Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Bioengineering

Medulla Spinalis Yaralanmalarında sonra yatak yarası fare modeli

Published: March 9, 2019 doi: 10.3791/58188

Summary

Burada, Medulla Spinalis Yaralanmalarında (SCI) bir fare modelinde klinik cilt basınç ülserleri (irin) ikna etmek için basit bir yöntem açıklanmaktadır. Bu model ekran için önceden klinik çalışmalarda farklı therapeutics SCI hastaların şifa irin için kullanılabilir.

Abstract

Basınç ülserleri (irin) travmatik spinal kord yaralanması (SCI) komplikasyonlar zayıflatıcı yaygındır ve kemik çikintilari çevresinde Yumuşak dokularda meydana eğilimindedir. Orada ancak, az kontrollü deneysel ayarları hayvan modellerinde bağlamında Cilt yara iyileşmesi SCI etkisi hakkında bilinmektedir. Bu çalışmada, irin tam SCI bağlamında bir basit, non-invaziv, tekrarlanabilir ve klinik fare modeli sunulur. Yetişkin erkek fareler (Balb/c, 10 haftalık) depilated ve traş. Sonrası epilasyon (24 saat), fareler tabi laminektomi tam omurilik transeksiyon (T9-T10 omurga) tarafından takip için. Hemen sonra bir cilt kapağı fareler arkasında kaldırdı ve sonraki 12 h, böylece bir PU aşağıdaki gün içinde geliştirilen iskemik bir alan yaratmak için yerinde düzenlenen iki adet manyetik diskler arasında gözükeceksin. Yaralı alanları doku ödemi ve epidermal kaybolması 3 gün sonrası mıknatıs uygulama tarafından gösterdi. İrin kendiliğinden gelişmiş ve iyileşti. Şifa olduğunu, ancak, SCI farelerde daha yavaş karşılaştırıldığında yara bilm tersine, seviyenin oluşturulduğu sırada SCI fare denetlemek için şifa fark yara bilm seviyesinden oluşturulduğu sırada bilim ve denetim SCI fareler arasında görüldü Bu model deri PU geliştirme ve bu yaraların sarılmasına yardımcı olabilir tedavi yaklaşımları test olarak SCI sonra de şifa dinamiklerini incelemek için potansiyel olarak yararlı bir araçtır.

Introduction

Basınç ülserleri (irin) travmatik SCI1büyük ikincil komplikasyonlar vardır. İrin cilt ve/veya genellikle kemik çikintilari üzerinde iken hasta oturuyor veya1yatarken vücut ağırlığı konsantre nerede oluşur temel alınan dokular için yerelleştirilmiş yaralanmalar vardır. Cilt, yağ ve kas yerelleştirilmiş iskemi, doku iltihabı, mekanik hasar ve nekroz2,3gelişimine yol açar bu sabit basınç maruz kalır.

İrin gelişimi basınç ve kayma, yükleme süresi, cilt nem ve sıcaklık, yaralanma uzun ömürlü ve genel cilt hijyen büyüklüğü de dahil olmak üzere çeşitli yerel faktörlerden etkilenir. Genel fiziksel durumu, kemik ve kas dokusu morfoloji ve gücü4, hastanın yaşı, hematolojik önlemler, cinsiyet ve medeni durum, eğitim de dahil olmak üzere bile sosyo-ekonomik faktörler gibi bir rol sistemik etken de vardır, ve gelir4,5.

Önleme ve tedavi irin birikimi SCI hastalarda önemli sorunlar kalır. SCI hastaların irin vakaların, ~ 30-%40 60-%85, büyük olasılıkla zayıf skar dokusu ve koruyucu hissi1eksikliği nedeniyle re-oluşumu oranında ile geliştirmek. Böylece, irin genellikle SCI hastalar yeniden yatış için açar ve genel olarak sağlık sistemi5,6,7,8,9 önemli mali yük (%80 daha fazla SCI vs sadece) poz , 10.

Bizim bilgi en iyi şekilde, orada hiçbir çalışma yapılmıştır uygun hayvan modellerin eksikliği nedeniyle SCI PU iyileşme süreci üzerindeki etkisini araştırmak için kontrollü deneysel ayarlarında. Burada, PU deri bir tekrarlanabilir ve klinik fare modeli kullanılmıştır. Bu model PU başlangıçlı ve sonraki şifa dinamiklerini incelemek için aynı zamanda PU önlemek veya PU bilm bağlamında şifa geliştirmek için potansiyel tedavi yaklaşımları test etmek için kullanılabilir

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Rutgers Üniversitesi Kurumsal hayvan bakım ve kullanım Komitesi tarafından onaylanmış bir protokol uyarınca tüm işleme hayvan ve cerrahi girişimler yapıldı. Fareler standart diyet ve su ad libitum beslenen edildi.

1. cerrahi ve cerrahi olmayan aletler hazırlanması

  1. Bir otoklav içinde cerrahi ve cerrahi olmayan aletleri sterilize.
  2. Cerrahi ameliyat masasına % 70 etanol ile temiz ve sıcak bir Isıtma yastığı ile 37 ° c
  3. Isıtma yastığını ameliyat masasında yer ve steril cerrahi perdeler ile kapağı.
    Not: Tüm yaşam yordamlar, "No Touch" teknik burada kısırlık korumak için kullanılır.

2. hayvan ve T9-T10 Spinal laminektomi gerçekleştirme hazırlanması

  1. Yetişkin (Balb/c) 10-hafta-yaşlı erkek fareler temin etmek. Anestezi %5 isoflurane ile başlayan bir oksijen tüpü kullanarak her hayvan teşvik ve yordamları kalanı için sedasyon korumak için 2-%3 azaltın.
  2. Tam anestezi bir kuyruk/pençe indüklenen çimdik duyusuna stimülasyon yanıt alabilme tarafından onaylayın.
  3. Saç patolojisi (kafa kuyruk) bir elektrik kesme makinesi ile tıraş ve geri kalan saç kaldırmak için depilatory krem (3 dk) uygulayın. Son olarak, su/ıslak fırçalayın çalışan patolojisi yıkama ve hayvanlar için onların kafes dönmek.
    Not: Bu cilt ve cilt yaralama esnasında kimyasal kirlenme ek tahrişi önlemek gereklidir
  4. Ertesi gün, cerrahi işlem sırasında kurumasını gözleri korumak ve sonra Cilt 3 alternatif hazırlıklar betadin fırçalayın ve % 70 etanol ile fırçalayın kornealar oftalmik merhem uygulamak.
  5. Neşterle, arkadaki T8-T12 vertebra düzeyinde orta çizgi boyunca bir cilt kesi (~1.0-1.5 cm) gerçekleştirin.
    Not: Vertebra düzeyi T13 omur11,12' ye karşılık yüzen kaburga konumunu kullanarak omur T13 üzerinden geri sayım tarafından tanımlanır.
  6. Cilt altı yağ dokusu paraspinal kas erişin ve sonra onları yavaş yavaş spinöz süreçleri ve lamina her iki tarafta ortaya çıkarmak için incelemek için temizleyin.
    Not: Bu yordam çok dikkatli bir şekilde aşırı kanama veya spinal kord, bu noktada herhangi bir yaralanma önlemek için ne.
  7. Bir laminektomi omurilik (T9-T10 omurga) hafifçe spinal lamina microdissecting forseps kullanarak soyulması tarafından ortaya çıkarmak için gerçekleştirin.
    Not: Böylece aşırı omurilik yaralanma oluşturulmasını kolaylaştırmak için maruz laminektomi gerçekleştirin. Kontrol grubunda sadece laminektomi gerçekleştirilir.

3. performans T9-T10 tam Medulla Spinalis Yaralanmalarında

  1. Forseps kullanarak, omurga T8 ve Asansör yukarı omurilik eğriliği abartmayı güvenli.
  2. İyi makas kullanırken, omurilik sonuna kadar tam transeksiyon sağlamak için vertebral kanalın yere T9 ve T10 omur arasında bölüm.
  3. Cerrahi mikroskop altında tam transeksiyon gözlemleyerek sonra Subkutan yag bir parça omurilik cerrahi site kapatma önce ek koruma sağlamak üzere laminektomi site üzerinden uygulanır.
  4. Son olarak, yarayı kapatın ve dikiş paravertebral kaslar, yüzeysel fasya, sürekli dikiş kullanarak ve deri dikiş klipleri12kullanarak kapatın.
  5. Post-SCI, bağırsak hareketi izlemek ertesi gün; Ancak, idrar kesesi tarafından el ile mesane tahliye yönetin.
    Not: Basso fare ölçek (BMS) gün 2 hindlimb fonksiyonel iyileşme sonrası-SCI ilerlemesini izlemek için kullanılan ve sonra haftalık, bkz: ek resim 111,12,13.

4. cilt basınç Ülseri tam SCI sonra indüksiyon

  1. SCI ameliyattan hemen sonra arkadaki Hayvan betadin ve % 70 alkol ile fırçalayın.
  2. Sakrum, çok küçük bir hacim (10 µL) eşit uzaklıkta yer ~0.5-1.0 cm apart, mıknatıs uygulama sitesi etrafında elips 25 G iğne kullanarak %0.125 bupivacaine çözüm yakınındaki dorsal cilt SCI sitenin altındaki bir PU için enjekte.
    Not: SCI site yukarıda bir PU için servikal bölgenin yakınındaki dorsal cilt enjekte.
  3. Yavaşça fare arkasındaki deri kat Asansör ve 2 manyetik disk arası (5 × 12 mm çap, 2.4 g, 3800 G Manyetik kuvvet) sandviç (şekil 1). 11 , 12
  4. Sonra hemen yerleştirildiği mıknatıs uygulaması, tek kafesleri için dönüş hayvanlar üzerine tam bilinç olana bir Isıtma yastığı (şekil 1) ele geçirdi.
  5. 12 h mıknatıs uygulamasının sonra hafifçe isoflurane hayvanla anestezi ve mıknatıslar kaldırın. PU ilk görünümünü kaydetmek için yara siteleri, bir fotoğraf çekmek (gün 0 saat üzerine gelin). Kurutma veya kontaminasyonu önlemek için şeffaf soyunma film (3 M) yarayla kapsar.

5. ameliyat sonrası hayvan bakımı, ötenazi ve Histoloji dokusu toplamalarında

  1. Ameliyattan hemen sonra 1 mL % 0,9 serum subkutan hidrasyon için hayvan enjekte.
  2. Subkutan buprenorfin-SR (1 mg/kg) hemen analjezi için enjekte et.
  3. Subkutan hayvan günlük Meloksikam (1 mg/kg) ve sülfadiyazin (3-7 gün için 50 mg/kg) ve iki kez günlük el ile mesane tahliye enjekte et.
  4. Tek kafeslerde hayvanlar koyun ve erişilebilir gıda sağlamak ve ad libitumsu. Fare tam SCI ile onların ön ayakları kullanılarak yürüyün ve gıda ve su herhangi bir sorun olmadan bir yaklaşım.
  5. Cerrahi klipleri SCI ameliyat sonrası 7 gün kaldırın.
  6. Bilim ve cilt yaralı sonra istediğiniz zaman noktalarda, hayvanlar ötenazi14travma yönergeler doğrultusunda CO2 inhalasyon (3-5 dk), tarafından ötenazi.
  7. Yaralı deri örnekleri toplamak, 24 h için % 10 formalin düzeltin ve sonra 4 ° C'de % 70 etanol kesit kadar saklayın.
  8. Doku işlemek için parafin içinde katıştırmak ve ince bir microtome bölümlerde (5 mikron) oluşturur. Hematoksilen ve Eozin (H & E) doku Morfoloji (şekil 3) görselleştirmek için leke. İmmünhistokimya çalışmaları (şekil 4) için uygun antikorlar Ki67 için kullanma bölümlerine leke (yayılması), CD31 (angiogenez) ve alfa-düz kas aktin (α-SMA) Kumar vd.12 ' açıklandığı gibi
    Not: Görüntü analiz yazılımı görüntü özellikleri12ölçmek için kullanılabilir.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Bu iletişim kuralı bir PU ayarı tam bilm kısa bir süre içinde oluşturur ( şekil 1' de gösterildiği gibi), tüm fare ile veya olmadan tam SCI mıknatıslar çok iyi, hangi orijinal konumlarını tam 12 h (rakamlar 1 c, 1 d, 1f, 1 h için kaldı tolere ). Bütün fareler normal doku (şekil 1e, 1 g, 1I) bir köprü ile ayrılmış iki dairesel yarası geliştirdi. İlk yaralama yanıt farelerde SCI (şekil 1e) olmadan veya bilim bilim sitesi (şekil 1 g) altında veya üstünde SCI sitesi (şekil 1I) benzer.

Şekil 2 bir önemli ölçüde yavaş geçiş de olsa SCI farelerde SCI seviyesinin altında oluşturulan yaralarda ile epidermis ortadan kalkması gün 7, gündüzleri 3 mesaj mıknatıs kaldırma ve onun yeniden ortaya çıkma tarafından gösteriyor.

Basınç yaralar daha önce yayımlanmış ölçüt12başı olarak sınıflandırılır. Şekil 3 ve şekil 4 SCI şifa özellikleri tasvir ve SCI fare kontrolü. Daha yavaş şifa, büyük yara alan, ince epidermis ve dermis ve daha düşük yoğunluklu Proliferasyona hücre SCI grup sergilenen (Ki67+ hücreleri), kan damarları (CD31+ hücreleri) ve alfa-düz kas aktin (α-SMA+) Cilt yaralarda 11 , 12.

Cilt yaraları şekil 5, gösterildiği gibi SCI, seviyesinden herhangi bir değişiklik şifa zamanında epidermal ve dermal oluşturulduğunda kalınlıkları veya yara alan SCI kontrollere göre ne zaman görülmüş.

Figure 1
Resim 1 : Basınç oluşturmak için deneysel işlemin yaralar içinde sigara-SCI (n = 3) ve tamamlamak-SCI fareler (n = 3). Sonra 1 hafta habituation laboratuvarda fareler traş ve (bir) depilated. Şematik manyetik disk (M) yerleştirme (b,) Stadler vd15değiştirildi. Normal bir farenin ve onun aktivite kurtarma içinde belgili tanımlık kafes (d, c) anestezi sonrası cilt patolojisi üzerinde manyetik diskler yerleşimi. SCI farelerde diskler (h) bilim sitesi veya (f) yerleştirilebilir. Mıknatıs kaynaklı cilt yaralanma 12 h 2 yaralar sigara-SCI (e) ve (g, ben) SCI fareler bir bozulmamış deri Bridge'de ayrılmış gösterir M uygulamasının hemen sonra görünür alanıdır. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız. 

Figure 2
Resim 2 : Cilt yara epidermal yaranın genişliği ve Histoloji (H & E leke). 3. gün ve gün 7 M uygulamadan sonra fareler bir dizi feda sigara-SCI (Ctrl + M) ve erken etkileri M indüklenen iskemi ve reperfüzyon çalışmaya tamamlamak-SCI (SCI + M) gruplar. Oklar nerede epitel astar incelir ve kaybolur bulunan epidermal yara kenarları gösterir. Ölçek çubuğu 1 mm. olarak ölçülen her grupta Epidermal yaranın genişliği = (n = 3, her zaman bir noktada) alt paneli bar diyagramda temsil edilir. İstatistiksel anlamlılık Öğrenci t-testi ile belirlenir. * p < 0,05 ve ** p < 0,01. Veri ± SEM (ortalama, standart hata) demek gibi sunulmaktadır. Bu rakam, günlük Neurotrauma, 35, 6, 815-824, Mary Ann Liebert, Inc, New Rochelle, NY12yayınlandı (2018), izni ile değiştirildi. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.

Figure 3
Şekil 3 : Tam SCI M indüklenen PU geliştirme ve şifa etkisi. (bir) temsilcisi görüntülerini sigara-SCI (Ctrl + M) ile tamamlamak-SCI (SCI + M) fareler PU indüksiyon 21 gün süre sonra cilt yaraları. Ölçek çubuğu = yara kapatma kısmını bir fonksiyonu olarak gösterilen 1 cm yara. (b) Quantified resimleri. (c, d) İyileşmiş yara yara alan sigara-SCI ve SCI fareler gösterilen temsilcisi görüntüler. (e) Quantified yara SCI fareler karşı bilim alanında. (f, g) (H & E boyama) iyileşmiş yara derinin epidermis (E, çift ok), gösterilen temsilcisi Histoloji dermis (D, büyük Çift Kişilik oklar) ve yağ Katmanı (F). Ölçek çubuğu 100 µm. (h) epidermal ve dermal kalınlıkları iyileşmiş yaralar miktar zaman yara kapatma (21 gün boyunca sigara-SCI ve SCI fareler için 35 gün) =. Veri mean±SEM. istatistiksel anlamlılık ardından post-hoc Fisher'in LSD testi ve Öğrenci t-Testi ANOVA tarafından belirlenen sunulmaktadır. * p < 0,05, ** p < 0,01, ve *** p < 0,001. Bu rakam Neurotrauma dergisi, 35, 6, 815-824, Mary Ann Liebert, Inc, New Rochelle, NY12yayınlandı (2018), izni ile yayımlanmaktadır. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.

Figure 4
Şekil 4 : İfade Ki67, CD31 ve cilt ülserleri sigara-SCI ve SCI fareler bir-SMA. Yara doku yara kapatma, yani gün 21 (kontrol + M) ve 35 (SCI + M) post-PU indüksiyon sonra hasat edildi. 5 µm kalınlığında kesitler temsilcisi görüntülerini anti-Ki67, anti-CD31 veya anti-α-SMA ile lekeli ve 40 x amacı ile görüntülenir. Sigara-(a, d, g) SCI ve SCI (b, e, h) fareler temsilcisi resimleri göster Ki67 dağıtımını+, CD31+ve α-SMA+ (kahverengi leke, Kırmızı oklar lekeli bazı alanlarda gelin) . Görüntü analizi tarafından elde gibi ifade % pozitif alan gruplar arasında (c, f, ben) karşılaştırılır. Alan üç 40 ortalama alanları (iki yara kenarları üzerinden) ve bir yara Merkezi'nden bölüm (2/fare, her grupta 3 fareler) başına x. Ortalama ± SEM istatistiksel önemi bir öğrenci t-testi tarafından belirlenen veri sunulmaktadır. Bu rakam Neurotrauma dergisi, 35, 6, 815-824, Mary Ann Liebert, Inc, New Rochelle, NY12yayınlandı (2018), izni ile yayımlanmaktadır. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.

Figure 5
Şekil 5 : Geliştirme ve ülsere SCI site yukarıda şifa SCI etkisi. Ülser sigara-(Ctrl + M) SCI ve SCI (SCI + M) fareler gözlem dönemine (bir) temsilcisi görüntüler. Ölçek çubuğu 1 cm =. Günde 21 yara alan daireler tarafından temsil edilir (a) ve sigara-SCI ve SCI fareler (b) değerlerin ortalaması. Yara kapatma kısmını zaman (c) bir fonksiyonu gösterilen quantified yara görüntüler. Temsilcisi Histoloji epidermis (E, küçük çift ok) ve DermIS (D, büyük çift ok) gösterilen iyileşmiş deri Ülseri. Ölçek çubuğu 100 µm (d) =. Epidermal ve dermal kalınlıkları iyileşmiş deri Ülseri miktar yara kapatma zaman (21 gün). Veri posthoc Fisher'ın LSD testi veya Öğrenci t-Testi ANOVA tarafından belirlenen SEM istatistiksel önemi takip ortalama ± sunulmaktadır. NS-istatistiksel olarak olmayan-önemli. Bu şekil değiştiren ve günlük Neurotrauma, 35, 6, 815-824, Mary Ann Liebert, Inc, New Rochelle, NY12yayınlandı (2018), izni ile yayımlanmaktadır. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız. 

Ek Resim 1: Motor işlevi SCI farelerde değerlendirildi BMS puan sonrası yaralanma günde 2 ve sonra haftalık kullanarak. BMS skor 2 gün ve hafta 5 0,058 ±0.058 idi (Medyan 0-Hayır hareket, n = 17) ve 0.35±0.12 (n = 17, medyan-0). Veri mean±SEM temsil edilir. Bu şekil değiştiren ve günlük Neurotrauma, 35, 6, 815-824, Mary Ann Liebert, Inc, New Rochelle, NY12yayınlandı (2018), izni ile yayımlanmaktadır. Bu rakam indirmek için buraya tıklayınız.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Bu çalışmada protokolünü irin yara iyileşmesi üzerinde SCI etkisini değerlendirmek için bir roman deneysel modeli açıklar. Cilt irin iki 12 mm çapında disk mıknatıs SCI sayfanın altında veya üstünde ikisinden biri koymak bir dorsal cilt kat 12 h uygulanması ile indüklenen. Veriler SCI Cilt yara farelerde iyileşmesi aşağı yavaşlatır göstermektedir. Önemlisi, bu gözlemler özellikle cilt yaraları SCI innervasyon seviyesinin altında SCI seviyesinden yapılan yaralar olarak yapılmış ve böylece bu innervated kaldı, büyük ölçüde SCI fareler karşılaştırıldığında onların şifa desen etkilenmemiş idi.

Burada açıklanan PU Protokolü nerede zayıf mıknatıslar (1000 Gauss) 12 h mıknatıs uygulamasının mıknatıs15olmadan 12 h ayrılmış üç devir uygulanmış olan farelerde, kullanılan daha önce yayımlanmış bir yöntemini temel alır. Başlangıçta, bir, iki ve üç 12 h döngüleri mıknatıs uygulama kullanarak karşılaştırıldığında. Tekrarlanan uygulamalar kullanarak bir dezavantaj bu özel bakım cilt kat üzerinden mıknatıs bağlantısını kesin ve tam olarak aynı konumda yeniden uygulamak için alınması gereken her zaman var. Tek bir uygulama bu nedenle çok daha kolaydır ve bir PU fare dorsal cilt katlayin oluşturmak için yeterli idi. Aksi takdirde, bu yöntem does değil istemek karmaşık bir aygıt, hayvan hareketlerinin zarar değil ve çok tekrarlanabilir. Farklı mıknatıs, şekiller ve ya güçlü kullanarak veya irin farklı anatomik yerlerde oluşturulmaya çalışılırken çalışmalar protokol reoptimize gerekebilir. Tüm Cilt yara iyileşme çalışmaları olduğu gibi düzgün uygulamak ve düzenli olarak kurutma ve yara yatağın kontaminasyonu önlemek için kapsayan şeffaf film değiştirmek önemlidir.

Bu modelde PU formasyonunun mekanizması önemli ölçüde kapiller ve venöz perfüzyon basıncı deride aşması bekleniyor ve daha önce de lezyonlarının ikna etmek için belgelenmiş oldu iki mıknatıslar arasındaki basınç güç güvenir daha büyük hayvanlar16. Bir tek 12 h döngüsü kullanılarak oluşturulan aşamaları için ı ve II standart ölçütleri15göre karşılık gelen derin dermis, içine uzanan yaralanma vardı bir deri Ülseri. Bu teknik bir sınırlama bir aşama III-IV PU almak mümkün değildi olduğunu. Bu nedenle, kas ve kemik PU geliştirme ve geçerli modelimiz için önemli değişiklik yapmadan şifa katılımı çalışmada bir değil. Ayrıca, biz üretmek irin kendiliğinden iyileşmesi ve bu nedenle, sadakatle bir kronik PU olarak insan hastalarda görülen temsil etmemektedir. İlginçtir, ancak, yöntem bir PU benzer gibi yaygın olarak kullanılan dynamics 1 cm x 1 cm tam-kalınlık excisional cilt yaraları ile kapalı başlangıç benzer boyutu sonuçlandı. Excisional modelinde tümüyle kaldırılır iken PU indüksiyon yöntemi temel panniculus carnosus yedek. Böylece, panniculus carnosus oluşan, fare ve diğer kemirgen, öncelikle fibroblastlar ve myofibroblasts uygun DermIS ile yara site çevreleyen aracılı kasılması ile yara kapatma sürecinde önemli bir rol oynamıyor görünür küçük yara oluşumu17.

PU indüksiyon, SCI altında veya üstünde site FK sitesine erişmek için kullanılan cilt kesi ile müdahale değil Bu nedenle, yöntemi aşağıda veya yara iyileşmesi üzerinde SCI sistemik etkileri vs yerel ayırt edebilir çalışmalar sağlar SCI seviyesinin üzerinde kolayca uygulanabilir. SCI hayvanlar PU indüksiyon sonra kilo almaya devam ederken, bilim hayvanların büyüme bodur olduğunu. PU SCI seviyesinden oluştururken bu derin sistemik değişiklik rağmen yara iyileşmesi etkilenen değil. Bu model bu nedenle, yara iyileşmesinde yerel innervasyon rolünün daha iyi anlamak için kullanılabilir. SCI ilgili bütün çalışmaları, özel bakım ve el ile mesane boşaltma gerektirir, post-SCI fareler için izleme sağlamak önemli olduğu gibi bağırsak koşulları ve profilaktik antibiyotik tedavisi11,12 izleme .

SCI hastaların önemli ölçüde bile en iyi hastane bakım ve eğitim ile meydan vardır ve cilt irin vermek için ABD sağlık sisteminin önemli maliyeti. Bu modeli yan yana değerlendirilmesi SCI etkisi cilt PU geliştirme verir ve şifa, hangi sağlamak a peron için test SCI hastalarda iyileşme PU yardımcı olabilir çeşitli tedavi stratejileri.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Yazarlar ifşa gerek yok.

Acknowledgments

Bu eser kısmen Omurilik Araştırma (CSCR15IRG010), ABD Savunma Bakanlığı (SC160029) ve Yale bölümü, ameliyat Ohse araştırma hibe programı New Jersey Komisyonu tarafından desteklenmiştir. Sean o'Leary incelemelerinden Keck Merkezi işbirlikçi Neuroscience, Rutgers teknik destek için teşekkür ediyoruz.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Magnets Master Magnetcs, Inc., Castle Rock, CO CD14C 3800 G Magnetic force
Mice standard diet PMI Nutrition International, Brentwood, MO Standard Food Pellet
Isoflurane HENRY SCHEIN Animal Health  SKU 029405
ImageJ NIH, Bethesda, MD Image Analysis Software
BETADINE Surgical Scrub HENRY SCHEIN Animal Health 
Ophthalmic Ointment  HENRY SCHEIN Animal Health  SKU 008897
NAIR-Hair Remover Lotion Church & Dwight Co., Inc. Princeton, NJ
ELOXIJECT (meloxicam) Injection HENRY SCHEIN Animal Health  SKU 049755 5 mg/mL, 10 mL
Cefazolin Sodium HENRY SCHEIN Animal Health  SKU 054846 1 g, 10 mL bottle
Buprenorphine-SR  ZooPharm, Windsor, CO - -
0.9% Sodium Chloride Injection USP BRAUN, Irvine, CA S8004-5384
10% Neutral Buffered Formalin  VWR, Radnor, PA 16004-130
BALB/C Male Mouse Charles River Lab., Wilmington, MA 28
Sterile Cotton Tipped Applicator Puritan, Guilford, ME SKU#: 25-806
Michel Suture Clips Fine Science Tools (USA) Inc., Foster City, CA 12040-01
Surgical Suture, U.S.P. Henry Schein Animal Health  101-2636

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Rappl, L. M. Physiological changes in tissues denervated by spinal cord injury tissues and possible effects on wound healing. International Wound Journal. 5 (3), 435-444 (2008).
  2. Salcido, R., Popescu, A., Ahn, C. Animal models in pressure ulcer research. The Journal of Spinal Cord Medicine. 30 (2), 107-116 (2007).
  3. Mak, A. F., Zhang, M., Tam, E. W. Biomechanics of pressure ulcer in body tissues interacting with external forces during locomotion. Annual Review of Biomedical Engineering. 12, 29-53 (2010).
  4. National Pressure Ulcer Advisory Panel. Prevention and Treatment of Pressure Ulcers: Clinical Practice Guideline. , Cambridge Media. Osborne Park, Western Australia. (2014).
  5. Marin, J., Nixon, J., Gorecki, C. A systematic review of risk factors for the development and recurrence of pressure ulcers in people with spinal cord injuries. Spinal Cord. 51 (7), 522-527 (2013).
  6. Krause, J. S. Skin sores after spinal cord injury: relationship to life adjustment. Spinal Cord. 36 (1), 51-56 (1998).
  7. Redelings, M. D., Lee, N. E., Sorvillo, F. Pressure ulcers: more lethal than we thought? Advances in Skin & Wound. 18 (7), 367-372 (2005).
  8. Kruger, E. A., Pires, M., Ngann, Y., Sterling, M., Rubayi, S. Comprehensive management of pressure ulcers in spinal cord injury: current concept and future trends. The Journal of Spinal Cord Medicine. 36 (6), 572-585 (2013).
  9. Lala, D., Dumont, F. S., Leblond, J., Houghton, P. E., Noreau, L. Impact of pressure ulcers on individuals living with a spinal cord injury. Archives of Physical Medicine and Rehabilitation. 95 (15), 2312-2319 (2014).
  10. Li, C., DiPiro, N. D., Krause, J. A latent structural equation model of risk behaviors and pressure ulcer outcomes among people with spinal cord injury. Spinal Cord. 55 (6), 553-558 (2017).
  11. Kumar, S., Yarmush, M. L., Berthiaume, F. Impact of complete spinal cord injury on neovascularization and tissue granulation in mouse model of skin pressure ulcers. Journal of Neurotrauma. 34 (13), A72-A73 (2017).
  12. Kumar, S., Yarmush, M. L., Dash, B. C., Hsia, H. C., Berthiaume, F. Impact of complete spinal cord injury on healing of skin ulcers in mouse models. Journal of Neurotrauma. 35 (6), 815-824 (2018).
  13. Basso, D. M., Fisher, L. C., Anderson, A. J., Jakeman, L. B., McTigue, D. M., Popovich, P. G. Basso Mouse Scale for locomotion detects differences in recovery after spinal cord injury in five common mouse strains. Journal of Neurotrauma. 23 (5), 635-659 (2006).
  14. Leary, S., et al. AVMA Guidelines for the Euthanasia of Animals. , American Veterinary Medical Association. Schaumburg, Illinois, USA. (2013).
  15. Stadler, I., Zhang, R. Y., Oskoui, P., Whittaker, M. S., Lanzafame, R. J. Development of a simple, noninvasive, clinically relevant model of pressure ulcers in the mouse. Journal of Investigative Surgery. 17 (4), 221-227 (2004).
  16. Peirce, S. M., Skalak, T. C., Rodeheaver, G. T. Ischemia-reperfusion injury in chronic pressure ulcer formation: a skin model in the rat. Wound Repair and Regeneration. 8 (1), 68-76 (2000).
  17. Wong, V. W., Sorkin, M., Glotzbach, J. P., Longaker, M. T., Gurtner, G. C. Surgical approaches to create murine models of human wound healing. Journal of Biomedicine and Biotechnology. 2011, 969618-969625 (2011).

Tags

Biyomühendislik sayı: 145 Medulla Spinalis Yaralanmalarında basınç ülserleri mıknatıslar ülser aşamaları ülser sınıflandırma nükleer silahların yayılmasına karşı geçiş
Medulla Spinalis Yaralanmalarında sonra yatak yarası fare modeli
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Kumar, S., Tan, Y., Yarmush, M. L.,More

Kumar, S., Tan, Y., Yarmush, M. L., Dash, B. C., Hsia, H. C., Berthiaume, F. Mouse Model of Pressure Ulcers After Spinal Cord Injury. J. Vis. Exp. (145), e58188, doi:10.3791/58188 (2019).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter