Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Medicine

زرع cochlear في خنزير غينيا

Published: June 15, 2018 doi: 10.3791/56829
* These authors contributed equally

Summary

والهدف من هذا البروتوكول هو تقديم نموذج حيوان لزرع cochlear، التي يمكن أن تستخدم لمعالجة العديد من الأسئلة البحثية. وتشمل التطبيقات المحتملة تقييم التدخلات الدوائية أو التحفيز الكهربائي لآثار مفيدة على عتبات السمع أو ممانعات القطب.

Abstract

عملية زرع cochlear هي أجهزة عالية الكفاءة التي يمكن استعادة السمع في الموضوعات مع فقدان السمع العميق. سبب خطاب تحسين إدراك النتائج، وتم توسيع معايير الترشيح على مدى العقود القليلة الماضية. وهذا يشمل مرضى السمع المتبقية الكبيرة التي تستفيد من التحفيز الكهربائية والصوتية من الإذن نفسها، الأمر الذي يجعل المحافظة على السمع أثناء زرع cochlear مسألة هامة. ممانعات القطب والمسألة المتعلقة باستهلاك الطاقة حقل بحثي رئيسي آخر، التقدم المحرز في هذا المجال يمكن أن تمهد الطريق للأطراف الاصطناعية السمعية القابلة للغرس تماما. ولمعالجة هذه القضايا بطريقة منهجية، نماذج حيوانية الكافية ضرورية. ولذلك، والهدف من هذا البروتوكول هو تقديم نموذج حيوان لزرع cochlear، التي يمكن استخدامها لمعالجة مختلف المسائل البحثية. سبب لها الفقاعة tympanic كبير، مما يتيح سهولة الوصول الجراحية للإذن الداخلية، فضلا عن نطاق السمع الذي يشبه نسبيا إلى نطاق السمع للبشر، خنزير غينيا أنواع الشائعة استخدام في البحوث السمعي. ويتم زرع cochlear في خنزير غينيا عن طريق اتباع نهج ريترووريكولار. من خلال بولوستومي حفر كوتشليوستومي ومسرى زرع cochlear يتم إدراجه في حبل سكالا. ثم يمكن استخدام هذا القطب للتحفيز الكهربائي وتحديد ممانعات الكهربائي وقياس إمكانات العمل المركب للعصب السمعي. وبالإضافة إلى هذه الطلبات، وزرع cochlear أقطاب يمكن أيضا استخدامها كأجهزة إيصال المخدرات، إذا كان القصد من عملية تسليم الموضعية لوكلاء الأدوية إلى خلايا أو سوائل من الإذن الداخلية.

Introduction

أكثر من 500 مليون شخص في العالم يعانون من فقدان السمع. 1 ارتبط ضعاف السمع بمعدل أعلى من الاكتئاب وانخفاض الثقة بالنفس ومشاعر أقل بالذات، مما يؤدي إلى انخفاض نوعية الحياة كافة. 2 حين السمع بطريقة كافية لاستعادة وظيفة حسية في حالات فقدان السمع معتدل، طريقة العلاج الأكثر فعالية للمرضى الذين يعانون من فقدان السمع العميق هو زرع cochlear (CI). بسبب نتائج ممتازة فيما يتعلق بتصور الكلام، معايير الترشيح لزرع cochlear الآن أيضا تشملs المرضى الذين لديهم بقايا كبيرة الاستماع في منطقة منخفضة التردد، ولكن لا ينتفعون بالسمع. 3 أن هؤلاء المرضى يمكن الجمع بين استخدام التحفيز الكهربائي والصوتية في الإذن مزروع، الحفاظ على السمع وقد أصبحت قضية رئيسية للجراحين CI. خلال زرع cochlear، يتم إدراج صفيف قطب في حبل سكالا من القوقعة، حيث أنه يحفز كهربائياً العصب السمعي. 4 الصدمة الإدراج قطب كهربائي يشكل خطرا على السمع المتبقية ويستحث التليف، مما يزيد من ممانعات القطب واستهلاك البطارية للزرع. وهكذا، نماذج لدراسة التدخلات الدوائية التي يمكن أن تقلل من فقدان السمع والتليف الناجم عن إدخال مسرى ضرورية.

خنزير غينيا هو نموذج حيوان ملائمة ومريحة لرابطة الدول المستقلة، بسبب أسهل وأكثر الوصول الجراحي استنساخه للإذن الداخلية مقارنة اليرابيع، والجرذان أو الفئران. 5 , 6 , 7 , 8 وعلاوة على ذلك، جلسة استماع مجموعة من هذه الأنواع نسبيا مقارنة بالسمع البشري. 9 الأنواع الكبيرة مثل القطط أو القرود، التي استخدمت لمعالجة المسائل البحثية المحددة المتصلة برابطة الدول المستقلة، لا تمثل خياراً معقولاً لمعظم الدراسات CI نظراً للاعتبارات الأخلاقية والمالية على السواء. 10 , 11

وخلاصة القول، خنزير غينيا نموذج موثوق بها وفعالة من حيث التكلفة نسبيا لتقييم آثار التدخلات الدوائية في الإعداد لزرع cochlear.

Protocol

جميع التجارب على الحيوانات أقرتها اللجنة رعاية الحيوانات المحلية والوزارة الاتحادية النمساوية للعلوم والأبحاث والاقتصاد.

1. إعداد المعدات والإعداد المطلوبة لإجراء عملية جراحية

  1. ضع المجهر الجراحي، الحفر، لوحة تدفئة ونبض التاكسج للسماح بسهولة وكفاءة معالجة أثناء الجراحة. التحقق من وظيفة الأجهزة استناداً إلى الدليل الخاص بالشركة المصنعة. تأكد من أن يتم تعيين لوحة تدفئة في 38 درجة مئوية من أجل حماية الحيوان من انخفاض درجة حرارة الجسم أثناء الجراحة.
  2. وضعت على غطاء وقناع.
  3. إجراء التعقيم الجراحي اليد. غسل اليدين بالصابون دقة. الجاف لليدين وثم استخدام منظف يد كحولية لتطهير اليدين. وضع قفازات بعد الأيدي جافة.
  4. إعداد تعقيم الأدوات الجراحية والمعدات اللازمة لزرع cochlear. انظر الجدول للمواد للأدوات الجراحية والمعدات المستخدمة لغرس CI خنزير غينيا في هذا البروتوكول.
  5. عندما يقصد بها قياس إمكانات العمل المركب (CAP)، إعداد قطعة سم طوله حوالي 3.5 من أسلاك الذهب تفلون--بمعزل عن طريق إزالة أجزاء من العزل بعناية من كلا الطرفين ملقط الصغير (حوالي 3 من طرف واحد و 5 ملم من استخدام الطرف الآخر). إعداد قطعة ثانية من أسلاك الذهب (حوالي 2.5 سم) مع نهايات الأغلفة لحوالي 5 مم-مكان الأسلاك المعدة في الكحول أو المطهرات.

2-التخدير والأدوية وإعداد الحيوانات

  1. وزن الحيوان.
    ملاحظة: الحيوانات المستخدمة خنازير غينيا ألبينو دانكن-هارتلي الإناث. وزن الحيوانات المستخدمة، وحوالي 4-6 أسابيع من العمر، يتراوح من 300 إلى 400 غرام.
  2. تعد المسكنات والأدوية اللازمة لإجراء عملية جراحية استناداً إلى وزن الحيوان. إعداد 0.72 مل المخلوط مخدر، تتألف من الكيتامين 0.06 مل (100 مغ/مل)، ميديتوميديني مل 0.18 (1 ملغ/مل)، 0.12 مل من الميدازولام (5 ملغ/ملليلتر) و 0.36 مل من شيفتشنكو (50 ميكروغرام/مل) لإجراء عملية جراحية على خنزير غينيا 400 غرام. انظر الجدول 1 لجرعات على أساس الوزن المسكنات.
  3. حقن الخليط من الكيتامين، ميديتوميديني، الميدازولام وشيفتشنكو تحت الجلد إلى منصة الدهون في رقبة الحيوان باستخدام إبرة ز 27. انظر الجدول 1 للوزن على أساس جرعات من المسكنات. تغطية القفص وترك الحيوان في مكان هادئ لمدة 10 دقائق قبل المتابعة.
  4. تليين عيون الحيوان وإبقائهم مشحم خلال الإجراء بأكمله. حلق رأس الحيوان، مع التركيز على منطقة ريترووريكولار للسماح وصول جراحي كاف للفقاعة.
  5. ضع الحيوان على لوحة تدفئة في موقف المعرضة والتأكد من أن الحيوان ليس في اتصال مباشر مع لوحة تدفئة لمنع الحروق الحرارية. مكان المسبار التاكسج نبض سيرا على أقدام للحيوان. ثم افتح الفم للحيوان بعناية مع المنظار صغيرة والنظيفة تقع تجويف الفم كاملة من الأغذية باستخدام مصاصة.
  6. تبقى فم الحيوان فتحت المنظار. إدراج أنبوب المعدة بعناية في المريء الحيوان، ودفع ببطء في اتجاه المعدة حتى تشعر بمقاومة.
    1. مراقبة س2-تشبع الحيوان للتأكد من أن أنبوب المعدة ليس في القصبة الهوائية. إزالة أنبوب المعدة إذا كان هناك انخفاض في س2 التشبع وحاول مرة أخرى بعد أن يتم تهوية الحيوان تماما.
  7. حقن خليط من المحلول الملحي الفسيولوجي وجلوكوز 5% وانروفلوكساسين في لوحة الدهون في رقبة الحيوان باستخدام إبرة ز 23.
  8. استخدام منظف اليد الكحولية لتطهير الأيدي مرة أخرى. وضع قفازات نظيفة جديدة.
  9. إعداد الحقل الجراحي مع التناوب دعك إيثانول البوفيدون اليود و 70 في المائة، وتغطي الحيوان. استخدام الستائر ذاتية اللصق أو المشابك منشفة للتأكد من أن الحقل الجراحي فقط يبقى اكتشفت أثناء الإجراء.
  10. تحت الجلد حقن 0.1 مل من محلول ليدوكائين 2% في مجال شق المخططة للتخدير الموضعي كافية ووضع الحيوان جانبية.
  11. إعادة جرعة الحيوان مع ربع الجرعة الأولى من المخلوط مخدر كل 30 دقيقة بعد الحقن الأول للمحافظة على التخدير كافية.

3. زرع cochlear

  1. القيام شق الجلد 2-3 سم تقريبا 3-5 مم الخلفي إلى بينا استخدام مشرط. استخدام الكي القطبين عند الضرورة للتقليل من النزيف.
    ملاحظة: ينبغي تأكيد عمق مخدر بعدم سحب دواسة قبل الشق الأول. يجب تكرار هذا الاختبار كل 15-20 دقيقة لرصد عمق مخدر طوال فترة الإجراءات.
  2. قص العضلات في منطقة ريترووريكولار بعناية بعد بالباتينج الفقاعة السمعية باستخدام 15 مشرط أو مقص جراحي.
    ملاحظة: جس الفقاعة السمعية كمكانة تحت العضلات.
  3. تشريح العضلات من الفقاعة بالضغط عليها برفق جانبا باستخدام راسباتوري أو برعم القطن. استخدام ضام لكشف كامل طول الشق وبلا عراقيل الوصول إلى الفقاعة.
  4. استخدام تلميح مشرط 15 لحفر حفرة في الفقاعة. تدوير دون مشرط بعناية حتى العظم هو مثقب للسماح بالتفتيش من بنيات الإذن الوسطى.
  5. تكبير الصورة بولوستومي حسب الحاجة للتأكد من أن تشغيل القاعدية للقوقعة، ويمكن تصور مكانة نافذة جولة على نحو كاف. ضع رأس الحيوان في وضع مقوس من أجل الوصول إلى هذه الهياكل. تغطي منطقة بولوستومي مع قطعة صغيرة من ضغط لمنع الدم والسوائل خارج الخلية من التشغيل للإذن الوسطى.
    ملاحظة: موقف مقوس الرأس قد تعيق مجرى الهواء للحيوان. ولذلك، تشبع الأكسجين الحيوان يحتاج إلى مراجعة كثيرا.
  6. ضع الحيوان في موقف المعرضة. كشف ذروة الحيوان عن طريق إجراء شق مستطيل وإزالة الجلد. تشريح في السمحاق وتنظيف العظام من أي نوع آخر من الأنسجة أو الدم باستخدام مشرط.
  7. عندما يقصد بها قياسات غطاء، الانتهاء من إعداد 3.5 سم تفلون معزول الأسلاك الذهبية بتشكيل هوك صغيرة مع ملقط الصغير في نهاية السلك، التي كانت من الأغلفة عن 3 مم.
  8. عندما يقصد بها قياسات غطاء، دليل نهاية الأسلاك الذهبية، التي كانت من الأغلفة عن 5 مم، تحت الجلد إلى الذروة من خلال ز 18 طرفية قسطرة وريدية استخدام ملقط الصغير. استخدام الملقط الصغير آخر باليد الأخرى لتوجيه نهاية السلك بعناية في التوصيل إلى الإذن الوسطى.
  9. عندما يقصد بها قياسات غطاء، لوي رئيس الحيوان لتصور مجال مكانة نافذة جولة من خلال بولوستومي. استخدام اليد الأخرى لربط سلك الذهب إلى بروز عظمى من مكانة نافذة جولة باستخدام ملقط الصغير.
  10. الإبقاء على التوتر لطيف في سلك الذهب وإصلاحه على حافة الجمجمة بولوستومي مع 10-15 ميليلتر من الغراء الأنسجة باستخدام حقنه 1 مل بواسطة إبرة ز 27. تجنب تشريد غراء في الإذن الوسطى. انظر الشكل 1 عن صورة المضاعفات من ناحية الإطار جولة مع سلك الذهب في الموقع.
