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Behavior

चूहों में गतिविधि आधारित आहार का आकलन

Published: May 14, 2018 doi: 10.3791/57395

Summary

चूहों को व्यक्तिगत रूप से एक चल रहे व्हील के साथ रखा, जबकि भोजन के लिए सीमित पहुंच का विकास भोजन की खपत में कटौती और रनिंग व्हील पर गतिविधि में वृद्धि दी । इस प्रायोगिक घटना गतिविधि आधारित आहार कहा जाता है । इस प्रतिमान तंत्रिका जीव विज्ञान और व्यवहार आहार क्रिया विकार के अंतर्निहित पहलुओं का अध्ययन करने के लिए एक प्रायोगिक उपकरण प्रदान करता है ।

Abstract

कुतर गतिविधि आधारित आहार का विकास (आबा) जब एक प्रतिबंधित खिला अनुसूची को उजागर और एक दौड़ पहिया करने के लिए स्वतंत्र पहुँच की अनुमति दी । इन स्थितियों में एक जीवन के लिए नेतृत्व शरीर के वजन में कमी की धमकी । हालांकि, कुतर केवल इन स्थितियों में से एक को उजागर अंततः फिर से सामांय शरीर के वजन को स्थापित करने के लिए अनुकूल । हालांकि बढ़ स्वैच्छिक भोजन के सेवन में कमी के साथ मिलकर चल आबा की स्थिति के तहत उलटा दिखाई, आबा व्यवहार कई स्तनधारी प्रजातियों में मनाया जाता है ।

आबा प्रतिमान आहार क्रिया विकार के लिए एक पशु मॉडल (एक), भूख-व्यवहार के गंभीर dysregulation के साथ एक भोजन विकार प्रदान करता है । विषयों अकेले चल रहे एक पहिया के लिए स्वतंत्र पहुँच के साथ घर कर रहे हैं । प्रत्येक दिन, विषय समय की एक सीमित राशि के लिए भोजन की पेशकश की है । प्रयोग के दौरान, एक विषय के शरीर का वजन उच्च गतिविधि और कम गरमी सेवन से कम हो जाती है । अध्ययन की अवधि कितनी देर भोजन की पेशकश की दैनिक, भोजन के प्रकार की पेशकश की है के आधार पर बदलता है, माउस का तनाव, अगर दवाओं का परीक्षण किया जा रहा है, और पर्यावरणीय कारकों ।

एक रोगियों के लिए प्रभावी औषधीय उपचार की कमी, उनके जीवन की कम गुणवत्ता, उपचार की उच्च लागत, और उनकी उच्च मृत्यु दर आगे अनुसंधान करने के लिए तात्कालिकता से संकेत मिलता है । हम चूहों के साथ आबा प्रयोगों के प्रदर्शन के लिए एक बुनियादी रूपरेखा प्रदान करते हैं, एक तरह के व्यवहार की जांच करने के लिए उपंयास चिकित्सा विकसित करने के लिए एक विधि की पेशकश की । इस प्रोटोकॉल बालब/मुख्य ंयायाधीश चूहों में उपयोग के लिए अनुकूलित है, लेकिन आसानी से अंय उपभेदों के लिए हेरफेर किया जा सकता है, विभिंन प्रश्नों के साथ काम करने में महान लचीलापन प्रदान करने, विशेष रूप से आबा के आनुवंशिक कारकों से संबंधित है ।

Introduction

१९५३ के बाद से, कुतर पहियों चलाने पर एक उलटा सक्रियता दिखाने की सूचना दी गई है जब वे पहियों के लिए मुफ्त का उपयोग दिया जाता है जबकि स्वैच्छिक hypophagia जब भोजन की उपलब्धता1प्रतिबंधित है के दौर से गुजर । इसके विपरीत, कुतर शरीर के वजन में तेजी से ड्रॉप नहीं जब पहियों चलाने के बिना एक अनुसूची पर भोजन की पेशकश की या जब पहियों चल रहा है और खाद्य विज्ञापन libitum1,2,3की पेशकश की आबा मॉडल मज़बूती से शरीर के वजन में नाटकीय गिरावट में परिणाम, hypophagia, हाइपोथर्मिया, मद की हानि, और HPA अक्ष की वृद्धि हुई उत्तेजना4. अंततः, मौत में आबा परिणाम, जब तक विषय के प्रतिमान से हटा दिया जाता है5। आबा प्रतिमान एक के एक पशु मॉडल के साथ शोधकर्ताओं प्रदान करता है, एक जटिल खाने विकार जो भूख के गंभीर dysregulation-व्यवहार, प्रभावित लगभग १०० महिलाओं में 1 और पुरुषों के एक छोटे प्रतिशत6। एक बार प्रदर्शित सक्रियता से पीड़ित रोगियों, व्यायाम की चरम मात्रा से मिलकर, और/या सामांय बेचैनी7,8। लगभग 10% की मृत्यु दर के साथ, एक सभी मनोरोग विकारों के बीच सबसे अधिक मृत्यु दर है9. एक के लिए वर्तमान उपचार संज्ञानात्मक चिकित्सा के लिए सीमित है, के रूप में वहां एक10,11से पीड़ित लोगों के लिए कोई अनुमोदित औषधीय उपचार कर रहे हैं ।

एक आम तौर पर एक मुख्य रूप से महिलाओं को प्रभावित विकार के रूप में माना गया है । एक निदान है कि पुरुषों की तुलना में महिलाओं में 10 गुना अधिक होने की संभावना है के रूप में, महिला विषयों पारंपरिक रूप से एक12में ध्यान केंद्रित कर रहे हैं । हालांकि, विशेष विचार अध्ययन से पुरुषों को छोड़कर में लिया जाना चाहिए । जबकि एक के निदान पुरुषों में कम रहता है, मांसपेशी dysmorphia (एमडी) एक शर्त है कि एक के लिए कई समानताएं है, कि शरीर की छवि में विकृत है और आहार अक्सर परिक्रमा है । वहां धारणा है कि एमडी और एक समान तरीके से13,14,15में वर्गीकृत किया जा सकता है के लिए समर्थन है । यह सुझाव है कि प्रबंध निदेशक के कुछ मामलों के "पुरुष संस्करण" एक का प्रतिनिधित्व कर सकते हैं । पशु मॉडल के संदर्भ में, कुछ रिपोर्टों का सुझाव दिया है कि नर आबा प्रतिमान के लिए महिलाओं की तुलना में अधिक अतिसंवेदनशील होते हैं । उदाहरण के लिए, एक ताजा अध्ययन एक उच्च मृत्यु दर दिखाया और C57Bl/6 चूहों में महिलाओं की तुलना में भोजन का सेवन कम16. आबा के लिए संवेदनशीलता का एक कारक सहज शारीरिक गतिविधि (स्पा) है । उच्च या कम स्पा के साथ चूहों को और अधिक आबा प्रतिमान में वजन कम होने की संभावना है, पुरुष17महिलाओं की तुलना में एक मजबूत प्रभाव दिखा चूहों के साथ । इसके विपरीत, आबा18के प्रतिबंध चरण के दौरान पुरुषों की तुलना में अधिक व्यायाम करने के लिए मादा कुतर मनाया गया है । साथ ही, बालब/मुख्य न्यायाधीश चूहों के साथ अध्ययन C57Bl/6 चूहों के विपरीत प्रभाव दिखाई दिया है, जहां महिला चूहों एक उच्च मृत्यु दर है और पुरुषों की तुलना में भोजन का सेवन कम (चित्रा 1)6. साथ आबा प्रतिमान में लिंगों और पुरुषों के प्रति जागरूकता बढ़ाने के बीच परिणाम बदलती खाने के पैटर्न के साथ, दोनों पुरुष और महिला विषयों का परीक्षण किया जाना चाहिए ।

आबा प्रतिमान, उंर और तनाव में सेक्स मतभेदों के अलावा जब विषयों को चुनने पर विचार किया जाना चाहिए । किशोर चूहों और अधिक सही एक मॉडल हो सकता है, के बाद से एक आम तौर पर किशोरावस्था में उभर, चूहों और चूहों के साथ मनाया के रूप में19,20,21,22। उपभेदों है कि एक आधारभूत स्तर पर दूसरों की तुलना में अधिक सक्रिय है और आबा23की संवेदनशीलता की गंभीरता का एक उच्च दर है । DBA/2 के रूप में चिंता का उच्च स्तर है, ज्ञात उपभेदों, पहिया चल गतिविधि है, जो आबा प्रतिमान24में एक तेजी से dropout दर का संकेत होगा बढ़ गया है । प्रायोगिक डिजाइन पर निर्भर करता है, चुनाव के तनाव आबा की अवधि को अधिकतम करने के लिए सिलवाया जा सकता है ।

आबा विरोधाभास चूहों के लिए अद्वितीय नहीं है । चूहों, हंसटर, gerbils, सूअर, chipmunks, और गिनी सूअरों सहित अंय स्तनधारियों इस घटना को6का प्रदर्शन किया है । स्तनधारी प्रजातियों में आबा घटना के संरक्षण पता चलता है कि आबा प्रतिमान एक शोधों के लिए मानव में व्यवहार की तरह आहार अंतर्निहित तंत्र की जांच उपकरण प्रदान कर सकते हैं । विशेष रूप से चूहों अंतर्निहित आबा तंत्र के अध्ययन के लिए अच्छी तरह से अनुकूल हैं । चूहे घनी ईमारत हो सकते हैं और पीढ़ी का समय अपेक्षाकृत कम होता है. चूहों एक पूरी तरह से अनुक्रम जीनोम है, और कई नस्ल, नस्ल, और विशेष उपभेदों, जैसे congenics, उपलब्ध हैं । आनुवंशिक रूप से हेरफेर लाइनों की एक विशाल संख्या उत्पंन किया गया है, उंहें ऐसे एक के रूप में विकारों पर आनुवंशिक प्रभावों का आकलन अध्ययन के लिए आदर्श बना । हाथ में सवाल पर निर्भर करता है, शोधकर्ताओं जटिल तंत्रिका सर्किट में हेरफेर कर सकते है और/ के लिए आबा प्रतिमान में व्यवहार का आकलन, संभावित आनुवंशिक प्रभाव है कि संभव है जब मनुष्य का अध्ययन नहीं कर रहे है के बारे में सवालों का जवाब ।

एक वर्तमान में मौजूद पशु मॉडलों की एक सीमित संख्या । तनाव मॉडल पूंछ चुटकी, नवीनता प्रेरित hypophagia, ठंड तैराकी, और मस्तिष्क उत्तेजना का उपयोग कर कुतर में hypophagia प्रेरित । तनाव उत्प्रेरण द्वारा, HPA में परिवर्तन-अक्ष कम शरीर के वजन में जिसके परिणामस्वरूप भूख कम25। हालांकि, HPA-अक्ष भी है, जो भी एक ऐसी सक्रियता के रूप में एक की अतिरिक्त सुविधाओं को शामिल आबा द्वारा शक्तिशाली प्रेरित । एक अंय मॉडल का अध्ययन करने में विचार करने के लिए एक पुरानी खाद्य प्रतिबंध मॉडल है । ४० से एक सीमा तक भोजन को सीमित विज्ञापन libitum के ६०% से, एक शारीरिक प्रतिक्रिया की नकल कर सकते है malnourishment26। हालांकि इस विधि अपर्याप्त खिला के प्रभाव का अध्ययन करने के लिए प्रभावी है, यह एक है, जो स्वैच्छिक खाद्य प्रतिबंध है की एक कोर मुद्दे को पुन: पेश नहीं करता है । आबा प्रतिमान में, पशु दिन के भाग के लिए भोजन का उपयोग से वंचित हैं, लेकिन यह भी स्वेच्छा से भोजन का सेवन कम अगर एक पहिया भी मौजूद है । जेनेटिक मॉडल्स का इस्तेमाल एटियलजि की जांच के लिए भी किया गया है । शोधकर्ताओं ने पाया है neurochemical और आनुवंशिक कारकों एक में फंसा, जैसे जीन बीडीएनएफ और न्यूरोट्रांसमीटर डोपामाइन और सेरोटोनिन27. आनुवंशिक मॉडल का उपयोग एक के पीछे तंत्रिका तंत्र को समझने के लिए महत्वपूर्ण है । हालांकि, एक के लिए जीनोम वाइड एसोसिएशन अध्ययन अभी तक महत्वपूर्ण हिट नहीं झुकेंगे, और एक में कोई दुर्लभ वेरिएंट की पहचान की गई है । भविष्य के अध्ययन के लिए एक-संबंधित phenotypes की समझ बढ़ाने के लिए आबा मॉडल के साथ एक आनुवंशिक दृष्टिकोण गठबंधन करना चाहिए ।

पूरे मनोरोग विकारों के लिए पशु मॉडलों का विकास वस्तुतः मानवीय विकारों की जटिलता और विविधता के कारण असंभव है. हालांकि, एक मनोरोग विकार, अंतर्निहित तंत्रिका जीव विज्ञान या pathophysiology में अद्वितीय अंतर्दृष्टि के विशिष्ट, अच्छी तरह से परिभाषित घटकों मॉडलिंग से प्राप्त किया जा सकता है । ऐसे जैविक अंतर्दृष्टि तो उपंयास उपचार की पहचान करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है । कुतर आबा प्रतिमान इसलिए अंतर्निहित तंत्र का अध्ययन करने के लिए एक नैदानिक उपकरण प्रदान करता है एक तरह का व्यवहार है कि नैतिकता की दृष्टि से मानव में अध्ययन नहीं किया जा सकता है, जैसे आनुवंशिक जोड़तोड़ के प्रभाव के रूप में, तंत्रिका सर्किट के लिए perturbations, और कुछ पर्यावरणीय कारकों के परिणाम ।

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Protocol

सभी तरीकों यहां वर्णित संस्थागत पशु देखभाल और उपयोग समिति (IACUC) कैलिफोर्निया, सैन डिएगो विश्वविद्यालय के द्वारा अनुमोदित किया गया है ।

1. चूहों

  1. अध्ययन के लिए उपयुक्त माउस तनाव चुनें ।
  2. एक आपूर्तिकर्ता से चूहों खरीद या उचित प्रयोगात्मक संख्या प्राप्त करने के लिए एक लाइन बढ़ाना ।
  3. समूह-हाउस पशु सुविधा में चूहों की खरीद के लिए एक पर्याप्त acclimation अवधि के लिए अनुमति देने के लिए अध्ययन शुरू करने से पहले कम से 1 सप्ताह ।
  4. चूहों के 8 सप्ताह पुराने होने पर पूर्व प्रायोगिक acclimation चरण शुरू करें ।

2. आवास

  1. पिंजरों कि काफी बड़े है के लिए एक संयुक्त राष्ट्र में चल बाधित पहिया, भोजन संदूक, और एक पानी की बोतल चुनें ।
  2. परिकल्पना परीक्षण किया जा रहा पूरक करने के लिए कमरे के तापमान और आर्द्रता को विनियमित.
    नोट: अधिक तापमान से28आबा का विकास कम होगा ।

3. रनिंग पहियों

  1. पिंजरे के भीतर संभावित distractions और entanglements से बचने के लिए वायरलेस संचार के साथ पहियों चुनें, एक उदाहरण के लिए सामग्री की तालिका देखें ।

4. पानी की बोतलें

  1. एक पानी की बोतल है कि घर के पिंजरे में चल पहिया या भोजन संदूक के साथ अंतरिक्ष के लिए प्रतिस्पर्धा नहीं करेंगे का चयन करें ।
  2. पीने के पानी में दवा उपचार उपलब्ध कराने, डक्ट टेप बोतल प्रकाश संवेदनशील वातावरण बनाने के लिए ।

5. खाद्य

  1. का चयन करें एक कम वसा की परिकल्पना के लिए उपयुक्त चाउ का परीक्षण किया जा रहा है (उदा, Envigo ' मूषक आहार ८६०४) ।
    नोट: वसा और चीनी में उच्च आहार आबा29के विकास को कम कर सकते हैं ।
  2. एक छोटे से ग्लास जार का प्रयोग करें चाउ प्रदान करने के लिए, ऊंचाई में व्यास x ५० सेमी में लगभग ६५ सेमी ।
    नोट: एक स्वचालित फीडर एक ग्लास जार के बजाय इस्तेमाल किया जा सकता है, जो जांचकर्ता हस्तक्षेप सीमित द्वारा तनाव को कम कर सकते हैं । यह सबसे लाभप्रद अगर दवा जोड़तोड़ के साथ आबा अध्ययन प्रदर्शन हो सकता है ।

6. पूर्व प्रायोगिक Acclimation चरण

  1. एक पिंजरे लैपटॉप और पहिया केंद्रों के पास रैक का चयन करके प्रयोगात्मक क्षेत्र की स्थापना की । यह डेटा संचरण के साथ मुद्दों को सीमित करेगा ।
  2. लैपटॉप और वायरलेस हब चालू करें ।
  3. लैपटॉप पर व्हील मैनेजमेंट सॉफ्टवेयर खोलें ।
    1. दोनों केंद्रों को सुनिश्चित करने के लिए सॉफ्टवेयर को देखो सक्रिय हैं ।
    2. खुला "उपकरण" और चुनें "पहियों हटाएँ." इस चरण को 5 बार दोहराएं ।
    3. सॉफ़्टवेयर बंद करें, फिर उसे पुन: खोलें ।
  4. एक व्हील बेस की बैटरी पैक में 3 एएए बैटरियों प्लेस ।
    1. बैटरी पैक तारों को व्हील बेस के हार्डवेयर से कनेक्ट करें । यह उपयोग करने से पहले डिस्कनेक्ट हो जाएगा । व्हील बेस में बैटरी पैक बंद करें ।
  5. व्हील बेस उचित वायरलेस हब के अंतर्गत ID "1" के साथ सूचीबद्ध है यह सुनिश्चित करने के लिए सॉफ़्टवेयर की जाँच करें । आधार ID "1" के रूप में सूचीबद्ध नहीं है, तो बैटरी पैक को अनhook, और चरण ६.२ पर प्रारंभ करें ।
  6. नाम स्तंभ के अंतर्गत माउस id पर "1" से व्हील id परिवर्तित करें ।
  7. डक्ट टेप के साथ पिंजरे के नीचे करने के लिए स्थिरता सुनिश्चित करने के लिए चल रहा है व्हील आधार का पालन करें । किसी भी टेप बाहर छड़ी करने की अनुमति नहीं है, के रूप में चूहों उजागर टेप पर चबाना होगा ।
  8. एक जीर्णशीर्ण चुंबकीय टुकड़ा के बिना एक रनिंग व्हील डिस्क चुनें ।
  9. आधार पर पहिया प्लेस और पिंजरे दीवारों और कद्दूकस करना से मंजूरी सत्यापित करने के लिए पहिया घुमाएँ ।
  10. डिस्क घुमाव की एक विशिष्ट संख्या स्पिन सुनिश्चित करने के लिए पहिया चल सॉफ्टवेयर ठीक से घुमाव गिनती है ।
  11. बिस्तर में खो जाने या वाहिनी द्वारा गीला हो रही से चाउ के टुकड़ों को रोकने के पिंजरे मंजिल को खाद्य जार के नीचे, चल पहिया और पानी की बोतल से दूर टेप ।
    नोट: गीले चाउ सूखी चाउ30की तुलना में भोजन का सेवन बढ़ जाती है ।
  12. जगह चाउ के जार में 5 टुकड़े ।
    नोट: पूर्व-प्रायोगिक चरण के दौरान चाउ उपलब्ध ad libitum है और उसे तौला जाने की आवश्यकता नहीं है acclimation अवधि के दौरान चलने पहियों के लिए जोखिम आबा21,31तेज हो सकता है ।
  13. एक पूर्ण पानी की बोतल पिंजरे में रखें और पानी के विज्ञापन libitumप्रदान करें ।
  14. दोहराएं जब तक सभी पिंजरों एक wirelessly जुड़ा पहिया, भोजन, और पानी है ।
  15. व्यक्तिगत रूप से चूहों उनके उपयुक्त पिंजरों में जगह है ।
  16. व्हील प्रबंधन सॉफ्टवेयर में, "फ़ाइल" पर जाएं और "अधिग्रहण शुरू करें" पर क्लिक करे ।
  17. देखो सॉफ्टवेयर अद्यतन पहिया घुमाव गिना जा रहा है और प्रणाली अच्छी तरह से काम कर रहा है सुनिश्चित करने के लिए ।
  18. 2 कुल दिनों के लिए प्रायोगिक आवास की स्थिति के लिए चूहों Acclimate ।
  19. इस चरण के दौरान चूहों का आकलन सुनिश्चित करने के लिए वे आबा प्रयोग संभाल करने के लिए पर्याप्त स्वस्थ हैं.
  20. पानी की बोतलों से हर दिन किसी भी बाढ़ के लिए पिंजरों की जांच करें । अगर बोतलें बाढ़ आ गई है, एक नया पिंजरे के साथ पुराने पिंजरे की जगह और आवश्यक कदम दोहराने के लिए हस्तक्षेप के बिना पिंजरे और भोजन का पालन करें ।
  21. 2 दिन पर, भोजन के स्तर के लिए पिंजरों की जांच करें । अगर खाना कम है, चाउ के 2 टुकड़े के साथ फिर से भरना । चूहों को परेशान किए बिना ऐसा करें ।
    नोट: यदि पूर्व प्रयोगात्मक acclimation चरण के दौरान किसी भी माउस hypophagia प्रदर्शन कर रहा है या वजन है, अध्ययन से माउस को हटा दें ।

7. प्रायोगिक आधारभूत चरण-1 दिन

  1. चुनें "अंत", और फिर पहिया प्रबंधन सॉफ्टवेयर में "अधिग्रहण शुरू" ।
  2. ०.०० ग्राम संवेदनशीलता के साथ एक पैमाने पर एक छोटे प्लास्टिक चोंच में 9 जी चाउ बाहर उपाय । सटीक वजन रिकॉर्ड ।
  3. धीरे से निकालें और एक बड़े प्लास्टिक चोंच में ०.० ग्राम संवेदनशीलता के साथ एक पैमाने पर माउस का वजन । रिकार्ड वजन ।
    नोट: यह चूहों के तनाव को सीमित करने के लिए महत्वपूर्ण है, जबकि हैंडलिंग, इसलिए उन्हें धैर्यपूर्वक संभाल.
  4. सभी acclimation भोजन का निपटान ।
  5. किसी भी खाना है कि जार से हटा दिया गया है और उस के निपटान के रूप में अच्छी तरह से कर सकते है के लिए बिस्तर खोजें ।
  6. जगह में पानी की बोतल छोड़ दो, लेकिन यह सुनिश्चित करने के लिए पर्याप्त रूप से भरा है ।
  7. ७०% isopropanol और कागज तौलिए के साथ स्वच्छ नेपकिन रनिंग पहियों ।
  8. यदि सफाई आवश्यक था, isopropanol सूख जाता है के बाद, अपने पिंजरे में माउस वापस और रैक पर पिंजरे की जगह ।
  9. इन चरणों को दोहराएं जब तक हर माउस तौला और भोजन के 9 जी बाहर मापा जाता है और पिंजरों में रखा है ।

8. प्रायोगिक आधारभूत चरण-दिन 2-7

  1. हर दिन एक ही समय पर पशुओं की सुविधा के लिए लौटें । पर या 10 मिनट के तहत से माप लेने में भिन्न नहीं हैं ।
  2. ०.०० ग्राम संवेदनशीलता के साथ एक पैमाने पर एक छोटे प्लास्टिक चोंच में 9 जी चाउ बाहर उपाय । सटीक वजन रिकॉर्ड ।
  3. धीरे से निकालें और एक बड़े प्लास्टिक चोंच में ०.० ग्राम संवेदनशीलता के साथ एक पैमाने पर माउस का वजन । रिकार्ड वजन ।
  4. खाना जार को पिंजरे से बाहर निकालकर सभी खाने को ०.०० जी स्केल पर एक छोटे से यूरिन में डंप कर दीजिये ।
    1. यदि मल और बिस्तर भोजन के साथ खाना जार में हैं, बाहर बिस्तर और मल के सभी उठाओ । एक छोटा सा छलनी का प्रयोग करें पाउडर भोजन को वजनी चोंच में रगड़ें । चिमटी (यदि आवश्यक हो) के साथ ऐसा करने से पहले किसी भी मल निकालें ।
      नोट: बिस्तर छोटे टुकड़ों में तोड़ने के लिए छलनी के माध्यम से फिट नहीं होगा ।
    2. पिंजरे में किसी भी खाद्य अवशेष की खोज करें और उन्हें चोंच में जोड़कर तौला जाए. शेष भोजन की राशि का रिकार्ड ।
      नोट: यदि बिस्तर और पिंजरे में खोजा जाना चाहिए, तो ऐसा करने के लिए सबसे अच्छा है, जबकि माउस वजन चोंच या हस्तांतरण पिंजरे में तनाव को कम करने के लिए है ।
    3. सभी भोजन का निपटान ।
  5. साफ जार पोंछ और पिंजरे में वापस जगह है । यदि आवश्यक हो तो टेप बदलें ।
  6. जगह पहले जार में नए भोजन के 9 जी मापा ।
  7. स्वच्छ नेपकिन रनिंग पहियों ७०% isopropanol के साथ, तो पहियों सूखी । एक समय में यह एक पिंजरे मत और गलती से विनिमय पहियों नहीं है ।
  8. अंत और हर दूसरे दिन पहिया चल कार्यक्रम में अधिग्रहण पुनः आरंभ करें ।
  9. प्रतिबंध चरण के प्रारंभ तक इन चरणों को दोहराएँ ।

9. प्रायोगिक प्रतिबंध चरण-1 दिवस

  1. अंत और पहिया प्रबंधन सॉफ्टवेयर में अधिग्रहण शुरू करते हैं ।
  2. चूहों, पुराने, और आधारभूत प्रोटोकॉल प्रति नए भोजन तौलना ।
  3. अब साफ पहियों मत करो । यह अपने सीमित खिला अवधि के दौरान चूहों विचलित हो सकता है ।
  4. नए भोजन, चाउ के 9 जी के लिए उपयोग की अनुमति दें, के लिए 6 एच रिकॉर्ड समय भोजन की पेशकश की है ।
    नोट: प्रकाश चक्र के दौरान जो भोजन उपलब्ध है उस समय आबा का विकास प्रभावित होगा । चूंकि चूहों आम तौर पर प्रकाश चक्र के दौरान सो जाते हैं, इस समय के दौरान भोजन के लिए उपयोग दे आबा के विकास में तीव्रता, के बाद से चूहों आमतौर पर इस समय अपने दैनिक भोजन के बहुमत का उपभोग नहीं करते. इसके विपरीत, चूहों अंधेरे चक्र के दौरान भोजन का उपयोग दिया आबा अधिक धीरे से विकसित होगा३२. भोजन का उपयोग की अवधि समायोजन अब या कम अस्तित्व के समय में परिणाम होगा (चित्रा 2) । खाद्य एंटीसिपेटरी गतिविधि (FAA) सक्रियता है, जो भोजन के तुरंत पहले होता है३२,३३,३४की पेशकश की है । faa आबा के विकास को प्रभावित कर सकते हैं, के रूप में यह दिखाया गया है कि faa के दौरान उपयोग चल पहिया के इनकार आबा व्यवहार३२उंनति ।
    1. प्रत्येक माउस के लिए ठीक 6 घंटे बाद भोजन निकालें और शेष मात्रा मापने । समय पर भोजन का रिकार्ड निकाला जाता है ।
  5. साफ पहियों अब, यदि आवश्यक हो, और बाद में पिंजरों से खाना खींच पर पीछे हो रही बिना ऐसा करने का प्रयास ।
  6. भोजन वजन और भोजन में अंतर की गणना करने के लिए माउस के अनुसार खाया भोजन की मात्रा निर्धारित करते हैं ।
  7. प्रत्येक माउस के लिए dropout वजन की गणना ।
    नोट: Dropout वजन है जब एक माउस प्रयोग से हटा दिया जाना चाहिए जब यह आधारभूत शरीर के वजन के अपने अंतिम माप के ७५% तक पहुंचता है । उदाहरण के लिए, यदि किसी माउस को प्रतिबंध चरण की शुरुआत में 20 g का वजन होता है, जब यह 15 g तक पहुंच जाता है, तो इसे प्रयोग से हटा देना चाहिए ।
  8. पशु सुविधा में हाथ पर dropout तौल की एक प्रति रखें ।
    नोट: आबा से वसूली का मूल्यांकन प्रयोगों का प्रयास किया जा सकता है; भोजन या तो विज्ञापन libitum प्रदान की है, या पहियों के लिए प्रक्रिया है जिसके द्वारा चूहों एक स्वस्थ शरीर के वजन३४के लिए वापस अध्ययन करने के लिए बंद कर रहे हैं ।

10. प्रायोगिक प्रतिबंध चरण-2 से 14 दिन

  1. प्रतिबंध दिन 1 प्रोटोकॉल में सभी माप चरणों को दोहराएँ । व्हील प्राप्ति पुनरारंभ न करें ।
  2. यदि एक चूहा छोड़ वजन (७५% अपनी आधारभूत शरीर के वजन), पिंजरे से पहिया और खाद्य जार निकालें और पिंजरे के नीचे पर पर्याप्त भोजन उपलब्ध कराने के लिए, तो अंय चूहों के साथ आगे बढ़ना । एक बार सभी पिंजरों में भाग लिया गया है, euthanize सभी चूहों कि ड्रॉप वजन तक पहुंच चुके हैं ।
  3. प्रयोग की अवधि के लिए प्रत्येक माउस के लिए व्हील छोड़ें ।
  4. प्रत्येक माउस की जांच करें किसी भी चोटों के लिए दैनिक । यदि आवश्यक हो, क्लिप क्षतिग्रस्त toenails, घावों का इलाज, आदि सलाह के लिए पशु देखभाल कर्मियों पूछना अगर एक चोट के साथ आगे बढ़ने के बारे में अनिश्चित

11. पढ़ाई समाप्त करना

  1. अगर पढ़ाई 14 दिन चली है तो 15 दिन पर सभी चूहों का वजन करें । प्रतिबंध दिवस 1 वजन एक आधारभूत वजन माना जाता है ।
    नोट: अध्ययन की लंबाई परीक्षण किया जा रहा परिकल्पना को संबोधित करने के लिए संशोधित किया जा सकता है । लंबी अवधि के भोजन का उपयोग अवधि अध्ययन लंबाई बढ़ाने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है ।
  2. Euthanize के रूप में आवश्यक चूहों ।
  3. उपयुक्त कमरे के लिए गंदे उपकरण ले लो ।
  4. 15 दिन पर अंत व्हील गणना अधिग्रहण डेटा के 10 पूरे दिन प्रदान करने के लिए ।
  5. वायरलेस व्हील हब बंद करें ।
  6. डेटा निकालें ।
  7. डेटा का विश्लेषण करें ।

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Representative Results

मस्तिष्क-व्युत्पंन neurotrophic फैक्टर (बीडीएनएफ), एक प्रोटीन है कि भोजन के रूप में अच्छी तरह से वजन के रखरखाव के विनियमन के लिए योगदान देता है, एक३५के साथ रोगियों के सीरम में कम है । यह प्रयोग अनुसूचित खिला के प्रभाव का मूल्यांकन, पहिया का उपयोग चल रहा है, या दोनों बीडीएनएफ अभिव्यक्ति पर हिप्पोकैम्पस (एचपीसी), ventral tegmental क्षेत्र (VTA), नाभिक accumbens (एनएसी), और औसत दर्जे का आकडे प्रांतस्था (मध् य) के भीतर । न्यूरॉन कोशिका आसंजन अणु की अभिव्यक्ति 1 (NCAM1) भी mesocorticolimbic मार्ग के भीतर बीडीएनएफ पर प्रभाव की विशिष्टता का पता लगाने के लिए मूल्यांकन किया गया था.

चूहों को व्यक्तिगत रूप से एक पशु देखभाल की सुविधा में एक जलवायु नियंत्रित कमरे में एक 12:12 प्रकाश अंधेरे चक्र के भीतर रखे थे । पिंजरों वायरलेस रनिंग पहियों जो एक लैपटॉप के लिए हर 30 एस डेटा relayed से सुसज्जित थे । मानक चाउ एक जार में लगभग 2 "दीवारों के साथ व्यास में की पेशकश की थी लगभग १.५" दोनों आधार रेखा और प्रतिबंध अवधि के दौरान उच्च ।

चार प्रयोगात्मक समूहों छद्म बेतरतीब ढंग से सौंपा गया: विज्ञापन libitum (विज्ञापन Lib), अनुसूचित खिला (STV), नि: शुल्क पहिया चल रहा है और भोजन का उपयोग (चलाने), या मुक्त खाद्य प्रतिबंध (आबा) (चित्रा 3) के साथ चल रहे व्हील । समूह असाइनमेंट चार वजन समकक्ष समूह बनाने के लिए प्रारंभिक शरीर के वजन से निर्धारित किया गया था । चूहों को व्यक्तिगत रूप से घर और acclimation अवधि के दौरान 2 दिनों के लिए एक चल पहिया के लिए लगातार उपयोग के साथ विज्ञापन libitum , और 7 दिन आधारभूत अवधि के दौरान खिलाया गया ।

12 दिनों तक की अनुसूचित खाद्य पहुंच अवधि के दौरान, दोनों STV और आबा समूहों प्रति दिन केवल 6 घंटे (09:00-15:00) के लिए भोजन का उपयोग किया था और निगरानी की और अगर वे अपने शरीर के वजन के 25% की गणना की बूंद वजन मिले हटा दिया गया । दैनिक समायोजन STV समूह के लिए भोजन का उपयोग सीमित करने के लिए, सुनिश्चित करें कि STV समूह आबा समूह, जिनके सदस्यों को आम तौर पर शरीर के वजन और अधिक तेजी से खो के रूप में एक समान dropout दर था बनाया गया था । प्रत्येक रन माउस को अध्ययन से हटाने के लिए एक आबा माउस को जुए का था, और प्रत्येक विज्ञापन Lib माउस एक STV माउस को जुए का था । Yoking ने यह सुनिश्चित किया कि सभी चूहे इसी तरह के समय बिंदुओं पर अध्ययन से निकाले गए. इस डिजाइन चूहे के समूहों के बीच जीन अभिव्यक्ति की तुलना के लिए अनुमति दी है कि एक ही अवधि के लिए विभिंन प्रायोगिक परिस्थितियों का अनुभव । हटाने के लिए दिनों की संख्या को जीवित रखने के एक उपाय के रूप में व्याख्या की गई थी । एक और संभावना के लिए एक अतिरिक्त रन समूह है जो के रूप में आबा समूह के रूप में कम खाने के लिए प्रतिबंधित नहीं है शामिल है, लेकिन 6 एच अवधि के दौरान भोजन की एक अतिरिक्त के साथ प्रदान की जाती है । इसके अलावा, 5 प्रयोगात्मक समूहों, रन समूह के दोनों रूपों सहित इस्तेमाल किया जा सकता है । समूहों की पसंद अध्ययन के लक्ष्यों पर निर्भर करता है ।

आबा प्रतिमान से हटाने के बाद, चूहों तेजी से मस्तिष्क निष्कर्षण के लिए decapitated थे. मध् य, एचपीसी, एनएसी, और VTA से ऊतक एक मस्तिष्क मैट्रिक्स और ऊतक पंच और तुरंत सूखी बर्फ का उपयोग कर जमे हुए तस्वीर का उपयोग कर हटा दिया गया था । आरएनए निष्कर्षण से पहले नमूनों को एक-८० डिग्री सेल्सियस फ्रीजर में रखा गया था ।

डेटा का सांख्यिकीय विश्लेषण प्रसरण (ANOVA) परीक्षणों के विश्लेषण का उपयोग करके किया गया था । आधारभूत डेटा के लिए, ANOVA प्रत्येक निर्भर चर (शरीर के वजन, भोजन का सेवन, और पहिया चल रहा है) के लिए लागू किया जाता है । प्रसरण या इंटरैक्शन का पोस्ट हॉक विश्लेषण किया गया । Bonferroni समायोजन तब किए गए थे जब पोस्ट हॉक विश्लेषण प्रसरण लागू किए गए थे ।

प्रतिबंध से डेटा का विश्लेषण करने के लिए, सामान्य रेखीय मॉडल (प्रक्रिया GLIMMIX; एसएएस v 9.2; अनुरोध पर इसी लेखक से उपलब्ध कोड) प्रत्येक चर का आकलन करने के लिए उपयोग किया जाता है । पोस्ट हॉक विश्लेषण गलत खोज दर विधि का उपयोग कर बातचीत को हल करने के लिए उपयोग किया जाता है । अस्तित्व विश्लेषण Logrank (Mantel-कॉक्स) और पेटो-पेटो-Wilcoxon पोस्ट हॉक परीक्षण के साथ कापलान-Meier परीक्षण का उपयोग किया गया था । p < 0.05 पर माहात्म्य सेट किया गया था ।

पहिया चल आधारभूत के दौरान शरीर के वजन को प्रभावित नहीं किया, जबकि भोजन की खपत बढ़ जब पहियों आधारभूत दिन 2-7 पर उपलब्ध थे । अनुसूचित खिलाने से पहले, चल रहे पहियों पर गतिविधि रन और आबा समूहों के बीच अलग नहीं था ।

के बाद से विज्ञापन उदारीकरण और भागो चूहों STV और आबा चूहों को जुए में थे, क्रमशः, अनुसूचित खिला (चित्रा 4) के दौरान प्रयोगात्मक समूहों के बीच अस्तित्व में कोई अंतर नहीं था । yoking बिना, आबा चूहों की उत्तरजीविता नाटकीय रूप से चलाने और STV समूहों३५की तुलना में कम है । हालांकि, शरीर के वजन को अनुसूचित खिला (STV और आबा समूहों) (चित्रा 4बी) को उजागर दोनों समूहों में 1-5 दिनों में कम हो गया था । अनुसूचित खिला भी दोनों समूहों में 1-5 दिनों पर भोजनका सेवन कम(चित्रा 4 ग), लेकिन पहिया चल गतिविधि पर कोई प्रभाव नहीं था(चित्रा 4 डी) । इस अध्ययन में, आबा समूह की सक्रियता संक्षिप्त (दिनों 1-3) और रन समूह की तुलना में नगण्य थी, शायद आबा की हालत में चूहों के तेजी से घटता स्वास्थ्य के कारण.

पहिया चल काफी VTA के भीतर बीडीएनएफ अभिव्यक्ति वृद्धि हुई (चित्रा 5), जबकि खाद्य प्रतिबंध VTA (चित्रा 5बी) में NCAM1 mRNA अभिव्यक्ति वृद्धि हुई है, लेकिन बीडीएनएफ mRNA अभिव्यक्ति बदल नहीं किया । वहां पहिया या भोजन का उपयोग करते हैं, या बीडीएनएफ या NCAM1 mRNA अभिव्यक्ति पर एनएसी (चित्रा 6) के भीतर बातचीत का कोई मुख्य प्रभाव थे । मध् य में, अनुसूचित खिला बीडीएनएफ mRNA अभिव्यक्ति में कमी आई है, लेकिन NCAM1 mRNA अभिव्यक्ति (चित्रा7) को प्रभावित नहीं किया. व्हील का उपयोग जीन अभिव्यक्ति को बदल नहीं किया, और खाद्य प्रतिबंध और पहिया का उपयोग की कोई बातचीत पाया गया । इसी प्रकार, एचपीसी में, बीडीएनएफ या NCAM1 mRNA व्यंजक पर खाद्य प्रतिबंध और व्हील एक्सेस की कोई सहभागिता नहीं थी, हालांकि खाद्य प्रतिबंध NCAM1 mRNA अभिव्यक्ति (चित्र 8) में वृद्धि हुई है ।

Figure 1
चित्र 1 : आबा प्रतिमान में सेक्स मतभेद । () समय के साथ पुरुष और मादा चूहों के बीच संचयी अस्तित्व. () प्रतिबंध दिन पर पुरुष और महिला चूहों के बीच शरीर के वजन () प्रतिबंध के दिनों में पुरुष और महिला चूहों के बीच भोजन का सेवन । () प्रतिबंध दिनों में पुरुष और महिला चूहों के बीच चलने वाला पहिया । यह आंकड़ा मूल प्रकाशन6से संशोधित किया गया है । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

Figure 2
चित्र 2 : आबा अवधि पर खिला बार के प्रभाव. यह आंकड़ा पता चलता है कि कितने दिन चूहे कितने समय तक भोजन उपलब्ध है इसके आधार पर पाबन्दी में रहेंगे । इस के साथ और पहियों चल बिना चूहों के लिए दिखाया गया है । यह आंकड़ा मूल प्रकाशन३५से संशोधित किया गया है । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

Figure 3
चित्र 3 : आबा प्रतिमान प्रयोगात्मक डिजाइन । यह छवि आबा प्रयोगों के लिए सेट अप दिखाता है । यह आंकड़ा मूल प्रकाशन३६से संशोधित किया गया है । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

Figure 4
चित्र 4 : आबा प्रतिमान के प्रभाव । (क) जीवन रक्षा, () दैनिक शरीर का वजन, () भोजन का सेवन, और () भोजन प्रतिबंध के दौरान चलनेवालापहिया. संख्याएं-आबा प्रतिमान में शेष चूहों की संख्या को चित्रित इटैलिक । परिणाम अर्थ ± SEM के रूप में व्यक्त कर रहे हैं । यह आंकड़ा मूल प्रकाशन३६से संशोधित किया गया है । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

Figure 5
चित्र 5 : VTA में जीन की अभिव्यक्ति पर आबा का प्रभाव. () बीडीएनएफ, () NCAM1 की VTA में चूहों की स्थिति से अवगत कराया. presets के स्वतंत्र उपाय के लिए प्रतिबंध के दौरान मतलब बीडीएनएफ और NCAM1 अभिव्यक्ति का संकेत दर्शाया. log2 (RQ) ± SEM p < 0.05 के रूप में दिखाए गए परिणाम । यह आंकड़ा मूल प्रकाशन३६से संशोधित किया गया है । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

Figure 6
चित्र 6 : Nucelus Accumbens में जीन की अभिव्यक्ति पर आबा का प्रभाव. () बीडीएनएफ, () चूहों की एनएसी में NCAM1 अभिव्यक्ति आबा की स्थिति से अवगत कराया. log2 (RQ) ± SEM p < 0.05 के रूप में दिखाए गए परिणाम । यह आंकड़ा मूल प्रकाशन३६से संशोधित किया गया है । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

Figure 7
चित्र 7 : मध् य में जीन की अभिव्यक्ति पर आबा का प्रभाव . () बीडीएनएफ, () NCAM1 की मध् य में चूहों की स्थिति से अवगत कराया. इनसेट इंगित करता है कि स्वतंत्र माप के लिए प्रतिबंध के दौरान बीडीएनएफ अभिव्यक्ति का मतलब दर्शाया गया है । परिणाम के रूप में दिखाया गया मतलब log2 (RQ) ± SEM p < 0.05 । यह आंकड़ा मूल प्रकाशन३६से संशोधित किया गया है । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

Figure 8
चित्र 8 : एचपीसी में जीन की अभिव्यक्ति पर आबा का प्रभाव. () बीडीएनएफ, () NCAM1 की एचपीसी में चूहों की स्थिति से अवगत कराया. presets मतलब बीडीएनएफ और NCAM1 अभिव्यक्ति स्वतंत्र माप के लिए प्रतिबंध के दौरान दर्शाया गया है । परिणाम के रूप में दिखाया गया मतलब log2 (RQ) ± SEM p < 0.05 । यह आंकड़ा मूल प्रकाशन३६से संशोधित किया गया है । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

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Discussion

आबा प्रयोग प्रयोगकर्ता द्वारा संशोधित किया जा सकता है अलग उपभेदों, उंर, ड्रग्स, और विभिंन अंय चर का परीक्षण करने के लिए मन में आनुवंशिक परिवर्तनशीलता, चल रहे व्हील या खाद्य पहुंच अवधि के समायोजन में वृद्धि या की गंभीरता को कम होगा लक्षण और dropout की दर । इस प्रयोग की लंबाई को बढ़ाने या घटाने के लिए सेवा कर सकते हैं, ब्याज की प्रयोगात्मक सवाल पर निर्भर करता है ।

भोजन के सेवन की सटीक माप आबा प्रतिमान का एक महत्वपूर्ण हिस्सा है, लेकिन अक्सर समस्याग्रस्त किया जा सकता है । बिस्तर, मल, और खाद्य जार में मूत्र, भोजन के साथ युग्मित पिंजरे अंतरिक्ष में ले जाया जा रहा है सही शेष भोजन वजन में कठिनाई प्रदान करता है । चूहों को भी जार में भोजन और पाउडर भोजन के छोटे टुकड़े छोड़ और पिंजरे भर में । एक छलनी में मदद करता है बिस्तर के माध्यम से झारना के लिए उचित वजन रिकॉर्डिंग के लिए भोजन के अवशेष को खोजने की समस्या है, लेकिन विधि अचूक नहीं है । चूहों को संभालने के लिए उनके वजन प्राप्त करने के लिए एक और महत्वपूर्ण है, अभी तक आबा प्रतिमान में कारक की स्थापना की । जांचकर्ता हस्तक्षेप के साथ, चूहों और अधिक तनाव की चपेट में हैं, जो आबा की शर्तों को बढ़ा सकते हैं ।

आबा एक का आकलन करने में एक उपयोगी तरीका है, लेकिन इस तकनीक सीमाओं के साथ आता है । पहली सीमा पर विचार करने के लिए है कि आबा मॉडल आहार के सभी पहलुओं की नकल नहीं करता है । उदाहरण के लिए, एक उच्च वसा वाले आहार के लिए उपयोग दिया कुतर ठेठ प्रायोगिक शर्तों के तहत आबा विकसित नहीं होगा30। हालांकि, वस्तुतः कोई पशु मॉडल मौजूद है कि दोहराऊंगा एक मनोरोग विकार के सभी पहलुओं । इस प्रकार, आबा अब भी महत्वपूर्ण अंतर्दृष्टि से संबंधित व्यवहार में उपज सकता है ।

दवा उपचार भी आबा प्रतिमान में लागू किया जा सकता है । पीने के पानी के माध्यम से दवा प्रशासन आदर्श है, के रूप में यह दैनिक इंजेक्शन है कि इंजेक्शन साइट पर स्थानीय जलन और अल्पकालिक कुछ दवाओं द्वारा प्रेरित बेहोश करने सहित प्रभाव हो सकता है से बचा जाता है । हालांकि, यह दैनिक लगातार खुराक को बनाए रखने के लिए दवा की एकाग्रता को समायोजित करने के लिए महत्वपूर्ण है, के बाद से दैनिक पानी का सेवन नाटकीय रूप से आबा के पाठ्यक्रम पर परिवर्तन, पहले पीने में वृद्धि के साथ और फिर बाद में तरल पदार्थ की खपत में कटौती के साथ. उपचर्म मिनी पंपों का उपयोग लगातार दवा देने के लिए भी आबा प्रतिमान के साथ संभव है; हालांकि, ध्यान रखा जाना चाहिए कि मिनी पंपों काफी छोटे चूहों में और खाद्य जार के बाहर पाने के लिए और चल पहिया पर बेरोक चलाने के लिए अनुमति देने के लिए कर रहे हैं । इसके अलावा, optogenetic फाइबर केबल का उपयोग सैद्धांतिक रूप से संभव है, लेकिन एक संशोधित सेट अप की आवश्यकता होगी. वैकल्पिक रूप से, विशेष रूप से डिजाइनर दवाओं द्वारा सक्रिय डिजाइनर रिसेप्टर्स का उपयोग कर विशिष्ट सर्किट की गतिविधि के हेरफेर (खूंखार) निवास डोरियों की जटिलता के बिना आबा प्रतिमान के साथ इस्तेमाल किया जा सकता है. इस प्रकार, आधुनिक तंत्रिका विज्ञान उपकरणों की एक किस्म के आबा व्यवहार के तंत्रिका तंत्र का अध्ययन करने के लिए शामिल किया जा सकता है ।

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Disclosures

लेखकों का खुलासा करने के लिए कुछ नहीं है ।

Acknowledgments

यह काम एक NARSAD स्वतंत्र अंवेषक पुरस्कार और जॉर्ज Largay की स्मृति में एक IMHRO राइजिंग स्टार अवसाद अनुसंधान पुरस्कार द्वारा वित्त पोषित किया गया SCD ।

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Wireless Low Profile Running Wheels, Hubs, Software Med Associates ENV-047
Standard Teklad Rodent Chow Envigo 8604
8 Week Old Mice Jackson Laboratories Balb/cJ Strain used in our study - Can use other strains to assess ABA
Scout Pro Scale 200 g Ohaus SPE202 Used to weigh mice
Scout Pro Scale 400 g Ohaus SPE402 Used to weight food

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Welch, A. C., Katzka, W. R., Dulawa, S. C. Assessing Activity-based Anorexia in Mice. J. Vis. Exp. (135), e57395, doi:10.3791/57395 (2018).

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