מאמר זה מתאר בפרוטוקולים ניסיוניים ללמוד שמחוץ התכווצויות של האדם myometrium ויישומם גילוי סמים. טכניקה זו משמשת כדי לשפר את ההבנה של פיזיולוגיה myometrial, פתופיזיולוגיה גם באשר לאמת נתונים תרופתי של הגששים מחקר חדשניים או סמים הפניות.
גילוי ואפיון של תרכובות פרמצבטיות הרומן או הגששים הביוכימי מסתמכים על מערכות assay רלוונטי מבחינה פיזיולוגית ועמיד. אנו מתארים שיטות למדידת שמחוץ myometrium contractility. Assay זה יכול לשמש כדי לחקור את הגורמים, מולקולות מעורב אפנון ההתכווצות myometrial וכדי לקבוע את מעשיהם סינאפסות או מעכבות, ומכאן שלהם פוטנציאל טיפולי בתוך vivo. ביופסיות מתקבלים מן הנשים שעברו קיסרי משלוח עם הסכמה מדעת. רצועות בסדר myometrium גזור, מקוטע, מחובר מתמר כוח בתוך אמבטיות איברים 1 מ”ל superfused עם תמיסת מלח פיזיולוגית פתרון ב 37 º C. רצועות לפתח צירים ספונטניים בתוך 2-3 h תחת מתח קבוע, נותרים יציבים במשך שעות רבות (> 6-אייץ ‘). גם יכול להיות מגורה רצועות חוזה כגון על ידי ההורמונים אנדוגני, אוקסיטוצין, וזופרסין, ואשר לגרום אפנון תלויי-ריכוז של התכווצות תדר, בכוח משך זמן, יותר דומים צירים צירים. לפיכך, השפעת סמים מוכרים ולא רומן מוביל יכול להיבדק על צירים ספונטניים, אגוניסט-induced.
פרוטוקול זה במיוחד פרטים איך assay זה יכול לשמש כדי לקבוע את העוצמה של סוכנים הרומן וידוע על ידי מדידת והשפעותיהם על פרמטרים שונים של התכווצות myometrial האנושית. אנו משתמשים אוקסיטוצין – ו V היריבים קולטן1a , atosiban ו- SR49059 כמו דוגמאות של תרכובות ידועות אשר לעכב אוקסיטוצין – ו וזופרסין-induced התכווצויות, להדגים כיצד ניתן להשתמש בשיטה זו כדי להשלים ולאמת תרופתי נתונים המתקבלים מבוססת תא מבחני לסייע פיתוח תרופות. ניתן גם לאפיין את ההשפעות של הרומן אגוניסטים לעומת אוקסיטוצין, וזופרסין. בעוד אנו את הדוגמה של אוקסיטוצין / מערכת וזופרסין, בשיטה זו ניתן גם המשמשות ללימוד אחרים הקולטנים, תעלות יונים זה לשחק תפקיד הרפיה כדי לקדם את ההבנה של האדם הפיזיולוגיה של הרחם, פתופיזיולוגיה להתכווצות הרחם.
המטרה של גילוי תרופות היא לייצר הרומן, חזק, ואת ליגנדים סלקטיבי מאוד המניבות תגובה טיפולית על-ידי הפעלה או מעכבים הסלולר איתות המסלולים. פעולה זו דורשת מערכת assay המתאים בו לבדוק עופרת תרכובות עם תוצאות אמינים, חזקים, רלוונטי1. טכניקות תרופתי כגון איגוד קולטן ליגנד, מבחני פונקציונלי מעסיקים לעתים קרובות heterologous מערכות מבוססות תא, מהונדסים לקולטנים overexpress אשר אחרת לא יהיה נוכח2. בעוד שיטות אלה לספק תובנות בעלות ערך עבור הקולטן פרמקולוגיה ומנהל פיתוח תרופות מוקדם, הנתונים שהושגו שלא לשקף תרחיש אמיתי ויוו . לכן חשוב כי נתונים תרופתי מבחני מבוססת תא אומתו גם פיזיולוגית הרלוונטיים במודלים.
הרחם שריר חלק (myometrium) מהווה את שכבת שרירי הרחם האחראית על התכווצויות במהלך העבודה רושם ואת הרחם להתרחב ולספק את העובר3. התכווצות של myometrium היא ספונטנית; . זה לא דורש קלט הורמונלי או עצבני חוזה4. הצירים הם הביא על ידי דפולריזציה ספונטנית של קרום התא myometrial, מה שמוביל הפתיחה של המופעלים באמצעות מתח Ca2 +-ערוצי (ערוצים מסוג L), זרם של Ca2 + לתוך תא5. מתחמי סידן עם קלמודולין ומפעילה צולבות הקישור חוטים שרירן שרשרת אור קינאז, אשר בתורו phosphorylates צולבות הקישור חוטים שרירן ומאפשרת לחצות גשר למבנה מחזור עם אקטין והתכווצות. הרפיה לרוב מתווך על ידי דה-זירחון של צולבות הקישור חוטים שרירן מאת צולבות הקישור חוטים שרירן פוספטאז וירידה בריכוז Ca2 + דרך שלה שחול התא ו/או sequestering לתוך רשת sarcoplasmic (SR)5,6 ,7.
פותחו מספר שיטות ללמוד myometrial ותפקוד לקוי, אין ויוו פנימיים וחיצוניים tocography, קטטרים לחץ תוך רחמי, לדור של תאים טרנספורמציה או מונצחים ממוצא myometrial8 ,9,10,11,12. בעוד מערכות התרבות התא יכול לזהות אם חומר יכול לפעול ברמה התאית, רצועות של רקמות בתוך איבר אמבטיות יכול לשמש כלי למדידת תגובות פונקציונלי של כל הרקמות ריאגנטים תרופתי. האמבטיה איברים המסורתית היא בדרך כלל תא זכוכית מחוממת גדול אשר מסוגל להחזיק בין 5 ל-50 מ של תמיסת מלח פיזיולוגית (PSS). רצועות בתוך התאים האלה גדולים דורשים בדרך כלל לערבב עם חמצן, כמויות גדולות של PSS. רצועות של רקמות גזור, מושעים בתוך תא הרחצה, מחובר מתמר כוח אשר מודד שינוי המתח, כמו למשל בזמן התכווצות. רצועות myometrium בני אדם והן בעלי חיים כולל, שפן13, העכבר14, עכברוש15, ארנב16ועוד17,18, שנוצלו על ידי מספר קבוצות מחקר לבחון שאלות רבות הנוגעות myometrial פיזיולוגיה, פתולוגיה, כולל לידות לידה מוקדמת ולא מתפקד. לדוגמה, רצועות myometrial שימשו כדי לזהות גורמים אשר לווסת, לשנות פעילות myogenic19,20,21, לקבוע אברון בפונקציה כגון ה SR22, וכן חוקרים מאפננים של יון ערוצי23,24,25,26, משאבות, מחליפי27 כדי לקבוע את תפקידם בפיזיולוגיה myometrial.
טכניקה זו שמחוץ מאפשר את ההערכה של ביצועים התכווצות של רקמות ההשפעה הישירה של סוכנים שונים על הפרמטרים של התכווצות כדי למדוד כולל התכווצות כוח (כוח), תדירות, משך זמן, כמו גם שילוב של ערכים אלה, כדי ליצור אינדקס של העבודה הכוללת לעשות (כלומר כוח אינטגרלי או אזור תחת העקומה, חאן אל). כפי ההכנה רצועת רקמה מבודדת מהווה מודל מסוג תא אחד או יותר, ניתן למדוד את התגובה הפיזיולוגית של כל רקמה. אמבט איברים ורצועת רקמות מבודד ולכן הם כלי שימושי במתן לגשר בין תא תרבות העבודה כל החיה /ויוו עבודה. לפיכך, בתחום גילוי תרופות, ההשפעות של סוכנים הרומן במונחים של סינאפסות שלהם (כלומר, מגרה) או מעכבות (קרי, הרפיה) פוטנציאליים ויוו יכול להיות הדוק יותר מוערך. טכניקה זו שימש בהצלחה בפיתוח של אוקסיטוצין – ו V1a-קולטן (OTR ו- V1aR) atosiban אנטגוניסט כסוכן טוקוליטיקה לעכב את צירי לידה מוקדמת, לעכב לידה לידה מוקדמת. במבחנה בדיקה של atosiban על רצועות myometrial מצא את היריב יכול להפחית באופן משמעותי את אוקסיטוצין (OT)-induced התכווצויות28,29,30. חשוב לציין מחקרים אלה עזר כדי לאמת את הערך translational של atosiban, שנוצר הנתונים הוכחה הרעיון צריך לקחת זה העברה של ניסויים קליניים31,32,33,34 . Atosiban הוא כעת בשימוש נרחב התרופה המקובלת לעכב את העבודה באירופה. דומה הוכחה הרעיון מחקרים בוצעו עבור carbetocin אנלוגי אוקסיטוצין להראות את הפוטנציאל הטיפולי במניעת לכתיבה דימום35,36,37. תרכובות אחרות עופרת בשלבי פיתוח עם זה וזמינותו כוללים retosiban (GSK221149A)38 , nolasiban (נתונים שלא פורסמו). שיטות אלה היו בשימוש גם בהצלחה כדי להשוות בין קבוצות המטופל39,40,41,42,43,44, 4546,,47 לבחון הבדלים אינטרה-מינים.
כאן נתאר את השימוש מבודד שמחוץ רצועות רקמות מן בהריון myometrium אנושי בתוך אמבטיות מחוייט איברים קטנים (1 מ”ל) כדי להדגים כיצד ניתן להשתמש בשיטה זו כדי להשלים ולאמת נתונים תרופתי המתקבל מבחני מבוססת-תא . ביופסיות התקבלו בעיקר בנשים שעברו משלוח קיסרי (CS) בחירה מראש העבודה כפי הם הניתוח המתוכנן ויש ולכן הן קל יותר לתזמן אוסף ביופסיה, גישה נוחה myometrium, רקמות לא נחשפו לכל uterotonic ממריצים או מרפה לפני הניתוח. עם זאת, ניתן להשיג ביופסיות גם מנשים שעברו לא מתוכנן (חירום) CS משלוח בצירים מתן שיש מספיק זמן את מלא הסכמת המטופל. ביופסיות רוב מתקבלים במהלך הניתוח של המקטע הרחם התחתון באתר של הניתוח החתך, אולם זה גם אפשרי להשיג דגימות של48,קטע עליון49. בכמה מקרים שלאחר משלוח הנרתיק, אגרוף ביופסיות מן המיטה היפרדות גם הושגו50. עם זאת, זו לא הדרך המקובלת ביותר, כמות רקמת myometrial לאחזר הוא קטן. Non-בהריון myometrium ניתן להשיג מראש או בגיל הבלות נשים שעברו כריתת רחם תנאים הגינקולוגית שפיר. ביופסיה עובי מלאה היא הבדיקה הפתולוגית שלאחר שנדגמו, מתוך הקורפוס נמוך יותר מן הרחם, ומועבר myometrium מאמצע הקיר הרחם הימנעות משטחים serosal של רירית הרחם.
בעוד רוב פיתוח תרופות מיועד לטיפול בהפרעות אנושי, מחקר בסיסי ביותר מתבצע בעיקר ברקמות בעלי חיים. כאן, אנו מתארים שיטות לחקור שמחוץ התכווצויות של האנושי myometrium המתקבל ניתוח בו ניתן להשתמש כדי לטפל מספר שאלות חשובות הקשורות הרחם פיזיולוגיה, פתולוגיה, כמו גם כדי לאמת את התגובות פונקציונלי הרומן וידוע סוכנים תרופתי לסיוע פיתוח תרופות. בפרט, אנחנו להדגיש את השימוש הזה assay לחקור את התגובה אויבת של ידוע OTR ו- V1aR אנטגוניסט תחרותי, atosiban הצירים הכבושים-induced myometrial בהריון, וכן לקבוע את התגובה ואת קולטן סלקטיביות של פיתח סלקטיבי V1aR אנטגוניסט, INT. [D-Arg8] נדגים כי יכול להיות מחושב פרמוקוקינטיים פרמטרים חשובים כגון EC50 ו- IC50 , אשר ליישר עם הנתונים מבוססת תא פרמקולוגיה.
