Summary
Lokala drogen leverans till submandibular körtlar är av intresse i förståelse spottkörtel biologi och för utvecklingen av nya behandlingar. Vi presenterar en uppdaterad och detaljerad retroductal injektion protokoll, utformade för att förbättra leveransprecision och experimentell reproducerbarhet. Programmet presenteras häri är leverans av Polymera nanopartiklar.
Abstract
Två gemensamma mål för spottkörtel therapeutics är förebyggande och behandling av vävnad dysfunktion efter antingen autoimmuna eller strålning skada. Genom att leverera lokalt bioaktiva föreningar spottkörtlarna, uppnås större vävnad koncentrationer säkert kontra systemisk administrering. Dessutom av målvävnaden kan effekter från extra glandular ansamling av material sänkas dramatiskt. I detta avseende är retroductal injektion en allmänt använd metod för att utreda såväl spottkörteln biologi och patofysiologi. Retroductal administration av tillväxtfaktorer, primära celler, adenovirala vektorer och småmolekylära läkemedel har visat sig stödja körtel funktion i fastställandet av skada. Vi har tidigare visat effekten av en retroductally injiceras nanopartikel-siRNA strategi att upprätthålla körtel funktion efter bestrålning. Här, en mycket effektiv och reproducerbar metod att administrera nanomaterial till murina submandibular körtel genom Whartons kanalen är detaljerad (figur 1). Vi beskriva åtkomst till munhålan och beskriva åtgärder som är nödvändiga till cannulate Whartons kanal, med ytterligare observationer som kvalitetskontroller under hela förfarandet.
Introduction
Saliv-körtel dysfunktion har många etiologier, inklusive Sjögrens syndrom, en autoimmun medierad förlust av fungerande sekretoriska vävnad och strålning inducerad muntorrhet (RIH), en gemensam Lönnhöstmal av huvud och hals cancer strålbehandling1. Förlust av saliv funktion på grund av antingen tillstånd predisponerar individer till muntliga och systemisk infektion, karies, mag- och svälja dysfunktion, talsvårigheter och egentlig depression1,2,3. Som ett resultat, lider livskvalitet avsevärt, med insatser som begränsat till lindringen av symtom i stället för att bota4. För att undersöka nya terapier i vivo, är det av intresse att administrera bioaktiva föreningar direkt till den saliv-körteln.
Retroductal injektion är en värdefull metod för att leverera bioaktiva föreningar direkt till spottkörtlarna och testa effekten i sjukdom, skada, eller under normal vävnad homeostas. Tre stora spottkörtlarna är parotis (PG), submandibular (SMG) och sublinguala (SLG), alla som Tom i munhålan via utsöndringsorganen kanaler. Anatomi av en murin SMG tillåter direkt tillgång via kanylering av Whartons kanalen, ligger i golvet i munnen under tungan5. Efter kanylering solvatiserade droger kan administreras direkt till SMG. Retroductal leverans, extra glandular diffusion är begränsad av omgivande vävnad kapsel som reglerar utbytet av material med omgivande strukturer6. SMG och dess kanal struktureras på samma sätt hos människor, och används rutinmässigt under SMG kirurgi och sialoendoscopy7. Hos människor och möss är till PG jämväl tillgänglig via Stensens kanal i den buckala slemhinna8.
I murina modeller av RIH, har SMG retroductal injektion använts för att leverera therapeutics inklusive tillväxtfaktorer, primära celler, adenovirala vektorer, cytokiner och antioxidantföreningar att modulera den cellulära Svaren till skada och minska den resulterande vävnad skada5,9,10,11,12,13,14,15,16. Den mest anmärkningsvärda klinisk framgången retroductal injektionsstället är administrationen av adenovirala vektor till direkt uttryck för en vattenkanal (akvaporinet 1; AQP1) hos patienter efter strålningen för huvud och hals cancer17.
Vi har tidigare utvecklat och visas effekten av en retroductally injiceras polymera nanopartiklar-siRNA system att skydda Saliv-körtel funktion från RIH11,18,19,20. Som en förlängning av vårt tidigare arbete, här, visar vi våra protokoll för retroductal SMG injektion med en fluorescently märkt nanopartiklar (NP) klarar av lastning och leverera annars svårlösliga läkemedel21,22, 23.
Vi har syntetiseras NP från en diblock sampolymer består av poly (styren-alt-maleinsyra anhydride)-b-poly(styrene) (PSMA) genom reversibel tillägg kedja fragmentering (flotte) polymerisation, som tidigare beskrivits21. Genom lösningsmedel utbyte montera dessa polymerer spontant själv in micelle NP strukturer med en hydrofob interiör och hydrofil exteriör21. NPs är märkta med Texas-röd fluorophore tillåter kontrollen av NP leverans till körtlar utan att offra djur. Levande djur imaging och SMG immunohistokemi visas på 1 h och 1 dag efter injektionen.
Detta uppdateras och reproducerbara kanylering protokollet bör göra det möjligt för andra att uppnå retroductal injektion. Vi förväntar oss att denna förfinade teknik kommer att bli avgörande för in-vivo studier och terapeutisk utveckling24,25.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Alla i vivo förfaranden som beskrivs nedan godkändes av utskottet universitet på djur resurser vid University of Rochester, Rochester, NY.
1. beredning
- Med 32G intrakraniell katetern slangen med wire infälld, skär 3 cm av slangen att bilda en avfasad slut, cirka 45° till den långa axeln. Kontrollera att kabeln är minst 1 cm längre än slangen.
- Läsa in 50 µL PSMA nanopartiklar lösning (figur 1), eller annat material som injektion, i en Hamilton spruta. För att minska sannolikheten för barotrauma under injektion, fäst katetern slangen, med mandrängen bort, till sprutan och utvisa dödvolym.
- Inspektera injektionslösningen för att säkerställa nanopartikelportföljen är fullt solvatiserade att förhindra duktal obstruktion efter administrering.
- Bered atropin vid 0,1 mg/mL.
Obs: Eftersom atropin är ljuskänsligt och försämras med tiden, denna lösning bör göras samma dag som injektion, och skyddas från ljus tills administreras.
2. åtkomst och visualisera duktal Entry Point
- Väga C57/BL6 möss använder en Analysvåg.
- Med en 0,5 mL spruta med 29G x ½ ”nål, söva möss med en intraperitonealt injicerade steril koksaltlösning av 100 mg/kg ketamin och 10 mg/kg xylazin. Gå vidare till följande steg när musen inte längre svarar på stimuli, vilket uppstår vanligen inom 5-10 min efter injektion.
Obs: Denna procedur kan också utföras under isofluran, men kräver en anpassad näsan konen som tillåter åtkomst till munhålan. - För att förhindra torrhet under förfarandet, gäller smörjmedel för ögon och Placera musen i en liggande ställning på en anpassad scen.
Obs: För att upprätthålla lämpliga villkor för intraoral förfarande, verktyg bör desinficeras eller steriliseras före varje användning. - Öppna munhålan genom att säkra de maxillary framtänderna över en metall beam, och Använd ett elastiskt band för att tillämpa nedåtgående spänning bakom de mandibular framtänderna (figur 2A).
- Anpassa musen under mikroskopet dissekera så att basen av käken är visualiseras.
- För att vidga munnen, använder du en anpassad, böjd stål upprullningsdon för att tillämpa spänning bilateralt på buckala slemhinnan.
- För att visualisera den submandibular papiller, grepp och lyft försiktigt tungan från golvet i munnen med trubbig pincett.
Obs: Papiller visas som två blek utskjutande delar under tungan (figur 2B). - För att underlätta den visualisering och ytterligare manipulation inom munhålan, placera bomull mellan tungan och buckala slemhinnan.
3. duktal kanylering och linje placering
- Med fina, förstå böjd pincett, kateter slang med den tråd infällt. För optimal manuell kontroll under kanylering, justera slangen med krökning av tången (figur 3A).
- Använda mikroskopet dissekera, flytta tången och tråd in i synfältet.
Obs: Tråden bör utskjutande från slangen. - Applicera försiktigt tryck i basen av en submandibulär papilla använda tråd infällda för att producera små, ytliga, mucosal punktering (0,076 mm diameter) som kommer att underlätta senare inträde av katetern slangen (0,25 mm diameter). Om motstånd påträffas, skär färsk avfasade tips på både slang och tråd infälld med vass dissekera sax.
- Efter posten, ta ut mandrängen och använda mikroskopet dissekera, bekräfta förekomsten av saliv på injektionsstället. Undvika kraftfullt eller plötslig rörelse (uttag eller insättning) av mandrängen som kan orsaka blödning eller äventyra duktal integritet.
- Dra tillbaka mandrängen inom slangen (figur 3B).
- För att säkerställa att injektion slangar passar i Whartons kanalen öppna, infoga slangar som innehåller mandrängen som en styv guide till tidigare gjorda punkteringen (figur 2 C).
Obs: Om inte utförs snabbt, lokal svullnad kan hindra återinförande. - För att förhindra mottryck från långvarig duktal obstruktion, dra upp slangen. Inspektera för att verifiera att en öppning, synlig under mikroskopi, kan ses i submandibular papilla. Om synlig blödning uppstår, avlägsna mandrängen och reattempt från steg 3,2 på den motsättande submandibular papiller.
- Utan att röra musen, administrera intraperitoneal injektion av 1 mg/kg atropin lösning, att minska salivavsöndring under förfarandet. Vänta 5-10 min.
- Ta tag i slutet av sprutan slangen och sätt in i den öppning som använder mikroskopet dissekera (figur 3 c). Om motstånd påträffas, skär en färsk avfasade änden på slangen och reattempt.
- När slangen är på plats inom submandibular papilla, avancera långsamt 3-5 mm i kanalen. Lossa slangen från tången.
- För att förbättra tätningen mellan slangen och submandibular papilla, torr gränssnittet genom att försiktigt läska med gasbinda för 1 min.
- Inspektera för att bekräfta att placeringen av slangen inte har skiftat under torkningen.
4. injektion
- Injicera materialet med en hastighet av 10 µL/min. Inspect bekräfta att musen förblir sederad och inte visar tecken på ångest (figur 2D).
Obs: Injektioner av 15-50 µL tolereras väl. Injektion av större volymer kan resultera i barotrauma. - Efter injektionen, upprätthålla sprutan tryck för 5 min till förbättra retention av material inom Whartons kanal och SMG (figur 4). Inspektera submandibular papilla regelbundet för att se till att slangen inte avslutas duktal öppningen.
- Med fin pincett, förstå och ta försiktigt ut slangen från den submandibular papiller.
Obs: Det är normalt att iaktta vissa flytande avstigning från papiller. - Ta bort upprullningsdon och bomull från munhålan innan du flyttar musen från scenen.
Obs: Djuret bör inte lämnas utan uppsikt tills den har återfått tillräcklig medvetande för att upprätthålla sternala koordinationsrubbning. Dessutom se till att musen inte ligger med andra möss tills återhämtat sig helt.
5. kontroll och analys
Obs: En i vivo Imaging System (IVIS) kan användas för att bedöma lagring av fluorescently märkt nanopartiklar efter injektion (som visas 1 h och 24 h efter injektion i figur 5).
- För att bättre visualisera fluorescerande signal inom SMG genom huden, ta bort den ventrala päls överliggande automatkarbiner antingen genom rakning eller använda en kemiska hårborttagningsprodukter.
Obs: Efter eutanasi, SMG vävnad kan även skördas, fast (övernattning i 4% PARAFORMALDEHYD) och målat med immunohistokemi bekräfta persistens av fluorescently märkta NP en dag efter injektion (figur 6).
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Retroductal injektion kan användas för att administrera NPs till murina SMG (figur 1). Här, levererar vi 50 µg PSMA NPs märkt med Texas Red fluorophore.
Korrekt placering av musen tillåter lättköpt tillgång och visualisering av golvet i munnen (figur 2A-B). Den submandibular papiller identifieras två köttiga utskjutande delar under tungan. Efter den kanylering (figur 2 c) och atropin injektion, spruta slang kan placeras i den submandibular papiller (figur 2D).
För att underlätta kanylering, görs först en liten punktering i submandibular papilla använda tråd mandrängen inuti katetern slangen (figur 3A). När detta är gjort, bör mandrängen dras inom slangen att fungera som en styv guide medan en större öppning görs (figur 3B). Mandrängen har en diameter på 0,076 mm, medan katetern slangen har en yttre diameter på 0,25 mm. Efter skapandet av denna större öppning, pre-lastat katetern slangar, bifogas injektionssprutan, kan sedan styras in duktal öppningen (figur 3 c).
Efter injektionen, det rekommenderas att sprutan vara orörlig och insprutningstryck underhålls. Om trycket inte tillämpas, kommer leverans att lyckas, om än med mindre effektivitet och reproducerbarhet. Detta demonstreras genom injicering 50 µL av 1% toluidin blått färgämne bilateralt och observera ljussvagare färgning i körteln utan underhållna tryck efter injektion (figur 4).
Kontrollera NP leverans genom kan IVIS användas för att identifiera fluorescerande signal inom musen, som är lateralized till den injicerade region 1 h post administrationen (figur 5). Detta tillvägagångssätt möjliggör bekräftelse utan euthanizing musen och kan fortsättas längdriktningen tills signalen är inte längre detekterbar26,27.
För att bekräfta NP persistens i SMG 24 h följande injektion, kan körtlar sektioneras och ses av fluorescerande imaging. Aqp5 och Krt5 IHC Markera sekretoriska och duktal celler av SMG, respektive, och visar NPs i båda fack (figur 6).
Figur 1 . Retrograd injektion Schematisk. Efter duktal kanylering och spruta placering, 50 µL av 1 mg/mL polymera NP lösning injiceras i SMG. Representativa transmission electron Mikrograf (TEM) visar monodisperse (polydispertion index = 0,2) NP befolkningen. Klicka här för att se en större version av denna siffra.
Figur 2 . Retrograd injektion steg. (A) tillgång till munhålan genom att separera på överkäken och mandibular framtänderna. (B) visualisera den papiller (box) under tungan på golvet i munnen, som markerar platsen för Wharton's duct. (C) med en kateter med wire infälld, försiktigt cannulate basen av submandibular papilla. (D) efter kanylering, katetern slangen kan utbytas med spruta slang vänligen klicka här för att visa en större version av denna siffra.
Figur 3 . Effektiv positionering av katetern och mandrängen för Wharton's duct kanylering. (A) anpassa slangen med krökning av tången, och skär en avfasade änden på slangen och tråd från början punktera den sublinguala papillen. (B) återkalla mandrängen inom slangen att göra en styv guide att infoga slangen inom sublinguala papilla. (C) infoga katetern slangen (mandrängen bort), ansluten till injektionsspruta, inom tidigare gjorda öppningen. Klicka här för att se en större version av denna siffra.
Figur 4 . Att upprätthålla spruta påtryckningarna efter injektion förbättrar materialkvarhållning. Efter retroductal injektioner av 50 µL av 1% toluidin blå, spruta påtryckningar bibehölls antingen för 5 min (rätt SMG - första injektion) eller sprutan drogs omedelbart efter injektionen (vänster SMG - andra injektionen). Klicka här för att se en större version av denna siffra.
Figur 5 . Bekräftelse av retroductal NP leverans efter injektionen. (A) In vivo Imaging System (IVIS) visar lateralization av röd fluorescerande signal till behandlade () vänster mus 1 h efter injektionen. (B) NP IVIS signal på 24 h har minskat betydligt. Klicka här för att se en större version av denna siffra.
Figur 6 . Bekräftelse av retroductal NP persistens 24 h efter injektionen. A, C. Uninjected kontroll SMG färgas för Aqp5 och Krt5, märkning sekretoriska acinar och duktal celler, respektive. B, D. I retroductal NP injiceras SMG, Aqp5 och Krt5 fläckar Visa normal körtel morfologi och NPs tas upp i både acini och kanaler (skala barer: 75 µm). Klicka här för att se en större version av denna siffra.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Retroductal injektion är kritiska för lokaliserade drogen leverans till den saliv-körteln. Denna teknik har tillämpningar inom screening terapeutiska medel för villkor inklusive Sjögrens syndrom och RIH9,10,28. Direkta drogen leverans till SMG via retroductal injektion ger en viktig fördel jämfört med systemisk administrering i dess potential att minska off-target effekter, inklusive immunsystemets aktivering11. Möjligheten att maximera lokal drog leverans, utan ackumulering i omgivande vävnader kan också aktivera terapeutiska testning i en dos bredare än kunde uppnås systemiskt.
Vi presenterar detta protokoll, med felsökning och kvalitet kontrollera steg, som en detaljerad och uppdaterad metod att leverera polymera nanomaterial genom Whartons kanalen till murina SMG20. Korrekt användning av en tråd guide underlättar till exempel kanyl placering. Dessutom minimeras risken för slemhinnor trauma med torr blotting istället för cyanoakrylat lim för att hålla kanylen på plats under injektionen. Denna metod kan användas för att behandla möss med en rad föreningar och kan utföras över flera dagar med samma musen för att utvärdera en timecourse av upprepad administrering11.
Normala körtelsekret kommer att ge en enkel och okomplicerad clearance-mekanismen för överskjutande nyttolast, även om denna strategi bör optimeras för olika tillämpningar av noggrant urval av injicerade ämnet och titrering av atropin dosering. I det här fallet kvarstår NPs i SMG under minst 24 h. Genom att använda NPs kan drogen lastning eller liknande nanomaterial, framtida tillämpningar av detta arbete inkludera att övervinna den löslighetsgräns som annars skulle hindra testning hydrofoba agenter med retroductal injektion20,21.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Författarna har något att avslöja.
Acknowledgments
Forskning som redovisas i denna publikation stöddes av det nationella institutet för tandvård och kraniofaciala forskning (NIDCR) och National Cancer Institute (NCI) av det nationella Institutes of Health under Award nummer R56 DE025098, UG3 DE027695 och F30 CA206296. Innehållet ansvarar enbart för författarna och representerar inte nödvändigtvis officiella ståndpunkter av National Institutes of Health. Detta arbete stöddes också av den NSF DMR 1206219 och IADR Innovation i Oral Care Award (2016).
Vi vill tacka Jayne Gavrity för hennes hjälp utföra IVIS experiment. Vi vill tacka Karen Bentley för hennes ingång och bistånd utföra EM. Vi vill tacka Pei-Lun Weng för hans hjälp med IHC. Vi vill tacka Matthew Ingalls för hans hjälp i figur förberedelse. Vi vill tacka Dr Elaine Smolock och Emily Wu för kritisk läsning av detta manuskript.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Pilocarpine hydrochloride | Sigma Aldrich | P6503 | Pilocarpine |
| Student Vannas Spring Scissors | Fine Science Tools | 91500-9 | Spring Scissors for Tracheostomy |
| Sterile Saline Solution | Medline | RDI30296H | Saline |
| Dumont #7 Forceps | Fine Science Tools | 11274-20 | Curved Forceps |
| Dumont #5 Forceps | Fine Science Tools | 11251-10 | Straight Forceps |
| Standard Pattern Forceps | Fine Science Tools | 11000-12 | Blunt Forceps |
| Fine Scissors- Tungsten Carbide | Fine Science Tools | 14568-09 | Dissection Scissors |
| Microhematocrit Heparinized Capillary Tubes | Fisher Scientific | 22362566 | Capillary tubes |
| Lubricant Eye Ointment | Refresh | N/A | Refresh Lacri-Lube |
| Goat polyclonal anti-Nkcc1 | Santa Cruz Biotech | SC-21545 | Nkcc1 Antibody |
| DAPI (4',6-Diamidino-2-Phenylindole, Dihydrochloride) | Thermo Fisher Scientific | D1306 | DAPI |
| GraphPad Prism | GraphPad | ver6.0 | Statistical Software |
| Cotton tipped applicator | Medline | MDS202000 | Applicator for eye ointment |
| 0.5cc Insulin Syringe, 29G x 1/2" | BD | 7629 | Syringe for intraperitoneal injection |
References
- Miranda-Rius, J., Brunet-Llobet, L., Lahor-Soler, E., Farre, M. Salivary Secretory Disorders, Inducing Drugs, and Clinical Management. International Journal Of Medical Sciences. 12 (10), 811-824 (2015).
- Acauan, M. D., Figueiredo, M. A. Z., Cherubini, K., Gomes, A. P. N., Salum, F. G. Radiotherapy-induced salivary dysfunction: Structural changes, pathogenetic mechanisms and therapies. Archives of Oral Biology. 60 (12), 1802-1810 (2015).
- Dirix, P., Nuyts, S., Vander Poorten, V., Delaere, P., Van den Bogaert, W. The influence of xerostomia after radiotherapy on quality of life. Supportive Care in Cancer. 16 (2), 171-179 (2008).
- Vissink, A., et al. Clinical management of salivary gland hypofunction and xerostomia in head-and-neck cancer patients: successes and barriers. International Journal of Radiation Oncology Biology Physics. 78 (4), 983-991 (2010).
- Delporte, C., et al. Increased fluid secretion after adenoviral-mediated transfer of the aquaporin-1 cDNA to irradiated rat salivary glands. Proceedings of the National Academy of Sciences. 94 (7), 3268-3273 (1997).
- Samuni, Y., Baum, B. J. Gene delivery in salivary glands: from the bench to the clinic. Biochimica et Biophysica Acta. 1812 (11), 1515-1521 (2011).
- Beahm, D. D., et al. Surgical approaches to the submandibular gland: A review of literature. International Journal of Surgery. 7 (6), 503-509 (2009).
- Zheng, C., Shinomiya, T., Goldsmith, C. M., Di Pasquale, G., Baum, B. J. Convenient and reproducible in vivo gene transfer to mouse parotid glands. Oral diseases. 17 (1), 77-82 (2011).
- Zheng, C., et al. Prevention of Radiation-Induced Salivary Hypofunction Following hKGF Gene Delivery to Murine Submandibular Glands. Clinical Cancer Research. 17 (9), 2842-2851 (2011).
- Okazaki, Y., et al. Acceleration of rat salivary gland tissue repair by basic fibroblast growth factor. Archives of Oral Biology. 45 (10), 911-919 (2000).
- Arany, S., Benoit, D. S., Dewhurst, S., Ovitt, C. E. Nanoparticle-mediated gene silencing confers radioprotection to salivary glands in vivo. Molecular Therapy. 21 (6), 1182-1194 (2013).
- Cotrim, A. P., Sowers, A., Mitchell, J. B., Baum, B. J. Prevention of irradiation-induced salivary hypofunction by microvessel protection in mouse salivary glands. Molecular Therapy. 15 (12), 2101-2106 (2007).
- Redman, R. S., Ball, W. D., Mezey, E., Key, S. Dispersed donor salivary gland cells are widely distributed in the recipient gland when infused up the ductal tree. Biotechnic & Histochemistry. 84 (6), 253-260 (2009).
- Grundmann, O., Fillinger, J. L., Victory, K. R., Burd, R., Limesand, K. H. Restoration of radiation therapy-induced salivary gland dysfunction in mice by post therapy IGF-1 administration. BMC Cancer. 10, 417-417 (2010).
- Limesand, K. H., et al. Insulin-Like Growth Factor-1 Preserves Salivary Gland Function After Fractionated Radiation. International Journal of Radiation Oncology Biology Physics. 78 (2), 579-586 (2010).
- Marmary, Y., et al. Radiation-induced loss of salivary gland function is driven by cellular senescence and prevented by IL-6 modulation. Cancer Research. , (2016).
- Baum, B. J., et al. Early responses to adenoviral-mediated transfer of the aquaporin-1 cDNA for radiation-induced salivary hypofunction. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 109 (47), 19403-19407 (2012).
- Arany, S., et al. Pro-apoptotic gene knockdown mediated by nanocomplexed siRNA reduces radiation damage in primary salivary gland cultures. Journal of Cellular Biochemistry. 113 (6), 1955-1965 (2012).
- Benoit, D. S. W., Henry, S. M., Shubin, A. D., Hoffman, A. S., Stayton, P. S. pH-responsive polymeric siRNA carriers sensitize multidrug resistant ovarian cancer cells to doxorubicin via knockdown of polo-like kinase 1. Molecular pharmaceutics. 7 (2), 442-455 (2010).
- Malcolm, D. W., Varghese, J. J., Sorrells, J. E., Ovitt, C. E., Benoit, D. S. W. The Effects of Biological Fluids on Colloidal Stability and siRNA Delivery of a pH-Responsive Micellar Nanoparticle Delivery System. ACS Nano. , (2017).
- Baranello, M. P., Bauer, L., Benoit, D. S. Poly(styrene-alt-maleic anhydride)-based diblock copolymer micelles exhibit versatile hydrophobic drug loading, drug-dependent release, and internalization by multidrug resistant ovarian cancer cells. Biomacromolecules. 15 (7), 2629-2641 (2014).
- Wang, Y., et al. Fracture-Targeted Delivery of β-Catenin Agonists via Peptide-Functionalized Nanoparticles Augments Fracture Healing. ACS Nano. 11 (9), 9445-9458 (2017).
- Baranello, M. P., Bauer, L., Jordan, C. T., Benoit, D. S. W. Micelle Delivery of Parthenolide to Acute Myeloid Leukemia Cells. Cellular and Molecular Bioengineering. 8 (3), 455-470 (2015).
- Kuriki, Y., et al. Cannulation of the Mouse Submandibular Salivary Gland via the Wharton's Duct. Journal of Visualized Experiments. (51), e3074 (2011).
- Nair, R. P., Zheng, C., Sunavala-Dossabhoy, G. Retroductal Submandibular Gland Instillation and Localized Fractionated Irradiation in a Rat Model of Salivary Hypofunction. Journal of Visualized Experiments. (110), (2016).
- Wang, Y., Malcolm, D. W., Benoit, D. S. W. Controlled and sustained delivery of siRNA/NPs from hydrogels expedites bone fracture healing. Biomaterials. 139 (Supplement C), 127-138 (2017).
- Hoffman, M. D., Van Hove, A. H., Benoit, D. S. W. Degradable hydrogels for spatiotemporal control of mesenchymal stem cells localized at decellularized bone allografts. Acta Biomaterialia. 10 (8), 3431-3441 (2014).
- Nguyen, C. Q., Yin, H., Lee, B. H., Chiorini, J. A., Peck, A. B. IL17: potential therapeutic target in Sjogren's syndrome using adenovirus-mediated gene transfer. Laboratory Investigation. 91 (1), 54-62 (2011).
