Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Biology

Мыши модель частичной непроходимостью кишечника

Published: March 5, 2018 doi: 10.3791/57381
* These authors contributed equally

Summary

Кишечные препятствия являются частичной или полной блокировки кишечника, что может вызвать сильные боли в животе, тошнота, рвота и предотвращения прохождения табуретку. Эта процедура создания кишечных частичное obsructions в мышах надежна в изучении механизмов лежащих в основе роста патологических клеток и смерти в кишечнике.

Abstract

Кишечные препятствия, которые мешают или блокировать перистальтические движения, может быть вызвано брюшной спаек и наиболее желудочно-кишечного тракта (ЖКТ), включая опухолевых новообразований. Однако сотовых Ремонт механизмов, занимающихся, и вызванные, кишечные препятствия плохо понимают. Были разработаны несколько животных моделей кишечных препятствий, но модель мыши является наиболее стоимости и времени эффективным. Мыши модель использует хирургической имплантации частичной непроходимостью кишечника (PO), имеющий высокий уровень смертности, если не выполняется правильно. Кроме того мышей, получающих PO хирургии не развивать гипертрофия, если соответствующие блокады не используется или помещены не должным образом. Здесь мы описываем подробный протокол для хирургии PO, которая производит надежных и воспроизводимых кишечных препятствия с очень низкой смертностью. Этот протокол использует хирургически размещены силиконовые кольца, которая окружает подвздошной кишки, который частично блокирует пищеварительной движения в тонком кишечнике. Частичная блокада делает стать расширены за счет прекращения пищеварительной движения кишечника. Дилатация кишечника вызывает гипертрофией гладких мышц на устные стороне кольца, который постепенно развивается более чем 2 недели до тех пор, пока она приводит к смерти. Хирургическое модель мыши PO предлагает модель в vivo гипертрофических кишечных тканей, полезно для изучения патологических изменений кишечных клеток, включая клетки гладких мышц (SMC), интерстициальных клеток Кахаля (МКК), PDGFRα+и нейронов клетки в ходе развития кишечной непроходимости.

Introduction

Кишечные препятствия являются частичной или полной блокировки в малых или больших кишечника, который предотвращает перемещение через кишечник1переваренной пищи, жидкости и газа. Из-за обструкции засорение индуцирует кишечника стены, чтобы стать утолщена, сужение просвета2. Кишечная непроходимость может возникать в результате брюшной полости или таза операций, которые вызывают образование брюшной адгезии ткани или от GI расстройств, таких как воспалительные заболевания кишечника (болезнь Крона), дивертикулит, грыж, заворот, стриктуры, инвагинации кишечника, запор, фекальные столкновение, псевдо-непроходимость, рак и опухоли3,4,5. Кишечные препятствия в таких случаях часто приводят к гипертрофии мышечной туника кишечника6.

PO просвета вызывает вздутие кишечника и увеличивается толщина слоя гладких мышц вокруг препятствий в ответ на необходимость продолжения функциональных перистальтики7,8,9,10, 11,12,13. Животные модели кишечной PO были разработаны для изучения гипертрофией гладких мышц в мышей7, крысы10, морских свинок11, собак12и кошек13 , что последовательно развивать аналогичные гипертрофия в пределах слои кишечной мышцы.

Модель мыши кишечных PO является наиболее экономически эффективным способом для создания и изучения кишечных препятствия в естественных условиях. Тонкой кишки помех осуществляется мышей с помощью силиконовые кольца хирургическим помещается вокруг подвздошной кишки. PO мышей показало ранних увеличение числа клеток (гиперплазия) и увеличение толщины слоя мышц (гипертрофия) после PO хирургии8,15. SMC являются основной пластиковые клетки, которые растут в пределах слоями гладких мышц в ответ на гипертрофических условия14, но другие клетки, такие как ICC и PDGFRα+ клетки, которые тесно связаны с SMC, также заполняются. Мы уже ранее сообщали, что PO мышей развитие гипертрофии в тонком кишечнике, в котором SMC являются Дедифференцированная в PDGFRα+ клетки, которые являются весьма пролиферативной7,,1516. И наоборот ICC выродились и потерял в слои гипертрофированной гладких мышц во время развития кишечных obsruction7. Другим преимуществом модели PO является его способность стимулировать изменения в нервной системе кишечных и пропаганде нейрогенный мотор узоры. Основные распространение нейрогенный мотор шаблон в мыши тонкой кишки является перенос двигателя комплекс (MMC), которая нейрогенных и не требует ICC или электрические медленных волн17. PO модель может обеспечить четкое понимание как MMCs и кишечных нервов перестроен по частичной обструкции.

Здесь мы предлагаем мышиных протокол для кишечной хирургии PO, с помощью силиконовые кольца. Мышей, надежно получить PO хирургии производят гипертрофия мышечной туника тонкой кишки. В пределах гипертрофических мышц SMC, МТП, PDGFRα+и нейрональные клетки резко перестроенный.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Следующий протокол был одобрен институциональный уход животных и использовать Комитет (IACUC) на ресурсы животного Университет Невады в Рено (УНР) и соблюдает все институциональные этические руководящие принципы, касающиеся использования исследований животных.

1. животных.

  1. Получите мышей C57BL/6 пожилые (4-6 недель), весом от 20-30 г. дом колонии лабораторных мышей в учреждении централизованного животных в УНР животных ресурсов.

2. частичная непроходимость хирургия

Примечание: В комнате, посвященный хирургические процедуры выполняются операции. Все хирургические инструменты газобетона до операции. Стерильные хирургические халаты и перчатки должны носить всем персоналом в хирургическое обслуживание на все времена.

  1. Подготовка к хирургической мыши
    1. Проверьте обезболивающий системы доставки обеспечить снабжение кислородом и изофлюрановая является адекватной для процедуры. Включите снабжения кислородом. Включите расходомеров газа и настроить его на 500-1000 мл/мин место животного в зале индукции и уплотнение верхней.
    2. Включите изофлюрановая испарителем до 5% и следить за животное, до тех пор, пока она становится лежачие. Перейдите обезболивающий системы доставки для носовой конус.
    3. Потолочные камеры индукции любого остаточного газа с кислородом, а затем выключите камеры линии индукции при сохранении линии носовой конус открытым.
    4. Удаление животное из камеры и тщательно место глазная мазь на глазах животного.
    5. Место носовой конус на разогретой теплые площадку, когда газа продолжает течь.
    6. Изменения потока кислорода до 100-200 мл/мин, с 2-3% изофлюрановая. Если животное начинает двигаться, gentlyrestrain животное с носовой конус на до полностью под наркозом снова.
    7. Контролировать дыхание и ответ на стимуляции во время процедуры и при необходимости измените процент изофлюрановая (2-5%). Животных анестезии уровень контролируется отсутствие мыс щепотку рефлекс до операции.
    8. Придать внутрибрюшинно медицины боли (бупренорфина, 1 мкг/г веса тела) от сайта разрез.
    9. Примените лосьон для удаления волос на животе, используя чистую ватным тампоном. Пусть лосьон МСН для 3-5 мин на мыши, затем удалить волосы с помощью Марли и ватные тампоны. Повторите этот шаг, пока все волосы будет удален из области живота мыши.
    10. Очистите кожу с помощью Марли и ватные тампоны на 70% спирте. Применять swabsticks или повидон йод раствор для очистки живота.
  2. Частичная непроходимость хирургия
    1. Драпировка хирургической сайта с помощью стерильных бумага 25 x 50 см с 2,5 х 2,5 см, открытие в середине для области хирургии. Закрепите Пелерина для животного, поместив Стерильные полоски на границах открытия и кожи.
    2. Сделайте ~3.0 см разрез брюшной продольно с помощью № 15 лезвие скальпеля, обеспечивая, что резаная только кожа и избегая резки в musculoperitoneal слой на данный момент.
    3. С помощью щипцов и Ножницы хирургические, тщательно отделите кожу от musculoperitoneal слоя без причинения любого разрез на musculoperitoneal слой. После того, как слои достаточно были разделены (приблизительно 1 см х 4 см), определить linea Альба на musculoperitoneal слой и вырежьте ~ 2 см вдоль linea alba подвергать внутрибрюшинного полости с помощью микро щипцами и ножницы.
    4. Тщательно найти и идентифицировать слепой кишки. Медленно и осторожно удалите слепой кишки из полости внутрибрюшинного с микро щипцы, принося проксимального отдела толстой кишки и подвздошной кишки с слепой кишки вне на стерильную пелерина. Немедленно смачивают кишечных тканей с марлевый стерильный физиологический пропитанной 0,9% и держать открытыми ткани, смоченной во все времена, когда они находятся за пределами брюшной полости.
    5. Найти и идентифицировать брыжейка между подвздошной кишки и проксимальной Колон. Сделать надрез (~ 1 см) параллельно, чуть ниже, подвздошной кишки, в брыжейке и Избегайте резки любых сосудистую.
    6. Возьмите газобетона силиконовые кольца (6 мм в длину, внешний диаметр 4 мм, внутренний диаметр 3,5 мм). Разрезанные продольно, чтобы открыть трубку и открыть кольцо с микро щипцами.
    7. Вставьте один конец открытые кольца через разрез в брыжейке ткани. Вернуть фигуру завершения кольцо кольцо путем привлечения один конец контакт с другой, с подвздошной кишки, окруженный кольцом.
    8. Убедитесь, что силиконовое кольцо полностью окружает подвздошной кишки, закройте кольцо с швом и тщательно место обратно в внутрибрюшинного полости кишечника.
  3. Операция закрытия
    1. Выполнение простой непрерывный шов в musculoperitoneal слое вдоль linea alba закрыть musculoperitoneal раны с рассасывающиеся шовные. После завершения шовный материал, очистите любое кровотечение с марлевый стерильный физиологический пропитанной 0,9%.
    2. Чтобы полностью закрыть рану, с отдельной нейлон накладывать шов, выполните простой непрерывный шов на коже.
    3. После завершения обоих швов, очистите рану с новой swabstick или повидон йод.
    4. Внутрибрюшинно вводить антибиотики (гентамицин, 150 мкл на мышь, основанные на массе тела 20-30 г).
    5. После завершения процедуры, выключите изофлюрановая испарителем и позволяют животным дышать только течет кислорода до его начала, обретения сознания.
    6. Как только животное спит, место животное в зону отдельный восстановления с тепловой поддержки до тех пор, пока полностью выздоровел.

3. послеоперационного наблюдения.

  1. После завершения операции переместите животных инкубатора в послеоперационную палату где регулируется температура и влажность. Мониторинг животных послеоперационные сутки каждые 15 мин в первый час после этого каждые 30 мин для второй час, в то время как животные находятся в инкубаторе.
  2. Как только предписанные наблюдения будет завершена, перенести свои собственные индивидуальные клетки животных и контролировать их ежедневно для клинических признаков боли18и обеспечить, что хирургической раны залечивает должным образом без каких-либо признаков осложнения) зияние) настоящее.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Хирургическим путем частичной обструкции (PO) вызывали исполнился месяц мышей, поместив силиконовые кольца вокруг подвздошной кишки рядом илеоцекальной сфинктера. Это кольцо создан частичного блокирования в подвздошной кишки. Шам операций (так), также проводились без кольца на возраст/пол соответствует мышей и эти мышей не показывают каких-либо симптомов аналогичны в PO мышей. Мышей быстро оправился от PO хирургии в течение нескольких часов. Они показали не очевидные изменения в поведении или слабость в течение первой недели, но после первой недели, они постепенно начали проявлять признаки PO: Растянутый живот и производства все меньше и меньше фекальные пеллеты. PO мышей были принесены в жертву на 8 и 13 дней хирургии пост PO наряду с т управления мышей. Тонкой кишки была частично заполнены и растянутый на 8 дней пост PO хирургии и полностью заполнены и растянутый на 13 дней пост PO хирургии, по сравнению с таким образом контролировать мышей (Рисунок 1A). Фекальный гранулирование в толстой кишке 8 и 13 дней пост PO хирургии мышей была сокращена по сравнению с т управления мышей (Рисунок 1B). Расчлененный ИЛЕАЛ ткани, которая была чуть выше по течению кольца и гладких мышц был проанализирован гематоксилином и эозином (H & E). Слой гладких мышц гипертрофированные на 8 дней пост PO хирургии и гораздо дальше гипертрофированные на 13 дней пост PO хирургии (рис. 2). Мы также наблюдаемые изменения в SMC, МТП, PDGFRα+и нейрональные клетки в мышечной туника в PO мышей с использованием иммунохимии. Каждая ячейка была помечены с маркерами определенного типа клеток: MYH11 (SMC), комплект (ICC), PDGFRA (клетки PDGFRα+ ) и PGP9.5 (нейрональные клетки). SMC находятся в пределах трех слоев ткани: продольные мышцы (лм), круговой мышцы (см) и мышечной mucosae (мм) в подвздошной кишки. SMC постепенно растет быстрыми темпами во всех трех слоях на 8 и 13 дней пост PO хирургии (рис. 3). Что касается ККО их субпопуляций расположены в глубокие мышечные сплетения (DMP), myenteric регионе (MY) и subserosal региона (СС). Однако ICC-DMP, ICC-мой и ICC-СС были переросла в intra/межмышечной слоев (рис. 3). Подобно ICC субпопуляций, субпопуляции клеток (PαC) PDGFRα+ расположены в DMP, мой и СС. В PO мышей, PαC-DMP, мой PαC и PαC-SS динамически были реконструированы в пределах межмышечной слои PO мышей: они росли в 8 дней пост PO хирургии и перерос в 13 дней пост PO хирургии (рис. 3). Наконец myenteric сплетение (МП), подслизистую сплетения (SP), subserosal нейронов (СС) и кишечные двигательных нейронов (ЕМС) были существенно потерял в Интер/внутримышечного регионах PO мышей на 8 и 13 дней пост PO хирургии (рис. 3).

Figure 1
Рисунок 1. Хирургическим путем частичной непроходимостью наведено в мышиной модели. PO было вызвано PO хирургии. Один месяц старый мышей были под наркозом, их живот был открыт надрез, силиконовые кольца был помещен окружающих подвздошной кишки и открытия был закрыт путем наложения швов. Мышей, которые перенес операцию было позволено восстановить 8 или 13 дней. Возраст и пол, соответствует так мышей были оперированы таким же образом как PO мышей, за исключением там было не размещение кольца. (A) валовой изображения желудочно-Кишечного тракта в мышей, которые прошли PO или так хирургии. Изображения мышей в 8 и 13 дней после операции (B) желудочно-Кишечного тракта, расчлененный от мышей в A. тонкой кишки, вверх по течению кольца был растянутый на 8 и 13 дней хирургии пост PO и фекальные пеллеты в толстой кишке были также меньше в обоих 8 и 13 день пост PO хирургии как по сравнению с 13 дней хирургии пост так мышей из-за частично обструктивного силиконовое кольцо. Масштаб гистограммы являются 0.5 см. пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.

Figure 2
Рисунок 2. Гладкие мышцы слой изменилась в хирургической мыши модели. Представитель H & E пятнать ИЛЕАЛ сечений от кишечных PO, так и не операции (NO) мышах. Гладких мышц (SM) и слизистой оболочки (Mu) слои в PO мышей на 8 и 13 дней пост PO хирургии толще, чем те, в так и не мышей. Масштаб гистограммы являются 50 µm. пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.

Figure 3
Рисунок 3. Динамический сотовой Ремоделирование в гладкие мышцы гипертрофии вызванных частичной непроходимостью. Представитель Конфокальная лазерная, сканирование изображений гипертрофических ИЛЕАЛ сечений, от PO, так и не мышей. Immunohistochemically окрашивание с антителами (красный) MYH11 (SMC), комплект (ICC), PDGFRA (клетки PDGFRα+ ) или PGP9.5 (NC; нейрональные клетки), совместно витражи с DAPI (синий). SMC в мышечной слизистой оболочки (мм), круговой мышцы (см) и продольных мышц (лм) слои, а также PDGFRα+ клетки в глубокой мышечной сплетения (DMP), myenteric регионе (MY) и subserosal региона (СС) росли в гипертрофических подвздошной кишки на 8 и 13 дней пост PO хирургии при МТП в DMP, мой и СС, myenteric сплетение (МП), подслизистую сплетения (SP), subserosal NC (СС) и кишечные двигательных нейронов (ЕМС) были выродились. Масштаб гистограммы являются 50 µm. пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.

Figure 4
Рисунок 4. Результаты силиконовые кольца, которые являются слишком большой, слишком маленький или неправильно на толстой кишке. (A) не гипертрофией гладких мышц в подвздошной кишки развивается если кольцо является слишком большим, чтобы вызвать непроходимость. Кольцо, сделал практически нет закупорки подвздошной кишки. (B) кишечная ишемия превращается в подвздошной кишки, если кольцо слишком мал. Кольцо сделал почти полной закупорки подвздошной кишки, который может повредить ткани и привести к ранней смерти перед тем, как развивается гипертрофия. (C) в двоеточие за неуместные кольцо разработан гипертрофией гладких мышц. Кольцо на толстой кишки была перенесена lumenal контента (кал), который поврежден брыжейка сосудистую и вызвало массивные кровоизлияния в толстой кишке. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Мы продемонстрировали, что мышей, получающих кишечной хирургии PO последовательно и герметизации развивать кишечной гладкой мышечной гипертрофии, которая имитирует человека кишечной непроходимости. Кишечная непроходимость операций были разработаны для различных животных включая7мышей, крыс10, морских свинок11,12 и кошки собаки13. Модель мыши кишечной непроходимости имеет время, стоимость, размер и фенотипические преимущества по сравнению с других крупных животных моделях. Развитие гипертрофии мышей или крыс занимает лишь 10-14 дней10, по сравнению с 2-4 недели в морских свинок, собаки и кошки11,12,13. Расходы на приобретение и поддержание мышей является также огромные финансовые преимущества по сравнению с другими моделями. Кроме того мышей, маленький и легкий в обращении для PO хирургии. Самое главное мышей, получающих PO хирургии постепенно и широко развивать гипертрофия в тонкой кишке, в то время как другие крупные животные разработать менее экстенсивного роста.

Есть несколько ключевых факторов, которые следует учитывать при попытке создать надежный гипертрофия через кишечную PO хирургии. Несколько исследовательских групп использовали кольца разных размеров и размещены в различных местах вдоль intestine для создания частичной препятствия7,9,10,11,12, кольцо 13,14. Однако силиконовые кольца оптимального размера следует использовать для мышей как большие кольца создает небольшое или никакое закупорки в подвздошной кишки гипертрофия лишь частично, или никогда, развитой (Рисунок 4A). И наоборот когда кольцо был слишком мал, он создал около полной закупорки подвздошной кишки, индуцированной ишемии кишечника и/или повреждения слизистой оболочки, вызывая сепсиса, приводит к ранней смерти в течение недели (рис. 4В). Мы использовали силиконовые кольца определенного размера (6 мм в длину, внешний диаметр 4 мм, внутренний диаметр 3,5 мм) на один месяц старых мышей (Таблица материалов). Различные размеры колец следует протестированы и использованы для мышей различных размеров для создания оптимального закупорки в подвздошной кишки. Еще одним ключевым фактором является местонахождение кольцо на кишечнике. Подвздошной кишки, недалеко от илеоцекальной клапан, это лучшее место, чтобы поместить кольцо надежно произвести частичный препятствия. Другие регионы, например тощей кишки или различных регионов подвздошной кишки от илеоцекальной вентиля, имели аналогичные кольцо, размещенных на них с целью побудить гипертрофия7. Однако благодаря поверхности серозных кишечника, будучи весьма смазываются перитонеальной жидкости, кольцо, размещенных на этих частях кишечника легко перемещается из-за сократительной силы кишечника, проталкивая фекалии. Как кольцо выталкивается вниз длина intestine, она отрезает верхней брыжеечной артерии иннервируются в регионе myenteric кишечника, вызывая кровоизлияния. Когда кольца вставляется в конце подвздошной кишки рядом с илеоцекальной клапан, он физически предотвратить перемещение дальше, громоздкий характер слепой кишки. Слепой кишки можно легко расположен и вывезены из брюшной полости в хирургии для того чтобы найти Илеоцекальной области клапан, как слепой кишки подключается к подвздошной кишки и проксимальной Колон. Подвздошной кишки и толстой кишки, подключенные в слепой кишки очень похожи и кольцо случайно могут быть размещены на проксимальной Колон вместо подвздошной кишки. Когда кольцо было неправильно на проксимальной толстой кишки, как также видно на тощей кишки, кольцо было толкаемых вниз и повреждения верхней брыжеечной артерии, вызывая обширных кровоподтеков (рис. 4 c). Чтобы избежать этого неправильного, подвздошной кишки следует всегда правильно расположен и определены прежде чем кольцо ставится на место. Подвздошной кишки впадает в середине слепой кишки в то время как двоеточие работает в одну сторону подсумка слепой кишки.

Этот протокол хирургии PO считается серьезной операции для мышей. Все хирургические инструменты и материалы следует стерилизовать перед использованием, и хирургии должны выполняться в чистой среде номер посвященный хирургии для того, чтобы свести к минимуму загрязнение, которое может привести к инфекции и воспаления у мышей. Кроме того боль лекарства следует предоставлять мышей после операции. Мы решили использовать медленно версии бупренорфина, который эффективен до 7-8 h22. Кроме того после операции, мышей имеют трудности жевания и глотания твердой пищи. До до 5 дней после операции, мышей следует быть обеспечены смягчил питание (твердых диета с небольшим количеством воды, добавляется смягчить пищи) и перешли к нормальной твердых диеты после 5 дней.

Наши кишечной хирургии PO обеспечивает модель гипертрофия в естественных условиях для кишечной непроходимости в котором SMC, МТП, и PDGFRα+ клетки аномально перестроенный. Эта модель PO также идеально подходит для понимания, как кишечные нейроны изменяются PO и как деятельность крупных мотор страдают в тонкой и толстой кишки23. Эти клетки могут быть динамически перестроенный в патологических условиях, а также культурные условия15,16. Мы отметили, что эти клетки мышей так вели себя немного иначе, чем нормальные мыши без операции (рис. 2 и рис. 3). Большинство кишечной непроходимости в организме человека происходит путем брюшной спайки после хирургии, приводит к гладкой мышечной гипертрофии3,4,5,21. После операции так, мы также обнаружили, что SMC, МТП и PDGFRα+ клетки были слегка гипертрофических в тонком кишечнике, по сравнению с не (рис. 3), предполагая, что сама операция может вызвать кишечной гладкой мышечной гипертрофии. Если это так, хирургия это не полный отрицательный контроль для PO хирургии. НЕТ и так должны использоваться в качестве сравнения с PO кишечника.

В целом мы нашли стоимости и времени эффективные, надежные и повторяемые PO хирургический протокол в мышей, которые энергично генерирует кишечных препятствия. В ходе разработки непроходимость SMC, ICC, PDGFRα+, а также нейрональные клетки динамически перестроенный в различные слои ткани и языковых стандартов. Это в vivo непроходимость модель предлагает новый взгляд на наши знания о как фенотипические изменения происходят в препятствовали кишечника на клеточном уровне.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Авторы не имеют ничего сообщать.

Acknowledgments

Авторы хотели бы поблагодарить Бенджамин J Weigler, доктор, доктора и Уолт Мандевиль, доктор (животных ресурсов и кампуса посещения ветеринара, Университет Невады, Рено) за их прекрасную животных услуги, оказываемой мышей, а также их адвоката на хирургические процедуры.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Surgical drape Medical and veterinary supplies SMS40 40”X100 yards
Underpad, econ, pro plus Medical and veterinary supplies MSC281224 17x24”
Iris scissors Braintree scientific, Inc SC-i-130
Iris scissors Vantage V95-304
Dumont electronic & jeweler tweezers Dumont 98-180-3
Braided absorbable suture Covidien polysorb SL-5687G 5-0, polyglactin
Nylon non-absorbable mono filament AD surgical S-N618R13 6-0, nylon
Surgical blade Dynarex No.15
Needle holder Jacobson microvascular 36-1342TC 8.5 inch
Scalpel handle Flinn scientific AB1049
Microsurgical scissor WPI 503305
Petrolatum ophthalmic ointment Puralube VET 3.5 g
Fluriso (isoflurane) Vetone V1 502017 250 ml
Steri-strip reinforced skin closure 3M R1547
Surgical gloves Medline MSG2270
Ear loop face mask The safety zone RS700
Avant gauze non-woven sponges Caring PRM25444
Surgical cup Admiral  craft OYC-2 725-A42 2.5 oz
Swabstick ChloraPrep 260103 2% w/v Chlorhexidine  Gluconate (CHG) and 70% v/v Isopropyl Alcohol (IPA)
Cotton tipped applicator Puritan 806-WC
Buprenorphine Zoo pharm BZ8069317 1 mg/ml
Gentamycin sulfate Vetone G-6336-04 100 mg/ml
Fast acting gel cream remover Veet 8111002
Syringe AHS AH01T2516 1 ml with needle
Silicon ring VWR 60985-720 6 mm in length, 4 mm exterior diameter, 3.5 mm interior diameter
C57BL/6 mice The Jackson Laboratory 4-6 weeks old

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Millat, B., Guillon, F. Physiopathology and principles of intensive care in intestinal obstructions. Rev Prat. 43, 667-672 (1993).
  2. Tonelli, P. New developments in Crohn's disease: solution of doctrinal mysteries and reinstatement as a surgically treatable disease. 1. The process is not a form of enteritis but lymphedema contaminated by intestinal contents. Chir Ital. 52, 109-121 (2000).
  3. Limsrivilai, J. Meta-analytic Bayesian model for differentiating intestinal tuberculosis from Crohn's disease. Am J Gastroenterol. 112, 415-427 (2017).
  4. Dvorak, D., Adamova, Z., Bar, T., Slovacek, R. Internal hernia as a cause of small bowel obstruction. Rozhl Chir. 96, 34-36 (2017).
  5. Massani, M., Capovilla, G., Ruffolo, C., Bassi, N. Gastrointestinal stromal tumour (GIST) presenting as a strangulated inguinal hernia with small bowel obstruction. BMJ Case Rep. , (2007).
  6. Chen, J., Chen, H., Sanders, M., Perrino, B. A. Regulation of SRF/CArG-dependent gene transcription during chronic partial obstruction of murine small intestine. Neurogastroenterol Motil. 20, 829-842 (2008).
  7. Chang, I. Y., et al. Loss of interstitial cells of Cajal and development of electrical dysfunction in murine small bowel obstruction. J Physiol. 536 (Pt 2), 555-568 (2001).
  8. Liu, D. H., et al. Voltage dependent potassium channel remodeling in murine intestinal smooth muscle hypertrophy induced by partial obstruction. PLoS One. 9 (2), e86109 (2014).
  9. Guo, X., et al. Down-regulation of hydrogen sulfide biosynthesis accompanies murine interstitial cells of Cajal dysfunction in partial ileal obstruction. PLoS One. 7, e48249 (2012).
  10. Yang, J., Zhao, J., Chen, P., Nakaguchi, T., Grundy, D., Gregersen, H. Interdependency between mechanical parameters and afferent nerve discharge in hypertrophic intestine of rats. Am J Physiol-Gastr L. 310, G376-G386 (2016).
  11. Zhao, J., Liao, D., Yang, J., Gregersen, H. Biomechanical remodeling of obstructed guinea pig jejunum. J Biomech. 43, 1322-1329 (2010).
  12. Bowen, E. J., et al. Duodenal Brunner's glade adenoma causing chronic small intestinal obstruction in a dog. J Small Anim Pract. 53, 136-139 (2012).
  13. Bettini, G., et al. Hypertrophy of intestinal smooth muscle in cats. Res Vet Sci. 75, 43-53 (2003).
  14. Macdonald, J. A. Smooth muscle phenotypic plasticity in mechanical obstruction of the small intestine. J Neurogastroenterol Motil. 20, 737-740 (2008).
  15. Ha, S. E., et al. Transcriptome analysis of PDGFRα+ Cells identifies T-types Ca2+ channel CACNA1G as a new pathological marker for PDGFRα+ cell hyperplasia. PLoS One. 12, e0182265 (2017).
  16. Park, C., et al. Serum response factor is essential for prenatal gastrointestinal smooth muscle development and maintenance of differentiated phenotype. J Neurogastroenterol Motil. 21, 589-602 (2015).
  17. Spencer, N. J., Sanders, K. M., Smith, T. K. Migrating motor complexes do not require electrical slow waves in the mouse small intestine. J Physiol. 553, 881-893 (2003).
  18. Langford, D. J., et al. Coding of facial expressions of pain in the laboratory mouse. Nat Methods. 7, 447-449 (2010).
  19. Terez, S. D., Notari, L., Sun, R., Zhao, A. Mechanisms of smooth muscle responses to inflammation. Neurogastroenterol Motil. 24, 802-811 (2012).
  20. Chen, W., et al. Smooth muscle hyperplasia/hypertrophy is the most prominent histological change in Crohn's fibrostenosing bowel strictures: A semiquantitative analysis by using a novel histological grading scheme. J Crohns Colitis. 11, 92-104 (2017).
  21. Huizinga, J. D., Chen, J. H. Interstitial Cells of Cajal: Update on Basic and Clinical Science. Curr Gastroenterol Rep. 16, 363 (2014).
  22. Jirkof, P., Touvieille, A., Cinelli, P., Arras, M. Buprenorphine for pain relief in mice: repeated injections vs sustained-release depot formulation. Lab Animal. 49, 177-187 (2015).
  23. Spencer, N. J., Dinning, P. J., Brookes, S. J., Costa, M. Insights into the mechanisms underlying colonic motor patterns. J Physiol. 594, 4099-4116 (2016).

Tags

Физиологии выпуск 133 желудочно-кишечного тракта гладких мышц частичная непроходимость гипертрофия интерстициальных клеток Кахаля тромбоцитарный фактор роста рецепторов A
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Ha, S. E., Wei, L., Jorgensen, B.More

Ha, S. E., Wei, L., Jorgensen, B. G., Lee, M. Y., Park, P. J., Poudrier, S. M., Ro, S. A Mouse Model of Intestinal Partial Obstruction. J. Vis. Exp. (133), e57381, doi:10.3791/57381 (2018).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter