Summary
다음에서는 쥐에 수직 소매 위절제술의 성능을 설명합니다. 복 부의 약 70%의 제거를 포함 하는 체중 감소 수술의 유형입니다.
Abstract
수직 소매 위절제술 (VSG) 같은 bariatric 수술은 체중 감량을 목적으로 수행 되는 위장의 수술. Bariatric 수술은 현재 비만 대 한 가장 효과적인 장기 치료입니다. 체중 감소 이외에 bariatric 수술 타입 2 당뇨병, 고혈압, 면제의 면제와 같은 추가적인 건강 혜택을 생성 하 고 특정 유형의 암 개발의 위험을 감소. 이러한 혜택에 대 한 체중 감량 넘어 메커니즘 불완전 하 게 정의 된 남아 있습니다. 따라서, bariatric 수술의 동물 모델 되는 개발 및 위장 생리학의 이해와 새로운 치료 목표를 식별 개선의 목표와 함께 이러한 혜택을 선도 하는 메커니즘을 식별 하는 유효성 검사. VSG 되고있다 미국에서 병원에 가장 일반적으로 수행된 bariatric 절차 때문에 체중 감량 및 대사 개선, 생산에 매우 효과적 이며 다른 bariatric 절차 보다 수행을 간단 하 게. 따라서, 우리는 개발과 VSG의 murine 모델 검증. 이 murine VSG 모델 VSG 인간, 향상 된 혈당 및 혈압 조절 등에서의 효과의 많은. 메서드를 사용 하면 복 부의 더 큰 곡률에 따라 transecting에 의해 복 부의 절연, 위 혈관의 결 찰 및 복 부의 70%의 제거에 기반. 우리 기계 참여자 VSG의 혜택을 정의 하기 위해 다양 한 유전자 변형된 마우스 라인을 성공적으로이 수술 프로토콜을 적용 했습니다. 또한,이 murine VSG 모델 깊은 기계적 통찰력을 달성 하기 위해 다른 외과 기술로 결합 하고있다. 따라서, 위장 생리학을 공부 하 고 비만 수술의 효능에 대 한 간단 하 고 다재 다능 한 모델입니다.
Introduction
비만 전세계 성장 지속으로 bariatric 수술 비만1에 대 한 가장 효과적인 장기 치료로 인기를 얻고 있다. 불행히도, 체중 감량 식이 요법과 운동에 의해 끝났습니다 달성 하기 어렵고 상대적으로 효과 없는 장기2,3. Bariatric 수술, 수직 소매 위절제술 (VSG), 같은 무게 손실1,4목적 위장의 조작으로 정의 됩니다. 무게 손실 bariatric 수술의 눈에 띄는 결과, 비록 bariatric 수술 비만 comorbidities 향상과 수명5확장 등 다른 건강 상의 혜택을 제공 합니다. 예를 들어 bariatric 수술 타입 2 당뇨병과 고혈압, 그리고 특정 유형의 암1,,67의 개발의 평생 위험 감소의 면제의 높은 속도에서 발생합니다. 메모의 2 형 당뇨병 및 고혈압의 면제를 일으키는 원인이 되는 비만 수술의 효과 종종 관찰 수술 후 곧 체중 감량8,9이전. 이 수술 후 관찰 하는 효능에 기여 하는 몸 무게의 독립적인 기계 장치는 개념을 강조 표시 합니다. Bariatric 수술의 동물 모델 개발 되었습니다와10,,1112이러한 건강 상의 혜택에서 발생 하는 데 사용 하는 메커니즘을 연구 활용 됩니다.
우리 우리는 bariatric 수술 비만 2 형 당뇨병, 고혈압, 대 장 암10 등 comorbidities 향상 하는 메커니즘을 연구 하는 다양 한 유전자 변형된 마우스 모델에 적용 된 VSG의 마우스 모델을 확인 한 , 11 , 12. 설치류 모델 허용 더 실험 제어 및 유전 또는 제약 조작, 특정 유전자의 역할 또는 관심의 신호 경로 정의 수행할 수 있는 능력. VSG 미국13클리닉에서 가장 일반적으로 수행된 bariatric 절차 이므로 우리 VSG에 주로 집중 하 고 있다. 또한, VSG Roux-en-Y 위장 바이패스 또는 biliopancreatic 전환 등 다른 절차에 비해 적은 해부학 수정 간단한 수술 모델입니다.
VSG의 우리의 마우스 모델이 인간에서 관찰 된 bariatric 수술의 효과: 체중 감소, 감소 된 음식 섭취 량, 향상 된 포도 당 규칙, 섬 기능 향상, 사후 높은가격순 글 루카 곤 유사 펩 티 드-1 (GLP-1) 분 비를 증가 동맥 혈압 및 증가 순환 담 즙 산 농도10,11,12,13,,1415감소. 따라서, 몸 무게 의존 하 고 독립적인 메커니즘은 VSG 개선 또는 비만 comorbidities 해결을 공부 하는 이상적인 모델입니다. 또한, 그것은 큰 기계적 통찰력12다양 한 질병 조건 VSG의 영향의 조사에 대 한 허용 하는 다른 수술 절차와 결합 될 수 있는 신뢰할 수 있는 모델입니다.
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Protocol
모든 실험 프로토콜은 코넬 대학 기관 동물 관리 및 사용 위원회에 의해 승인 되었습니다가지고.
1. 미리 수술 준비
참고: 마우스 연구는 일반적으로 배경에 C57BL 다이어트 유발 된 비만 연구 translationally 인간의 비만 인슐린 저항에 관련 된 수 있도록. 남성 및 여성 쥐 후속 단계에 설명 된 대로 공부 될 수 있습니다.
- 2 개월의 나이, 2 개월 ( 재료의 표참조)에 대 한 45% 또는 60% 높은 지방 다이어트에 마우스를 놓습니다.
참고: 마우스는 비만 인슐린 저항 표현 형을 생성 하 고 지방 규정식을 먹인 다. 높은 지방 다이어트를 먹이 기의 짧은 또는 긴 기간 연구의 목표에 따라 사용할 수 있습니다. - 쥐를 먹이를 계속 광고 libitum 수술까지. 경우 초기 측정 필요 후 7 주 동안 높은 지방 다이어트 먹이, 6 h에 대 한 마우스를 빨리 또는 밤새 고 관심 (예: 포도 당)의 대사 산물의 측정을 위한 기준 혈액 샘플.
- 높은 지방에 쥐 다이어트 있게 쥐 1 주일 이전 가짜 수술 또는 VSG 혈 후 복구 계속 합니다. 액체에 마우스를 놓고 수술 하기 전에 4 일 동안 ( 재료의 표참조) 다이어트.
참고: 마우스 유지 됩니다 액체 다이어트 취소 치료 응답 저하 될 수 있습니다 미 립 자 물질의 소화 관 수술 전후. - 수술 하기 전에 다음 항목을 소독: 포 일, 거 즈, 면 도포 (CTAs) 및 수술 기구 (운영 위, 아이리스 시저, dumont forcep hemostat 톱니 브라운 Adson forcep, gavage 바늘, 미세 바늘 드라이버, 봄이 위를 스쳐 ).
2. 수직 소매 위절제술 및 가짜 절차
- 수술 당일 기준 무게 측정을 얻기 위해 마우스 무게.
- 마 취 시스템, 온수 물 목욕와 난방 패드 수술 실 장비. 37 ° C에 물 목욕을 설정 하 고 따뜻한 관개 0.9% 식 염 수 솔루션 사용. 70% 에탄올과 수술 필드를 청소 하 고 메 마른 기술 압력가 수술 팩 및 도구를 사용 하 여.
참고: 난방 패드 동물 수술 및 마 취에서 회복 하는 동안 따뜻하게 유지 하는 데 사용 됩니다. - 유도 챔버를 사용 하 여, 5 %isoflurane O2 유량 1 L/분입니다 마우스 마 취의 적절 한 평면에 발가락 핀치를 수행 하 여 확인의 마우스 anesthetize. 마 취의 일관 된 평면 달성 되 면 1-3% isoflurane 0.6 L/min의 O2 흐름 속도와 마우스를 유지.
- 일단 마우스 취 장소 눈 연 고 (재료의 표 참조) 그들을 수술 하는 동안 촉촉한 유지 하는 눈에. 이 이번에도 진통제, meloxicam 등 관리 (2 mg/kg 피하). 부드럽게 긴장을 제공 하는 피부 잡고 겨드랑이에 배꼽에서 머리 클립.
