Summary
Nøyaktig vurdering av smerte respons i en nevropatisk dyremodell er avgjørende å undersøke i Patofysiologien ved smerte sykdommer og utvikle nye smertestillende. Vi presenterer en følsom og objektive metode for å bestemme sensorisk funksjonen av gnagere hind pote av et automatisert gangart analysesystem.
Abstract
Von Frey testen er en klassisk metode som har vært mye brukt til å undersøke funksjonen sensoriske nevropatisk smerte dyr. Men har det noen ulemper som subjektive data og kravet om en dyktig og erfaren eksperimentator. Hittil har en rekke endringer forbedret metoden von Frey, men fortsatt har noen begrensninger. Nylige rapporter har antydet at gait analyse produserer mer nøyaktig og objektive data fra nevropatisk dyrene. Denne protokollen demonstrerer hvordan å utføre automatiserte gait analyse for å fastslå graden av nevropatisk smerte i mus. Etter flere dager av acclimation, fikk mus lov å gå fritt på glassgulvet å belyse fotavtrykk. Deretter kvantifisering av fotavtrykk og gangart ble utført gjennom videoklipp med automatisk analyse av ulike gangavstand parametere, for eksempel område av paw print, swing tid, vinkelen på labben, etc.
Hovedformålet med denne studien er å beskrive metodikk automatisert gait analyse og kort sammenligne den med data fra klassisk sensoriske testen bruker von Frey filament.
Introduction
Patologiske forandringer av nervesystemet indusert av traumer, metabolske dysfunksjon, betennelse, infeksjon, iskemi, eller autoimmune sykdommer noen ganger føre til nevropatisk smerte, som er definert som en smerte som oppstår som en direkte konsekvens av en lesjon eller sykdom påvirker somatosensory system1. Dessverre konvensjonelle analgetika vanligvis produserer ikke tilstrekkelig smerte lindring2nevropatisk smerte er vanligvis uutholdelig. En viktig funksjon i nevropatisk smerte inneholder spontan og stimulering-utløste (dvs., allodynia og hyperalgesia) smerter. Allodynia er et nociceptive svar som oppstår vanligvis ikke-smertefulle stimuli, som lett berøring eller varm stimulering. Hyperalgesia angir et forbedret smerte svar til skadelige mekanisk og/eller termisk stimuli3. Selv om disse to symptomer både kritisk svekke pasientens livskvalitet, er mekanisk allodynia fremkalt av mild taktil stimulering mest skjerpende symptomet fordi myk kontakt er vanskelig å unngå i hverdagen.
Undersøke den underliggende mekanismen og nye smertestillende for behandling av nevropatisk smerte, nøyaktig måling av smerte svaret er viktig. Mange nevropatisk smerte dyremodeller har utviklet nociceptive svar på hind pote området på grunn av dens høy tilgjengelighet4,5,6,7. Dermed har mest smerte svar vurderinger blitt utført på plantar eller dorsal overflaten av bakben labben ved å bruke mekaniske stimuli spesielle instrumenter, som von Frey filamenter. En av de mest brukte metoden er opp ned beskrevet av Dixon8 og senere endret versjoner9,10. Men veldig dyktig, erfarne forskere kreves for å utføre von Frey testen og resultatene kan være subjektiv.
Automatisert gangart analyse systemet kan undersøke nevrologiske og nevromuskulære lidelser ved å måle ulike parametere gange i fritt flytte gnagere. I en rekke nerve skade dyr modeller, kan graden av nociception og antinociceptive effekten av flere behandlinger vurderes uten å legge en smerte stimulering11,12,13, 14. denne analysesystem finner statisk og dynamisk gangart parametere, som: pote utskriftsområde (området fullstendig paw print som kontakter med gulvet), pote intensitet (gjennomsnittlig intensiteten av kontakte pote området), skjærende lengden (den avstanden mellom etterfølgende plasseringer av det likt poten), holdning fase (varigheten av bakken kontakt for en enkelt bakben pote), trinnet sekvens (rekkefølgen som fire paws er plassert på gulvet), svinge (varigheten swing) og swing hastighet (beregnet fra stride lengde og svinge varighet og uttrykkes som piksler per sekund). Dette dokumentet demonstrerer bruken en analysesystem og gir en kort sammenligning av data med von Frey test med kronisk innsnevring skade (CCI) nevropatisk mus.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
alle eksperimentene ble utført i samsvar med etiske retningslinjer International Association for studier av smerte og ble godkjent av institusjonelle Animal Care og bruk komiteen på Chungnam National University ( Daejeon, Sør-Korea).
