Summary
A seguir descreve o desempenho de gastrectomia de manga vertical em camundongos. Este é um tipo de cirurgia de perda de peso que envolve a remoção de aproximadamente 70% do estômago.
Abstract
Cirurgia bariátrica, como gastrectomia de manga vertical (VSG), é uma cirurgia do tracto gastrointestinal é executada com a finalidade de perda de peso. Cirurgia bariátrica é atualmente o tratamento mais eficaz a longo prazo para a obesidade. Além de perda de peso, cirurgia bariátrica produz benefícios adicionais de saúde como remissão do diabetes tipo 2, remissão de hipertensão e diminuiu o risco de desenvolver certos tipos de câncer. Os mecanismos, além da perda de peso, para estes benefícios permanecem incompletamente definidos. Portanto, os modelos animais de cirurgia bariátrica estão sendo desenvolvidos e validados para identificar os mecanismos, levando a estes benefícios, com o objetivo de melhorar a compreensão da fisiologia gastrointestinal e identificação de novos alvos terapêuticos. VSG, tornou-se o procedimento mais comumente realizado bariátrico na clínica nos Estados Unidos porque é altamente eficaz em produzir perda de peso e melhoria metabólica e é simples de realizar do que outros procedimentos bariátricos. Portanto, temos desenvolvido e validado um modelo murino de VSG. Este modelo murino de VSG recapitula a muitos dos efeitos da VSG nos seres humanos, incluindo o Regulamento melhorado de glicose e pressão arterial. O método baseia-se no isolamento do estômago, ligadura dos vasos gástricos e remoção de 70% do estômago por cruza ao longo da curvatura maior do estômago. Nós bem sucedida deste protocolo cirúrgico para várias linhas de rato geneticamente modificado para definir os contribuintes mecanicistas para os benefícios de VSG. Além disso, este modelo murino de VSG foi combinado com outras técnicas cirúrgicas, para alcançar a visão mecanicista mais profunda. Portanto, este é um modelo simples e versátil para estudar fisiologia gastrointestinal e os benefícios de saúde de cirurgia bariátrica.
Introduction
Como a epidemia de obesidade continua a crescer em todo o mundo cirurgia bariátrica ganhou popularidade como é o tratamento mais eficaz a longo prazo para obesidade1. Infelizmente, perda de peso dieta e exercício é difícil de alcançar e relativamente ineficaz sobre o longo prazo2,3. Cirurgia bariátrica, como gastrectomia de manga vertical (VSG), é definida como a manipulação do trato gastrintestinal com a finalidade de1,de perda de peso4. Embora a perda de peso é um resultado proeminente da cirurgia bariátrica, cirurgia bariátrica oferece outros benefícios de saúde como melhorar comorbidades da obesidade e estender a vida útil de5. Por exemplo, a cirurgia bariátrica resulta em altas taxas de remissão do diabetes tipo 2 e hipertensão e redução do risco de vida do desenvolvimento de certos tipos de câncer,1,6,7. Digno de nota, o efeito da cirurgia bariátrica causando remissão da diabetes tipo 2 e hipertensão é frequentemente observado logo após a cirurgia e antes da perda de peso8,9. Isso realça o conceito de que existem mecanismos independentes do peso corporal, contribuindo para os benefícios de saúde observados após a cirurgia. Modelos animais de cirurgia bariátrica têm sido desenvolvidos e são utilizados para estudar os mecanismos pelos quais estes benefícios de saúde ocorrem de11,10,12.
Podemos ter validado um modelo do rato da VSG, que temos aplicado aos vários modelos de rato geneticamente modificado para estudar os mecanismos pelos quais a cirurgia bariátrica melhora comorbidades da obesidade como diabetes tipo 2, hipertensão e câncer colorretal10 , 11 , 12. modelos de roedores permitem controle mais experimental e a capacidade para executar a manipulação genética ou farmacêutica para definir o papel de genes específicos ou sinalização de percursos turísticos. Estamos focando principalmente VSG porque VSG é o procedimento mais comumente realizado bariátrico na clínica no Estados Unidos13. Além disso, o VSG é um modelo cirúrgico simples, com poucas modificações anatômicas em comparação com outros procedimentos como Roux-en-Y gastric bypass ou biliopancreatic desvio.
