Summary
Den exakta bedömningen av smärta svar i en neuropatisk djurmodell är kritiska att undersöka patofysiologin av smärta sjukdomar och utveckla nya analgetika. Vi presenterar en känslig och objektiv metod för att bestämma sensoriska funktionen av gnagare hind tass av en automatiserad gait analyssystem.
Abstract
Von Frey testet är en klassisk metod som har använts i stor utsträckning att undersöka den sensoriska funktionen av neuropatisk smärta djur. Det har dock vissa nackdelar som subjektiva data och kravet på en skicklig, erfaren försöksledaren. Hittills har en mängd ändringar har förbättrat metoden von Frey, men det har fortfarande några begränsningar. Senaste rapporter har antytt att gånganalys ger mer exakta och objektiva data från neuropatisk djur. Detta protokoll visar hur man utför den automatiska gånganalys för att bestämma graden av neuropatisk smärta hos möss. Efter flera dagars acklimatisering tilläts mössen gå fritt på glasgolvet att belysa fotspår. Sedan, kvantifiering av fotspår och gånganalys utfördes genom videoklipp med automatisk analys av olika promenader parametrar, såsom området paw print, swing tid, vinkel på tass, etc.
Det huvudsakliga syftet med denna studie är att beskriva metodiken för automatiserad gånganalys och snabbt jämföra den med data från den klassiska sensorisk test med hjälp av von Frey glödtrådens.
Introduction
Patologiska förändringar i nervsystemet induceras av metabolisk dysfunktion, infektion, inflammation, trauma, ischemi, eller autoimmun sjukdom resultera ibland i neuropatisk smärta, som definieras som en smärta som uppstår som en direkt konsekvens av en lesion eller sjukdom som påverkar det somatosensoriska system1. Neuropatisk smärta är vanligtvis outhärdlig och tyvärr konventionell analgetika generellt producerar inte tillräckligt smärta lättnad2. Ett viktigt inslag av neuropatisk smärta innehåller spontana och stimulering-framkallat (dvs, allodyni och hyperalgesi) smärtor. Allodyni är ett nociceptiva svar som uppstår för normalt icke-smärtsamt stimuli, såsom lätt beröring eller varma stimulering. Hyperalgesi indikerar en ökad smärta reaktion på skadliga mekanisk eller termisk stimuli3. Även om dessa två symtom både kritiskt försämra patientens livskvalitet, är mekanisk allodyni frammanade genom skonsam taktil stimulering den mest försvårande symptomet eftersom mjuk kontakt är svårt att undvika i vardagen.
Att undersöka bakomliggande mekanism och nya analgetika för behandling av neuropatisk smärta, exakt mätning av smärta svaret är viktigt. Talrika neuropatisk smärta djurmodeller har utvecklat nociceptiva svaren på hind paw området på grund av dess hög tillgänglighet4,5,6,7. De flesta smärta svar bedömningar har således utförts på plantar eller dorsala ytan av hind tass genom att tillämpa mekaniska stimuli med hjälp av särskilda instrument, såsom von Frey filament. En av de mest använda metoden är upp och ner metod som beskrivs av Dixon8 och senare modifierade versioner9,10. Dock mycket skickliga och erfarna praktiker är skyldiga att utföra testet von Frey och resultaten kan vara subjektiva.
Systemets automatiska gait analys kan utreda neurologiska och neuromuskulära störningar genom att mäta olika parametrar för promenader i fritt rörliga gnagare. I en mängd olika nerv skada djurmodeller, kan graden av nociception och antinociceptive effekten av flera behandlingar utvärderas utan att lägga till en smärta stimulering11,12,13, 14. denna analyssystem kan upptäcka statiska och dynamiska gait parametrar, såsom: tass utskriftsområde (området för den komplett paw print som kommer i kontakt med golvet), paw intensitet (genomsnittliga intensiteten i området kontakta tass), steglängd (den avståndet mellan successiva placeringar av samma tass), hållning fasföljd (varaktigheten av markkontakt för en enda hind tass), steg (den ordning i vilken de fyra tassar placeras på golvet), swing (löptid fasen swing) och swing hastighet (beräknas från steglängd och swing varaktighet och uttryckt i bildpunkter per sekund). Detta dokument visar hur du använder ett analyssystem för och ger en kort jämförelse av data med von Frey test med kronisk förträngning skada (CCI) neuropatisk möss.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
alla experiment genomfördes i enlighet med de etiska riktlinjerna av den internationella sammanslutningen för studie av smärta och godkändes av institutionella djur vård och användning kommittén vid den 남도 National University ( Daejeon, Sydkorea).
1. induktion av CCI på ischiasnerven
- hus ICR hanmöss som väger 20-25 g under en 12 h ljus/mörk cykel vid kontrollerad rumstemperatur (underhålls på 20-25 ° C) och luftfuktighet (40-60%), med fri tillgång till mat och vatten. Tillåta en acklimatisering period för möss i djurvård rummet på minst 1 vecka före operation.
- Under bostäder, Observera utseendet och beteendet hos möss och Använd inte möss visar onormal rörelseaktivitet.
Obs: En dag före CCI operationen, mäta hind tass mekaniska känslighet genom att tillämpa von Frey filament och utföra den automatiska gånganalys för att få normal utgångsvärden. Tilldela sedan möss slumpmässigt kontroll och experimentella grupper.
- Under bostäder, Observera utseendet och beteendet hos möss och Använd inte möss visar onormal rörelseaktivitet.
- På operationsdagen, söva möss genom att injicera 2,2,2-tribromoethanol (250 mg/kg, intraperitoneal (IP)).
Obs: Använd personlig skyddsutrustning såsom kirurgiska klänning, handskar och mask.- Väg in 2,5 g av 2,2,2-tribromoethanol och lägga 2-metyl-2-buthanol till den avslutande volymen i 5 mL. Förvara lösningen från ljus (t.ex., använder en mörk behållare eller linda in i folie).
- Tillåt reagenser att upplösa helt genom uppvärmning vid 40 ° C och under omrörning i 10-30 min.
- Tillsätt destillerat vatten till slutvolymen av 200 mL och rör om tills blandas väl.
- Lagra alikvoter vid 4 ° C och hålla i mörkret. Efter två veckor, bedövningsmedlet bör ersättas med nya alikvoter.
- Injicera en volym av 20 µL per 1 g kroppsvikt. Till exempel om kroppen musen väger 25 g, ge 500 µL lösning. Typiska denna anestesi varar 1 h.
Obs: Denna lösning kommer att bli giftiga när de utsätts för ljus eller värme så var noga med att undvika exponering för ljus och värme. En IP-injektion väg rekommenderas.
- När musen faller i djup anestesi, placera den på operationsbordet med ryggsidan upp (dvs liggande position) och sterilisera området yttre mitten av låret till höger med en 70% alkoholservett.
Obs: Bekräfta djup anestesi genom att kontrollera bristen på svar att nypa eller tryck stimulans på hind tassar eller svansen. - Framkalla CCI på rätt ischiasnerven musklick.
- Gör ett snitt på huden runt mitten av låret området 1.0-1.5 cm längd med en skalpell blad.
- Rakt på sak dissekera lår musklerna med de mikro-mygga hemostat att exponera ischiasnerven.
- Ligera exponerade ischiasnerven 3 gånger med 1,0-1,5 mm intervaller med hjälp av en 4-0 kromsyra katgut suturen.
Notera: Se lös nering genom att knyta av ischiasnerven tills milda skakningar visas på ipsilaterala hind tass. Sham gruppen av möss fick samma kirurgiska öppningen under liknande förhållanden utom utan nerv ligering.
- Nära kirurgiska öppningen med 3-4 enkla avbrutna suturer med 5-0 silke och sterilisera med povidon jod för desinfektion av yttre området kirurgi.
- Efter operation, Placera musen i en ren bur på en värmedyna. När djur återvinns från anestesi, återföra dem till deras hem bur.
Obs: I denna studie antibiotika inte användes. CCI + GBP gruppen fick IP gabapentin (GBP) vid en dos på 50 mg/kg en gång dagligen som en positiv kontroll.
2. Mätning av mekanisk allodyni (von Frey Test)
Obs: bedöma frekvensen av tillbakadragande svar till de mekaniska stimuli genom att använda 1 g von Frey glödtråden till ipsilaterala hind tass plantar yta.
- På varje test dag, ta möss till beteendevetenskaplig testrummet och acklimatiserar sig möss i sina egna hem bur för minst 30 min innan test
Obs: Använd personlig skyddsutrustning såsom kirurgiska klänning, handskar och mask. - Placera musen i en transparent akryl låda på golvet metallnät och acklimatiserar sig musen för 30 min.
- Applicera 1 g von Frey glödtrådens hind tass plantar yta tills glödtråden böjer.
- Tillämpa glödtråden stimulans till den ipsilaterala hind paw 10 gånger med minst 10 s intervall och registrera resultatet.
Obs: I denna studie visas antalet tass tillbakadragande svaren från 10 prövningar som procentandel av tass uttag frekvens (PWF, %). Det von Frey testet utfördes varje två dagar efter CCI operationen.
3. Utföra automatiserad gånganalys
Obs: gait analys systemet visualiserar varje tass utskrift medan djuret är promenader och analyserar automatiskt olika gait parametrar, sådan som tass print, paw intensitet, steglängd, hållning fas, steg sekvens, swing, swing hastighet etc. i denna studie visade vi tass utskriftsområde och enda hållning efter omvandla data till procentuellt ändra mellan kontralaterala vänster kontra ipsilaterala höger bakben tass. Således visar ett resultat av 50% att storleken på paw print och varaktigheten av tass område i kontakt med golvet, mellan vänster och höger sida är samma. Dessutom lägre datavärden som närmar sig 0% visar att både storlek och varaktighet av kontakt är minskat i ipsilaterala hind tass jämfört med den kontralaterala sidan (se panel B i figur 2 och Figur 3).
- För acklimatisering, hålla mössen inom gångarten analys enheten för 10 min en gång dagligen med början 5 dagar innan operationen CCI.
Obs: Gait analys test inklusive acklimatisering bör utföras i mörkret. - Ta möss till provrummet för gånganalys och acklimatiserar sig i deras hem bur för minst 30 min innan test
- i den inställningsfliken i programmenyn, ange den " gångvägen Längd " till 30 cm, och Ställ in den " maximalt löpa " till 5 s och den " maximalt köra variation " till 50%.
- Välj en registrerad kamera från den ' setup ' fliken i den ' program ' menyn.
- Välj " öppna förvärv " från den ' förvärva ' fliken i den ' program ' menyn.
- Efter statusmeddelande, klicka på den ' knäppa bakgrund ' knappen för att ta en bakgrundsbild av Tom (dvs, blank) gångvägen.
- Klicka på den ' börja förvärv ' knappen och placera en mus på gångvägen; inspelningen startar automatiskt enligt förflyttning av musen.
Obs: När musen går klart över gångvägen, programmet automatiskt klassificerar detta drag som " kompatibel kör " med en grön ikon. Om programvaran inte upptäcka den fot ut, experimenter visas en röd ikon och måste upprepa inspelningen. Minst fem framgångsrika kompatibel körningar behövs för analys. - Efter test, Välj ' klassificera körningar ' från fliken förvärva den ' program ' menyn.
- Välj körningarna för analys och klicka på den ' auto klassificera ' knappen.
Obs: Efter klassificering, alla statistiska parametrar sparas automatiskt och försöksledaren kan hitta resultaten genom att klicka på " Visa kör statistik " på menyn analyze.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Vi har utfört testet von Frey och automatiserad gånganalys i CCI möss 10 dagar efter CCI kirurgi. Upprepade mätningar av tvåvägs variansanalys (ANOVA) avgör de totala effekterna för statistisk analys, och Dunnetts post-hoc analys utfördes för att fastställa p-värdet bland de experimentella grupperna.
Resultaten visas i figur 1 visar tidsförloppet för klassiskt von Frey testdata. PWF (%) av CCI möss var ökad 2 dagar efter CCI kirurgi och kvarstod under 10 dagar jämfört med gruppen Sham. I CCI positiva kontrollgruppen, GBP (50 mg/kg, IP, en gång dagligen i 10 dagar börjar 1 dag efter operation) avsevärt lindras CCI-förbättrade PWF. I gruppen Sham av panel A PWF (%) var 8.00 ± 5,83 på tidpunkt före operationen (Pre), 6.00 ± 2,45 på dag 2, 4.00 ± 2,45 på dag 4, 2,00 ± 2.00 på dag 6, 4.00 22.45 på dag 8, och 6.00 ± 2,45 på dag 10. I gruppen CCI PWF (%) var 2.86 ± 1,84 på Pre, 61.43 ± 5,95 på dag 2, 68,57 ± 4.59 på dag 4, 72.86 ± 5,22 på dag 6, 75.71 6,49 på dag 8, och 75.71 ± 3,69 på dag 10. I CCI + GBP grupp PWF (%) var 2,50 ± 1,43 på Pre, 57,50 ± 5.22 på dag 2, 50.00 ± 4,04 på dag 4, 45.00 ± 4.81 på dag 6, 46,25 5,65 dag 8 och 47,50 ± 4,88 på dag 10. I panelen B var arean under kurvan (AUC) 23,00 ± 6.00 i Sham, 317.86 ± 17,04 i CCI och 223.75 ± 17,05 i CCI + GBP grupp.