1. induksjon av CCI på Sciatic Nerve
- huset mannlige ICR mus veier 20-25 g under en 12t lys/mørke syklus i kontrollerte romtemperatur (opprettholdt på 20-25 ° C) og luftfuktighet (40-60%), med gratis tilgang til mat og vann. Tillate en acclimation periode for mus i dyr omsorg rommet minst 1 uke før operasjonen.
- Under boliger, observere utseendet og virkemåten av mus og ikke bruker mus viser unormale locomotor aktivitet.
Merk: En dag før CCI kirurgi, måle mekanisk følsomheten til bakben labben ved å bruke von Frey filamenter og utføre automatiserte gait analyse for å få normal opprinnelige verdier. Deretter tilordne mus tilfeldig kontroll og eksperimentelle grupper.
- Under boliger, observere utseendet og virkemåten av mus og ikke bruker mus viser unormale locomotor aktivitet.
- På dagen, bedøve mus ved å injisere 2,2,2-tribromoethanol (250 mg/kg, intraperitoneal (IP)).
Merk: Bruk personlig verneutstyr som kirurgiske kappe, hansker og maske.- Veie 2.5 g av 2,2,2-tribromoethanol og legge 2-metyl-2-buthanol til det siste bindet av 5 mL. Holde løsningen fra lys (f.eks bruke en mørk container eller Pakk i aluminiumsfolie).
- Tillat reagenser å oppløse helt av oppvarming ved 40 ° C og omrøring for 10-30 min.
- Legg destillert vann til det endelige volumet av 200 mL og rør til blandet godt.
- Lagre dele på 4 ° C og mørkt. Etter to uker, anesthetic skal erstattes med nye dele.
- Sette inn et volum på 20 µL per 1 g kroppsvekt. For eksempel hvis kroppsvekten til musen er 25 g, gi 500 µL av løsning. Typisk varigheten av denne anestesi er 1 h.
Merk: Denne løsningen vil bli giftig når de utsettes for lys og/eller varme så vær forsiktig å unngå eksponering for lys og varme. En IP injeksjon rute anbefales.
- Når musen faller i dyp anestesi, plasserer den i drifts tabellen med dorsal side opp (dvs., liggende stilling) og sterilisere ytre midten av låret området til høyre med en 70% alkoholholdige vattpinnen.
Merk: Bekreft dyp anestesi ved å sjekke mangelen på respons å klemme eller trykk stimulans bakben paws eller hale. - Induserer CCI på høyre sciatic nerve museklikk.
- Gjør en snitt på huden rundt midten av problemsonene 1.0-1,5 cm lengde med skalpell blad.
- Rett ut dissekere lårmuskelen med mikro-mygg hemostat å avsløre ischias nerven.
- Ligate utsatt sciatic nerve 3 ganger med 1.0-1,5 mm mellomrom med en 4-0 chromic catgut Sutur.
Merk: Kontroller løs ligations ved å binde av ischias nerven til mild risting vises på ipsilateral bakben labben. Den humbug gruppen mus fikk samme kirurgisk åpning under like forhold unntatt uten nerve ligation.
- Nær kirurgisk åpningen med 3-4 enkle avbrutt suturer bruker 5-0 silke og sterilisere med povidon jod ved desinfisering av ytre kirurgi.
- Etter operasjonen, plasserer musen i et rent bur på en varmeputen. Når dyrene er bedøvelsen returnere dem til deres hjem bur.
Merk: I denne studien antibiotika ble ikke brukt. CCI + GBP gruppe mottatt IP gabapentin (nok) på en dose av 50 mg/kg én gang daglig som en positiv kontroll.
2. Måling av mekaniske Allodynia (von Frey Test)
Merk: vurdere frekvensen av uttak respons til mekanisk stimuli ved hjelp av 1 g von Frey filament plantar overflaten av ipsilateral bakben labben.
- På hver test dag, bringe mus til atferdsdata test room og acclimate musene i sine egne hjem bur i minst 30 min før test
Merk: Bruk personlig verneutstyr som kirurgiske kappe, hansker og maske. - Sette musen i en gjennomsiktig akryl boks metallnett etasje og acclimate musen for 30 min.
- Forsiktig gjelder 1 g von Frey filament plantar overflaten av bakben labben til filament bøyer.
