Summary
चूहों में तीव्र रोधगलन बाएं वेंट्रिकुलर (एल. वी.) समारोह में तीव्र लेकिन पूरी तरह से परिवर्तन लाती है । एल. वी. कैथीटेराइजेशन कोरोनरी धमनी रोड़ा के दौर से गुजर चूहों में lv समारोह के एक वास्तविक समय मूल्यांकन के लिए एक उपंयास विधि के रूप में कार्य करता है ।
Abstract
तीव्र रोधगलन तीव्र हृदय विफलता और फुलाव सदमे के लिए नेतृत्व कर सकते हैं । hemodynamics का मूल्यांकन तीव्र वाम वेंट्रिकुलर (एल. वी.) शिथिलता के खिलाफ निर्देशित किसी भी संभावित चिकित्सीय दृष्टिकोण के मूल्यांकन के लिए महत्वपूर्ण है । वर्तमान इमेजिंग मोडल (उदा., इकोकार्डियोग्राफी और चुंबकीय अनुनाद इमेजिंग) में कई सीमाएं हैं क्योंकि LV प्रेशर पर डेटा सीधे मापा नहीं जा सकता । एल. वी. कैथीटेराइजेशन कोरोनरी धमनी रोड़ा के दौर से गुजर चूहों में lv समारोह के एक वास्तविक समय मूल्यांकन के लिए एक उपंयास विधि के रूप में सेवा कर सकता है ।
प्रक्रिया की शुरुआत में, चूहों endotracheal इंटुबैषेण द्वारा पीछा anesthetized थे । LV कैथीटेराइजेशन के लिए, सही मन्या धमनी मध्य गर्दन चीरा के माध्यम से उजागर किया गया था. कैथेटर शुरू किया और LV गुहा में रखा गया था । वाम thoracotomy का आयोजन किया गया था और वाम मुख्य कोरोनरी धमनी (एलसीए) ligated था । reperfusion प्रेरित करने के लिए, टांका ४५ मिनट के बाद जारी किया गया था । दबाव की मात्रा डेटा हर समय दर्ज किया गया था ।
एलसीए के बंधाव में एक 30% कमी स्ट्रोक की मात्रा, lv इंजेक्शन अंश (EF), और कार्डियक आउटपुट द्वारा सबूत के रूप में lv सिस्टोलिक समारोह में कमी का कारण बना । LV सिकुड़ना के लिए एक पैरामीटर के रूप में अधिकतम डीपी/dt भी काफी कम था और डायस्टोलिक फ़ंक्शन बुरी तरह से ख़राब हो गया था (न्यूनतम dP/dt-४०%). 20 मिनट की अवधि में Reperfusion LV समारोह की एक पूरी वसूली के लिए नेतृत्व नहीं किया ।
वास्तविक समय दबाव मात्रा विश्लेषण चूहों में तीव्र रोधगलन के दौरान कार्डियक समारोह की निगरानी के लिए एक वैध प्रक्रिया के रूप में कार्य किया. स्थिर संज्ञाहरण और एक मानकीकृत शल्य चिकित्सा दृष्टिकोण को बनाए रखने के वैध परिणाम सुनिश्चित करने के लिए महत्वपूर्ण था । तीव्र रोधगलन के प्रारंभिक चरण के रूप में रुग्णता और मृत्यु दर के लिए महत्वपूर्ण है, delineated विधि cardioprotection के लिए नई रणनीतियों के पूर्व नैदानिक मूल्यांकन के लिए फायदेमंद हो सकता है ।
Introduction
हृदय रोग पश्चिमी सभ्यता में मृत्यु का सबसे आम कारण है1. तीव्र रोधगलन एक महत्वपूर्ण घटना है, जो उच्च तीव्र और जीर्ण मृत्यु2के साथ जुड़ा हुआ है । यहां तक कि अगर revascularization आपातकालीन percutaneous कोरोनरी हस्तक्षेप (पीसीआई) के माध्यम से हासिल की है, मृत्यु दर उच्च रहता है, विशेष रूप से पहली ४८ एच के भीतर तीव्र रोधगलन3के साथ रोगियों में लक्षण की शुरुआत के बाद. बाएं वेंट्रिकुलर (LV) समारोह में तीव्र कमी के कारण फुलाव सदमे इन रोगियों में अस्पताल में मृत्यु दर के लिए एक प्रमुख कारण है3। LV समारोह में यह जल्दी कमी ischemia और reperfusion के बाद रोधगलन नुकसान के कारण होता है । यह तथाकथित ischemia/reperfusion (I/R) चोट सेलुलर metabolome में परिवर्तन द्वारा इस तरह के रूप में प्रतिक्रियाशील ऑक्सीजन प्रजातियों के अतिरंजित पीढ़ी4,5मध्यस्थता है ।
संभावित सुरक्षा एक नैदानिक सेटिंग में रोधगलन में कमी के लिए अग्रणी तंत्र का पता लगाने के लिए, विश्वसनीय माउस मॉडल पोस्ट के मूल्यांकन के लिए तरीकों सहित आवश्यक है I/आर LV समारोह6। इस सेटिंग में, transthoracic इकोकार्डियोग्राफी7 और चुंबकीय अनुनाद इमेजिंग (एमआरआई)6 कार्यात्मक phenotyping8,9के लिए व्यापक रूप से इस्तेमाल कर रहे हैं । हालांकि, इन पद्धतियों गंभीर lv रोग और फुलाव सदमे में चल रहे तीव्र रोधगलन के आकलन के लिए उपयुक्त नहीं हैं और सीधे LV दबाव पर डेटा नहीं दिखा सकते हैं । Langendorff उपकरण एक पूर्व vivo परख में अलग दिल का उपयोग प्रारंभिक चरण I/आर चोट10के अंतर्निहित pathomechanisms के बारे में जानकारी प्रदान करता है । इस विधि की वजह से इस तरह के स्वायत्त तंत्रिका तंत्र या हार्मोनल विनियमन और एसिड आधार homeostasis के विनियमन के रूप में vivo अनुकूली तंत्र में पुन: पेश अक्षमता के कारण सीमित है । वर्तमान में कोई विधि फुलाव सदमे की एक पूरी कार्यात्मक phenotyping के लिए उपलब्ध है और एक चालू रोधगलन के दौरान वेंट्रिकुलर शिथिलता छोड़ दिया/
दबाव की मात्रा (पीवी) कैथीटेराइजेशन और क्षणिक शल्य चिकित्सा वाम मुख्य कोरोनरी धमनी (एलसीए) रोड़ा के संयोजन के साथ एक सिंक्रनाइज़ दृष्टिकोण फायदेमंद है, लेकिन तकनीकी रूप से चुनौतीपूर्ण हो सकता है । I/R चोट के दौरान स्थिर extracardiac hemodynamics के बाद से अस्थिर संज्ञाहरण या खून की कमी भारी परिणामों को प्रभावित कर सकता है वैध परिणामों के लिए आवश्यक हैं । lv पीवी कैथीटेराइजेशन और क्षणिक एलसीए रोड़ा के माध्यम से I/R चोट के hemodynamic phenotyping के लिए एक उपंयास दृष्टिकोण तीव्र रोधगलन में फुलाव सदमे और LV रोग पर नई अंतर्दृष्टि ला सकता है और पर भविष्य के विश्लेषण के लिए एक विधि के रूप में सेवा cardioprotection ।
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Protocol
सभी प्रयोगों के अनुसार सभी प्रासंगिक विनियमों के साथ पालन और अनुपालन में पूरा किया गया (' यूरोपीय कन्वेंशन हड्डीवाला जानवरों के संरक्षण के लिए इस्तेमाल प्रयोगात्मक और अन्य वैज्ञानिक प्रयोजनों के लिए ' (निर्देश 2010/63/यूरोपीय संघ) और जानवरों की देखभाल में था संस्थागत दिशानिर्देशों के अनुसार । सभी प्रयोगों 6 महीने की उम्र में पुरुष C57BL/6JRj चूहों के साथ प्रदर्शन किया गया है.
1. तैयारी
- एक शल्य माइक्रोस्कोप और एक हीटिंग पैड के रूप में के रूप में अच्छी तरह से शरीर के तापमान पर नजर रखने के लिए एक गुदा जांच तैयार । सभी शल्य चिकित्सा उपकरणों को साफ और निष्फल ।
- पोत बंधाव के लिए 10 सेमी 5-0 सिल्क थ्रेड के 2 टुकड़े, 6-0 के 5 सेमी धागे, और एलसीए के बंधाव के लिए 2 मिमी सिलिकॉन ट्यूब तैयार करें ।
- ३७ ° c करने के लिए पूर्व-ताप द्वारा PV कैथेटर अंशांकन cuvette तैयार करें और एक १०० µ एल हैमिल्टन सिरिंज 15% सोडियम क्लोराइड (NaCl) के साथ एच2में खारा अंशांकन के लिए भर तैयार ।
- ३७ ° c में PV कैथेटर (3 सेमी, १.४ F) प्लेस पूर्व-गरम ०.९% NaCl में एच2ओ (खारा) माप से पहले कम से कम 30 मिनट. कैथेटर डेटा प्राप्ति डिवाइस से कनेक्ट करें और डिवाइस एक एनालॉग/डिजिटल कनवर्टर करने के लिए कनेक्ट करें । दोनों डिवाइसेस को किसी कंप्यूटर से कनेक्ट करें ।
- सॉफ़्टवेयर सेट करें । सॉफ़्टवेयर-निर्देशित कार्यप्रवाह8द्वारा मांगी गई सॉफ़्टवेयर-निर्देशित दबाव अंशांकन और कंडक्टर अंशांकन निष्पादित करें ।
2. संज्ञाहरण और Analgesia
- Anesthetize माउस का प्रयोग ketamine १०० मिलीग्राम/kg बॉडी वेट और xylazine हाइडरोक्लॉराइड 10 मिलीग्राम/intraperitoneal इंजेक्शन के द्वारा शरीर का वजन । I/आर सर्जरी की शुरुआत में, प्रशासन ०.०५ मिलीग्राम/kg शरीर का वजन buprenorphine intraperitoneally बनाए रखने के लिए analgesia.
- 10 मिनट के बाद, एक endotracheal इंटुबैषेण एक 20 ग्राम नसों (iv) कैथेटर का उपयोग कर और ४०% ऑक्सीजन (ओ2) और 2% (v) isoflurane के साथ माउस हवादार प्रदर्शन करते हैं । सेट उचित वेंटिलेशन पैरामीटर (जैसे, २२० µ एल स्ट्रोक मात्रा, एक 25-30 g C57BL/6JRj माउस के लिए 150/
- लगातार गुदा जांच के माध्यम से शरीर के तापमान की निगरानी । सिर के साथ गर्म प्लेट पर माउस जकड़ना अंवेषक की ओर इशारा करते हुए । माउस सामांय शरीर का तापमान ३६.५-३८ डिग्री सेल्सियस है । गर्म प्लेट तापमान के समायोजन से 1 डिग्री के भीतर शरीर का तापमान बनाए रखें ।
3. वाम वेंट्रिकुलर कैथीटेराइजेशन
- संक्रमित छाती और गर्दन तीन betadine और ७०% शराब की बारी सफ़ाई के साथ । त्वचा को शुष्क करने के लिए संक्रमण के लिए रुको । एक छोटे से पशु शेविंग प्रणाली का उपयोग करके छाती के बाल निकालें ।
- छोटे सर्जिकल कैंची का उपयोग कर उरोस्थि की ओर नीचे होंठ के नीचे एक 10 मिमी अनुदैर्ध्य माध्य चीरा 5 मिमी प्रदर्शन.
- काटना अवअधोहनुज ग्रंथि के बाएं और दाएं भाग कुंद तैयारी के माध्यम से एक संदंश का उपयोग कर । सही paratracheal क्षेत्र में अलग मांसपेशी और वसा ऊतक सही सांप्रदायिक मन्या धमनी बेनकाब करने के लिए. जुटाने और एक तुला संदंश के साथ पोत के साथ सावधान कुंद तैयारी के माध्यम से संयोजी ऊतक से 5-10 mm की कुल लंबाई के लिए पोत अलग ।
नोट: vagus तंत्रिका या मन्या शरीर के यांत्रिक हेरफेर से बचने के रूप में यह गंभीर हाइपरटेंशन और मंदनाड़ी के कारण हो सकता है । - पोत के नीचे दो तैयार रेशम धागे दर्रा । Ligate एक तंग गांठ के साथ बाहर पोत और समीपस्थ उजागर क्षेत्र है कि अभी भी कैथेटर के पारित होने की अनुमति देता है पर एक ढीला गांठ जगह है ।
- कपाल के धागे को ठीक करें (टाइट) गाँठ के सिर के बगल में चूहों के पोत पर हल्का तनाव लागू करने के रूप में यह कैथेटर की शुरूआत की सुविधा होगी. reversibly ब्लॉक रक्त प्रवाह के लिए ढीला गाँठ के समीपस्थ पोत समीपस्थ पर एक hemostat संवहनी दबाना प्लेस ।
- सूक्ष्म कैंची के साथ पोत खोलने के लिए कपाल गाँठ के लिए एक कील के आकार का चीरा 1 मिमी समीपस्थ प्रदर्शन.
नोट: रक्त की एक छोटी सी बूंद इस कदम के उचित निष्पादन का संकेत होगा । - 10 मिमी के लिए कैथेटर ध्यान से डालें. कैथेटर डेटा की रिकॉर्डिंग शुरू.
नोट: एक संदंश के साथ चीरा खींच इस प्रक्रिया को आसान बना सकते हैं । - संवहनी दबाना निकालें । चीरा के लिए खारा के 1-2 बूंदें कैथेटर आंदोलन की सुविधा के लिए जोड़ें । लगभग एक और 10 मिमी के लिए कैथेटर शुरू जारी है । सेंसर टिप के साथ समीपस्थ गाँठ गुजर के बाद, गाँठ ध्यान से जकड़ना कैथेटर आंदोलन को बाधित किए बिना कैथेटर के पतले भागों के साथ रक्त भाटा को रोकने के लिए बस पर्याप्त ।
नोट: कैथेटर की नोक पर सेंसर का आकार संवहनी क्लैंप निकालने जब रक्त के भाटा रोकता है । - धीरे दबाव विश्लेषण जब तक कैथेटर डालने जारी रखें धमनी रक्तचाप का संकेत है कि कैथेटर महाधमनी में रखा गया है (आंकड़ा 3ए) प्रोफ़ाइल दिखाता है ।
नोट: महाधमनी वाल्व तक पहुंचने कैथेटर कैथेटर के प्रकाश प्रतिरोध और नाड़ी सिंक्रनाइज़ गति द्वारा संकेत दिया जाएगा । - जब महाधमनी वाल्व के माध्यम से अग्रिम की कोशिश कर रहा प्रतिरोध का अनुभव, कैथेटर वापस खींच 5 मिमी और जब तक LV कैथीटेराइजेशन PV विश्लेषण में एक परिवर्तन में संकेत दिया जाएगा के रूप में डायस्टोलिक दबाव तक पहुंच जाएगा 0-20 mmHg (आंकड़ा 3 बी) । नोट आगे की पुष्टि करने के लिए मात्रा निगरानी में परिवर्तन सेंसर टिप के वेंट्रिकुलर स्थान (चित्रा 3सी) । समीपस्थ गांठ और अधिक कसकर कैथेटर आंदोलन को रोकने के लिए जकड़ना ।
4. Ischemia/Reperfusion सर्जरी
- 15 मिमी की कुल लंबाई के लिए बाईं axilla की ओर caudal उरोस्थि से त्वचा चीरा प्रदर्शन. दो मांसपेशी परतों के कुंद तैयारी के साथ आगे बढ़ें जब तक पसलियों visualized किया जा सकता है ।
- तीसरी और चौथी बाईं पसली के बीच चीरा के माध्यम से छाती खोलें. पेरीकार्डियम तक पहुँच प्राप्त करने के लिए सर्जिकल हुक का उपयोग करें । हृदय के ऊपर पेरीकार्डियम का संप्रदाय । एलसीए बंधाव के साथ जारी रखने से पहले, मांय विश्लेषण के लिए PV डेटा रिकॉर्ड करने के लिए पशु को छूने के बिना 30 एस रुको ।
- स्थानीयकृत बाईं auricle के तहत उभरते एलसीए और शीर्ष की ओर दिल के बाईं ओर उतरते । बाईं auricle के नीचे एक पाश 2 मिमी के साथ धमनी घेरना करने के लिए एक 6-0 के लिए टांका का प्रयोग करें । पाश के तहत एक छोटे से सिलिकॉन ट्यूब प्लेस और ऊपर एक तंग गांठ जगह है ।
नोट: बाहर मायोकार्डियम टर्निंग ग्रे एलसीए रोड़ा6के लिए सकारात्मक नियंत्रण के रूप में कार्य करता है । I/आर सर्जरी 5 मिनट के भीतर ऑपरेटिंग अंवेषक से स्वतंत्र रूप से किया जाना चाहिए । - 1 मिमी लंबाई में सीवन काट । सर्जिकल हुक रिलीज और मैंयुअल रूप से चीरा के ऊपर मांसपेशी परतों को बंद करें । लगातार पीवी डेटा रिकॉर्डिंग करते समय ४५ मिनट तक प्रतीक्षा करें ।
- ४५ मिनट के बाद, फिर से चीरा खोलने के लिए और सिलिकॉन ट्यूब निकालने के लिए प्रेरित reperfusion. एक और 20 मिनट के लिए डेटा रिकॉर्ड ।
नोट: एक लाल रंग के लिए एक परिवर्तन के रूप में देखा से पहले ischemia सफल reperfusion इंगित करता है ।
5. अंशांकन
नोट: PV कैथेटर सिस्टम के अंशांकन 4 अनिवार्य कदम होते हैं, जिनमें से दो माप के बाद किया जाना है । अंशांकन मांय परिणाम सुनिश्चित करने के लिए हर प्रयोग के बाद दोहराया जाना चाहिए ।
- चरण १.५ में वर्णित के रूप में प्रयोग करने से पहले दबाव अंशांकन और कंडक्टर अंशांकन प्रदर्शन.
- जब कैथेटर अभी भी प्रयोग के बाद छोड़ दिया निलय में रखा है खारा अंशांकन प्रदर्शन समाप्त हो गया है । तैयार क्षेत्र में मन्या धमनी का सही jugular नस पार्श्व information. एक हैमिल्टन सिरिंज के माध्यम से 10 µ एल 25% NaCl एच2ओ में सुई जबकि डेटा रिकॉर्डिंग ।
- वॉल्यूम वक्र (चित्रा 5C) में आरोही चरण पर प्रकाश डाला द्वारा अधिग्रहण सॉफ्टवेयर का उपयोग कर अंशांकन की गणना । इस प्रक्रिया को कुल 3 बार दोहराएं । तेजी से पंचर सेक करने के लिए एक संवहनी दबाना का उपयोग करके सिरिंज निष्कर्षण के बाद खून की हानि से बचें ।
- मात्रा डेटा अधिग्रहण मानकीकृत संस्करणों के विश्लेषण द्वारा जांच करने के लिए वॉल्यूम अंशांकन निष्पादित करें । एक थोड़ा heparinized 1 मिलीलीटर सिरिंज (जैसे, 5 µ एल प्रति २०० IE हेपरिन) के साथ कार्डियक पंचर से लगभग ५०० µ एल माउस रक्त प्राप्त करें । कैथेटर को नुकसान पहुँचाए से बचने के लिए पीवी कैथेटर 10-15 mm वापस खींचो ।
- ३७ डिग्री सेल्सियस पूर्व गरम अंशांकन cuvette (चित्रा 5) में प्राप्त रक्त भरें । बुलबुले से बचें के रूप में यह परिणाम के साथ हस्तक्षेप कर सकते हैं । एक अच्छी तरह से और रिकॉर्ड डेटा में कैथेटर टिप जोड़ें । सॉफ्टवेयर निर्देशित विश्लेषण (चित्रा 5B) द्वारा एक मानक वक्र प्राप्त करें । इस प्रक्रिया को कुल 3 बार दोहराएं ।
- exsanguination या गर्भाशय ग्रीवा के विस्थापन के द्वारा चूहों Euthanize जबकि पर्याप्त isoflurane संज्ञाहरण सभी समय पर बनाए रखा है ।
6. डेटा विश्लेषण
- अंशांकन चरण पूर्ण करने के बाद, सॉफ़्टवेयर-निर्देशित डेटा विश्लेषण निष्पादित करें । इसलिए, PV वर्कफ़्लो के विश्लेषण अनुभाग के भीतर उपयुक्त खंड (कम से कम दस चक्र) हाइलाइट करें और आधार रेखा विश्लेषण करें । यदि आवश्यक हो तो वेंटिलेशन या हेरफेर के कारण विचलन के साथ चक्र बाहर निकालें (चित्रा 3 डी).
- महाधमनी वाल्व के पारित होने से पहले पीवी आधारभूत विश्लेषण प्रदर्शन (केवल धमनी का दबाव), तुरंत पहले और बाद एलसीए रोड़ा । पीवी आधारभूत विश्लेषण और 5 मिनट के अंतराल में आयोजित करके आगे बढ़ें । जबकि ischemia और बाद reperfusion । प्रयोग के अंत में, बाईं निलय (धमनी दबाव) से कैथेटर के पुनर्कर्षण के बाद दबाव डेटा का विश्लेषण करते हैं ।
- नमूना त्रुटि से बचने के लिए लगातार 10 चक्रों का विश्लेषण करें । वेंटिलेशन के साथ प्राप्त मूल्यों के प्रबल हस्तक्षेप का सामना करते हैं, 5 एस की एक अधिकतम के लिए वेंटिलेशन की क्षणिक रुकावट पर विचार किया जा सकता है.
- LV फ़ंक्शन की विशेषता के लिए आधारभूत विश्लेषण (आरेख 3d) में परिकलित निम्न पैरामीटर्स का उपयोग करें:
- स्ट्रोक वॉल्यूम (µ l)
- इंजेक्शन अंश: स्ट्रोक वॉल्यूम/एंड-डायस्टोलिक वॉल्यूम (%)
- कार्डिएक आउटपुट: स्ट्रोक मात्रा * दिल की दर (µ l/
- कार्डिएक सूचकांक: कार्डिएक आउटपुट/शरीर की सतह क्षेत्र (µ l/(ंयूनतम * सेमी ²)
- स्ट्रोक काम: पीवी वक्र के भीतरी क्षेत्र (mmHg * µ एल)
- अधिकतम दाब (Pmax); मतलब दबाव (Pmean)
- LV सिस्टोलिक फ़ंक्शन के पैरामीटर के रूप में अधिकतम डीपी/dt (mmHg/
- LV अनुपालन के लिए एक पैरामीटर के रूप में ंयूनतम डीपी/dt (mmHg/
- isovolumetric विश्राम का समय निरंतर: ताऊ (एमएस)
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Representative Results
LV कैथीटेराइजेशन के बाद, प्रतिवर्ती एलसीए बंधाव reperfusion के 10 मिनट के बाद ४५ मिनट के लिए प्रदर्शन किया गया था । PV डेटा हर समय (चित्रा 1) दर्ज किया गया था ।
पीवी कैथेटर का सही स्थान विशेषता LV पीवी ग्राफ (चित्रा 2a) प्राप्त करने से पुष्टि की गई थी । LV कैथेटर प्लेसमेंट महाधमनी में PV-कैथेटर की झूठी नियुक्ति जबकि 0-20 mmHg की एक न्यूनतम के साथ ठेठ वेंट्रिकुलर दबाव रेंज दिखाया 30-60 mmHg के एक न्यूनतम दबाव के साथ एक ठेठ धमनी दबाव वक्र दिखाया जाएगा (डायस्टोलिक रक्तचाप ) और systole के अंत में एक छोटे से भ्रमण महाधमनी वाल्व बंद करने का संकेत (आंकड़ा 3 बी औरसी सी) । एलसीए के सफल रोड़ा को नेत्रहीन बाहर के LV मायोकार्डियम (चित्रा बी) के blanching द्वारा पुष्टि की गई थी ।
एलसीए रोड़ा के बाद, PV डेटा 5 मिनट के अंतराल में प्राप्त किया गया था । दबाव डेटा विश्लेषण अधिकतम LV सिस्टोलिक संरक्षित परिधीय छिड़काव और स्थिर संज्ञाहरण (चित्रा 4a) का संकेत दबाव में कोई परिवर्तन का प्रदर्शन किया । LV वॉल्यूम का विश्लेषण EF (५२% बनाम४०%, पी = ०.००८) और निरपेक्ष स्ट्रोक वॉल्यूम (चित्रा 4B और 4c) दोनों में एक महत्वपूर्ण कमी का पता चला । ये परिवर्तन ischemia और LV कार्यात्मक डेटा के प्रारंभिक चरण के भीतर हुआ ischemia के बाद के चरण में अपरिवर्तित रहे । LV सिकुड़ना के एक पैरामीटर के रूप में अधिकतम डीपी/डीटी रोधगलन ischemia के दौर से गुजर चूहों में एक 30% कमी दिखाई । स्ट्रोक काम 30% कम (चित्रा 4d और 4E) था । डायस्टोलिक फ़ंक्शन के लिए एक पैरामीटर के रूप में, न्यूनतम dP/dt बिगड़ा हुआ LV अनुपालन (चित्रा 4F) का संकेत काफी कम था. सिलिकॉन ट्यूब के निष्कर्षण द्वारा Reperfusion नेत्रहीन मांय था । Reperfusion 20 मिनट (चित्रा 4a-4d) की अवधि के भीतर PV डेटा विश्लेषण में महत्वपूर्ण परिवर्तन नहीं दिखा था । अन्तर्वासना संचालित करने वाले जानवरों ने LV सिस्टोलिक या डायस्टोलिक पैरामीटर्स (फिगर 4i-4J) में उल्लेखनीय कमी नहीं दिखाई ।
डेटा प्राप्ति के अंत में, cuvette अंशांकन और खारा अंशांकन प्रदर्शन किया गया (चित्रा 5).
चित्रा 1: विधि की योजना । बाएँ वेंट्रिकुलर (एल. वी.) के अनुक्रम कैथीटेराइजेशन, बाएँ मुख्य कोरोनरी धमनी (एलसीए) रोड़ा और reperfusion.
चित्रा 2: सर्जिकल प्रक्रियाओं । (क) वाम वेंट्रिकुलर कैथीटेराइजेशन सही आम मन्या धमनी के माध्यम से रखा. (ख) रोड़ा टांका और सिलिकॉन ट्यूब के साथ छोड़ दिया मुख्य कोरोनरी धमनी । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।
चित्रा 3: प्रतिनिधि दबाव मात्रा डेटा । (क) प्रतिनिधि धमनी दबाव के एक ंयूनतम दबाव द्वारा संकेत दिया > 30 mmHg और महाधमनी वाल्व के समापन का संकेत systole के अंत में एक ठेठ भ्रमण । (B) प्रतिनिधि बाएं वेंट्रिकुलर दबाव डेटा डायस्टोलिक मान दिखा रहा है < 20 mmHg । (ग) प्रतिनिधि वाम वेंट्रिकुलर दबाव मात्रा आरेख । (घ) सॉफ्टवेयर आधारित पीवी आधारभूत विश्लेषण के स्क्रीनशॉट । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।
चित्रा 4: के ischemia/reperfusion के दौर से गुजर चूहों में दबाव/ (क) सिस्टोलिक वाम वेंट्रिकुलर रक्तचाप (Pmax). (ख) वाम वेंट्रिकुलर (LV) बेदखली अंश (EF) (%). (ग) LV स्ट्रोक वॉल्यूम (µ l). (घ) अधिकतम डीपी/डीटी (मैक्स डीपी/dt) (mmHg/ (ङ) LV स्ट्रोक वर्क (दप). (F) न्यूनतम dp/dt (ंयूनतम dp/dt) (mmHg/ (छ) isovolumetric विश्राम तौ (ms) का समय निरन्तर । (ज) दबाव/मात्रा आरेख से पहले और ४५ ंयूनतम रोधगलन ischemia की प्रेरण के बाद । (आई-जे) स्ट्रोक मात्रा (एसवी) (µ एल) और अधिकतम डीपी/डीटी (मैक्स डीपी/डीटी) (mmHg/15/30 मिन ischemia के बाद जानवरों की तुलना में संचालित जानवरों में) । डेटा (a-G) के रूप में प्रस्तुत कर रहे है मतलब ± SEM. * p < 0.05 के माध्यम से छात्र का t-परीक्षण या अनुपात-युग्मित t-परीक्षण, n = 4 चूहों/समूह (a + D-g)) या n = 3 चूहों/समूह (B, C) । + ४५:४५ ंयूनतम ischemia; प्रतिनिधि: reperfusion । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।
चित्र 5: पोस्ट-हॉक अंशांकन । (A) अंशांकन cuvette की योजनाबद्ध । µ एल में खंड (ख) प्रतिनिधि रेखीय प्रतिगमन cuvette अंशांकन करने के लिए प्राप्त खंड डेटा का विश्लेषण । (ग) 25% सोडियम क्लोराइड के 10 µ एल के इंजेक्शन के बाद प्रतिनिधि मात्रा डेटा में एच2ओ में खारा अंशांकन करने के लिए सही jugular नस । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।
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Discussion
तीव्र रोधगलन में lv hemodynamics के PV निगरानी फुलाव सदमे और मैं में बिगड़ा lv समारोह vivo आकलन में वास्तविक समय के लिए एक उपंयास विधि के रूप में कार्य करता है/ पीवी कैथीटेराइजेशन LV सिस्टोलिक और डायस्टोलिक समारोह के संबंध में मापदंडों का एक व्यापक स्पेक्ट्रम प्रदान कर सकते हैं । आमतौर पर इकोकार्डियोग्राफी या एमआरआई (चैंबर मात्रा, EF, स्ट्रोक मात्रा, और कार्डियक आउटपुट) द्वारा प्राप्त lv volumetric मापदंडों के अलावा, PV विश्लेषण एक साथ lv सिस्टोलिक के उपायों को प्रदान करके एल. वी. समारोह की एक और अधिक पूरा प्रोफ़ाइल पैदावार प्रदर्शन (सिकुड़ना डीपी/dt, स्ट्रोक वर्क) और LV अनुपालन (-डीपी/dt, ताऊ) डायस्टोलिक फ़ंक्शन के लिए एक पैरामीटर के रूप में ।
तीव्र रोधगलन के साथ रोगियों में तीव्र दिल की विफलता के रूप में जल्दी में अस्पताल में रुग्णता और मृत्यु2, तीव्र hemodynamic हानि और तीव्र रोधगलन में फुलाव सदमे की निगरानी के लिए एक महत्वपूर्ण कारक के रूप में सेवा कर सकता है एक प्रयोगात्मक सेटिंग में संभावित सुरक्षात्मक तंत्र की पहचान के लिए एक महत्वपूर्ण उपकरण ।
कई कारकों को सफल डेटा अधिग्रहण के लिए महत्वपूर्ण हो गया । स्थिर संज्ञाहरण वैध PV डेटा के लिए महत्वपूर्ण था के बाद से isoflurane दबाव में बूंदों के साथ एक मजबूत cardiodepressive प्रभाव दिखाया, LV EF, और स्ट्रोक मात्रा । मन्या धमनी की Atraumatic तैयारी खून की कमी के कारण hypovolemia से बचने के लिए महत्वपूर्ण थी । इसके अलावा, संपीड़न या vagus तंत्रिका और मन्या शरीर की चोट hemodynamics की गंभीर हानि में परिणाम सकता है ।
खारा अंशांकन और cuvette अंशांकन वैध डेटा बनाए रखने के लिए एक और महत्वपूर्ण कदम होने के लिए दिखाई दिया । खारा अंशांकन के लिए, 15% NaCl समाधान के इंजेक्शन वृद्धि हुई कंडक्टर खंड स्तर (चित्रा 5C) में एक अस्थाई वृद्धि द्वारा संकेत के लिए नेतृत्व किया । एक ही गति को बनाए रखने जब इंजेक्शन स्थिर डेटा के लिए महत्वपूर्ण था । cuvette अंशांकन का आयोजन करते समय, यह वैध परिणाम सुनिश्चित करने के लिए cuvettes के भीतर बुलबुले से बचने के लिए महत्वपूर्ण था ।
प्राप्त PV डेटा इसके अलावा एक वैध hemodynamic लक्षण वर्णन के लिए दबाव और मात्रा डेटा के एक साथ अधिग्रहण के महत्व का संकेत अकेले दबाव डेटा प्रयोग भर में महत्वपूर्ण परिवर्तन नहीं दिखा था (आंकड़ा 4a ). संयुक्त पीवी विश्लेषण lv सिस्टोलिक समारोह के लिए दोनों आधारभूत मापदंडों की पेशकश की (उदाहरण के लिए, बेदखली अंश) के रूप में के रूप में अच्छी तरह से एल.वी. सिकुड़ना (डीपी/डीटी) और lv विश्राम के लिए मापदंडों (-डीपी/डीटी, ताऊ) ।
दिलचस्प है, एक्यूट रोड़ा रोगियों में एलसीए के आम तौर पर यांत्रिक hemodynamic समर्थन के लिए तत्काल आवश्यकता के साथ LV समारोह के एक गंभीर घाटे का कारण बनता है और एक उच्च मृत्यु दर11,12के साथ जुड़ा हुआ है । चूहों में एलसीए रोड़ा कम hemodynamic ख़राबी और प्रक्रिया के दौरान एलसीए रोड़ा-संबद्ध मौत दिखाई नहीं थी । ischemia के दौरान hemodynamic स्थिरता कायम करने का संकेत के रूप में, सिस्टोलिक LV रक्तचाप सभी समय (चित्रा 4a) पर स्थिर था । हालांकि, यह प्रभाव मनुष्यों में एलसीए occlusions की तुलना में चूहों में अधिक बाहर ligations के कारण हो सकता है ।
एक साथ ले लिया, चूहों में तीव्र रोधगलन की वास्तविक समय hemodynamic निगरानी गंभीर LV रोग में cardioprotective तंत्र का अध्ययन करने के लिए एक नई विधि के रूप में सेवा कर सकता है तीव्र दौर से गुजर रोगियों के प्रारंभिक चरण के उपचार में सुधार करने के लिए लक्ष्य रोधगलन ।
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Disclosures
लेखकों का खुलासा करने के लिए कुछ नहीं है ।
Acknowledgments
लेखक निंनलिखित धन स्रोत स्वीकार करते हैं: और Kröner-Fresenius-Stiftung (Tienush Rassaf); हंस und Gertie फिशर Stiftung (Tienush Rassaf), चिकित्सा संकाय से अनुदान, विश्वविद्यालय ड्यूसबर्ग-एस्सेन, जर्मनी (Tienush Rassaf, लार्स मिशेल); अर्नस्ट-und Berta Grimmke-Stiftung (Christos Rammos) ।
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Betaisodona Loesung | Mundipharma | 4162-1606/89x30mm | Povidon-Iod |
| Calibration cuvette | Millar instruments | 910-1049 | Calibration cuvette |
| Contura professional hair trimmer | Wella | HS-60 | Small animal shaving system |
| Eclipse Needle 27G | BD | REF 305770 | 27G needle |
| Forceps | FST | 11203-25, 11069-08, 11616-15, 11506-12, 11051-10 | Surgical forceps |
| Forceps | Aesculap Braun | BN731R, BD 311R | Surgical forceps |
| Foris FS2434 | Eizo | 0FTD2033 | Monitor |
| Hamilton Syringe 100 µl needle | Hamilton | 80621 | 100µl syringe with needle |
| Heated Small animal OP table | Harvard Apparatus | 15001 | Heated OP table |
| Heparin-Natrium 25000 | Ratiopharm | N68542.04 | Heparin |
| Ketamin 10% 100 mg/ml | bela-pharm | FS1670041 | Ketamin |
| Labchart Pro 8 + Pro modules | AD Instruments | MLS260/8 | PV data analysis software |
| LAS EZ | Leica | LAS EZ | Microscope camera software |
| Leica IC80 HD | Leica | IC80 HD | Microscope camera |
| Leica M80 | Leica | M80 | Microscope |
| Micro-tip catheter transducer | Millar instruments | SPR-839 | PV catheter |
| MiniVent | Harvard Apparatus | 845 | ventilation |
| MPVS Ultra | Millar instruments | PL3508B48/M | PV catheter data acquisition device |
| Octenisept | Schülke | 20000832-A | disinfectant |
| Plastipak 1ml | PD | REF 303172 | 1ml syringe |
| PowerLab 8/35 | AD Instruments | PL3508 | analog/digital converter |
| Prolene 6-0 | Ethicon | XNEH7814.P31 | Polypropylene suture |
| Retraction Kit | FST | 18200-20 | retraction of surgical situs |
| Seraflex 5-0 | Naila | IC108000 | silk suture |
| Small and micro-scissors | FST Essen | 14059-11, 15007-08, 14064-11 | Surgical scissors |
| Small silicon tube | Reichelt Chemietechnik | tube for LCA occlusion | |
| Sodium Chloride | Sigma-Aldrich | S7653 | Sodium Chloride |
| testo 108 | testo | 5631080 | rectal thermometer |
| Thinkcentre desktop computer | Lenovo | PC0EJS2V | Computer |
| Vasofix Safety 20G | Braun | 4269110S-01 | intubation catheter |
| Windows 10 | Microsoft | KW9-00240 | Operating system |
| Xylazin 2% | Ceva | 6324464.00.00 | Xylazine hydrochloride |
References
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