Summary

Agarose-baserte vev Mimicking optisk Phantoms for diffus refleksjon spektroskopi

Published: August 22, 2018
doi:

Summary

Her viser vi hvordan agarose-baserte vev-mimicking optisk fantomer gjøres og hvordan optiske egenskaper fastsettes ved hjelp av en konvensjonell optisk system med en integrert sfære.

Abstract

Denne protokollen beskriver hvordan lage agarose-baserte vev-mimicking fantomer og demonstrerer hvordan å bestemme optiske egenskapene med en konvensjonell optisk system med en integrert sfære. Måle systemer for oppkjøpet av diffus refleksjon og totale transmisjon spectra er bygget med bredbånd hvit lyskilde, en lys guide, en achromatic linse, en integrert sfære, prøve innehaver, en optisk fiber sonde, og flerkanals spectrometer. En akryl mold som består av to rektangulære akryl stykker og en U-formet akryl stykke er konstruert for å opprette en epidermal phantom og en dermal phantom med fullblod. Anvendelsen av en natrium dithionite (Na2S2O4) løsning til dermal phantom gjør forskeren til deoxygenate hemoglobin i røde blod celler distribuert i dermal phantom. Inverse Monte Carlo simulering med diffus refleksjon og totale transmisjon spectra målt ved et spektrometer med en integrert sfæren er utført for å avgjøre den absorpsjon koeffisienten spektrum µen(λ) og redusert spredning koeffisienten spektrum μs‘ (λ) i hvert lag phantom. En to-lagdelt phantom mimicking diffus refleksjon av menneskelige huden vev er også demonstrert av piling opp epidermal phantom på dermal phantom.

Introduction

Optisk phantoms objekter mimicking den optiske egenskapene av biologisk vev og brukt mye innen Biomedisinsk optikk. De er utformet slik at den optiske egenskapene, for eksempel lysspredning og absorpsjon koeffisienter, samsvarer med de av levende menneske og dyr vev. Optisk fantomer brukes vanligvis til følgende formål: simulere lys transport i biologisk vev, kalibrere en nyutviklet optisk systemdesign, vurdere kvaliteten og ytelsen av eksisterende systemer, sammenligne ytelsen mellom systemer og validere evne av optiske metoder å kvantifisere den optiske egenskaper1,2,3,4,5. Derfor kreves lett å få stoffer, en enkel fabrikasjon prosessen, en høy reproduserbarhet og en optisk stabilitet for å lage optiske fantomer.

Ulike typer optisk fantomer med forskjellige base materialer som vandig suspensjon6, gelatin gel7, agarose gel8,9,10, polyakrylamid gel11, harpiks12, 13,14,15,16, og rom-temperatur-vulcanizing silikon17 har blitt rapportert i forrige litteratur. Det har blitt rapportert at gelatin og alginate-baserte gels er nyttig for optisk fantomer med heterogene strukturer18. Alginate fantomer har en egnet mekanisk og termisk stabilitet for å vurdere photothermal effekter som laser ablasjon studier og laser-basert hypertermi studier18. Agarose gels har muligheten til å dikte heterogene strukturer, og deres mekaniske og fysiske egenskaper er stabil for en lang tid18. Høy renhetsgrad agarose gels har en svært lav turbiditet og en svak optisk absorpsjon. Derfor kan optiske egenskaper av agarose-baserte fantomer lett være utformet med riktig lys spredning og absorberende agenter. Nylig styren-etylen-butylene-styren (SEBS) blokk copolymers19 og polyvinylklorid (PVC) gels20 har blitt rapportert som interessant phantom materialer for optisk og photoacoustic teknikker.

Polymer mikrosfærer7,12,21,22, Titan oksid pulver1og lipid emulsjoner23,24,25,26 som melk og lipid emulsjon brukes som lysspredning agenter, mens svart blekk27,28 og molekylære fargestoffer29,30 brukes som lys dempere. Diffus refleksjon spektra av de fleste levende organer er dominert av absorpsjon av oksygen og deoxygenated hemoglobin i røde blod celler. Derfor hemoglobin løsninger31,32 og fullblod,8,,9,,10,,33,,36 blir ofte brukt som lys dempere i den fantomer for en diffus refleksjon spektroskopi og multispectral bildebehandling.

Metoden beskrevet i denne artikkelen brukes til å opprette en optisk phantom mimicking lys transport i biologisk vev og karakterisere optiske egenskaper. Som et eksempel, en to-lagdelt optisk phantom mimicking optiske egenskaper av menneskelig hud vev er demonstrert. Fordelene med denne metoden over alternative teknikker er muligheten til å representere diffus refleksjon spektra av levende biologisk vev i den synlige for nær-infrarøde bølgelengdeområdet, samt enkelheten å gjøre det, bruke som er lett tilgjengelig materialer og konvensjonelle optiske instrumenter. Derfor vil de optiske fantomer laget av denne metoden være nyttig for utvikling av optisk metoder basert på diffus refleksjon spektroskopi og multispectral bildebehandling.

Protocol

1. bygging av en konvensjonell diffus refleksjon og totale transmisjon spektroskopiske System Merk: Konstruere måling systemer for diffus refleksjon og totale transmisjon spectra bredbånd hvit lyskilde, en lys guide, en achromatic linse, en integrert sfære, prøve innehaver, en optisk fiber og en flerkanals spectrometer. Rollen til lys fellen er å fjerne komponenten specular refleksjon fra refleksjon spekteret. Eksempel innehaver av integrere sfæren består av en monteringsplaten og svaleha…

Representative Results

Figur 3 viser til representant anslagsvis spectra redusert spredning koeffisient og absorpsjon koeffisient for epidermal phantom og dermal phantom. Resultatene vises i Figur 3 er gjennomsnitt av ti mål til både refleksjon og transmisjon spectra. Redusert spredning koeffisienten μs’ har en bred spredning spektrum, viser en høyere styrke på kortere bølgelengder. Spectral funksjonene tilsvarer de t…

Discussion

Det viktigste trinnet i denne protokollen er temperaturkontroll grunnmaterialet. Temperaturen å opprettholde grunnmaterialet varierte fra 58 til 60 ° C. Hvis temperaturen er mer enn 70 ° C, oppstår en denaturering av både den lipid emulsjonen og hele blod. Som en konsekvens, vil den optiske egenskapene av phantom svekkes. Hvis temperaturen er mindre enn 40 ° C, basen materialet vil være ununiformly gelled og dermed lette spredning og absorpsjon agentene vil bli heterogeneously distribuert i phantom. Selv om grunnm…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Del av dette arbeidet ble støttet av en Grant-in-Aid for Scientific Research (C) fra japansk Society for fremme av vitenskap (25350520, 22500401, 15 K 06105) og US ARMY ITC-PAC forsknings og utviklingsprosjekt (FA5209-15-P-0175, FA5209-16-P-0132).

Materials

150-W halogen-lamp light source Hayashi Watch Works Co., Ltd, Tokyo, Japan LA-150SAE
Light guide Hayashi Watch Works Co., Ltd, Tokyo, Japan LGC1-5L1000
Integrating Sphere Labsphere Incorporated, North Sutton, NH, USA RT-060-SF
Port adapter Labsphere Incorporated, North Sutton, NH, USA PA-050-SMA-SF
Light trap Labsphere Incorporated, North Sutton, NH, USA LTRP-100-C
Spectralon white standard with 99% diffuse reflectance Labsphere Incorporated, North Sutton, NH, USA SRS-99-020
Optical fiber Ocean Optics Inc., Dunedin, Florida, USA P400-2-VIS-NIR
Miniature Fiber Optic Spectrometer Ocean Optics Inc., Dunedin, Florida, USA USB2000
Achromatic lens Chuo Precision Industrial Co.,Ltd, Tokyo, Japan ACL-50-75M
Intralipid Fresenius Kabi AB, Uppsala, Sweden Intralipid 10%
Coffee
(Blendy Mocha Blend Regular Coffee)
Ajinomoto AGF, Inc. Tokyo, Japan Unavailable
Whole blood Nippon Bio-Test Laboratories Inc. Saitama, Japan 0103-2
Agarose Nippon Genetics Co., Ltd, Tokyo, Japan NE-AG02
Cooking heater TOSHIBA CORPORATION Tokyo, Japan HP-103K

References

  1. Pogue, B. W., Patterson, M. S. Review of tissue simulating phantoms for optical spectroscopy, imaging and dosimetry. Journal of Biomedical Optics. 11 (4), 041102 (2006).
  2. Cohen, G. Contrast–detail–dose analysis of six different computed tomographic scanners. Journal of Computer Assisted Tomography. 3 (2), 197-203 (1979).
  3. Seltzer, S. E., Swensson, R. G., Judy, P. F., Nawfel, R. D. Size discrimination in computed tomographic images. Effects of feature contrast and display window. Investigative Radiology. 23 (6), 455-462 (1988).
  4. Pifferi, A., et al. Performance assessment of photon migration instruments: the MEDPHOT protocol. Applied Optics. 44 (11), 2104-2114 (2005).
  5. Linford, J., Shalev, S., Bews, J., Brown, R., Schipper, H. Development of a tissue-equivalent phantom for diaphanography. Medical Physics. 13 (6), 869-875 (1986).
  6. Durkin, A. J., Jaikumar, S., Richardskortum, R. Optically dilute, absorbing, and turbid phantoms for fluorescence spectroscopy of homogeneous and inhomogeneous samples. Applied Spectroscopy. 47 (12), 2114-2121 (1993).
  7. Nishidate, I., Aizu, Y., Mishina, H. Estimation of melanin and hemoglobin in skin tissue using multiple regression analysis aided by Monte Carlo simulation. Journal of Biomedical Optics. 9 (4), 700-710 (2004).
  8. Nishidate, I., Maeda, T., Aizu, Y., Niizeki, K. Visualizing depth and thickness of a local blood region in skin tissue using diffuse reflectance images. Journal of Biomedical Optics. 12 (5), 054006 (2007).
  9. Nishidate, I., et al. Noninvasive imaging of human skin hemodynamics using a digital red-green-blue camera. Journal of Biomedical Optics. 16 (8), 086012 (2011).
  10. Bharathiraja, S., et al. Multi-modality tissue-mimicking phantom for thermal therapy. Physics in Medicine & Biology. 49 (13), 2767-2778 (2004).
  11. Firbank, M., Oda, M., Delpy, D. T. An improved design for a stable and reproducible phantom material for use in near-infrared spectroscopy and imaging. Physics in Medicine & Biology. 40 (5), 955-961 (1995).
  12. Hebden, J. C., Hall, D. J., Firbank, M., Delpy, D. T. Timeresolved optical imaging of a solid tissue-equivalent phantom. Applied Optics. 34 (34), 8038-8047 (1995).
  13. Firbank, M., Delpy, D. T. A phantom for the testing and calibration of near-infrared spectrometers. Physics in Medicine & Biology. 39 (9), 1509-1513 (1994).
  14. Sukowski, U., Schubert, F., Grosenick, D., Rinneberg, H. Preparation of solid phantoms with defined scattering and absorption properties for optical tomography. Physics in Medicine & Biology. 41, 1823-1844 (1996).
  15. Beaudry, S., P, Fabrication and characterization of a solid polyurethane phantom for optical imaging through scattering media. Applied Optics. 38 (19), 4247-4251 (1999).
  16. Lualdi, M., Colombo, A., Farina, B., Tomatis, S., Marchesini, R. A phantom with tissue-like optical properties in the visible and near infrared for use in photomedicine. Lasers in Surgery and Medicine. 28 (3), 237-243 (2001).
  17. Dabbagh, A., Abdullah, B. J., Ramasindarum, C., Abu Kasim, N. H. Tissue-mimicking gel phantoms for thermal therapy studies. Ultrasonic Imaging. 36 (4), 291-316 (2014).
  18. Cabrelli, L. C., Pelissari, P. I., Deana, A. M., Carneiro, A. A., Pavan, T. Z. Stable phantom materials for ultrasound and optical imaging. Physics in Medicine & Biology. 62 (2), 432-447 (2017).
  19. Vogt, W. C., Jia, C., Wear, K. A., Garra, B. S., Pfefer, T. J. Biologically relevant photoacoustic imaging phantoms with tunable optical and acoustic properties. Journal of Biomedical Optics. 21 (10), 101405 (2016).
  20. Bays, R., et al. Three-dimensional optical phantom and its application in photodynamic therapy. Lasers in Surgery and Medicine. 21 (3), 227-234 (1997).
  21. Ramella-Roman, J. C., Bargo, P. R., Prahl, S. A., Jacques, S. L. Evaluation of spherical particle sizes with an asymmetric illumination microscope. IEEE Journal of Selected Topics in Quantum Electronics. 9 (2), 301-306 (2003).
  22. Waterworth, M. D., Tarte, B. J., Joblin, A. J., van Doorn, T., Niesler, H. E. Optical transmission properties of homogenised milk used as a phantom material in visible wavelength imaging. Australasian Physical and Engineering Science in Medicine. 18 (1), 39-44 (1995).
  23. Moes, C. J., van Gemert, M. J., Star, W. M., Marijnissen, J. P., Prahl, S. A. Measurements and calculations of the energy fluence rate in a scattering and absorbing phantom at 633 nm. Applied Optics. 28 (12), 2292-2296 (1989).
  24. van Staveren, H. J., Moes, C. J., van Marie, J., Prahl, S. A., van Gemert, M. J. Light scattering in intralipid-10% in the wavelength range of 400-1100 nm. Applied Optics. 30 (31), 4507-4514 (1991).
  25. Flock, S. T., Jacques, S. L., Wilson, B. C., Star, W. M., Vangemert, M. J. C. Optical-properties of intralipid – a phantom medium for light-propagation studies. Lasers in Surgery and Medicine. 12 (5), 510-519 (1992).
  26. Madsen, S. J., Patterson, M. S., Wilson, B. C. The use of India ink as an optical absorber in tissue-simulating phantoms. Physics in Medicine & Biology. 37, 985-993 (1992).
  27. Cubeddu, R., Pifferi, A., Taroni, P., Torricelli, A., Valentini, G. A solid tissue phantom for photon migration studies. Physics in Medicine & Biology. 42 (10), 1971-1979 (1997).
  28. Ebert, B., et al. Near-infrared fluorescent dyes for enhanced contrast in optical mammography: phantom experiments. Journal of Biomedical Optics. 6 (2), 134-140 (2001).
  29. Sukowski, U., Schubert, F., Grosenick, D., Rinneberg, H. Preparation of solid phantoms with defined scattering and absorption properties for optical tomography. Physics in Medicine & Biology. 41, 1823-1844 (1996).
  30. Yoshida, K., Nishidate, I., Ishizuka, T., Kawauchi, S., Sato, S., Sato, M. Multispectral imaging of absorption and scattering properties of in vivo exposed rat brain using a digital red-green-blue camera. Journal of Biomedical Optics. 20 (5), 051026 (2015).
  31. Lo, J. Y., et al. A strategy for quantitative spectral imaging of tissue absorption and scattering using light emitting diodes and photodiodes. Optics Express. 17 (3), 1372-1384 (2009).
  32. Bednov, A., Ulyanov, S., Cheung, C., Yodh, A. G. Correlation properties of multiple scattered light: implication to coherent diagnostics of burned skin. Journal of Biomedical Optics. 9 (2), 347-352 (2004).
  33. Hull, E. L., Nichols, M. G., Foster, T. H. Quantitative broadband near-infrared spectroscopy of tissue-simulating phantoms containing erythrocytes. Physics in Medicine & Biology. 43 (11), 3381-3404 (1998).
  34. Kienle, A., Patterson, M. S., Ott, L., Steiner, R. Determination of the scattering coefficient and the anisotropy factor from laser Doppler spectra of liquids including blood. Applied Optics. 35 (19), 3404-3412 (1996).
  35. Srinivasan, S., Pogue, B. W., Jiang, S., Dehghani, H., Paulsen, K. D. Spectrally constrained chromophore and scattering NIR tomography improves quantification and robustness of reconstruction. Applied Optics. 44 (10), 1858-1869 (2004).
  36. . Glossary. Dark Noise Available from: https://oceanoptics.com/glossary/#d (2018)
  37. Friebel, M., Roggan, A., Müller, G., Meinke, M. Determination of optical properties of human blood in the spectral range 250 to 1100 nm using Monte Carlo simulations with hematocrit-dependent effective scattering phase functions. Journal of Biomedical Optics. 11 (3), 34021 (2006).
  38. Nishidate, I., Aizu, Y., Mishina, H. Estimation of absorbing components in a local layer embedded in the turbid media on the basis of visible to near- infrared (VIS-NIR) reflectance spectra. Optical Review. 10 (5), 427-435 (2003).
  39. Friebel, M., Helfmann, J., Netz, U., Meinke, M. Influence of oxygen saturation on the optical scattering properties of human red blood cells in the spectral range 250 to 2000 nm. Journal of Biomedical Optics. 14 (3), 034001 (2009).
  40. Jacques, S. L., Glickman, R. D., Schwartz, J. A. Internal absorption coefficient and threshold for pulsed laser disruption of melanosomes isolated from retinal pigment epithelium. SPIE Conference Proceedings. 2681, 468-477 (1996).
  41. Park, J., Ha, M., Yu, M., Jung, B. Fabrication of various optical tissue phantoms by the spin-coating method. Journal of Biomedical Optics. 21 (6), 065008 (2016).
  42. . Skin Optics Available from: https://omlc.org/news/jan98/skinoptics.html (1998)
  43. Prahl, S. A., van Gemert, M. J. C., Welch, A. J. Determining the optical properties of turbid media by using the adding-doubling method. Applied Optics. 32 (4), 559-568 (1993).
  44. Hale, G. M., Querry, M. R. Optical constants of water in the 200-nm to 200-um wavelength region. Applied Optics. 12 (3), 555-563 (1973).

Play Video

Cite This Article
Mustari, A., Nishidate, I., Wares, M. A., Maeda, T., Kawauchi, S., Sato, S., Sato, M., Aizu, Y. Agarose-based Tissue Mimicking Optical Phantoms for Diffuse Reflectance Spectroscopy. J. Vis. Exp. (138), e57578, doi:10.3791/57578 (2018).

View Video