- Bruk filament stimulans til ipsilateral hind pote 10 ganger med minst 10 s mellomrom og registrere resultatet.
Merk: I denne studien vises antall pote uttak svar fra 10 forsøk som prosent av pote uttak frekvens (PWF, %). Von Frey testen ble utført hver to dager etter CCI operasjonen.
3. Utføre automatiserte Gait analyse
Merk: analysesystem gangart visualiserer hver paw print mens dyrene går og analyserer automatisk ulike gangart parametere, slik som paw print, pote intensitet, skrittlengde, holdning fase, trinnet sekvens, swing, swing hastighet, etc. i denne studien vi viste pote utskriftsområde og enkelt holdning etter konvertere dataene til prosenten endre mellom kontralateral venstre mot ipsilateral bakben rett pote. Dermed angir resultatet 50% at størrelsen på paw print og varigheten av pote området i kontakt med gulvet, mellom venstre og høyre side er samme. I tillegg lavere dataverdier nærmer 0% angir at både størrelsen og varigheten av kontakt redusert i ipsilateral bakben labben i forhold til siden kontralateral (se B-panelet i figur 2 og Figur 3).
- Til å akkumulere, holde musene i gangart analyse enheten i 10 min en gang om dagen begynner 5 dager før operasjonen CCI.
Merk: Gangart analyse test inkludert acclimation bør utføres i mørket. - Bringe mus til test rommet for gait analyse og acclimate inne deres hjem bur i minst 30 min før test
- i oppsettkategorien i programmenyen, kan du angi den " gangvei lengde " 30 cm, og sett den " maksimal kjøre varighet " 5 s og " maksimal kjøre variasjon " til 50%.
- Velg et registrert kamera fra det ' setup ' kategorien i ' programmet ' menyen.
- Velg " åpne oppkjøpet " fra den ' erverve ' kategorien i det ' programmet ' menyen.
- Etter statusmeldingen, klikk på ' fest bakgrunn ' for å ta et bakgrunnsbilde av Tom (dvs., tom) gangveien.
- Klikk på ' starte oppkjøpet ' knappen og plassere musen på gangveien; innspillingen starter automatisk etter bevegelse av musen.
Merk: Når musen tydelig går over gangveien, programmet automatisk klassifiserer dette trekket som " medgjørlig kjøre " med et grønt ikon. Hvis programvaren ikke oppdage fotavtrykk, eksperimentator vises et rødt ikon og må gjenta innspillingen. Minst fem vellykket kompatibel går kreves for analyse. - Etter testen, Velg ' klassifisere går ' fra kategorien anskaffe det ' programmet ' menyen.
- Velg går for analyse og klikk den ' auto klassifisere ' knappen.
Merk: Etter klassifisering, alle flygninger parametere lagres automatisk, og eksperimentator finner resultatene ved å klikke " Vis kjøre statistikk " på rullegardinmenyen analyser.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Vi har utført von Frey testen og automatisert gait analyse i CCI mus til 10 dager etter CCI kirurgi. Gjentatte målinger av toveis variansanalyse (ANOVA) bestemmer den samlede effekten statistisk analyse og Dunnett's post-hoc analyse ble gjennomført for å fastslå den p-verdien blant de eksperimentelle gruppene.
Resultatene som vises i figur 1 angir time course of klassisk von Frey test-data. PWF (%) av CCI mus var økt 2 dager etter CCI kirurgi og vedvarende 10 dager mot gruppen humbug. I CCI positiv kontrollgruppen, GBP (50 mg/kg, IP, én gang daglig for 10 dager starter 1 dag etter operasjonen) betydelig bedret CCI forbedret PWF. I gruppen humbug panelet A PFW (%) var 8.00 ± 5.83 på timepoint før operasjonen (Pre), 6.00 ± 2,45 på dag 2, 4.00 ± 2.45 på dag 4, 2,00 ± 2,00 på dag 6, 4.00 ± 22.45 på dag 8 og 6.00 ± 2.45 på dag 10. I gruppen CCI PFW (%) var 2,86 ± 1.84 på Pre, 61.43 ± 5.95 på dag 2, 68.57 ± 4.59 på dag 4, 72.86 ± 5.22 på dag 6, 75.71 ± 6,49 på dag 8 og 75.71 ± 3.69 på dag 10. CCI + GBP gruppen PWF (%) var 2,50 ± 1,43 på Pre, 57.50 ± 5.22 på dag 2, 50.00 ± 4.04 på dag 4, 45.00 ± 4.81 på dag 6, 46.25 ± 5.65 på dag 8 og 47,50 ± 4,88 på dag 10. Området under kurven (AUC) var B-panelet 23.00 ± 6.00 i humbug, 317.86 ± 17.04 i CCI og 223.75 ± 17.05 i CCI + GBP-gruppen.
Resultatene som vises i figur 2 angi tid selvfølgelig endre pote utskriftsområdet etter CCI kirurgi. Dataene vises som Prosentvis endring på labben utskriftsområdet mellom venstre og høyre bakben paws. Hvis pote utskriftsområdet er det samme på venstre og høyre side i en normal tilstand, vil dataene være 50%. CCI betydelig redusert pote utskriftsområde av ipsilateral bakben labben 2 dager etter operasjonen og ble opprettholdt i 10 dager. GBP gjenopprettet bemerkelsesverdig redusert pote utskriftsområdet. I gruppen humbug panelet B pote utskriftsområdet (%) ble 50.13 ± 2.13 på Pre, 50.30 ± 1.45 på dag 2, 53.24 ± 0.80 på dag 4, 50.30 ± 1,68 på dag 6, 52.08 ± 1,79 på dag 8 og 49.66 ± 2.24 på dag 10. I gruppen CCI pote utskriftsområdet (%) ble 50.71 ± 3.17 på Pre, 0 ± 0 på dag 2, 0 ± 0 på dag 4, 8.86 ± 3,27 på dag 6, 6.6 ± 3,20 på dag 8 og 10.30 ± 5.60 på dag 10. I gruppen CCI + GBP pote utskriftsområdet (%) ble 55.59 ± 2.01 på Pre, 4.65±4.17 på dag 2, 15.18±5.57 på dag 4, 20.20 ± 4.00 på dag 6, 26.01 ± 5.53 på dag 8 og 28.40 ± 6.04 på dag 10.
Resultatene vises i Figur 3 viser tid selvfølgelig endring av en enkelt holdning etter CCI kirurgi. Dataene ble beregnet og vist som Prosentvis endring (ligner på labben utskriftsområde dataene). CCI redusert enkelt holdning til ipsilateral side og GBP betydelig gjenopprettet den. I gruppen humbug panelet B enkelt holdning (%) ble 49.31 ± 2,15 på Pre, 50.71 ± 0,67 på dag 2, 50.76 ± 0.44 på dag 4, 50.60 ± 1.11 på dag 6, 51.50 ± 0.96 på dag 8 og 49.00 ± 2,35 på dag 10. I gruppen CCI enkelt holdning (%) ble 50.36 ± 3.17 på Pre, 0 ± 0 på dag 2, 0 ± 0 på dag 4, 11,5 ± 3,25 på dag 6, 13.61 ± 5,04 på dag 8 og 12.94 ± 6.40 på dag 10. I gruppen CCI + GBP enkelt holdning (%) ble 52.35 ± 0,91 på Pre, 5.44 ± 4.87 på dag 2, 18.66 ± 4.33 på dag 4, 25.48 ± 4.10 på dag 6, 30.26 ± 2,17 på dag 8 og 32.24 ± 4.95 på dag 10.
Figur 1: mekanisk allodynia vurdert av von Frey test i CCI mus. (A) labben tilbaketrekning frekvens (PWF, %) i von Frey test ble økt 2 dager etter CCI kirurgi og vedvarende 10 dager mot gruppen humbug. Gabapentin (GBP, 50 mg/kg, IP) reversert betydelig CCI-indusert mekaniske allodynia. (B) akkumulert data PWF vises som området under kurven. ** p < 0,01 og *** p < 0,001 versus CCI gruppe. Feilfelt viser gjennomsnittlig ± SD. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Figur 2: pote utskriftsområdet ved automatisert gait analyse i CCI mus. (A) tatt bilder av bakben paws fra gruppene humbug, CCI og CCI + GBP (gabapentin, 50 mg/kg, IP) av analyseprogramvare. Hvite rektangler er indikatorer bakben labb oppdaget av analyse systemet. Merk den minste pote størrelsen CCI og denne reduksjonen ble delvis gjenopprettet av GBP behandling. (B) tid selvfølgelig pote utskriftsområdet (%). Data er beregnet som Prosentvis endring av utskriftsområde mellom venstre og høyre bakben paw (f.eks50% angir samme pote utskriftsområder i venstre og høyre side). * p < 0,05 og ** p < 0,01 versus CCI gruppe. Feilfelt viser gjennomsnittlig ± SD.
Figur 3: enkelt holdning av automatiserte gait analyse i CCI mus. (A) registrert og konverterte bilder av enkelt holdning fremhevet av ulike farger for hver pote. Merk at rosa spor for ipsilateral bakben labben forkortes i gruppen CCI og gabapentin (GBP, 50 mg/kg, IP) betydelig gjenopprettet det tilsvarende til nivå humbug. (B) tid selvfølgelig enkelt holdning (%). Dataene oppsummeres som et linjediagram etter beregning av prosentvis forandring av enkelt holdning mellom venstre og høyre bakben paw (f.eks50% angir samme enkelt standpunkt i venstre og høyre side). * p < 0,05, ** p < 0,01 og *** p < 0,001 versus CCI gruppe. Feilfelt viser gjennomsnittlig ± SD. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Måling av mekaniske allodynia ved hjelp av von Frey filamenter er foreløpig mest brukte metoden i smerte dyremodeller for å demonstrere taktile overfølsomhet. Som dyr modeller for nevropatisk smerte har fortsatt å bli utviklet, er metodikk vurdering for sensorisk funksjonen også forbedret8,9,10,15. I disse rapportene, har det blitt foreslått disse endringene kan gi en mer nøyaktig, rask og brukervennlig erstatning for eldre metoder. Imidlertid kan data fra disse metodene fortsatt være begrenset av sin subjektivitet og kravet av dyktighet eller erfaring å utføre metoden. I tillegg holde dyrene kan ikke unngås når utføre von Frey test, og derfor tilbakeholdenhet stressnivået av dyrene kan påvirke smerte respons resultatene.
Automatisert gangart analyse systemet måler automatisk ulike parametere av dyr gangavstand (f.eks, totalt areal på labben kontakt til gulvet, vinkel paw print, holdning tid, etc.), og derfor eksperimentator kan bruke mer objektive data for analyse12,13,14,16,17,18. Videre er kan denne metoden utføres uten noen stimulering; Dermed er det mindre invasive og data fra fritt bevegelige gnagere kan oppnås. Som vist i resultatene av denne studien, foten utskriftsstørrelse og holdning ipsilateral bakben labben er redusert med CCI kirurgi og av GBP behandling; lignende resultater er også funnet i von Frey test. I samsvar med tidligere observasjoner14, resultatene av gait analyse i nevropatisk smerte dyremodeller har en høy grad av positiv korrelasjon med det fra von Frey testen, som indikerer at CCI-relaterte endret parameterne kan gjenspeile graden av mekaniske allodynia, en av de mest irriterende symptomene av nevropatisk smerte.
Her gir vi en metode for hvordan å operere automatisk gangart analyse systemet i detalj og en kort sammenligning av data med klassisk von Frey test i CCI nevropatisk mus. Avslutningsvis kan automatisert gait analyse være den mest forbedret tilgjengelig verktøyet for studiet av nevropatisk smerte fordi det er brukervennlig, objektiv og følsom.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Forfatterne ikke avsløre.
Acknowledgments
Denne forskningen ble støttet av Chungnam National University, Korea Institute av orientalsk medisin (KIOM) og stipend til Korea helse teknologi R & D prosjektet gjennom den Korea helse industri Development Institute (KHIDI), finansiert av Helsedepartementet & Velferd, Sør-Korea (gi nummer: HI15C0007).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 0.9% Saline | JW Pharmaceutical | N/A | Vehicle for drugs |
| 1ml syringe | BD Plastipak | 300013 | Injecting device |
| 2, 2, 2-tribromoethanol (97% purity) | Sigma | T48402 | Anesthetic |
| 2-methyl-2-buthanol (99% purity) | Sigma | 152463 | Solvent for 2, 2, 2-tribromoethanol |
| Catwalk Automated gait analysis system | Noldus | N/A | Automatic analysis software of aniaml gait |
| Chromic catgut (4-0 thickness) | AILEE | C442 | Ligature to make chronic constriction injury on the sciatic nerve |
| Gabapentin | Sigma | Y0001280 | Analgeisc, Used as a positive control drug in this study |
| Graefe Forceps | F.S.T | 11051-10 | Surgical instrument |
| Heating Pad | DAESHIN ELECTRONICS | M-303AT | Regulation of body temperature |
| ICR Mouse | Samtaco | N/A | Experimental animal |
| Mersilk (3-0 thickness) | ETHICON | W598H | Suture material for surgical closure of skin |
| Micro-Mosquito | F.S.T | 13010-12 | Surgical instrument |
| Micro-scissors | F.S.T | 14090-09 | Surgical instrument |
| Needle holder | F.S.T | 12002-12 | Surgical instrument |
| Povidone Iodine | Firson | N/A | Disinfectant to prevent infection after surgery |
| Scalpel blade | F.S.T | 10010-00 (#10) | Surgical instrument to make an incision |
| Scalpel handle | F.S.T | 10003-12 (#3) | Surgical instrument to make an incision |
| Von-Frey filaments | North Coast | NC12775-99 | Measurement device to test sensory function for mechanical stimulation |
References
- Loeser, J. D., Treede, R. D. The Kyoto protocol of IASP Basic Pain Terminology. Pain. 137 (3), 473-477 (2008).
