Summary
이 연구에서는 동굴 같은 신경 자극 신경 전극의 절연을 수행 하기 위한 기술과 간단한 수술에 설명 합니다 intracavernous 압력 측정 및 실리콘 접착제를 사용 하 여 복잡 한.
Abstract
해 면 신경 (CN)의 자극 및 intracavernous 압력 (ICP)의 측정 테스트 하 고 평가 하는 발기 부전 치료에 광범위 하 게 사용 되어 왔습니다. 그러나, 실험실, 사이 다를 사용 하는 방법 그리고 여전히 존재 하는 함정. 이 연구의 목표는 안정적이 고 재현 가능한 모델을 제공 하는 수술 기법을 설명 했다. Ischial tuberosity에 삽입 지점에서 ischiocavernosus 근육을 노출 하 여 최소한의 해 부와 발기 기능에 관련 된 구조를 부상 penile cru는 cannulated 수 있습니다. 리프팅 하 고 건조, 필요 없이 CN의 반복된 자극 전극 신경 복합물을 125 µ m 바이 폴라 실버 전극과 생체 실리콘 접착제를 사용 하 여 달성 되었다. 이 방법은 스트레칭과 신경 건조를 줄여 neuropraxia을 방지 하 고 전기 누설을 negating와 대체 통로의 자극을 방지 신경의 완전 한 격리를 제공 합니다.
Introduction
Vivo에서 연구 실험 동물에서 발기 기능에1의 선구적인 실험적인 작품으로 1863 년에 시작 했다. 통해 골반 신경의 개에 있는 증가 ICP를 유도 하기 위해 사용 되었다. 20 세기에 걸쳐 비슷한 실험 프로토콜은 개, 원숭이, 고양이, 토끼 같은 더 큰 동물에 사용 되었다. 쥐의 발기 기능을 평가 퀸 란 외. 19892에 의해 처음 개발 되었다. 메서드 수정 고 여러 다른 그룹34업데이트 이후는. 오늘, 쥐는 가장 널리 사용 되는 동물 모델 발기 부전의 병리학을 공부 하 고 새로운 치료 옵션을 평가 대 한. 절차의 주요 단계는 ICP에 있는 증가 유도 하 경 동맥 측정 ICP, penile cru cannulation 및 CN의 자극에에서 라인을 사용 하 여 조직의 혈압 기록 포함 됩니다. 여러 연구자 모델 정제는, 비록 그 재현성 유지 문제, 그리고 가변 결과 다른 실험실에 의해 보고 되었습니다. 여러 함정 아직도 지속 한다.
이전 기사5,6,7,,89,10 동굴 몸 cannulation 위한 성 기의 degloving로 전체 성 기 노출의 사용을 설명 합니다. 이것은 조작으로 최적의 접근 하 고 파괴 해 부 구조, 발기 기능에 필수적인 부상 발생. CN의 해 부 잘 설명된10,11, 했지만 신경의 자극 실험 결과 영향을 미칠 수 있는 여러 요인으로 인해 최적입니다. CN 자극 기술은 신경 주위 위치 후크 바이 폴라 전극에 당기 및 건조 각 자극 하기 전에 신경 주위 조직에서 신경 운동 포함 됩니다. 이 신경 손상 및 전기 전류 누설, 저하 응답 또는 대체 경로 예를 들어, 골반 바닥 근육, 방광의 자극을 통해 ICP에 거짓 증가 그리고 위장의 다양 한 학위를 이어질 수 있습니다. 로12. 이러한 모든 요소는 재현성을 제한합니다.
우리의 연구 기간 동안 우리는 깊이 마 취의 종류는 ICP에 심대한 영향을 미칠 다는 것을 관찰. 사용 하는 마 취약은 나트륨 pentobarbital, 케 타 민/xylazine 또는 케 타 민/midazolam 주입, 또는 isoflurane/산소 흡입.
여기 우리가 간단한 수술 방법에 설명 하 고 실험 프로토콜의 표준화 지원 데이터를 제공.
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Protocol
동물 기관 지침에 의하여 남쪽 덴마크의 대학 동물 보호 시설에 보관 되어 있었다. 모든 동물 실험 관리 및 실험 동물의 사용에 대 한 국립 보건원의 가이드에 따라 실행 되었다. 이것은 급성, 비 생존 수술 절차입니다.
1. 튜빙, 전극, 및 수술에 대 한 악기의 준비
- 다음 microsurgical 악기를 사용 하 여: 수술가 위, 각도 마이크로 위, 조직 집게, 뒤 몽 # 7의 쌍 및 #5 곡선된 마이크로 집게, 마이크로 바늘 홀더, 및 견인 기.
참고: 이것은 급성 절차, 악기 할 살 균 될 필요가 없습니다. 사용 후, 청소 하 고 70% 에탄올과 팁을 닦아냅니다. - 70% 에탄올에 튜브를 담근 다 고 다음 살 균 0.9% 물을 사용 하기 전에 100 U/mL 헤 파 린과 NaCl. 튜빙 시스템으로 기포를 도입 하지 않으려면 가득 남겨 주세요.
- ICP 측정에 대 한 카 테 터를 만들기 위해 폴 리 에틸렌 (PE)-50 튜브의 20-30 cm 길이 조각 잘라. 튜빙 꺾는 압력을 줄이기 위해 가능한 한 짧게 인지 확인 합니다.
- 바늘 중간에 중단 될 때까지 한 무 균 24 G 바늘 사이드-투-사이드 벤드. 경사 penile cru로 삽입에 대 한 PE 튜브의 선단부를 조각을 연결 합니다. 다른 절반 압력 트랜스듀서에 대 한 연결 허브에 삽입 합니다. Heparinized 염 (100 U/mL)로 시스템을 채우십시오.
- 바이 폴라 테 플 론 코팅된 전극 수 있도록, 컷된 2 125 µ m은 동등한 길이 전선. 테이프의 조각을 사용 하 여 테이블의 가장자리에 철사를 연결 하 여 함께 스레드 합니다. 그 후, 검은 접시 전극을 연결 합니다.
- 테 플 론에 작은 절 개를 만들고 전극의 끝에서 테 플 론 코팅의 4-5 m m 길이 #5 마이크로 집게를 사용. 메스 칼의 무딘 가장자리 끝 여 걸 만들고 심지어 길이를 메스로 팁을 잘라.
- 전극 끝이 약간 검은 접시의 가장자리 위쪽으로 가리키는 후크 확장 테이프. 10 s 하 고 포장 접착제 거품 후크 로부터 1-2 mm 전극 주위에 대 한 플라스틱 접시에 실리콘 접착제를 혼합.
- (그림 1) 사용 하기 전에 약 5 분 동안 건조 하실 수 있습니다. 스트립은 자극에 대 한 연결 허용을, 다른 끝에 긴 섹션에서 테 플 론.
참고: 다시는 선단부에 후크를 하 고, 함께 전극 여러 번 재사용할 수 있습니다.
2입니다. 동물의 준비
- 동물을 마비, 후 복 부, 목, 및 회음부의 아래쪽 절반을 면도. Povidone-요오드 세 번 뒤 70% 알코올로 동물 스크럽. 부정사 위치에 온수 외과 패드에 쥐를 놓습니다. 수 의사 눈 연 고를 적용 하 고 마 취 코 콘 캐리어로 2.5 %isoflurane 및 0.8 L/min 산소로 전환.
참고: Isoflurane 마 취의 수락 가능한 수준을 달성 하기 위해 산소의 수준을 조정 합니다.
3. presurgical 준비
- 운영 현미경 전체 수술 절차를 수행 하십시오: 20 X 3.15 X에서에서까지 확대는 충분. 장갑을 사용 하 고는 수술을 통해 깨끗 한 환경을 유지. 장소는 드 레이프에 쥐입니다.
4. Ischiocavernosus 근육 ICP 측정에 대 한 해 부
- 메스, 바로 위를 사용 하 여 및 Dumont #7 곡선 1 cm 수직 수 있도록 마이크로 겸 중간 선 경의 기지의 수준에서 시작 하 고 확장 하향 (그림 2A)에 피부 절 개 5 m m 옆. 면봉을 사용 하 고 신중 하 게 음 낭 (그림 2B)에 근 막 측면을 분리. 근 막 해 부, 후 견인 기를 부착 하 고 목화-밀고-스왑 ischial tuberosity (그림 2C)를 찾을 수와 함께 만져.
- Ischiocavernosus 근육 시각까지이 이때의 지방 조직 중간을 통해 해 부 (그림 3A). 뒤 몽 #7 곡선된 마이크로 집게의 쌍을 사용 하 여 고 경도 근육을 분리. Tunica albuginea 밝은 흰색 구조 (그림 3B)으로 표시 됩니다. Using 마이크로 집게와 마이크로 시저, 적절 하 게 그것의 과정 (그림 3C)를 보러 tunica albuginea 노출.
- 시스템 설정의 교정, 후 penile cru (그림 4)를 병렬 실행 하는 회음부에 피부를 통해 튜브를 삽입 합니다. 자리에 라인을 두고 절 개를 염 분으로 촉촉한 유지.
5. CN 자극에 대 한 해 부
- 2cm 낮은, 중간 피부를 사용 하 여, 첫째, 메스, 그리고 똑 바른가 위 및 마이크로 집게의 쌍을 통해 복 부 절 개를 확인 합니다. 교육에 따라 근 막 통해 일치 하는 절 개를 만드는 알바와 기본 근육 조직을 노출 방광과 전립선.
- 견인 기를 사용 하 여 좋은 노출을 달성. 주요 골반 신경 절 (MPG)의 명확한 시각화를 지방 조직에서 전립선을 목화-팁 면봉을 사용 하 여 및 CN, 전립선 (그림 5)의 dorsolateral 부분에서 실행.
- MPG와 CN의 시각화, 후 신중 하 게 각 마이크로 위 (그림 6a) 2-5 m m는 MPG에 말 초 신경 overlying 근 incise. #5 마이크로 집게를 사용 하 여, 신경의과 4 m m 긴 부분 (그림 6b), 무료 밑 양쪽에 조직 확산와 신경 (그림 6c)에서 9-0 봉합을 슬라이드.
- 신경 신경 (그림 7b) 주위 양극 전극의 갈고리의 배치를 촉진 하기 위하여 봉합 (그림 7a)의 도움으로 약간 상승 합니다. 보조 믹스는 인슐린의 팁 2-구성 요소 실리콘 접착제 신경 5 미 드라이 바늘 갈고리와 신경 (그림 7 c, d) 주변 지역에 접착제를 적용 하자. 접착제를 건조 수 있도록 약 1 분 동안 전극에 약간 당겨서 신경 높은 유지.
- 견인 기, 어떤 철수 또는 전극의 왜곡을 피하기 위해 오른쪽에 견인 기 제외를 제거 합니다. 절 개를 통해 식 염 수에 담가 염 분 및 누워 거 즈와 노출 된 장기를 젖은.
6. 동굴 몸 Cannulation ICP 측정에 대 한
- 견인 기를 사용 하 여 tunica albuginea의 시각화를 복원 합니다. Cru를 왜곡할 것 이다 그것으로 견인 기 ischiocavernosus 근육에 연결 되었는지 확인 합니다.
- 바늘을 연결 하 고 tunica albuginea에 도입 하기 전에 heparinized 염 분으로 튜브를 플러시. 계속 뻗어, Dumont #7 곡선된 마이크로 집게를 사용 하 여 한 손으로 tunica albuginea (비 지배적인), 삽입 지점에 원심 tunica albuginea 및 overlying 근육의 나머지 부분을 잡고. 다른 지배적인 손에 바로 마이크로 집게와 바늘을 잡고 고 있는지 그것을 소개 하 동굴 몸 (그림 8)의 코스와 함께 병렬.
- 동굴 몸으로 바늘 5-8 밀리미터를 밀어. 튜브를 플러시를 누르고 cru에 테스트 라인 (그림 9). 아무 누출 확인 합니다. 테이프 라인에 실수로 당기를 방지 하기 위해 테이블에 튜브를 고정 시킵니다. 견인 기를 제거 합니다.
7입니다. CN의 자극
- 녹음 프로그램 (예를 들면, 스파이크 2) 두 intracavernous 고 평균 동맥 압력 기록 지속적으로 실행.
- CN 자극에 대 한 자극 (예를 들어, SD9 잔디 악기, 재료의 표참조)에 다음 매개 변수를 설정: 1.5 mA, 16 Hz, 3 V, 전압 및 펄스 폭의 1 분의 최소 자극의 5 양 적용 50 s에서 주파수에 현재 stimulations 사이 휴식.
참고: 첫 번째 stimulations 저하 응답 (그림 10)에 보통 결과.
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Representative Results
사용 권장된 자극 설정으로이 프로토콜의 흡입 마 취와 isoflurane 2.0% 산소 0.8 L/min, 생성 해야 결과 그림 11 및 그림12와 같이 있는 여러 다시 다시 75-80 mm Hg. 그림 13 사이 stimulations 보여 줍니다 같은 안정적인 응답 응답 20 분 자극 73-77 m m Hg. ICP 측정에 대 한 테스트 라인에서 안정적인 튜브 홍 조와 cru (그림 9)에 활용 하 여. 신속한 응답 기준선을 다시 잘 배치 라인의 특징 이다. Tunica albuginea의 무결성이 손상 되 면 테스트는 낮은 피크 압력 및 기준선 홍 조 및 도청, 후에 다시 느린 응답 및 감소 응답 때 발생할 자극 (그림 14). 또한 홍 조와 stimulations 동안 출혈 때 heparinized NaCl의 누설이 있을 것.
종류 및 마 취의 수준 뿐만 아니라 산소를 사용 하 여 ICP에 큰 영향을 했다. 그림 15 감소 응답와 덜 ICP에 isoflurane의 다양 한 레벨의 효과 보여 안정적인 고원. 그러나 2%에서 isoflurane 있었습니다 안정적인 응답 78 mm Hg. isoflurane 3.5%,, 귀착되 었 다 34 m m Hg 여러 빠른 50% 감소의 농도 증가에 여러 stimulations ICP 측정에서 후속 stimulations. 동일한 효과 3.0 %2.0 %에서 isoflurane 스위칭, 관찰 되었다 응답의 19% 감소, 2.5%에서 5% 더 빠른 감소 70%의 응답에 보였다 때 관찰 되었다. 혈압 모든 stimulations에 걸쳐 안정 유지. 쥐 취 수술 다음 펜타닐/midazolam (동안에 isoflurane 단종 되었다)의 권장된 복용량의 25%를 받은 초기 stimulations isoflurane/산소 마 취 사용에 마찬가지로 안정적인 응답 하지만 그것 (그림 16) isoflurane에 비해 펜타닐/midazolam 마 취 동안 25% 증가.
코 통해 산소의 99-100% 약 20에 61-75%에서 혈액의 산소 포화를 증가 s. 분 혈압, stimulations에 걸쳐 안정 하지만 코 콘 (0.8 L/min)를 통해 산소 관리 최대 ICP 측정, 그것에 의해 감소에 큰 영향을 미쳤다 같은 감소 약 1 보였다는 산소 중지 된 때 연속 stimulations (그림 17)에 35-45%.
그림 1 . 바이 폴라 테 플 론 코팅된은 전극. (A) 접착제 코팅 및 비 코팅 전극 사이의 전이 영역에 거품. (B) Distal 전극의 2 cm braded 단단히. (C) 병렬 uncoated 후크 1mm 간격. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 2 . 동굴 시체의 해 부 - 랜드마크. (A) 1 cm 수직 피부 절 개, 음 경의 기지에서 하향 시작 2 m m 옆. (B) 음 낭을 근 막 옆 면 기울 ㄴ 면봉을 사용 하 여 분리. 견인 기의 배치 후 운영 분야의 (C) 보기 (오후: pyramidalis 근육, 그것은: ischial tuberosity에 cru의 삽입점). 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 3 . Tunica albuginea 노출. (A) ischiocavernosus 근육 (화살표). (B) Tunica albuginea (화살표). (C) 낮은 전력 확대 동굴 시체의 과정을 보여주는. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 4 . 동굴 압력 기록에 대 한 선. 바늘 동굴 몸 (화살표)와 병렬 실행 회음부에 피부를 통해 소개. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 5 . 화살표와 전립선의 dorsolateral 부분에서 수직 실행 CN는 MPG의 노출 표시. 주요 골반 신경 절 (MPG) 화살표, 해 면 신경 (CN)에 의해 표시. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 6 . 동굴 같은 신경의 해 부. (A) 마이크로 위 동굴 같은 신경 overlying 근을 절단. (B) 마이크로 집게를 사용 하 여 기본 조직에서 신경 분리. (C)는 신경 아래 9-0 합자를 배치. 주요 골반 신경 절 (MPG) 화살표, 해 면 신경 (CN)에 의해 표시. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 7 . 신경의 연결. (A)는 신경 봉합에 살짝 당겨 올리는. (B) 신경 전극의 갈고리에 휴식. (C) 신경 및 전극 복잡 한 생체 실리콘 접착제 절연 있습니다. (D) 추가 접착제 거품이 완전히 분리 신경 전극 복잡 한 추가 있다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 8 . Tunica albuginea cannulation입니다. 23 G 바늘 삽입 tunica albuginea PE-50 튜브에 연결. 화살표로 표시 된 삽입의 포인트입니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 9 . Intracavernous 라인 테스트. 올바른 선 배치와 응답입니다. Note 라인과 cru에 도청에 대 한 응답의 홍 조. 또한, 기준선 등을 맞댄 빠른 압력 강하 note. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 10 . 동굴 같은 신경 자극에 대 한 응답을 초기. 저하의 첫 번째 응답입니다. 50 mm Hg의 첫 번째 자극과 변동 대 지. 66 mm Hg의 두 번째 및 세 번째 자극입니다. 다음 측정 73 m m Hg. 정상적인 수준에서 기록 된 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 11 . 반복 되는 동굴 같은 신경 자극 및 intracavernous 압력 기록. 이 프로토콜을 사용 하 여 결과의 안정성을 보여주는. 75-78 mm Hg. 사이 10 연속 stimulations 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 12 . 동굴 같은 신경 자극과 압력 기록. 약 30 연속 stimulations < 6 m m Hg 변화 압력에. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 13 . 20 분을 지속 지속적인 자극 1 분 휴식 후에 결국, 하지만 후속 stimulations 증가 변동 생산 안정 응답. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 14 . Tunica albuginea 새. 홍 조 및 도청 후 기준선 등을 맞댄 장시간된 응답. 자극 후 감소 응답입니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 15 . Intracavernous 압력에 마 취 복용량의 효과. 감소 하 고, 그리고 마지막 세 stimulations isoflurane 증가에 더 변동 응답 첫 번째에서 2%에 안정적인 응답에 비해. 일정을 보여주는 상단에 파란색 추적 동맥 압력을 의미 합니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 16 . Intracavernous 압력에 마 취 종류의 영향. 초기 stimulations isoflurane 마 취 쇼에서 80 밀리미터 Hg의 압력 증가, 펜타닐/midazolam 투여 되 면 110 mm Hg. 응답에 증가 했다 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 17 . 원뿔을 통해 산소 관리의 효과. 동굴 같은 신경 자극 동굴 압력 증가 있는 뜻깊은 감소 귀착되는 코 통해 산소 관리를 중단. 평균 동맥 압력에 영향을 주지 않습니다 지적 했다 (추적 위의 블루). 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 18 . 자극에 대 한 압력 응답에 전압의 효과. 1.5-6 V 사이의 전압 동일한 압력 응답 생산. 응답 대 1.5 아래 점감 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
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Discussion
이 연구의 주 목표 penile cru cannulation ICP 녹음의 단순화 된 수술 기법 및 통해에 대 한 CN의 격리를 설명 했다. 수술을 단순화 하는 ICP의 증가의 재현 녹음 CN 자극 제공 동굴 시체의 해 부에 대 한 수정 도입 했습니다. 1 cm 수직 피부 절 개를 만져 서 ischial tuberosity 지침으로 사용 하 여 음 경의 기지에 측면 우리 달성 ischiocavernosus 근육과 tunica albuginea의 좋은 노출을. 이 절차는 빨리 (15 분이 하) 보다는 문학과 원인 최소한의 조직 장애2,3,4에 설명 된.
CN의 현재 사용 된 기술은 포함 연결, 해제, 그리고 각 통해 전에 CN의 건조 적용된10. 이 기술은 조건 각 자극에 대 한 동일 하 게 유지는 보장 하지 않습니다. 또한, 신경의 해제는 micromanipulator 사용 해야 하 고 스트레칭 하 고 neuropraxia로 이어질 수 있는 신경의 발표를 반복 했다. 현재 CN 자극 기법에 비해 신경 전극 복잡 한을 생체 실리콘 접착제를 사용 하 여 두 인스턴스에; 스트레칭 하는 신경의 주파수를 감소 바이 폴라 전극 신경 주위를 한 번 그리고 한 번 신경 및 접착제를 사용 하 여 전극 분리. 그 후, 여러 neurostimulations 신경 조작 필요 없이 수행 될 수 있는.
압력 기록 동굴 몸으로 바늘의 삽입은 중요 한 단계를 구성합니다. 이 기술의 새로운 사용자는 실험을 시작 하기 전에이 부분을 연습 해야 합니다. Cru에 바늘을 배포 하는 경우 그것은 중요 cru 뻗어와 바늘 배포 과정을 병렬. 다른 중요 한 단계는 주변 조직과 아래 전극의 배치에서 그것의 해 부 동안 처리 하는 신경 이다. 절 개 자체가 어려운 작업 동안 어떤 스트레칭 또는 신경의 호감 손상 될 수 있습니다. 우리의 수정이 단계는 micromanipulator에 대 한 필요성을 불필요 하 게 하 고 신경 처리를 단순화 합니다. 신경 분리 전극과 신경 사이의 안정적이 고 신뢰할 수 있는 연락처를 제공 하는 생체 실리콘 접착제를 사용 하 여 필요한 조작을 줄어듭니다. 실리콘 접착제도 사용 될 수 다른 동물 모델에서 신경 vivo에서 적용 됩니다.