Resultaten visas i figur 2 indikera en tid kursen förändring av utskriftsområdet tass efter CCI kirurgi. Uppgifterna presenteras som procentuella förändringen av tass utskriftsområdet mellan vänster och höger bakre tassarna. Om utskriftsområdet tass är samma på vänster och höger sida i en normal kondition, blir data 50%. CCI avsevärt minskat tass utskriftsområdet för ipsilaterala hind tass 2 dagar efter operationen och underhölls i 10 dagar. GBP återhämtade anmärkningsvärt reducerad tass utskriftsområdet. I gruppen Sham panel B tass utskriftsområde (%) var 50.13 ± 2.13 på Pre, 50.30 ± 1,45 på dag 2, 53.24 ± 0.80 på dag 4, 50.30 ± 1,68 på dag 6, 52.08 1,79 dag 8 och 49,66 ± 2.24 på dag 10. I gruppen CCI tass utskriftsområde (%) var 50.71 ± 3.17 på Pre, 0 ± 0 dag 2, 0 ± 0 på dag 4, 8.86 ± 3.27 på dag 6, 6,6 3.20 på dag 8 och 10.30 ± 5,60 på dag 10. I gruppen CCI + GBP tass utskriftsområde (%) var 55,59 ± 2.01 på Pre, 4.65±4.17 på dag 2, 15.18±5.57 på dag 4, 20.20 ± 4.00 på dag 6, 26.01 5,53 dag 8 och 28.40 ± 6,04 på dag 10.
Resultaten visas i figur 3 visar tiden kursen förändring av en enda hållning efter CCI kirurgi. Data beräknas och visas som procentuella förändringen (liknar tass utskriftsområde data). CCI minskas den ipsilaterala sidan enda hållning och GBP betydligt återställt det. I gruppen Sham panel B var den enda hållningen (%) 49.31 ± 2.15 på Pre, 50.71 ± 0,67 på dag 2, 50.76 ± 0,44 på dag 4, 50,60 ± 1.11 på dag 6, 51,50 0,96 dag 8 och 49,00 ± 2,35 på dag 10. I gruppen CCI enda hållning (%) var 50,36 ± 3.17 på Pre, 0 ± 0 dag 2, 0 ± 0 på dag 4, 11,5 ± 3,25 på dag 6, 13.61 5.04 på dag 8, och 12,94 ± 6.40 på dag 10. I gruppen CCI + GBP den enda hållningen (%) var 52.35 ± 0,91 på Pre, 5,44 ± 4,87 på dag 2, 18.66 ± 4.33 på dag 4, 25.48 ± 4.10 på dag 6, 30.26 2.17 dag 8 och 32,24 ± 4,95 på dag 10.
Figur 1: mekanisk allodyni bedömas av von Frey test i CCI möss. (A), tass tillbakadragandet frekvens (PWF, %) i den von Frey test var ökad 2 dagar efter CCI kirurgi och kvarstod under 10 dagar jämfört med gruppen Sham. Gabapentin (GBP, 50 mg/kg, IP) omvända betydligt den CCI-inducerad mekanisk allodyni. (B) ackumulerade data av PWF visas som arean under kurvan. ** p < 0,01 och *** p < 0,001 kontra CCI-gruppen. Felstaplar visar medelvärde ± SD. vänligen klicka här för att visa en större version av denna siffra.
Figur 2: Paw utskriftsområdet genom automatiserade gånganalys i CCI möss. (A) fångade bilder av hind tassar från grupperna av Sham, CCI och CCI + GBP (gabapentin, 50 mg/kg, IP) av analysprogram. Vita rektanglar är indikatorer på hind tass identifieras av systemet för analys. Observera att minsta tass storlek CCI och minskningen återfanns delvis av GBP behandling. (B) tidsförloppet för tass utskriftsområde (%). Data beräknas som procentuella förändringen av utskriftsområdet mellan vänster och höger bakben tass (t.ex.50% anger samma tass ut områden i vänster och höger sida). * p < 0,05 och ** p < 0,01 kontra CCI-gruppen. Felstaplar visar medelvärde ± SD.
Figur 3: enda hållning av automatiserade gånganalys i CCI möss. (A) inspelat och konverterade bilder av enda hållning markerade med olika färger för varje tass. Observera att den rosa tracen för ipsilaterala hind tass förkortas i gruppen CCI och gabapentin (GBP, 50 mg/kg, IP) betydligt återställt det likaså till Sham nivå. (B) tidsförloppet för enda hållning (%). Data sammanfattas som ett linjediagram efter beräkna procentuell förändring av enda hållning mellan vänster och höger bakben tass (t.ex.50% anger samma enda hållning i vänster och höger sida). * p < 0,05, ** p < 0,01 och *** p < 0,001 kontra CCI-gruppen. Felstaplar visar medelvärde ± SD. vänligen klicka här för att visa en större version av denna siffra.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Mätning av mekanisk allodyni med hjälp av von Frey filament är för närvarande mest använda metoden i smärta djurmodeller för att demonstrera taktil överkänslighet. Som modeller för neuropatisk smärta har fortsatt att utvecklas, varit metodiken för sensorisk funktion också förbättrad8,9,10,15. I dessa rapporter har det föreslagits dessa ändringar kan ge en mer korrekt, snabb och användarvänlig ersättning för äldre metoder. Data från dessa metoder kan fortfarande dock vara begränsat av dess subjektivitet och kravet på skicklighet eller erfarenhet att utföra metoden. Dessutom besöksförbud djuren inte kan undvikas när du utför testet von Frey, och därför stress i återhållsamhet av djuren kan påverka smärta svar resultaten.
Automatiserad gait analys systemet mäter automatiskt olika parametrar för djur promenader (t.ex., total yta på tass kontakt till golvet, vinkel på paw print, hållning tid, etc.), och därför försöksledaren kan använda mer objektiva data för analys12,13,14,16,17,18. Dessutom kan denna metod utföras utan någon stimulans; Således är det mindre invasiv och data från fritt rörliga gnagare kan erhållas. Som visas i resultaten av denna studie, foten utskriftsstorlek och hållning tid för ipsilaterala hind tass är minskat med CCI kirurgi och återkrävas av GBP behandling; liknande resultat finns också i von Frey test. Överensstämmer med tidigare observationer14, resultaten av gånganalys i neuropatisk smärta djurmodeller har en hög grad av positiv korrelation med som från von Frey testet, som visar att de CCI-relaterade ändrade parametrarna kan återspegla graden av mekanisk allodyni, en av de mest irriterande symptom av neuropatisk smärta.
Här ger vi en metod på hur till använda automatiserade gait analys systemet i detalj och en kort jämförelse av data med klassiskt von Frey test i CCI neuropatisk möss. Avslutningsvis kan den automatiserade gånganalys vara det mest förbättrade tillgängliga verktyget för studiet av neuropatisk smärta på grund av det är användarvänligt, objektiva och känslig.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Författarna har något att avslöja.
Acknowledgments
Denna forskning stöddes av 남도 University, Sydkorea institutet av orientalisk medicin (KIOM) och ett bidrag av Korea hälsa teknik R & D projekt genom den Korea hälsa industri utveckling Institute (KHIDI), finansierat av hälsoministeriet & Välfärd, Sydkorea (bevilja nummer: HI15C0007).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 0.9% Saline | JW Pharmaceutical | N/A | Vehicle for drugs |
| 1ml syringe | BD Plastipak | 300013 | Injecting device |
| 2, 2, 2-tribromoethanol (97% purity) | Sigma | T48402 | Anesthetic |
| 2-methyl-2-buthanol (99% purity) | Sigma | 152463 | Solvent for 2, 2, 2-tribromoethanol |
| Catwalk Automated gait analysis system | Noldus | N/A | Automatic analysis software of aniaml gait |
| Chromic catgut (4-0 thickness) | AILEE | C442 | Ligature to make chronic constriction injury on the sciatic nerve |
| Gabapentin | Sigma | Y0001280 | Analgeisc, Used as a positive control drug in this study |
| Graefe Forceps | F.S.T | 11051-10 | Surgical instrument |
| Heating Pad | DAESHIN ELECTRONICS | M-303AT | Regulation of body temperature |
| ICR Mouse | Samtaco | N/A | Experimental animal |
| Mersilk (3-0 thickness) | ETHICON | W598H | Suture material for surgical closure of skin |
| Micro-Mosquito | F.S.T | 13010-12 | Surgical instrument |
| Micro-scissors | F.S.T | 14090-09 | Surgical instrument |
| Needle holder | F.S.T | 12002-12 | Surgical instrument |
| Povidone Iodine | Firson | N/A | Disinfectant to prevent infection after surgery |
| Scalpel blade | F.S.T | 10010-00 (#10) | Surgical instrument to make an incision |
| Scalpel handle | F.S.T | 10003-12 (#3) | Surgical instrument to make an incision |
| Von-Frey filaments | North Coast | NC12775-99 | Measurement device to test sensory function for mechanical stimulation |
References
- Loeser, J. D., Treede, R. D. The Kyoto protocol of IASP Basic Pain Terminology. Pain. 137 (3), 473-477 (2008).
- Colloca, L., et al. Neuropathic pain. Nat Rev Dis Primers. 3, 17002 (2017).
- Vranken, J. H. Mechanisms and treatment of neuropathic pain. Cent Nerv Syst Agents Med Chem. 9 (1), 71-78 (2009).
- DeLeo, J. A., et al. Characterization of a neuropathic pain model: sciatic cryoneurolysis in the rat. Pain. 56 (1), 9-16 (1994).
- Kim, S. H., Chung, J. M. An experimental model for peripheral neuropathy produced by segmental spinal nerve ligation in the rat. Pain. 50 (3), 355-363 (1992).
- Seltzer, Z., Dubner, R., Shir, Y. A novel behavioral model of neuropathic pain disorders produced in rats by partial sciatic nerve injury. Pain. 43 (2), 205-218 (1990).
- Bennett, G. J., Xie, Y. K. A peripheral mononeuropathy in rat that produces disorders of pain sensation like those seen in man. Pain. 33 (1), 87-107 (1988).
- Dixon, W. J. Efficient analysis of experimental observations. Annu Rev Pharmacol Toxicol. 20, 441-462 (1980).
- Bonin, R. P., Bories, C., De Koninck, Y. A simplified up-down method (SUDO) for measuring mechanical nociception in rodents using von Frey filaments. Mol Pain. 10, 26 (2014).
- Chaplan, S. R., Bach, F. W., Pogrel, J. W., Chung, J. M., Yaksh, T. L. Quantitative assessment of tactile allodynia in the rat paw. J Neurosci Methods. 53 (1), 55-63 (1994).
- Chen, H., Du, J., Zhang, Y., Barnes, K., Jia, X. Establishing a Reliable Gait Evaluation Method for Rodent Studies. J Neurosci Methods. , (2017).
- Kang, D. W., et al. Antinociceptive Profile of Levo-tetrahydropalmatine in Acute and Chronic Pain Mice Models: Role of spinal sigma-1 receptor. Sci Rep. 6, 37850 (2016).
- Huehnchen, P., Boehmerle, W., Endres, M. Assessment of paclitaxel induced sensory polyneuropathy with "Catwalk" automated gait analysis in mice. PLoS One. 8 (10), e76772 (2013).
- Vrinten, D. H., Hamers, F. F. 'CatWalk' automated quantitative gait analysis as a novel method to assess mechanical allodynia in the rat; a comparison with von Frey testing. Pain. 102 (1-2), 203-209 (2003).
- Martinov, T., Mack, M., Sykes, A., Chatterjea, D. Measuring changes in tactile sensitivity in the hind paw of mice using an electronic von Frey apparatus. J Vis Exp. (82), e51212 (2013).
- Ferland, C. E., Laverty, S., Beaudry, F., Vachon, P. Gait analysis and pain response of two rodent models of osteoarthritis. Pharmacol Biochem Behav. 97 (3), 603-610 (2011).
- Mogil, J. S., et al. Hypolocomotion, asymmetrically directed behaviors (licking, lifting, flinching, and shaking) and dynamic weight bearing (gait) changes are not measures of neuropathic pain in mice. Mol Pain. 6, 34 (2010).
- Ferreira-Gomes, J., Adaes, S., Castro-Lopes, J. M. Assessment of movement-evoked pain in osteoarthritis by the knee-bend and CatWalk tests: a clinically relevant study. J Pain. 9 (10), 945-954 (2008).