- Colloca, L., et al. Neuropathic pain. Nat Rev Dis Primers. 3, 17002 (2017).
- Vranken, J. H. Mechanisms and treatment of neuropathic pain. Cent Nerv Syst Agents Med Chem. 9 (1), 71-78 (2009).
- DeLeo, J. A., et al. Characterization of a neuropathic pain model: sciatic cryoneurolysis in the rat. Pain. 56 (1), 9-16 (1994).
- Kim, S. H., Chung, J. M. An experimental model for peripheral neuropathy produced by segmental spinal nerve ligation in the rat. Pain. 50 (3), 355-363 (1992).
- Seltzer, Z., Dubner, R., Shir, Y. A novel behavioral model of neuropathic pain disorders produced in rats by partial sciatic nerve injury. Pain. 43 (2), 205-218 (1990).
- Bennett, G. J., Xie, Y. K. A peripheral mononeuropathy in rat that produces disorders of pain sensation like those seen in man. Pain. 33 (1), 87-107 (1988).
- Dixon, W. J. Efficient analysis of experimental observations. Annu Rev Pharmacol Toxicol. 20, 441-462 (1980).
- Bonin, R. P., Bories, C., De Koninck, Y. A simplified up-down method (SUDO) for measuring mechanical nociception in rodents using von Frey filaments. Mol Pain. 10, 26 (2014).
- Chaplan, S. R., Bach, F. W., Pogrel, J. W., Chung, J. M., Yaksh, T. L. Quantitative assessment of tactile allodynia in the rat paw. J Neurosci Methods. 53 (1), 55-63 (1994).
- Chen, H., Du, J., Zhang, Y., Barnes, K., Jia, X. Establishing a Reliable Gait Evaluation Method for Rodent Studies. J Neurosci Methods. , (2017).
- Kang, D. W., et al. Antinociceptive Profile of Levo-tetrahydropalmatine in Acute and Chronic Pain Mice Models: Role of spinal sigma-1 receptor. Sci Rep. 6, 37850 (2016).
- Huehnchen, P., Boehmerle, W., Endres, M. Assessment of paclitaxel induced sensory polyneuropathy with "Catwalk" automated gait analysis in mice. PLoS One. 8 (10), e76772 (2013).
- Vrinten, D. H., Hamers, F. F. 'CatWalk' automated quantitative gait analysis as a novel method to assess mechanical allodynia in the rat; a comparison with von Frey testing. Pain. 102 (1-2), 203-209 (2003).
- Martinov, T., Mack, M., Sykes, A., Chatterjea, D. Measuring changes in tactile sensitivity in the hind paw of mice using an electronic von Frey apparatus. J Vis Exp. (82), e51212 (2013).
- Ferland, C. E., Laverty, S., Beaudry, F., Vachon, P. Gait analysis and pain response of two rodent models of osteoarthritis. Pharmacol Biochem Behav. 97 (3), 603-610 (2011).
- Mogil, J. S., et al. Hypolocomotion, asymmetrically directed behaviors (licking, lifting, flinching, and shaking) and dynamic weight bearing (gait) changes are not measures of neuropathic pain in mice. Mol Pain. 6, 34 (2010).
- Ferreira-Gomes, J., Adaes, S., Castro-Lopes, J. M. Assessment of movement-evoked pain in osteoarthritis by the knee-bend and CatWalk tests: a clinically relevant study. J Pain. 9 (10), 945-954 (2008).
