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Medicine

골격 근육 혈관 결합, 산화 용량 및 Microvascular 함수 '원스톱 쇼핑' 근처-적외선 분광학

Published: February 20, 2018 doi: 10.3791/57317

Summary

여기, 우리는 근처-적외선 분광학을 사용 하 여 단일 병원 또는 실험실 방문에 반응성 충 혈, 혈관 커플링 및 골격 근육 산화 능력을 평가 하는 간단한, 비-침략 적 접근 방식을 설명 합니다.

Abstract

운동 신진 대사 요구에 산소 공급을 맞추기 위해 높은 조정된 neurovascular 응답을 요구 하는 주요 hemodynamic 스트레스를 나타냅니다. (조직 허 혈의 짧은 기간에) 반응성 충 혈 심장 혈관 사건의 독립적인 예측 인자 이며 혈관 건강과 vasodilatory 용량에 중요 한 통찰력을 제공 합니다. 골격 근육 산화 용량 결정 myocellular 프로세스에 대 한 에너지 공급으로 건강과 질병, 똑같이 중요 하다. 여기, 우리는 근처-적외선 분광학을 사용 하 여 단일 병원 또는 실험실 방문 기간 중 각이 주요 임상 끝점 (반응성 충 혈, 혈관 커플링, 및 근육 산화 능력)을 평가 하는 간단한, 비-침략 적 접근 방식을 설명 합니다. 도플러 초음파, 자기 공명 이미지/분광학, 또는 침략 적인 카 테 터 기반 흐름 측정, 근육 생 검과 달리 우리의 접근 덜 연산자 종속, 낮은-비용, 그리고 완전히 비 침략 적 이다. 대표적인 데이터 이전 게시 된 문학에서 요약 데이터를 함께 찍은 우리의 실험실에서 이러한 종점의 각각의 유틸리티를 보여 줍니다. 일단이 기술을 마스터 응용 임상 인구 운동 옹 졸 및 심장 혈관 기능 장애에 중요 한 기계 통찰력을 제공할 것입니다.

Introduction

조직 허 혈의 짧은 기간에 hyperemic 응답 (마이크로) 혈관 기능의 키 비-침략 적 수단으로 떠오르고 있다. 동안 도관 동맥의 폐색, 다운스트림 arterioles 허 혈 성 모욕을 상쇄 하기 위해에서 같은데요. 폐색의 방출, 감소 혈관 저항 충의 크기는 다운스트림 microvasculature 팽창 하는 하나의 기능에 의해 결정 됩니다 발생 합니다. 반응성 충 혈은 심장 혈관 사건의1,2 , 따라서 임상적으로 중요 한 끝점의 강한 독립적인 예측, 관용과 삶의 질을 운동 그것의 기능적 중요성은 덜 분명 하다.

실제로, 동적 운동 신진 대사 요구에 산소 공급을 맞추기 위해 높은 조정된 neurovascular 응답을 요구 하는 주요 심장 혈관 스트레스를 나타냅니다. 예를 들어 골격 근육 혈 약 거의 고립 된 근육 수축3, hemodynamic 응답 했다 전신 운동에 추정 하는 경우 심장의 펌핑 용량을 압도 것 동안 증가할 수 있다. 따라서, 심한 저 혈압, 교감 (즉, vasoconstrictor)을 피하기 위해 신경 활동 증가 심장 출력 비활성 및 내장 조직에서 고 활성 골격 근육4쪽으로 재분배. 동 정적인 유출 또한 운동 골격 근5; 이동 그러나, 적절 한 조직의 산소 배달6,7,,89,10, 를 위해 vasoconstrictor 응답을 약하게 지역 신진 대사 신호 11.,이 과정은 불린다 기능 sympatholysis12, 그리고 운동 중 골격 근육 혈액 흐름의 일반 규정 하는 것이 필수적입니다. 골격 근육 혈 이기 때문에 호 기성 용량의 핵심 결정-삶의 질과 심혈 관 질환 사망률 및 사망13의 독립적인 예측-골격 근육 혈액 흐름과 조직 산소 제어 이해 운동 하는 동안 배달 큰 임상 의미입니다.

그러나 산소 공급은 Fick 방정식의 절반 밖에, 산소 이용 방정식의 나머지 절반을 만족으로. 중 산소 이용의 주요 determinates, 휴식 및 운동을 하는 동안 세포 프로세스에 대 한 충분 한 에너지 공급에 필수적인 역할을 담당 하는 미토 콘 드 리아 산화 인 산화. 실제로, 근육 산화 용량에 장애 기능 용량 및 삶의 질14,,1516를 제한할 수 있습니다. 다양 한 측정 일반적으로 근육 산화 용량, 침략 적 근육 biopsies을 비싸고 시간이 많이 걸리는 자기 공명 분광학 (MRS) 기술을 포함 한 인덱스를 제공 하는 데 사용 됩니다.

여기, 우리는 근처-적외선 분광학 (적외선)를 사용 하 여 단일 병원 또는 연구소 방문에서 (반응성 충, sympatholysis, 및 근육 산화 용량)이 세 가지 주요 임상 끝점의 각각을 평가 하는 소설, 비-침략 적 접근을 제안 합니다. 이 방법의 주요 장점은 3 겹: 먼저,이 기술을 쉽게 휴대용 이며, 상대적으로 저렴 한 비용, 실행 하기 쉬운. 충 혈 반응 측정을 위한 현재 도플러 초음파 방식은 높은 연산자--요구 하는 광범위 한 기술 및 훈련-정교한, 높은 비용, 데이터 수집 하드웨어 및 후 처리 소프트웨어를 필요로. 또한,이 클리닉 및 모니터링 또는 치료 효능을 테스트 하는 머리 맡에 대 한 대규모 임상 시험으로 도입 생각할 수 있습니다. 둘째, 방법론, 덕이 기술은 기술의 전반적인 특이성을 증가 골격 근육 microvasculature에 특히 집중 한다. 도플러 초음파를 사용 하 여 대체 방법을 업스트림 도관에 전적으로 집중 하 고 변경 내용을 다운스트림, 신호를 저해할 수 있는 추론. 셋째,이 기술은 완전히 비 침략 적 이다. 골격 근육 산화 용량은 전통적으로 침략 적으로 평가 하 고 고통 스러운 근육 생 검, 그리고 기능 sympatholysis sympathomimetics와 sympatholytics의 간 동맥 주입으로 평가 될 수 있습니다. 이 이렇게 모두 함께 이러한 요구 사항을 방지합니다.

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Protocol

이 프로토콜 알링턴 텍사스 대학에서 기관 검토 위원회의 지침 및 헬싱키의 선언의 최신 버전에 의해 설정 된 표준 규격을 준수. 따라서, 서 면된 동의 (이었고 이어야 한다) 취득된 이전 연구 절차의 개시에.

1입니다. 계측

참고: 다음 계측 설명 기반 근처-적외선 (NIR) 분석기 및 데이터 수집 시스템 실험실에서 사용 ( 재료의 표참조). 따라서, 지침이이 소자의 최적의 기능에 필요한 단계를 포함 합니다. 이 단계에는 NIR 프로브 동반 소프트웨어 및 교정, 팬텀을 사용 하 여 교정과 주변광을 제외 하는 어두운 천으로의 응용 프로그램 포함 됩니다. 다른 데이터 수집 하드웨어 및 소프트웨어를 사용 하는 경우에 조사 교정 및 주변 빛 고려 사항에 대 한 그들의 자신의 특정 사용자 매뉴얼을 참조 해야 합니다. 그림 1 실험 설정 및 계측 바로 아래 설명 된 보여 줍니다.

  1. 그들의 벨트 라인 약 LBNP 상자에 오프닝으로도 내부 낮은 체 부정적인 압력 (LBNP) (그림 1A), 그들의 다리와 부정사를 주제를 지시 합니다. LBNP 챔버를 구축 하는 방법에 대 한, 참조17. 를 참조 하십시오.
  2. 주제에 3 개의 심전도 전극 배치: 주제에 열 등 한, 중간 clavicular 위치에 두 개와 왼쪽 중간에 장 골도 머리. 이 구성은 낮은 팔 다리, 손 그립 운동 중 위 사지, 운동과 팔의 계측에 대 한 제한 된 액세스 때문에 최상의 결과를 제공합니다.
  3. 비-침략 적 혈액 압력 모니터 모듈을 지배적인 손목에 놓습니다. 각 손가락에 손가락 혈압 수 갑을 놓고 모듈 (그림 1B)에 연결 합니다. 손가락 혈압 수 갑은 당신의 장치를 동반 하는 사용자의 설명서에 따라 올바르게 보정을 확인 합니다.
  4. 손 그립 동력 (HGD) 약간 납치 위치에 그들의 비 지배적인 팔으로 파악을 지시 합니다. 머리 맡 테이블에 팔을 편안 하 게 위치 한다. 거리와 각도 HGD의 최소한의 팔 운동 (그림 1C) 최적의 그립 강도 수 있도록 조정 되어야 한다.
  5. 머리 맡 테이블에 HGD 보안.
  6. 참가자의 최대 자발적으로 수축 (MVC)를 측정 합니다. 즉, 프롬프트가 표시 되 면, 그들은 해야 합니다 짠 다는 HGD 가능한 하드만 손과 팔 뚝에 근육을 이용 하는 동안 참가자에 게. 그들은 그들의 팔, 가슴, 어깨, 또는 복 부 근육 최대 그립을 수행할 때 모집에서 자제 해야 합니다 주제에 지시 합니다.
  7. 반복 단계 1.6 세 번으로 구분 적어도 60 미 기록 달성 최대 힘 (최고 3의). 최대 힘이 골격 근육 산화 용량 및 혈관 (아래) 커플링에 대 한 운동 강도 계산 하기 위해 사용 됩니다.
  8. 급속 한 인플레이션 팔목 운동 손의 위쪽 팔 주위를 놓습니다. 팔목에 급속 한 인플레이션 컨트롤러에서 항공사를 연결 합니다.
  9. Profundus flexor digitorum를 식별 합니다. 피부 마커를 사용 하 여 만져 서 근육의 경계를 구분.
  10. NIR 분 광 계 장치에 포함 된 사용자의 설명서에 따라 올바르게 보정을 확인 합니다. 깨끗 한 피부는 NIR 프로브는 알코올 준비 닦기와 함께 배치 됩니다.
  11. 근육 (flexor digitorum profundus)의 뱃속의 센터 NIR 프로브를 놓고 팔 뚝에 안전 하 게 부착 합니다.
  12. 프로브를 포장 하 고 어두운 천으로, 주변광 (그림 1C, 그림 1D)에서 간섭 최소화와 팔.
  13. 연구의 기능 sympatholysis 부분을 수행할 준비가 되어 있는 때 LBNP 챔버로 주제를 봉인.

2. 골격 근육 산화 용량

참고: 골격 근의 산화 능력을 측정 하기 위한 실험 절차를 보여주는 대표적인 데이터 추적 그림 2에 묘사 된다. 이 실험 방법은 이전 vivo에서 인 부인18제자리에서 근육 respirometry19에 대 한 검증 된 그리고 광범위 한 수용20를 얻고 있다.

  1. 주제를 계측 (계측) 위에 표시 된 대로.
  2. NIR 프로브를 통해 여전히 2 분 동안 (HHb) 헤모글로빈 모니터링 및 oxyhemoglobin (hbo가2)에 대 한 거짓말을 하도록 지시 합니다.
    참고:이 나머지 기간 주제 계측 프로세스와 관련 된 모든 운동 유물에서 복구를 허용 하 고 안정적인 기본 측정을 보장. 2 분 후 아무 중요 한 변동이 발생 하는 경우 정상 상태, 또는 휴식 기준선에서 주제를 고려할 수 있습니다.
  3. 팔목 폐색 이전 통보 피사체 팔목 팽창 될 것입니다. 5 분 (즉, suprasystolic)에 대 한 수축 기 혈압의 위 팔 갑 이상 30 mmHg를 부 풀 려. 아직도 하 고 팔목 인플레 및 다음 갑 디플레이션 도중 가능한 편안한으로 그들의 팔을 유지 하는 주제를 지시 합니다.
    참고:이 분 상 완 동맥 갑 폐색 프로토콜 밀접 하 게 반영 한다 혈관 폐색에 대 한 현재 허용된 임상 표준 테스트21,,2223,,2425.
  4. (전 갑 폐색) 초기/초기 값과 팔목 폐색 동안 조직 채도 (스토2) 최하 값을 기록 하 고이 두 값 사이의 중간점을 결정.
    Equation 1
  5. 주제를 팔목 폐색에서 복구 휴식 초기 계획 값을 허용 합니다. 일단 주제는 적어도 1 전체 분에 대 한 휴식 기준선을 유지 하 고, 다음 단계를 계속 합니다.
  6. 천천히 따라 지시 하십시오 그리고 그들의 MVC의 50%에서 아이소메트릭 핸드 그립을 유지. 조직 채도가 50% 될 때까지 그들의 isometric 수축을 유지 하기 위해 주제를 권장 합니다. 이 가치를 얻을, 그들의 손을 긴장 하 고 더 이상 운동 또는 운동 필요 하다 그들을 통보 하는 주제에 게.
  7. 3-5 s 내의 다음 정지 운동, 다음 빠른 갑 폐색 시리즈 관리 (1 시리즈 = 1 인플레이션 + 1 디플레이션), 이전 설립18:
    시리즈 #1-6: 5에서 s/5 s
    시리즈 #7-10: 7에서 s/10 s
    떨어져 시리즈 #11-14시 10분 s/15 s
    떨어져 시리즈 #15-18시 10분 s/20 s
  8. 18 인플레이션/디플레이션 시리즈를 완료 한 후 나머지, 주제 조직 채도 초기 초기 계획 값을 반환할 수 있도록 지시 합니다. 이 값은 적어도 2 분 동안 일관 된 남아 있다, 후 2.4 및 2.5 단계를 반복 합니다.
  9. 골격 근육 산화 용량 계산
    1. 그림 2C에 monoexponential 복구 포인트를 형성 하는 개별 18 갑 않기의 각 스토2에 변화의 기울기를 계산 합니다.
    2. 2.7에서 계산 된 데이터는 다음 monoexponential 곡선18,,1926
      y = 끝-Δ x e-kt
      참고: 'y'는 팔목 인플레 동안 상대 근육 산소 소비 속도 (mV̇O2), 운동;의 직후 mV̇O2 나타냅니다 '끝' 델타 ('Δ') 연습; 끝에 나머지에서 mV̇O2 에서 변화를 의미 'k'는 피팅 속도 상수; ' t ' 시간 이다. 타우 1/k로 계산 됩니다.

3. 반응성 충 혈

참고: 반응성 충 혈을 측정 하기 위한 실험 절차를 보여주는 대표적인 데이터 추적 그림 3에서 묘사 된다.

  1. 부정사와 계측 거짓말 주제와 (계측) 위에서 설명한 대로 여전히 가능한 거짓말을 지시 합니다.
  2. 주제는 일관 된 휴식 상태를 달성 했다, 기준 데이터의 적어도 1 분을 기록 하 고 빠르게 suprasystolic 압력 (30 mmHg 이상 수축 기 혈압) 위 팔에 혈압 팔목을 팽창 시키기를 계속.
  3. 5 분 마크에서 급속 하 게 폐의 갑 hyperemic 응답을 기록 하는 동안.
  4. 복구를 잡으려고 3 분 이상에 대 한 녹음을 계속 합니다.
  5. 계산 반응성 충
    참고: 계산 적외선 매개 변수는 그림 3에서 묘사 된다.
    1. 팔목 동맥 폐색의 발병에 기준선 스토2 1 전체 분 사전에 평균 스토2 로 계산 합니다.
    2. 팔목 (슬로프 1로 정의) 폐색27,28동안 불포화 속도 (즉, 평균 기울기)으로 골격 근육의 휴식 신진 대사 속도 결정 합니다.
    3. 다음과 같이 반응 충을 계산.
      팔목 릴리스 (즉, reperfusion 속도, 경사 2로 정의 된), 다음 a) 평균 upslope 리바운드 추적;의 선형 증가 단계 갑 릴리스 순간부터 계산
      b) 높은 스토2 가치 도달 후 팔목 (스토2최대로 표시 됨);
      c) 곡선 (AUC); 아래 반응 충 지역 계산 갑 출시 시점에서 1-, 2-및 3-분 게시 팔목 폐색 (AUC AUC 1 분, 2 분, 그리고 AUC 3 민, 각각); 그리고
      d) hyperemic 보유, 기준선 위의 스토2 에서 변경으로 계산 되며 변화를 퍼센트 (%)로 보고. 이 값은 평균 채도 단계 3.5.1 (위 참조)에서 계산한 마이너스 리바운드 후 폐색 동안 달성 높은 채도로 계산 됩니다.
      참고: 초기 계획 데이터에 큰 차이 hyperemic 예비의 해석에 영향을 크게이 됩니다.

4. 기능 Sympatholysis

참고: 대표적인 데이터 추적 기능 sympatholysis을 측정 하기 위한 실험 절차를 보여주는 그림 4에 묘사 된다.

  1. 주제를 계측 (계측) 위에 표시 된 대로.
  2. LBNP 챔버에 밀폐 인감을 확인 합니다.
  3. 여전히 그리고 나머지에서 거짓말 하는 주제와 초기 데이터의 3 분을 수집 합니다.
  4. 3 분 마크에서 진공 켭니다. LBNP 챔버 내부 압력은-20와-30 mmHg 사이 진공을 조정 한다. 진공의 응답을 모니터링 하는 동안 2 분 동안 실행을 허용 합니다.
  5. 5 분 마크에서 진공을 해제 하 고 3 분 동안 휴식을 허용 합니다.
  6. 8 분 마크에서 시작 리듬 핸드 그립 운동을 통해 주제 안내 음성 프롬프트 (20 %MVC).
  7. 주제는 각 창과 단계 전체에 걸쳐 그들의 쥐 어 짜기를 유지 하 고 각 반복 사이 동안 완전히 편안한 확인 합니다. 그들의 힘 출력을 모니터링 하 고 20%를 달성 하는 확인 각 그립 MVC. 11 분 마크까지 연습을 계속 합니다.
  8. 11 분 마크에서 계속 그들의 리듬 연습을 격려 하는 진공 켭니다. 11 월 13 일 분에서 실행 한 다음 해제를 진공을 수 있습니다.
  9. 계속 추가 2 분 동안 리듬 손 그립 운동 그들의 MVC의 20%를 수행 하는 주제를가지고. 운동 정지시 주제 나머지 조용히 있고 아직도 거짓말.
  10. 계산 기능 Sympatholysis
    1. 정상화 5 분 갑 폐색 동안 결정 총 정한 신호 (TLS), LBNP와 oxyhemoglobin에 변경:
      Equation 2
      Equation 3
    2. 각 이벤트의 마지막 20 분 평균으로 각 이벤트를 계산 합니다.
    3. 운동 유도 감쇠 oxyhemoglobin 감소의 계산:
      Equation 4

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Representative Results

골격 근육 산화 용량

그림 2 적외선 파생 골격 근육 산화 능력 평가 중 대표 참가자 응답을 보여 줍니다. 패널 A 쇼 조직 채도 동맥 5 분 동안 프로필 폐색 프로토콜, 손잡이, 운동과 운동에서 복구 하는 동안 간헐적으로 동맥 폐색에 커 프 스. 패널 B 복구 기간 동안 간헐적으로 동맥 않기 동안 예상된 조직 불포화/다시 saturation 프로필을 보여 줍니다. 불포화의 속도 직접 근육 산소 소비 속도에 비례 하 고 간헐적인 팔목 폐색 기간의 각각에 대 한 패널 C에 그려집니다. 계산 된 근육 산소 소비 복구 데이터는 다음 monoexponential 곡선 고 복구 시간 상수 파생 있습니다. 동일한 접근 방식을 사용 하 여, 연구의 증가 다양 한 근육 그룹 ( 1)에서 건강 및 질병에 대 한 골격 근육 산화 능력을 평가 했습니다.

반 동적인 충 혈

그림 3 대표적인 혈관 폐색 테스트 중 반응성 충 적외선 파생 된 프로필을 보여 줍니다. 이 같은 접근은 연구 인구와 좋은 성공 ( 2) 근육 그룹의 광범위 한 범위에 걸쳐 사용 되었습니다. 하지만 그 테스트는 쉽게 적응 하 고 임상적으로 의미 있는 데이터 뿐만 아니라 혈관 반응성에 대 한 값진 통찰력을 제공 하는 그 적외선 파생 반응성 충 나타냅니다.

기능 Sympatholysis

테이블 3 정확한 같은 혈관 접근 측정 기계 및 임상 관련 결과 보여주는 기능 sympatholysis을 여기에 설명 된 연결을 사용 하 여 기존 문학 요약 되어 있습니다. 건강 한 제어 과목에서 LBNP 가벼운 손잡이에 포개져 근육 산소에 반사 감소 50% (그림 4)에 의해 감쇠는. 심장 혈관 이나 신경 질환 ( 3), 것과 같이 운동을 하는 동안 공감 (vasoconstrictor) 신경 활동 감소를 산소 공급 및 활용, 사이의 균형을 방해 고 기능성 근육 국 소 빈 혈입니다.

Figure 1
그림 1입니다. 실험 설정 및 계측. (A) 대표 실험 설정, 챔버 내부에 LBNP 그들의 다리를 침대에 부정사와 완벽 하 게 계측 거짓말 일반적인 주제와 함께 했다. (B) 지배적인 팔 비트 대 비트 동맥 혈압 측정, 비-침략 적 이길-이길 혈압 장치와 교정 및 비트-비트 시스템의 확인에 대 한 상 완 동맥 혈압 팔목 기구. (C) 비 지배 팔의 계측. 손을 편안 하 게 (데이터 수집 시스템에 연결), 손잡이 동력을 재 밌 고 팔 뚝 근육의 근 적외선 분광학 프로브 계측. (D) 계측, 일단 적외선 optodes (주변 광 간섭 제거)을 검은 비닐 옷감으로 덮여 있다. 또한, 급속 한 팔목 인플레 체계는 상 완 동맥 위에 배치 됩니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.

Figure 2
그림 2입니다. 골격 근육 산화 용량 프로토콜입니다. (A) 대표 주제에서 원시 데이터 추적 적외선, 조직 채도 (스토2) 시간이 지남에 표시를 통해 측정. 안정적인 기준선을 설정한 후 비 지배적인 팔의 상 완 동맥의 불포화 예비 (초기 스토2 와 최하 점 차이)를 설정 하기 위해 5 분 동안 가려진입니다. 복구는 폐색, 후 주제는 50% 아이소메트릭 손잡이, 18 급속 한 팔목 인플레 시리즈 근육 산소 소비 복구 활동을 평가 하기 위해 다음을 수행 하도록 결정 했다. (B) 데이터 분석 각 팔목 폐색 시리즈 다음의 평균 기울기를 계산 하 여 오프 라인으로 수행은 다음 운동; 여기에 가상 팔목 폐색 시리즈 데이터를 사용 하 여 그림. (C) 근육 산소의 복구 시간 상수를 계산 하려면 기울기는 18 빠른 갑 않기 (즉, 포스트 운동 근육 산소 소비, mV̇O2) a에서 의 각각의 시간에 대 한 플롯 이며 적합 한 monoexponential 곡선입니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.

Figure 3
그림 3입니다. 반 동적인 충 혈 실험 프로토콜입니다. 부정사 거짓말 주제와 초기 계획 데이터, 총 동맥 갑 폐색의 5 분와 팔목 릴리스 다음 복구의 적어도 3 분의 1 분 이상 기록. 골격 근육 산화 용량 프로토콜 (그림 2)와이 프로토콜 사이 명백한 중복 note '기준' 팔목 동맥 폐색 이전 시간의 기간을 정의합니다. ' 슬로프 1' 팔목 폐색 동안 불포화 속도 정의 하 고 골격 근육 신진 대사 속도 휴식의 측정으로 간주 됩니다. 국 소 빈 혈 동안 얻은 가장 낮은 스토2 값 ' 스토2 최소 '로 정의 되 고 vasodilate에 허 혈 성 자극의 측정으로 간주 됩니다. 조직 채도 reperfusion ' 슬로프 2'로 표시 됩니다 그리고 반응성 충;의 인덱스 StO2 최대, 반응성 충 혈 '곡선 아래의 영역'은 (AUC). Hyperemic 예약에 대 한 통찰력을 얻으려면, 최대 스토2 기준선에서 백분율 변경 표시 됩니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.

Figure 4
그림 4입니다. 기능 sympatholysis 실험 프로토콜입니다. 왼쪽된 패널: 대표 주제에서 원시 데이터 추적. LBNP 챔버에 부정사 누워 주제와 정상 기준 데이터 수집의 3 분을 허용 합니다. LBNP-20를 설정 2 분 Oxyhemoglobin/myoglobin에 대 한 mmHg 반사 동 정적인 vasoconstriction (파란색 원, 음영된 지역)에 대 한 응답에서 감소 한다. 복구에 대 일 분을 허용 합니다. 20%에서 리듬 손잡이 운동을 수행 하는 주제에 게 MVC (데이터 수집 전에 측정). 리듬 운동 3 분 후 반복-20 mmHg LBNP 2 분 동안 주제 운동을, 계속 되는 동안 LBNP 없이 운동 2 분 뒤. Oxyhemoglobin/myoglobin 감소 크게 감쇠 (빨간 원 모양, 음영된 지역) 해야 합니다. 되지 않은 경우, 불포화의 피사체의 범위 설정 5 분 운동 팔의 상 완 동맥에 혈압 팔목에 부 풀 려. 참고 그림에서 음영 처리 된 영역 에서만 의미 oxyhemoglobin/myoglobin; 변화를 강조 하는 분석 결과 변수 sympatholysis를 계산 하는 데 사용 하는 방법에 대 한 자세한 내용은 프로토콜을 참조 하십시오. 오른쪽 패널: oxyhemoglobin/myoglobin 휴식 및 손잡이 운동을 왼쪽에는 데이터에서 계산 하는 동안에 변화를 유도 하는 LBNP. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.

참조/데이터 집합 연구 인구 샘플 크기
(n)
참가자의 나이
(년 ± SD)
타우 (τ)
(s)
근육 그룹 적외선 변수 보고 장치
Brizendine . (2013) 지구력 운동 선수 8 25 ± 3 19 Vastus lateralis Hbdiff/total 혈액 볼륨 연속 웨이브
(Oxymon MK III)
라이언 . (2014) 젊고, 건강 한 21 26 ± 2 55 Vastus lateralis HHb 연속 웨이브
(Oxymon MK III)
남부 . (2015) 노인 23 61 ± 5 63 손목 flexor Hb비교 연속 웨이브
(Oxymon MK III)
노인 + 심장 마비 16 65 ± 7 77 손목 flexor 연속 웨이브
(Oxymon MK III)
아다미 . (2017) 일반 spirometry와 흡연 자 23 63 ± 7 80 중간 팔 뚝 조직 포화 지 수 (TSI) 연속 웨이브
(Portamon)
COPD 골드 2-4 16 64 ± 9 100 중간 팔 뚝 연속 웨이브
(Portamon)
에릭슨 . (2013) 척수 상해 9 43 ± 11 143 Vastus lateralis Hbo가2  연속 웨이브
(Oxymon MK III)

표 1: 근 적외선 분광학을 사용 하 여 골격 근의 산화 능력을 측정 하는 건강 연속체에 걸쳐 이전 게시 된 보고서의 요약.

참조 연구 인구 근육 그룹 보고 결과 결과 값
라크, J Biomed 선택, 2012 건강 한 남성 팔 뚝 피크 Oxyhemoglobin 28.05 ± 3.15 Μ M
피크 총 헤모글로빈 10.56 ± 1.80 Μ M
피크 HbO에 속도 증가2 0.75 ± 0.22 μ M/s
피크 총 Hb 속도 증가 0.52 ± 0.16 μ M/s
Kragelj, 앤 Biomed 공학과, 2001 주변 혈관 질병 팔 뚝 산소 소비 0.68 ± 0.04 mL/min
피크 시간 153 ± 16 s
Hbo가2 에서 최대 절대 변화 2.93 ± 0.22 μ M/100 mL
Suffoletto, 소생, 2012 체포 후 심장 중 환자 실 Admittants Thenar 저명 채도 속도 -5.6 ± 2 %/min
Resaturation 속도 0.9 ± 0.6 %/sec
Dimopoulos, Respir 관리, 2013 폐 동맥 고혈압 Thenar 저명 21% O2 와 기준선 채도 65.8 ± 14.9%
21% O2 와 o 2 소비 속도 35.3 ± 9.1 %/min
21% O2 와 reperfusion 속도 535 ± 179 %/min
Doerschug, J Physiol 심장 Circ Physiol 오전, 2007 기관 실패 및 패 혈 증 팔 뚝 기본 채도 84%
Reoxygenation 속도 3.6 %/s
시장, 크리티컬 케어 메 드, 2011 부패 시키는 충격 Thenar 저명 기본 채도 80 ± 1.0%
불포화 사면 -9.8 ± 3.7 %/min
복구 슬로프 2.3 ± 1.4 %/sec
McLay, 특급 Physiol, 2016 건강 한 남성 앞쪽에 Tibialis 기본 채도 71.3 ± 2.9%
최소 채도 44.8 ± 8.6%
불포화 사면 -0.1 ± 0.03 %/s
복구 슬로프 1.63 ± 0.5 %/s
피크 채도 82.6 ± 2.3%
McLay, Physiol 담당자, 2016 건강 한 남성 앞쪽에 Tibialis 기본 채도 71.1 ± 2.4%
최소 채도 46.2 ± 7.5%
피크 채도 82.1 ± 1.4%
복구 슬로프 1.32 ± 0.38 %/s

표 2: 반응성 충 혈을 측정 하기 위해 근처-적외선 분광학을 사용 하 여 건강 연속체에 걸쳐 이전 게시 된 보고서의 요약.

참조 연구 인구 % 감쇠
넬슨 메릴랜드, J. Physiol, 2015 건강 한 -57
베 커 근이 영양 증 -13
Vongpatanasin, J. Physiol, 2011 건강 한 -93
고혈압 -14
Fadel, J. Physiol, 2004 전 폐 -84
포스트 폐 경 -19
샌 더, PNAS, 2000 건강 한 -74
듀 켄 씨 근이 영양 증 . 7
넬슨 MD, 신경과, 2014 건강 한 -54
듀 켄 씨 근이 영양 증 -7
가격, 고혈압, 2013 고혈압 치료 전 -52
고혈압 게시물 Nebivolol 치료 -97
한 센, J. Clin 투자., 1996 20 %MVC 건강 한 운동 -92
30 %MVC 건강 한 운동 -125

표 3: 낮은 체 부정적인 압력 및 손잡이 운동, 함께 기능 sympatholysis를 평가 하기 위해 근 적외선 분광학를 사용 하 여 건강 연속체에 걸쳐 이전 게시 된 보고서의 요약.

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Discussion

여기에 설명 된 메서드는 단일 병원 또는 실험실 방문에 반응성 충 혈, 혈관 커플링 및 골격 근육 산화 용량 비-침략 적, 임상 평가 사용.

중요 한 고려 사항

적외선은 상대적으로 강력 하 고 사용 하기 쉬운, 비록 이러한 데이터의 수집 필요 주의 근육 배꼽 바로 위에 optodes의 배치 이동 유물을 피하기 위해 장소에서 단단히 확보 하 고 덮여을 피하기 위해 어렴풋이 점등 방에 검은 비닐 시트 외부 빛 으로부터 근처 적외선의 방해입니다. 또한, 테스터와 주제, 테스트 팀 간의 명확한 통신에 무 겁 게 의존 좋은 품질 데이터를 가져오는. 우리는, 그리고 다른 사람, 그 때 적절 한 관심과 주의 사용 하 여 수행, 적외선은 높은 재현성 단일 연구 방문 시간과 여러 방문10,11,,2429에서 나타났습니다. 또한, 생리 적 결과 변수 여기 보고 (즉, 골격 근육 산화 용량, 반응성 충 혈 및 혈관 커플링)는 실험/임상 개입, 둘 다 시간과 연구 방문 사이 민감한 30 , 31 , 10 , 11.

적외선 결과 변수의 적절 한 보고에 현재 제한 된 합의입니다. 예를 들어 골격 근육 산화 용량을 측정할 때 조사 HbO232, HHb19, Hbdiff30 및 조직 O2 포화 (현재 연구 그리고 다른33의 복구 활동에 맞게가지고 ). 마찬가지로, 결과 변수에서 비슷한 확산 또한 반응성 충 적외선 기반에 대 한 보고 되었습니다. 34 , 35 , 36 , 37 이 불일치의 일부 사용 하는 적외선 장치 유형의 관계 수 있습니다. 예를 들어 주파수 장치 (여기 사용) HbO2 와 HHb, 절대 정량화를 제공 하 고 따라서 급성 변화 총 Hb 콘텐츠 (부정 데이터를 수정 하는 필요)에 의해 영향 하지 않을 수 있습니다. 그러나 반면, 연속파 소자는 크게 영향을 요구 하는 데이터 수정25총 헤모글로빈의 급성 변화.

수정 및 문제 해결

적외선에의 한 중요 하 고 현재 피할 수 없는 한계 그것의 한정 된 침투 깊이 (~ 2 cm) 이다. 따라서 사지 adiposity 크게 줄일 수 있습니다-그리고 심지어 완전히 제거-적외선 신호 잠재적인 과목 심사 때 고려 되어야 합니다. 이 대 한 제어를 조사 측정 하는 것이 좋습니다 팔 뚝 피부 집계 두께, 및 중요 한 주변 adiposity 참가자 제외.

혈관 반응, 혈관 커플링 및 골격 근육 산화 용량 (즉, 약물, 유전자 변이, )을 조절 수 있습니다 어떤 요인 든 지 실제로 여기에 설명 된 기본 끝점 측정에 영향을 미칠 것 이다 . 조사자는 따라서 적응이 프로토콜 때 이러한 요소를 고려 하도록 하 고 미래의 실험 계획.

기능 sympatholysis 결정에 대 한 조사는 신호는 여전히 존재 하 고 운동 LBNP 동안 관찰 차이 신호 또는 측정 오류 손실 때문에 단순히 되지 않은 두 번째 휴식 LBNP 도전 포함 하실 수 있습니다. 3-5 분 휴식 LBNP 도전 반복 하기 전에 초기 계획 값을 전체 복구 oxyhemoglobin 신호 수 있도록 허용 하는 것이 좋습니다.

미래의 응용 프로그램 또는이 기술을 습득 후 방향

NIR 분광학 레이저 빛을 사용 하 여 조직에 산소와 deoxygenated 헤모글로빈의 농도 평가. 반 동적인 충 혈 및 기능 sympatholysis의 측정, 동안 이러한 매개 변수에 상대적인 변화 microvascular 흐름에 변화를 나타내는 여겨진다. 확산 상관 분광학 (DCS)은 신흥 근처-적외선 이미징 산소의 농도 평가 하는 것 뿐만 아니라, 접근-그리고 헤모글로빈, 또한 microvascular 관류38을 정할 수 있습니다. 이 두 가지 이미징 방법 사이 명백한 유사성을 감안할 때, 제안 된 기법으로 DC의 설립 사실상 원활한 것 그리고 microvascular 기능과 관류의 정량화에 추가 통찰력을 제공할 수 있습니다.

일단이 기술을 마스터 응용 프로그램 임상 인구, 심장 마비 등을 운동 옹 졸 및 심장 혈관 기능 장애에 중요 한 기계 통찰력을 제공할 것입니다.

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Disclosures

저자 들은 아무 경쟁 금융 관심사 선언 합니다.

Acknowledgments

이 작품은 텍사스 대학 알링턴 학 제 연구 프로그램 그랜트에 의해 지원 되었다.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Dual-channel OxiplexTS Near-infrared spectroscopy machine Iss Medical 101
NIRS muscle sensor Iss Medical 201.2
E20 Rapid cuff inflation system Hokanson E20
AG101 Air Source Hokanson AG101
Smedley Handgrip dynometer (recording) Stolting 56380
Powerlab 16/35, 16 Channel Recorder ADInstruments PL3516
Human NIBP Set ADInstruments ML282-SM
Bio Amp ADInstruments FE132
Quad Bridge Amp ADInstruments FE224
Connex Spot Monitor Welch Allyn 71WX-B
Origin(Pro) graphing software OrignPro Pro
Lower body negative pressure chamber Physiology Research Instruments standard unit

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References

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의학 문제 132 미토 콘 드리 아 산소 소비 근처-적외선 분광학 sympatholysis 반응성 충 혈 산소 활동
골격 근육 혈관 결합, 산화 용량 및 Microvascular 함수 '원스톱 쇼핑' 근처-적외선 분광학
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Rosenberry, R., Chung, S., Nelson,More

Rosenberry, R., Chung, S., Nelson, M. D. Skeletal Muscle Neurovascular Coupling, Oxidative Capacity, and Microvascular Function with 'One Stop Shop' Near-infrared Spectroscopy. J. Vis. Exp. (132), e57317, doi:10.3791/57317 (2018).

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