Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Neuroscience

Kronik daralma Yaralanmalı farelerde otomatik yürüyüş analizi

Published: October 17, 2017 doi: 10.3791/56402

Summary

Ağrı yanıt nöropatik hayvan modeli olarak hassas bir değerlendirme ağrı hastalıkları Patofizyoloji araştırmak ve yeni analjezikler geliştirmek çok önemlidir. Biz bir otomatik yürüyüş analizi sistemi tarafından hind pençe kemirgen duyusal işlev belirlemek için hassas ve objektif bir yöntem mevcut.

Abstract

Von Frey test yaygın olarak nöropatik ağrı hayvanların duyusal işlev incelemek için kullanılan klasik bir yöntemdir. Ancak, bazı dezavantajları öznel verileri gibi ve yetenekli, deneyimli deneyci şartı vardır. Bugüne kadar değişiklikler çeşitli gelişmiş von Frey yöntemi, ama yine de birkaç sınırlaması vardır. Son raporlar yürüyüş analizi nöropatik hayvanlardan daha doğru ve objektif verileri üreten tavsiye ettiler. Bu iletişim kuralı, farelerde nöropatik ağrı derecesini belirlemek için otomatik yürüyüş analizi gerçekleştirmek gösterilmiştir. Calıştıkları birkaç gün sonra fareler serbestçe ayak izleri aydınlatmak için cam zemin üzerinde yürümek için izin verildi. O zaman, miktar ayak izleri ve yürüyüş gerçekleştirilen alan pençe baskı, swing zaman, Agiz pençe, vb gibi çeşitli yürüyüş parametreleri otomatik olarak analiz ile video klipler aracılığıyla

Bu çalışmanın temel amacı otomatik yürüyüş analizi yöntemi açıklamak ve kısaca klasik duyusal test von Frey filament kullanarak verilerle karşılaştırın etmektir.

Introduction

Sinir sisteminin patolojik değişiklikler travma, metabolik fonksiyon bozukluğu, iltihap, enfeksiyon, iskemi indüklenen veya Otoimmün hastalık bazen bir lezyon ya da hastalığı doğrudan bir sonucu ortaya çıkan bir ağrı olarak tanımlanan nöropatik ağrı neden somatosensor sistem1etkileyen. Nöropatik ağrı genellikle dayanılmaz ve ne yazık ki, geleneksel analjezikler genellikle yeterli ağrı Rölyef2üretmek değildir. Nöropatik ağrı önemli bir özelliği spontan ve stimülasyon uyarılmış (Yani, allodynia ve hyperalgesia) ağrıları içerir. Allodynia Kısaca bastırmak veya sıcak stimülasyon gibi normalde ağrılı uyaranlara karşı oluşan nosiseptif bir yanıttır. Hyperalgesia mekanik ve/veya termal zararlı uyaranlara3için bir gelişmiş acı tepki gösterir. Her ne kadar bu iki belirtiler her iki kritik hastanın yaşam kalitesini bozabilir, yumuşak Kontakt günlük yaşamda önlemek zor olduğu için mekanik allodynia nazik dokunsal uyarım tarafından uyarılmış en sinir bozucu semptomdur.

Nöropatik ağrı tedavisinde yeni analjezikler ve temel mekanizması araştırmak için hassas ölçüm ağrı yanıtının esastır. Çok sayıda nöropatik ağrı hayvan modelleri geliştirdik hind nosiseptif yanıtları pençe alan onun yüksek erişilebilirlik4,5,6,7yüzünden. Böylece, çoğu ağrı yanıt Değerlendirmeler arka pençe plantar veya dorsal yüzeyi mekanik uyaranlara von Frey filamentler gibi özel araçlar kullanarak uygulama tarafından gerçekleştirilmiş. En sık kullanılan yöntem biri yukarı ve aşağı Dixon tarafından açıklanan yöntemi sürümleri9,108 ve daha sonra değiştirilebilir. Ancak, çok yetenekli, deneyimli Denemecileri von Frey testi gerçekleştirmek için gerekli olan ve sonuçları öznel olabilir.