באמצעות רצועות מרובות בו זמנית מאפשרת השוואה ישירה של הסוכן אפקטים מרובים, תחרות ניסויים עם היריבים, הזמן המתאים בקרות הרכב. כפי רצועות מוכנות לעיתים קרובות בקבוצות של 2, 4 או 8, טכניקה זו מספק תפוקה בינונית, המאפשרת בדיקה של תרכובות 2 – 4 בריכוזים (מצטבר) 6-8 (לפי ביופסיה). שיטה זו מספקת גם נתוני זמן-אמת כך יכול וצריך להעריך את ההשפעות במהירות ולא ניתן להתאים פרוטוקולים. בנוסף, טכניקה זו ניתן להשתמש כדי לבדוק את כל המתחם של עניין, שימש בהצלחה על ידי מספר קבוצות מחקר ממוקד על הפיזיולוגיה myometrial, גילוי סמים. מלבד ניתוח תרכובות טהור כמתואר במאמר זה, המודל contractility הרחם היה גם, יכול להיות מנוצל בהצלחה על המסך עבור תרכובות הרומן uterotonic תערובות, כגון ההכנות צמחים רפואה מסורתית7 , 55 , 56.
אף על פי מודל זה היא טכנית חזקה ומראה הפארמצבטית טוב, יש כמה מגבלות: ניתוח יכול להיות קשה עבור אלה מכיר הרקמה או באמצעות ניתוח ציוד, ולכן משתמשים חדשים ידרוש קצת זמן כדי למטב את רקמת הכנה ופרוטוקולים. יש גם לציין ש-myometrium האנושי הזה שונה משמעותית של המראה של דגמים אחרים כגון עכבר ועכבר. רוב uteri מכרסם מורכבים שני קרניים הרחם כמו שפופרת, אחד להשלים עם שחלה בקצה אחד, שמחוברים צוואר הרחם. לכל קרן יש מוגדרים בבירור שכבות שריר אורכי, מעגלית, אשר ניתן להפריד בקלות על הקרע בזמן סוגי סיבים שונים ב myometrium האדם לעיתים קרובות שלובים זה בזה ויוצרים ‘רשת’. בנוסף, פרופילים התכווצות של myometrium אנושיים שונים מאוד יחסית. בעיקר, התכווצויות בשריר myometrium האנושי הם פחות תכופים אך יותר משך. ניסיוני מסגרות זמן לעבודה עם myometrium האנושית ולכן הם לעיתים קרובות הרבה יותר מאשר הדגמים מכרסמים. הבדלים בביטוי קולטן בין המינים יכול לתרום גם די קיימים הבדלים התגובות אגוניסטים, זה צריך לזכור אם חיוץ תוצאות על פני מינים.
יש גם מספר שלבים צריך שיקול דעת כדי למקסם את פלט ממערכת זו. שלבים קריטיים כוללים שימור רקמות הכדאיות כגון מטפל בעת טיפול רקמות למנוע נזק מיותר במהלך ניתוח או בעת טעינה. בלש מיומן נדרש לנתח רצועות בסדר של שריר הרחם, להבטיח הכיוון של סיבי השריר כיוון האורך, אחרי המטוס של הרקמה, כמו גם הימנעות רקמות צלקת רותמי, כלי שיט קטנים. כדי לסייע למטרות התמצאות, ברגע הדגימה במעבדה, זה אפשרי להוסיף תגית (כגון תפר כירורגי קטן) בזמנו של אוסף לצד אחד של הביופסיה על הקצה serosal מהקצה decidual.
יש לשמור רקמות ב יציב 36 – 37 מעלות צלזיוס במהלך ניסויים כמו תפקוד הרקמות כפוף תנודות הטמפרטורה. זו יכולה להיות מושגת עם יחידת מיזוג אוויר חזקים בתוך המעבדה. זלוף מתמדת של PSS ומחוממת מבטיחה שהטמפרטורה נשמרת כמו הסמקה מתוך הפסולת של התכווצות. הטמפרטורה בתוך המרחצאות איבר יכול להשתנות על ידי שינוי קצב הזרימה או התאמת הטמפרטורה אמבט מים ישירות. גודל חדר אמבטיה קטן בהשוואה המסורתית 5-50 מ”ל אמבטיות מבטיחה מחזור מהירה יחסית של PSS. הכשלון של ריאגנטים. האמבטיה איברים ולמחקר כפי שמתואר כאן, גם מפחית את עוצמת הקול של PSS ריאגנטים של עניין הצורך, ובכך לחסוך עלויות, ממעט היקר, מחדש פיתח כימיקלים. בנוסף, בשל גודל חדר אמבטיה קטן ושימוש מאגר מבוסס-HEPES, מערכת זו אינה דורשת חמצון למשל, על ידי בעבוע של PSS עם carbogen. סטנדרטיזציה של מתח להחיל את הרצועות חשוב גם. עבור רצועות בגודל כזה (5 מ מ x 2 מ”מ x 1 מ”מ), זה צריך להיות בערך 2 mN (שווה ערך ל ~0.2 גרם). שיטות אלטרנטיביות לכלול יישום של פתרון אשלגן גבוהה לזירוז התכווצות מירבית ומתיחה מחצית זו התכווצות מירבית. יש לציין עם זאת, כי המתח חלה ויוו עשויים להשתנות.
האתגרים העיקריים כוללים קבלת רקמות מן הנבדקים אנושי, אבל למרות מפרכת, ברקמות אנושיות המייצגים באופן מובהק ביותר מבחינה פיזיולוגית דגם הרלוונטיים (ומתגמלת) ללמוד התכווצות הרחם גילוי סמים ומחלת אנושי. הרקמה מבודד רצועות עם זאת, לא בהכרח להשוות רקמות ויוו כפי שהם פטורים לדוגמה, של הורמונלי עצבני קלט, אמנם לא חיוני להתכווצות, לווסת את הצירים בתוך vivo. זה וזמינותו עם זאת מספק את ההזדמנות כדי לנתח myometrial צירים בצורה מבוקרת, מופרדים מהשפעות כאלה. זה גם מאפשר ההשפעה של גורמים כגון בקרה הורמונלית של התכווצות (למשל, באמצעות OT, סמנכ ל, פרוסטגלנדינים, וכו ‘) להיחקר, מתן רמזים ברגולציה של פונקציה myometrial. ככל רקמות מתקבלים מן נשים שונות, יש באופן טבעי גיוון בפרופילי כויץ ספונטני בין דגימות. ומכאן יש לעיתים קרובות צורך לבצע ניסויים על מספר גדול (~ n = 10) דוגמאות כדי למזער את הווריאציה כמה נתונים (datasets)53. הדבר חשוב ביותר בעת השוואת פעילות כויץ בין קבוצות שונות החולה. נרמול התגובה של אגוניסטים היריבים כדי לשלוט פעילות (כלומר, ביטוי כאחוז של פעילות שליטה או גבוהה K+) מפחית חלק וריאציה זו. בנוסף, כדי לצמצם את הווריאציה של inter-סטריפ, יכול מנורמל נתונים להתפשט שטח חתך צלב על ידי מדידת שלהם אורך ומשקל פוסט ניסויים41. פעולה זו שימושית במיוחד בעת השוואת דפוסי התכווצות בין קבוצות שונות החולה.
מגבלות של טכניקה זו כוללים גם גישה אל רקמות טריים אשר דורשת קשרים עסקיים טובים עם צוות בית החולים, צוות תיאטרון במיוחד, אלה המעורבים התהליך הסכמתך. הרשאות האתית של ועדת הבדיקה המקומית, ועדת האתיקה מחקר ו המכון או חולים גם צריכים להיות במקום. אוסף של האדם myometrium סביר לביצוע במהלך הלידה CS, כאשר התורם עובר ניתוח. הביופסיה שנלקחו באותו אתר החתך הרחם עבור מסירת התינוק, ולכן המטופל לא צריך לעבור כל הליכים נוספים בהמשך. צוות תיאטרון, המנתח מבצע הביופסיה צריך להיות מודע לשימוש עוקבות של הרקמות וזה שהם לא ניתן להציב לתוך מקבע פתרונות כאלה לגבי שליחת המחלקה לפתולוגיה. פרק זמן ארוך ניסיוני הוא שיקול נוסף. ניסויים ברקמות אנושיות לארוך מספר שעות (בדרך כלל > 6-אייץ ‘) (לעומת 2-3 h עבור ניסוי דומה ברחם חולדה או עכבר), בשל תדירות איטית יותר של כווץ את זמן ההשהיה של 2-3 h בין רקמות וביטול הקמת ספונטנית התכווצויות. עם זאת, כפי שהראתי, רקמה אנושית הצירים חזקים, כאשר הוקמה יכולים לפעול במשך שעות רבות ללא עייפות משמעותית40.
מערכת זו מאפשרת גם אתגרים נוספים ויוו עבודה להתגבר כולל היכולת לבחון ריאגנטים התרופות על רקמות בהריון. טכניקה זו יכולה להיות אומדן בקלות למינים אחרים כולל העכבר לפיה אפשר לאמת תוצאות ראשוניות לפני שתמשיך נוסף במחקרים שנעשו בבעלי חיים שלם. מבוקר טמפרטורה, ההרכב של superfusate (PSS), ו- pH ניתן לבצע שינויים בקלות לחקות תרחישים שונים ויוו ולנתח את ההשפעה של שינויים אלה על התנהגות מורכבים. העקרונות הבסיסיים של מדידת מתיחות איזומטריות ברצועות myometrial ניתן גם להרחיב מדידת שינויים שמתבצעים ריכוז הסידן תאיים או pH על ידי השימוש של Ca פלורסנט או אינדיקטורים pH (H.+) וציוד לאתר, שיא פלורסצנטיות57,58,59,60.
בסך הכל, האדם myometrium מייצג מודל רלוונטי מבחינה פיזיולוגית ועמיד לאפיין ולאימות תרכובות הרומן טיפולית גילוי סמים – תרכובות טהורים ותערובות. יש מספק דוגמאות של השימוש בו גילוי תרופות ביחס למערכת OT/סמנכ ל ואנו התמקדו OTR, V1R היריבים כדי להראות כיצד מודל זה יכול לשמש כדי לקבוע יעילות מתחם ואת עוצמת לעבר מטרות מוגדרות ולאמת ליגנד סלקטיביות. עם זאת, זה כדאי לזכור כי טכניקה זו ניתן ללמוד כל מטרה מעניינים או שביל שמוביל להתכווצות myometrial (או הרפיה), כמו גם לסייע סמים גילוי מטרות חדשות מסלולים, לקדם את ההבנה שלנו של myometrial פיזיולוגיה, פתופיזיולוגיה.
The authors have nothing to disclose.
מחקר זה בתמיכתם את האוסטרי המדע קרן (FWF) דרך פרוייקט I3243, האירופית מחקר המועצה (ERC) תחת המחקר של האיחוד האירופי אופק 2020 ולהעניק והחדשנות (הסכם לא 714366). Cwg ב נתמכו על-ידי מלגת העתיד של מועצת המחקר האוסטרלי (ARC) (FT140100730) ובאמצעות מ”מ של אחוות ARC גילוי מוקדם בקריירה חוקר (DECRA) (DE150100784). SA נתמך על ידי האריס-רווחה לידה מוקדמת לידה מרכז במענק המחקר מנוהל על ידי רווחתם של נשים, בריטניה.
Origin software | Origin Lab | 2015 version | |
Labscribe Software | WPI | Formally Datatrax | |
GraphPad Prism graphical software | GraphPad Prism | PRISM 5 | |
LabTrax 4-Channel Data Acquisition | WPI | LAB-TRAX-4 | |
Transbridge Transducer Amplifier | WPI | SYS-TBM4M | |
Force-displacement Transducer | WPI | FORT10g | 10 g |
BNC to BNC Cable | WPI | 500184 | |
Magnetic Clamp stand | WPI | M10 | |
Micrometer | Reconditioned from microscopes | ||
Peristaltic pump | Gilson | MINIPULS3 | R4 Standard pump head |
Suction pumps | Various | AP2 air pump | |
Circulating Water bath | Grant Instruments | TC120 | 5L |
Perspex Tissue Bath | Custom made | ||
Water reservoir container | the reallyusefulbox | 7L | |
Tissue Hooks (fixed) | Hand made in house | ||
Peristaltic tubing | Gilson | F117948 | PVC 2.79 mm internal diameter |
Tygon Tubing | Fisher Scientific | various diameters | R-3603 |
Aluminium clips | Laser services, USA | custom made | |
Stereo Zoom binocular microscope | WPI | PZMIV | |
Microscope Fiber-optic Light Source | WPI | PHOTONIC PL 2000 | |
Dissecting Dishes | Handmade with Sylgard | ||
Sylgard Silicone Elastomer kit | Dow Corning | Sylgard 170 Kit | |
Vannas Scissors | WPI | 50086 | 8.5 cm, straight edge |
Iris Forceps | WPI | 15914 | 10 cm, straight edge (serrated) |
Dissecting scissors | WPI | 14393 | 10 cm, straight |
Dissecting pins | SIGMA | Z192341 | B-D precision guide syringe needle 30G |
HBSS | SIGMA | H9269 | |
Physiological Salt Solution | SIGMA | various | PSS |
Oxytocin acetate salt | SIGMA | O6379 | |
[Arg8]-vasopressin acetate salt | SIGMA | V9879 |