- 마우스의 피부는 얇고 섬세 한, 머리를 자르는 때 피부 병 변 발생 하지 주의 하십시오. Povidone-요오드와 알코올 피부를 청소.
- 멸 균 장갑 하 고 메 마른 외과 분야와 악기를 준비. 무 균 기술을 사용 하 여 절차의 나머지 부분을 수행 합니다. 마우스의 양쪽에 메 마른 외과 커튼을 배치 하 여 무 균 수술 필드를 준비 합니다. 압력가 깡통 호 일을 사용 하 여 마우스에 대 한 수술 드 레이프를 만들.
- 마우스의 복 부에 대 한 액세스를 허용 하는 종이에 작은 구멍을 잘라.
- 아이리스가 위를 사용 하 여 xiphoid 연골의 수준에 중앙 복 부 (배꼽)에서 피부의 절 개를 확인 합니다. 알바와 사용 아이리스는 교육 따라 체 벽을 통해 잘라가 위 교육 식별 알바. CTAs를 사용 하 여 부드럽게 복 부의 위 상승 하 고 퉁 명 스럽게 복 부의 더 큰 곡률의 그레이터 omentum을 해 부.
- 7-0 monofilament 흡수 봉합 사를 사용 하 여 두 개의 합자를 배치 하 여 복 부의 저 비장 사이 실행 되는 짧은 위 동맥 선 봄이 위를 사용 하 여 두 개의 합자 사이 잘라. 일단 동맥 transected 완전히 복 부 구멍에서 복 부를 exteriorize. 위장 및 조직 촉촉한 유지 하는 식 염 수와 젖은 거 즈를 놓습니다.
- 가짜 절차
- 가짜 프로시저에 대 한 테이퍼 바늘으로 6-0 monofilament 흡수 봉합 사를 사용 하 여 봉합의 느슨한 간단한 연속 패턴을 배치 합니다. 2mm 식도의 오른쪽 (외과 의사의 오른쪽)을 시작 합니다. 복 부 위 벽을 따라 봉합 라인을 배치 하 고 등 위 벽을 따라 계속.
참고: 모든 위 조작에 대 한 감염의 위험을 줄이려면만 monofilament 흡수 봉합 사를 사용 합니다. 또한, 봉합 사 풀-""를 통해 위 조직 손상 및 dehiscence 상처의 위험을 증가 하는 절단 바늘의 사용으로 모든 위 조작에 대 한 테이퍼 바늘만 봉합을 사용 합니다. - 봉합을 배치 하면서 1 위 벽을 통해 완전히 바늘을 전달 합니다. 봉합 평면, 거짓말만 하지 위를 제한 다는 것을 확인 하십시오. 부드럽게 매 3-4 자유 투를 사용 하 여 봉합 하 고 2.9 단계로 건너뜁니다.
- VSG 절차 단계 2.7을 생략 하 고 단계로 2.8 진행.
- 가짜 프로시저에 대 한 테이퍼 바늘으로 6-0 monofilament 흡수 봉합 사를 사용 하 여 봉합의 느슨한 간단한 연속 패턴을 배치 합니다. 2mm 식도의 오른쪽 (외과 의사의 오른쪽)을 시작 합니다. 복 부 위 벽을 따라 봉합 라인을 배치 하 고 등 위 벽을 따라 계속.
- VSG 절차
- VSG 절차에 대 한 위 동맥과 정 맥 monofilament 테이퍼 바늘 3를 사용 하 여 흡수 되기 쉬운 봉합 사 각 매듭에 대 한 던져 7-0의 저명한 분 지 선. 바로 아래 (즉, 위장의 낮은 곡률을 향해) 합자 transection의 의도 라인을 놓습니다.
참고: transection의 의도 라인 위장과 마 고 pilcatus 아래 최소 2 mm의 심장 노치 ~ 2 m m 위의 (복 부의 더 큰 곡률을 향해 의미)에서 시작 하 고 췌 장의 오른쪽 엽의 인접 끝. 일반적으로, 있다 출혈; 하는 위 벽 당 4 배 그러나,이 쥐 사이의 달라질 수 있습니다. - 위절제술 중 위 내용의 흘림 방지, 봉합 transection 테이퍼 바늘으로 6-0 monofilament 흡수 봉합 사를 사용 하 여의 의도 라인 바로 아래 두 위 벽을 통과의 간단한 연속 라인을 배치 합니다. 식도의 외과 의사의 오른쪽 마 고 pilcatus 및 췌 바로 위에 끝 아래 봉합 라인을 시작 합니다.
- 봉합 사 선 위에 얇은 밀고 hemostats 놓고 봄이 위를 사용 하 여 봉합 라인과 hemostats 사이 잘라. 메 마른 외과 분야에서 transected 위 조직을 제거 합니다.
- VSG 절차에 대 한 위 동맥과 정 맥 monofilament 테이퍼 바늘 3를 사용 하 여 흡수 되기 쉬운 봉합 사 각 매듭에 대 한 던져 7-0의 저명한 분 지 선. 바로 아래 (즉, 위장의 낮은 곡률을 향해) 합자 transection의 의도 라인을 놓습니다.
참고: 간단한 불연속 봉합 패턴 이후이 제공 하는 간단한 연속 봉합 패턴 보다 더 안전한 폐쇄 좋습니다.
참고:이 유체 손실 수술 하는 동안 경험된을 대체 하 고 복구 지원 외과 사이트에 항생제의 직접 적용 하는 방법을 제공 합니다.
참고: 정확한 음식 섭취 량 측정 연구를 통해 얻을 수 있다면, 마우스 연구 내내 홀로 지 내게 계속 해야 합니다. 먹는 가정 케이지 침구에서 이물질 방해의 위험이 있다. 동물 농축을 제공 하기 위해 자료를 중첩 제외 침구의 장에 보관 한다 ( 테이블의 자료를 참조).
3. 수술 마우스 관리 및 측정
- 마우스의 집 케이지를 반환 하 고 생리대에 케이지를 놓습니다. 수술 후 적어도 7 일 동안 액체 규정식에 쥐를 유지 합니다. 진통제, meloxicam 등 관리 (2 mg/kg 피하), 수술 후 2 일 동안.
참고: enrofloxacin (20 mg/kg), 같은 항생제, 수술 후 최대 7 일 동안 주어진 수 있습니다. 항생제는 수술에서 감염의 위험을 최소화 하 고 있습니다 또는 무 균 절차를 통해 유지의 수준에 따라 필요 하지 않을 수 있습니다. 그러나, 항생제 사용 하는 경우 그들은 일관성을 유지 하기 위해 동일한 연구에 모든 쥐에 관리 될 해야 합니다. - 수술 후 기간 동안 몸 무게, 음식 섭취, 배변, 활동 수준, 그리고 적절 한 치유와 회복을 위해 적어도 매일 처리를 평가 합니다. 수술 후 수술 후 14 일에 대 한 모니터링을 실시 합니다.
참고: 수술 실패는 일반적으로 본 수술 직후 또는 3 일 후 이내 operatively. 동물을 먹고 하거나 수술 후 두 번째 하루에 마시는 하지 수술 합병증에 대 한 밀접 하 게 모니터링 해야 합니다. - 수술 기간 완료 후 적절 한 표현 형의 유지를 보장 하기 위해 연구에 걸쳐 정기적으로 몸 무게와 음식 섭취 량을 측정 합니다.
- 포도 당 내성, 포도 당 자극 인슐린 분 비를 평가 하는 경구 포도 당 내성 검사 (OGTT)을 수행 하 고 호르몬 분 비를 직감.
- 금식 후 쥐에는 OGTT를 수행 6 h 그리고 gavage 쥐 1 g/kg의 복용량에 50% 포도 당 솔루션에 대 한 그들.
- 꼬리 혈액 샘플에서 0, 2.5, 5, 15, 30, 60, 120 분 후에 gavage 수집 합니다. 이 시간 포인트에서 glucometer로 혈당을 측정 합니다. 다양 한 호르몬, 인슐린, GLP-1 등의 측정에 대 한 각 시간 지점에서 혈 청 샘플을 수집 합니다.
- 6 h 이전에 안락사에 대 한 빠른 쥐입니다. 최종 혈액 샘플 및 혈당 측정을 가져가 라. 최종 혈당 측정 기준선 측정을 비교 합니다. 200 mg/kg의 복용량에 pentobarbital의 복 주사와 쥐 안락사
- 초기 및 최종 혈 청 샘플을 사용 하 여 추가 analytes를 측정 하 여 사전 및 수술 외과 값 비교.
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Representative Results
가짜와 VSG 절차는 그림 1에 묘사 된다. 그림 1A 는 가짜 절차 동안 위 벽을 따라 봉합 라인 배치 되는 위치를 보여 줍니다. 이 같은 지역 위 VSG 수술 하는 동안 컷은입니다. 그림 1B 실적 VSG의 후 위 왼쪽의 관 나머지를 보여준다.
통계 및 데이터 분석
데이터는 평균 ± SEM. 데이터는 Tukey의 테스트 후과 ANOVA 또는 스튜던트 t-검정 분석 했다 표시 된로 표시 됩니다. 차이 P에서 중요 하 게 고려 했다 < 0.05.
VSG은 에너지 섭취 량과 체중을 감소 하 고 포도 당 내성 향상
높은 지방 다이어트 먹이 남성 C57BL 쥐에 운영 하 고 위에서 설명한 대로 공부 했다. VSG 운영 쥐 전시 감소 에너지 섭취와 체중 광고 libitum 에 비해 운영 하는 가짜 쥐 먹이 (누적 에너지 섭취: 가짜 474 ± 19, VSG = = 385 ± 14 kcal; 최종 몸 무게: 가짜 34.5 ± 2.1, VSG = = 29.9 ± 1 g; 그림 2A-B *P< 0.05). 수술 후 3 주 경구 포도 당 내성 검사 수행 되었다. 혈당 측정은 glucometer를 사용 하 여 만들어졌다 ( 재료의 표참조). 혈 청 인슐린 및 GLP-1 농도 멀티플렉스 샌드위치 electrochemiluminescence immunoassay에 의해 측정 되었다 ( 재료의 표참조). VSG 향상 된 포도 당 포용 력 (포도 당 AUC0-120: 가짜 1467 ± 76, VSG = = 1,061 ± 72 mmol/L x 120 분; 그림 3A-B, P < 0.01), 포도 당 자극 인슐린 분 비를 증가 (% 포도 당 gavage 후 15 분 기준에서 인슐린의 증가: 가짜 92 ± 54, VSG = = 2720 ± 1,241%; 그림 3 C, P < 0.05), 운영 하는 가짜 광고 libitum 통제 쥐 먹이와 비교 후 높은가격순 GLP-1의 분 비를 증가 (GLP-1 AUC0-120: 가짜-124 ± 45, VSG = = 111 ± 48 pmol/L x 120 분; 그림 3D, *P < 0.01). 이러한 결과 비만 수술9,17,,1819후 인간과 다른 설치류 모델에서 본 것과 일치 합니다.
그림 1: VSG의 다이어그램. VSG 동안 transection의 묘사 (A)이 같은 지역 가짜 절차 동안 위 벽을 따라 봉합의 간단한 연속 라인 배치 되는 위치입니다. (B) 관 잔해의 묘사는 VSG 절차의 완료 후에 떠났다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 2: VSG 에너지 섭취 량과 몸 무게를 낮춘 다. 누적 에너지 섭취 량 (A) 와 몸 무게 (B). P < 0.05 비해 가짜 학생의 t-테스트와 *P < 0.05 가짜 이중 ANOVA에 의해 VSG와 비교. 결과 표시 의미 ±SEM. n = 그룹 당 6-7. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 3: VSG 포도 당 내성을 향상, 포도 당 자극 인슐린 분 비를 증가 하 고는 OGTT 동안 포스트 높은가격순 GLP-1 분 비 증가. (A) 혈액 포도 당 농도, 곡선 (AUC), 아래 (B) 포도 당 지역 (C) % 증가 혈 청 인슐린 농도 기준에서 15 분 후에 포도 당 gavage, 및 (D) 혈 청 총 GLP-1 동안에 OGTT의 농도 P < 0.05, * *P < 0.01, * * *P < 0.001 VSG 가짜 학생의 t에 비해-AUC 또는 인슐린에 백분율 변경의 테스트. 결과 표시 의미 ± SEM. n = 그룹 당 6-7. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
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Discussion
Bariatric 수술 비만 대 한 가장 효과적인 장기 치료 이며, 타입-2 당뇨병과 고혈압 면제1,9,15의 높은 속도 같은 다른 건강 상의 혜택에 결과. Bariatric 수술의 murine 모델 bariatric 수술 비만 comorbidities에 신속 하 고 뚜렷한 향상을 발생 하는 메커니즘을 식별 하는 강력한 도구를 제공 합니다. Bariatric 수술의 murine 모델은 용기 조절 물질 대사, 심장 혈관 기능, 및 발암10,11, 등의 다양 한 프로세스, 기본적인 생물학을 공부에 대 한 새로운 패러다임을 제공 하는 또한, 12.
우리는 bariatric 수술 비만 comorbidities 타입 2 당뇨병과 고혈압10,,1112등을 향상 하는 메커니즘을 연구를 수직 소매 위절제술의 마우스 모델을 개발 했습니다. 뒤에 위장의 70%의 제거 복 부 혈관의 결 찰 VSG의이 모델에 의하여 이루어져 있다. 제어 조건은 가짜 수술 봉합 어디 위 VSG 절차에서 transected 것 같은 위치에 위 벽을 따라 배치 됩니다. 여기, 선물이 데이터를 운영 하는 가짜 쥐 수술 후 광고 libitum 지 루 했다. 위해서는 몸 무게에 관계 없이 효과 설명한 우리는 이전11,12VSG 운영 쥐 자신의 몸 무게를 맞추기 위해 제한 음식 공부 한다는 가짜 운영 제어 그룹을 조사 한다. 우리의 데이터 모두 체중 감소를 달성 하는이 VSG 모델 광고 libitum 에 비해 음식 섭취 량 먹이 가짜 운영 컨트롤 보여줍니다. 경구 포도 당 내성 검사는 수술 복구 하지 혼동 요인 동물 수술에서 완전히 회복을 충분 한 시간을 허용 하는 수술 후 적어도 2 주 할 수 있습니다. 체중에서 감소와 일치, 제시 모델 향상 된 포도 당 포용 력을 전시 한다. 무슨 유사한 bariatric 수술 후 인간 환자에서 관찰은, VSG 운영 쥐 포도 당 자극 인슐린 분 비와 식 후 GLP-1 분 비14,17에 있는 놀라운 증가 전시.
랩 멤버는 철저 하 게 가짜 수술 및 VSG 연습에 몇 달 동안이 기술을 지배 하 고 보다 큰 95%;의 생존 율을 달성 훈련 그러나,이 이전 경험에 따라 달라 집니다. 전체 연구를 시작 하기 전에 것이 좋습니다 새로운 외과 의사 자신의 VSG를 확인 하 고 몸 무게, 음식 섭취 량, 및 연습 가짜와 적절 한 표현 형 되 고 되도록 VSG 운영 쥐에 포도 당 허용 오차를 측정 하 여 수술을 사기 달성. 또한, 그것은 수술 실패의 흔적에 대 한 수술 후 마우스를 밀접 하 게 모니터링 하는 것이 중요입니다. 가장 일반적인 수술 합병증은 위 내용물의 누출. 이 합병증의 수술 흔적 등의 식품 소비 부족, 배설물 생산의 부족 만져 서 상부 복 부 질량. 수술 합병증의 흔적을 전시 하는 동물 즉시 안락사 해야 한다. 수술 합병증 reoccurring 문제가 있다면, 수술 방법의 재평가 수행 합니다. 가장 일반적인 문제는 위 내용의 누설으로 이어지는 위 벽의 부적당 한 폐쇄. 위 벽의 폐쇄는 프로토콜의 가장 중요 한 단계입니다. 봉합 배치 완료 되 면 노트 사이 보이는 격차 있어야 합니다. CTAs 복 부를 닫기 전에 위 내용의 누설이 있는지 확인 하는 데 사용 됩니다 것이 좋습니다. 또 다른 일반적인 문제에 덜 때 소장의 실수로 조작 하 여 위장 혈 행의 유도 처음 복 부 구멍에서 복 부를 제거. 소장을 조작 하지 마우스 소장 매우 깨지기 쉬운 이며 소장의 과도 한 조작 혈 행으로 이어질 수 있습니다 때문에 주의 해야 합니다.
우리의 마우스 모델 VSG의 다른 그룹 및 생존 율 보다 큰 95%의 비슷한 수술 결과 있다. 마찬가지로 인간의 환자 및 VSG의 다른 마우스 모델 제시 마우스 VSG 모델 전시 체중 감소, 음식 섭취 량 감소, 포도 당 내성을 개선 하 고 증가 후 높은가격순 GLP-1 분 비4,18, 19. 다른 모델만 무딘 집게19,20위에 압력을 적용 하는 동안 봉합의 위치를 관련 된 다른 모델에서이 가짜 절차가 다릅니다. 봉합을 배치의 위 조직의 수술 조작을 제공 하면서 뱃속에 외국 물자를 배치의 효과의 제어할 수 있습니다. 어떤 마우스 모델 처럼이 기술의 한계는 인 간에 게이 마우스 모델에서 생성 된 데이터를 변환 하는 종의 차이 의해 제한 됩니다. 그러나, 마우스 제어 및 인간 환자에서 달성 될 수 있다 보다 더 깊은 기계적 통찰력을 제공 하는 실험 조작 허용. Murine 비만 연구의 대다수는 주로 이러한 절차의 glucoregulatory 혜택에 초점을 맞추고, 우리를 사용 하 여 제시 murine VSG 모델 고혈압 및 암12 bariatric 수술의 영향을 운전 하는 메커니즘을 정의 . 이이 모델의 중요 한 미래의 응용 프로그램을 강조 표시합니다.
Bariatric 수술의 murine 모델은 bariatric 수술 체중 감소를 생산 하 고 의료 혜택을 수 여 하는 메커니즘을 연구 하는 중요 한 도구를 제공 합니다. 또한, 비만 모델 용기 본문에 다른 physiologic 프로세스와 인터페이스 하는 방법을 연구 하는 새로운 패러다임을 제공 합니다. 여기에 설명 된 이전 유효성 검사 및 VSG10,,1112후 인간에서 본 효과의 많은는 VSG의 모델이 이다. 또한, 더 자세한 기계적 평가12다른 질병 과정의 평가 대 한 다른 수술 절차와 성공적으로 결합 될 수 있는 다재 다능 한 모델입니다.
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Disclosures
저자는 커밍스 박사 받은 일 라이 릴리와 회사에서 자금을 제외 하 고 아무 충돌을 선언 합니다.
Acknowledgments
이 연구는 NIH/NCI R21CA195002-01A1, 코넬 성과 주립대 대학원 다양성 친교의 대통령의 위원회에 의해 지원 되었다. 커밍스 박사 ' 실험실 또한 받았다 코넬 비교 암 생물학 교육 프로그램 및 일 라이 릴리와 회사에서 프로젝트 기간 동안 자금.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 45% high fat diet | Research Diets | D12451 | |
| 60% high fat diet | Research Diets | D12492 | |
| Boost | Nestle | 160-67538 | rich chocolate flavor |
| 6-0 Suture | Ethicon | Z432 | monofilament absorbable/taper |
| 7-0 Suture | Covidien | 8866127-01 | monofilament absorbable/taper |
| Cotton Swabs | Fisherbrand | 23-400-118 | small |
| Cotton Swabs | Fisherbrand | 233-400-101 | large |
| Gauze | Various | 4x4 4 ply and 2x2 4 ply | |
| Foil | Various | ||
| Surgery drape | Various | ||
| 0.9% saline solution | Various | ||
| LRS | Hospira | 170RX | |
| Betadine | Various | ||
| Alcohol | Various | ||
| Eye Ointment | Paralube® Vet Ointment | 17033-211-38 | |
| Tissue Adhesive | Vetbond | 1469SB | |
| Meloxicam (Metacam) | Boehringer Ingelheim | 141-213 | 5 mg/ml |
| Enrofloxacin | Baytril | 08713254-186599 | 22.7 mg/ml |
| Thin tipped hemostats | Fine Science Tools | 13021-12 | |
| Metzenbaum Scissor | Fine Science Tools | 14018-18 | |
| Iris Scissors | Fine Science Tools | 14058-09 | |
| Dumont Forcep | Fine Science Tools | 11251-20 | |
| Serrated Forcep | Fine Science Tools | 11020-12 | |
| Gavage needle | Fine Science Tools | 18060-20 | |
| Microneedle driver | Fine Science Tools | 12075-14 | |
| Spring Scissor | Fine Science Tools | 15396-00 | |
| Insulin syringe | Various | ||
| 1mL syringe | Various | ||
| 20mL syringe | Various | ||
| Glucometer (one touch ultra mini) | Lifescan | 70021208 | |
| Multiplex insulin and GLP-1 kit | Meso Scale Discovery | K15171C-1 | |
| GraphPad Prism 6.00 | GraphPad Software | ||
| Nestlets | Ancare | NES3600 |
References
- Buchwald, H., et al. Bariatric surgery: a systematic review and meta-analysis. JAMA. 292 (14), 1724-1737 (2004).
