Summary
Intestinal obstruksjoner er en delvis eller fullstendig blokkering av tarmen kan forårsake alvorlige magesmerter, kvalme, oppkast og hindrer passasje av avføring. Denne fremgangsmåten for å opprette intestinal delvis obsructions i mus er pålitelig i å studere mekanismene bak patologisk cellevekst og død i tarmen.
Abstract
Intestinal obstruksjoner, som hindrer eller blokkere peristaltiske bevegelser, kan være forårsaket av abdominal adhesjon og mest gastrointestinal (GI) sykdommer som tumorous vekster. Men mobilnettet remodeling mekanismer involvert i, og skyldes, intestinal obstruksjoner er dårlig forstått. Flere dyr modeller av intestinal obstruksjoner har blitt utviklet, men musen modellen er mest pris/tid effektivt. Musemodell bruker kirurgisk implantering av en intestinal delvis hindring (PO) som har en høy dødelighet, hvis det ikke utføres riktig. I tillegg mus mottar PO kirurgi ikke utvikle hypertrofi hvis en passende blokaden ikke brukes eller ikke riktig plassert. Her beskriver vi en detaljert protokoll for PO kirurgi som gir pålitelig og reproduserbar intestinal obstruksjoner med en svært lav dødelighet. Denne protokollen bruker en kirurgisk plassert silikon ring som omgir ileum som delvis blokkerer fordøyelseskanal bevegelighet i tynntarmen. Delvis blokkeringen gjør tarmen bli utvidet på grunn av stans av fordøyelseskanal bevegelse. Utvidelse av tarmen induserer glatt muskel hypertrofi på muntlig side av ringen som utvikler gradvis over 2 uker før det fører til død. Den kirurgiske PO mus modellen tilbyr en i vivo modell av hypertrofisk tarmen tissue nyttig for studerer patologiske forandringer av intestinal cellene glatt muskelceller (SMC), interstitiell celler av Cajal (ICC), PDGFRα+, og nevrale celler under utviklingen av intestinal obstruksjon.
Introduction
Intestinal obstruksjoner er en delvis eller fullstendig blokkere i små eller store tarmen som hindrer fordøyd mat, væske og gass i bevegelse gjennom tarmen1. På grunn av hindringen induserer blokkering intestinal vegger å bli tykkere, smalere lumen2. Intestinal obstruksjon kan oppstå som følge av mage eller bekken operasjoner som forårsaker mage vedheft vev formasjonen eller GI lidelser som inflammatorisk tarm sykdommer (Crohns sykdom), divertikulitt, brokk, Tarmslyng, striktur, intussusception, forstoppelse, fecal impaction, pseudo obstruksjon, kreft og svulster3,4,5. Intestinal obstruksjoner i disse tilfellene føre ofte til hypertrofi av tunika muscularis av tarmen6.
PO av lumen induserer intestinal oppblåsthet, og øker glatt muskel lagtykkelse rundt hindringen i respons til fortsatt funksjonell peristalsis7,8,9,10, 11,12,13. Dyr modeller av intestinal PO er utviklet for å studere glatt muskel hypertrofi i mus7, rotter10, marsvin11, hundene12og kattene13 som konsekvent utvikle lignende hypertrofi i den intestinal muskelgrupper lag.
En musemodell av intestinal PO er den mest kostnadseffektive måten å generere og studere intestinal obstruksjoner i vivo. Tynntarmen hindringer utføres i mus ved hjelp av en silikon ring kirurgisk plassert rundt på ileum. PO musene viste en tidlig økning i antall celler (hyperplasia), og en økning i muskel lagtykkelse (hypertrofi) etter PO kirurgi8,15. SMC er den primære plast celler som vokser i glatt muskel lag svar hypertrofisk forhold14, men andre celler som ICC og PDGFRα+ celler som er nært forbundet med SMC, er også på nytt. Vi har tidligere rapportert at PO musene utvikle hypertrofi i tynntarm, der SMC er dedifferentiated til PDGFRα+ celler som er svært proliferativ7,15,16. Derimot ICC utartet og mistet i forstørret glatt muscle lagene under utviklingen av intestinal obsruction7. En annen stor fordel av PO modellen er dens evne å skape enteric nervesystemet og spre neurogenic motor mønstre. Den store spre neurogenic motoren mønsteret i tynntarmen musen er overføre motoren komplekse (MMC), som er neurogenic og krever ikke ICC eller elektrisk langsom bølger17. PO modellen gir klar innsikt i hvordan MMCs og enteric nerver er ombygd av delvis hindringer.
