Summary
Nous présentons une méthode chirurgicale pour provoquer l’hypertrophie ventriculaire droite et l’échec chez les rats.
Abstract
Ventriculaire droite (RV) échec, induit par une surcharge de pression soutenue est un contributeur majeur à la morbidité et la mortalité dans plusieurs troubles cardio-pulmonaires. Modèles animaux fiables et reproductibles de l’échec de RV sont donc garantis afin d’étudier les mécanismes de la maladie et les effets de stratégies thérapeutiques possibles. Baguage du tronc pulmonaire est une méthode courante pour induire une hypertrophie RV isolée, mais en général, modèles décrites précédemment n’ont pas réussi à créer un modèle stable d’hypertrophie de RV et d’échec.
Nous présentons un modèle de rat de l’hypertrophie de RV surcharge induite par la pression causée par le tronc pulmonaire des bandes (PTB) qui permet aux différents phénotypes de l’hypertrophie de RV avec et sans défaillance de RV. Nous utilisons un applicateur de clips ligature mis à jour le compresser un clip de titane autour du tronc pulmonaire à un diamètre intérieur prédéterminé. Nous utilisons des diamètres différents clip pour induire des différentes étapes de la progression de la maladie de l’hypertrophie bénigne de RV à l’échec de RV décompensée.
Hypertrophie de la RV se développe constamment chez des rats soumis à la procédure de la PTB et selon le diamètre du clip des bandes appliqué, nous pouvons reproduire fidèlement les sévérités de différentes maladies allant de l’hypertrophie compensé à RV décompensée grave échec avec des manifestations extra-cardiaque.
Le modèle PTB présenté est qu'un modèle solide et valable d’une surcharge de pression induit une hypertrophie RV et échec qui a plusieurs avantages à d’autres modèles des bandes dont la reproductibilité élevée et la possibilité d’induire une insuffisance de RV sévère et décompensée.
Introduction
Le ventricule droit (RV) peut s’adapter à une surcharge de pression persistante. Dans le temps, cependant, des mécanismes d’adaptation ne parviennent pas à maintenir le débit cardiaque, le RV se dilate et finalement le RV échoue. La fonction RV est le principal facteur pronostique de plusieurs troubles cardio-pulmonaires, y compris l’hypertension artérielle pulmonaire (HTAP), l’hypertension pulmonaire thrombo-embolique (CTEPH) et diverses formes de cardiopathies congénitales avec une surcharge de pression (ou volume) de la VR. Malgré un traitement intense, échec de RV reste une cause prédominante de la mort dans ces conditions.
Conséquence des propriétés uniques1,2 et le développement embryologique3 du VP, connaissances provenant de l’insuffisance cardiaque gauche ne peut pas simplement être extrapolés à insuffisance cardiaque droite. Des modèles animaux d’insuffisance cardiaque droite sont donc nécessaires afin d’étudier les mécanismes de défaillance de RV et stratégies possibles de traitement pharmacologique.
Il y a expérimental modèles d’hypertension pulmonaire induite par le SU5416 combinée avec l’hypoxie (SuHx)4 ou monocrotaline (MCT)5, qui induit insuffisance RV secondaire à la maladie dans le système vasculaire pulmonaire. Ces modèles sont utilisés pour évaluer les effets thérapeutiques des médicaments qui ciblent le système vasculaire pulmonaire. Fois le SuHx et le modèle MCT sont modèles postcharge non fixe de l’échec de RV. Par conséquent, il n’est pas possible de conclure si une amélioration de la fonction RV après une intervention est secondaire à la postcharge réduisant les effets vasculaires pulmonaires ou si elle est causée par des effets directs sur le RV En outre, le modèle MCT a plusieurs effets extra-cardiaque.
Dans les modèles de baguage tronc pulmonaire expérimentale, la postcharge le RV est fixée en raison d’une constriction mécanique du tronc pulmonaire. Cela permet l’étude des effets cardiaques directs d’une intervention sur le RV indépendante des effets vasculaires pulmonaires6,7,8,9. Habituellement, le baguage se fait en plaçant une aiguille le long du tronc pulmonaire. Puis une ligature est placée autour de l’aiguille et le tronc pulmonaire et à égalité avec un noeud, et l’aiguille est retirée, laissant la suture autour du tronc pulmonaire. Selon le calibre de l’aiguille, différents degrés de contraintes peuvent être appliquées, mais en dépit de cette approche étant largement utilisée, il a quelques inconvénients. Tout d’abord, le diamètre du cerclage n’est pas exactement le même que le diamètre extérieur de l’aiguille que la ligature est liée autour de l’aiguille et le tronc pulmonaire. En second lieu, il peut y avoir une variation significative comment serré le noeud est liée rend difficile de reproduire un certain degré de baguage. Cela conduira à une variation de diamètre des bandes et ainsi une plus grande dispersion. Enfin, le noeud peut se détacher au fil du temps.
Une étude s’applique à un clip de tantale mi-clos autour du tronc pulmonaire10. Ils compressé la pince autour du tronc pulmonaire d’une superficie intérieure de 1,10 mm2 et comparativement à des rats soumis à des bandes avec une suture à l’aide d’une aiguille 18 G. Dans l’ensemble, des bandes avec le clip a été associée à moins de complications peri-chirurgicales et variance des données.
Basé sur les principes décrits par Schou al.11, nous avons encore développé et caractérisé le tronc pulmonaire des bandes modèle (PTB) de l’hypertrophie de RV et l’échec. Ici, nous présentons notre expérience à l’aide de ce modèle basé sur les résultats de précédentes études12,13. Pour ce modèle, un clip de titane est compressé autour du tronc pulmonaire au diamètre intérieur exact prédéfini, qui peut être ajusté afin d’inciter des phénotypes distincts d’échec RV.
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Protocol
Tous les rats ont été traités conformément aux directives nationales danoises décrits dans la loi danoise sur l’expérimentation animale et arrêté ministériel sur l’expérimentation animale. Toutes les expériences ont été approuvés par la Commission d’examen éthique institutionnelle et effectués conformément à la loi danoise pour la recherche sur les animaux (numéro d’autorisation de 2012-15-2934-00384, Ministère danois de la Justice).
1. réglage de l’applicateur de clips ligature
Remarque : Le cerclage du tronc pulmonaire est réalisé avec un applicateur de clips mis à jour le ligature ouvert avec une mâchoire coudée. L’applicateur est modifié avec un mécanisme d’arrêt réglable pour arrêter la compression quand les mâchoires atteignent une distance exacte de l’autre. Quand un petit titane ligaturant clip est compressé avec l’applicateur modifié, une lumière persiste entre les jambes de l’attache avec un diamètre spécifique selon le réglage du mécanisme stop (Figure 1).
- Choisissez le diamètre de la bande désirée, par exemple, 0. 6 mm.
- Réglez l’applicateur de clips ligature jusqu'à ce que la distance entre les mâchoires est 1,0 mm lorsqu’il est complètement comprimé. Cela laisse une lumière de 0,6 mm, comme les jambes de deux clip ont une épaisseur de 0,2 mm chacune.
Figure 1 : procédure de la PTB. (A) l’intervention chirurgicale instruments utilisés pour la procédure PTB dont l’applicateur de clips ligature (flèche bleue). (B) la butée réglable mécanisme de la ligature clip applicateur. En tournant la roue dentée (flèche bleue) ajustera la position de l’axe (flèche jaune), qui s’arrête à la clôture de l’applicateur quand les mâchoires atteignent une certaine distance les uns des autres. La distance correspond à deux fois l’épaisseur des jambes du clip plus le diamètre intérieur de la pince, quand le clip est compressé et peut être calibré en utilisant par exemple une aiguille avec un diamètre extérieur connu. (C) l’applicateur compresse un clip de titane pour un diamètre intérieur exact spécifié préalablement par l’ajustement de l’applicateur. Diamètre (D) l’intérieur de l’élément compressé peut être ajusté afin d’inciter les différentes sévérités d’hypertrophie de RV et d’échec. Pour des données présentées, 1,0 mm de diamètre intérieur a été utilisé pour induire une hypertrophie bénigne RV, 0,6 mm de diamètre intérieur a été utilisé pour induire l’insuffisance modérée de RV et 0,5 mm de diamètre intérieur a été utilisé pour induire une insuffisance sévère RV. (E) le clip après application autour du tronc pulmonaire. S’il vous plaît cliquez ici pour visionner une version agrandie de cette figure.
2. préparation du Rat
Remarque : Les autres schémas d’analgésiques peuvent être appliqués.
- Utilisez sevrés de rat Wistar pesant environ 100 – 120 g. Afin de maintenir la température du corps pendant la chirurgie, utilisez un coussin chauffant couverte.
- Pour la chirurgie, utilisez un ventilateur mécanique, affectez une tidal volume d’environ 1,75 mL et fréquence respiratoire de 75 min.
- Anesthésier le rat avec le sévoflurane (mélange de 7 % dans 1,5 L d’O2) dans une chambre à induction pendant 5 minutes. Intuber le rat à l’aide d’une canule IV de 17 G, où la partie distale de 2 mm de l’aiguille ont été coupés afin que le cathéter souple couvrir la pointe. Retirer l’aiguille et connecter la canule au ventilateur.
- Placez le rat sur le dos sur le coussin chauffant. Assurez-vous que l’intubation est correcte en observant les mouvements du thorax. Ceux-ci doivent être sans différences de côté et en rythme avec le ventilateur.
Remarque : Absence de mouvements du thorax, des contractions abdominales et gonflement de l’estomac dans l’abdomen supérieur gauche sont des signes d’un tube déplacé. Retirer la canule, remettre le rat dans la chambre de l’induction et ré-intuber. - Après intubation correcte, réduire le sévoflurane à concentration de maintenance (mélange de 3,5 % à O2, 1,5 L/min) et fixer les pattes du rat pour le coussin chauffant.
- Confirmer anesthetization prober en vérifiant les réflexes de retrait des extrémités à l’aide d’une pince à serrer les pattes du rat.
- Injecter les rats avec la buprénorphine (0,1 mg/kg par voie sous-cutanée (s.c.)) et carprofene (5 mg/kg s.c.) pour soulager la douleur postopératoire.
- Raser la poitrine et désinfecter à la chlorhexidine.
3. isolement du tronc pulmonaire
- Avec une paire de ciseaux, faire une incision de 2 cm dans la peau le long de la partie moyenne du sternum. Identifier les principaux muscles pectoraux et couper son attache sternal. Identifier le 2èmeet 4ème costa ci-dessous 3rd.
- Vous pouvez également saisir le 2nd costa avec une pince de fixation, mettre une suture (4-0, multifilament, résorbable) autour de la costa de la 2ème de la 1st l’espace intercostal sur la partie inférieure médiane de l’espace intercostal 2nd . Faire un noeud solide afin de ligaturer l’artère thoracique antérieure.
Remarque : Cela peut être utile si le saignement de l’artère thoracique antérieure est un problème récurrent. - Couper les 4èmeet 3rd2nd costa près du sternum avec une paire de ciseaux et disséquer attentivement les muscles intercostaux, jusqu'à ce qu’une thoracotomie gauche complète a été effectuée. Si des saignements de l’artère thoracique antérieure se produisent, compresser avec un pean et ligaturer l’artère.
- Insérer un rétracteur entre le sternum et les côtes et ouvrez-le pour obtenir un produit de la zone d’exploitation. Dans la partie supérieure du champ est le thymus couvrant l’aorte et le tronc pulmonaire. Avec précaution, soulever le thymus en utilisant une pean et renversez-le vers le haut afin d’exposer l’aorte et le tronc pulmonaire ci-dessous.
-
Introduire la pointe d’un petit comportent chirurgical avec un angle de 85° à travers le sinus péricardique transversal situé derrière l’auricule gauche. Tirez-le à mi-chemin à travers le sinus et introduire la pointe de l’oreille vers le haut jusqu'à ce qu’il apparaisse entre l’aorte et le tronc pulmonaire.
- Supprimer n’importe quel tissu conjonctif qui couvre la pointe avec un ciseaux iris afin de séparer le tronc pulmonaire de l’aorte ascendante.
- Répétez l’étape avec un gros crochet (facultatif).
- Guider une pince coudée muscle autour du tronc pulmonaire dans le passage avec le crochet. Saisir l’extrémité d’une ligature de cm environ 10 (4-0, multifilament) et tirer la moitié de la ligature en arrière dans le passage. Maintenant le tronc pulmonaire est séparé de l’aorte ascendante et peut être contrôlé par la ligature autour d’elle.
4. application du Clip
- Charger l’applicateur de clips ligature ajusté avec un clip. Guidez avec soin un des mors et une jambe du clip même si le passage autour du tronc pulmonaire. La ligature permet de tirer doucement sur le tronc pulmonaire vers le haut et dans le fourreau du clip.
- Lorsque le tronc pulmonaire est dans la branche de la pince et les deux pointes des pieds clip sont libres de tout tissu conjonctif, compresser le clip avec l’applicateur d’appliquer le baguage.
- Observez comment le RV se dilate immédiatement en réponse au cerclage et enlever la ligature.
5. clôture du Thorax
- Retirer la pean de thymus et repositionner le thymus à sa position naturelle. Retirez le rétracteur.
- Fermer le thorax en trois couches : la couche intercostale, le muscle pectoral majeur et la peau avec suture (4-0, multifilament, résorbable). Injecter 2 mL de s.c. saline pour remplacer les fluides perdus pendant la chirurgie.
- Désactiver le sévoflurane et et de garder le rat sur le ventilateur (1,5 L de O2) jusqu'à ce qu’il commence à respirer spontanément. Ensuite, sortir le rat.
- Traiter les rats avec buprénorphine dans l’eau potable pendant les trois jours suivants14 ou appliquer un protocole analgésique semblable. Après trois jours, les rats ont récupéré et sont sans gêne.
- Dans les semaines qui suivent, le bien-être des rats et des effets indésirables possibles doit être évalué sur une base quotidienne. La guérison de la plaie de la thoracotomie devrait recevoir une attention spéciale au cours de la première semaine afin de détecter tout signe d’infection ou d’une insuffisance des cicatrices. Si les rats montrent des signes de retard staturo-pondéral y compris fourrure hérissée, mobilité réduite, des problèmes respiratoires et perte de poids, ils devraient être étroitement surveillées et euthanasiés si ils perdent plus de 20 % de leur poids corporel ou développent fulminante respiratoire insuffisance.
6. sham chirurgie
- Opérer une imposture en suivant toutes les étapes ci-dessus à l’exception de l’application de la pince (étape 4).
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Representative Results
En utilisant la procédure décrite de PTB dans des études antérieures dans notre groupe de12,13, nous avons induit hypertrophie RV (PTB doux) par des bandes avec un clip de 1,0 mm, un degré modéré de l’échec de RV (PTB modérée) par des bandes avec un clip de 0,6 mm et un degré sévère de l’échec de la RV (PTB sévère) par des bandes avec un clip de 0,5 mm. Les rats soumis aux manifestations extra-cardiaque développées baguage sévères d’insuffisance de RV, y compris une insuffisance hépatique et ascite (Figure 5E). Tous les rats ont évalué sept semaines après le PTB et imposture rats ont subi la même procédure mais sans l’application de la pince. La mortalité péri-opératoire a été moins de 1 à 6. Sept semaines le taux de survie était de 80 % chez les rats soumis à un sévère des bandes et près de 100 % chez les rats soumis à la légère ou modérée des bandes ou chirurgie de l’imposture.
Pour évaluer les effets de la procédure de la PTB, nous avons utilisé l’échocardiographie cardiaque d’imagerie par résonance magnétique (IRM) pour évaluer les volumes de RV et débit cardiaque. Excursion de systolique tricuspide plan annulaire (Tessono) a été mesurée la distance du plan annulaire tricuspide avec la contraction de RV dans la vue de chambre quatre apicale. Une moyenne de trois cycles en dehors de la respiration a été utilisée comme une valeur représentative. Volume télédiastolique RV (EDV) et le volume télésystolique (ESV) ont été évaluées par le dessin de l’endocarde dans une série d’images d’axe court à travers la RV obtenues par IRM pour chaque rat et RV fraction d’éjection (EF) calculé comme EF = (EDV-ESV) / EDV. Débit cardiaque a été mesurée entre les valves pulmonaires et la pince à l’aide d’une séquence de MRI de contraste de phase. Enregistrements numériques des pressions RV ont été obtenues par un cathéter de pointe micro installé dans le RV avant l’euthanasie. Plus de détails sur les méthodes ont été décrites précédemment12. Hypertrophie de RV a été évalué comme étant le rapport du poids divisé par la masse du ventricule gauche (VG) plus cloison RV et le poids de la RV divisé par la longueur du tibia pour corriger la taille du rat. Toutes les méthodes ont été appliquées comme décrit plus haut12.
En une semaine, des pressions élevées de RV et RV un dysfonctionnement manifeste par une diminution de débit cardiaque et Tessono avaient développé chez les rats PTB par rapport à simulacre de rats exploités. En conséquence, interventions ou traitements pharmacologiques peuvent être lancées déjà à ce moment si on vise à étudier les effets sur l’échec de RV établie. Après six semaines, pression RV avait encore augmenté. Les différences du phénotype modéré vs le RV sévère échec étaient encore plus marquées montré par une diminution progressive de débit cardiaque et de Tessono avec une sévérité accrue de la bande (Figure 2 et Figure 3). Hémodynamiques différences entre rats douces PTB et le PTB sévère rat 4 semaines après la chirurgie ont été publiés par notre groupe précédemment15.
La procédure de la PTB a également causé dilatation RV évidente par une augmentation en RV EDV et ESV RV chez les rats PTB modérés comparés à simulacre de rats exploités et chez les rats PTB sévères par rapport à la fois modéré PTB et sham. Une diminution progressive des RV EF a été également vu (Figure 4).
Le développement d’hypertrophie RV était lié à l’ampleur de la surcharge de pression appliquée par le clip. Le ratio de la RV au-dessus du poids LV plus cloison accru en échelons de rats avec un cerclage doux avec un clip de 1,0 mm plus de rats s’unit à un clip modérée de 0,6 mm à des rats s’unit à un clip sévère de 0,5 mm. Des résultats similaires ont été observés pour le RV de poids corrigé pour la taille du rat en divisant la longueur du tibia. L’hypertrophie était également considérée comme une augmentation du cardiomyocyte transversale chez les rats PTB par rapport à simulacre de rats exploités. En dehors de l’hypertrophie des cardiomyocytes, la surcharge de pression induit aussi des autres changements morphologiques du VP associée insuffisance de RV, y compris la fibrose RV. Chez les rats soumis à sévères des bandes, décompensée RV insuffisance a été induite. Ce phénotype est caractérisé par des signes de défaillance en arrière y compris la congestion hépatique, vue comme une décoloration sombre du foie. Congestion hépatique a été habituellement accompagnée d’une ascite (Figure 5).
Figure 2 : effets du PTB une semaine et sept semaines après l’intervention. (A) droite ventriculaire (RV) (B) de la pression systolique cardiaque et le (C) plan annulaire tricuspidienne systolique excursion (Tessono) mesuré une semaine après l’imposture ou opération PTB avec un modéré ou un baguage sévères respectivement. (D, E et F) Les mêmes mesures de sept semaines après les procédures et le développement du RV échec12. Données présentées comme moyenne ± SEM. unidirectionnel ANOVA analyse post-hoc de Bonferroni. ** p < 0,01, *** p < 0,001, et *** imposture de vs p < 0,0001 PTB et modérée PTB PTB vs sévère. S’il vous plaît cliquez ici pour visionner une version agrandie de cette figure.
Figure 3 : effets de l’intervention PTB évalués par échocardiographie. Vue de chambre représentant quatre (A) A et (B) mesures d’intégrale de temps de vélocité (VTI) dans le tronc pulmonaire (du haut) et l’excursion systolique de plan annulaire tricuspide (Tessono) (panneau inférieur) à un rat de simulacre exploité. (C et D) des images similaires pour un rat PTB soumis à modérée des bandes. Toutes les images sont sept semaines après une opération fictive ou des bandes. S’il vous plaît cliquez ici pour visionner une version agrandie de cette figure.
Figure 4 : imagerie par résonance magnétique des rats PTB. Cardiaque du résonance magnétique (IRM) de la PTB et sham exploité des rats. (A) quatre représentatifs chambre images (du haut) et axe court (panneau inférieur) des rats sham (à gauche) et le PTB rat avec un degré modéré de l’échec de RV (à droite). Chez le rat de la PTB, les hautes pressions RV causé bombé (astérisque bleu) cloison. (B), le PTB procédure induite par RV dilatation évidente par une augmentation en volume télédiastolique RV (EDV) et volume systolique (ESV) de fin RV. (C), RV fraction d’éjection (Fe) a diminué de12. Les données présentées comme moyenne ± SEM. ANOVA à avec post hoc analyse de Bonferroni. * p < 0,05, ** p < 0,01, et *** imposture de vs p < 0,0001 PTB et modérée PTB PTB vs sévère. S’il vous plaît cliquez ici pour visionner une version agrandie de cette figure.
Figure 5 : données anatomiques et histologiques. Hypertrophie RV mesurée en RV (A) divisé par le poids de RV LV et septum et (B) divisé par la longueur du tibia de rats avec une légère hypertrophie RV, échec du RV modérée et sévère échec de RV sept semaines après l’intervention de la PTB. (C) des images représentatives de coupes histologiques colorées avec hematoxyline eosine pour mesure du cardiomyocyte croisent transversale et (D) picrosirius rouge analysés sous une lumière polarisée pour fibrose des rats sham (à gauche) et des rats de la PTB souffrant d’insuffisance modérée de RV (à droite). Eun foie sain (à gauche) et le foie décoloré avec congestion (à droite) d’un rat PTB avec sévère RV échec12,13. Données présentées comme moyenne ± SEM. unidirectionnel ANOVA analyse post-hoc de Bonferroni. ** p < 0,01 et *** imposture de vs p < 0,0001 PTB, PTB modérées vs PTB doux et modéré PTB PTB vs sévère. S’il vous plaît cliquez ici pour visionner une version agrandie de cette figure.
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Discussion
Nous décrivons une méthode accessible et hautement reproductible du tronc pulmonaire des bandes à l’aide d’un applicateur de clips ligature mis à jour le compresser un clip de titane autour du tronc pulmonaire. En ajustant l’applicateur pour compresser l’agrafe à différents diamètres intérieurs, des phénotypes distincts d’hypertrophie de RV et d’échec peuvent être induites notamment insuffisance sévère de RV avec extra-cardiaque manifestation de décompensation.
Bien que simple, le protocole contient quelques étapes cruciales. Ce qui est important, les rats ne peut pas être trop gros lorsqu’ils subissent la procédure de la PTB. Dans notre expérience, sevrés de rat Wistar pesant 100 – 120 g sont adaptés pour la procédure. Chez les plus grands, application d’un cerclage sévère peut conduire à aiguë RV échec et la mort. Autres études6,7,8,9,10,16 ont principalement utilisé des rats plus grands (160 – 260 g), mais aussi des diamètres de leurs bandes respectives (1.27 – 1,65 mm).
L’application de bandes de moins gravité peut-être aussi expliquer que la relative modeste augmente signalés par d’autres groupes de pression de RV. Des bandes avec un G 18 aiguille (1,27 mm) conduit à pressions systoliques RV de l’ordre de 70 à 90 mmHg6,7,8,9. Dans une étude6, ce n’était pas suffisant pour causer la fibrose RV ou réduire le débit cardiaque. Nous rapportons ici, pressions de RV d’environ 90 mmHg pour un cerclage modérée et 110 mmHg pour un cerclage sévère. Avec un cerclage sévère, nous avons aussi pu créer un phénotype de l’échec de RV décompensée avec extra-cardiaque manifestations dont la congestion et l’ascite hépatique12. Tronc pulmonaire des bandes par ligature à l’aide d’une aiguille de 20G (0,902 mm) causé une fibrose du foie, noix de muscade-like congestion hépatique et ascite en Sprague Dawley rats16 malgré la constriction relativement douce par rapport à notre étude. Cela peut s’expliquer par des souches de rats différents répondre différemment pour le cerclage. Il y a des différences importantes en ce qui concerne le métabolisme17, tonus adrénergique et fréquence cardiaque18 souches de rats. Même au sein de la même souche de rat, diverses caractéristiques dont le taux de croissance peuvent varier avec différents fournisseurs19. Il doit toujours être tenu compte. Pour la souche de rat spécifique utilisée, il est donc essentiel que les études pilotes bien conçus sont effectuées afin de déterminer le diamètre des bandes et la durée de suivi nécessaires pour le phénotype d’échec RV souhaité à développer. Le modèle de clip est potentiellement utilisable chez les nouveau-nés de rat par opposition à la ligature de la technique utilisée précédemment20, mais nous n’avons pas d’expérience avec cela et les mêmes considérations comme mentionné ci-dessus s’applique avant d’entreprendre une étude.
Le modèle de la PTB a quelques limitations. Tout d’abord, l’occlusion très proximale de la pince autour du tronc pulmonaire représente les conditions d’une sténose pulmonaire, soit CTEPH de plus que le rétrécissement distal des petites artères pulmonaires vus en HAP. L’adaptation de la RV à la postcharge accrue peut varier selon l’emplacement de la obstruction(s)21. Deuxièmement, l’application de la pince pendant la chirurgie cause une augmentation très soudaine postcharge RV différente de l’augmentation progressive dans la résistance vasculaire pulmonaire en HAP. La procédure est, cependant, réalisée en sevrés de rat (100 à 120 g) donnant lieu à une postcharge RV progressivement accru par rapport au poids de corps avec la croissance des animaux. Au cours de la période de sept semaines après la chirurgie, le poids corporel des rats augmente environ quatre fois et donc relative postcharge RV augmente proportionnellement induisant un développement de maladie évolutive6.
En utilisant un applicateur de clips ligature modifiés et un clip de titane pour le baguage du tronc pulmonaire, nous étions capables d’induire l’échec de RV. La méthode a plusieurs avantages dont la reproductibilité élevée et la possibilité de créer des gravités différentes maladies de l’hypertrophie bénigne de RV à l’échec de RV décompensée en ajustant le diamètre du clip des bandes. Changer le diamètre de 0,1 mm a donné lieu à des phénotypes de défaillance RV distincts allant de modéré et compensé la défaillance de RV à l’échec de RV sévère et décompensée démontrant l’exactitude de ce tronc pulmonaire baguage méthode.
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Disclosures
Les auteurs n’ont rien à divulguer
Acknowledgments
Ce travail a été soutenu par le Conseil danois pour la recherche indépendante [11e108410], le danois Heart Foundation [12e04-R90-A3852 et 12e04-R90-A3907] et The Novo Nordisk Foundation [NNF16OC0023244].
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 17 G IV Venflon Cannula | Becton Dickinson, US | 393228 | Distal 2 mm of the needle have been cut off |
| 1 mL syringe + 26 G needle | Becton Dickinson, US | 303172 & 303800 | |
| 4-0 absorbable multifilament suture | Covidien, US | GL-46-MG | Polysorb, violet, 5x18" |
| 4-0 multifilament ligature | Covidien, US | LL-221 | Polysorb, violet, 98" |
| Buprenorphine | Indivior UK Limited | Local procurement, Temgesic 0.3 mg/mL | |
| Carprofene | ScanVet, DK | 27693 | Norodyl 50 mg/mL |
| Chlorhexidine | Faaborg Pharma, DK | Local procurement | |
| Contractor | Aesculap, Germany | BV010R | Blunt, self retaining, 70 mm |
| Ear Hooklet | Lawton, Germany | 66-0261 | Small, 14 cm, tip modified to an angle of 85° |
| Eye gel | Decra, UK | Lubrithal, Local procurement | |
| Forceps, Delicate Tissue | Lawton, Germany | 09-0020 | |
| Forceps, Dissecting | Lawton, Germany | 09-0013 | 1 regular, 1 with tip modified to an angle of 100° |
| Gas Anesthesia System | Penlon Limited, UK | SD0217SL | Sigma Delta Vaporizer |
| Hair trimmer | Oster | 76998-320-051 | |
| Horizon Open Ligating Clip Applier | Teleflex, US | 137085 | Modified with adjustable stop mechanism |
| Horizon Titanium Clips | Teleflex, US | 001200 | Small |
| Induction chamber | N/A | ||
| Iris Scissor | Lawton, Germany | 05-1450 | |
| Iris Scissor | Aesculap, Germany | BC060R | |
| Mechanical ventilator | Ugo Basile, Italy | 7025 | |
| Microscissor | Lawton, Germany | 63-1406 | |
| Microscope | Carl Zeiss, Germany | 303294-9903 | |
| Needle Holder | Lawton, Germany | 08-0011 | TITEGRIP |
| Pean | Lawton, Germany | 06-0100 | Halsted-Mosquito, straight |
| Pro-Optha | Lohmann & Rauscher, Germany | 16515 | Tampon |
| Saline 9 mg/mL | Fresenius Kabi, DK | 209319 | |
| Sevoflurane | AbbVie, US | Sevorane, Local procurement | |
| Surgical hook | Lawton, Germany | 51-0665 | Cushing, 19 cm, tip modified to an angle of 90° |
| Surgical Tape | 3M, US | 1530-0 | Micropore |
| Temperature Controller | CMA Microdialysis; Sweden | 8003760 | CMA 450 |
| Weighing machine | VWR, US | ||
| Wistar rat weanlings | Janvier Labs, France | RjHan:WI, 100-120 g |
References
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