Nosso modelo de rato da VSG recapitula os seguintes efeitos da cirurgia bariátrica, observados em humanos: perda de peso, ingestão de alimentos reduzida, regulamento de glicose melhorou, melhorou a função ilhéu, aumento da secreção pós-prandial glucagon-como peptide-1 (GLP-1), redução da pressão arterial e aumento circulante ácidos biliares concentrações10,11,12,13,14,15. Portanto, este é um modelo ideal para estudar os corpo peso dependentes e independentes mecanismos pelo qual VSG melhora ou resolve comorbidades da obesidade. Além disso, é um modelo confiável que pode ser combinado com outros procedimentos cirúrgicos, permitindo a investigação do impacto da VSG sob várias condições de doença com maior visão mecanicista12.
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Protocol
Todos os protocolos experimentais foram aprovados pelo Comitê de uso e Cornell University institucional Cuidado Animal.
1. pré-cirúrgica preparação
Nota: Os ratos do estudo são tipicamente em um C57BL induzida por dieta obeso fundo fazer estudos translationally relevantes a obesidade humana e resistência à insulina. Ratos machos e fêmeas podem ser estudados, conforme descrito nas etapas subsequentes.
- Com uma idade de 2 meses, coloque os ratos em uma dieta de gordura alta 45% ou 60% por 2 meses (ver Tabela de materiais).
Nota: Os ratos são alimentados uma dieta de alta gordura para criar um fenótipo resistente à insulino e obeso. Períodos mais curtos ou mais longos de alta gordura dieta alimentar podem ser utilizados dependendo os objetivos do estudo. - Continuar a alimentar os ratos ad libitum até cirurgia. Se são necessárias medições de base, depois de 7 semanas de alto teor de gordura da dieta alimentar, rápido ratos para 6 h ou durante a noite e tirar uma amostra de sangue da linha de base para a medição de metabólitos de interesse (por exemplo, glicose).
- Continue a permitam ratos uma semana para se recuperar após a coleta de sangue antes da cirurgia de farsa ou VSG e dieta de ratos no alto teor de gordura. Coloque os ratos em um líquido (veja a Tabela de materiais) da dieta por 4 dias antes da cirurgia.
Nota: Os ratos são mantidos em uma dieta líquida antes e após a cirurgia para limpar o aparelho digestivo das partículas que podem afectar a resposta curativa. - Esterilizar os itens a seguir antes da cirurgia: folha, gaze, algodão com ponta aplicadores (CTAs) e instrumentos cirúrgicos (pinça, tesoura, tesoura de íris, pinça de dumont, de funcionamento serrilhada pinça Adson-Brown, agulha de gavagem, motorista de microneedle, tesoura de mola ).
2. vertical Sleeve gastrectomia e procedimentos de Souza
- No dia da cirurgia pesar ratos para obter uma medida de peso de referência.
- Equipe a sala cirúrgica com uma almofada de aquecimento, banho de água aquecida e sistema de anestesia. Conjunto banho-maria a 37 ° c e usá-lo para aquecer a solução salina 0,9% para a irrigação. Limpe o campo cirúrgico com 70% de etanol e utilizar técnica asséptica para abrir ferramentas e cirurgia autoclavado pack.
Nota: A almofada de aquecimento é usada para manter o animal aquecido durante a cirurgia e a recuperação da anestesia. - Utilizando uma câmara de indução, anestesia o mouse com 5% de isoflurano e O2 vazão de 1 L/min. Confirme se o mouse está no plano adequado de anestesia, realizando uma pitada de dedo do pé. Manter o mouse com isoflurano 1-3% e uma taxa de fluxo de2 O de 0,6 L/min, uma vez que um plano consistente de anestesia foi alcançado.