- Wadden, T. A., Butryn, M. L., Byrne, K. J. Efficacy of lifestyle modification for long-term weight control. Obes Res. 12, Suppl . 151s-162s (2004).
- Yanovski, S. Z., Yanovski, J. A. Obesity. N Engl J Med. 346 (8), 591-602 (2002).
- Abbatini, F., et al. Long-term effects of laparoscopic sleeve gastrectomy, gastric bypass, and adjustable gastric banding on type 2 diabetes. Surg Endosc. 24 (5), 1005-1010 (2010).
- Sjostrom, L., et al. Effects of bariatric surgery on mortality in Swedish obese subjects. N Engl J Med. 357 (8), 741-752 (2007).
- Adams, T. D., et al. Cancer incidence and mortality after gastric bypass surgery. Obesity (Silver Spring). 17 (4), 796-802 (2009).
- Vest, A. R., Heneghan, H. M., Schauer, P. R., Young, J. B. Surgical management of obesity and the relationship to cardiovascular disease. Circulation. 127 (8), 945-959 (2013).
- Ahmed, A. R., et al. Laparoscopic Roux-en-Y gastric bypass and its early effect on blood pressure. Obes Surg. 19 (7), 845-849 (2009).
- Pories, W. J., et al. Who would have thought it? An operation proves to be the most effective therapy for adult-onset diabetes mellitus. Ann Surg. 222 (3), 339-350 (1995).
- Garibay, D., et al. beta-Cell Glucagon-Like Peptide-1 Receptor Contributes to Improved Glucose Tolerance After Vertical Sleeve Gastrectomy. Endocrinology. 157 (9), 3405-3409 (2016).
- McGavigan, A. K., et al. TGR5 contributes to glucoregulatory improvements after vertical sleeve gastrectomy in mice. Gut. 66 (2), 226-234 (2017).
- McGavigan, A. K., et al. Vertical sleeve gastrectomy reduces blood pressure and hypothalamic endoplasmic reticulum stress in mice. Dis Model Mech. 10 (3), 235-243 (2017).
- Esteban Varela, J., Nguyen, N. T. Laparoscopic sleeve gastrectomy leads the U.S. utilization of bariatric surgery at academic medical centers. Surg Obes Relat Dis. 11 (5), 987-990 (2015).
- Laferrere, B., et al. Effect of weight loss by gastric bypass surgery versus hypocaloric diet on glucose and incretin levels in patients with type 2 diabetes. J Clin Endocrinol Metab. 93 (7), 2479-2485 (2008).
- Adams, T. D., et al. Health benefits of gastric bypass surgery after 6 years. Jama. 308 (11), 1122-1131 (2012).
- McGavigan, A. K., et al. TGR5 contributes to glucoregulatory improvements after vertical sleeve gastrectomy in mice. Gut. , (2015).
- Peterli, R., et al. Improvement in glucose metabolism after bariatric surgery: comparison of laparoscopic Roux-en-Y gastric bypass and laparoscopic sleeve gastrectomy: a prospective randomized trial. Ann Surg. 250 (2), 234-241 (2009).
- Ryan, K. K., et al. FXR is a molecular target for the effects of vertical sleeve gastrectomy. Nature. 509 (7499), 183-188 (2014).
- Wilson-Perez, H. E., et al. Vertical sleeve gastrectomy is effective in two genetic mouse models of glucagon-like Peptide 1 receptor deficiency. Diabetes. 62 (7), 2380-2385 (2013).
- Pressler, J. W., et al. Vertical sleeve gastrectomy restores glucose homeostasis in apolipoprotein A-IV KO mice. Diabetes. 64 (2), 498-507 (2015).