Her foreslår vi en murine protokoll for intestinal PO kirurgi med en silikon ring. Mus mottar PO kirurgi pålitelig produsere hypertrofi i tunica muscularis av tynntarm. Innen hypertrofisk muskler, er SMC, ICC, PDGFRα+og neuronal celler dramatisk remodeled.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Følgende protokollen er godkjent av institusjonelle Animal Care og bruke Committee (IACUC) på University of Nevada-Reno (UL) dyr ressursene og overholder alle institusjonelle etiske retningslinjer for bruk av forskning dyr.
1. dyr.
- Få eldre (4-6 uker gamle) C57BL/6 mus veier mellom 20-30 g. House kolonien av laboratoriet mus i et sentralisert dyr anlegg på UL dyr ressurser.
2. delvis hindringer kirurgi
Merk: Operasjoner utføres i et rom dedikert til kirurgiske prosedyrer. Alle kirurgiske instrumenter er autoklaveres før kirurgi. Sterilt kirurgisk kjoler og hansker skal bæres av alt personell i kirurgiske rommet hele tiden.
- Forberedelse for kirurgiske musen
- Sjekk bedøvende levering systemet for å sikre tilførsel av oksygen og isoflurane er tilstrekkelig for prosedyren. Slå på forsyning oksygen. Slå på gass flowmeter og tilpasse den til 500-1000 mL/min. sted dyret i induksjon kammeret og forsegle toppen.
- Slå på isoflurane vaporizer 5%, og overvåke dyret til den blir liggende. Bytte bedøvende levering systemet til nesen kjegle.
- Tømme induksjon Mysteriekammeret eventuelle gjenværende gass med oksygen, så slå av induksjon kammer linjen samtidig forpart linjen åpen.
- Fjern dyret fra kammeret og forsiktig plassere ophthalmica salve på øynene av dyret.
- Plass nesen kjegle på en forvarmet varm pad når gass fortsetter å strømme.
- Endre oksygen flyten til 100-200 mL/min, med 2-3% isoflurane. Hvis dyret begynner å flytte, gentlyrestrain dyret med nesen kjegle på til fullt anesthetized igjen.
- Overvåke åndedrett og svar til stimulering under prosedyren og justere prosenten for isoflurane (2-5%) etter behov. Dyr anesthetization nivå overvåkes av mangel på tå knipe refleks før operasjonen utføres.
- Injisere smerte medisin (buprenorfin, 1 µg/g kroppsvekt) intraperitoneally fra webområdet snitt.
- Bruk hår fjerning lotion på bakkroppen med en ren bomullspinne. La lotion sitte i 3-5 min på musen, deretter fjerne håret med gasbind og bomull vattpinner. Gjenta dette trinnet til alle hår er fjernet fra magen av mus.
- Rengjør huden med 70% etanol med gasbind og bomull vattpinner. Bruke swabsticks eller povidon-joden løsning å feilfri magen.
- Delvis hindringer kirurgi
- Drapere kirurgiske området 25 x 50 cm sterilt papir med en 2,5 x 2,5 cm åpning i midten for kirurgi området. Sikre drapere til dyret ved å plassere sterilt strimler på grensene for åpning og hud.
- Gjøre en ~3.0 cm abdominal snitt langs bruker nr 15 bladet skalpell, sikrer at bare huden er avbildning og unngå kutte i musculoperitoneal laget denne gangen.
- Bruke tang og kirurgisk saks, forsiktig skille huden fra musculoperitoneal laget uten å forårsake noen snitt på musculoperitoneal laget. Etter at lagene har vært tilstrekkelig skilt (ca 1 cm x 4 cm), identifisere linea alba musculoperitoneal lag og kutt ~ 2 cm langs linea alba å avsløre intraperitoneal hulrom mikro-tang og saks.
- Forsiktig finne og identifisere cecum. Sakte og forsiktig fjerne cecum fra intraperitoneal hulrommet med mikro-tang, bringe den proksimale kolon og ileum med cecum utenfor på det sterile drapere. Umiddelbart fukt i tarmen tissue med 0,9% sterilt saltvann fuktet gasbind og holde eksponert vev fuktet hele tiden mens de er utenfor bukhulen.
- Finne og identifisere mesentery mellom ileum og proksimale kolon. Gjøre et snitt (~ 1 cm) parallell til, og like under, ileum, i mesentery og unngå kutte noen blodkar.
- Ta en autoklaveres silikon ring (6 mm i lengde, 4 mm ytre diameter, 3,5 mm indre diameter). Skjær langs for å åpne slangen og ringen med mikro-tang.
- Sett ene enden av åpnet ringen gjennom snittet i mesentery vev. Tilbake ringen til en fullført ring-figur ved å bringe en ende i kontakt med hverandre, med ileum omgitt av ringen.
- Sikre at silikon tetning ringen helt omgir ileum, lukker ringen med Sutur og forsiktig plassere tarmen tilbake i intraperitoneal hulrom.
- Kirurgi nedleggelse
- Utføre en enkel Sutur kontinuerlig på musculoperitoneal laget langs linea alba lukke musculoperitoneal såret med en absorberbare Sutur. Etter suture er fullført, fuktet blødninger med 0,9% sterilt saltvann ren gasbind.
- For å fullstendig lukke såret, med en egen nylon Sutur, utføre en enkel Sutur kontinuerlig på huden.
- Når begge suturer har blitt fullført, rense såret med nye swabstick eller povidon-jod.
- Intraperitoneally injisere antibiotika (gentamicin, 150 μL per musen 20-30 g kroppsvekt).
- Etter ferdigstillelse av prosedyren, deaktiverer isoflurane vaporizer og tillate dyr å puste bare flyter starte oksygen til den økende bevissthet.
- Når Dyret er våken, plassere dyret i en egen utvinning område med termisk støtte til helt frisk.
3. etter operasjon observasjon.
- Etter ferdigstillelse av kirurgi, flytte dyrene til en inkubator i utvinningen rommet der temperatur og luftfuktighet er regulert. Overvåk dyrene postoperatively hvert 15 min for den første timen da enhver 30 min for den andre timen mens dyrene i inkubator.
- Så snart den foreskrevne observasjonen er fullført, flytte dyr til sine egne personlige bur og overvåke dem daglig for klinisk indikasjoner smerte18og sikre at kirurgisk såret er healing riktig uten noen tegn på komplikasjoner ( dehiscence) tilstede.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Delvis hindringer (PO) ble kirurgisk indusert i en måned gammel mus ved å plassere en silikon ring rundt ileum nær den ileocecal sphincter. Denne ringen laget en delvis blokkering i ileum. Falske operasjoner (så) ble også utført uten en ring på alderen/sex matchet mus og disse musene viser ikke noen symptomer tilsvarende i PO mus. Mus raskt fikset PO kirurgi i noen timer. De viste ingen åpenbare atferdsendringer eller svakhet innen den første uken, men etter den første uken, de gradvis begynte å vise tegn på PO: en oppblåst mage og produksjon av færre og mindre fecal pellets. PO mus ble ofret på 8 og 13 dager innlegg-PO kirurgi med SO kontroll mus. Tynntarmen var delvis fylt oppblåst på 8 dager innlegg-PO kirurgi og fullstendig fylt og oppblåst på 13 dager innlegg-PO kirurgi, sammenlignet med så kontroll mus (figur 1A). Fecal pellet formasjonen i tykktarmen 8 og 13 dager innlegg-PO kirurgi mus ble redusert i forhold til SO kontroll mus (figur 1B). Chymet vev som var bare oppstrøms ringen ble dissekert og glatt muskel ble analysert av hematoxylin & eosin (H & E) flekker. Den glatte muskulatur laget var forstørret på 8 dager innlegg-PO kirurgi og mye lenger forstørret på 13 dager innlegg-PO kirurgi (figur 2). Vi har også observert endringer i SMC, ICC, PDGFRα+og neuronal celler i tunica muscularis i PO mus ved hjelp av immunochemistry. Hver celle var merket med celle-type spesifikke indikatorer: MYH11 (SMC), KIT (ICC), PDGFRA (PDGFRα+ celler) og PGP9.5 (neuronal celler). SMC er funnet i tre lag av vev: langsgående muskel (LM), sirkulære muskel (CM) og muscularis mucosae (MM) i ileum. SMC vokste gradvis til rask priser på alle tre lagene på 8 og 13 dager innlegg-PO kirurgi (Figur 3). Som for ICC ligger deres subpopulasjoner i dyp muskel plexus (DMP), myenteric-regionen (min) og subserosal-regionen (SS). Men ble ICC-DMP, ICC-min, og ICC-SS utartet i intra/intermuscular lag (Figur 3). Ligner ICC subpopulasjoner, subpopulasjoner av PDGFRα+ celler (PαC) ligger i DMP, MY og SS. I PO mus, PαC-DMP, PαC-min, og PαC-SS ble dynamisk ombygd i intermuscular lag av PO mus: de vokste i 8 dager innlegg-PO kirurgi og utartet på 13 dager innlegg-PO kirurgi (Figur 3). Endelig var myenteric plexus (MP), submucosal plexus (SP), subserosal neurons (SS) og enteric motor neurons (EMN) betydelig mistet i inter/intramuskulær regioner i PO mus på 8 og 13 dager innlegg-PO kirurgi (Figur 3).
Figur 1. Intestinal delvis hindringer kirurgisk indusert i en musemodell. PO ble indusert ved PO kirurgi. En måned gammel mus var anesthetized, sitt underliv ble åpnet av et snitt, en silikon ring ble plassert rundt på ileum og åpningen ble stengt av suturing. Mus som gjennomgikk kirurgi kunne gjenopprette 8 eller 13 dager. Alder og kjønn matchet slik mus ble operert på samme måte som PO mus bortsett fra det var ingen plassering av en ring. (A) brutto bilder av mage-tarmkanalen hos mus som gjennomgikk PO eller SO kirurgi. Bildene er av mus på 8 og 13 dager etter operasjonen (B) mage-tarmkanalen dissekert fra mus i A. tynntarmen oppstrøms ringen var oppblåst på både 8 og 13 dager innlegg-PO kirurgi og fecal pellets i tykktarmen var også mindre både 8 og 13 dagkirurgi innlegg-PO som sammenlignet med 13 dager innlegg-så kirurgi mus skyldes delvis obstruktiv silikon tetning ringen. Skala barer er 0,5 cm. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Figur 2. Glatte muskulaturen laget endret i kirurgiske musemodell. Representant H & E farging av chymet tverrsnitt fra intestinal PO, så og ingen operasjon (NO)-mus. Glatt muskel (SM) og mucosa (Mu) lag er tykkere i PO mus på 8 og 13 dager innlegg-PO kirurgi enn de i SO og ingen mus. Skala barer er 50 µm. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Figur 3. Dynamisk mobilnettet remodeling i glatt muskel hypertrofi forårsaket av intestinal delvis hindringer. Representant AC confocal laser skanne bilder av hypertrofisk chymet tverrsnitt, fra PO, så og ingen mus. Immunohistochemically farging med antistoffer (rød) av MYH11 (SMC), KIT (ICC), PDGFRA (PDGFRα+ celler) eller PGP9.5 (NC, neuronal celler), co farget med DAPI (blå). SMC i mucosa muscularis (MM) sirkulære muskel (CM), og langsgående muskel (LM) lag og PDGFRα+ celler i dyp muskel plexus (DMP), myenteric område (min) og subserosal-regionen (SS) vokste i hypertrofisk ileum på 8 og 13 dager innlegg-PO kirurgi mens ICC i DMP og min SS, myenteric plexus (MP), submucosal plexus (SP), subserosal NC (SS) og enteric motor neurons (EMN) var degenerert. Skala barer er 50 µm. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Figur 4. Resultatene av silikon ringene som er for stor, for små eller feilplassert på tykktarmen. (A) ingen glatt muskel hypertrofi utvikler i ileum hvis ringen er for stor til å forårsake hindring. Ringen gjorde liten eller ingen blokkering av ileum. (B) utvikler Intestinal iskemi i ileum hvis ringen er for liten. Ringen laget en nesten fullstendig blokkering av ileum, som kan skade vev og føre til tidlig død før hypertrofi utvikler. (C) glatt muskel hypertrofi utviklet i tykktarmen på grunn av en feilplassert ring. Ringen på tykktarmen ble flyttet av lumenal innhold (avføring), som skadet mesentery blodkar og forårsaket massive hemorrhaging i tykktarmen. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Vi har vist at mus mottar intestinal PO kirurgi konsekvent og reproduserbar utvikle intestinal glatt muskel hypertrofi, som etterligner menneskelige intestinal obstruksjon. Intestinal obstruksjon operasjoner har blitt utviklet for forskjellige dyr inkludert mus7, rotter10, marsvin11, hunden12 og kattene13. Musemodell av intestinal obstruksjonen har tid, pris, størrelse og fenotypiske fordeler over andre større dyr modeller. Utviklingen av hypertrofi i mus eller rotter tar bare 10-14 dager10sammenlignet med 2-4 uker i guinea griser, hunder og katter11,12,13. Kostnad for å kjøpe og vedlikeholde mus er også en enorm økonomisk fordel sammenlignet med andre modeller. I tillegg er mus liten og lett å håndtere for PO kirurgi. Viktigst, utvikle mus mottar PO kirurgi gradvis og omfattende hypertrofi i tynntarmen mens andre større dyr utvikle mindre omfattende vekst.
Det er flere viktige faktorer å vurdere når du prøver å produsere pålitelige hypertrofi gjennom tarmen PO kirurgi. Flere forskningsgrupper har brukt ringer i ulike størrelser og plassert en ring på ulike steder langs tarmen opprette delvis hindringer7,9,10,11,12, 13,14. Men bør en silikon ring av optimal størrelse brukes for mus som en større ring oppretter liten eller ingen blokkering i ileum der hypertrofi bare delvis, eller aldri, utviklet (figur 4A). Motsatt, når en ring var for liten, opprettes det nær fullstendig blokkering av ileum som forårsaket intestinal ischemia og/eller skadet mucosa forårsaker sepsis, fører til tidlig død innen en uke (figur 4B). Vi brukte en silikon ring av en bestemt størrelse (6 mm i lengde, 4 mm ytre diameter, 3,5 mm indre diameter) på en måned gammel mus (Tabell for materiale). Forskjellige størrelser av ringene bør testes og brukes til mus i forskjellige størrelser for å skape optimale blokkering i ileum. En annen viktig faktor er plasseringen av ringen på tarmen. Ileum, nær ileocecal ventil, er det beste stedet å plassere ringen for å produsere robust delvis hindringer. Andre regioner, for eksempel jejunum eller regioner av ileum fra ileocecal ventil, har hatt en lignende ring plassert på dem for å indusere hypertrofi7. Men på grunn av serosal overflaten av tarmen blir svært smurt med peritoneal væske, flyttes en ring plassert på disse delene av tarmen lett på grunn av tarmen som presser fecal materiale gjennom kontraktile kraft. Som ringen skyves ned lengden av tarmen, skjærer av hvem arterier innerveres i regionen myenteric i tarmen, forårsaker hemorrhaging. Når en ring settes på slutten av ileum ved ileocecal ventil, det er fysisk forhindret fra å flytte videre store natur cecum. Cecum kan lett lokalisert og tatt ut av magen i kirurgi for å finne ileocecal ventiler regionen som cecum kobles til både ileum og proksimale kolon. Ileum og kolon koblet til cecum ligne ganske og en ring kan tilfeldigvis plasseres på det proksimale kolonet i stedet for ileum. Når en ring var feilplassert på proksimale kolon, også sett på jejunum, ringen ble presset nedover og skadet hvem arteriene, forårsaker omfattende hemorrhaging (figur 4C). For å unngå denne misplacement, bør ileum alltid riktig plassert og identifisert før ringen er satt på plass. Ileum går inn i cecum mens tykktarmen går inn i en side av cecum posen.
Denne PO kirurgi protokollen er regnet som en større kirurgi for mus. Alle kirurgiske instrumenter og materialer må steriliseres før bruk, og operasjonen skal utføres i rene omgivelser på et dedikert kirurgi rom for å redusere forurensning, som kan føre til infeksjon og betennelse i mus. I tillegg bør en smerte medisiner gis til mus etter operasjonen. Vi valgte å bruke en langsom løslate versjon av buprenorfin, som er effektiv opp til 7-8 h22. Videre etter operasjonen har mus problemer med å tygge og svelge fast føde. For opp til fem dager etter operasjonen, musene bør være utstyrt med myknet mat (solid diett med litt vann til myke mat) og byttet til normal solid diett etter 5 dager.
Våre intestinal PO-kirurgi gir en i vivo hypertrofi modell for intestinal obstruksjonen der SMC, ICC, og PDGFRα+ celler er unormalt remodeled. Denne PO modellen er også ideelt egnet til forståelse hvordan enteric neurons er endret av PO og hvordan motor hovedaktivitetene påvirkes i små og store tarm23. Disse cellene kan være dynamisk remodeled pathological betingelser og under kulturperler forhold15,16. Vi observerte at disse cellene i SO mus oppførte seg litt annerledes enn vanlig mus uten operasjon (figur 2 og Figur 3). De fleste intestinal obstruksjon hos mennesker skjer ved abdominal adhesjon utviklet etter operasjonen fører til glatt muskel hypertrofi3,4,5,21. Etter SO kirurgi, vi fant også at SMC, ICC og PDGFRα+ celler var litt hypertrofisk i tynntarmen, sammenlignet med ingen (Figur 3), tyder på at kirurgi selv kan føre intestinal glatt muskel hypertrofi. Hvis dette er tilfelle, så er kirurgi ikke en komplett negativ kontroll for PO kirurgi. INGEN tillegg SO bør brukes som sammenligningsgrunnlag PO tarmen.
I sammendraget, har vi funnet en kostnad/tid effektiv, pålitelig og repeterbare PO kirurgisk protokoll i mus som robust genererer intestinal obstruksjoner. Under utviklingen av hindringen ombygd SMC, ICC, PDGFRα+, i tillegg til nevronale celler dynamisk i ulike vev lag og steder. Denne i vivo obstruksjon modellen gir ny innsikt i vår kunnskap om hvordan fenotypiske endringer forekommer i hindret tarmen på cellenivå.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Forfatterne ikke avsløre.
Acknowledgments
Forfatterne gjerne takke Benjamin J Weigler, D.V.M., Ph.D. og Walt Mandeville, D.V.M. (dyr ressurser & Campus stede Veterinarian, University of Nevada, Reno) for sine utmerkede dyr tjenester leveres musene som sine råd kirurgiske prosedyrer.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Surgical drape | Medical and veterinary supplies | SMS40 | 40”X100 yards |
| Underpad, econ, pro plus | Medical and veterinary supplies | MSC281224 | 17x24” |
| Iris scissors | Braintree scientific, Inc | SC-i-130 | |
| Iris scissors | Vantage | V95-304 | |
| Dumont electronic & jeweler tweezers | Dumont | 98-180-3 | |
| Braided absorbable suture | Covidien polysorb | SL-5687G | 5-0, polyglactin |
| Nylon non-absorbable mono filament | AD surgical | S-N618R13 | 6-0, nylon |
| Surgical blade | Dynarex | No.15 | |
| Needle holder | Jacobson microvascular | 36-1342TC | 8.5 inch |
| Scalpel handle | Flinn scientific | AB1049 | |
| Microsurgical scissor | WPI | 503305 | |
| Petrolatum ophthalmic ointment | Puralube VET | 3.5 g | |
| Fluriso (isoflurane) | Vetone | V1 502017 | 250 ml |
| Steri-strip reinforced skin closure | 3M | R1547 | |
| Surgical gloves | Medline | MSG2270 | |
| Ear loop face mask | The safety zone | RS700 | |
| Avant gauze non-woven sponges | Caring | PRM25444 | |
| Surgical cup | Admiral craft OYC-2 | 725-A42 | 2.5 oz |
| Swabstick | ChloraPrep | 260103 | 2% w/v Chlorhexidine Gluconate (CHG) and 70% v/v Isopropyl Alcohol (IPA) |
| Cotton tipped applicator | Puritan | 806-WC | |
| Buprenorphine | Zoo pharm | BZ8069317 | 1 mg/ml |
| Gentamycin sulfate | Vetone | G-6336-04 | 100 mg/ml |
| Fast acting gel cream remover | Veet | 8111002 | |
| Syringe | AHS | AH01T2516 | 1 ml with needle |
| Silicon ring | VWR | 60985-720 | 6 mm in length, 4 mm exterior diameter, 3.5 mm interior diameter |
| C57BL/6 mice | The Jackson Laboratory | 4-6 weeks old |
References
- Millat, B., Guillon, F. Physiopathology and principles of intensive care in intestinal obstructions. Rev Prat. 43, 667-672 (1993).
- Tonelli, P. New developments in Crohn's disease: solution of doctrinal mysteries and reinstatement as a surgically treatable disease. 1. The process is not a form of enteritis but lymphedema contaminated by intestinal contents. Chir Ital. 52, 109-121 (2000).
- Limsrivilai, J. Meta-analytic Bayesian model for differentiating intestinal tuberculosis from Crohn's disease. Am J Gastroenterol. 112, 415-427 (2017).
- Dvorak, D., Adamova, Z., Bar, T., Slovacek, R. Internal hernia as a cause of small bowel obstruction. Rozhl Chir. 96, 34-36 (2017).
- Massani, M., Capovilla, G., Ruffolo, C., Bassi, N. Gastrointestinal stromal tumour (GIST) presenting as a strangulated inguinal hernia with small bowel obstruction. BMJ Case Rep. , (2007).
- Chen, J., Chen, H., Sanders, M., Perrino, B. A. Regulation of SRF/CArG-dependent gene transcription during chronic partial obstruction of murine small intestine. Neurogastroenterol Motil. 20, 829-842 (2008).
- Chang, I. Y., et al. Loss of interstitial cells of Cajal and development of electrical dysfunction in murine small bowel obstruction. J Physiol. 536 (Pt 2), 555-568 (2001).
- Liu, D. H., et al. Voltage dependent potassium channel remodeling in murine intestinal smooth muscle hypertrophy induced by partial obstruction. PLoS One. 9 (2), e86109 (2014).
- Guo, X., et al. Down-regulation of hydrogen sulfide biosynthesis accompanies murine interstitial cells of Cajal dysfunction in partial ileal obstruction. PLoS One. 7, e48249 (2012).
- Yang, J., Zhao, J., Chen, P., Nakaguchi, T., Grundy, D., Gregersen, H. Interdependency between mechanical parameters and afferent nerve discharge in hypertrophic intestine of rats. Am J Physiol-Gastr L. 310, G376-G386 (2016).
- Zhao, J., Liao, D., Yang, J., Gregersen, H. Biomechanical remodeling of obstructed guinea pig jejunum. J Biomech. 43, 1322-1329 (2010).
- Bowen, E. J., et al. Duodenal Brunner's glade adenoma causing chronic small intestinal obstruction in a dog. J Small Anim Pract. 53, 136-139 (2012).
- Bettini, G., et al. Hypertrophy of intestinal smooth muscle in cats. Res Vet Sci. 75, 43-53 (2003).
- Macdonald, J. A. Smooth muscle phenotypic plasticity in mechanical obstruction of the small intestine. J Neurogastroenterol Motil. 20, 737-740 (2008).
- Ha, S. E., et al. Transcriptome analysis of PDGFRα+ Cells identifies T-types Ca2+ channel CACNA1G as a new pathological marker for PDGFRα+ cell hyperplasia. PLoS One. 12, e0182265 (2017).
- Park, C., et al. Serum response factor is essential for prenatal gastrointestinal smooth muscle development and maintenance of differentiated phenotype. J Neurogastroenterol Motil. 21, 589-602 (2015).
- Spencer, N. J., Sanders, K. M., Smith, T. K. Migrating motor complexes do not require electrical slow waves in the mouse small intestine. J Physiol. 553, 881-893 (2003).
- Langford, D. J., et al. Coding of facial expressions of pain in the laboratory mouse. Nat Methods. 7, 447-449 (2010).
- Terez, S. D., Notari, L., Sun, R., Zhao, A. Mechanisms of smooth muscle responses to inflammation. Neurogastroenterol Motil. 24, 802-811 (2012).
- Chen, W., et al. Smooth muscle hyperplasia/hypertrophy is the most prominent histological change in Crohn's fibrostenosing bowel strictures: A semiquantitative analysis by using a novel histological grading scheme. J Crohns Colitis. 11, 92-104 (2017).
- Huizinga, J. D., Chen, J. H. Interstitial Cells of Cajal: Update on Basic and Clinical Science. Curr Gastroenterol Rep. 16, 363 (2014).
- Jirkof, P., Touvieille, A., Cinelli, P., Arras, M. Buprenorphine for pain relief in mice: repeated injections vs sustained-release depot formulation. Lab Animal. 49, 177-187 (2015).
- Spencer, N. J., Dinning, P. J., Brookes, S. J., Costa, M. Insights into the mechanisms underlying colonic motor patterns. J Physiol. 594, 4099-4116 (2016).