Otomatik yürüyüş analiz sistemi nörolojik ve nöromüsküler hastalıklar kemirgenler serbestçe hareket yürüyüş çeşitli parametreler ölçerek araştırabilirsiniz. Sinir yaralanma hayvan modelleri çeşitli, duyusuna derecesini ve çeşitli tedaviler antinociceptive etkisini bir ağrı stimülasyon11,12,13, eklemeden değerlendirilebilir 14. bu analiz sistemi statik ve dinamik yürüyüş parametreleri, aşağıdaki gibi algılayabilir: yazdırma alanı (zemin ile bağlantı kurduğunda tam pençe baskı alanı) pençe, yoğunluğu (kontak pençe alanının ortalama yoğunluğu) pençe, adım uzunluğu ( Art arda gelen yerleşimleri aynı pençe arasındaki mesafe), duruş (süresi yere temas için bir tek arka pençe), adım dizisi (içinde dört paws sipariş yere yerleştirilir) faz (salıncak faz süresi) salıncak ve salıncak hız (hesaplanan uzunluğu stride ve salıncak süresi ve piksel / saniye olarak ifade). Bu kağıt bir analiz sistemi kullanımı gösterilmiştir ve kronik daralma yaralanma (CCI) nöropatik fare kullanarak von Frey testi ile veri kısa bir karşılaştırma sağlar.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

tüm deneylerin Uluslararası Birliği etik kurallarına uygun olarak ağrı çalışma için yapılmıştır ve kurumsal hayvan bakım ve kullanım Komitesi tarafından onaylanmış Chungnam Ulusal Üniversitesi () Daejeon, Güney Kore).

1. indüksiyon CCI siyatik sinir üzerindeki

  1. ev erkek ICR fareler ile kontrollü oda sıcaklığında (20-25 ° C'de muhafaza) ve nem (40-%60), bir 12 h açık/koyu döngüsü altında 20-25 g ağırlığında ücretsiz Gıda erişim ve su. Ameliyattan önce fareler hayvan bakım odasında bir calıştıkları süre en az 1 hafta izin.
    1. Konut sırasında fareler davranışını ve görünümünü gözlemlemek ve anormal Lokomotor aktivite gösteren fareler kullanmayın.
      Not: Bir gün CCI ameliyat öncesi von Frey filamentler uygulayarak arka pençe mekanik duyarlılığı ölçmek ve normal temel değerlerini elde etmek için otomatik yürüyüş analizi gerçekleştirin. Ardından, fare rasgele kontrol ve deneysel gruplara izin atama.
  2. 2,2,2-tribromoethanol (250 mg/kg, mayi (IP)) enjekte edilerek ameliyat günü, fareler anestezi.
    Not: Cerrahi önlük, eldiven ve maske gibi kişisel koruyucu ekipman giymek.
    1. 2,2,2 tribromoethanol 2.5 g tartmak ve 2-metil-2-buthanol 5 mL son hacim için ekleyin. Çözüm ışıktan uzak tutmak (örneğin, karanlık bir kapsayıcı kullanın veya şal folyo).
    2. 40 ° C'de Isıtma ve 10-30 dk. karıştırarak tarafından tamamen erimesi için izin ver reaktifler
    3. Distile su 200 mL son hacmi ekleyin ve iyi kadar karışık karıştırın.
    4. Aliquots 4 ° C'de depolayın ve karanlıkta tut. İki hafta sonra anestezi ile yeni aliquots değiştirilmelidir.
    5. 1 g vücut ağırlığı başına 20 µL hacmi enjekte. Vücut ağırlığı fare ile 25 g ise, örneğin, çözeltinin 500 µL ver. Bu anestezi tipik süresi 1 h. olduğu
      Not: Bu çözüm ışığa maruz zaman zehirli olacak ve/veya ısı ışık ve ısı maruz önlemek dikkatli olun. IP enjeksiyon yolu önerilir.
  3. Fare derin anestezi düştüğünde, dorsal yüzü (Yani, yüzükoyun) kadar ameliyat masasında yerleştirin ve sağ tarafta bir % 70 alkol bez ile dış orta uyluk bölgeyi sterilize.
    Not: derin anestezi yanıt-e doğru tutam veya uyarıcı arka paws veya kuyruk basınç eksikliği kontrol ederek onaylayın.
  4. Üzerinde fare sağ siyatik sinir CCI neden.
    1. Bir neşter bıçakla orta uyluk bölgesinin kalbinde 1.0-1.5 cm uzunluk çevresindeki deri bir kesi yapmak.
    2. Açık açık siyatik sinir ortaya çıkarmak için mikro-sivrisinek hemostat ile uyluk kasları teşrih.
    3. 4-0 fotokromik akorduna dikiş kullanarak 3 kez 1.0-1.5 mm aralıkları ile maruz siyatik sinir ligate.
      Not: hafif sallayarak Ipsilateral arka pençe üzerinde görünene kadar siyatik sinir bağlayarak gevşek d alın. Sham grup farelerin aynı cerrahi açılış sinir ligasyonu olmadan dışında benzer koşullarda alınan.
  5. 5-0 ipek kullanarak 3-4 basit kesintiye uğramış dikiş ile cerrahi açılış kapatın ve cerrahi dış çevrenin dezenfeksiyonunda povidone iyot ile sterilize.
  6. Ameliyattan sonra bir Isıtma yastığını temiz bir kafeste fareyi getirin. Anesteziden hayvanlar kurtarıldı sonra onları ev onların kafes dönün.
    Not: Bu çalışmada, antibiyotik kullanılmadı. Bir doz 50 mg/kg pozitif kontrol olarak günde bir kez, CCI + GBP alınan grup IP gabapentin (GBP).

2. Mekanik Allodynia ölçümü (von Frey Test)

Not: 1 g Ipsilateral arka pençe plantar yüzeyine von Frey filament kullanarak para çekme yanıt mekanik uyaranlara karşı sıklığını değerlendirmek.

  1. Her test günü, fareler davranış test odasına getir ve en az 30 dk önce test için kendi ev kafeste fareler alışmana
    Not: Cerrahi önlük, eldiven ve maske gibi kişisel koruyucu ekipman giymek.
  2. Şeffaf Akrilik kutu metal kafes yerde fare koymak ve fareyi 30 dakika süreyle alışmana
  3. Filaman virajlı kadar yavaşça von Frey filament 1 g arka pençe plantar yüzeyine uygulamak.
  4. Uygula filaman uyarmaya Ipsilateral hind pençe ile 10 kez en az 10 s aralıklarını ve sonuç kayıt.
    Not: Bu çalışmada, pençe çekilme yanıt--dan 10 deneme sayısını pençe çekilme frekans (PWF, %) yüzdesi olarak gösterilir. Von Frey test iki günde CCI ameliyat sonrası gerçekleştirildi.

3. Yürüyüş çözümlemesini otomatik

Not: hayvan yürüyor ve otomatik olarak çeşitli yürüyüş parametreleri çözümler yürüyüş analiz sistemi her pençe baskı görüntüler, böyle paw baskı, pençe gibi yoğunluk, adım uzunluğu, duruş faz adım dizisi, salıncak, salıncak, hız vb bu çalışmada pençe yazdırma alanı ve yüzde veri dönüştürme sonra tek tutumunu değiştirmek kontralateral arasında sola karşı Ipsilateral sağ arka pençe gösterdik. Böylece, bir sonuç % 50 pençe baskı boyutunu ve pençe alan kat, sağ ve sol arasında temas süresi aynı olduğunu gösterir. Buna ek olarak, temas süresi ve boyutu ile karşılaştırıldığında kontralateral yan Ipsilateral arka pençe içinde azalma % 0 yaklaşan alt veri değerlerini belirtmek (bkz: Şekil 2 Masası B ve Şekil 3).