- Uma vez que o mouse é anestesiado, colocar pomada (ver tabela de materiais) em seus olhos para mantê-los húmida durante a cirurgia. Neste momento também administrar um analgésico, como o meloxicam (2 mg/kg por via subcutânea). Corte o cabelo a partir do umbigo para a axila, mantendo a pele suavemente para fornecer a tensão.
- Como pele do mouse é fina e delicada, tome cuidado para não causar lesões na pele quando cortar o cabelo. Limpe a pele com iodo-povidona e álcool.
- Use luvas estéreis e prepare o campo cirúrgico estéril e instrumentos. Execute o resto do procedimento utilizando uma técnica estéril. Prepare o campo cirúrgico estéril, colocando cortinas cirúrgicas estéril em ambos os lados do rato. Use folha de estanho autoclavada para criar um pano cirúrgico para o mouse.
- Corte um pequeno buraco na folha de estanho para permitir acesso ao abdômen do rato.
- Fazer uma incisão da pele do abdômen médio (umbigo) ao nível da cartilagem xifoide usando uma tesoura de íris. Identificar o linea alba e uso íris tesoura para cortar através da parede do corpo ao longo da linea alba. Use CTAs para elevar suavemente o estômago fora do abdômen e então sem rodeios dissecar o omento maior fora da curvatura maior do estômago.
- Ligam as artérias gástricas curtas que se estende entre o fundo do estômago e do baço, colocando duas ligaduras usando sutura de monofilamento de 7-0. Use tesoura de mola para cortar entre as duas ligaduras. Uma vez que a artéria é transecção, totalmente exteriorize o estômago da cavidade abdominal. Coloque gaze sob o estômago e molhado com soro fisiológico para manter o tecido úmido.
- Procedimento de Souza
- Para o procedimento de Souza, coloque um padrão contínuo simples solto da sutura usando sutura de monofilamento de 6-0 com uma agulha cónica. Começa com 2 mm para a direita (direito do cirurgião) do esôfago. Coloque a linha de sutura ao longo da parede gástrica ventral e em seguida, continuar ao longo da parede gástrica dorsal.
Nota: Para todas as manipulações gástricas, use apenas a sutura absorvível monofilamento para diminuir o risco de infecção. Além disso, use apenas a sutura com uma agulha cónica para todas as manipulações gástricas, como o uso de uma agulha de corte aumenta o risco de sutura "puxar-através de" levando a danos no tecido gástrico e deiscência. - Passe a agulha completamente através de uma parede gástrica ao colocar a sutura. Certifique-se a sutura está deitado, mas não restringindo o estômago. Delicadamente, amarrar a sutura fora de usar lances de 3-4 e pule para o passo 2.9.
- Para o procedimento VSG pular etapa 2.7 e prossiga com a etapa 2.8.
- Para o procedimento de Souza, coloque um padrão contínuo simples solto da sutura usando sutura de monofilamento de 6-0 com uma agulha cónica. Começa com 2 mm para a direita (direito do cirurgião) do esôfago. Coloque a linha de sutura ao longo da parede gástrica ventral e em seguida, continuar ao longo da parede gástrica dorsal.
- Procedimento VSG
- Para o procedimento VSG, ligate proeminentes ramos da artéria gástrica e veia com sutura de monofilamento com uma agulha cónica usando 3 lança para cada nó de 7-0. Coloque as ligaduras logo abaixo (ou seja, em direção a curvatura menor do estômago) a linha pretendida de transecção.
Nota: A linha pretendida de transecção começa em ~ 2 mm acima (ou seja, no sentido da curvatura maior do estômago) o entalhe cardíaco do estômago e pelo menos 2 mm abaixo do pilcatus de margo e estende-se até a extremidade proximal do lobo direito do pâncreas. Normalmente, existem 4 vasos por parede gástrica que precisam ser ligados; no entanto, pode variar entre ratos. - Para evitar o derrame do conteúdo gástrico durante a gastrectomia, coloque uma linha simples contínua da sutura passando por ambas as paredes gástricas apenas abaixo da linha pretendida de transecção usando sutura de monofilamento de 6-0 com uma agulha cónica. Começa a linha de sutura para a direita do cirurgião do esôfago e abaixo a margo pilcatus e final logo acima do pâncreas.
- Coloque a ponta fina hemostatos acima da linha de sutura e use tesoura de mola para cortar entre a linha de sutura e hemostatos. Remova o tecido gástrico necrosante do campo cirúrgico estéril.
- Para o procedimento VSG, ligate proeminentes ramos da artéria gástrica e veia com sutura de monofilamento com uma agulha cónica usando 3 lança para cada nó de 7-0. Coloque as ligaduras logo abaixo (ou seja, em direção a curvatura menor do estômago) a linha pretendida de transecção.
Nota: Um padrão simples sutura descontínua é recomendado já que este fornece o fechamento mais seguro do que o padrão de sutura contínua simples.
Nota: Isto substitui experientes durante a cirurgia de perda de fluido e fornece um método para a aplicação direta de antibióticos para o sítio cirúrgico ajudar com a recuperação.
Nota: Se medições de ingestão de alimentos precisos são obtidos ao longo do estudo, os ratos devem continuar a ser alojados individualmente ao longo do estudo. Há um risco de obstrução de corpo estranho de roupa de cama de gaiola em casa a comer. Os animais devem ser alojados em gaiolas sem fundamento, exceto o material para fornecer enriquecimento de nidificação (ver Tabela de materiais).
3. pós-operatório Mouse cuidados e medidas
- Retorne o mouse para sua gaiola em casa e coloque a gaiola em uma almofada de aquecimento. Manter os ratos em uma dieta líquida pelo menos 7 dias após a cirurgia. Administrar um analgésico, como o meloxicam (2 mg/kg por via subcutânea), por 2 dias após a cirurgia.
Nota: Um antibiótico, como enrofloxacina (20 mg/kg), pode ser dada por até 7 dias após a cirurgia. Antibióticos são dadas para minimizar o risco de infecção pelo procedimento cirúrgico e podem ou podem não ser necessários, dependendo do nível de esterilidade, mantida durante todo o procedimento. No entanto, se os antibióticos são usados, eles devem ser administrados a ratos todas no mesmo estudo para manter a consistência. - Durante o período pós-operatório avalie o peso corporal, ingestão de alimentos, defecação, nível de atividade e disposição pelo menos diariamente para garantir cura adequada e recuperação. Conduta de acompanhamento pós-operatório durante 14 dias após a cirurgia.
Nota: Falha cirúrgica é normalmente vista ou imediatamente após a cirurgia, ou no prazo de três dias pós-operatório. Animais que não estão comendo ou bebendo no segundo dia após a cirurgia devem ser acompanhados por complicações cirúrgicas. - Após a conclusão bem-sucedida do período pós-operatório, medir a ingestão de comida e peso de corpo regularmente ao longo do estudo para garantir a manutenção do fenótipo adequado.
- Executar um teste de tolerância de glicose oral (OGTT) para avaliar a tolerância à glicose, a secreção de insulina glicose-estimulada e intestino a secreção de hormônio.
- Executar o OGTT em ratos após jejum por 6 h e, em seguida, os ratos gavage com solução de glicose 50% com uma dose de 1g/kg.
- Colete amostras de sangue de cauda em 0, 2,5, 5, 15, 30, 60 e 120 minutos após a intubação. Medir a glicose no sangue com um glicosímetro para estes pontos de tempo. Colete amostras de soro em cada ponto de tempo para a medição de vários hormônios, como insulina e GLP-1.
- Camundongos rápidos para 6 h antes da eutanásia. Tome uma medida de amostra e glicose de sangue final. Compare a medição final de glicose para a medição de referência. Eutanásia em ratos com uma injeção intraperitoneal de pentobarbital em uma dose de 200 mg/kg.
- Use a linha de base e as amostras de soro final para medir analitos adicionais e comparar valores cirúrgicos pré e pós-operatório.
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Representative Results
A farsa e VSG procedimentos são descritos na Figura 1. A figura 1A mostra onde a linha de sutura é colocada ao longo das paredes gástricas durante o procedimento de Souza. Nesta mesma área é onde o estômago é cortado durante a cirurgia VSG. A figura 1B mostra o remanescente tubular de estômago esquerda após realização de VSG.
Estatísticas e análise de dados
Os dados são apresentados como média ± SEM. dados foram analisados por ANOVA com pós-teste de Tukey ou pelo teste t de Student, conforme indicado. As diferenças foram consideradas significativas em P< 0,05.
VSG diminui o peso de corpo e ingestão de energia e melhora a tolerância à glicose
Dieta de alta gordura alimentados masculino C57BL ratos foram operados e estudou como descrito acima. VSG-operado ratos exibiram o consumo de energia reduzido e peso corporal em comparação com ad libitum alimentou ratos de operação (ingestão de energia cumulativa: Sham = 474 ± 19, VSG = 385 ± 14 kcal; Peso corporal final: Sham = 34,5 ± 2,1, VSG = 29,9 ± 1 g; Figura 2A-B, *P< 0,05). Três semanas após a cirurgia, realizou um teste de tolerância à glicose oral. Medições de glicose foram feitas utilizando um glicosímetro (ver Tabela de materiais). Insulina de soro e concentrações de GLP-1 foram medidas por imunoensaio de eletroquimioluminescência sanduíche multiplex (ver Tabela de materiais). VSG melhorou a tolerância à glicose (glicose AUC0-120: Sham = ± 1.467 76, VSG = 1.061 ± 72 mmol/L x 120 minutos; Figura 3A-B, P < 0,01), aumento da secreção de insulina glicose-estimulada (% aumento da insulina, da linha de base para 15 minutos após o gavage de glicose: Sham = 92 ± 54, VSG = ± 2.720 1.241%; Figura 3 C, P < 0.05) e aumento da secreção de GLP-1 pós-prandial comparada com operação ad libitum alimentada ratos controle (GLP-1 AUC0-120: Sham =-124 ± 45, VSG = 111 ± 48 pmol/L x 120 minutos; Figura 3D, *P < 0,01). Estes resultados são consistentes com o que é visto nos seres humanos e outros modelos de roedores após cirurgia bariátrica9,17,18,19.
Figura 1: diagrama de VSG. Representação da linha de transecção durante VSG. (A) nesta mesma área é onde uma simples linha contínua de sutura é colocada ao longo das paredes gástricas durante o procedimento de Souza. (B) representação do remanescente tubular deixou após a conclusão do procedimento de VSG. Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.
Figura 2: VSG reduz o peso de corpo e consumo de energia. Ingestão de energia cumulativa (A) e corpo de peso (B). P < 0.05 comparado com Sham por Student t-teste e *P < 0.05 Sham comparado com VSG por ANOVA de dois fatores. Resultados mostrados como dizer ±SEM. n = 6-7 por grupo. Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.
Figura 3: VSG melhora a tolerância à glicose, aumenta a secreção de insulina glicose-estimulada e aumenta a secreção de GLP-1 pós-prandial durante um OGTT. Concentração de glicose no sangue (A) , (B) área de glicose sob a curva (AUC), % (C) aumento da concentração de insulina sérica da linha de base para 15 minutos após gavagem de glicose e (D) soro total GLP-1 concentrações durante um OGTT. P < 0.05, * *P < 0,01, * * *P < 0.001 VSG comparado com Sham por Student t-teste da AUC ou porcentagem de mudança na insulina. Resultados mostrados como dizer ± SEM. n = 6-7 por grupo. Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.
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Discussion
Cirurgia bariátrica é o tratamento mais eficaz a longo prazo para a obesidade e resulta em outros benefícios de saúde, tais como taxas elevadas de tipo 2 diabetes e hipertensão remissão1,9,15. Modelos de murino de cirurgia bariátrica fornecem uma poderosa ferramenta para a identificar os mecanismos pelos quais cirurgia bariátrica provoca melhorias rápidas e pronunciadas em comorbidades da obesidade. Além disso, modelos murino de cirurgia bariátrica fornecem um novo paradigma para estudar a biologia básica, pelo qual o intestino regula vários processos, tais como o metabolismo, função cardiovascular e carcinogênese10,11, 12.
Nós desenvolvemos um modelo do rato de gastrectomia de manga vertical para estudar os mecanismos pelos quais a cirurgia bariátrica melhora comorbidades da obesidade como tipo 2 diabetes e hipertensão10,11,12. Este modelo de VSG consiste em ligadura dos vasos de estômago seguido por remoção de 70% do estômago. A condição de controle é uma cirurgia de farsa na qual sutura é colocada ao longo da parede gástrica no mesmo local onde o estômago iria ser seccionado em um procedimento VSG. Neste documento, apresentamos dados onde operação ratos foram alimentados ad libitum após a cirurgia. A fim de investigar os efeitos de peso independentes do corpo, um grupo de controle de operação que é comida limitada, para coincidir com seu peso corporal de ratos VSG-operado deve ser estudada, como descrevemos anteriormente11,12. Nossos dados demonstram que este modelo VSG alcança ambas as reduções no peso corporal e ingestão de alimentos em relação ao ad libitum alimentados controles de operação. Testes de tolerância de glicose oral são feitas pelo menos duas semanas após a cirurgia para permitir que animais o tempo suficiente para se recuperar de uma cirurgia, para que a recuperação cirúrgica não é um fator de confundimento. Consistente com a diminuição do peso corporal, o modelo apresentado apresenta tolerância à glicose melhorada. Semelhante ao que é observado em pacientes humanos após cirurgia bariátrica, VSG-operado ratos exibem notável aumento da secreção de insulina glicose-estimulada e de14,de secreção de GLP-1 pós-prandial17.
Membros do laboratório são exaustivamente treinados em cirurgia Souza e VSG e prática durante vários meses para dominar essa técnica e atingir uma taxa de sobrevivência de mais de 95%; no entanto, isto irá variar com base na experiência anterior. Antes de iniciar um estudo completo, recomenda-se que um cirurgião novo validar sua VSG e sham a cirurgias, medindo o peso corporal, ingestão de alimentos e tolerância à glicose em prática sham e ratos VSG-operado para garantir que o fenótipo apropriado está sendo alcançado. Além disso, é importante acompanhar de perto os ratos após cirurgia para sinais de falha cirúrgica. A complicação pós-operatória mais comum é o vazamento do conteúdo do estômago. Pós-operatória sinais desta complicação incluem falta de consumo de alimentos, falta de produção fecal e uma massa abdominal superior palpável. Animais que apresentam sinais de complicação cirúrgica devem ser prontamente sacrificados. Se complicações pós-operatórias são um problema recorrente, deve ser realizada uma reavaliação da técnica cirúrgica. O problema mais comum é o fechamento inadequado da parede gástrica levando a vazamento do conteúdo gástrico. Fechamento da parede gástrica é o passo mais importante no protocolo. Uma vez concluída a colocação de suturas, deve haver sem lacunas visíveis entre knots. É aconselhável que CTAs são usados para verificar que não há nenhum vazamento do conteúdo do estômago antes de fechar o abdome. Outra menos problema comum é a indução de estase gastrointestinal por manipulação inadvertida do intestino delgado ao inicialmente remover o estômago da cavidade abdominal. Deve ter cuidado para não manipular o intestino porque o intestino delgado do rato é muito frágil e manipulação excessiva do intestino pode levar a estase.
Nosso modelo de rato da VSG tem resultados cirúrgicos semelhantes ao de outros grupos e taxas de sobrevivência superiores a 95%. Semelhante a pacientes humanos e outros modelos de rato de VSG, os modelos VSG rato apresentado exibiram a perda de peso, reduziram a ingestão de alimentos, melhoraram a tolerância à glicose e aumentaram pós-prandial GLP-1 secreção4,18, 19. este procedimento de Souza difere de outros modelos, como envolve a colocação de suturas enquanto outros modelos só aplicam pressão no estômago com fórceps romba19,20. Colocação de suturas permite o controle do efeito da colocação de material estranho no estômago, proporcionando também a manipulação cirúrgica do tecido gástrico. Como qualquer modelo de rato, as limitações desta técnica são que a tradução de dados gerados a partir deste modelo de rato para os seres humanos é limitada pelas diferenças de espécie. No entanto, os ratos permitem maior controle e manipulação experimental, fornecendo uma visão mecanicista mais profunda do que pode ser alcançado em pacientes humanos. Embora a maioria dos estudos bariátricos murino centraram-se principalmente sobre os benefícios de glucoregulatory destes procedimentos, usamos o modelo apresentado de VSG murino para definir os mecanismos de condução o impacto da cirurgia bariátrica na hipertensão e câncer12 . Isso realça importantes aplicações futuras deste modelo.
Modelos de murino de cirurgia bariátrica fornecem uma ferramenta importante para estudar os mecanismos pelos quais a cirurgia bariátrica produz perda de peso e confere benefícios à saúde. Além disso, bariátricos modelos fornecem um paradigma de romance com o qual deseja estudar como o intestino interfaces com outros processos fisiológicos no corpo. Descrito aqui é um modelo de VSG que foi previamente validada e recapitula os efeitos vistos em humanos após VSG10,11,12. Além disso, este é um modelo versátil que pode com sucesso ser combinado com outros procedimentos cirúrgicos para a avaliação dos processos de diferentes doenças e/ou mais detalhada avaliação mecanicista12.
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Disclosures
Os autores declaram não há conflitos de interesses, exceto Dr. Cummings recebeu financiamento da Eli Lilly e Company.
Acknowledgments
Esta pesquisa foi apoiada pelo NIH/ICN R21CA195002-01A1, Conselho o Presidente das mulheres de Cornell e da SUNY pós-graduação diversidade comunhão. Laboratório da Dr. Cummings também recebido financiamento durante o período do projeto de Cornell programa de treinamento de biologia comparativa de câncer e Eli Lilly e Company.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 45% high fat diet | Research Diets | D12451 | |
| 60% high fat diet | Research Diets | D12492 | |
| Boost | Nestle | 160-67538 | rich chocolate flavor |
| 6-0 Suture | Ethicon | Z432 | monofilament absorbable/taper |
| 7-0 Suture | Covidien | 8866127-01 | monofilament absorbable/taper |
| Cotton Swabs | Fisherbrand | 23-400-118 | small |
| Cotton Swabs | Fisherbrand | 233-400-101 | large |
| Gauze | Various | 4x4 4 ply and 2x2 4 ply | |
| Foil | Various | ||
| Surgery drape | Various | ||
| 0.9% saline solution | Various | ||
| LRS | Hospira | 170RX | |
| Betadine | Various | ||
| Alcohol | Various | ||
| Eye Ointment | Paralube® Vet Ointment | 17033-211-38 | |
| Tissue Adhesive | Vetbond | 1469SB | |
| Meloxicam (Metacam) | Boehringer Ingelheim | 141-213 | 5 mg/ml |
| Enrofloxacin | Baytril | 08713254-186599 | 22.7 mg/ml |
| Thin tipped hemostats | Fine Science Tools | 13021-12 | |
| Metzenbaum Scissor | Fine Science Tools | 14018-18 | |
| Iris Scissors | Fine Science Tools | 14058-09 | |
| Dumont Forcep | Fine Science Tools | 11251-20 | |
| Serrated Forcep | Fine Science Tools | 11020-12 | |
| Gavage needle | Fine Science Tools | 18060-20 | |
| Microneedle driver | Fine Science Tools | 12075-14 | |
| Spring Scissor | Fine Science Tools | 15396-00 | |
| Insulin syringe | Various | ||
| 1mL syringe | Various | ||
| 20mL syringe | Various | ||
| Glucometer (one touch ultra mini) | Lifescan | 70021208 | |
| Multiplex insulin and GLP-1 kit | Meso Scale Discovery | K15171C-1 | |
| GraphPad Prism 6.00 | GraphPad Software | ||
| Nestlets | Ancare | NES3600 |
References
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