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Behavior

Kitzeln, eine Technik zur Induktion positiven Einfluss beim Umgang mit Ratten

Published: May 8, 2018 doi: 10.3791/57190
Automatic Translation
1,2, 3, 3, 1, 4
1Center for the Study of Animal Well-being, Department of Integrative Physiology and Neuroscience, Washington State University, 2Canadian Council on Animal Care, 3Department of Animal Sciences, Center for Animal Welfare Science, College of Agriculture, Purdue University, 4Department of Animal and Aquacultural Sciences, Faculty of Biosciences, Norwegian University of Life Sciences

Summary

Dieser Artikel beschreibt die standardisierte Anwendung von spielerischen handling, eine kitzelnde Technik entwickelt, um die Ratte rauen Spiel zu imitieren. Dieses Verfahren ist effektiv bei der Reduzierung von ängstlicher Reaktionen auf den Menschen und erzeugen positive beeinflussen, wenn Ratten für gemeinsame Aktivitäten der Tierhaltung und medizinische behandelt werden und Forschung Verfahren wie die Injektion.

Abstract

Umgang mit Kleintieren wie Ratten kann zu verschiedenen Nebenwirkungen führen. Dazu gehören die Angst vor den Menschen, Widerstand, handling, erhöhte Verletzungsgefahr für die Tiere und die Hände von ihren Handlern, verminderte Tierschutz, und weniger gültig Forschungsdaten. Zur Minimierung von negativen Auswirkungen auf experimentelle Ergebnisse und Mensch-Tier-Beziehungen sind forschungstiere oft gewöhnt, behandelt werden. Jedoch sind die Methoden der Gewöhnung sehr variabel und oft von begrenzter Wirksamkeit. Mehr potent ist es möglich, dass Menschen, Aspekte der Tiere spielerisch rauen Verhaltens bei der Handhabung zu imitieren. Bei Anwendung auf Laborratten in systematischer Weise entsteht dieser spielerische Handling, genannt kitzeln, konsequent positive Verhaltensreaktionen. Dieser Artikel enthält eine ausführliche Beschreibung einer standardisierten Ratte kitzeln Technik. Diese Methode kann dazu beitragen, künftige Untersuchungen positive affektive Zustände bei Tieren, machen es einfacher zu handhaben Ratten für gemeinsame Tierhaltung Aktivitäten wie Käfig ändern oder Medizin/Forschung Verfahren wie Injektion, und als eine Quelle der implementiert werden soziale Bereicherung. Es wird festgestellt, dass diese Methode praktisch und effizient reduzieren Ratten Ängstlichkeit der Menschen und ihr Wohlbefinden verbessern sowie zuverlässig modellieren positive affektive Zustände verwendet werden kann.

Introduction

Behandlung von Kleintieren, wie inländische Ratten (Rattus Norvegicus) in Laboratorien und als Haustiere gehalten deutliche Steigerungen Verhaltens- und physiologischen Indikatoren für Stress1sowie aversive Reaktionen andeutend sein kann emotionale Bedrängnis2. Umgang mit Ratten kann Angst basierende Reaktionen gegenüber Menschen3,4, die weitere Handhabung schwieriger machen kann, erhöhen das Risiko von Verletzungen zu Tier- und Handler und begrenzen die Gültigkeit von Versuchsdaten5auslösen.

Zur Vermeidung von negativen Auswirkungen der Behandlung auf experimentelle Ergebnisse und Mensch-Tier-Beziehungen ist es gängige Praxis, um einige Zeit für neu erworbene Jungtiere zu gewöhnen um menschliche Interaktion vor der Zuweisung zum experimentellen Behandlungen zu ermöglichen. In diesem Zeitraum Akklimatisierung können Hausmeister Ratten zu einer Reihe von Veranstaltungen verfügbar machen, die sehr variabel in Form und Dauer sein können. Dazu gehören passive Exposition gegenüber Menschen, berühren, heben, streicheln, halten, reden, und anbietennahrung behandelt. Obwohl Kombinationen dieser Verfahren zur Verringerung der Angst der Menschen6gemeldet wurden, ist unklar, welche spezifischen Praktiken am effektivsten für die Verwendung durch Tierpfleger beschäftigt sind. Es gibt Berichte, dass Ratten negative Antworten oder zumindest keine positive Antwort auf einige dieser Einzeltechniken2,7,8,9haben können.

Im Gegensatz dazu unterstützt reichlich Beweise die Schlussfolgerung, dass kitzeln, Umgang mit Technik, die Aspekte des spielerischen rauen Verhaltens von Ratten, imitiert eine robust vorteilhafte Form der sozialen Kontakt, vor allem für jungen Ratten10, 11,12,13. Ratten sind sehr gesellige Säugetiere, die ergibt sich aus der Beobachtung der Zeit verbringen sie zusammen zu spielen, als Jugendliche14 und ihre starke Motivation wieder herstellen und pflegen soziale Kontakte mit Artgenossen15,16, 17. Ratte kitzeln stützt sich auf die spielerische soziale Natur des Ratten Handhabung zu einer positiven Erfahrung zu konvertieren. Dieses Konzept wurde ursprünglich als ein Modell für die Untersuchung der neurobiologischen Grundlage für positive affektive Zustände hervorgerufen durch soziales Spiel Verhalten7entwickelt. Seitdem wurde Ratte kitzeln in über 56 verschiedenen Experimenten, eingesetzt, von denen 22 im Vergleich zu anderen Umgang mit Techniken13kitzeln.

Die Ratte rauen Spiel zeichnet sich durch zwei wesentliche Verhaltensweisen: "dorsalen Contact" und "Pin" (Abbildung 1)18,19. Während der rauen Wiedergabe initiiert eine Ratte spielen durch die dorsalen Kontaktaufnahme mit dem Partner Nacken. Der Empfänger antwortet mit einem rollenden Rückenlage und ist durch den Initiator stehen über19festgenagelt. Das Spiel geht weiter mit den Ratten, die abwechselnd in jeder Position, an der Spitze und unter18 Jahren. Menschliche Handler sind in der Lage, die zwei wichtigsten Komponenten des rauen Spiel nachahmen, indem abwechselnd in Kontakt mit einer Ratte in den Nacken (dorsale Kontakt) und ventralen Oberfläche (Pin) mit kräftigen, schnellen Bewegungen der Finger ähnlich denen verwendet, wenn ein Kind kitzeln. Natürlich ist kitzeln keine exakte Kopie der Ratte rauen Spiel weil Ratten die menschliche Hand während kitzeln pin können nicht. In der Tat kann das Engagement von Individuen in rauen Spiel und kitzeln20,21unterschiedlich sein. Trotzdem scheint es, dass kitzeln die gleiche Belohnung Mechanismen möglichst rauen Spiel unter Artgenossen ruft. Kitzeln kann ist aktiv von den Tieren erbeten und als Belohnung für operantes lernen, trägt Beweise, die gekitzelt wesentlich für jungen Ratten7,11,12, lohnend ist 13 , 22. Obwohl Ratten auch berichtet haben, eine operante Aufgabe im Austausch für die sanfte streicheln als Belohnung zu lernen, sie waren schneller nähern die Hand einer Person mit kitzeln im Vergleich zu7streicheln.

Die Pins verwendet in kitzeln mag gemeinsamer Zurückhaltung Verfahren ähnlich, aber es gibt Beweise, die Ratten diese Art von Umgang mit anders wahrnehmen. Bei Ratten immer wieder zurückgehalten werden, absondern, wie z. B. für eine Injektion sie übermäßige Porphyrine, was zu Chromodacryorrhea ("rote Tränen")8. Chromodacryorrhea tritt als Reaktion auf akute Stressoren und bewirkt, dass die Haut und das Fell um die Augen und Nase, um eine rötliche Farbe23verschmutzt werden. Wenn wiederholt gedrückt gehalten und auf der Rückseite wie eine Pin zurückgehalten, Ratten zeigten weniger Anziehungskraft auf den Menschen als gekitzelt12. Diese Ergebnisse bedeuten, dass die wiederholte kurze Fesseln und Veröffentlichungen während kitzeln anders als spielerisch-Zurückhaltung wahrgenommen werden. So hat die präzise Technik in kitzeln wichtige Implikationen für die Erzeugung von einem positiven affektiven Zustand im Gegensatz zur Stressbewältigung beitragen.

Überwachung der Wirkung von kitzeln auf Ratte affektiven Zustand kann leicht durch die Teilnahme an den Ratten Lautäußerungen durchgeführt werden. Ratten produzieren in der Regel zwei Arten von Ultraschall Lautäußerungen (USVs), 22 kHz und 50 kHz, neben hörbar Lautäußerungen. Die 22-kHz-USVs treten in der Regel beim antizipieren aversive Ereignisse und sind von erhöhten Gehirn cholinerge Aktivität24 begleitet. 22-kHz-USVs gelten daher um einen negative affektiven Zustand der Angst zu zeigen. 50-kHz-USVs, vor allem der verwendeten Frequenz moduliert "Triller" (Abbildung 2), sind in der Regel verbunden mit lohnenden Situationen und Reize und sind begleitet von erhöhten Gehirn dopaminerge Aktivität24,25. Dementsprechend gilt als Ausdruck von reichlich 50-kHz-USVs entsprechend eine positive affektive Zustand24,26,27,28. Schließlich sind hörbare Lautäußerungen in der Regel zugeordnet und daher als Marker der, körperliche Schmerzen und Beschwerden eingesetzt. Die differenzierte Produktion dieser drei Formen der Lautäußerungen bietet somit eine zuverlässige Aufzeichnung der Änderungen in den affektiven Zustand der Ratten26. Ratten produzieren USVs an um 22 kHz während der Exposition gegenüber Raubtieren, Belastung durch schmerzhafte Reize wie Fuß Schock und Inter männlich kämpfen28. Streicheln berichtet auch mehrere 22-kHz-USVs in naiven Ratten, als Hinweis auf negative Auswirkung2abgeleitet zu entlocken. Im Gegensatz dazu erzeugen, wenn vom Menschen als gekitzelt im rauen Spiel mit anderen Ratten, Ratten zahlreiche 50-kHz-USVs. Daraus folgt, dass die Rate von 50 kHz USVs ein abgestuftes Maß für die affektive Resonanz erzeugt bietet durch kitzeln29,30.

Vorhandene Beschreibungen "wie eine Ratte zu kitzeln" sind eher kurz und können zu unterschiedlichen Ergebnissen führen. Darüber hinaus möglicherweise Anfänger "Ratte Kitzler" übermäßig vorläufig in ihren versuchen, rauen Spiel zu imitieren. Die Worte "kitzeln energisch" sind leichter zu verstehen als visuell gezeigt. Daher ist das Ziel dieses Artikels, eine detaillierte Beschreibung und Demonstration, wie man Ratten positive spielerische Interaktionen auf eine wirksame und kohärente Weise nachahmen, die zuverlässig löst positive Antworten von den meisten Ratten beim Umgang mit. Dieses Protokoll beschreibt eine standardisierte kitzelnde Technik und erklärt, wie kitzeln mit Verfahren wie der Zurückhaltung und Injektion zu mildern möglicherweise unangenehme affektive Erfahrungen kombiniert werden kann.

Protocol

Alle Experimente wurden durchgeführt in Übereinstimmung mit den nationalen Instituten der Health Guide für die Pflege und Verwendung von Labortieren31,32 in Einrichtungen von AAALAC International akkreditiert und von der Washington State angenommen wurden Universität institutionelle Tierpflege und Use Committee. Das folgende Protokoll kann Mitarbeiter Labor Tierallergene aussetzen. Persönlicher Schutzausrüstung sollte getragen werden, wie durch die institutionelle Arbeitsschutz und Sicherheit Programm und Health Care Provider empfohlen. Das Protokoll zeigt Verfahren unter typischen Labor Wohnverhältnisse aber (z.B. durch Verwendung eines Biosafety Schrank usw..) für den Einsatz in höheren Biosicherheit Einrichtungen angepasst werden kann.

1. Vorbereitung der Ausrüstung und Einrichtung

  1. Umgang mit box
    1. Bereiten Sie ein Tier nach Hause Käfig oder andere Gehäuse für kitzeln, bezeichnet die Handhabung-Box.
    2. Sicherstellen Sie, dass die Handhabung Box ist groß genug, um Platz für die Tickler Hand und für die Ratten zu bewegen ohne dass sie durch herausspringende bieten.
    3. Sicherstellen Sie, dass die Handhabung Box frei von Hindernissen ist. Also, wenn im Hause Käfig kitzeln, entfernen Sie alle Objekte wie Hütten, nagen, Stöcke und zerknitterten Papier.
    4. Linie die Handhabung Box Stock mit33Betten. Andere Arten von weichen Bodenbelag können verwendet werden, aber sind nicht so effektiv bei 50 kHz Lautäußerungen13zu entlocken.
    5. Platzieren Sie die Handhabung Box auf einem Tisch oder Arbeitsplatte in einer Höhe, die der Handler Hand, um die gesamte Bodenfläche des Feldes Handhabung bequem erreichen kann.
    6. Minimieren Sie die Auswirkungen der Neuheit durch förderliche die Ratten zum Feld Handhabung vor dem kitzeln, wenn nötig.
  2. Timer: Um Anfang und Ende der 15 s Kämpfe anzugeben, legen Sie ein Zeitmessgerät in der Nähe der Umgang mit Box, wo sie leicht abgelesen werden kann. Alternativ kann eine akustische Zeitsignal zu Tickler über Kopfhörer übertragen werden.
  3. Vokalisation Aufnahme
    1. Wenn Lautäußerungen zu verschiedenen Vocalization Arten für Forschungszwecke zu quantifizieren, verwenden Sie ein Mikrofon in der Lage, für den Fang von 10-120-kHz-Breitband-Ton aufgezeichnet werden, verbunden mit einem Gerät in der Lage hohe Töne aufzuzeichnen.
    2. Aussetzen Sie oder befestigen Sie das Mikrofon oben oder Seite des Kastens, niedrig genug, um klar die Anrufe erkennen und vermeiden Verwechslungen mit Anrufe von Ratten im nahe gelegenen Käfige, aber außerhalb der physischen Reichweite der Ratten.
    3. Wenn Lautäußerungen nur überwacht werden, um richtige kitzeln Technik bestätigen müssen, verwenden Sie ein Fledermausdetektor und setzen Sie ihn auf der Seite der Box. Wenn Sie einen einfache Überlagerung Detektor verwenden, stellen Sie das Gerät bei 50 kHz.
  4. Labor-Handschuhe: verwenden eine bloßen oder dünn behandschuhte Hand beim kitzeln. Die kitzelnde Technik wurde mit einer bloßen Hand entwickelt.  Allerdings ist eine dünne behandschuhte Hand auch effektiv bei Induktion spielerischen Verhalten und 50-kHz-USV-Produktion beim erlauben des Handlers, der die Menge an Druck auf die Ratte Körper spüren und fühlen die Ratte Antworten durch den Handschuh.

2. Verfahren kitzeln

  1. Die Labor-Handschuhe ziehen Sie an, bei Bedarf. Bringen Sie nach Hause Käfig auf einen Tisch oder Werkbank. Übertragen Sie sanft die Ratte in der Handhabung-Box, wenn kitzeln im Hause Käfig nicht durchgeführt wird. Starten Sie den Timer und die Audio-Aufnahme bei Bedarf.
  2. Für die konsequente Anwendung abwechselnd 15 s Handberührung und 15 s Freisetzung von Kontakt für eine Gesamtmenge von 2 min. Diese Dauer der Interaktion ist ausreichend zur Steigerung der Attraktivität von Ratten auf Menschen11gefunden worden.
    1. Um die kitzeln Session mit einem 15 s Release beginnen, legen Sie die Hand in einer Seite des Feldes Handhabung bewegungslos. Das Vorhandensein der Hand erlaubt Ratten, Interaktion zu erbitten, durch die Leitung leckt und Licht erstickt (Nibbles) auf der Hand, unter Angabe der Ratte Interesse um22zu interagieren. Wenn dies der Fall, bewegen Sie die Hand Weg von der Ratte, die spielerische jagen der Hand durch die Ratte zu erbitten. Alternativ lassen Sie sich die Hand out of the Box während der 15 s-Version.
    2. Folgen Sie die Veröffentlichung mit 15 s kitzeln, initiieren die Interaktion mit einem dorsalen Kontakt (2-4 s). Berühren Sie die Ratte in den Nacken (dorsalen Oberfläche des Halses) mit einer Hand, kräftig mit den Fingerspitzen mit schnellen Fingerbewegungen, die so häufig durchgeführt in menschlichen kitzeln. Vermeiden Sie den Kontakt mit der Bürzel, wie dieser Bereich des Körpers während der aggressiven Begegnungen34ausgerichtet ist.
    3. Folgen Sie des dorsalen Kontakts mit einem Stift. Legen Sie den Daumen und Mittelfinger unter die Ratte Vorderläufe; Heben Sie die Ratte gerade hoch genug, um schnell lassen Sie drehen die Ratte auf seinem Rücken und gleichzeitig die Rute nicht geknickt erhalten.
      Hinweis: Es kann helfen, leicht auf der Rückseite der Ratte mit dem kleinen Finger drücken, wenn die Ratte auf den Rücken drehen.
    4. Halten Sie die Ratte, lose, aber fest; sein Selbstbewusstsein aber nicht energisch. Sobald die Ratte auf seinem Rücken auf dem Boden ist, halten Sie den Körper Sie locker während der Bewegung der Finger schnell und kräftig, aber vorsichtig auf den Bauch, wie häufig im menschlichen kitzeln verwendet wird.
    5. Obwohl die Stimulation rapid und durchsetzungsfähig ist, halten Sie das pinning rege (2-4 s/Pin) zur Minimierung von negativen Reaktionen. Lassen Sie die Ratte nach rechts selbst und schnell mit einem dorsalen Kontakt folgen.
    6. Weiter zum Umschalten zwischen dorsalen Kontakte und Pins. Im Durchschnitt sollte 4 bis 5 Pins/15 s35.
    7. Die Ratte mit beiden Händen nicht abholen. Während der 15 s kitzeln, immer halten Sie die Finger bewegen und in Kontakt mit der Ratte Körper, sogar in Übergängen zwischen Bolzen und dorsalen Kontakte.
    8. Führen Sie drei zusätzliche 15-s kitzelt und 15 s Versionen für eine Gesamtmenge von 2 min.
  3. Wenn eine Handling-Box verwenden, die Ratte zurück zu seinem Hause Käfig. Wenn die Heimat Käfig verwenden, Anreicherung Gegenstände zurück in den Käfig. Sauber Feld Umgang mit Papiertüchern, Kot und Urin nicht entfernen von der Einstreu aufgenommen.
  4. Wiederholen Sie mit dem nächsten Käfig Ratten, je nach Bedarf.

(3) kitzeln mehrere Ratten gleichzeitig

  1. Ratten können als eine Gruppe36gekitzelt werden. Wenn die Dauer der Behandlung nicht ist relevant, Alternative kitzeln jede Ratte für 15 s. Die Dauer der Sitzung, kitzeln kann über 2 min verlängert werden, wie nötig, so dass jede Ratte vier Kämpfe erhält kitzeln Handberührung durch Freisetzung durchsetzt.
  2. Wenn die Dauer der Behandlung für Forschungsergebnisse relevant ist, verwenden Sie die folgenden Verfahren:
    1. Für Paare, kitzeln eine Ratte für 15 s, unmittelbar gefolgt von kitzeln die zweite Ratte für die nächsten 15 s (i.e., während die Freigabe der ersten Ratte), und so weiter. Die Tickler muss keine Ruhezeit.
    2. Verwenden Sie für Drillinge in 3.2.1 beschriebene Verfahren, um zwei der Ratten zu kitzeln und das dritte man zur gleichen Zeit als ein anderer mit der anderen Hand zu kitzeln.
    3. Für Gruppen von 4 oder mehr Ratten, kitzeln, jede Ratte oder ein paar Ratten für 15 s. Die Dauer der Sitzung, kitzeln kann über 2 min verlängert werden, je nach Bedarf.

Representative Results

Faktoren beeinflussen oder potenziell beeinflussen, sind Reaktionen auf kitzeln in Tabelle 1zusammengefasst. Positive Ergebnisse aus Ratte kitzeln haben durch mehrere Maßnahmen der Ratte Wohlfahrt und positive Wirkung gezeigt. Gemeinsame Erkenntnisse sind erhöhte Produktion von 50-kHz-USVs, erhöhten Ansatz Verhalten und erhöhte einfache Handhabung. Berichteten Nebenwirkungen der Ratte kitzeln auf genetische und zellulärer Ebene veränderte Genexpression in der Hypothalamus-37und Neurogenese im dentate Gyrus der Hippocampus38,39erhöht. Ergebnisse deutet auf reduzierte generalisierter Angststörung und Angst vor den Menschen werden auch berichtet, wie reduzierte Latenz Ansatz in 9 verschiedene Experimente13, weniger nach Angst Klimaanlage40,41, Einfrieren und erhöhte Einträge in der Mitte einer Freiland-Arena durch individuell untergebrachten Ratten36. Weitere Informationen finden Sie unter LaFollette Et Al., identifiziert präsentieren, die einer systematischen Überprüfung der kitzeln Literatur, 22 Berichte untersucht die Ergebnisse der Ratte kitzeln im Vergleich zu anderen Techniken-13.

Nächste, spezifische Beispiele für Ergebnisse, die erreicht werden können, wenn die kitzelnde Technik gepaart mit Zurückhaltung und Intra peritoneale (IP)-Injektionsverfahren ist werden beschrieben.

Sprague-Dawley Ratten (Männchen; 85-94 Tage alt; n = 48) 2 min. lang gekitzelt, unmittelbar vor und nach der IP-Kochsalzlösung Injektion täglich für 10 Tage, vor allem in Kombination mit der juvenilen kitzeln Erfahrung (2 min/Tag von 25-45 Tage alt), produziert nur mehr 50-kHz-USV vor (GLM ANOVA, F3, 44 = 9,59, p < 0,0001; Abbildung 3A) und nur nach (F3, 44 = 8,74, p = 0,0001; Abb. 3 b) Injektion (Tukey-Kramer, p < 0,05) im Vergleich zu Ratten eine passive Hand10ausgesetzt. Während der eigentlichen kurze Anlieferung der Injektion, war die Produktion von 50 kHz USVs gebremst (± 15 ± 1,4 SE bedeuten USVs/min) und Umgang mit Behandlung hatte keinen Einfluss auf ihre Rate10. Es wurde festgestellt, dass kitzeln, wenn sowohl vor als auch nach einer Injektion angewendet einen positiven affektiven Zustand, der der Fallenstellung des Verfahrens, vor allem für diejenigen, die ausgesetzt worden waren induziert, zu kitzeln als Jungtiere moderiert.

Um herauszufinden, ob kitzeln wirksam wäre vor oder nach einer Injektion, anstatt beide reduziert, und wenn ja, welche Zeit besser wäre, wurden Ratten Antworten zu kitzeln vor, nach, und vorher-nachher-Injektion verglichen. Raten von 50 kHz USVs und hörbaren Anrufe wurden gemessen, als Indikatoren für die positiven und negativen beeinflussen bzw.12. Sprague-Dawley Ratten (Männchen; 32-41 Tage alt; n = 96) waren entweder zurückgehalten und eine tägliche IP-Kochsalzlösung Injektion (INJ) oder zurückhaltend, ohne dass eine Injektion (Control, CON) und eines der folgenden Behandlungen ausgesetzt: kein kitzeln, die Ratten waren nicht berührt, vor und nach dem Eingriff Zurückhaltung (TN); gekitzelt für 2 min vorm (TB), nach (TA), oder vor und nach (TBA) Zurückhaltung12. In der 2 min vor Zurückhaltung, Ratten von Behandlungen, die empfangen, bevor die Zurückhaltung (TB, TBA) kitzeln produziert die meisten 50-kHz-USVs (GLMM ANOVA, F3,88 = 49,19, p < 0,0001; Abbildung 3). TA und TN Ratten unterschieden sich nicht in der Rate der USVs vor der Zurückhaltung-Verfahren hergestellt. Während des Verfahrens produziert eine Ratte, die kitzeln (TA, TB, TBA) erhalten mehr 50-kHz-USV als jene, die waren nicht (TN gekitzelt; F3,88 = 50.67, p < 0,0001; Abbildung 3D). Unter gekitzelt Ratten produziert Bezieher kitzeln vor dem Eingriff (TB, TBA) weitere 50-kHz-USVs während der Zurückhaltung im Vergleich zu denen, die danach gekitzelt (TA; p < 0,05). In der 2-min-Zeit nach dem Eingriff produziert Ratten in allen gekitzelt Gruppen (TA, TB, TBA) mehr 50-kHz-USVs als jene, die waren nicht (TN gekitzelt; F3,88 = 53,64, p < 0,0001; Abbildung 3E). Darüber hinaus während des Eingriffs wird gekitzelt Ratten vor Zurückhaltung (TB, TBA) produziert weniger hörbar Anrufe im Vergleich zu Ratten, die Tat nicht erhalten kitzeln (TN), während die Ratten anschließend gekitzelt (TA) nicht von denen in den anderen Gruppen unterscheiden (F3,88 = 3,67, p= 0,02; Abbildung 3F). Die Ergebnisse zeigen, dass kitzeln Ratten vor davor zurückschrecken, für eine IP-Injektion Anzeichen für größere positive Wirkung auf die Perioden vor, während und nach dem Eingriff als kitzeln erst nach Zurückhaltung12produziert.

Betreuer eines der folgenden Behandlung Behandlungen angewendet an Ratten (Sprague-Dawley Männchen; n = 32) von 57 bis 74 Tage alt: (1) Minimal handling, sobald eine Woche im Käfig ändern; (2) Belastung durch eine passive Hand für 2 Minuten täglich; (3) 2 min jeden Tag, um soziale imitieren kitzeln spielen; (4) 2 min täglich Zurückhaltung auf die Ratte zurück, Simulation von unreciprocated Anheften von einem dominanten11. In der Minute nach einer IP verbrachte Injektion, Ratten aus dem Tickled und Passive Behandlungen mehr Zeit Aufzucht in der vorderen Hälfte des Käfigs, in der Nähe, wo der Forscher Stand, im Vergleich zu Ratten aus der Minimal und Zurückhaltung Behandlungen (GLM ANOVA, F3, 27 = 5,70, p = 0,004; Abbildung 3). Darüber hinaus sprach Tickled Ratten mehr 50-kHz-USVs als Ratten in die Passive Behandlung, wenn Sie einem bekannten oder unbekannten Hand für 3 min in einem menschlichen Ansatz-Test ausgesetzt (Log-transformierten Mittelwert ± SE Anrufe/min, Minimal: 0,7 ± 0,26, passiv: 0,6 ± 0,18, gekitzelt: 1,8 ± 0,30 Zurückhaltung: 1,4 ± 0,28; F3,28 = 4.04, p = 0,02). So, die bloße Anwesenheit einer passiven Hand unterstützt Gewöhnung von Ratten auf den Menschen bezogen auf minimal Handling, aber kitzeln war die effektivste Methode zur Herstellung einer positive Reaktion auf Menschen11.

Figure 1
Abbildung 1: Ratte handgreiflich spielen Verhalten. (A) dorsale Kontakt; (B) Pin18. Bitte klicken Sie hier für eine größere Version dieser Figur.

Figure 2
Abbildung 2: 50 kHz Ultraschall Lautäußerungen der Frequenz moduliert "Triller" Art. Fünf Triller Lautäußerungen entstanden in 1 s von einer Ratte während kitzeln. Die horizontalen Linien 17, 25 und 70 kHz von elektronischen Geräten im Raum produziert wurden (zB., Computer, Mikrofon, Kamera).

Figure 3
Abbildung 3: Antworten von Ratten, die vor oder in Kombination mit kitzeln, experimentelle Verfahren wie Intra peritoneale (IP) Injektionen ausgesetzt. Rate (Mittelwert ± SE Anrufe/min) von 50 kHz USVs produziert (A) vor und (B) nach einer Injektion von erwachsenen männlichen Ratten zu minimalen ausgesetzt Umgang mit (M) oder kitzeln (T) als Jungtiere und eine passive Hand (P) oder kitzeln (T) unmittelbar vor und nach Injektion (mit vier Behandlung Kombination: M-P, T-P, M-T, T-T); von Cloutier Et al. 10.-Rate von 50 kHz USVs (Mittelwert ± SE Anrufe/min) produziert (C) vor, (D) während und (E) nach Zurückhaltung (mit oder ohne eine IP-Injektion) einmal täglich für 10 aufeinanderfolgende Tage von jungen männlichen Ratten, die keine kitzeln (TN) erhalten oder Kitzeln vor (TB), nach (TA), oder vor und nach (TBA) das Verfahren; und (F) die Rate der hörbaren Anrufe während Zurückhaltung produziert; von Cloutier Et al. 12. (G) Dauer (Mittelwert ± SE s) der Aufzucht in der Nähe des Forschers während der 1 min nach einer IP-Injektion von männlichen Ratten ausgesetzt, minimal, passiv, kitzeln oder Zurückhaltung Handhabung durch Hausmeister; von Cloutier Et al. 11. Balken mit verschiedenen Buchstaben (a, b, C) zeigen Unterschiede in paarweisen vergleichen (Tukey-Kramer, p < 0,05). Bitte klicken Sie hier für eine größere Version dieser Figur.

Faktor Wirkung Referenzen
Intrinsische
Alter Keinen Unterschied in der 50-kHz-Ultraschall-Lautäußerungen (USVs) zwischen Ratten im Alter von 24-44 und 89-92 Tage alt 18, 29, 42
Rückgang der 50-kHz-USVs für Ratten aus 71 Tage alt bis 148 Tage alt 29
17 Tage alten Männchen gemacht viele weitere 50-kHz-USVs als 7-9 Monate alten Rüden 43
Gekitzelt als Jugendliche und Erwachsene Ratten zeigten die positivsten Ergebnisse im Vergleich zu Ratten nur gekitzelt als Jugendliche oder Erwachsene. 10
Sex Männliche Ratten produziert mehr 50-kHz-USVs bei 44 und 71 Tage alt, aber Weibchen produziert mehr 50-kHz-USVs in 148 Tage alt 29
Männliche Ratten produziert mehr 50-kHz-USVs als Weibchen 44 und 58 Tage. 43
Keine Geschlechtsunterschiede in 50-kHz-USVs in 96 jungen Long-Evans-Ratten oder 52 jungen Wistar-Ratten 42, 44
Weibliche Jugendliche Wistar-Ratten produziert mehr 22-kHz-USVs als Männchen 44
Interindividuelle Unterschiede Ratten, die weitere 50-kHz-USVs zeigte verminderte Ansatz Mal zu ausgesprochen Self-administered kitzeln, positives Urteil Bias nach kitzeln erhöht und erhöht hippocampal Zellproliferation nach kitzeln 27, 37, 45
Verspielte Ratten produziert mehr 50-kHz-USVs 43
Stamm Nicht berichtet, aber anekdotische Hinweise darauf Ratten aus verschiedenen Stämmen und Züchter unterscheiden sich in ihrer Antwort zu kitzeln. Ratte Linien auseinandergelaufen wenn auf hohe vs. niedrige 50 KHz USVs in Reaktion auf kitzeln ausgewählt. 22, 26, 42, 46
Bisherigen Erfahrungen kitzeln Erhöhte Produktion von 50 kHz Ultraschall USVs 12
Extrinsische
Bettwäsche Ratten produziert mehr 50-kHz-USVs wenn auf vertraute Bettwäsche Vs keine Bettwäsche gekitzelt 33
Stress Kitzeln Ratten, 1 Stunde, aber nicht 23 Stunden nach Zurückhaltung Stress reduziert 50-kHz-USVs-Produktion 47, 48
Zeitplan Kitzeln Ratten vor Injektion wirksamer war bei der Steigerung von 50 KHz USVs als kitzeln nach Injektion 12
Geschlecht der handler Keine Wirkung gefunden Panksepp, J. 2014, unveröffentlichte Daten
Vertrautheit der Ratte mit handler Ratten produziert mehr 50-kHz-USVs und mehr Zeit in der Nähe einer vertrauten im Vergleich zu einer ungewohnten tickler 11
Handler kitzeln Erfahrung / Kraft der vom Handler kitzeln Betroffenen Produktion des 50-kHz-USVs aber keine Präferenz und Ansatz Verhalten Cloutier, S. 2011, unveröffentlichte Daten
Dauer der Stifte durch Hundeführer / Häufigkeit der Wechsel zwischen dorsalen Kontakte und Pins Niedrigere Frequenz von Nibbles (interpretiert als Aufforderung zu spielen) richtete sich in eine Hand, die imposante 15-s Pins (Zurückhaltung) als ein Aushaendigen kitzelt mit mehreren dorsalen Kontakte und Pins pro 15 s 11
Geruchsstoffe (z.B. Parfüm, Shampoo, Rasierschaum) von Handler verwendet Nicht gemeldet
Sozialen Gruppengröße Individuelle Gehäuse vergrößert positive Reaktionen zu kitzeln im Vergleich zur Gruppenhaltung in die meisten Experimente. Diese Differenz reduziert kitzeln Gruppe untergebracht Ratten mit Käfig Kumpels im Hause Käfig 7, 22, 27, 36
Lichtintensität Kitzeln bei 1000 Lux reduziert 50-kHz-USVs im Vergleich zu 25 Lux. 43
Lärm Nicht gemeldet
Käfig Reinigung vor dem Kitzeln Induzierte Produktion von 22-kHz-USVs bei einigen Ratten 12
Tageszeit Keine Auswirkung auf 50 kHz USVs Produktion wenn am Anfang oder Ende der leichte Periode durchgeführt. Ratten am Anfang/Ende der leichte Periode Vs kitzeln, die Mitte der hellen oder dunklen Periode noch nicht verglichen wurde Cloutier, S. 2011, unveröffentlichte Daten

Tabelle 1: Liste der Faktoren, die beeinflussen, oder potenziell betroffen, die Antworten der Ratten auf kitzeln, eine spielerischen Umgang mit Technik Ratte rauen Spiel imitieren soll.

Discussion

Dieses Protokoll beschreibt eine Technik zur Ratte kitzeln, eine spielerischen Umgang mit Technik imitiert Ratte rauen Spielverhalten, das ist wirksam bei der Schaffung von Lautäußerungen bezeichnend für positiven Einfluss und Steigerung Ansatz Verhalten beim Umgang mit Ratten für gemeinsame Haltung oder Medizin und Forschung Verfahren wie IP-Injektion.

Soziales Spiel, eine in der Regel positive Form der Sozialkontakt, wurde vorgeschlagen, zu unterstützen bei der Kalibrierung von emotionalen Reaktionen auf beängstigende Situationen42,43, Widerstandsfähigkeit gegen Angst und Depression44zu generieren. Von sozialen Nachahmung Ratte spielen, kitzeln scheinen sich ebenso positiv7. Also, für die Anwendung von tickling erfolgreich bei Induktion positive affektive Zustände zu sein, ist es wichtig, im Hinterkopf behalten, dass die Hand während dem kitzeln als "Spielpartner" fungieren soll. Die Hand ist attraktiv, weil es die Verhalten simuliert, die Ratten erwarten und genießen Sie von einer anderen Ratte im rauen Spiel. Daher, anheben und halten die Ratte mit beiden Händen ist keine Ratte Spiel imitiert, und haben nicht den gleichen Effekt. In der Tat werden Laborratten lernen spielerisch-Beschränkungen zu vermeiden, in denen ein Handler hält sie mit einer Hand und streichelt sie mit der anderen Hand45. Während die Ratte zu kitzeln ist es auch wichtig, souverän und selbstbewusst, die Hand zu bewegen, dabei lebhaft und verspielt. Halten das pinning rege (2-4 s/Pin) negative Reaktionen minimieren soll, da im rauen Spiel zwischen Ratten, pinning führt zu äußern 22 kHz USVs18wiederholt.

Obwohl junge Ratten verspielter sind und stärkere Reaktionen zeigen auf als Erwachsene Ratten18kitzeln, hat kitzeln im Erwachsenenalter auch Vorteile10. Kitzeln bei jungen Ratten wurde auch gefunden, um Vorteile zu haben, später im Leben36, was darauf hindeutet, dass Ratten verlängerte wirkt sich positiv auf ihre emotionale Reaktion auf menschliche Präsenz erleben. Geschlechtsunterschiede als Reaktion auf kitzeln sind inkonsistent, mit Berichten über keine Geschlechtsunterschiede juveniler Ratten46,47, juvenile Männchen produzieren mehr 50 kHz Lautäußerungen und weniger 22-kHz-Lautäußerungen als juvenile Weibchen29 ,48,39und ältere Frauen produzieren mehr 50-kHz-Lautäußerungen als Männer gleichen Alters29, ähnlich wie Ergebnisse für soziales Spiel49.

Die Wirksamkeit der kitzeln Technik kann mit Ratte Bewegungsmuster und Vokalisation beurteilt werden. Ratten werden knabbern und lecken den Handler Finger während der 15-s Perioden der Veröffentlichung nach dem kitzeln11. Knabbereien sind leichte, schädigenden Häppchen, die als Play-Aufforderung Verhalten bei jungen Ratten22beschrieben worden. Wenn der Handler die Hand um den Umgang mit Box bewegt, die Ratte folgen und es zu jagen. Ratten, vor allem junge, werden auch ausgeführt, zwischen kitzeln Kämpfe um die Box huschen und zeigen einen deutlichen Anstieg an Aktivität nach einem kitzeln Anfall, ähnlich wie die laufende Aktivität, die rauen Spiel charakterisiert. Wenn die Ratte unbeweglich während Veröffentlichungen, Anpassung der kitzeln Technik bleibt, wie die Verringerung der Dauer der Pin oder geben weniger Pins, wahrscheinlich benötigt wird. Es empfiehlt sich, Stifte von kurzer Dauer für die erste kitzeln Session geben. Dauer und Anzahl der Pins können erhöht werden, wie die Ratten kitzeln gewöhnt haben. Ratten 50-kHz-USVs, einschließlich Trillern, während Kitzeln und zwischen kitzeln Anfällen zu äußern. Eine schrittweise Erhöhung der Anzahl der Triller produziert während der 15-s-Versionen sehen in den ersten zwei Wochen der täglichen kitzeln vor47zu stabilisieren. Individuelle Unterschiede erlauben gekitzelt Ratten in hoher und niedriger eingeteilt werden Anrufer, die differentiell reagieren auf stress, Angst und Anhedonie46,47,50.

Ratte kitzeln hat erfolgreich zur positiven Einfluss als bewerteten basierend auf Herstellung von 50 kHz USVs beim kitzeln13zu induzieren. Es hat vor kurzem eingeführt wurde, als eine Technik, um Angst vor den Menschen in den Ratten zu verringern und ihre Fallenstellung von Medizin und Forschung Verfahren wie Injektion zu mildern. Hinweise darauf, dass, wenn nur 2 min täglich pro Tier zur Verfügung gestellt, kitzeln eine effektive und praktische Methode zur Verringerung der Vermeidung von Menschen11. Wenn man bedenkt, dass junge Ratten zusammen spielen werden für ca. 60 min. täglich51,52,53, kitzeln für 2 min täglich praktische aber vermutlich ist zu kurz, um die volle Wirkung des sozialen spielen unter den Ratten zu replizieren. Haustier Ratte Besitzer, die in der Regel mehr Zeit für die Behandlung ihrer Rats als Labor Betreuer haben, können Ratten mit zusätzlichen kitzeln, solange die Ratten weiterhin positiv reagieren. Basierend auf Burgdorf Et al. 44 , 45, die erste 15 min des rauen Spiel scheint die positivsten für Ratten sein. Im Gegenzug kann es effektiver Ratten für einen Zeitraum von bis zu 15 min, kitzeln sein vor allem, wenn für einen berechtigten Grund sie in einer sozialen Gruppe gehalten werden können. Basierend auf spielen als "Training for the unexpected"38, eine vielfältigere Technik als die hier beschriebene Methode vielleicht mussten jedoch die Verspieltheit der länger halten Sitzungen zu kitzeln. Zusätzliche kitzelnde Sitzungen pro Tag können auch vorteilhaft sein, solange andere biologisch wichtigen Aktivitäten wie Schlaf und Fütterung nicht beeinträchtigt werden. Sowie einen Beitrag zur Verbesserung des Wohlergehens von Labor- und Haustier Ratten, die beschriebenen standardisierten kitzelnde Technik kann verwendet werden, in kontinuierliche Forschung, die darauf abzielen, die Auswirkungen der sozialen Spiel und seine Komponenten zu verstehen auf Verhaltens-, Sozial- und Gehirn Entwicklung.

Beim kitzeln Umgebung Injektion durchgeführt wurde, besonders in Kombination mit kitzeln Vorkenntnisse (Endung 40-50 Tage früher), es erhöht 50-kHz-USV-Preise vor und nach der Injektion, und Ermäßigungen akustische Anrufe während der Injektion10 . So kitzeln scheint die negativen Auswirkungen von IP-Injektionen, vor allem bei Ratten als Jungtiere10kitzeln gewöhnt gemildert haben. Obwohl kitzeln Beschwerden mit der Injektion als beurteilt je nach Produktion von hörbar Anrufe nicht verhindert haben, stieg er im Vergleich zu der Kontrollgruppe vor, während und nach der Zurückhaltung Verfahren1250-kHz-USVs. 50-kHz-USV-Angaben zufolge war die wirksamste Zeitpunkt für die Anwendung von kitzeln kurz vor und nicht nach der Zurückhaltung Verfahren12. Kitzelnde Ratten vor die Injektion einer Verschleppung, dass erhöhte Positive Wirkung hatte auswirken, während der Prozedur12. Kitzeln kann somit mögliche negative Auswirkungen der routinemäßigen medizinischen Verfahren auf Ratte Wohlbefinden und Verhalten minimieren. Mehr Forschung ist notwendig, um festzustellen, wie die Technik effektiv mit anderen Injektionstechniken und andere medizinische/experimentelle Verfahren gekoppelt werden könnte.

Alles in allem haben wir gezeigt, dass Ratte kitzeln führt zu positiven Ergebnissen wie z. B. erhöhte Produktion von 50 kHz USV und Ansatz Verhalten, sowie verringerte Vermeidung von Menschen und Widerstand gegen die Behandlung. Es wird empfohlen, Ratte kitzeln als eine praktikable Methode zur Verbesserung der Ratte Wohlfahrt und Modellierung positive affektive Zustände.

Disclosures

Die Autoren erklären, dass sie nichts preisgeben.

Acknowledgments

Sylvie Cloutier, Megan LaFollette, Brianna Gaskill und Ruth Newberry möchte die Erinnerung an Jaak Panksepp, unser geliebtes Co-Autor dieses Artikels widmen, die in den letzten Phasen der Vollendung dieses Manuskripts verstorben. Wir erinnern Jaak liebevoll als "Vater der Ratte zu kitzeln" - seine Einsichten in die tierische Emotionen bilden die grundlegende Inspiration für diese Arbeit. Dieses Material basiert teilweise auf der Arbeit, unterstützt durch ein Washington State University Veterinary Sommer Forschungsstipendium, Animal Welfare Enhancement Auszeichnung Animal Welfare Institute und ein "Grant für Versuchstierkunde" von der amerikanischen Gesellschaft für Versuchstierkunde. Veröffentlichung dieses Artikels wurde von Petco Animal Supplies, Inc. gesponsert. Wir möchten danken Carol Dowell und Purdue University Tier Laborprogramm für die Erlaubnis, ihre Ratten für das Shooting zu kitzeln.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Table or workbench No specific brand is recommended.
Handling box (rat home cage or another enclosure) No specific brand is recommended.
Bedding or or other type of soft cover No specific brand is recommended.
Gloves (thin laboratory gloves) Optional.
Timing device Deltaworks Interval Timer:Timing for HIIT Training, Workouts
https://itunes.apple.com/us/app/interval-timer-timing-for-hiit-training-workouts/id406473568?mt=8		 Optional. Any timer will do, although it is convenient to use an interval timer if you are tickling multiple rats.
Ultrasonic microphone such as a bat detector or USB microphone Magenta Electronics LTD Bat4 Bat Detector
https://www.magenta2000.co.uk/acatalog/Bat_Detector_Bat4.html		 Optional. The Magenta bat detector is relatively inexpensive and easy to use, but can only detect vocalizations at one range at a time.
Dodotronic Ultramic 200K
http://www.dodotronic.com/ultramics/?v=7516fd43adaa		 Optional. This microphone has worked well in our experiments. There are many other options for ultrasonic microphones.
Bioacoustic software CIBRA SeaWave
http://www-3.unipv.it/cibra/seawave.html		 Optional. Free software with limited recording capabilities.
CIBRA SeaPro
http://www-3.unipv.it/cibra/seapro.html		 Optional. This software has extensive recording capabilities, and has worked well in our studies. There are many other software packages that work with bioacoustic microphones.

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Cloutier, S., LaFollette, M. R.,… More

Cloutier, S., LaFollette, M. R., Gaskill, B. N., Panksepp, J., Newberry, R. C. Tickling, a Technique for Inducing Positive Affect When Handling Rats. J. Vis. Exp. (135), e57190, doi:10.3791/57190 (2018).

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