  1. Calıştıkları için günde bir 5 gün CCI ameliyattan önce başlayan yürüyüş analiz cihazı 10 dk içinde fareler devam.
    Not: yürüyüş analizi testi calıştıkları dahil olmak üzere karanlıkta gerçekleştirilmelidir.
  2. Fareler için yürüyüş analizi test odası getirmek ve en az 30 dk önce test için onların ev kafeste alışmana
    1. Kur sekmesinde program menüsünü " geçit uzunluğu " 30 cm ve küme için " maksimum süresi çalıştırmak " 5 s ve " maksimum varyasyon çalıştırmak " % 50'ye.
    2. Kayıtlı bir kameradan seçin ' kurulum ' sekmesinde ' programı ' menü.
    3. Seçin " açın edinme " üzerinden ' elde ' sekmesinde ' programı ' menü.
    4. Durum iletisi tıklatın ' snap arka plan ' boş (Yani, boş) geçit arka plan resmini çekmek için düğmesini.
  3. 'I tıklatın ' başlamak satın alma ' düğme ve yer bir fare üzerinde geçit; kaydı otomatik olarak fare hareket göre başlar.
    Not: fare açıkça geçit arasında yürürken, program otomatik olarak bu hareket olarak sınıflandırır " çalıştırmak uyumlu " yeşil bir simge ile. Yazılım ayak basmak algılamak başarısız olduysa, deneyci kırmızı bir simge göreceksiniz ve kayıt yinelemeniz gerekir. En az beş başarılı uyumlu çalışır analiz için ihtiyaç vardır.
  4. Testten sonra seçin ' ishal sınıflandırmak ' edinme sekmesinden ' programı ' menü.
  5. Analizi ve tıklama için çalışır seçin ' otomatik sınıflandırmak ' düğmesini.
    Not: sınıflandırma sonra tüm istatistik parametreleri otomatik olarak kaydedilir ve deneyci tıklatarak sonuçları bulabilirsiniz " görünüm istatistikleri çalıştırmak " Çözümle menüsünde.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Biz von Frey testi gerçekleştirilen ve CCI ameliyattan sonra 10 gün kadar yürüyüş analizi CCI farelerde otomatik. İstatistiksel analiz için iki yönlü Varyans analizi (ANOVA) tekrarlanan ölçüleri belirleyen genel etkileri ve Dunnett'ın post-hoc analizi deneysel grupları arasında p değeri belirlemek için gerçekleştirildi.

Şekil 1 ' de gösterilen sonuçları zamanlı Kurs klasik von Frey test verilerinin gösterir. CCI farelerin PWF (%) CCI ameliyat sonrası artan 2 gün oldu ve Sham grubu ile karşılaştırıldığında 10 gün boyunca sürekli. CCI pozitif kontrol grubunda GBP (50 mg/kg, IP, günde bir kez 10 gün başlayan ameliyat sonrası 1 gün için) önemli ölçüde CCI gelişmiş PWF hafifletti. A paneli Sham grubunda PWF (%) olduğunu 8.00 ± 5,83 timepoint ön-cerrahi (Pre), 6.00 ± 2.45 üzerinde gün 2, 4.00 ± 2.45 günde 4, 2.00 ± 2.00 üzerinde gün 6, üzerinde 4.00 22.45 günde 8 ve 6,00 ± ± 2.45 günde 10. CCI grubunda PWF (%) yapıldı öncesi, günde 2, 68.57 ± 4.59 üzerinde gün 4, 72.86 ± 5.22 üzerinde gün 6, 61.43 ± 5,95 2,86 ± 1,84 75.71 6,49 günde 8 ve 75.71 ± ± 3,69 günde 10. CCI + GBP grubunda PWF (%) yapıldı öncesi, 57,50 ± 5.22 günde 2, 50.00 ± 4,04 üzerinde gün 4, 45,00 ± 4,81 üzerinde gün 6, 2.50 ± 1.43 46.25 5.65 günde 8 ve 47,50 ± ± 4,88 günde 10. B panelinde eğri (AUC) altındaki alan 23,00 ± 6,00 Sham, 317.86 ± 17.04 CCI ve CCI + GBP grubunda 223.75 ± 17.05 oldu.

Şekil 2 ' de gösterilen sonuçları, CCI ameliyattan sonra pençe yazdırma alanı saat ders değişikliği gösterir. Arasında sol ve sağ arka paws pençe yazdırma alanının yüzde değiştirmek gibi veri gösterilir. Pençe yazdırma alanını aynı anda sol ve sağ tarafında normal bir durumda ise, verileri % 50 olacaktır. CCI önemli ölçüde ameliyattan sonra 2 gün Ipsilateral arka pençe pençe yazdırma alanı azaltılmış ve 10 gün boyunca devam edildi. GBP oldukça azaltılmış pençe yazdırma alanını yeniden elde etmek. Sham grup Masası B, pençe yazdırma alanı (%) olduğunu 50.13 ± 2,13 öncesi, 50.30 ± 1,45 günde 2, 53.24 ± 0.80 üzerinde gün 4, 50.30 ± 1.68 üzerinde gün 6, 52.08 1,79 günde 8 ve 49.66 ± ± 2,24 günde 10. CCI grubunda pençe yazdırma alanı (%) yapıldı öncesi, günde 2, 0 ± 0 üzerinde gün 4, 8.86 ± 3.27 üzerinde gün 6, 0 ± 0 50.71 ± 3,17 6.6 ± 3,20 günde 8 ve 10,30 ± 5,60 günde 10. CCI + GBP grubunda pençe yazdırma alanı (%) yapıldı öncesi, 4.65±4.17 günde 2, günde 4, 20.20 ± 4.00 üzerinde gün 6, 15.18±5.57 55.59 ± 2,01 26.01 5.53 günde 8 ve 28.40 ± ± 6.04 günde 10.