14-20 Hz 및 1.5-12 V11,13,14에서 수많은 연구에서 나열 된 자극 매개 변수 다. 이 기술은 1.5를 사용 하 여 그 자극 했다 mA, 16 Hz 3 V, 및 5 ms 펄스 생성 전체 응답. 증가 함께 자극 매개 변수는 ICP (그림 18)을 증가 하지 않습니다. 이것은 동맥 (동굴 동맥), arteriolar, 및 정현파 평활 근 이완, 트리거링을 위한 임계값 이상의 매개 변수를 사용 하 여 자극 반사를 방 아 쇠를 충분 하 고 전체 생리 귀 착될 것입니다. 응답입니다. 주파수, 진폭, 또는 펄스 폭에 후속 증가 강한 생리 적인 응답으로 이어질 하지 않는 그리고 신경 전달 물질을 고갈 또는 신경 손상도 일으킬 수 있습니다. 위에 설명 된 매개 변수 우리 재현 응답 30 짧은 휴식 기간을 달성 하기 위해 수 있었다 s 연속에서 40 시간.
마 취의 깊이 생리 적인 응답을 명확 하 게 영향을 줍니다. 그러나 흡입 마 취와 함께 그것은 수 수 잘 제어, 피크 응답 펜타닐/midazolam 마 취 주사에 의해 관리에 비해 약 25%, 이다. 우리가 관찰 isoflurane 복용량 발가락 핀치 응답을 제거 하는 데 필요한 최소 isoflurane 농도 의해 결정 된 수준에서 유지 될 수 있습니다. 대부분 수 사관, sodium pentobarbital, 펜타닐/midazolam, 케 타 민/xylazine, 또는 마 취 제/midazolam15주입 마 취를 사용 합니다.
게시 된 기사 중 제어 산소의 사용을 언급 했다. 이 연구에서 결과 표시이 ICP에 큰 영향을 했다. 따라서, 사용 하는 마 취의 종류에 그, 동물 원뿔 통해 산소 받는 중요 하다.
쥐를 사용 하 여 그들의 크기와 탄력성 때문에 유리 하다. 이전에 게시 연구에서 모두이 연구에서 확인, Sprague Dawley 쥐 6 ~ 12 주 오래 된의 범위에 있는 CN 자극을 그대로 응답을 보여왔다 고 200-550 g. 사용 마우스 무게 때문에 유익 하지만, 더 많은 도전는 유전자 변형 기술12의 가용성입니다.
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Disclosures
저자는 공개 없다.
Acknowledgments
저자 아무 승인 있다.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Adson forceps | Fine Science Tool | 11006-12 | |
| Dumont #7 forceps | Fine Science Tool | 11271-30 | |
| Dumont #5 forceps | Fine Science Tool | 11273-20 | |
| ToughCut Mayo scissor | Fine Science Tool | 14110-15 | |
| Miniature Vannas Spring scissor | Fine Science Tool | 15006-09 | |
| Ultra Fine Hemostat | Fine Science Tool | 13020-12 | |
| Crile Hemostat | Fine Science Tool | 13004-14 | |
| Kwik-Sil Adhesive | World Precision Instruments | KWIK-SIL | |
| Teflon coated silver wire 0.125 mm | World Precision Instruments | AGT0510 | |
| Elastic wire retractors | Custom made | ||
| Scalpel blade | Fine Science Tool | 10023-00 | |
| PE-50 tubing | Warner Instruments | 64-0753 | |
| 23 G Needle | Kruuse | 121272 | |
| SD-9 Square Pulse Stimulator | Somatco | 1077/183 | |
| Blood pressure transducer and cable | World Precision Instruments | BLPR2 | |
| Raucotupf Cotton-tipped Applicators | Lohmann-Raucher | 11966 | |
| Pro-ophta Ocular Sticks | Lohmann-Raucher | 16515 | |
| NaCl 0,9 % 100 mL | Local pharmacy | ||
| Heparin | Local pharmacy | ||
| 25 mL Syringe | Odense University Hospital | ||
| Vet eye ointment - Viscotears | Local pharmacy | ||
| silver wires | Science Products GmbH, Heidelberg, Germany | ||
| Silicon Glue | Kwik-Sil, World Precision Instruments, Sarasota, FL, USA |
References
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