Summary
안정적인 파리 (Stomoxys calcitrans) 양육 절차 제공 됩니다. 절차는 다이어트 구성 요소, 장비 및 공급에 대 한 로컬 사용 가능한 재료를 사용합니다.
Abstract
안정적인 파리, Stomoxys calcitrans, 가축, 인간, 동행자 동물 및 야생 동물 전세계의 심각한 해충 있습니다. 지난 20 + 년 동안, 농경 관행에 변화는 여러 국가에서 안정적인 파리의 심각한 발발에 결과. 이러한 발생 가축 생산 및 인간의 레크리에이션이이 해충에 대 한 연구 및 관리 노력을 증가 대 한 공개 요구의 결과로 중단. 실험실 연구에 대 한 안정적인 파리를 양육에 대 한 간단 하 고 저렴 한 절차 제공 됩니다. 절차는 로컬로 사용할 수 다이어트 부품, 장비 및 공급을 사용합니다. 절차는 얼굴 파리 (파리 자리 autumnalis), 경적 비행 거리 (Haematobia irritans), 그리고 집에서 파리 (파리 자리 부채)를 포함 하 여 다른 muscoid 파리를 양육에 대 한 적응 될 수 있다. 절차는 안정적인 비행 puparia 평균 12.5 mg와 ~ 35% 계란 성인 생존을 생성 합니다. 약 3000 파리 각 팬에서 생산 됩니다.
Introduction
안정적인 파리, Stomoxys calcitrans (나), hematophagous 파리 그 고통 스러운 물린 가축 방목 동작을 방해, 통증을 유발 하 고 고통 동반자 동물 전세계 인간의 여가 활동을 중단 있습니다. 미 숙 안정 파리 발효 식물 문제, 동물 폐기물 오염 자주 개발. 변화 농경 관행 및 작물 생산 작물 잔류물, 호주1야채, 브라질2, 사탕수수와 파인애플 코스타리카3안정적인 파리의 심각한 발발. 동물 당 단지 14 안정 파리 경제 임계값4간주 됩니다, 비록 동물 당 2000 파리의 최근 발발5동안 했다. 이러한 감염 수준 가까운 0에 호스트 생산성을 감소 하 고 사망률6발생할 수 있습니다. Agronomically 관련된 발발 결과로 안정적인 파리 새롭게 관심을 받고 있다 고 실험실 식민지에 대 한 수요가 크게 증가 했다.
모든 holometamorphic 곤충에 관해서는 안정 파리 미 숙 또는 애벌레 단계에서 성장에 필요한 영양소의 모든 얻을. 따라서, 양육 시스템의 중요 한 요소는 애벌레 다이어트 또는 기판입니다. 안정적인 비행 거리 애벌레 관찰 되었습니다 필드7 에서 기판의 광범위 한 범위에서 개발 그리고 그들은 기판8,9의 미생물 지역 사회에 따라 결정 됩니다. 자연 애벌레 기판 분해 또는 자주 질소 폐기물 오염 식물 재료를 발효 주로 구성 됩니다.
실험실 양육에 대 한 안정적인 비행 거리 애벌레 기판 식물 재료와 소스를 추가 질소의 일반적으로 구성 됩니다. 수많은 자료 안정적인 비행 거리 애벌레 다이어트에 대 한 사용 되었습니다. 첫 번째 애벌레 다이어트 자연 기판 유사 하 고 귀리 밀 짚, 말 또는 암소 비료10,11발효 포함. 탄수화물 소스 밀 밀기 울12,,1314, 알 팔 파 식사12,,1314 등 상업 정립 화학 전문 개발 제조 업체 협회 (CSMA, 33% 밀 밀기 울, 27% 알 팔 파 식사, 맥주 효 모 40%과 립)13,14,,1516. 질소 소스 포함 효 모 현 탁 액12, 물고기 식사 및 염화 중 탄산염17. 불활성 bulking 자료 귀리 선체12, 사탕수수13, 질 석16, 나무 칩13,18 수송과 땅콩 선체14등이 다이어트에 자주 포함 됩니다.
실험실 양육의 기본 목표는 실험실 실험의 필드 인구를 반영 하는 결과 생산할 예정 이다 가능한 "강포한 유형"으로 순수와 유사한 제품을 생산 하는 것입니다. 이에 번 식 및 선택 최소화 될 필요 유지 유전자 다양성 및 영양 자원 필드에 비교 해야. 보조 목표는 노동과 비용을 최소화 하기 위해. 비용 최소화의 주요 구성 요소는 다이어트 로컬로 사용할 수 있는 구성 요소를 사용 하 여. 안정적인 비행 양육 시스템 제시는 이러한 목표를 충족 하기 위해 개발 되었다.
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Protocol
1. 달걀 컬렉션 (그림 1)
- 부추 기지 컵 준비, ~ 500 mL 비 커 (~ 40 ° C) 따뜻한 물으로 채워진 헝겊의 한쪽 끝을 놓으십시오. 컵의 양쪽을 중복 하 고 고무 밴드와 함께 해결. 컵 위에 다시 옷감의 느슨한 끝을 접어.
- 안정적인 ~ 2 h. 벗 여성에 대 한 8-10 일 오래 된 파리의 장에 컵을 부추 기지 파리 장소는 옷감에 oviposit 것입니다.
- 짜기 세척 병으로 작은 팬으로 egging 옷감의 장과 린스 계란에서 부추 기지 컵을 제거 합니다.
2. 애벌레 양육 팬 준비
-
매체 (수량 1 양육 팬에 대 한) 준비
- 밀 밀기 울 (500 g), 나무 부스러기 (200 g) 및 10 L 플라스틱 접시 냄비에 생선 식사 (115 g)를 결합 하 고 잘 혼합.
- 물 (25 ° C, 1600ml) 염화 중 탄산염 (50 g)를 추가 하 고 해산 때까지 섞는다.
- 건조 재료와 아무 unwetted 소재 되도록 혼합 물 솔루션을 추가 합니다. 냄비에 매체 수준 하지만 압축 하지 마십시오.
-
안정적인 비행 계란 추가
- 팬의 길이 중간에 얕은 밭 고 랑을 확인 합니다.
- 계란 피 펫 (그림 2)와 함께 밭 고 랑에서의 안정적인 비행 계란 (계란 ~ 8000) 1 mL를 입금.
참고: 플라스틱 졸업된 피펫으로 100 삽입 원하는 지점에서 절단 하 여 만든 계란 피 펫 메쉬 스크린 및 다시 함께 접착제로 붙이는 피 펫. - 계란을 건조를 방지 하기 위해 매체의 얇은 층으로 커버.
- 베개 케이스 팬 커버, 고무 밴드와 라벨에 있습니다. 팬 애벌레 방에 배치 (23 ± 2 ° C, 30-50 %RH 및 12:12 [L:D] h photoperiod).
참고: 애벌레 개발 산란의 시간에서 10-14 일 걸립니다.
3. 번데기 처리, 애벌레는 매체의 가장자리에 이동 7-9 일 후에 산란 Pupariate 13 또는 14 일
- 주로 밖으로 매체의 표면에 형성 하 고 깨끗 한 냄비에 배치 하는 빵 껍질 아래 팬의 가장자리 주위에, puparia 특 종.
- 팬, puparia, ½에 ¾ 물을 가득 채우십시오. Puparia와 매체의 대단히 짧은 시간을 휴식. 매체의 밀 밀기 울 및 단백질 구성 요소 puparia 동안 싱크 > 1 일 오래 된 float19.
- 부동, puparia 소재와 소 쿠리와 일련의 체 (#5, #7, #12, #20) 나머지 매체를 제거 하는 세척 일부 중간 구성 요소를 제거 합니다. #12 체는 puparia 수집 그리고 #20 구로 들어가기에서 고체 폐기물을 유지 합니다. 싱크 스프레이와 체 사이 puparia 워시.
- 깨끗 한 냄비에, puparia #12 체에 린스. 물 ½ 전체 팬을 입력 합니다. 부동 puparia는 소 쿠리에 부 어 하 고 초과 물이 배수 수 있도록.
- 전송 팬과 건조 화면 puparia 고갈이 고 드라이 (그림 3)까지 둡니다.
4. 번데기 선반, Puparia 수집에 대 한 대체 방법 번데기 선반18 이다
참고: 선반에서에서 이루어집니다 플라스틱 컷의 조각 10 L 요리 팬 (길이 31.9 m x 세로 10.2 c m x 높이 10.2 c m)의 끝에서.
- 2.1에 설명 된 대로 매체를 준비 합니다. ~7.5 cm ~2.5 cm 깊이 한쪽에서 팬에 테이퍼 매체는 다른 깊이에.
-
양육 팬 및 선반 (그림 4)와 함께 크롤 링에서 애벌레를 방지 하기 위해 테이프의 얕은 끝에 중간에 선반을 배치.
- 스폰지 (~14.5 x 9.0 x 4.5 c m3, 재생된 셀 룰 로스) 포화 (30.5 x 42 cm2, 면) 물 젖은 헝겊과 매체에서 한 반 인치 약 선반에 장소에 포장.
-
2.2에 설명 된 대로 계란을 추가 하 고 진행 하기 전에.
- 스폰지 유지 촉촉한 팬 매일 확인 합니다.
- 선반, 스폰지 깨끗 한 접시에 천에서 린스 puparia 이동 및 산란 후 14 일 소 쿠리에 부 어.
5입니다. 품질 관리
- 팬 (전체 무게)에서 생산 puparia의 모든 무게.
- 100 puparia 격리, 무게 그리고 9 cm 배양 접시에에서 배치.
- 수와 섹스 성인 ~ 5-8 일 후 출현 속도 섹스 비율을 결정. 필요한 경우 나중에 계산을 위해 냉동 실에 등장 성인 접시를 저장 합니다. 파리는 그들의 눈의 모양과 fronto 궤도 격판덮개20 또는 낮은 배율에서 생식 기의 너비에 의해 sexed.
- 레코드 총 무게, 무게 100 puparia, 고 수가 등장된 성인 남성 및 여성.
6. 혈액 준비
- 19 L 양동이 물 500 mL에 시트르산 나트륨 tribasic이 수화물의 70 g를 포함 하는 로컬 도살 장에서 신선한 소 혈액을 수집 합니다. 저 어 적극적으로 5-10 분 위한 혈액 및 실험실에 반환.
- 제거 하는 소 쿠리를 통해 긴장 혈액 응고 하 고 수집 및 냉동 (-20 ° C)에서 저장소의 날짜와 레이블 2 L 용기에, 분할.
- 냉동 고와 냉장고에 있는 장소에서 제거 컨테이너 2 일 전에 필요합니다. 피는 한번 해 동 하 고 최대 1 년 동안 냉동 실에 저장 ~ 2 주 동안 사용할 수 있습니다.
7. 성인 유지 보수
- 감 금 소, 선 케이지 바닥 청소를 촉진 하기 위해 정육점 종이 준비.
- 각 장에 50 g의 건조 안정적인 비행 pupae (~ 3500)를 배치 합니다. 성인 eclose 번데기 처리 후 며칠 몇 시간
- 장소는 신선한 혈액 먹이 대 한 각 케이지 위에 여성 냅킨을 젖 었. 성인 일수로의 24 시간 안에 먹이 시작 하 고 산란 (출현 후 9-10 일) 전날까지 매일 반복 합니다.
- 산란 (제 1), 후 케이지 4-8 h에 대 한 냉동 실에 놓고 종이 제거, frass 측면과 바닥 뜨거운 물에서 헹 구 고 세탁 세제와 염소 표 백제와 함께 모든 서피스를 제거 하 여 청소 합니다. 케이지 뜨거운 물으로 헹 구 고 건조 허용.
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Representative Results
애벌레 pupariate 10-14 일 성인 등장 산란 후 14-16 일. 생성 시간, 달걀 계란, ~ 24 일 이다. 3 다른 bulking 요원와 두 식민지 5 월 2013 1 월 2017에 대 한 양육 데이터는 그림 5에 표시 됩니다. 미루나무 준 최고의 수익률, 3867 ±1442 (
± 표준 편차) 무게 74 ±19% 일수로와 12.5 ±1.6 mg pupae 성인 설립된 실험실 식민지에 대 한 파리 2,872 ±1294 생산. 섹스 률은 약간 여성 0.97:1 (남성: 여성, 77,141 파리 1,184 팬에서 sexed) 쪽으로 편견. 성인 생존에 계란은 약 36%입니다. 불행히도, 미루나무 부스러기 소나무 부스러기를 자주 사용 하 게 강제를 더 어렵게 되고있다. 소나무와 생산은 낮은, 팬, 당 ~ 1700 성인 크기는 약간 큰, 13 mg.
번데기 선반 메서드를 사용 하 여 애벌레의 약 85%는 선반에 마이그레이션, puparia는 클리너, 있으며 선반에 수집 매체의 대부분은 쉽게 부양에 의해 제거. 이 메서드는 또한 양육 방법을 비교할 때 애벌레의 개발의 속도 모니터링 하는 데 사용할 수 있습니다. 단점은 팬 스폰지 유지 촉촉한을 보장 하기 위해서 매일 모니터링 해야 합니다 그입니다.
중간 구성 요소에 대 한 현재 비용은 $1.17/팬 또는 $0.39/1000 안정적인 파리 생산 (표 1).
| 구성 요소 | 수량 | 비용/팬 |
| 밀 밀기 울 | 500 g | $ 0.35 |
| 나무 부스러기 | 200 g | $ 0.06 |
| 어 분 | 115 g | $ 0.27 |
| 물 (≈25 ° C) | 1600ml | |
| 염화 중 탄산염 | 50 g | $ 0.48 |
표 1: 안정 비행 애벌레 다이어트. 결합 마른 재료 염화 중 탄산염을 제외 하 고 철저 하 게 혼합. 물에 염화 중 탄산염을 추가 하 고 해산 때까지 섞는다. 염화 중 탄산염 해결책 건조 재료와 아무 unwetted 소재 되도록 혼합을 추가 합니다. 1 팬에 대 한 수량입니다.
그림 1: 안정적인 비행 계란을 수집 하기 위해 사용 되는 재료. 컵을 부추 기지, 세척 병 및 계란을 받기 위한 작은 팬을 짠 다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 2: 계란 팬.에 준비 된 중간에 적용 되 고 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 3: puparia 건조를 위해 사용 하는 기구. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 4: 번데기 선반 애벌레 양육 팬. Puparia의 위에 안팎 옷감의 축적 note 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 5: 양육 데이터의 요약. 안정적인 비행 1 월 2017 세 bulking 요원, 미루나무 부스러기, 소나무 부스러기 및 vermiculite와 두 식민지를 사용 하 여 2013 년 5 월부터에서 양육에 대 한 팬 (A), puparia 무게 (B), 및 팬 (C) 당 성인 당 puparia의 수를 의미 . 실험실 식민지는 약 10 년 동안 우리 연구실에서 지속적으로 reared 되었습니다. PL 식민지는 랭 커스터 주, 네브라스카, 2014 년가 미국에에서 유제품에서 수집 된 야생 파리에서 설립 되었다. 오차 막대는 표준 편차를 나타냅니다. N은 데이터 기초는 팬의 수를 나타냅니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
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Discussion
안정적인 파리 있습니다 실제로 기판의 광범위 한 다양 한 개발 하 고 실험실에서 미디어의 많은 종류에 reared 수 있습니다. 나무 부스러기와 vermiculite bulking 요원으로 사용 했습니다. 질 석 작용, 하지만 어려운 매체 양육에서 분리 puparia 만들었고 비싼 (~$0.60/pan)를 했다. 아마이, puparia는 매체에서 분리의 추가 경직으로 인해 일수로 vermiculite, 나무 부스러기에 대 한 75% 57% 낮은 했다. 미루나무 부스러기 유사한 질 석, 어렵지만 때때로 조달 했다. 가장 중요 한 구성 요소는 식물 또는 cellulosic 자료를 발효 하 고 "열기" 또는 잘 화난 매체 및 암모니아 질소21,22를 유지 나타납니다. 안정 된 비행 거리 애벌레 순수한 배설물, 선호 하는 식물성 물질과 혼합 세 배설물에서에서 찾을 수 없습니다. 마음에 이러한 생각으로 여기에 설명 된 양육 절차 양육 안정적인 파리 저렴 한 절차를 개발 하 로컬로 사용할 수 있는 재료에 적용할 수 있습니다.
이러한 메서드를 사용 하 여 reared 파리 필드 수집 파리에 크기에 비교할 수 있습니다. 날개 길이 안정적인 비행 몸 무게23와 상관 된다. 때문에 야생 파리의 날개는 마모 자주, 우리는 날개 길이의 지표로 서 discal 중간 셀의 길이 사용 합니다. 이 방법으로 reared 249 파리의 discal 중간 셀의 평균 길이 2.49 ± 0.15 m m (범위 1.96-2.81) 2011과 이타카 근처 2012 년의 여름 동안 끈 적 트랩에 수집 3,713 파리의 동안, NE 2.52 ±0.21 m m (범위 1.80-3.58) (unpubl. 데이터). 이 방법으로 reared puparia의 무게 이전 양육 프로토콜14,24 와 생존에 대 한 보고는 보다 높은, 성인 달걀, 필드25에서 5% 보다 높은.
다른 muscoid 파리 면 파리, 경적 파리, 그리고 집 파리를 포함 하 여 양육 비슷한 메서드를 사용할 수 있습니다. 얼굴 비행 및 경적 비행 애벌레 신선한 소 똥 매체가 필요합니다. 하우스 비행 매체 470 g 송아지 피드, 500 g 밀 밀기 울, 물 1600 mL (25 ° C)의 이루어집니다. 안정적인 파리 처럼 경적 비행 성인 혈액 피드. 비행 및 집 파리 얼굴 성인 우유 가루와 설탕의 건조 혼합물을 먹이 수 있습니다. 비행 및 집 파리 얼굴 성인 또한 물의 원천이 필요. 100ml 플라스틱 병 뚜껑 통과 치과 심지와 함께 사용 합니다.
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Disclosures
저자는 공개 없다.
Acknowledgments
우리는 우리의 곤충 양육 절차를 개선 하기 위한 제안으로 기술 지원에 대 한 년 동안 우리와 함께 일 한 수많은 학생과 안토니 Weinhold 감사 하 고 싶습니다.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Diamalt | Premier Malt Products, Inc., Saddle Brook, NJ | 2540 | |
| CSMA Fly media | Purina Animal Nutrition, Arden Hills, MN | 5S6Z | |
| Thin Maxi Pad | The Tranzonic Co., Cleveland, OH, USA | 5001M | |
| Calf Manna | MannaPro, Chesterfield, MO, USA | Manna Pro | |
| Ammonium Bicarbonate | Spectrum Chemical Manufacturing Corp, Gardena, CA | A1125 | |
| Wheat bran, Coarse | Siemer Milling Company, Teutopolis, IL | ||
| Wood shavings | Tractor Supply Company, Brentwood, TN | 502770699 | |
| Fishmeal | Consumer Supply Distributing, North Sioux City, SD | F1550 | |
| Adult cages | All Aluminum Window Company, Lincoln, Ne | Custom | 45 × 45 × 45 cm, 18 × 16 mesh aluminum screen, stockinette access |
| 9 × 28 cm black cotton cloth | Robert Kaufman Fabrics, Los Angeles, CA | K040-114 | Egging cloth |
| 10 L plastic dish pans | Rubbermaid, Saratoga Springs, NY | FG2951ARWHT | Larval pans |
| Stockinette, Cotton, 12 inch x 25 yard roll | Tex-Care Medical Company, Burlington, NC | 91311-225 |
References
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