Şekil 3 ' te gösterilen sonuçları, CCI ameliyattan sonra tek bir duruş saat ders değişikliği gösterir. Veri hesaplanır ve yüzde değiştirmek olarak (pençe yazdırma alanı veri için benzer) gösterilir. CCI Ipsilateral yan tek duruş azaltılmış ve GBP önemli ölçüde o yeniden elde etmek. Panel B Sham grubunda tek duruş (%) olduğunu 49.31 ± 2.15 öncesi, günde 2, 50.76 ± 0,44 üzerinde gün 4, 50.60 ± 1,11 üzerinde gün 6, 50.71 ± 0.67 51.50 0,96 günde 8 ve 49,00 ± ± 2,35 günde 10. CCI grubunda tek duruş (%) olduğunu 50,36 ± 3,17 öncesi, günde 2, 0 ± 0 üzerinde gün 4, 11,5 ± 3,25 üzerinde gün 6, 0 ± 0 13.61 ± 5,04 günde 8 ve 12.94 ± 6,40 günde 10. CCI + GBP grubunda tek duruş (%) yapıldı öncesi, günde 2, 18.66 ± 4,33 üzerinde gün 4, 25.48 ± 4,10 üzerinde gün 6, 4,87 5.44 ± 52.35 ± 0.91 30.26 2.17 günde 8 ve 32,24 ± ± 4,95 günde 10.

Figure 1
Şekil 1: mekanik allodynia von Frey test CCI farelerde tarafından değerlendirildi. Von testin CCI ameliyat sonrası artan 2 gün ve Sham grubu ile karşılaştırıldığında 10 gün boyunca sürekli Frey (A) pençe çekilme sıklığı (PWF, %). Gabapentin (GBP, 50 mg/kg, IP) önemli ölçüde CCI kaynaklı mekanik allodynia tersine. (B) PWF birikmiş veri eğri altındaki alan olarak gösterilir. ** p < 0,01 ve *** p < 0,001 CCI grup karşı. Hata çubukları belirtmek ortalama ± SD Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.

Figure 2
Şekil 2: pençe yazdırma alanı tarafından otomatik yürüyüş analizi CCI farelerde. (A)Sham, CCI ve CCI + GBP (gabapentin, 50 mg/kg, IP) gruplardan arka paws görüntülerini analiz yazılımı tarafından yakalanan. Beyaz dikdörtgen arka pençe analiz sistem tarafından algılanan göstergeleri vardır. Not en küçük pençe boyutu ve CCI ve bu azalma kısmen GBP tedavi tarafından kurtarıldı. (B) zaman ders pençe yazdırma alanının (%). Veri sol ve sağ arka pençe arasında yazdırma alanının yüzde değiştirmek gibi hesaplanır (örneğin, % 50 gösterir aynı pençe baskı alanlarında sol ve sağ tarafında). * p < 0,05 ve ** p < 0,01 CCI grup karşı. Hata çubukları ortalama ± SD gösterir

Figure 3
Şekil 3: otomatik yürüyüş analizi CCI farelerde tarafından tek duruşu. (A)yakalanan ve dönüştürülen görüntüleri tek duruş her pençe için farklı renklerle vurgulanır. Not Ipsilateral arka pençe için pembe izleme CCI grubunda kısaltılır ve gabapentin (GBP, 50 mg/kg, IP) önemli ölçüde benzer şekilde Sham seviyeye bulunamadı. (B) zaman tabii ki tek duruş (%). Veri sol ve sağ arka pençe arasında tek duruş yüzde değişikliği hesaplama sonra bir çizgi grafik özetlenir (örneğin, % 50 gösterir sol ve sağ tarafında aynı tek duruş). * p < 0,05, ** p < 0,01 ve *** p < 0,001 CCI grup karşı. Hata çubukları belirtmek ortalama ± SD Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Von Frey filamentler kullanarak mekanik allodynia şu anda, en yaygın ağrı hayvan modellerinde dokunsal aşırı duyarlılık göstermek için kullanılan yöntem ölçümdür. Nöropatik ağrı için hayvan modeller geliştirilmeye devam etmiş gibi duyusal işlev için değerlendirme metodolojisi de geliştirilmiş8,9,10,15olmuştur. Bu raporları, bu değişiklikler eski yöntemleri daha doğru hızlı ve kullanıcı dostu yerine sağlayabilir sürülmüştür. Ancak, bu yöntemleri verilerden hala kendi öznellik ve yöntemi gerçekleştirmek için beceri ya da deneyim şartı ile sınırlı. Buna ek olarak, hayvanların frenleyici von Frey Testi gerçekleştirirken kaçınamayız ve bu nedenle hayvanların kısıtlama ilgili stres ağrı yanıt sonuçları etkileyebilir.

Otomatik yürüyüş analizi Sistem otomatik olarak yürüyen hayvan (örneğin, kat, Agiz pençe baskı, duruş zaman, vbpençe kişisinin Toplam alan) çeşitli parametreleri ölçer ve bu nedenle deneyci daha objektif verileri için kullanabilirsiniz analiz12,13,14,16,17,18. Ayrıca, bu yöntem herhangi bir uyarı gerçekleştirilebilir; Bu nedenle, daha az invaziv ve serbestçe hareket kemirgen verilerden elde edilebilir. Bu çalışmanın sonuçları gösterildiği boyutu ayak basmak ve Ipsilateral arka pençe duruş süresi CCI cerrahi ile azaltılmış ve GBP tedavi tarafından kurtarıldı; benzer sonuçlar da von Frey test bulunur. Önceki gözlemler14ile tutarlı, yürüyüş analizi nöropatik ağrı hayvan modellerinde sonuçlarını değişen parametre CCI ilgili derecesi yansıtabilir gösteren von Frey testinden bu ile pozitif korelasyon yüksek derecesine sahip mekanik allodynia, nöropatik ağrı en rahatsız edici belirtilerden.

Burada, biz CCI nöropatik farelerde klasik von Frey testi ile ayrıntılı ve veri kısa bir karşılaştırma otomatik yürüyüş analiz sisteminin çalışması nasıl bir yöntem sağlar. Sonuç olarak, otomatik yürüyüş analizi nöropatik ağrı nedeniyle bu çalışma için en çok gelişme gösteren erişilebilir araç kullanımı kolay, objektif ve hassas olabilir.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Yazarlar ifşa gerek yok.

Acknowledgments

Bu araştırma Chungnam Ulusal Üniversitesi, Kore Enstitüsü Oriental Tıp (KIOM) ve vermek için Kore sağlık teknoloji R tarafından desteklenmiştir & D proje ile Kore sağlık sanayi geliştirme Enstitüsü (Sağlık Bakanlığı tarafından finanse edilen KHIDI), & Refah, Güney Kore (sayı vermek: HI15C0007).

Materials

Name Company Catalog Number Comments
0.9% Saline JW Pharmaceutical N/A Vehicle for drugs
1ml syringe BD Plastipak 300013 Injecting device
2, 2, 2-tribromoethanol (97% purity) Sigma T48402 Anesthetic
2-methyl-2-buthanol (99% purity) Sigma 152463 Solvent for 2, 2, 2-tribromoethanol
Catwalk Automated gait analysis system Noldus N/A Automatic analysis software of aniaml gait
Chromic catgut (4-0 thickness) AILEE C442 Ligature to make chronic constriction injury on the sciatic nerve
Gabapentin Sigma Y0001280 Analgeisc, Used as a positive control drug in this study
Graefe Forceps F.S.T 11051-10 Surgical instrument
Heating Pad DAESHIN ELECTRONICS M-303AT Regulation of body temperature
ICR Mouse Samtaco N/A Experimental animal
Mersilk (3-0 thickness) ETHICON W598H Suture material for surgical closure of skin
Micro-Mosquito F.S.T 13010-12 Surgical instrument
Micro-scissors F.S.T 14090-09 Surgical instrument
Needle holder F.S.T 12002-12 Surgical instrument
Povidone Iodine Firson N/A Disinfectant to prevent infection after surgery
Scalpel blade F.S.T 10010-00 (#10) Surgical instrument to make an incision
Scalpel handle F.S.T 10003-12 (#3) Surgical instrument to make an incision
Von-Frey filaments North Coast NC12775-99 Measurement device to test sensory function for mechanical stimulation

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Loeser, J. D., Treede, R. D. The Kyoto protocol of IASP Basic Pain Terminology. Pain. 137 (3), 473-477 (2008).
  2. Colloca, L., et al. Neuropathic pain. Nat Rev Dis Primers. 3, 17002 (2017).
  3. Vranken, J. H. Mechanisms and treatment of neuropathic pain. Cent Nerv Syst Agents Med Chem. 9 (1), 71-78 (2009).
  4. DeLeo, J. A., et al. Characterization of a neuropathic pain model: sciatic cryoneurolysis in the rat. Pain. 56 (1), 9-16 (1994).
  5. Kim, S. H., Chung, J. M. An experimental model for peripheral neuropathy produced by segmental spinal nerve ligation in the rat. Pain. 50 (3), 355-363 (1992).
  6. Seltzer, Z., Dubner, R., Shir, Y. A novel behavioral model of neuropathic pain disorders produced in rats by partial sciatic nerve injury. Pain. 43 (2), 205-218 (1990).
  7. Bennett, G. J., Xie, Y. K. A peripheral mononeuropathy in rat that produces disorders of pain sensation like those seen in man. Pain. 33 (1), 87-107 (1988).
  8. Dixon, W. J. Efficient analysis of experimental observations. Annu Rev Pharmacol Toxicol. 20, 441-462 (1980).
  9. Bonin, R. P., Bories, C., De Koninck, Y. A simplified up-down method (SUDO) for measuring mechanical nociception in rodents using von Frey filaments. Mol Pain. 10, 26 (2014).
  10. Chaplan, S. R., Bach, F. W., Pogrel, J. W., Chung, J. M., Yaksh, T. L. Quantitative assessment of tactile allodynia in the rat paw. J Neurosci Methods. 53 (1), 55-63 (1994).
  11. Chen, H., Du, J., Zhang, Y., Barnes, K., Jia, X. Establishing a Reliable Gait Evaluation Method for Rodent Studies. J Neurosci Methods. , (2017).
  12. Kang, D. W., et al. Antinociceptive Profile of Levo-tetrahydropalmatine in Acute and Chronic Pain Mice Models: Role of spinal sigma-1 receptor. Sci Rep. 6, 37850 (2016).
  13. Huehnchen, P., Boehmerle, W., Endres, M. Assessment of paclitaxel induced sensory polyneuropathy with "Catwalk" automated gait analysis in mice. PLoS One. 8 (10), e76772 (2013).
  14. Vrinten, D. H., Hamers, F. F. 'CatWalk' automated quantitative gait analysis as a novel method to assess mechanical allodynia in the rat; a comparison with von Frey testing. Pain. 102 (1-2), 203-209 (2003).
  15. Martinov, T., Mack, M., Sykes, A., Chatterjea, D. Measuring changes in tactile sensitivity in the hind paw of mice using an electronic von Frey apparatus. J Vis Exp. (82), e51212 (2013).
  16. Ferland, C. E., Laverty, S., Beaudry, F., Vachon, P. Gait analysis and pain response of two rodent models of osteoarthritis. Pharmacol Biochem Behav. 97 (3), 603-610 (2011).
  17. Mogil, J. S., et al. Hypolocomotion, asymmetrically directed behaviors (licking, lifting, flinching, and shaking) and dynamic weight bearing (gait) changes are not measures of neuropathic pain in mice. Mol Pain. 6, 34 (2010).
  18. Ferreira-Gomes, J., Adaes, S., Castro-Lopes, J. M. Assessment of movement-evoked pain in osteoarthritis by the knee-bend and CatWalk tests: a clinically relevant study. J Pain. 9 (10), 945-954 (2008).

Tags

Neuroscience sorunu 128 yürüyüş analizi mekanik allodynia von Frey testi nöropatik ağrı fareler ağrı
Kronik daralma Yaralanmalı farelerde otomatik yürüyüş analizi
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Kang, D. W., Choi, J. G., Moon, J.More

Kang, D. W., Choi, J. G., Moon, J. Y., Kang, S. Y., Ryu, Y., Park, J. B., Kim, H. W. Automated Gait Analysis in Mice with Chronic Constriction Injury. J. Vis. Exp. (128), e56402, doi:10.3791/56402 (2017).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter