Summary
احتشاء عضلة القلب الحاد في الفئران الحث على التغيرات الحادة لكنها يتسم غير كامل في وظيفة (LV) البطين الأيسر. قسطرة LV في الفئران تمر انسداد الشريان التاجي بمثابة طريقة جديدة لإجراء تقييم في الوقت الحقيقي لوظيفة LV.
Abstract
احتشاء عضلة القلب الحاد يمكن أن يؤدي إلى فشل القلب الحاد والصدمة كارديوجينيك. تقييم الهليوكبتر أمر حاسم لتقييم أي النهج العلاجية المحتملة ضد الخلل (LV) البطين الأيسر الحاد. التصوير الطرائق الحالية (على سبيل المثال.، تخطيط صدى القلب، والتصوير بالرنين المغناطيسي) تعاني من أوجه قصور عدة منذ مباشرة لا يمكن قياس البيانات في الضغط المنخفض. يمكن أن الوقف قسطرة في الفئران تمر انسداد الشريان التاجي بمثابة طريقة جديدة لإجراء تقييم في الوقت الحقيقي لوظيفة LV.
تم تخديره الفئران في بداية الإجراء، تليها التنبيب داخل الرغامى. للوقف قسطرة، كان الشريان السباتي حق المكشوفة عبر الشق الأوسط-رقبته. القسطرة ووضعها في تجويف LV. وأجرى ثوراكوتومي الأيسر والشريان التاجي الرئيسي الأيسر (LCA) كانت متصلة. للحث على ضخه، أفرج الخياطة بعد 45 دقيقة ضغط حجم البيانات وسجلت في جميع الأوقات.
ربط للائتلاف سبب انخفاضا في الوظيفة الانقباضية LV كما يدل على ذلك انخفاض بنسبة 30% في حجم السكتة الدماغية، كسر قذفي LV (الإنكليزية والفرنسية)، وإخراج القلب. تم تخفيض الحد الأقصى dP/dt كمعلمة ل LV contractility أيضا بدرجة كبيرة وكان االنبساطي الدالة ضعف شديد (الحد الأدنى dP/dt-40%). لا يؤدي إلى انتعاش كامل من وظيفة LV ضخه خلال فترة 20 دقيقة.
تحليل حجم الضغط في الوقت الحقيقي بمثابة إجراء صحيح لرصد وظيفة القلب أثناء احتشاء عضلة القلب الحاد في الفئران. الحفاظ على استقرار التخدير واتباع نهج موحد جراحية أمر حاسم لضمان الحصول على نتائج صحيحة. المرحلة المبكرة من احتشاء عضلة القلب الحاد حاسم بالنسبة لمعدلات الاعتلال والوفيات، طريقة محددة يمكن أن تكون مفيدة للتقييم السريري لاستراتيجيات جديدة من أجل كارديوبروتيكشن.
Introduction
أمراض القلب والأوعية الدموية هي السبب الأكثر شيوعاً للوفاة في الحضارة الغربية1. احتشاء عضلة القلب الحاد هو حدث حاسمة، التي ترتبط بارتفاع معدل الوفيات الحاد والمزمن2. حتى في حالة عودة التوعي يتحقق عن طريق عن طريق الجلد التاجي التدخل في حالات الطوارئ (PCI)، ما زالت وفيات مرتفعة، لا سيما في إطار أول 48 ساعة بعد ظهور الأعراض في المرضى الذين يعانون من احتشاء عضلة القلب الحاد3. كارديوجينيك الصدمة الناجمة عن الانخفاض الحاد في وظيفة (LV) البطين الأيسر سبب رئيسي للوفيات في المستشفيات في هذه المرضى3. هذا الخفض المبكر في وظيفة LV هو الناجم عن تلف عضلة القلب بعد الاسكيمية وضخه. هذا ما يسمى الاسكيمية/ضخه (أنا/R) هو الإصابة بوساطة بالتغيرات في ميتابولومي الخلوية مثل توليد مبالغ فيها للأنواع الأكسجين التفاعلية4،5.
لاستكشاف الآليات الوقائية الممكنة مما يؤدي إلى انخفاض في تلف عضلة القلب في إعداد السريري، ضرورية نماذج الماوس موثوق بها بما في ذلك أساليب لتقييم وظيفة LV بوست/ص6. في هذا الإعداد، تستخدم على نطاق واسع تخطيط صدى القلب عبر الصدر7 والتصوير بالرنين المغناطيسي (التصوير بالرنين المغناطيسي)6 ل8،فينوتيبينج الفنية9. ومع ذلك، هذه الأساليب ليست مناسبة لتقييم الخلل الشديد في LV وصدمة كارديوجينيك في احتشاء حادة جارية ومباشرة لا يمكن إظهار البيانات على الضغط المنخفض. جهاز لانجيندورف باستخدام القلب معزولة في السابقين فيفو مقايسة يوفر معلومات حول باثوميتشانيسمس الأساسية من المرحلة المبكرة أنا/R إصابة10. هذا الأسلوب محدود بسبب عجزه عن استخراج في فيفو الآليات التكيفية مثل تنظيم الجهاز العصبي الذاتي أو التنظيم الهرموني وحمض قاعدة التوازن. لا تتوفر حاليا أي أسلوب phenotyping وظيفية كاملة من الصدمة كارديوجينيك والأيسر خلل بطيني خلال دائمة احتشاء عضلة القلب أنا/الإصابة R.
اتباع نهج متزامنة مع مزيج من قسطرة الضغط-الحجم (PV) وانسداد عابر الجراحية الرئيسية الشريان التاجي الأيسر (LCA) يمكن أن تكون مفيدة ولكنها صعبة من الناحية التقنية. الهليوكبتر اكستراكاردياك مستقرة خلال أنا الإصابة R هي ضرورية للحصول على النتائج الصحيحة نظراً لفقدان التخدير أو الدم غير المستقرة يمكن أن تؤثر بشدة على النتائج. رواية النهج ل phenotyping الفسيولوجية لانا/R الإصابة عن طريق LV PV قسطرة وعابرة LCA انسداد يمكن أن تجلب أفكاراً جديدة على صدمة كارديوجينيك وخلل LV في احتشاء عضلة القلب الحاد وتخدم كأسلوب للتحليل في المستقبل على كارديوبروتيكشن.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
وأنجزت جميع التجارب وفقا والامتثال لجميع اللوائح ذات الصلة ('كانت"الاتفاقية الأوروبية""حماية الحيوانات الفقارية" المستخدمة للأغراض العلمية (التوجيه 2010/63/الاتحاد الأوروبي) التجريبية وغيرها من الرعاية الحيوانية في وفقا للمبادئ التوجيهية المؤسسية. أجريت جميع التجارب مع الفئران C57BL/6JRj الذكور في سن 6 أشهر.
1-إعداد
- إعداد مجهر جراحي ووسادة تدفئة، فضلا عن تحقيق المستقيم لرصد درجة حرارة الجسم. تنظيف وتعقيم جميع الأدوات الجراحية.
- إعداد 2 قطعة من 10 سم الخيط الحرير 5-0 لربط السفينة، 5 سم من الخيط البوليبروبيلين 6-0، وأنبوب السليكون 2 مم لربط للرابطة.
- إعداد ومبومو المعايرة القسطرة PV بالتسخين الأولى إلى 37 درجة مئوية وإعداد من 100 ميليلتر هاملتون حقنه مليئة 15% كلوريد الصوديوم (NaCl) في ح2س على المعايرة المالحة.
- قسطرة مكان الكهروضوئية (3 سم، و 1.4) في 37 درجة مئوية قبل تسخينها 0.9% كلوريد الصوديوم في ح2س (المالحة) 30 دقيقة على الأقل قبل القياس. توصيل القسطرة بجهاز للحصول على البيانات وقم بتوصيل الجهاز إلى محول تناظري/رقمي. تتصل كل الأجهزة بكمبيوتر.
- قم بإعداد البرنامج. إجراء معايرة ضغط البرامج الإرشادية ومعايرة الموصلية كما طالب ب توجيه برامج سير العمل8.
2-التخدير والتسكين
- تخدير الماوس باستخدام الكيتامين 100 مغ/كغ من وزن الجسم وإكسيلازيني هيدروكلوريد 10 مغ/كغ من وزن الجسم بالحقن داخل. في بداية أنا/R جراحة، إدارة الهيئة 0.05 مغ/كغ وزن البوبرينورفين إينترابيريتونيلي للحفاظ على التسكين.
- بعد 10 دقيقة، إجراء تنبيب داخل رغامى استخدام قسطرة (رابعا) 20 غ عن طريق الحقن الوريدي ويحققوا الماوس مع الأكسجين 40% (س2) وإيسوفلوراني 2% (v). تعيين معلمات التهوية الملائمة (مثلاً، 220 ميليلتر السكتة الدماغية حجم، 150/دقيقة لماوس C57BL/6JRj ز 25-30).
- رصد درجة حرارة الجسم عن طريق المستقيم التحقيق مستمر. ربط الماوس في لوحة ساخنة مع رئيس لافتاً نحو المحقق. درجة حرارة الجسم العادية الماوس هو 36.5-38 درجة مئوية. الحفاظ على درجة حرارة الجسم داخل 1 درجة من التكيف لدرجة حرارة صفيحة ساخنة.
3. قسطرة البطين الأيسر
- تطهير الصدر والرقبة مع ثلاثة يدعك متناوبة من الكحول تدين و 70%. انتظر مطهر الجلد الجافة. إزالة شعر الصدر باستخدام نظام حلاقة حيوانات صغيرة.
- تنفيذ 10 ملم طولية متوسط شق 5 مم تحت الشفة السفلي نحو القص باستخدام المقص جراحية صغيرة.
- تشريح الجزء الأيمن والأيسر من الغدة اللهاة عن طريق إعداد صراحة استخدام ملقط. فصل أنسجة العضلات والدهون في المنطقة اليمنى رغامى لفضح الشريان السباتي البلدية الحق. تعبئة وفصل السفينة لإجمالي طولها 5-10 ملم من النسيج الضام عبر إعداد كليلة دقيق جنبا إلى جنب مع السفينة مع ملقط بنت.
ملاحظة: تجنب التلاعب الميكانيكية للعصب المبهم أو الجسم السباتي في كل وقت كهذا يمكن أن يسبب انخفاض حاد في ضغط الدم، وبطء القلب. - تمرير خيوط الحرير استعداد اثنين تحت السفينة. اضطر السفينة البعيدة مع عقده ضيق ومكان عقده فضفاضة في منطقة مكشوفة الدانية التي ما زال يسمح مرور القسطرة.
- إصلاح خيوط العقدة (ضيق) الجمجمة بجوار رئيس الفئران لتطبيق توتر ضوء على متن السفينة كما سيسهل ذلك الأخذ بالقسطرة. وضع المشبك الأوعية الدموية هيموستات على متن السفينة الدانية الدانية العقدة فضفاضة شكل قابل للعكس عرقلة تدفق الدم.
- إجراء شق على شكل آسفين الدانية إلى عقده الجمجمة لفتح السفينة مع مقص مايكرو 1 مم.
ملاحظة: تشير قطره صغيرة من الدم إلى التنفيذ السليم لهذه الخطوة. - أدخل القسطرة بعناية لبدء تسجيل 10 مم. البيانات القسطرة.
ملاحظة: تمتد الشق مع ملقط جعل هذه العملية أسهل. - استخراج المشبك الأوعية الدموية. إضافة 1-2 قطرات من المياه المالحة إلى شق لتسهيل حركة القسطرة. مواصلة إدخال القسطرة لآخر حوالي 10 ملم. بعد اجتياز عقده الدانية مع نصيحة أجهزة الاستشعار، اربط العقدة بعناية فقط ما يكفي لمنع الدم الجزر جنبا إلى جنب مع أرق أجزاء القسطرة دون إعاقة حركة القسطرة.
ملاحظة: حجم أجهزة الاستشعار في غيض القسطرة يمنع ارتداد للدم عند استخراج المشبك الأوعية الدموية. - بلطف مواصلة إدخال القسطرة حتى يظهر تحليل الضغط ضغط الدم الشرياني الشخصية تشير إلى أن يتم وضع القسطرة في الشريان الاورطي (الشكل 3A).
ملاحظة: سوف أوضح القسطرة التوصل إلى الصمام الابهري بالمقاومة الخفيفة والحركة نبض متزامنة للقسطرة. - عندما تواجه المقاومة في محاولة للمضي قدما من خلال الصمام الابهري، سحب القسطرة مرة أخرى 5 مم ومقدماً حتى الوقف قسطرة سترد في إجراء تغيير في تحليل الكهروضوئية كما الضغط االنقباضي سوف تصل إلى 0-20 مم زئبق (الشكل 3B). ملاحظة التغييرات في حجم الرصد إلى مزيد تأكيد التنسيب البطين الأيسر من طرف أجهزة الاستشعار (الشكل 3). ربط عقده الدانية أكثر أحكاما لمنع حركة القسطرة.
4-الاسكيمية/ضخه جراحة
- تنفيذ شق الجلد من القص والذيلية نحو الإبط الأيسر لإجمالي طولها من 15 ملم. المضي قدما مع إعداد كليلة طبقات العضلات اثنين حتى يمكن تصور الأضلاع.
- فتح الصدر شق طريق بين الضلع الأيسر الثالث والرابع. استخدام خطاف الجراحية للوصول إلى تامور. يرسخ تامور فوق القلب. قبل المتابعة مع ربط LCA، الانتظار 30 ثانية دون لمس الحيوان لتسجيل PV البيانات لتحليل صحيح.
- تعريب LCA الناشئة في ظل صوان الأيسر وتنازلي في الجانب الأيسر من القلب نحو ذروة. استخدام خياطة البوليبروبيلين 6-0 لتطويق الشريان مع حلقة 2 ملم تحت صوان الأيسر. ضع أنبوب سيليكون صغيرة تحت الحلقة ومكان عقده ضيق أعلاه.
ملاحظة: غراي تحول عضلة القلب القاصي بمثابة السيطرة الإيجابية ل انسداد LCA6. أنا/يجب إجراء الجراحة R ضمن 5 دقيقة بشكل مستقل من المحقق التشغيل. - قص الخياطة على طول 1 مم. إطلاق سراح هوكس الجراحية وإغلاق يدوياً طبقات العضلات فوق الشق. انتظر 45 دقيقة بينما باستمرار تسجيل بيانات الكهروضوئية.
- وبعد 45 دقيقة، إعادة فتح الشق وإزالة أنبوب السيليكون للحث على ضخه. الحصول على بيانات السجل لآخر 20 دقيقة.
ملاحظة: تغيير لون أحمر كما يشاهد من قبل الاسكيمية يشير إلى ضخه ناجحة.
5-معايرة
ملاحظة: معايرة نظام القسطرة PV تتكون من 4 خطوات إلزامية، اثنان منها قد يكون أداؤها بعد القياس. يجب تكرار المعايرة بعد كل تجربة لضمان الحصول على نتائج صحيحة.
- إجراء معايرة الضغط ومعايرة الموصلية قبل التجربة كما هو موضح في "الخطوة 1، 5".
- إجراء المعايرة المالحة عندما لا يزال يتم وضع القسطرة في البطين الأيسر بعد الانتهاء من التجربة نفسها. تعريب الجانبي الأيمن حبل الوريد الشريان السباتي في منطقة المعدة. حقن 10 ميليلتر 25% كلوريد الصوديوم في ح2س عن طريق هاملتون المحاقن أثناء تسجيل البيانات.
- حساب المعايرة باستخدام البرمجيات اقتناء بتسليط الضوء على المرحلة التصاعدي في حجم المنحنى (الشكل 5). كرر هذه العملية لمدة 3 مرات. تجنب فقدان الدم بعد استخراج حقنه باستخدام المشبك الأوعية الدموية لضغط الثقب سرعة.
- إجراء المعايرة وحدة التخزين لمعايرة حجم البيانات اقتناء بتحليل وحدات التخزين الموحد. الحصول على حوالي 500 ميليلتر الماوس الدم من ثقب القلب بحقنه قليلاً هيبارينيزيد 1 مل (مثلاً، 5 ميليلتر الواحدة 200 IE الهيبارين). سحب القسطرة PV 10-15 ملم لتجنب إتلاف القسطرة.
- تعبئة الدم التي تم الحصول عليها في ومبومو المعايرة ساخنة قبل 37 درجة مئوية (الشكل 5A). تجنب فقاعات كما أنها قد تتداخل مع النتائج. إضافة تلميح القسطرة إلى كل جيدا وسجل البيانات. الحصول على منحنى قياسي بتحليل البرامج الإرشادية (الشكل 5 (ب)). كرر هذه العملية لما مجموعة 3 مرات.
- Euthanize الفئران التي اكسسانجوينيشن أو التفكك سرطان عنق الرحم في حين يحتفظ كافية isoflurane التخدير في كل وقت.
6-بيانات التحليل
- بعد إكمال الخطوات المعايرة، القيام بتحليل البيانات البرامج الإرشادية. ولذلك، تسلط الضوء على القسم المناسب (على الأقل عشر دورات) داخل قسم تحليل سير العمل PV وإجراء تحليل لخط الأساس. استبعاد دورات مع الانحرافات بسبب التهوية أو التلاعب إذا لزم الأمر (3D الشكل).
- إجراء تحليل الأساس PV قبل مرور الصمام الابهري (الضغط الشرياني فقط)، مباشرة قبل وبعد الانسداد LCA. المضي قدما بإجراء تحليل الأساس الكهروضوئية، وفي فترات من 5 دقيقة بينما الاسكيمية، وبعد ضخه. في نهاية التجربة، إجراء تحليل لبيانات الضغط بعد سحب القسطرة من البطين الأيسر (الضغط الشرياني).
- تحليل دورات متتالية على الأقل 10 لتجنب خطأ أخذ العينات. عندما تعاني من تدخل قوي للحصول على القيم مع التهوية، انقطاع عابر للتهوية لمدة أقصاها 5 يمكن اعتبار s.
- استخدم المعلمات التالية التي يتم حسابها في التحليل الأساسي (الشكل 3D) لتوصيف وظيفة LV:
- حجم السكتة الدماغية (ميليلتر)
- كسر قذفي: السكتة الدماغية حجم/الانبساطي نهاية وحدة التخزين (%)
- إخراج القلب: السكتة الدماغية حجم * معدل ضربات القلب (ميليلتر/دقيقة)
- مؤشر القلب: إخراج القلب/هيئة المساحة السطحية (µL/(min*cm²)
- السكتة الدماغية العمل: المنطقة الداخلية من منحنى PV (ملم زئبق * ميليلتر)
- أقصى درجات الضغط (بماكس)؛ يعني الضغط (بمين)
- ماكس dP/dt (ملم زئبق/ثانية) كمعلمة دالة الانقباضية LV
- مين dP/dt (ملم زئبق/ثانية) كمعلمة للامتثال LV
- وقت ثابت للاسترخاء إيسوفولوميتريك: تاو (مللي ثانية)
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
بعد الوقف قسطرة، أجرى عكسها LCA ربط لمدة 45 دقيقة تليها 10 دقيقة من ضخه. تم تسجيل البيانات الكهروضوئية في جميع الأوقات (الشكل 1).
وأكد الموضع الصحيح من القسطرة PV الحصول على الرسم البياني LV PV المميزة (الشكل 2A). الوقف قسطرة التنسيب وأظهرت مجموعة ضغط البطين النموذجية مع حد أدنى 0-20 مم زئبق بينما كاذبة تنسيب الكهروضوئية-القسطرة في الشريان الاورطي أظهرت منحنى ضغط الشرياني نموذجية ذات ضغط الحد أدنى من 30-60 مم زئبق (ضغط الدم االنقباضي ) ورحلة صغيرة في نهاية االنقباض يبين الصمام الابهري إغلاق (الشكل 3 و 3 ج). وأكد نجاح انسداد الائتلاف بصريا تبييض لعضلة القلب LV القاصي (الشكل 2).
بعد انسداد الائتلاف، تم الحصول على بيانات الكهروضوئية في فواصل زمنية دقيقة 5. أظهر تحليل البيانات الضغط أية تغييرات في أقصى درجات الضغط systolic LV تشير إلى الحفاظ على التروية المحيطية والتخدير مستقرة (الشكل 4 أ). وكشف تحليل لحجم LV انخفاضا كبيرا في كلا EF (52% مقابل. 40%، p = 0، 008) وحجم الحد المطلق (الشكل 4 باء وجيم 4). حدث هذه التغييرات خلال المرحلة المبكرة من الاسكيمية، وبيانات LV الفنية لم تتغير في مرحلة لاحقة من الاسكيمية. وأظهرت أقصى dP/dt كمعلمة LV contractility انخفاض بنسبة 30% في الفئران تمر احتشاء عضلة القلب الاسكيمية. وكان عمل السكتة الدماغية 30 ٪ تخفيض (الشكل 4 و 4E). كمعلمة دالة الانبساطي، الحد الأدنى dP/dt كان تناقص بصورة كبيرة مما يشير إلى ضعف الامتثال LV (4F الشكل). وكان بصريا صحة ضخه باستخراج أنبوب السيليكون. ضخه لم تظهر تغييرات هامة في تحليل البيانات الكهروضوئية في غضون 20 دقيقة (الشكل 4A-4D). الحيوانات تعمل بالشام لم تظهر انخفاضا كبيرا في LV معلمات الانقباضي أو الانبساطي (الرقم 4I-4J).
في نهاية للحصول على البيانات، أجريت معايرة ومبومو ومعايرة المالحة (الشكل 5).
رقم 1: مخطط للأسلوب- تسلسل من قسطرة (LV) البطين الأيسر وانسداد الشريان التاجي الأيسر الرئيسي (LCA) وضخه.
رقم 2: الإجراءات الجراحية. (أ) قسطرة البطين الأيسر وضعها عن طريق الشريان السباتي المشترك الحق. (ب) انسداد الشريان التاجي الرئيسي الأيسر مع أنبوب خياطة والسيليكون البولي بروبلين. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-
الشكل 3: بيانات تمثيلية الضغط-الحجم- الضغط الشرياني الممثل (A) يتبين من ضغط الحد أدنى من > 30 ملم زئبق، ورحلة نموذجية في نهاية االنقباض تشير إلى إغلاق الصمام الابهري. غادر الممثل (ب) ضغط البطين قيم االنبساطي إظهار البيانات < 20 ملم زئبق. (ج) ممثل ضغط البطين الأيسر-حجم الرسم التخطيطي. (د) لقطة شاشة لتحليل خط الأساس PV المستندة إلى البرامج. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-
الشكل 4: ضغط/حجم البيانات في الفئران تمر الاسكيمية/الاكسجينيه- (أ) Systolic غادر البطين ضغط الدم (بماكس). (ب) غادر البطين (LV) طرد جزء (الإنكليزية) (%). (ج) الوقف السكتة الدماغية حجم (ميليلتر). (د) الحد الأقصى dP/dT (ماكس dP/dt) (ملم زئبق/s). (ﻫ) LV السكتة الدماغية العمل (جنوب غرب). (و) الحد الأدنى dP/dt (مين dP/dt) (ملم زئبق/s). (ز) وقت ثابت للاسترخاء إيسوفولوميتريك تاو (مللي ثانية). (ح) ضغط/حجم المخطط قبل و 45 دقيقة بعد الاستقراء من احتشاء عضلة القلب الاسكيمية. (--ي) السكتة الدماغية حجم (SV) (ميليلتر) وأقصى dP/dt (ماكس dP/dt) (ملم زئبق/s) في الحيوانات تعمل بالشام مقارنة بالحيوانات بعد الاسكيمية 15/30 دقيقة. وترد البيانات (أ-ز) يعني ± sem. * ف < الاختبار t 0.05 عن طريق الطالب أو نسبة إقران اختبار t، n = 4 الفئران/مجموعة (أ + د-ز)) أو n = الفئران/المجموعة 3 (ب، ج). + 45: 45 دقيقة الاسكيمية؛ قال النائب: ضخه. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-
الرقم 5: معايرة وظيفة مخصصة. (أ) التخطيطي لمعايرة ومبومو. وحدات التخزين في ميليلتر. (ب) تحليل الانحدار الخطي تمثيلاً للبيانات التي تم الحصول عليها من وحدة التخزين لإجراء المعايرة ومبومو. (ج) بيانات حجم الممثل بعد ضخ 10 ميليلتر من كلوريد الصوديوم 25% في ح2س إلى حبل الوريد المناسب لإجراء المعايرة المالحة. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
رصد PV الهليوكبتر LV في احتشاء عضلة القلب الحاد بمثابة طريقة جديدة للتقييم في الوقت الحقيقي في فيفو الصدمة كارديوجينيك وتلف في وظيفة LV في الأول/الإصابة R. قسطرة الكهروضوئية يمكن أن توفر مجموعة واسعة من المعايير فيما يتعلق بوظيفة LV الانقباضي والانبساطي. بالإضافة إلى معلمات الحجمي LV الحصول عليها عادة بضربات القلب أو التصوير بالرنين المغناطيسي (حجم الدائرة، الإنكليزية والفرنسية وحجم السكتة الدماغية وإخراج القلب)، تحليل PV غلة صورة أكثر اكتمالا لوظيفة LV بتوفير تدابير LV الانقباضية في وقت واحد الأداء (contractility dP/dt، عمل السكتة الدماغية) والامتثال LV (-dP/dt، وتاو) كمعلمة للدالة الانبساطي.
كما فشل القلب الحاد في المرضى الذين يعانون من احتشاء عضلة القلب الحاد مؤشرا حاسما لأوائل في مستشفى المراضة والوفيات2، رصد الأضرار الفسيولوجية الحادة وصدمة كارديوجينيك في احتشاء عضلة القلب الحاد يمكن أن يكون أداة قيمة لتحديد آليات الحماية الممكنة في بيئة تجريبية.
هناك عدة عوامل تبين أن تكون حاسمة بالنسبة للحصول على البيانات الناجحة. التخدير مستقرة أمر حاسم لصالح PV البيانات منذ isoflurane أظهرت تأثير قوي كارديوديبريسيفي مع قطرات في الضغط و LV EF وحجم السكتة الدماغية. من المهم إعداد أتروماتيك الشريان السباتي لتجنب هيبوفوليميا بسبب فقدان الدم. وعلاوة على ذلك، يمكن أن يؤدي ضغط أو إصابة العصب المبهم والجسم السباتي في إعاقة شديدة من الهليوكبتر.
معايرة المالحة ومعايرة ومبومو تبدو وكأنها آخر خطوة حاسمة للحفاظ على بيانات صالحة. لمعايرة المالحة، والحقن بمحلول كلوريد الصوديوم 15% أدت إلى زيادة الموصلية وأشارت إلى زيادة مؤقتة في مستوى حجم الصوت (الشكل 5). المحافظة على نفس السرعة عند الحقن كان حاسما بالنسبة لبيانات ثابتة. وعند إجراء المعايرة ومبومو، من المهم تجنب فقاعات داخل الترعة ضمان الحصول على نتائج صحيحة.
PV البيانات التي تم الحصول عليها وعلاوة على ذلك تشير إلى أهمية اقتناء المتزامن للضغط وحجم البيانات لتوصيف الفسيولوجية صالحة منذ التغييرات ضغط البيانات وحدها لم تظهر كبيرة طوال هذه التجربة (الشكل 4A ). تجمع بين التحليل PV عرضت كلا المعلمتين الأساس للوظيفة الانقباضية LV (مثلاً، كسر قذفي) فضلا عن معلمات contractility LV (dP/dt) والاسترخاء LV (-dP/dt، وتاو).
من المثير للاهتمام، الانسداد الحاد للائتلاف في المرضى عادة يسبب عجزا شديد لوظيفة LV مع ضرورة فورية لدعم الفسيولوجية ميكانيكية ويترافق مع11،12معدل وفيات عالية. انسداد LCA في الفئران أظهرت أقل الأضرار الفسيولوجية ولوحظ عدم الوفاة المرتبطة بانسداد LCA أثناء الإجراء. كعلامة على استمرار الاستقرار الفسيولوجية أثناء الاسكيمية، كان ضغط الدم الانقباضي LV مستقرة في جميع الأوقات (الشكل 4 أ). بيد أن هذا التأثير يمكن أن تكون ناجمة القاصي أكثر ليجيشنز في الفئران مقارنة بانسداد LCA في البشر.
أخذت معا، في الوقت الحقيقي الفسيولوجية الرصد من احتشاء عضلة القلب الحاد في الفئران يمكن أن تخدم كأسلوب جديد لدراسة آليات كارديوبروتيكتيفي في شديدة الضعف LV تهدف إلى تحسين علاج المرحلة المبكرة من المرضى الذين يخضعون لالحاد احتشاء عضلة القلب.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
الكتاب ليس لها علاقة بالكشف عن.
Acknowledgments
الكتاب تعترف مصادر التمويل التالية: آخر كرنر-فريسينيوس-ستيفتونغ (تينوش رأساف)؛ هانز أوند "غيرتي فيشر شتيفتونغ" (تينوش رأساف)، منحة من كلية الطب، جامعة دويسبورغ-إيسن، ألمانيا (رأساف تينوش، ميشال لارس)؛ إرنست-und بيرتا جريمكي-ستيفتونغ (كريستوس راموس).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Betaisodona Loesung | Mundipharma | 4162-1606/89x30mm | Povidon-Iod |
| Calibration cuvette | Millar instruments | 910-1049 | Calibration cuvette |
| Contura professional hair trimmer | Wella | HS-60 | Small animal shaving system |
| Eclipse Needle 27G | BD | REF 305770 | 27G needle |
| Forceps | FST | 11203-25, 11069-08, 11616-15, 11506-12, 11051-10 | Surgical forceps |
| Forceps | Aesculap Braun | BN731R, BD 311R | Surgical forceps |
| Foris FS2434 | Eizo | 0FTD2033 | Monitor |
| Hamilton Syringe 100 µl needle | Hamilton | 80621 | 100µl syringe with needle |
| Heated Small animal OP table | Harvard Apparatus | 15001 | Heated OP table |
| Heparin-Natrium 25000 | Ratiopharm | N68542.04 | Heparin |
| Ketamin 10% 100 mg/ml | bela-pharm | FS1670041 | Ketamin |
| Labchart Pro 8 + Pro modules | AD Instruments | MLS260/8 | PV data analysis software |
| LAS EZ | Leica | LAS EZ | Microscope camera software |
| Leica IC80 HD | Leica | IC80 HD | Microscope camera |
| Leica M80 | Leica | M80 | Microscope |
| Micro-tip catheter transducer | Millar instruments | SPR-839 | PV catheter |
| MiniVent | Harvard Apparatus | 845 | ventilation |
| MPVS Ultra | Millar instruments | PL3508B48/M | PV catheter data acquisition device |
| Octenisept | Schülke | 20000832-A | disinfectant |
| Plastipak 1ml | PD | REF 303172 | 1ml syringe |
| PowerLab 8/35 | AD Instruments | PL3508 | analog/digital converter |
| Prolene 6-0 | Ethicon | XNEH7814.P31 | Polypropylene suture |
| Retraction Kit | FST | 18200-20 | retraction of surgical situs |
| Seraflex 5-0 | Naila | IC108000 | silk suture |
| Small and micro-scissors | FST Essen | 14059-11, 15007-08, 14064-11 | Surgical scissors |
| Small silicon tube | Reichelt Chemietechnik | tube for LCA occlusion | |
| Sodium Chloride | Sigma-Aldrich | S7653 | Sodium Chloride |
| testo 108 | testo | 5631080 | rectal thermometer |
| Thinkcentre desktop computer | Lenovo | PC0EJS2V | Computer |
| Vasofix Safety 20G | Braun | 4269110S-01 | intubation catheter |
| Windows 10 | Microsoft | KW9-00240 | Operating system |
| Xylazin 2% | Ceva | 6324464.00.00 | Xylazine hydrochloride |
References
- Sanchis-Gomar, F., Perez-Quilis, C., Leischik, R., Lucia, A. Epidemiology of coronary heart disease and acute coronary syndrome. Annals of Translational Medicine. 4 (13), 256 (2016).
- Anderson, J. L., Morrow, D. A. Acute Myocardial Infarction. New England Journal of Medicine. 376 (21), 2053-2064 (2017).
- McNamara, R. L., et al. Predicting in-hospital mortality in patients with acute myocardial infarction. Journal of the American College of Cardiology. 68 (6), 626-635 (2016).
- Kurian, G. A., Rajagopal, R., Vedantham, S., Rajesh, M. The Role of Oxidative Stress in Myocardial Ischemia and Reperfusion Injury and Remodeling: Revisited. Oxidative Medicine and Cellular Longevity. , (2016).
- Turer, A. T., Hill, J. A. Pathogenesis of myocardial ischemia-reperfusion injury and rationale for therapy. American Journal of Cardiology. 106 (3), 360-368 (2010).
- Totzeck, M., Hendgen-Cotta, U. B., French, B. A., Rassaf, T. A practical approach to remote ischemic preconditioning and ischemic preconditioning against myocardial ischemia/reperfusion injury. Journal of Biological Methods. 3 (4), (2016).
- Respress, J. L., Wehrens, X. H. Transthoracic echocardiography in mice. Journal of Visualized Experiments. (39), (2010).
- Pacher, P., Nagayama, T., Mukhopadhyay, P., Batkai, S., Kass, D. A. Measurement of cardiac function using pressure-volume conductance catheter technique in mice and rats. Nature Protocols. 3 (9), 1422-1434 (2008).
- Zhang, B., Davis, J. P., Ziolo, M. T. Cardiac catheterization in mice to measure the pressure volume relationship: Investigating the Bowditch effect. Journal of Visualized Experiments. (100), e52618 (2015).
- Rossello, X., Hall, A. R., Bell, R. M., Yellon, D. M. Characterization of the Langendorff perfused isolated mouse heart model of global ischemia-reperfusion injury: Impact of ischemia and reperfusion length on infarct size and LDH release. Journal of Cardiovascular Pharmacology and Therapeutics. 21 (3), 286-295 (2016).
- Task Force on the management of ST-segment elevation acute myocardial infarction of the European Society of Cardiology (ESC). ESC Guidelines for the management of acute myocardial infarction in patients presenting with ST-segment elevation. European Heart Journal. 33 (20), 2569-2619 (2012).
- Shigemitsu, O., et al. Acute myocardial infarction due to left main coronary artery occlusion. Therapeutic strategy. Japanese Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 50 (4), 146-151 (2002).
