Summary
Her presenterer vi en protokoll for å produsere tachycardia-indusert kardiomyopati i svin. Denne modellen representerer en potent måte å studere hemodynamics i progressiv kronisk hjertesvikt og effekten av anvendt behandling.
Abstract
En stabil og pålitelig modell av kronisk hjertesvikt er nødvendig for mange eksperimenter å forstå hemodynamics eller for å teste effekten av nye behandlingsmetoder. Her presenterer vi slik modell av tachycardia-indusert kardiomyopati, som kan være produsert av rask cardiac pacing i svin.
En enkelt pacing bly er introdusert transvenously i fullt anaesthetized sunn svin, til toppen av høyre hjertekammer, og fikserte. Den andre enden er deretter tunnelerte ryggen til regionen paravertebral. Der er det koblet til en internt endret hjertet pacemaker enhet som er så implantert i en subcutaneous lomme.
Etter 4-8 uker med raske ventrikkel pacing på priser på 200-240 slag i minuttet, fysisk undersøkelse viste tegn på alvorlig hjertesvikt - tachypnea, spontan sinus takykardi og tretthet. Echocardiography og X-ray viste utvidelse av alle kamre av hjertet, effusions og alvorlig systolisk dysfunksjon. Disse funnene svarer godt til dekompensert Dilaterte kardiomyopati, og beholdes også etter opphør av pacing.
Denne modellen av tachycardia-indusert kardiomyopati kan brukes for å studere i Patofysiologien ved progressiv kronisk hjertesvikt, spesielt hemodynamic endringer forårsaket av nye behandlingsmetoder som mekanisk sirkulasjons støtter. Denne metoden er enkel å utføre resultatene er robust og reproduserbar.
Introduction
En rekke nye behandlingsmetoder for hjertesvikt (HF), særlig den voksende verdensomfattende bruken av mekanisk sirkulasjons støtter og ekstrakorporal membran oksygenering (ECMO) i klinisk praksis, er reflektere i preklinisk eksperimentelle testing. Hovedfokuset er på hemodynamic endringer forårsaket av de undersøkt behandlingsmetoder, nemlig på systemisk blodtrykk1, myocardial contractility, trykk og volum i kamre av hjertet og hjerte arbeid2,3, arterial blod flyte i systemisk og eksterne arteriene, sammen med metabolske kompensasjon4 - regionale vev metning, lunge perfusjon og blod gass analyse. Andre studier er rettet på langtidseffekter av sirkulasjons støtte5, samtidig betennelse eller forekomst av hemolyse. Alle disse typene studie trenger en stabil biomodel av kongestiv HF.
De fleste av de publiserte eksperimentene på venstre ventrikkel (LV) ytelse og hemodynamics i mekanisk sirkulasjons støtte gjennomført på eksperimentelle modeller av akutt HF2,6,7,8 , 9 , 10, eller helt intakt hjerter. På den annen side, i klinisk praksis, blir mekanisk sirkulasjons støtter ofte brukt i statusen sirkulasjons decompensation som utvikler på tidligere stede kronisk hjertesykdom. I slike situasjoner tilpasning mekanismene er fullt utviklet og kan spille viktige roller i inkonsekvens av resultater observert etter "acuteness eller kronisitet" underliggende hjertesykdom11. Derfor kan en stabil modell av kronisk HF gir ny innsikt i patofysiologiske mekanismer og hemodynamics. Selv om det er grunner til at bruk av kronisk HF-modeller er knappe - tidkrevende forberedelse, ustabilitet hjerterytmen, etiske spørsmål og dødelighet - sine fordeler er klare, siden de tilbyr tilstedeværelsen av langsiktig neurohumoral aktivisering, de generelle systemisk tilpasning, funksjonelle endringer av cardiomyocytes, og strukturelle endringer av hjertet muskel og ventiler12,13.
Generelt, tilgjengelighet og rekke dyremodeller brukes for hemodynamic studier er bredt og tilbyr valg for mange behov. For disse eksperimentene, hovedsakelig svin, hjørnetann, ovine, eller med mindre innstillinger murint blir modeller, valgt og tilbyr en god simulering av forventet menneskelige kroppslige reaksjoner14. Videre blir skjemaer enkelt organ eksperimenter stadig hyppigere15. Å pålitelig etterligne i Patofysiologien ved HF, er sirkulasjon å være kunstig forverret. Skade hjertet kan skyldes ulike metoder, ofte av enten iskemi, arytmi, press overbelastning eller cardiotoxic effekter av narkotika, med noen av disse fører til hemodynamic forringelse av modellen. For å produsere en sann modell av kronisk HF, må tid gis for å utvikle langsiktige tilpasningen av hele organismen. Slik pålitelig og stabil modell er representert godt av tachycardia-indusert kardiomyopati (TIC), som kan være produsert av rask cardiac pacing i forsøksdyr.
Det har vist at i disponert hjerter, langvarig uopphørlig tachyarrhythmias kan føre til systolisk dysfunksjon og dilatasjon med redusert cardiac utgang. Betingelsen referert til som TIC ble først beskrevet i 191316, mye brukt i eksperimenter siden 196217, og er nå en anerkjente lidelse. Sin opprinnelse kan ligge i ulike typer arytmi - både supraventrikulær og ventrikkel takykardi kan føre til progressiv forverring av systolisk funksjon, biventricular dilatasjon og progressiv klinisk underskriver av HF inkludert ascites, edemas, apati , og til slutt cardiac decompensation fører til terminal HF og hvis ikke behandles, død.
Liknende effekter av sirkulasjons undertrykkelse ble observert av innføring av høy hjerte pacing i dyremodeller. I en porcine modell, en atrial eller ventrikkel hjertefrekvens over 200 slag per minutt er potente nok å indusere sluttstadiet HF i en periode på 3-5 uker (progressiv fase) med karakteristikker av TIC, men interindividuelle forskjeller finnes18, 19. disse funnene svarer godt til dekompensert kardiomyopati og som viktigere, beholdes også etter opphør av pacing (kronisk fase)19,20,21,22, 23.
Svin, hjørnetann eller ovine TIC modeller ble gjentatte ganger forberedt å studere i Patofysiologien ved HF14, som endringer i LV etterligner egenskapene til Dilaterte kardiomyopati24. De hemodynamic er godt beskrevet - økt ventrikkel ende-diastolisk trykk, redusert cardiac utgang, økt systemisk vaskulær motstand, og utvidelse av både ventriklene. Derimot veggen hypertrofi er ikke observert konsekvent, og selv veggen tynning ble beskrevet av noen forskere25,26. Med utviklingen av ventrikkel dimensjoner utvikler gulpe opp på atrioventrikulær ventiler26.
I denne publikasjonen presenterer vi en protokoll for å produsere en TIC av langsiktig rask cardiac pacing i svin. Denne biomodel representerer potent middel for å studere dekompensert Dilaterte kardiomyopati, hemodynamics i progressiv kronisk HF med lav cardiac utgang, og effekten av anvendt behandling.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Denne eksperimentelle protokollen ble gjennomgått og godkjent av institusjonelle dyr ekspert komiteen i første fakultet, Charles University, og ble utført ved University eksperimentelle laboratory, Institutt for fysiologi, første fakultet Medisin, Charles University i Praha, Tsjekkia, i samsvar med lov nei 246/1992 Coll, om beskyttelse av dyr mot grusomhet. Alle dyrene ble behandlet og tatt vare på i henhold til guiden for omsorg og bruk av forsøksdyr, 8nde edition, utgitt av National Academies Press, 2011. Alle prosedyrer ble utført i henhold til standard veterinær konvensjoner og ved avslutningen av hver studie, dyret ble ofret og en obduksjon utført. På grunn av egnet anatomi, fem sunn crossbred kvinnelige svin (Sus scrofa domestica) opptil 6 måneders alder ble inkludert i dette eksperimentet. Gjennomsnittlig vekten var 66 ± 20 kg på dagen for datainnsamling.
1. general Anesthesia
- Etter 1 dag faste starte anestesi av intramuscular administrasjonen av midazolam (0,3 mg/kg) og ketamin hydrochloride (15-20 mg/kg) til gluteal regionen.
- Eksterne kanyle inn marginale øret venen for intravenøs narkotika-programmer.
- Administrere intravenøs boluser propofol (2 mg/kg) og morfin (0.1 - 0,2 mg/kg).
- Gi dyr oksygen via en ansiktsmaske og forhånd orotracheal intubasjon med en cuffed endotracheal tube med en diameter på 6.5-7.5 mm.
- Fortsette totale intravenøs anestesi ved kombinasjon av propofol (6-12 mg/kg/t), midazolam (0,1 - 0,2 mg/kg/t), og morfin (0,1 - 0,2 mg/kg/t), justere doser etter individuelle svar - undertrykke spontan åndedrag, hornhinnen reflekser, og motoric svar. Beskytte dyrets øyne med sårsalve å hindre tørrhet.
- Betjene den mekanisk ventilasjonen med en lukket automatisk enhet settes til adaptive støtte ventilasjon for å opprettholde målet slutten-tidevanns CO2 av 38-42 mmHg og tilstrekkelig hemoglobin metning av 95-99%. Overvåke alle vitale funksjoner, spesielt hjertefrekvens og kroppstemperatur.
- Fest dyr ved å sikre sine ben forsiktig å operasjonsbordet i supine posisjon.
- Administrere bredt spekter antibiotika - 1 g cefazolin intravenøst gjennom øret blodåre kanyle.
2. ventrikkel føre implantasjon
- Finn kirurgiske områder og barbere huden riktig med en barberhøvel på (1) jugulare regionen over sternocleidomastoid-muskelen og (2) ensidig paravertebral regionen på baksiden av dyr.
- Ved hjelp av ultralyd vaskulær sonden, visualisere eksterne vena jugularis og merke plasseringen på huden. Finn arteria carotis for å hindre sin skade.
- Etter den bredt huden desinfeksjon bruke povidon jod, dekk med et sterilt kirurgisk drapere med hullet over merket jugulare regionen.
- Forberede alle nødvendige verktøy for pacemakeren implantasjon og holde dem sterile. Det er viktig å opprettholde et sterilt miljø i hele denne prosedyren.
- Kutt huden parallelt over eksterne vena jugularis, danner en grunne subkutan lomme i bløtvev ikke mer enn 10 mm dyp. Utsett ikke alle store fartøy.
- Fra bunnen av preformed lommen, setter du inn en skjede i eksterne vena jugularis, ved hjelp av standard Seldinger-teknikken. Først setter inn en myk-spissen guidewire gjennom en 12G punktering nål, og deretter over guidewire innføre en 7-fransk plast rive bort introducer skjede med en dilator.
- Under fluoroscopic ledelse, innføre en 58 cm pacing ledelsen ved denne skjede og plassere sine tips til toppen av høyre hjertekammer. Deretter fjerne skjede og fixate aktive tuppen av elektroden til myokard Drei ut sin helix.
- Teste pacing parameterne - kjente avledningene fra ventrikkel elektrokardiogram og impedans må være stabil, pacing terskelen bør være under en amplituden til 1 V med 0,4 ms puls varighet.
- Ta en gummi ermet på pacing blyet og fastsette både sammen til bunnen av preformed jugulare subkutan lommen av to ikke-absorberbare Sutur flettet tråden masker. Viktigere, må nok lengden på pacing ledelsen settes, vurderer fremtidige mulig veksten av dyret.
3. subkutan føre tunnelering
- Snu dyret på siden desinfisere tidligere barbert huden regionen sideveis til ryggraden, og dekk med et sterilt kirurgisk drapere med et hull. Kontroller at jugulare subkutan lommen og ledelsen forblir sterilt.
- Kuttet hud sideveis til ryggraden og danne en dyp, romslige og underhud lomme. Bruk kjedelig forberedelse og stopp mulig blødninger.
- Ta en myk gummi forlengelsesrør fra en steril infusjon satt og kuttet av begge endene. Bruk en tunnelering verktøyet preform en direkte subkutan tunnel forbinder jugulare og dorsal subkutan lommer med denne forlengelsesrør.
- Koble tuben gratis enden til ventrikkel ledelsen ved å dra det til er-1 kontakten og trekke ledelsen ved preformed tunnelen i dorsal subkutan lommen ved å trekke røret på ryggen. Det kan være nyttig å sikre tilkoblingen med silke slips.
- Fjerne både tunnelering verktøyet og forlengelsesrør, utsette ventrikkel ledelsen fra dorsal subkutan lommen.
4. pacemaker implantasjon
- Definere implanterbare dual-kammer hjertet pacemaker enheten med "Y" koble del. Den "Y" kan du koblingen deg konvergent på begge pacemaker utganger koblet og koblet sammen til én pacing føre (figur 1 og figur 2). Denne innstillingen vil senere gi en rekke pacing frekvenser.
- Etter tilkobling pacing ledelsen, fest alle er-1 tilkobling skruer pacemaker hodet enheten og "Y" bly tilkoblingen.
- Skjule hele pacing systemet i dypt rygg lomme. Det må være nok plass til komfortabelt pacemaker enheten og alle overflødige bly.
- Sjekk de siste pacing parameterne. Kontroller at cardiac ventrikkel pacing er mulig fra begge pacemaker utganger.
- Skyll med povidon jod og Lukk begge subkutan lommer. Bruk absorberbare flettet tråden for å Sutur fibrøst vev lag og ikke-absorberbare Sutur for hud tilpasning.
5. postoperativ pleie
- Observere dyret nøye før det gjenvinner tilstrekkelig bevissthet.
- Strikk en bredt spekter intravenøs antibiotikumet område til sårene blir helbredet - cefazolin 1 g hver 12 h. administrere analgetika i riktig dosering, f.eks morfin 0,2 mg/kg hver 6-12 h for 3 dager ved subkutan injeksjon. Om nødvendig gjør dose justeringer tilstrekkelig hindre smerte.
- Sett dyr i et behagelig, rolig anlegg ved romtemperatur. Gir gratis tilgang til vann og passende alimentation.
- Kle sår med sterilt scrubs regelmessig for å beholde ren helbredelse.
- For å gi resten etter kirurgiske prosedyren, holde pacemakeren hemmet av innfødte hjerterytmen for minst 3 dager.
- Fjerne ikke-absorberbare huden bildet når fullstendig helbredet, ca 10-14 dager etter inngrepet.
6. pacing protokollen
- Start pacing protokollen etter en tilstrekkelig hvile periode. Først øke tempoet ventrikkel hjertet sats til 200 slag i minuttet ved å angi dual-kammer pacemakeren modus D00, 100 slag i minuttet, og samtidig justere AV forsinkelsen til 300 ms (å akkurat kamp tempoet å tempo intervall, se tabell 1). Velg Unipolare pacing i begge utganger.
- Øke trinnvis tempo pulsen til 220 slag i minuttet etter 1 uke og 240 slag i minuttet etter 2 uker (Figur 3). Holde kontinuerlig pacing på denne frekvensen med mindre det ikke tolereres hemodynamisk. Hvis HF går for fort, redusere tempo hjertefrekvensen før du øker det igjen etter en uke.
- Bruk auskultasjon av hjerteslag, ECG og pacemaker avhør daglig hjertefrekvens og konstant pacing parametere, inkludert batterilevetid.
7. hjertesvikt induksjon og overvåking
- Sikre Stamgjest bekymre av en spesialisert veterinær og overvåke dyr generelle helsetilstand. Kliniske observasjoner av økende eget hjerte og respiratoriske priser, evaluering av eksterne puls oximetry, og reduksjon i spontan fysisk aktivitet eller appetitt gir informasjon om HF progresjon.
- Bruke fordelen av trådløse transkutan pacemaker avhør og, hvis mulig, kontinuerlig EKG-opptak - hyppige ikke-vedvarende ventrikulær tachycardias (VT) er et tegn på alvorlige HF progresjon.
- Bruke echocardiographic vurderinger for å avdekke endres strukturelle og funksjonelle hjertet. Ta hensyn til å finne en optimal bildevinduet svin anatomi og hjertet dilatasjon - typisk 4 kammer vise, plasser svingeren til høyre like nedenfor xiphoid og vinkel det å peke på halsen eller venstre skulder. For kort-aksen visninger, kan du bruke interkostalrom windows. Reduksjon av ventrikkel utstøting fraksjon i native hjerterytmen og atrioventrikulær regurgitations bør være merkbar etter noen uker.
Merk: Betydelige interindividuelle høy ventrikkel pacing toleranse forskjeller. Derfor er hyppige overvåking og individuelt tilpasset justering av pacing protokollen nødvendig.
Figur 1: hjerte pacing enhet skjematisk. Dual-kammer pacemakeren (1), en "Y" formet adapter (2) gjennomfører convergently begge pacemaker utganger sammen til en enkelt pacing føre (3). Spissen av ledelsen er fiksert i den apikale delen av RV hulrommet (4). Denne innstillingen gir en rekke høy pacing frekvenser. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Figur 2 : Hjerte pacing enhet X-ray (A) og (B) fotografi av dual-kammer pacemakeren (1), en "Y" formet kort (2), og ventrikkel pacing føre (3). Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
| Ønsket HR | Angi pacemaker rate | Tempoet til tempo intervall |
| slag i minuttet | slag i minuttet | MS |
| 200 | 100 | 300 |
| 220 | 110 | 270 |
| 240 | 120 | 250 |
| 250 | 125 | 240 |
Tabell 1: Pacemaker parametere. For at høy hjerte pacing med implantert i in-House-endret dual-kammer pacemaker enheten, viser tabellen ønsket tempo hjertefrekvens (HR) og matchende tempo til tempo intervall verdier. Pacemakeren må settes til D00 Operasjonsmodus frekvensen av halvparten av ønsket HR og AV forsinkelsen satt til tilsvarende tempoet til tempo intervall i millisekunder.
Figur 3 : Pacing protokollen. Den progressive fasen av TIC induksjon starter etter en hvile periode på 3 dager. Deretter pacemakeren er satt til D00 modus med pacing frekvens på 50% av ønsket tempo, og AV forsinkelsen er satt til samsvarende tempoet til tempo intervall (se tabell 1). Takk til "Y" formet kortet, er begge pacemaker utganger utført til en enkelt pacing ledelsen. BPM = slag per minutt. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Teste en modell: Etter tegn på dekompensert kronisk HF ble fremtredende, anestesi og kunstig ventilasjon var administrert igjen etter prinsippene beskrevet ovenfor, men dosering ble justert på grunn av lav cardiac utgang27. På grunn av mulig cardiodepressive effekter av anestesi er forsiktig intensiv overvåking av vitale funksjoner nødvendig.
Dyret var festet i supine posisjon og alle invasjonen tilnærminger påbegynt. Femoral vene og arterien og vena jugularis ble punktert og intravascular tilnærminger sikret av standard PCI intraluminal hylser. Høyre carotis og arteria arterier var kirurgisk utsatt og circumjacent ultralyd flyt sonder av passende størrelse var festet, slik at obtainment kontinuerlig blodet flyt mål28.
Sentralt venetrykk (CVP) ble målt via vena jugularis bruker en standard invasiv metode med en væskefylte trykktransduceren, men en høy følsomhet press sensor utstyrt kateter i thoracic aorta ble brukt for systemisk arteriell trykk målinger. Regionale vev oksygenering ble overvåket av nær infrarød spektroskopi med sensorer plassert på hodet og høyre underarm representerer hjernen og perifere vev oksygen metning nivåer (rSO2)29. En transthoracic echocardiographic sonde ble brukt for 2D og farge Doppler bildebehandling. Data fra ECG, puls, puls oximetry, blod trykk, capnometry og endetarms temperatur var sentralisert på en bed-side skjerm for umiddelbar kontroll. En ballong Swan-Ganz kateter ble introdusert gjennom en femur blodåre skjede lungearterien tillater av thermodilution avledet kontinuerlig cardiac output (CO)30 og blandet venøs hemoglobin metning (SvO2). Gjennom aortic ventilen, ble en presset bind (PV) kateter introdusert retrogradely LV hulrommet. Denne PV konduktans kateter aktivert registrering av instant volum og trykket i LV kammer31,32,33,34og stabil posisjonen ble ledet av fluoroscopy og echocardiography å få optimal PV loop morfologi (Figur 4 og figur 5). Målt LV parametere inkludert ende-diastolisk blodtrykk og volum (EDP og EDV), end-systolisk volum (ESV), LV topp trykket (LV PP) og maksimal positiv endring LV press, definert som den første gang deriverte LV press normalisert til EDV (dP/dtmax / EDV), som representerer en preload uavhengig indeks på LV contractility35,36. Ytterligere beregnet parametere ble Slagvolum (SV = EDV - ESV), venstre ventrikkel utstøting brøkdel (EF = SV / EDV), og i gjennomsnitt arteriell flyt i carotis og arteria arterier. Fluoroscopic veiledning og X-ray imaging ble utført av en C-arm i protokollen. Etter konklusjonen av eksperimentelle målinger, dødshjelp av intravenøs kalium overdose og obduksjon ble utført. Hjertet ble utsatt, kutte ut fra brystet, tømt for blod, veid og undersøkt for strukturelle unormalt.
Alle data ble kjøpt i native sinus rytme etter den raske ventrikkel pacing hadde blitt stoppet brått og tid hadde fått for stabilisering steady state forhold. Parametere ble så registrert, og datasett gjennomsnitt av tre slutten-ekspiratorisk tid poeng. Hvis tidlig beats ble utelatt fra analysene. Alle verdiene uttrykkes som gjennomsnittlig ± standardavvik.
Målte resultater: Fysisk undersøkelse viste alvorlig klinisk underskriver av kronisk HF i alle dyr etter 4-8 uker med pacing protokollen. Detaljerte resultatene oppsummeres i tabell 2.
Første Gjennomsnittlig hjertefrekvens sinus rytme var 100 ± 38 slag/minutt, mener aorta blodtrykket nådd 47 ± 38 mmHg og CVP 14 ± 4 mmHg. Bryst røntgenbilder viste hjertet skygge dilatasjon, med en studerte forholdet mellom 0,64 ± 0,04 (figur 5A). Dette er i overensstemmelse med transthoracic echocardiography funn. Utvidelse av alle kamre av hjertet, alvorlig systolisk dysfunksjon av både ventriklene, og betydelig mitral og trikuspidalklaff regurgitations var tydelig på echocardiography. Mener utstøting brøkdel av venstre ventrikkel var under 30% i alle dyr, LV veggen ble dømt ikke-hypertrofisk med en tykkelse på 7-10 mm dyssynchrony LV kontraksjon var tydelig (figur 6).
Thermodilution målt cardiac output hvile tilstand var 2.9 ± 0,8 L/min og blandet venøst blod metning 62 ± 18% korresponderte med utilstrekkelig vev oksygen levering i denne modellen. Gjennomsnittlig arteriell blod flyte i arteria carotis ble 211 ± 144 mL/min og arteria subclavia var 103 ± 108 mL/min. Tilsvarende regionale vev metning registrert transcutaneously på hodet var bare 57 ± 13%, og det var enda lavere på den høyre underarmen, 37 ± 13%.
Trykk volum løkken fra PV kateter viser den detaljerte hemodynamic tiltak og arbeider av den mekaniske aktiviteten til venstre ventrikkel under hvert hjerte syklus (Figur 4). Maksimal LV topp trykket ble redusert til 49 ± 32 mmHg, men EDP forble lav på 7 ± 4 mmHg. De målte volumene av venstre ventrikkel chamber var reflekterende dilatasjon og systolisk dysfunksjon. EDV ble økt til 189 ± 59 mL og ESV til 139 ± 37 mL. Gjennomsnitt SV var 51 ± 45 mL og mener LV utstøting brøken beregnet til 25 ± 16%. I tillegg en preload uavhengig indeks på LV contractility kan bli representert av en dP/dtMaks / EDV forhold, som var i gjennomsnitt til 2,2 ± 1.7 mmHg/s/mL.
En obduksjon bekreftet cardiomegaly (figur 7) med en gjennomsnittlig hjertet vekt 471 + 127 g, som dannet 0,7% av kroppsvekt. Utvidelse av alle kamre av hjertet og LV veggen tynning ble nevnt, og flytende samlinger ble beskrevet i perikard og peritoneal. Ingen shunt eller andre cardiac avvik funnet i noen av dyrene.
Figur 4: Trykk volum målinger. Eksempler på direkte venstre ventrikkel PV looper (A-D) og skjematisk gjennomsnitt PV løkke av alle TIC fag (E). LV PP = LV topp trykket, EDP = ende-diastolisk blodtrykk, EDV = ende-diastolisk volum og SV = Slagvolum. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Figur 5 : Bryst røntgenbilder. Forstørret hjerte skygge (rød pil) og økt studerte forholdet (A). Merk pacing ledelsen introdusert til toppen av høyre ventrikkel (1), svane-Ganz kateter plasseres i lungearterien (2), og PV kateter med 5 elektroder i venstre ventrikkel kammer (3). For sammenligning, en brystet X-ray normale hjertet fra dagen av pacemakeren implantasjon (B). Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Figur 6 : Transthoracic echocardiography. Representant tachycardia-indusert kardiomyopati med alvorlig utvidelse av alle kamre av hjertet (A) og en tilsvarende visning innhentet før pacemakeren var implantert (B) for sammenligning. Begge oppkjøp ble tatt på slutten-diastolen. Legg merke til synlige spissen av pacing ledelsen i RV apex i (A). RV = høyre ventrikkel og LV = venstre ventrikkel. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Figur 7 : Fotografier av eksponert hjertet. Cardiomegaly (A) etter TIC induksjon. Normalt svin hjertet utvalg for størrelse sammenligning (B) (skala i cm). Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
| Parameteren | TIC verdi | Enheter | ||
| Bildebehandling | ||||
| CTR | 0.64 | ± | 0,04 | |
| LV EF | < 30 | % | ||
| LV EDD | 66 | ± | 3 | mm |
| RV EDD | 40 | ± | 6 | mm |
| AV regurgitations | alvorlig | |||
| Sirkulasjon parametere | ||||
| HR | 100 | ± | 38 | slag i minuttet |
| KART | 47 | ± | 38 | mmHg |
| CO | 2.9 | ± | 0,8 | L/min |
| SvO2 | 62 | ± | 18 | % |
| rSO2 hode | 57 | ± | 13 | % |
| rSO2 høyre underarm | 37 | ± | 13 | % |
| Carotis flyt | 211 | ± | 144 | mL/min |
| Subclavian strøm | 103 | ± | 108 | mL/min |
| CVP | 14 | ± | 4 | mmHg |
| Trykk volum oppkjøp | ||||
| LV PP | 49 | ± | 32 | mmHg |
| LV EDP | 7 | ± | 4 | mmHg |
| LV EDV | 189 | ± | 59 | mL |
| LV ESV | 139 | ± | 37 | mL |
| SV | 51 | ± | 45 | mL |
| LV EF | 25 | ± | 16 | % |
| dP/dtMaks / EDV forhold | 2.2 | ± | 1.7 | mmHg/s/mL |
| Obduksjon | ||||
| mener hjertet vekt | 471 | ± | 127 | g |
| Cardiomegaly, utvidelse av kamre av hjertet, LV veggen tynning, perikard væske samlinger | ||||
Tabell 2: numeriske resultatene av TIC modellen etter opphør av pacing protokollen. Alle verdier uttrykt som gjennomsnittlig ± standardavvik. CTR = studerte forhold, LV EF = LV utstøting brøk, LV EDD / RV EDD = LV / RV ende-diastolisk diameter, AV regurgitations = atrioventrikulær ventil regurgitations, HR = hjertefrekvens, kart = mener aorta press, CO = cardiac utgang, SvO2 = blandet venøs hemoglobin metning, rSO2 = regionale vev metning, CVP = sentralt venetrykk, LV PP = LV topp trykket, LV EDP / LV EDV = LV ende-diastolisk trykk/volum, LV ESV = LV slutten-systolisk volum og SV = Slagvolum.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Kronisk HF er et stort helseproblem som bidrar sterkt til sykelighet og dødelighet. Patogenesen og progresjon av HF i mennesker er kompleks, så en passende dyremodell er viktig å undersøke de underliggende mekanismene og teste romanen legemiddelselskap som mål å forstyrre innfødt alvorlig sykdomsprogresjon. For å studere sin patogenese, brukes store dyr modeller for eksperimentelle tester.
Generelt, etterligne kirurgisk modeller av kronisk HF tett denne sykdommen. Sammenlignet med modeller av akutt HF, tilbyr kronisk HF modeller mer innsikt inn i patofysiologien, men på bekostning av tidkrevende eksperimentelle forberedelse eller høyere dødelighet. Fra en rekke kjente kronisk HF modeller henviser vi til en hensiktsmessig og lett håndterlig modell, her representert ved dekompensert kronisk HF indusert av tempo tachycardia.
Tachycardia-indusert kardiomyopati som Dilaterte kardiomyopati er induserbart av rask cardiac pacing. Pacing elektroden kan plasseres i ventriklene eller atria19,24. Vi utelatt supraventrikulær pacing området for å hindre problemer som skyldes atrioventrikulær blokk under høy pacing frekvenser. Ventrikkel posisjon også forbedret stabilitet pacing ledelsen fiksert i ventrikkel apex sammenlignet med atrial plasseringen og redusert forekomst av sin forvridning. Presentert metodikken er spesielt utformet for å lette utføringen, bruk av tilgjengelig utstyr og forebygging av komplikasjoner. Et annet mål for denne metoden var enkelt kontrollere kronisk HF progresjon av titrering pacing protokollen.
Bakteriell infeksjon komplikasjoner er et stort problem av implantater i eksperimentell innstillinger. Generator lomme infeksjoner og infeksiøs endokarditt er assosiert med dårlig prognoser og ville gjøre eksperimentet fåfengt. Jugular regionen er utsatt svin anatomi, og hvis en pacemaker generator er plassert her, healing og hindre forurensning ville være en vanskelig oppgave i lang-overlevelse eksperimenter. Bruken av subkutan tunnel gjør plasseringen av pacemakeren generator lommen til dorsal regionen, som er tilgjengelig og kan oppbevares i en hygienisk tilstand. Pacemakeren er heller ikke dyrets tilgjengelig, som vesentlig forbedrer helbredelse. En alternativ tilnærming kan være bruk av en ekstrakorporal pacemaker generator festet til huden overflate, men denne taktikken viste seg å være mekanisk sårbare, hvis langsiktige dyr overlevelse var ment.
Alt nødvendig utstyr for beskrevet protokollen er allment tilgjengelig, og denne metoden er reproduserbare med grunnleggende kirurgiske og catheterization ferdigheter. Formålet med "Y" formet tilkobling enheten er å bruke en vanlig dual-kammer pacemaker, som det konvergerer begge utgangene (atrial og ventrikkel) til tuppen av enkelt pacing ledelsen. Disse innstillingene lar en rekke høyt pacing frekvenser (200-300 slag/minutt, figur 1 og tabell 1).
Det viktigste trinnet er Serine pacing frekvenser. For høy fra begynnelsen ville forårsake akutt decompensation uten tid til tilpasning mekanismer å utvikle; derimot titrating pacing for lav vil bli godt tolerert og vil forlenge HF induksjon.
Ifølge tidligere publikasjoner22,25,37 og forfatternes erfaring, ble pacing protokollen definert og startet med pacing hastighet på 200 slag/minutt, som er utover fysiologiske sunn svin i trening eller stress. Deretter ble frekvensen trappet opp og titreres mellom 200 og 240 slag i minuttet når det gjelder personlige HF progresjon13,19. På grunn av interindividuelle forskjeller svar rask pacing, tiden det tar å produsere kronisk HF dyp tegn til decompensation varierte fra 4 til 8 uker. Et problem her kan bli batterilevetid, slik høyt pacing øker energibehov. Spesielt når pacing terskelen er opphøyet, er vanlig avhør viktig.
Etter pacing protokollen, symptomer på kronisk HF var konsekvent i alle dyr - tachypnea, tretthet, spontane takykardi av > 150 slag i minuttet, og systolisk bilyder. Etter ytterligere klinisk undersøkelse, ascites, perikard og pleural effusions, ikke-vedvarende ventrikulær tachycardias, utvidelse av alle kamre av hjertet, og betydelig mitral og trikuspidalklaff regurgitations var beskrevet. Sviktende hemodynamics ble angitt med arteriell hypotensjon, dårlig myocardial contractility, lav Slagvolum og cardiac output redusert til ca 50% av en sunn dyrets forventet normalverdien38. Denne utviklede modell av takykardi indusert kardiomyopati passer godt til dårlig kompensert Dilaterte kardiomyopati, og var også bevart etter opphør av pacing21,39,40.
Det faktum at systolisk funksjonen fortsetter å være sterkt forverret etter opphør av pacing gjør modellen et utmerket valg for å undersøke HF i native sinus rytme. Det har tidligere vært vist at tachycardia-indusert systolisk dysfunksjon er minst delvis reversibel i såkalte restitusjonsfasen, men tiden som er nødvendig å forbedre eller normalisere varierer betydelig mellom individer. Pacing protokollen varighet og aggressivitet av hastighets-titrering kan være en betydelig bidragsyter også, som permanent iskemiske og fibrotiske endringer produsert i myokard22,39,40,41 . For alvorlig systolisk dysfunksjon i presentert modellen ble testet minst 12 h etter pacing hadde vært opphørt4 og kvaliteter forberedt modellen inkludert neurohumoral dynamics, perifer vaskulær misdannelser og hjerte dysfunksjon var reflekterende menneskelige kronisk HF14.
Presentert resultatene viser sterkt forverret hemodynamics, både klinisk undersøkelse og målte verdier angir induksjon av HF syndrom. Cardiomegaly ble konsekvent observert ved klinisk eksamen, bildebehandling og obduksjon. Hjertefrekvens sinus rytme etter opphør av rask pacing var hevet fra normale hvile frekvensen, men vi antar at påvirkning av cardiodepressive effekter av bedøvelse kan begrense denne spontan tachycardia. Aorta press viser dyp hypotensjon42 og CVP ble opphøyet.
Funksjonell refleksjon er sviktende sirkulasjonen og vev hypoperfusion. Disse er hovedsakelig forårsaket av svekket hjerteinfarkt kontraksjon, som indikert av lav utstøting brøkdel av venstre ventrikkel. Begge ventriklene var dilated uten endelse i veggtykkelse, og dette hjertet remodeling var grunnlag for progressiv atrioventrikulær regurgitations og derfor lav blodsirkulasjon. Som ingen anatomisk shunter fant postmortem cardiac utgang var like lav systemisk og lunge sirkulasjon og så thermodilution avledet cardiac utgang mål i lungearterien ble brukt til PV loop volumet egenskaper.
Brachialis og hjernen regionale vev oksygenmetning samt regionale blodet strømme inn subclavia og arteria carotis foreslår sentralisering av blodsirkulasjonen. Deres lave verdier Vis sterkt redusert vevsperfusjon i perifere så vel som i vitale organer, som ble bekreftet av lav SvO2 sammenlignet med forventet normalverdien på minst 65%42. Generelt lav vevsperfusjon var i samsvar med målene i lav cardiac output.
Hemodynamics og mekanisk arbeid under hvert hjerte syklus av venstre ventrikkel ble godt dokumentert av PV diagrammet fra PV kateter øyeblikkelig målinger. Dårlig hjerteinfarkt styrke var merket med maksimal LV topp trykket under systolen og dP/dtMaks / EDV forhold, en preload uavhengig indeks på LV contractility. LV kammer volumer ble utvidet i løpet av hele syklus, dermed bildet av Dilaterte kardiomyopati. Ende-diastolisk LV presset ble ikke økt så høyt som kan forventes i kardiogent sjokk. LV fylle press fortsatt lav, sannsynligvis på grunn av høy overholdelse av LV tynn hjerteinfarkt vegg43.
I det store flertallet av tidligere TIC studier, har svin og hjørnetann modeller vært brukt19. Imidlertid kan raske pacing brukes å indusere kardiomyopati i andre arter, selv i små dyr. Noen studier har vist metabolske effekten av akutt TIC i rotter44 eller myocardial contractility verdifall etter langsiktige rask pacing i kaniner45.
Selv om denne modellen er tilstrekkelig pålitelig, har flere begrensninger. Ikke-vedvarende ventrikulær tachycardias er et tegn på vellykket HF induksjon, men langvarig VT produserer risikoen for sudden cardiac død. Under anestesi krevde en av dyrene lungeredning og defibrillering. Bred spredning av resultatene var delvis på grunn av forskjeller i dyr kroppsvekt. Nødvendigheten av anestesi har også tas hensyn når de rapporterer resultatene, særlig dens innflytelse på hjertefrekvens og blodtrykk. Blod nivåer av svin-spesifikke indikatorer kan være nyttig for vurdering av graden av cardiac remodeling, men bevis på denne fronten er fremdeles mangler. Som de fleste av disse målemetoder var invasiv og dermed gjentatt, vi ikke gi en opprinnelige eller falsk emnet måling.
En modell av progressiv kronisk hjertesvikt kan produseres av presentert metodikken. Denne teknikken er enkelt å utføre med tilgjengelig utstyr, og resultatene er robust og reproduserbar. Denne tachycardia-indusert kardiomyopati tilbyr en verdifull gjenstand for videre eksperimentelle studier på hemodynamics, undersøkelse av sykdom mekanismer og effekten av anvendt behandlinger.
| positive | negativer |
| kronisk hjertesvikt syndrom med systemisk tilpasning | tidkrevende modell forberedelse |
| enkel kontroll av sykdomsprogresjon | slutte avlytting nødvendig |
| bly tunnelering hindrer infeksiøs komplikasjoner | risikoen for bly forvridning |
| gjort med grunnleggende kirurgiske og cathetrization ferdigheter | risikoen for ondartet arytmi |
| potensielt overføres til forskjellige dyrearter |
Tabell 3: Oversikt oppsummerer den positive og negative av presentert metodikken for tachycardia-indusert kardiomyopati i svin som modell av kronisk hjertesvikt.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Forfatterne ikke avsløre.
Acknowledgments
Dette arbeidet ble støttet av Charles University forskningsmidler GA UK nr. 538216 og GA UK nr. 1114213.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Medication | |||
| midazolam | Roche | Dormicum | anesthetic |
| ketamine hydrochloride | Richter Gedeon | Calypsol | anesthetic |
| propofol | B.Braun | Propofol | anesthetic |
| cefazolin | Medochemie | Azepo | antibiotic |
| Silver Aluminium Aerosol | Henry Schein | 9003273 | tincture |
| povidone iodine | Egis Praha | Betadine | disinfection |
| morphine | Biotika Bohemia | Morphin 1% inj | analgetic |
| Tools | |||
| Metzenbaum scissors, lancet with #22 blade, DeBakey forceps, needle driver | basic surgical equipment | ||
| cauterizer | |||
| 2-0 Vicryl | Ethicon | V323H | absorbable braided suture |
| 2-0 Perma-Hand Silk | Ethicon | A185H | silk tie suture |
| 2-0 Prolene | Ethicon | 8433H | non-absorbable suture |
| Diagnostic devices | |||
| ESP C-arm | GE Healthcare | ESP | X-ray fluoro C-arm |
| Acuson x300 | Siemens Healthcare | ultrasound system | |
| Acuson P5-1 | Siemens Healthcare | echocardiographic probe | |
| Acuson VF10-5 | Siemens Healthcare | sonographic vascular probe | |
| 3PSB, 4PSB and 6PSB | Transonic Systems | perivascular flow probes | |
| TS420 | Transonic Systems | perivascular flow module | |
| TruWave | Edwards Lifesciences | T001660A | fluid-filled pressure transducer |
| 7.0F VSL Pigtail | Transonic Systems | pressure sensor catheter | |
| INVOS 5100C Cerebral/Somatic Oximeter | Somanetics/Medtronic | near infrared spectroscopy | |
| CCO Combo Catheter | Edwards Lifesciences | 744F75 | Swan-Ganz pulmonary artery catheter |
| Vigillace II | Edwards Lifesciences | VIG2E | cardiac output monitor |
| 7.0F VSL Pigtail | Transonic Systems | pressure-volume catheter | |
| ADV500 | Transonic Systems | pressure-volume system | |
| LabChart and PowerLab | ADInstruments | data acquisition and analysis system | |
| Prism 6 | GraphPad | statistical analysis software | |
| Pacing devices | |||
| ICS 3000 | Biotronic | 349528 | pacemaker programmer |
| ERA 3000 | Biotronic | 128828 | external pacemaker |
| Effecta DR | Biotronic | 371199 | dual-chamber pacemaker |
| Tendril STS | St. Jude Medical | 2088TC/58 | ventricular pacing lead |
| Lead permanent adapter | Osypka | Article 53422 | convergent "Y" connecting part |
| Lead permanent adapter | Osypka | Article 53904 | convergent "Y" connecting part |
| Tear-Away Introducer 7F | B.Braun | 5210593 | tear away introducer sheath |
| Split Cath Tunneler | medComp | AST-L | tunneling tool |
| infusion line | MPH Medical Devices | 2200045 | connecting line |
References
- Ostadal, P., et al. Direct comparison of percutaneous circulatory support systems in specific hemodynamic conditions in a porcine model. Circ Arrhythm Electrophysiol. 5 (6), 1202-1206 (2012).
- Ostadal, P., et al. Increasing venoarterial extracorporeal membrane oxygenation flow negatively affects left ventricular performance in a porcine model of cardiogenic shock. J Transl Med. 13, 266 (2015).
- Shen, I., et al. Left ventricular dysfunction during extracorporeal membrane oxygenation in a hypoxemic swine model. Ann Thorac Surg. 71 (3), 868-871 (2001).
- Hala, P., et al. Regional tissue oximetry reflects changes in arterial flow in porcine chronic heart failure treated with venoarterial extracorporeal membrane oxygenation. Physiol Res. 65 (Supplementum 5), S621-S631 (2016).
- Church, J. T., et al. Normothermic Ex-Vivo Heart Perfusion: Effects of Live Animal Blood and Plasma Cross-Circulation. ASAIO J. , (2017).
- Bavaria, J. E., et al. Changes in left ventricular systolic wall stress during biventricular circulatory assistance. Ann Thorac Surg. 45 (5), 526-532 (1988).
- Shen, I., et al. Effect of extracorporeal membrane oxygenation on left ventricular function of swine. Ann Thorac Surg. 71 (3), 862-867 (2001).
- Ostadal, P., et al. Novel porcine model of acute severe cardiogenic shock developed by upper-body hypoxia. Physiol Res. 65 (4), 711-715 (2016).
- Ostadal, P., et al. Noninvasive assessment of hemodynamic variables using near-infrared spectroscopy in patients experiencing cardiogenic shock and individuals undergoing venoarterial extracorporeal membrane oxygenation. J Crit Care. 29 (4), e611-e695 (2014).
- Mlcek, M., et al. Hemodynamic and metabolic parameters during prolonged cardiac arrest and reperfusion by extracorporeal circulation. Physiol Res. 61 (Suppl 2), S57-S65 (2012).
- Tarzia, V., et al. Extracorporeal life support in cardiogenic shock: Impact of acute versus chronic etiology on outcome. J Thorac Cardiovasc Surg. 150 (2), 333-340 (2015).
- Howard, R. J., Stopps, T. P., Moe, G. W., Gotlieb, A., Armstrong, P. W. Recovery from heart failure: structural and functional analysis in a canine model. Can J Physiol Pharmacol. 66 (12), 1505-1512 (1988).
- Moe, G. W., Armstrong, P. Pacing-induced heart failure: a model to study the mechanism of disease progression and novel therapy in heart failure. Cardiovasc Res. 42 (3), 591-599 (1999).
- Power, J. M., Tonkin, A. M. Large animal models of heart failure. Aust N Z J Med. 29 (3), 395-402 (1999).
- Trahanas, J. M., et al. Achieving 12 Hour Normothermic Ex Situ Heart Perfusion: An Experience of 40 Porcine Hearts. ASAIO J. 62 (4), 470-476 (2016).
- Gossage, A. M., Braxton Hicks, J. A.
- Whipple, G. H., Sheffield, L. T., Woodman, E. G., Theophilis, C., Friedman, S. Reversible congestive heart failure due to chronic rapid stimulation of the normal heart. Proceedings of the New England Cardiovascular Society. 20 (1), 39-40 (1962).
- Spinale, F. G., Grine, R. C., Tempel, G. E., Crawford, F. A., Zile, M. R. Alterations in the myocardial capillary vasculature accompany tachycardia-induced cardiomyopathy. Basic Res Cardiol. 87 (1), 65-79 (1992).
- Shinbane, J. S., et al. Tachycardia-induced cardiomyopathy: a review of animal models and clinical studies. J Am Coll Cardiol. 29 (4), 709-715 (1997).
- Moe, G. W., Stopps, T. P., Howard, R. J., Armstrong, P. W. Early recovery from heart failure: insights into the pathogenesis of experimental chronic pacing-induced heart failure. J Lab Clin Med. 112 (4), 426-432 (1988).
- Takagaki, M., et al. Induction and maintenance of an experimental model of severe cardiomyopathy with a novel protocol of rapid ventricular pacing. J Thorac Cardiovasc Surg. 123 (3), 544-549 (2002).
- Tomita, M., Spinale, F. G., Crawford, F. A., Zile, M. R. Changes in left ventricular volume, mass, and function during the development and regression of supraventricular tachycardia-induced cardiomyopathy. Disparity between recovery of systolic versus diastolic function. Circulation. 83 (2), 635-644 (1991).
- Schmitto, J. D., et al. Large animal models of chronic heart failure (CHF). J Surg Res. 166 (1), 131-137 (2011).
- Spinale, F. G., et al. Chronic supraventricular tachycardia causes ventricular dysfunction and subendocardial injury in swine. Am J Physiol. 259 (1 Pt 2), H218-H229 (1990).
- Chow, E., Woodard, J. C., Farrar, D. J. Rapid ventricular pacing in pigs: an experimental model of congestive heart failure. Am J Physiol. 258 (5 Pt 2), H1603-H1605 (1990).
- Howard, R. J., Moe, G. W., Armstrong, P. W. Sequential echocardiographic-Doppler assessment of left ventricular remodelling and mitral regurgitation during evolving experimental heart failure. Cardiovasc Res. 25 (6), 468-474 (1991).
- Roberts, F., Freshwater-Turner, D. Pharmacokinetics and anaesthesia. Contin Educ Anaesth Crit Care Pain. 7 (1), 25-29 (2007).
- Carter, B. S., Farrell, C., Owen, C. Microsurgical clip obliteration of middle cerebral aneurysm using intraoperative flow assessment. J Vis Exp. (31), (2009).
- Wolf, M., Ferrari, M., Quaresima, V. Progress of near-infrared spectroscopy and topography for brain and muscle clinical applications. J Biomed Opt. 12 (6), 062104 (2007).
- Mateu Campos, M. L., et al. Techniques available for hemodynamic monitoring. Advantages and limitations. Med Intensiva. 36 (6), 434-444 (2012).
- Baan, J., et al. Continuous measurement of left ventricular volume in animals and humans by conductance catheter. Circulation. 70 (5), 812-823 (1984).
- Ellenbroek, G. H., et al. Primary Outcome Assessment in a Pig Model of Acute Myocardial Infarction. J Vis Exp. (116), (2016).
- Townsend, D. Measuring Pressure Volume Loops in the Mouse. J Vis Exp. (111), (2016).
- van Hout, G. P., et al. Admittance-based pressure-volume loops versus gold standard cardiac magnetic resonance imaging in a porcine model of myocardial infarction. Physiol Rep. 2 (4), e00287 (2014).
- Kass, D. A., et al. Comparative influence of load versus inotropic states on indexes of ventricular contractility: experimental and theoretical analysis based on pressure-volume relationships. Circulation. 76 (6), 1422-1436 (1987).
- Glower, D. D., et al. Linearity of the Frank-Starling relationship in the intact heart: the concept of preload recruitable stroke work. Circulation. 71 (5), 994-1009 (1985).
- Hendrick, D. A., Smith, A. C., Kratz, J. M., Crawford, F. A., Spinale, F. G. The pig as a model of tachycardia and dilated cardiomyopathy. Lab Anim Sci. 40 (5), 495-501 (1990).
- Wyler, F., et al. The Gottinger minipig as a laboratory animal. 5. Communication: cardiac output, its regional distribution and organ blood flow (author's transl). Res Exp Med (Berl). 175 (1), 31-36 (1979).
- Cruz, F. E., et al. Reversibility of tachycardia-induced cardiomyopathy after cure of incessant supraventricular tachycardia. J Am Coll Cardiol. 16 (3), 739-744 (1990).
- Umana, E., Solares, C. A., Alpert, M. A. Tachycardia-induced cardiomyopathy. Am J Med. 114 (1), 51-55 (2003).
- Dixon, J. A., Spinale, F. G. Large animal models of heart failure: a critical link in the translation of basic science to clinical practice. Circ Heart Fail. 2 (3), 262-271 (2009).
- Xanthos, T., et al. Baseline hemodynamics in anesthetized landrace-large white swine: reference values for research in cardiac arrest and cardiopulmonary resuscitation models. J Am Assoc Lab Anim Sci. 46 (5), 21-25 (2007).
- Little, W. C. Diastolic dysfunction beyond distensibility: adverse effects of ventricular dilatation. Circulation. 112 (19), 2888-2890 (2005).
- Montgomery, C., Hamilton, N., Ianuzzo, C. D. Effects of different rates of cardiac pacing on rat myocardial energy status. Mol Cell Biochem. 102 (2), 95-100 (1991).
- Qin, F., Shite, J., Mao, W., Liang, C. S. Selegiline attenuates cardiac oxidative stress and apoptosis in heart failure: association with improvement of cardiac function. Eur J Pharmacol. 461 (2-3), 149-158 (2003).
