tem sido excluída, mova o rato para treinamento agenda 1 por um período mínimo de 5 dias ou até que eles atinjam os critérios. Se o rato não atinge os critérios na lista 1 em 12 dias, solte o rato do estudo. Se o rato passa 1 cronograma de treinamento e é movido para o SAT, mas não melhora após 41 e 28 dias para machos e fêmeas, respectivamente, depois de inicialmente começar SAT, solte o rato do estudo.
- Solução de outros problemas de
- se um rato desenvolve um viés de lado (ou seja, consistentemente Pontuação > 70% hits e < 40% corretas rejeições, ou vice-versa) enquanto a formação horário 2 ou SAT, mova o rato para Formação de fase 1, que tem ensaios de correção que incentivam o rato para responder a ambas as áreas de resposta. Mantenha o rato 1 cronograma de treinamento para um mínimo de 5 dias ou até que eles atinjam os critérios. Soltar o rato do estudo se não for atendida após 12 dias critérios na formação de programação 1.
- Consultar o pessoal veterinário imediatamente se um rato para de comer, desenvolve porfirina ou caso contrário está mostrando sinais de dor e angústia.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Para a maioria dos estudos de atenção, ratos são treinados para critérios em sab e então manipulações de interromper ou melhorar a atenção são executadas. Dados de aquisição não é normalmente apresentados, mas fazemo-lo aqui para ilustrar preços de aquisição em ratos Sprague-Dawley machos e fêmeas. Para este fim, podemos quantificar o número médio de dias para atingir os critérios em SAT (começando na fase de cutucar nariz). Observe que alguns ratos nunca chegou a critérios (n = 5 machos e n = 1 feminino). Os dias medianos que levou masculino (n = 24) e feminino (n = 16) ratos para alcançar critérios (incluindo aqueles que não atingiram os critérios no tempo previsto) foi 54,5 dias e 62 dias, respectivamente (Figura 1). Não havia nenhuma diferença significativa entre os sexos no tempo de aquisição [U = 165,5, Z = -0,75, p =. 469]. É notável que a variabilidade no tempo de aquisição aparece maior no sexo masculino [intervalo interquartil (IQR) = 60.25] que as fêmeas [IQR = 29.50].
Uma vez que os ratos adquiriram a linha de base, avaliamos as quatro medidas de desempenho típico nos machos (n = 19) e fêmeas (n = 15): hits por cento, porcentagem CRs, VI e omissões por cento. Baseia-se as percentagens de hits e correta de rejeições, machos e fêmeas foram precisos da mesma forma por sinalizado [t(32) =.929, p =. 360] e ensaios não-sinalizado [t(32) =.071, p =. 394] (Figura 2ab). Como é típico de SAT, precisão em ensaios não-sinalizado foi a melhor precisão em ensaios sinalizados [F(1, 32) = 129.99, p <. 001], mas isso não foi diferente entre os sexos (ou seja, nenhum efeito principal de sexo ou interação, [Fdo < 1]). Conforme observado, VI é calculado como uma medida global do desempenho de atenção, e os machos e as fêmeas tinham semelhante VIs [t(32) =.419, p =. 678] (Figura 2C). Omissões foram comparáveis entre os sexos e baixa, conforme o esperado com um procedimento de restrição alimentar ideal, [t(32) = 1.61, p =. 118] (Figura 2d). Para testar o desempenho em toda a sessão, nós avaliou as alterações entre os três blocos de julgamento e não encontramos nenhuma diferença em sucessos [F(2, 64) = 2,75, p =. 071] e corrigir rejeições [F(2, 64) = 1.871, p =. 162]. Ao comparar o desempenho através de blocos de julgamento, não havia diferenças sexo para hits e rejeições corretas [Fdo < 1] ou interações entre sexo e bloco experimental para hits [F(2, 64) = 1.427, p =. 247] e corrigir [rejeições F < 1] (dados não mostrados).
Durante o SAT, os sinais variam entre 500 ms, 50 ms e 25 ms e desempenho tipicamente declina com o menor sinal durações10,17,18. Podemos replicar que encontrar aqui, como declinado com duração de sinal de precisão [F(2, 64) = 90.21, p <. 001] (Figura 3a). Testes de post-hoc de Bonferroni revelaram uma diminuição significativa na porcentagem hits de 500 ms para 50 ms (p <.001) e novamente a partir de 50 ms a ms 25 (p =.017. Desempenho foi comparável entre machos e fêmeas: não havia nenhum efeito principal do sexo [F(1, 32) = 1,74, p =. 267] ou sexo pela interação de duração do sinal [F(2, 64) = 1,66, p =. 198].
Uma maneira de aumentar as demandas de atenção é pelo piscar o houselight durante o segundo bloco de ensaios. Nós testamos um subconjunto de ratos com este distrator (masculino n = 14, feminino n = 13). Como esperado, houve um efeito principal da sessão [F(2, 50) = 37.73, p <. 001], tal que o desempenho diminuiu durante o segundo bloco de ensaios (post-hoc, bloco 1, vs. 2, p <.001), mas recuperou uma vez que o Distrator cessou em bloco 3 (post-hoc, bloco 1 vs. 3, p =.862) (Figura 3b). Houve um efeito principal do sexo [F(1, 25) = 11,29, p =. 003], tal que fêmeas executadas pior do que os machos durante a sessão de distrator. Embora não houvesse nenhuma interação entre sexo e desempenho para os blocos de julgamento [F(2, 50) =.582, p <. 563], planejadas comparações entre machos e fêmeas em cada bloco experimental revelaram que, apesar de machos e fêmeas realizaram da mesma forma no bloco 1 (p =.144), fêmeas realizada pior no bloco 2 (p =.046) e bloco 3 (p =.003), a sugerir que o Distrator é mais interrupções nas fêmeas e sua recuperação é pior.
Figura 1: dias para critérios. O número médio de dias para chegarmos a critérios sobre a tarefa de atenção sustentada (SAT) foi semelhante entre machos e fêmeas. No entanto, tempos de aquisição masculino são mais variável, como eles têm um intervalo interquartil maior (IQR) que as fêmeas. Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.
Figura 2: medidas de desempenho de SAT. (A, B) Ratos machos e fêmeas têm precisão semelhante em ensaios de sinal, conforme indicado com hits por cento e os ensaios não-sinal, conforme indicado com percentuais corretas rejeições (CRs). (C) a vigilância índice (VI), uma medida global de atenção, também foi semelhante em ambos os sexos. (D) omissões foram baixos e comparáveis entre machos e fêmeas. Os dados são apresentados como média ± erro padrão da média (SEM). Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.
Figura 3: desempenho SAT através de sinal durações e na presença de um distrator Visual. (A) sinais durante SAT variam de duração. Como esperado, batidas por cento (ou seja, precisão nos ensaios de sinal) declina como sinal durações ficam mais curtas e este efeito foi semelhante em ambos os sexos. Asterisco indica uma diferença significativa da duração do sinal de 500 ms. (B) o desempenho sobre o Distrator SAT sessão normalmente é medido com o VI. Como esperado, a introdução de um distrator (ou seja, houselight piscando) no bloco 2 (ilustrado com uma barra preta) diminuiu a VI em machos e fêmeas. As fêmeas tinham um VI inferior ao longo da sessão que os machos. Asterisco indica uma diferença significativa do bloco 1 e bloco 3 (p < 0,05). Os dados são apresentados como média ± SEM. clique aqui para ver uma versão maior desta figura.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Déficits na atenção sustentada são relatados em neuropsiquiátrica, desenvolvimento neurológico e Neurodegenerativas Transtornos1,2,3, mas os processos que contribuem para o ideal versus atenção interrompida são Understudy. Isto é, em parte, porque o equipamento especializado limita a fácil adaptação de tarefas de atenção de roedores. No entanto, touchscreen câmaras estão abordando esse assunto, fornecendo a flexibilidade para executar uma variedade de tarefas cognitivas com um pedaço de equipamento20,22. Aqui nós adicionamos à lista crescente de tarefas cognitivas disponíveis para telas sensíveis ao toque de20,22 por detalhando como implementar touchscreen SENTOU-se para ratos Sprague-Dawley machos e fêmeas. Uma comparação de desempenho entre os sexos revelou taxas comparáveis de aquisição. No entanto, os machos foram mais variável em alcançar os critérios que as fêmeas. Esta diferença de sexo interessante pode estar relacionada com a variabilidade alta característica dos machos, mas não as fêmeas, dos ratos Sprague-Dawley estirpe6 e certamente merece mais investigação. Depois de atingir os critérios de base, machos e fêmeas tinham precisão comparável no sinal e ensaios não-sinal, que se reflectiu-se nas pontuações VI. Desempenho no sinal e ensaios não-sinal manteve-se semelhante em todos os três blocos de julgamento em ambos os sexos, que é consistente com a maioria dos relatórios de desempenho constante em toda a sessão na versão tradicional do SAT quando ratos adultos jovens sem lesões são avaliados26,,27,28,29,,30, mas ver10,11. Omissões foram similarmente baixas em ambos os sexos, indicando que os machos e as fêmeas foram motivadas para executar a tarefa. Note que em nosso laboratório, nós mantemos nossos ratos em um ciclo claro/escuro reverso (luzes apagadas às 08:30). No entanto, o procedimento de SAT tradicional tem sido conduzido com ratos mantidos em um ciclo regular de claro/escuro com testes durante o período de luz (por exemplo,10,17). Desempenho cognitivo em SAT vem para servir como um zeitgeber provavelmente, minimizando o impacto que a hora do dia tem em testes31.
Uma característica do SAT é o uso de durações diferentes do sinal. Há evidências de que a introdução de múltiplos sinaliza as demandas de atenção de impostos e se envolve o sistema colinérgico porque introduz incerteza esperada32,33. Além disso, diferentes durações de sinal permite que as comparações entre breves sinais, que são difíceis de detectar, e sinais de mais. Como esperado, os presentes resultados demonstram que o desempenho diminuído em ambos os sexos como durações de sinal diminuídas. É provável que a maioria dos investigadores usarão SAT para teste de fatores que aumentam ou diminuem a atenção. Comparando o desempenho em durações diferentes do sinal pode ser útil nestas situações. Por exemplo, um efeito de um putativo cognitivo reforço composto pode ser mais pronunciado nas durações mais curtas do sinal e visualização, portanto, o efeito da droga em durações de sinal específico pode fornecer um quadro mais completo da eficácia.
Uma abordagem de atenção demandas crescentes é apresentar um estímulo perturbador pelo piscar o houselight em uma versão da tarefa conhecida como distrator SAT. Aqui nós encontramos que apresentar este distrator durante bloco 2 prejudicada desempenho em comparação com a linha de base (ou seja, 1 bloco com nenhum distrator) em ambos os sexos. Como esperado, desempenho recuperados uma vez que o estímulo perturbador foi finalizado no bloco 3. Embora não houvesse uma interação significativa entre sexo e bloco experimental, desempenho na linha de base foi mais similar entre machos e fêmeas do que nos blocos 2 e 3, onde as fêmeas apresentou pior do que os machos, sugerindo que o efeito do distrator pode ser mais pronuncia-se em fêmeas. No entanto, o fato de que o Distrator efetivamente prejudicada a atenção em machos e fêmeas indica que distrator SAT pode ser utilizada para aumentar a demanda atenção em ambos os sexos. Aqui usamos a manipulação do distrator típico de piscar o houselight, mas com touchscreen câmaras lá poderiam ser outras maneiras de introduzir um estímulo perturbador. Por exemplo, uma tarefa de desempenho contínuo de touchscreen para roedores apresenta dicas visuais na tela sensível ao toque que são adjacentes ao estímulo alvo para aumentar as demandas de atenção8. Uma manipulação semelhante é possível com SAT, embora nós não testei isso ainda.
Uma desvantagem desta tarefa é que demora muito tempo atingir os critérios de base de ratos. No entanto, esta duração do treinamento é uma característica de muitas atenção tarefas7,34,35, então SAT não é uma exceção. Para facilitar o treinamento, atenção ao desempenho ao longo das fases de modelagem e treinamentos é crucial, para que as intervenções podem ser feitas para resolver problemas de desempenho em tempo hábil. Em nossa experiência, uma queda brusca no desempenho mais frequentemente é atribuível a um problema com a restrição alimentar. Quando suspeita de um problema de restrição alimentar, é fundamental para avaliar a omissões, assistir o desempenho do rato durante a tarefa e rever os registros diários de peso para determinar como ajustar a alimentação. Embora mais raro, um viés de lado também podem desenvolver. Esta questão é facilmente Sanada, no entanto, por ficar para trás o rato para treinamento agenda 1, que exige correção forçada ensaios. Outros fatores importantes a considerar são ratos de treinamento ao mesmo tempo cada dia e garantir que eles são executados no horário adequado. Aderir a essas dicas otimiza este procedimento comportamental.
No estudo atual, nós testamos a atenção na cepa de ratos Sprague-Dawley. Esta variedade foi escolhida com base em nosso trabalho anterior, investigando o comportamento masculino e feminino Sprague-Dawley ratos18,19,36,37. Outras cepas, incluindo Noruega Fischer/Brown híbrido ratos, Wistar e Long-Evans ratos, foram testados com a versão original do SAT 10,32,38. Assim, é provável que o procedimento descrito aqui pode ser utilizado com uma variedade de cepas de rato. Na verdade, dado que cepas pigmentadas, em comparação com a cepa de ratos Sprague-Dawley, albino tem melhor acuidade visual 39, é possível que cepas pigmentadas iria adquirir SAT fÁster (mas veja referência21). Movendo-se além de ratos, uma mouse versão do SAT foi desenvolvida para uso em câmaras operante tradicional40. As versões touchscreen de outras tarefas de atenção (por exemplo, a tarefa de tempo de reação serial escolha cinco e desempenho contínuo) são usadas com ratos8,41, então é provável que os parâmetros detalhados aqui podem ser adaptados para testar os ratos em uma versão do SAT touchscreen.
Em resumo, o presente protocolo detalha como implementar SAT para touchscreen câmaras operante em ratos. Dada a crescente popularidade deste equipamento, touchscreen SAT pode ser facilmente empregado em muitos laboratórios com este protocolo. Outro aspecto importante de nosso projeto de estudo é que comparamos o desempenho de SAT entre os sexos. Enquanto ambos os sexos foram avaliados usando o tradicional SAT10,11, muitas tarefas de touchscreen de atenção foram desenvolvidas utilizando apenas masculinos roedores ou não comparar o desempenho de machos e fêmeas8,19 ,,41. Nós achamos que o touchscreen SAT aquisição e desempenho de critérios foram semelhantes em machos e fêmeas, sugerindo que, como com tradicional SAT, touchscreen SAT é um teste igualmente válida de atenção em ambos os sexos. A importância da validação de procedimentos comportamentais nos roedores do sexo masculinos e femininos está se tornando cada vez mais crítica por causa de recentes esforços implementados pelos institutos nacionais de saúde que exigem a consideração do sexo como uma variável biológica; uma política que pretende abordar o preconceito masculino histórico em pesquisa básica42. Os presentes resultados indicam que não há nenhuma razão para excluir ratos fêmeas em um estudo projetado para touchscreen SAT. Além disso, porque touchscreen SAT desempenho é semelhante em homens e mulheres na linha de base, qualquer manipulação vista melhorar ou prejudicar a atenção, o que resulta em uma diferença de sexo não é complicada por diferenças de sexo em medidas de desempenho de linha de base. Assim, a crescente adoção das câmaras de tela sensível ao toque e movimento para incluir roedores femininos em pesquisa básica estudos fazer touchscreen sentou-se uma abordagem particularmente útil estudar sustentar a atenção.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Os autores não têm nada para divulgar.
Acknowledgments
Gostaríamos de agradecer a Joy Bergmann, Attilio Ceretti, Sarah Cohen, Nina Duncan, Aaron Hall, Hanna Lefebo, Madeleine Salvatore por sua ajuda com o comportamento e Dr. Vinay Parikh, Dr. Brittney Yegla e Rob Cole para seus conselhos sobre os parâmetros de SAT. Gostaríamos de agradecer o Dr. Jill McGaughy dicas sobre o processo de formação. Este trabalho foi financiado pelos institutos nacionais de subsídio de saúde 092438 NIMH e National Science Foundation grant 1552416 IOS para D.A.B.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Bussey-Saksida Rat Touch Screen Chambers Easy-Install System | Lafayette Instrument | 80604-20 | Includes: Touch Screen, Chamber base with perforated floors, Large Feeder Reward Area (44.5 mm wide x 92.5 mm high), Speaker, Houselight, Tone Generator, SAC; Trapezoidal animal working area is 126 mm wide at the Feeder, 240 mm wide and 332 mm deep at the Screen, and 300 mm in height |
| Sound Attenuation Cubicles (SAC) | Lafayette Instrument | 80604-20 | Attenuation to approximately 35 dB; 38 kg in weight; External dimensions: 600 mm wide x 670 mm tall x 352 mm deep; Internal dimensions: 540 mm wide x 610 mm tall x 532 mm deep |
| Abet II Software for Touch Screens | Lafayette Instrument | 89505 | Version 2.19 |
| Whisker Multimedia | Lafayette Instrument | 80698-1 | Required for Abet II Touch Operation |
| Pellet Dispenser | Lafayette Instrument | 80209-45 | 45 mg Interchangeable Pellet Size Wheel |
| Camera | Lafayette Instrument | 80600-CAM | Filtered and focused for IR light |
| Microsoft Windows | Microsoft | Windows 7-64 bit recommended | |
| Controller PC-Touch Screen Chambers | Lafayette Instrument | 88530 | Dual Core Pentinum Processor; 2.5 GHz or greater; keyboard, mouse, and monitor; Installed PCI card, cable and expansion; Four RS232 ports; Four VGA ports |
| Dustless Precision Pellets | BioServe | F0165 | 45 mg |
| Black Acrylic Mask | Everything Plastic | Custom Product | Black polycarbonate with one matte finish side, 3.18 mm thick; Central circular opening, 28.58 mm diameter, 107.95 mm from the bottom, centered between the left and right side; Two square response areas, 28.57 mm x 28.57 mm each positioned below and off center, one 85.725 mm from the left and one 85.725 mm from right side, and both 34.925 mm from the bottom. |
| Utility Cart | Fisher Scientific | 11-954-754 | 30.75 in. x 18.38 in x 33 in |
| Black towel | Large enough to cover cages for animal transport | ||
| Headlights with red lights | Energizer | HDL33A2E | LED white and red light |
References
- Cornblatt, B. A., Keilp, J. G. Impaired attention, genetics, and the pathophysiology of schizophrenia. Schizphr Bull. 20 (1), 31-46 (1994).
- Gmehlin, D., et al. Attentional Lapses of Adults with Attention Deficit Hyperactivity Disorder in Tasks of Sustained Attention. Arch Clin Neuropsychol. 31 (4), 343-357 (2016).
- Perry, R. J., Hodges, J. R. Attention and executive deficits in Alzheimer's disease. A critical review. Brain. 122 (Pt 3), 383-404 (1999).
- Sarter, M., Givens, B., Bruno, J. P. The cognitive neuroscience of sustained attention: where top-down meets bottom-up. Brain Res Rev. 35 (2), 146-160 (2001).
- Smilek, D., Carriere, J. S. A., Cheyne, J. A. Failures of sustained attention in life, lab, and brain: Ecological validity of the SART. Neuropsychologia. 48 (9), 2564-2570 (2010).
- Becker, J. B., Prendergast, B. J., Liang, J. W. Female rats are not more variable than male rats: a meta-analysis of neuroscience studies. Biol Sex Differ. 7 (1), 34 (2016).
- Cope, Z. A., Young, J. W. The Five-Choice Continuous Performance Task (5C-CPT): A Cross-Species Relevant Paradigm for Assessment of Vigilance and Response Inhibition in Rodents. Curr Protoc Neurosci. 4, 9-56 (2017).
- Kim, C. H., et al. The continuous performance test (rCPT) for mice: a novel operant touchscreen test of attentional function. Psychopharmacology (Berl). 232 (21-22), 3947-3966 (2015).
- Robbins, T. W. The 5-choice serial reaction time task: behavioural pharmacology and functional neurochemistry. Psychopharmacology (Berl). 163 (3-4), 362-380 (2002).
- McGaughy, J., Sarter, M. Behavioral vigilance in rats: task validation and effects of age, amphetamine, and benzodiazepine receptor ligands. Psychopharmacology (Berl). 117 (3), 340-357 (1995).
- McGaughy, J., Sarter, M. Effects of ovariectomy, 192 IgG-saporin-induced cortical cholinergic deafferentation, and administration of estradiol on sustained attention performance in rats. Behav neurosci. 113 (6), 1216-1232 (1999).
- St Peters, M., Cherian, A. K., Bradshaw, M., Sarter, M. Sustained attention in mice: expanding the translational utility of the SAT by incorporating the Michigan Controlled Access Response Port (MICARP). Behav Brain Res. 225 (2), 574-583 (2011).
- Demeter, E., Sarter, M., Lustig, C. Rats and humans paying attention: cross-species task development for translational research. Neuropsychology. 22 (6), 787-799 (2008).
- McGaughy, J., Kaiser, T., Sarter, M. Behavioral vigilance following infusions of 192 IgG-saporin into the basal forebrain: selectivity of the behavioral impairment and relation to cortical AChE-positive fiber density. Behav neurosci. 110 (2), 247-265 (1996).
- Gritton, H. J., et al. Cortical cholinergic signaling controls the detection of cues. Proc Natl Acad Sci. 113 (8), E1089-E1097 (2016).
- Burk, J. A., Sarter, M. Dissociation between the attentional functions mediated via basal forebrain cholinergic and GABAergic neurons. Neuroscience. 105 (4), 899-909 (2001).
- Parikh, V., Bernard, C. S., Naughton, S. X., Yegla, B. Interactions between Aβ oligomers and presynaptic cholinergic signaling: Age-dependent effects on attentional capacities. Behav Brain Res. 274, 30-42 (2014).
- Cole, R. D., Kawasumi, Y., Parikh, V., Bangasser, D. A. Corticotropin releasing factor impairs sustained attention in male and female rats. Behav Brain Res. 296, 30-34 (2016).
- Wicks, B., et al. Method for testing sustained attention in touchscreen operant chambers in rats. J Neurosci Meth. 277, 30-37 (2017).
- Hvoslef-Eide, M., Nilsson, S. R., Saksida, L. M., Bussey, T. J. Cognitive Translation Using the Rodent Touchscreen Testing Approach. Curr Top Behav Neurosci. 28, 423-447 (2016).
- Bussey, T. J., et al. The touchscreen cognitive testing method for rodents: how to get the best out of your rat. Learn Mem. 15 (7), 516-523 (2008).
- Mar, A. C., et al. The touchscreen operant platform for assessing executive function in rats and mice. Nat Protoc. 8 (10), 1985-2005 (2013).
- Gill, T. M., Sarter, M., Givens, B. Sustained visual attention performance-associated prefrontal neuronal activity: evidence for cholinergic modulation. J Neurosci. 20 (12), 4745-4757 (2000).
- Mazure, C. M., Jones, D. P. Twenty years and still counting: including women as participants and studying sex and gender in biomedical research. BMC Womens Health. 15 (1), 94 (2015).
- Toth, L. A., Gardiner, T. W. Food and Water Restriction Protocols: Physiological and Behavioral Considerations. J Am Assoc Lab Anim Sci. 39 (6), 9-17 (2000).
- Nuechterlein, K. H., Luck, S. J., Lustig, C., Sarter, M. CNTRICS Final Task Selection: Control of Attention. Schizo Bull. 35 (1), 182-196 (2009).
- Burk, J. A., Herzog, C. D., Porter, M. C., Sarter, M. Interactions between aging and cortical cholinergic deafferentation on attention. Neurobiol Aging. 23 (3), 467-477 (2002).
- St Peters, M., Demeter, E., Lustig, C., Bruno, J. P., Sarter, M. Enhanced control of attention by stimulating mesolimbic-corticopetal cholinergic circuitry. J Neurosci. 31 (26), 9760-9771 (2011).
- Turchi, J., Holley, L. A., Sarter, M. Effects of nicotinic acetylcholine receptor ligands on behavioral vigilance in rats. Psychopharmacology. 118 (2), 195-205 (1995).
- Newman, L. A., McGaughy, J. Attentional effects of lesions to the anterior cingulate cortex: How prior reinforcement influences distractibility. Behav neurosci. 125 (3), 360-371 (2011).
- Gritton, H. J., Stasiak, A. M., Sarter, M., Lee, T. M. Cognitive Performance as a Zeitgeber: Cognitive Oscillators and Cholinergic Modulation of the SCN Entrain Circadian Rhythms. PLOS ONE. 8 (2), e56206 (2013).
- Newman, L. A., McGaughy, J. Cholinergic deafferentation of prefrontal cortex increases sensitivity to cross-modal distractors during a sustained attention task. J Neurosci. 28 (10), 2642-2650 (2008).
- Yu, A., Dayan, P. Uncertainty, Neuromodulation, and Attention. Neuron. 46 (4), 681-692 (2005).
- Bari, A., Dalley, J. W., Robbins, T. W. The application of the 5-choice serial reaction time task for the assessment of visual attentional processes and impulse control in rats. Nat Protoc. 3 (5), 759-767 (2008).
- Bhandari, J., Daya, R., Mishra, R. K. Improvements and important considerations for the 5-choice serial reaction time task-An effective measurement of visual attention in rats. J Neurosci Meth. 270, 17-29 (2016).
- Bangasser, D. A., Shors, T. J. The hippocampus is necessary for enhancements and impairments of learning following stress. Nat Neurosci. 10 (11), 1401-1403 (2007).
- Wiersielis, K. R., et al. Sex differences in corticotropin releasing factor-evoked behavior and activated networks. Psychoneuroendocrinology. 73, 204-216 (2016).
- Parikh, V., et al. Diminished trkA receptor signaling reveals cholinergic-attentional vulnerability of aging. Eur J Neurosci. 37 (2), 278-293 (2013).
- Prusky, G. T., Harker, K. T., Douglas, R. M., Whishaw, I. Q. Variation in visual acuity within pigmented, and between pigmented and albino rat strains. Behav Brain Res. 136 (2), 339-348 (2002).
- Peters, M., Cherian, A. K., Bradshaw, M., Sarter, M. Sustained attention in mice: Expanding the translational utility of the SAT by incorporating the Michigan Controlled Access Response Port (MICARP). Behav Brain Research. 225 (2), 574-583 (2011).
- Romberg, C., Mattson, M. P., Mughal, M. R., Bussey, T. J., Saksida, L. M. Impaired Attention in the 3xTgAD Mouse Model of Alzheimer's Disease: Rescue by Donepezil (Aricept). J Neurosci. 31 (9), 3500-3507 (2011).
- Clayton, J. A., Collins, F. S. NIH to balance sex in cell and animal studies. Nature. 509 (7500), 282-283 (2014).