  11. عندما يقصد بها قياسات غطاء، قم بتوصيل الطرف الأغلفة أسلاك الذهب والمعدات المستخدمة لقياس الإمكانات السمعية وإجراء قياسات غطاء أساسية. انظر هونيدير et al., 2016، وصفاً مفصلاً للقياسات كاب المنجز بشكل روتيني في المختبر. 12
  12. ضع الحيوان في موقف المعرضة. حفر ثقوب 2 1 مم عرفت خياطة لامدا باستخدام لدغ 1-مم دون التسبب في الأضرار التي لحقت بلده دوراً. زرع مسامير الفولاذ المقاوم للصدأ 2 مم 2 في الجمجمة.
    ملاحظة: المسامير تخدم كنقاط التثبيت للموصل بالقطب. التكيف مع المسافة بين المسامير فيما يتعلق بحجم الموصل.
  13. استخدام قسطرة وريدية طرفية ز 18 لتوجيه مسرى من الموصل إلى الفقاعة في طبقة نسيج قريبة من جمجمة قدر الإمكان.
  14. يخلط مسحوق الأسمنت الأسنان السائل لمسحوق الأسمنت الأسنان باستخدام ملعقة وفقا للدليل الخاص بالشركة المصنعة.
  15. مكان 0.5-0.7 مل أسمنت الأسنان سيميفلويد بين المسامير باستخدام ملعقة. موقف الموصل الكهربائي بين المسامير.
  16. الاحتفاظ بالموصل في الموقف حتى يتم تصلب الأسمنت الأسنان. تأكد من أن المسامير هي المغطى بالأسمنت للسماح لتثبيت الاستقرار من الموصل.
  17. ضع الحيوان جانبية. حفر بعناية كوتشليوستومي 1 مم من مكانة نافذة جولة استخدام لدغ الماس 0.5 مم بمعدل دوران من 5000 طلقة في الدقيقة الواحدة.
  18. عناية إدراج مسرى في بحبل سكالا إلى عمق 4 مم. سحب مسرى وتكرار الإدراج. انظر الشكل 2 لمسرى المستخدمة لزرع cochlear خنزير غينيا.
  19. باستخدام إبرة مستقيمة، ختم منطقة كوتشليوستومي مع قطعة صغيرة من العضلات. إصلاح مسرى على وشك بولوستومي الجمجمة مع 10 ميليلتر من الغراء الأنسجة باستخدام حقنه 1 مل بواسطة إبرة ز 27.
  20. إعداد الأسمنت الأسنان كما هو مذكور في 3.14. إغلاق بولوستومي مع حوالي 0.3 مل أسمنت الأسنان بعناية باستخدام ملعقة. إغلاق شق ريترووريكولار استخدام خيوط قابلة للامتصاص 5-0.
  21. تحويل الحيوان إلى الموقف الذي عرضه.
  22. عندما يقصد بها قياسات غطاء، الاستيلاء على الحافة الخلفية من شق مستطيل في ذروة الحيوان باستخدام ملقط أنسجة. استخدام مقص باليد الأخرى لجعل نفق تحت الجلد بطول 2 سم تقريبا في رقبة الحيوان.
  23. عندما يقصد بها قياسات غطاء، زرع أسلاك الذهب 2.5 سم تحت الجلد في عنق الحيوان باستخدام ملقط. لحام الأغلفة نهاية أقصر إلى طرف معين موصل على ذروة الحيوان.
  24. عندما يقصد بها قياسات غطاء، اللحيم الكهربائي مكانة نافذة جولة (سلك الذهب) الرقم المناسب من الموصل في ذروة الحيوان.
  25. تطبيق مبلغ إضافي للإسمنت الأسنان العلوي الموصل لتغطية الدبابيس معزول ومسرى.
  26. عندما يقصد بها قياسات غطاء، إجراء قياسات بعد العملية الجراحية ووفقا لبروتوكول البحث.

4-بعد العملية الجراحية الرعاية

  1. تطبيق أتيباميزولي وفلومازينيل تحت الجلد بعد الجراحة والقياسات من أجل استعداء التخدير.
  2. تطبيق المحلول الملحي الفسيولوجي كاستبدال السوائل لدعم انتعاش الحيوان من الجراحة.
  3. وضع الحيوان تحت مصباح تدفئة حتى تعافي تماما من التخدير ويبدأ التحرك داخل القفص.
    1. منع hyperthermia أو حرق بوضع المصباح تدفئة حوالي 50 سم للحيوان. تأكد من أن درجة حرارة جسم الحيوان دائماً بين 37.5 درجة مئوية و 39 درجة مئوية.
  4. تحقق من هذا الحيوان لأعراض الإصابة الدهليزية مثل رأرأة، الدوران أو التدحرج. 13 , 14
  5. تطبيق البوبرينورفين للتسكين مرتين في يوم لاثنين أكثر أيام ما بعد الجراحة.
    ملاحظة: قبل التطبيق الأول لجراحة البوبرينورفين بعد التأكد من أن الحيوان قد تعافي تماما وقد تنفس مستقرة. قد يؤدي تطبيق هذا الدواء بينما الحيوان لا تزال تحت التخدير للتنفس.
  6. وزن الحيوان أثناء الجراحة بعد 3 أيام الأولى للكشف عن فقدان الوزن الممكن كعلامة حرف مركب من الشدة أثناء هذا الوقت.
    ملاحظة: يمكن توقع فقدان الوزن من حوالي 10% خلال 3 أيام الأولى بعد الجراحة وينبغي النظر الشائعة. هذا الوزن مؤقت وسوف تسترد في غضون أيام قليلة.

Representative Results

عادة شفاء الجروح الجراحية سريعة ودون تعقيدات في نموذج خنزير غينيا والاتصالات للقياسات الكهربية بعد العملية الجراحية يبقى موجوداً بسهولة في ذروة الحيوان (الشكل 3). ويبين الشكل 4 قياس الغطاء فوق ما قبل وما بعد الجراحة حيوان الممثل. الإدراج قطب كهربائي أدى إلى تحول عتبة 16 ديسيبل (ديسيبل) (أرقام 4A و 4B). الشكل 4 ج يوضح ما قبل وبعد العملية الجراحية الخاصة بالتردد كاب عتبات الحيوان نفسه. عتبات كاب دون تغيير تقريبا في الترددات المنخفضة، بينما يتحقق تحول عتبة لما يقرب من 25 إلى 30 dB في منطقة عالية التردد، ابتداء من الساعة 8 كيلو هرتز.

القطب الإدراج يمكن أن يسبب صدمة للإذن الداخلية. بالإضافة إلى الصدمة الجراحية الحادة، أن رد فعل جسم غريب على مسرى يؤثر سلبا على أداء زرع cochlear. يوضح الشكل 5 كوكليا خنازير غينيا بعد الإدراج CI والإجراءات المختلفة لغذائها. في الشكل 5A الكهربائي، الذي وضع بشكل صحيح في حبل سكالا، تركت في الموقع، بينما في الشكل 5ب أزيل مسرى قبل workup النسيجي. في الشكل 5ألف تقريبا أي رد فعل جسم غريب مرئياً، بينما في الشكل 5ب مساحة كبيرة من حبل سكالا مليء بأنسجة تليفية. الشكل 5 ج يصور كسر الصفيحة دوامة العظمى بسبب الإدراج CI القطب، مما تسبب أيضا في فقدان خلايا العقدة دوامة في هذا الحيوان. يمكن أن تفسر هذه الكسور أعلى من عتبة المتوقع حدوث تحولات في بعض الحيوانات.

Figure 1
الشكل 1 : جولة ناحية الإطار مع سلك الذهب في الموقع. علامات نجمية في إطار جولة، بدوره القاعدية x من القوقعة. أسلاك الذهب يتسم سهم. مقياس بار-2 مم الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

Figure 2
الشكل 2 : قطب زرع cochlear خنزير غينيا- يتم إدراج مسرى مع جهات اثنين عن 4 مم. قطر مسرى هو مدبب من 0.3 مم في التلميح إلى 0.5 مم. تدل الخطوط 0.5 ملم. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

Figure 3
الشكل 3 : خنزير غينيا حوالي أسبوعين بعد زرع cochlear. مسرى CI في عين المكان والاتصالات للقياسات الكهربية بسهولة في ذروة الحيوان. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

Figure 4
الشكل 4 : الممثل كاب عتبات (A) انقر فوق قبل الجراحة كاب عتبة حيوان الممثل. (ب) بوستوبيراتيفي فوق عتبة الباب للحيوان نفسه، نستعرض تحولاً عتبة 16 ديسيبل. تشير الخطوط إلى 10 dB. (ج) ما قبل وبعد العملية الجراحية الخاصة بالتردد كاب العتبات. بينما الترددات المنخفضة بدون تغيير تقريبا، ويمكن ملاحظة تحول عتبة dB 25-30 في نطاق الترددات من 8 إلى 32 كيلو هرتز. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

Figure 5
الشكل 5 : الآثار المحلية المحتملة للإدراج القطب CI. (أ) صورة مجهرية لدورة القاعدية من القوقعة خنزير غينيا مع CI قطب كهربائي في الموقع (#) وإلا رد فعل جسم غريب الحد الأدنى. وأجرى التحليل النسيجي تستخدم طحن وتلميع تقنية بعد تضمينها الراتنج وتلطيخ Giemsa. 15 سكليبر 100 ميكرومتر (ب) صورة مجهرية للقناة tympanic العليا القاعدية بدوره من القوقعة مع استجابة الأنسجة مرئية ترك قناة بعد إزالة القطب CI (#). سكليبر 100 ميكرومتر (ج) دورة القاعدية أقل من القوقعة مع كسر دوامة العظمى الصفيحة (سهم غامق) واستجابة النسيج المجاور: (ط) فقدان خلايا العقدة دوامة (سهم) في قناة (ثانيا) التليف روزنتال وأوستيونيوجينيسيس في القناة الدهليزية (●)، و ( ثالثا) فقدان كورتي من الجهاز (*). حفر حفرة للإدراج من CI (○) مع أوستيونيوجينيسيس المجاورة. سكليبر 500 ميكرومتر. الأرقام 5 باء وجيم 5 كانت ملطخة الهيماتوكسيلين (أزرق) وويوزين (أحمر). الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

Discussion

يصف البروتوكول المقدم كيفية إجراء زرع cochlear في نموذج خنزير غينيا. يمكن استخدام هذا البروتوكول لتقييم التدخلات المختلفة لآثارها على السمع المتبقية ورد فعل جسم غريب على مسرى CI. ينبغي اتخاذ احتياطات عدة للتوصل إلى إمكانية تكرار نتائج عالية ودقة من التجارب.

وينبغي قياس عتبات السمع الأساس لجميع خنازير غينيا تأهيلي باستخدام استجابات الدماغ السمعية مثلاً . بعض من خنازير غينيا المتاحة تجارياً يحمل فقدان السمع ذات صلة ولذلك لم يدرج في الفوج التجريبية. اعتماداً على طول الجراحة وبروتوكول يمكن إجراء هذا التقييم أما مباشرة قبل الجراحة أو زرع cochlear قبل بضعة أيام، مما يتيح للحيوان ما يكفي من الوقت للتعافي من التخدير.

عند إجراء عملية جراحية تحت التخدير العام في التنفس صورة عفوية سرعة الحيوان، المهم. لذلك، إعداد دقيق قبل الجراحة أمر أساسي، كما اختيار البروتوكول مخدر. استخدام الكيتامين، ميديتوميديني، الميدازولام وشيفتشنكو في تركيبة مع نتائج التخدير الموضعي في التخدير الكافي والتسكين، بينما وفي الوقت نفسه يستمر الحيوان على التنفس بصورة تلقائية. بالمقارنة مع استخدام الكيتامين وإكسيلازيني كثيرا ما توصف، نتائج هذا النظام في أفضل التسكين والمحيطة بالجراحة خفض معدلات الاعتلال والوفيات. من المهم لجميع الصكوك والأدوية (بما في ذلك الداعم للمسكنات) متاحة قبل وضع الحيوان إلى النوم.

بسبب التغييرات الموقف من الحيوانات أثناء الجراحة (تغيير من موقف المعرضة إلى موقف سيديوارد والعودة)، هناك خطر تطلع للمعدة المحتوى في أي وقت إلى الرئتين. ولهذا السبب، يتضمن البروتوكول أيضا تطبيق أنبوب المعدة، وطريقة سريعة وسهلة لحماية الحيوان من الطموح، والحد من الوفيات المحيطة بالجراحة.

للحفاظ على العقم خلال إعادة تحديد المواقع والمناطق حيث يكون الحيوان لمست الحاجة التي تغطيها الستائر العقيمة، قفازات تحتاج إلى تغيير بعد ذلك أو إعادة تحديد المواقع يحتاج إلى القيام به من شخص آخر غير معقمة.

O2-التشبع الرصد أيضا أهمية قصوى أثناء الجراحة. الموضع من الرأس المطلوب للتصور الرعن ومكانه نافذة جولة يمكن أن يسبب انسداد في مجرى الهواء، التي يمكن معالجتها بسهولة عند تحديد وقت كاف.

وعادة ما تفقد الحيوانات كمية كبيرة من سوائل الجسم (مثل الدم، السائل خارج الخلوي، والبول) أثناء الجراحة. ولذلك، البروتوكول استبدال السوائل في هذه المخطوطة يمثل أسلوب جيد التحمل استقرار الهليوكبتر الحيوانات ويعتمد على انتعاش سريع من التخدير.

لتجنب الأخطاء عند إجراء القياسات أوديوميتريكال، يوصي بالاتصال pin نفس الرابط قطب محددة أثناء كل عملية جراحية.

واحد الحد من هذا الأسلوب هو تباين مرتفعة نسبيا في نوبات عتبة السمع بعد العملية الجراحية، التي غالباً ما ترتبط كذلك بتصور الجراح. على الرغم من هذا التفاوت في النتائج يشبه الوضع في البشرية CI المتلقين مع السمع المتبقية، لا تماما ومن المعلوم ما أسباب نتائج متغير. 16 , 17 , 18 عموما، التباين تتناقص مع الوقت والخبرة المكتسبة من الجراح. من المهم تجنب إفراط القوات عند إدراج الكهربائي، الذي يمكن أن يتحقق بسرعة بطيئة إدراج. لأنه يمكن أن يؤدي الإدراج حذراً القطب CI فقط يصف فقدان السمع محدودة جداً، على البروتوكول المقدم من إدراج متكررة القطب، الذي يؤدي أعلى وأكثر قابلية للتنبؤ من فقدان السمع. هذا فقدان السمع بصورة أكثر وضوحاً في منطقة عالية التردد، بين 16 و 32 كيلو هرتز. الصدمة إينتراكوتشلير يعتمد على عمق الإدراج، مورفولوجية القوقعة والنهج (كوتشليوستومي مقابل الإدراج في إطار جولة) بحاجة إلى أن تؤخذ في الاعتبار. وقد استخدمت أيضا الإدراج القطب CI عبر غشاء النافذة جولة، عادة ما تؤدي في زرع cochlear الحفاظ على السمع البشري، في نموذج خنزير غينيا. 19 لأن الغشاء نافذة جولة مخفياً في خنزير غينيا والإدراج القطب من خلال نتائج غشاء النافذة جولة في زاوية إدراج غير مواتية، الحفر كوتشليوستومي يؤدي إلى تحولات عتبة السمع أكثر قابلية للتنبؤ. ويقترح هذا البروتوكول استخدام مشرط بدلاً من حفر لفتح الفقاعة tympanic، نظراً لأن هذه النتائج في تعرض تخفيض ضوضاء في الإذن يكون مزروع. تقييم النسيجي الأذنين الداخلية معالجة رد فعل جسم غريب على مسرى، كمية خلايا الشعر وخلايا العقدة دوامة، فضلا عن الصدمات النفسية لهياكل مثل الصفيحة دوامة العظمى، وينبغي أن يقوم القطب إزفاء معدلات في كل مزروع الأذنين، كما أن هذه النتائج تسهيل فهم أفضل للنتائج الفنية التي تقاس. 12 , 20

Disclosures

كريستوف أرنولدنير وهونيدير كليمنس، المكلفين بمنحه بحثية من "النمسا" ميد-ش. وقدمت "النمسا" ميد-ش الأقطاب الكهربائية المستخدمة في هذا المنشور. الكتاب الباقية ليس لها علاقة بالكشف عن.

Acknowledgments

الكتاب أريد أن أشكر بيرتش ساندرا العناية بالحيوانات وبييت نويلاني الكتابة الطبية. هو العرفان بدعم مالي من صندوق العلوم النمساوية (FWF منحة ف 24260-B19) والنمسا ميد-ش.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Scale
Oxygen insufflator
Shaver
Sucker
Povidone Iodine Solution
Alcohol
Laryngoscope
Stomach tube  Fr 06, Lg 80 cm
Surgical binocular microscope
Drill
0.5 mm diamond burr
1 mm diamond burr
Heating plate
Pulse oximeter
Tissue glue
Dental cement powder
Fluid for dental cement powder
Bipolar cautery
Gauze compress
Cotton bud
Cement mixing bowl
Teflon insulated gold wire 99.99 % gold, diameter: 0.125 mm, isolation: 0,016 mm, PTFE (Polytetrafluoroethylen) 
Scalpel with blade No. 10
Scalpel with blade No. 15
Scissors
Mosquito forceps
Dressing forceps
Tissue forceps
Delicate dressing forceps 2X
Micro forceps
Screw driver
Stainless steel screws diameter: 1 mm
Retractor
Needle probe
Spatula
Needle holder
5-0 absorbable sutures 
Needle 23G
Needle 27G
Medetomidine 1 mg/mL 0.36 mg/kg
Midazolam g mg/mL 1.2 mg/kg
Fentanyl 50 µg/mL 0.036 mg/kg
Ketamine 100 mg/mL 12 mg/kg
Lidocaine (local anesthesia) 4 mg/kg
Atipamezole 5 mg/mL 1 mg/kg
Flumazenil 0.1 mg/mL 0.1 mg/kg
Enrofloxacin 100 mg/mL 7 mg/kg
Buprenorphin  0.3 mg/mL 0.05 mg/kg 
Physiological Saline (at body temperature) 12.5 mL/Kg (pre-surgery)
Glucose 5 % (preoperative, at body temperature) 12.5 mL/Kg
Physiological Saline (at body temperature) 25 mL/kg (post-surgery)

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Stevens, G., et al. Global and regional hearing impairment prevalence: an analysis of 42 studies in 29 countries. Eur J Public Health. 23 (1), 146-152 (2013).
  2. Ciorba, A., Bianchini, C., Pelucchi, S., Pastore, A. The impact of hearing loss on the quality of life of elderly adults. Clin Interv Aging. 7, 159-163 (2012).
  3. Arnoldner, C., et al. Electric acoustic stimulation in patients with postlingual severe high-frequency hearing loss: clinical experience. Adv Otorhinolaryngol. 67, 116-124 (2010).
  4. Kral, A., O'Donoghue, G. M. Profound deafness in childhood. N Engl J Med. 363 (15), 1438-1450 (2010).
  5. DeMason, C., et al. Electrophysiological properties of cochlear implantation in the gerbil using a flexible array. Ear Hear. 33 (4), 534-542 (2012).
  6. Eshraghi, A. A., et al. Pattern of hearing loss in a rat model of cochlear implantation trauma. Otol Neurotol. 26 (3), discussion 447 442-447 (2005).
  7. Mistry, N., Nolan, L. S., Saeed, S. R., Forge, A., Taylor, R. R. Cochlear implantation in the mouse via the round window: effects of array insertion. Hear Res. 312, 81-90 (2014).
  8. Wysocki, J. Topographical anatomy of the guinea pig temporal bone. Hear Res. 199 (1-2), 103-110 (2005).
  9. Heffner, H. E., Heffner, R. S. Hearing ranges of laboratory animals. J Am Assoc Lab Anim Sci. 46 (1), 20-22 (2007).
  10. Van Beek-King, J. M., Bhatti, P. T., Blake, D., Crawford, J., McKinnon, B. J. Silicone-coated thin film array cochlear implantation in a feline model. Otol Neurotol. 35 (1), 45-49 (2014).
  11. Marx, M., et al. Cochlear implantation feasibility in rhesus macaque monkey: anatomic and radiologic results. Otol Neurotol. 34 (7), 76-81 (2013).
  12. Honeder, C., et al. Effects of sustained release dexamethasone hydrogels in hearing preservation cochlear implantation. Hear Res. , (2016).
  13. Ris, L., Capron, B., de Waele, C., Vidal, P. P., Godaux, E. Dissociations between behavioural recovery and restoration of vestibular activity in the unilabyrinthectomized guinea-pig. J Physiol. 500, (Pt 2) 509-522 (1997).
  14. Jin, Z., Mannstrom, P., Skjonsberg, A., Jarlebark, L., Ulfendahl, M. Auditory function and cochlear morphology in the German waltzing guinea pig. Hear Res. 219 (1-2), 74-84 (2006).
  15. Honeder, C., et al. Effects of intraoperatively applied glucocorticoid hydrogels on residual hearing and foreign body reaction in a guinea pig model of cochlear implantation. Acta Otolaryngol. 135 (4), 313-319 (2015).
  16. Moteki, H., et al. Long-term results of hearing preservation cochlear implant surgery in patients with residual low frequency hearing. Acta Otolaryngol. 137 (5), 516-521 (2017).
  17. Eshraghi, A. A., et al. Clinical, surgical, and electrical factors impacting residual hearing in cochlear implant surgery. Acta Otolaryngol. 137 (4), 384-388 (2017).
  18. Reiss, L. A., et al. Morphological correlates of hearing loss after cochlear implantation and electro-acoustic stimulation in a hearing-impaired Guinea pig model. Hear Res. 327, 163-174 (2015).
  19. Chang, M. Y., et al. The Effect of Systemic Steroid on Hearing Preservation After Cochlear Implantation via Round Window Approach: A Guinea Pig Model. Otol Neurotol. 38 (7), 962-969 (2017).
  20. Eshraghi, A. A., Yang, N. W., Balkany, T. J. Comparative study of cochlear damage with three perimodiolar electrode designs. Laryngoscope. 113 (3), 415-419 (2003).

Tags

الطب، العدد 136، خنزير غينيا، وزرع Cochlear، نموذج الحيوان، الاستماع إلى الحفاظ على السمع فقدان، الكهربية،
زرع cochlear في خنزير غينيا
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Honeder, C., Ahmadi, N., Kramer, A.More

Honeder, C., Ahmadi, N., Kramer, A. M., Zhu, C., Saidov, N., Arnoldner, C. Cochlear Implantation in the Guinea Pig. J. Vis. Exp. (136), e56829, doi:10.3791/56829 (2018).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter