Summary
Hier beschreiben wir eine einfache Methode, um klinisch relevante Haut Dekubitus (PUs) induzieren in einem Mausmodell der Rückenmarksverletzung ("SCI"). Dieses Modell kann in präklinischen Studien als Bildschirm für verschiedene Therapeutika für heilende Eiter im SCI Patienten verwendet werden.
Abstract
Dekubitus (PUs) sind häufig schwächenden Komplikationen von traumatischer Querschnittlähmung (SCI) und neigen dazu, in weiche Gewebe um knöcherne Protuberanzen auftreten. Es ist allerdings wenig über die Auswirkungen des SCI auf Hautwunden heilen im Kontext von Tiermodellen in kontrollierten experimentellen Einstellungen bekannt. In dieser Studie wird eine einfache, nicht-invasive, reproduzierbare und klinisch relevante Mausmodell der Eiter im Zusammenhang mit der kompletten SCI vorgestellt. Erwachsene männlichen Mäusen (Balb/c, 10 Wochen alt) waren rasiert und Epilation. Post-Epilation (24 h), Mäuse Laminektomie gefolgt von kompletten Rückenmark Durchtrennung (T9-T10-Wirbel) ausgesetzt waren. Unmittelbar nach war eine Hautfalte an der Rückseite der Mäuse aufgehoben und eingeklemmt zwischen zwei magnetischen Scheiben, die an der Stelle für die nächsten 12 h, wodurch es einen ischämischen Bereich, der in den folgenden Tagen zu einem PU entwickelt. Die verwundeten Bereiche zeigte Gewebe Ödem und epidermalen verschwinden von Tag 3 Post-Magnet-Anwendung. Eiter spontan entwickelt und geheilt. Heilung war, jedoch langsamer in den SCI-Mäusen im Vergleich um-SCI Mäuse steuern, wenn die Wunde unter dem Niveau des Sci umgekehrt erstellt wurde, galt keinen Unterschied bei der Heilung zwischen SCI und Kontrolle-SCI-Mäusen Erstellungsdatum die Wunde über dem Niveau des Sci. Dieses Modell ist ein potenziell nützliche Tool, studieren die Dynamik der Haut PU Entwicklung und Heilung nach SCI sowie therapeutische Ansätze zu erproben, die helfen können, solche Wunden zu heilen.
Introduction
Dekubitus (PUs) sind die wichtigsten sekundären Komplikationen der traumatischen SCI1. Eiter sind lokalisierte Verletzungen der Haut bzw. darunter liegende Gewebe, die in der Regel über knöchernen Protuberanzen wo ist Körpergewicht konzentriert auftreten, während der Patient sitzen oder liegen1. Haut, Fett und Muskeln sind diese konstanten Druck ausgesetzt, die zur Entwicklung der lokalisierte Ischämie, Entzündung der Gewebe, mechanische Beschädigungen und Nekrose2,3führt.
Die Entwicklung von Eiter ist durch mehrere lokale Faktoren, einschließlich des Umfangs der Druck und Scherung, laden, Dauer, Hautfeuchtigkeit und Temperatur, Verletzungen Langlebigkeit und allgemeine Hauthygiene betroffen. Auch gibt es systemische Faktoren, die eine Rolle, wie allgemeine Kondition, Knochen und Muskel Gewebe Morphologie und Stärke4, Alter des Patienten, hämatologischen Maßnahmen, Geschlecht und auch sozio-ökonomische Faktoren wie Familienstand, Bildung, und Einkommen4,5.
Vorbeugung und Behandlung von Eiter bleiben erhebliche Herausforderungen bei SCI Patienten. SCI-Patienten entwickeln sich Eiter in ~ 30-40 % der Fälle mit einem Wiederauftreten von 60-85 %, möglicherweise aufgrund schwacher Narbengewebe und schützende Empfindung1. So Eiter führt oft zu erneuten Krankenhausaufenthalt SCI Patienten und insgesamt stellen eine beträchtliche finanzielle Belastung (80 % vs. SCI nur) auf das Gesundheitssystem5,6,7,8,9 , 10.
Nach bestem Wissen und gewissen gab es keine Studien in kontrollierten experimentellen Einstellungen, um die Auswirkungen der SCI auf den Heilungsprozess PU wegen des Mangels an geeigneten Tiermodellen untersucht. Hier wird eine reproduzierbare und klinisch relevante Mausmodell der PU in der Haut beschrieben. Dieses Modell kann verwendet werden, um die Dynamik der PU-Beginn und anschließende Heilung zu studieren sowie mögliche therapeutische Ansätze zur Vermeidung PU oder PU im Rahmen des Sci Heilung verbessern zu testen
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Protocol
Nach einem Protokoll durch die Rutgers University institutionelle Animal Care and Use Committee genehmigt wurden alle Umgang mit Tier und chirurgische Eingriffe durchgeführt. Mäuse wurden Standardkost und Wasser ad libitum gefüttert.
1. Vorbereitung der chirurgische und nicht-chirurgische Instrumente
- Sterilisieren Sie die chirurgische und nicht-chirurgische Instrumente in einem Autoklaven.
- Reinigen Sie die chirurgische OP-Tisch mit 70 % Ethanol und ein Heizkissen auf 37 ° c warm
- Legen Sie das Heizkissen auf dem Operationstisch und bedecken Sie es mit sterilen OP-Tüchern.
Hinweis: Bei allen überleben Verfahren wird "No Touch" Technik hier verwendet, um Sterilität zu pflegen.
2. Vorbereitung der Tiere und die Durchführung der T9-T10 spinale Laminektomie
- Erwachsener (Balb/c) 10 Wochen alte männliche Mäuse zu beschaffen. Anästhesie in jedes Tier mit einem Inhalator Anfang mit 5 % Isofluran zu induzieren, und dann 2 bis 3 % Sedierung für den Rest der Verfahren zu verringern.
- Bestätigen Sie komplette Anästhesie durch keine Reaktion auf eine Heck/Pfote Prise induzierte Nozizeption Stimulation zu entlocken.
- Rasieren Sie die Haare über der Dorsum (Leiter zum Heck) mit einer elektrischen Haarschneidemaschine, und wenden Sie dann die Enthaarungscreme (3 min) um die verbleibenden Haare zu entfernen. Schließlich waschen Sie den Handrücken mit fließendem Wasser/nass Scheuern und Rückkehr der Tiere in ihren Käfigen.
Hinweis: Dies ist notwendig, um weitere Reizungen der Haut und chemische Kontamination zum Zeitpunkt der Verwundung der Haut zu vermeiden - Wenden Sie am nächsten Tag an, ophthalmologische Salbe auf die Hornhaut zu schützen die Augen vor dem Austrocknen während des chirurgischen Eingriffs und dann reiben Sie die Haut mit 3 alternative Präparate von Betadine Scrub mit 70 % ethanol
- Führen Sie mit einem Skalpell einen Hautschnitt (~1.0-1.5 cm) entlang der Mittellinie auf dem Rücken auf der Ebene der T8-T12 Wirbel.
Hinweis: Die Höhe der Wirbel wird durch zurück zählen die Wirbel von T13 mit den Speicherort der schwimmende Rippen, die T13 Wirbel11,12entsprechen, identifiziert. - Deaktivieren Sie das subkutane Fettgewebe um Zugang zu den paraspinalen Muskeln und dann zerlegen sie langsam um die Dornfortsätze und Schichten auf beiden Seiten sichtbar.
Hinweis: Tun Sie dieses Verfahren sehr sorgfältig, um übermäßige Blutungen oder Verletzungen des Rückenmarks, an dieser Stelle zu vermeiden. - Führen Sie eine Laminektomie um das Rückenmark (T9-T10-Wirbel) verfügbar machen, indem der spinalen Lamina mit Microdissecting Pinzette vorsichtig abziehen.
Hinweis: Führen Sie die Laminektomie, so dass ein Übermaß an das Rückenmark ausgesetzt ist, um die Erstellung der Verletzung zu erleichtern. In der Kontrollgruppe wird nur die Laminektomie durchgeführt.
3. Durchführung der T9-T10 komplette Querschnittlähmung
- Mit Pinzette, sichern Sie die Wirbelsäule beim T8 und Auftrieb die Krümmung der Wirbelsäule zu übertreiben.
- Mit einer feinen Schere, Abschnitt des Rückenmarks zwischen T9 und T10 Wirbel bis zum Boden des vertebralen Kanals, um vollständige Durchtrennung zu gewährleisten.
- Wenden Sie nachdem er beobachtet die vollständige Durchtrennung unter einem Operationsmikroskop ein Stück des subkutanen Fettgewebes über die Laminektomie-Website, um zusätzlichen Schutz des Rückenmarks vor Schließung der Operationsstelle bieten.
- Schließlich schließen Sie die Wunde und Naht der paravertebralen Muskeln, oberflächliche Faszie, mit kontinuierlicher Naht und schließen Sie dann die Haut mit Naht Clips12.
- Post-SCI, beobachten den Stuhlgang am nächsten Tag; Dennoch gelingt es der Harnblase durch manuelle Blase Evakuierung.
Hinweis: Der Basso Maus Skala (BMS) kann verwendet werden zur Überwachung des Fortschritts der Megalosauridae funktionelle Wiederherstellung Post-SCI am 2. Tag und dann wöchentlich, siehe ergänzende Abbildung111,12,13.
(4) Induktion von Haut Dekubitus nach komplette SCI
- Unmittelbar nach der Operation SCI Schrubben Sie den Rücken des Tieres mit Betadine und 70 % Alkohol.
- Spritzen Sie für eine PU unter der SCI Website in die Rückenhaut nahe dem Kreuzbein, einem sehr kleinen Volumen (10 µL) 0,125 % Bupivacain Lösung mit einer 25 G Nadel äquidistant Orte ~0.5-1.0 cm voneinander entfernt, in einer Ellipse um die Applikationsstelle Magnet.
Hinweis: Injizieren Sie für ein PU oberhalb der SCI Stelle die dorsale Haut in der Nähe der zervikalen Region. - Heben Sie eine Hautfalte an der Rückseite der Maus und zwischen 2 magnetische Scheiben (5 × 12 mm Durchmesser und 2,4 g, 3800 G Magnetkraft) sandwich (Abbildung 1). 11 , 12
- Unmittelbar nach der Anwendung, Rückkehr Tiere in einzelne Käfige aufgesetzt gewann ein Heizkissen bis vollständige Bewusstsein ist (Abbildung 1).
- Nach 12 h von Magnet-Anwendung leicht Tier mit Isofluran zu betäuben und die Magneten zu entfernen. Fotografieren Sie die Wunde Websites, um das ursprüngliche Aussehen des PU aufzunehmen (Tag 0 Zeit Punkt). Decken Sie die Wunde mit transparente Verband Film (3M), Trocknung oder Kontamination zu vermeiden.
5. postoperative Pflege der Tiere, Euthanasie und Gewebe-Kollektion für Histologie
- Unmittelbar nach der Operation Spritzen Sie das Tier mit 1 mL 0,9 % Kochsalzlösung subkutan für Trinksystem.
- Subkutan injizieren Sie Buprenorphin-SR (1 mg/kg) sofort für Analgesie.
- Spritzen Sie subkutan Tier täglich Meloxicam (1 mg/kg), und Cefazolin (50 mg/kg für 3-7 Tage) und zweimal tägliche manuelle Blase Evakuierung.
- Setzen Sie Tiere in einzelne Käfige und zugängliche Nahrung und Wasser Ad Libitum. Mäuse mit kompletten SCI einen Spaziergang mit ihrer Vorderbeine und nähern sich die Nahrung und Wasser ohne Schwierigkeiten.
- Entfernen Sie 7 Tage postoperativ SCI chirurgische Clips.
- Zu den gewünschten Zeitpunkten nach SCI und verletzte Haut einschläfern Sie Tiere durch CO2 Inhalation (3-5 min), gemäß den Leitlinien der AVMA zur Euthanasie14.
- Verwundeten Hautproben zu sammeln, in 10 % Formalin für 24 h zu beheben und dann bis zur Aufteilung in 70 % igem Ethanol bei 4 ° C lagern.
- Um Gewebe zu verarbeiten, in Paraffin eingebettet und Dünnschliffen (5 µm) auf ein Mikrotom zu generieren. Färben Sie mit Hämatoxylin und Eosin (H & E) Gewebe Morphologie (Abbildung 3) zu visualisieren. Für immunhistochemische Studien (Abbildung 4), färben Abschnitte mit entsprechenden Antikörpern für Ki67 (Proliferation), CD31 (Angiogenese) und Alpha-Glattmuskel Aktin (α-SMA) beschriebenen Kumar Et Al.12
Hinweis: Bildanalyse-Software kann verwendet werden, Bild Funktionen12zu quantifizieren.
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Representative Results
Dieses Protokoll schafft eine PU in der Umgebung des kompletten Sci kurz (wie in Abbildung 1dargestellt), alle Mäuse mit oder ohne komplette SCI die Magnete sehr gut vertragen, die blieben in ihrer ursprünglichen Position für die volle 12 h (Abb. 1 c, 1D, 1f, 1 h ). Die Mäuse entwickelten zwei kreisrunde Wunden, die durch eine Brücke des normalen Gewebes (Abb. 1e, 1 g, 1i) getrennt. Der erste verletzte Antwort war ähnlich bei Mäusen ohne SCI (Abbildung 1e) oder mit SCI unter SCI-Seite (Abbildung 1 g) oder über die SCI-Seite (Abbildung 1i).
Abbildung 2 zeigt das Verschwinden der Epidermis von Tag 3 der Magnet Entfernung und seine Wiederkehr von Tag 7, allerdings mit einer deutlich langsamer Migration in Wunden unter dem Niveau des SCI SCI Mäusen erstellt.
Die Druck-Wunden wurden gemäß zuvor veröffentlichten Kriterien12bewertet. Abb. 3 und Abb. 4 zeigen die heilenden Eigenschaften im SCI und Steuern-SCI Mäuse. Der SCI ausgestellt und langsamere Heilung, größere Narbenbereich, dünner Epidermis und Dermis und geringere Dichte der proliferierenden Zellen (Ki67+ Zellen), Blutgefäße (CD31+ Zellen), und Alpha-Glattmuskel Aktin (α-SMA+) in die Hautwunden 11 , 12.
Wenn die Hautwunden über dem Niveau des SCI, wie in Abbildung 5dargestellt keine Änderung in der Heilungszeit, epidermale und dermale entstanden war dicken oder Narbenbereich gesehen, im Vergleich zu nicht-SCI-Steuerelemente.
Abbildung 1 : Experimentelle Verfahren zum Erstellen von Druck Wunden in nicht-SCI (n = 3) und komplette SCI Mäuse (n = 3). Nach 1 Woche Gewöhnung im Labor Mäuse wurden rasiert und Epilation (ein). Schematische Darstellung der Magnetscheiben (M) Platzierung (b, modifiziert von Stadler Et Al.15). Platzierung der magnetischen Disks auf Haut Dorsum eine normale Maus und seine Tätigkeit nach der Wiederherstellung aus der Narkose in den Käfig (d, c). In SCI Mäuse Scheiben oder oben (h) der SCI Website können unter (f) platziert werden. Der Bereich von Magnet-induzierte Hautverletzungen ist sofort nach 12 h M-Anwendung, die 2 Wunden, getrennt durch eine intakte Haut-Brücke in den nicht-SCI (e) und SCI Mäuse (g, i) zeigt sichtbar. Bitte klicken Sie hier für eine größere Version dieser Figur.
Abbildung 2 : Haut Wunde Histologie (H & E stain) und epidermalen Wunde Breite. Am Tag 3 und Tag 7 nach M Anwendung eine Reihe von Mäusen in den nicht-SCI (Strg + M) und komplette SCI (SCI + M) Gruppen zur Untersuchung der frühen Auswirkungen M-induzierten Ischämie und dann Reperfusion geopfert wurden. Pfeile zeigen die epidermalen Wundränder, wo die epitheliale Auskleidung lichtet sich und verschwindet. Maßstabsleiste = 1 mm. epidermalen Wunde Breite gemessen in jeder Gruppe (n = 3 zu jedem Zeitpunkt) wird in das untere Panel-Bar-Diagramm dargestellt. Statistische Signifikanz von Student t-Test bestimmt. * p < 0,05 und ** p < 0,01. Daten werden dargestellt als ± SEM (Standardfehler des Mittelwerts) bedeuten. Diese Zahl wurde mit freundlicher Genehmigung von der Zeitschrift Neurotrauma, 35, 6, 815-824, (2018), herausgegeben von Mary Ann Liebert, Inc., New Rochelle, New York12geändert. Bitte klicken Sie hier für eine größere Version dieser Figur.
Abbildung 3 : Auswirkungen der komplette SCI auf M-induzierte PU Entwicklung und Heilung. (einem) Vertreter Bilder von Hautwunden bei nicht-SCI (Strg + M) und komplett-SCI (SCI + M) Mäusen nach PU Induktion im Zeitraum von 21 Tagen. Maßstabsleiste = 1 cm. (b) Quantified Wunde Bilder zeigen den Anteil der Wundverschluss als Funktion der Zeit. (c, d) Repräsentative Bilder von geheilten Wunden der Narbenbereich in nicht-SCI und SCI Mäuse zeigen. (e) Quantified Narbenbereich in nicht-SCI versus SCI Mäuse. (f, g) Repräsentative Histologie geheilte Wunde Haut (H & E Färbung) Epidermis (E, Doppelpfeile), Lederhaut (D, große Doppelpfeile) und Fettschicht (F). Maßstabsleiste = 100 µm. (h) Quantifizierung der epidermalen und dermalen dicken von geheilten Wunden zur Zeit der Wundverschluss (21 Tage für nicht-SCI und 35 Tage für SCI Mäuse). Daten werden als Mean±SEM. statistischen Signifikanz von ANOVA gefolgt von Post-hoc-Fisher LSD-Test und der Student t-Test bestimmt dargestellt. * p < 0,05, ** p < 0,01 und *** p < 0,001. Diese Zahl wurde mit freundlicher Genehmigung von der Zeitschrift Neurotrauma, 35, 6, 815-824, (2018), herausgegeben von Mary Ann Liebert, Inc., New Rochelle, New York12nachgedruckt. Bitte klicken Sie hier für eine größere Version dieser Figur.
Abbildung 4 : Ausdruck von Ki67, CD31 und einen SMA in Hautgeschwüre-SCI und SCI Mäuse. Wunde Gewebe wurden nach Wundverschluss, nämlich am Tage 21 (Control + M) und 35 (SCI + M) Post-PU Induktion geerntet. Repräsentative Bilder von 5 µm dicke Abschnitte mit Anti-Ki67, Anti-CD31 oder Anti-α-SMA gebeizt und mit einem 40 X Objektiv visualisiert. Repräsentative Bilder von nicht-SCI (ein, d, g) und SCI (b, e, h) Mäuse zeigen die Verteilung der Ki67+, CD31+und α-SMA+ (braune Flecken, rote Pfeile zeigen auf gefärbten Teilbereichen) . % Positiven Bereich der Ausdruck als durch die Bildanalyse gewonnen wird zwischen den Gruppen (c, f, i) verglichen. Das Gebiet wurde im Durchschnitt von drei 40 x Felder (zwei von Wundrändern) und eine Wunde Center pro Abschnitt (2/Maus, 3 Mäuse in jeder Gruppe). Daten werden dargestellt als Mittelwert ± SEM statistische Bedeutung von Studenten t-Test ermittelt wurde. Diese Zahl wurde mit freundlicher Genehmigung von der Zeitschrift Neurotrauma, 35, 6, 815-824, (2018), herausgegeben von Mary Ann Liebert, Inc., New Rochelle, New York12nachgedruckt. Bitte klicken Sie hier für eine größere Version dieser Figur.
Abbildung 5 : Auswirkungen der SCI auf Entwicklung und Heilung von Geschwüren über der SCI Website. Repräsentative Bilder von Geschwüren in den nicht-SCI (Strg + M) und Mäuse SCI (SCI + M) über den Beobachtungszeitraum (ein). Maßstabsleiste = 1 cm. Der Narbenbereich am Tag 21 wird durch Kreise dargestellt (a) und Werte wurden bei nicht-SCI und SCI Mäusen (b) gemittelt. Quantifizierte Wunde Bilder zeigen den Anteil der Wundverschluss als Funktion der Zeit (c). Repräsentative Histologie der Geheilte Hautgeschwüre zeigen (E, kleinen Doppelpfeil) Epidermis und Dermis (D, große Doppelpfeil). Maßstabsleiste = 100 µm (d). Quantifizierung der epidermalen und dermalen dicken von geheilten Hautgeschwüre (Tag 21) Wunde Schließung Zeit. Daten sind als Mittelwert ± SEM statistische Bedeutung von ANOVA bestimmt gefolgt von Posthoc Fisher LSD-Test oder Student t-Test dargestellt. NS-statistisch nicht signifikant. Diese Zahl wurde modifiziert und Nachdruck mit freundlicher Genehmigung von der Zeitschrift Neurotrauma, 35, 6, 815-824, (2018), herausgegeben von Mary Ann Liebert, Inc., New Rochelle, New York12. Bitte klicken Sie hier für eine größere Version dieser Figur.
Zusätzliche Abbildung 1: Motor-Funktion bei SCI Mäusen wurde anhand der BMS-Score an posttraumatischen Tag 2 und dann wöchentliche. Der BMS-Punktzahl am 2. Tag und Woche 5 wurden 0.058 ±0.058 (Median 0-keine Bewegung, n = 17) und 0.35±0.12 (n = 17, Median-0). Daten werden als Mean±SEM dargestellt. Diese Zahl wurde modifiziert und Nachdruck mit freundlicher Genehmigung von der Zeitschrift Neurotrauma, 35, 6, 815-824, (2018), herausgegeben von Mary Ann Liebert, Inc., New Rochelle, New York12. Klicken Sie bitte hier, um diese Zahl zu downloaden.
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Discussion
Das Protokoll in dieser Studie beschreibt ein neuartige experimentelles Modell der Eiter Bewertung die Auswirkungen von SCI auf die Wundheilung. Die Haut Eiter waren veranlasst, über eine 12 h-Applikation von zwei 12 mm Durchmesser Scheibenmagnete auf eine dorsale Hautfalte, entweder oberhalb oder unterhalb der SCI-Website einstellen. Daten zeigen, dass SCI verlangsamt sich die Wundheilung der Haut bei Mäusen. Wichtig ist, diese Beobachtungen wurden speziell in Hautwunden unterhalb Innervation des SCI, als Wunden ü SCI, gemacht und damit, die innervierten blieb, waren weitgehend unberührt in ihre heilende Muster im Vergleich zu nicht-SCI-Mäuse.
Die hierin beschriebene PU-Protokoll basiert auf eine zuvor veröffentlichte Methode bei Mäusen, wo schwächere Magneten (1000 Gauss) wurden in drei Zyklen von 12 h-Magnet-Anwendung durch 12 h ohne Magnet15getrennt angewendet. Zunächst haben wir verglichen mit einem, zwei und drei 12 h-Zyklen von Magnet-Anwendung. Ein Nachteil der Verwendung von wiederholten Anwendungen ist, dass jedes Mal, wenn besondere Vorsicht muss es genau an der gleichen Stelle erneut zu trennen den Magneten aus der Hautfalte. Eine einzelne Anwendung ist daher viel einfacher und reichte aus, um eine PU in der Maus dorsalen Hautfalte zu schaffen. Andernfalls diese Methode erfordert keine komplizierte Vorrichtung, Tierbewegungen nicht beeinträchtigt und ist sehr reproduzierbar. Studien verwenden verschiedene Magnet-Größen, Formen und stärken, oder der Versuch, Eiter in verschiedenen anatomischen Standorten erstellen möglicherweise müssen Sie das Protokoll reoptimize. Wie bei allen Hautwunden heilende Studien ist es wichtig, richtig anzuwenden und die Klarsichtfolie abdecken zur Vermeidung von Trocknung und Kontamination des Wundbettes in regelmäßigen Abständen ändern.
Der Mechanismus der PU-Bildung in diesem Modell stützt sich auf die Druckkraft zwischen zwei Magneten, die Kapillaren und venösen Perfusion Druck in die Haut deutlich übertreffen soll, und zuvor gut um Läsionen in induzieren dokumentiert größer Tiere-16. Mit einem einzigen 12 h Zyklus erstellt eine Haut-Geschwür, die hatte Verletzungen erstreckt sich tief in die Dermis, die Stufen I und II nach einheitlichen Kriterien15entspricht. Eine Einschränkung dieser Technik ist, dass wir keine Phase III-IV PU bekommen konnten. Daher könnte man nicht die Beteiligung der Muskeln und Knochen in PU Entwicklung und Heilung ohne bedeutende Änderungen an unserer aktuellen Modell studieren. Darüber hinaus der Eiter generieren wir heilen spontan und daher nicht treu repräsentieren eine chronische PU wie bei menschlichen Patienten gesehen werden könnte. Interessanterweise führten jedoch die Methode eine PU die anfängliche ähnlicher Größe, die mit ähnlicher Dynamik so häufig verwendet 1 x 1 cm voll-dicke excisional Hautwunden geschlossen. Die PU-Induktionsmethode erspart die zugrunde liegenden Panniculus Carnosus, während es im excisional Modell vollständig entfernt wird. So scheint es, dass das Panniculus Carnosus keine wichtige Rolle dabei Schließung Wunde, die bei Mäusen und anderen Nagetieren, vor allem durch Kontraktion vermittelt durch Fibroblasten und Myofibroblasts in tragfähige Lederhaut, die Umgebung der Wunde spielt tritt mit kleine Narbe Bildung17.
Ortsbild des PU-Induktion, oberhalb oder unterhalb SCI, beeinträchtigt nicht die Hautinzision verwendet, Zugriff auf die Website des Sci. Die Methode kann daher ohne weiteres angewendet werden, unter oder über dem Niveau des SCI, die Studien ermöglicht, die die lokale vs. systemische Wirkungen des SCI auf die Wundheilung differenzieren können. Während nicht-SCI Tiere Gewichtszunahme nach PU-Induktion weiterhin, ist das Wachstum der SCI Tiere verkümmert. Trotz dieser tiefgreifenden Systemwechsel wurde Wundheilung nicht beeinträchtigt, wenn die PU ü SCI erstellt wurde. Dieses Modell, daher lässt sich besser zu verstehen, die Rolle der lokalen Innervation bei der Wundheilung. Wie in allen Studien, bei denen SCI, es wichtig ist, damit die besondere Pflege und Überwachung für die Post-SCI-Mäuse, die erfordern manuelle Entleerung der Blase, Überwachung der Bedingungen der Darm und prophylaktische Behandlung mit Antibiotika11,12 .
SCI-Patienten sind im Wesentlichen auch mit der besten Krankenhauspflege und Erziehung gefordert, und Haut Eiter vermitteln erhebliche Kosten für das US-Gesundheitssystem. Dieses Modell erlaubt es Side-by-Side-Bewertung der Auswirkung von SCI auf Haut PU Entwicklung und Heilung, die bietet eine Plattform zum testen verschiedene therapeutische Strategien, die PU Heilung bei SCI Patienten helfen können.
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Disclosures
Die Autoren haben nichts preisgeben.
Acknowledgments
Diese Arbeit wurde teilweise durch die New-Jersey Kommission auf Spinal Cord Research (CSCR15IRG010), das US Department of Defense (SC160029) und der Yale Department of Operation Ohse Research Grant-Programm unterstützt. Wir danken Sean o ' Leary von w.m. Keck Center for Collaborative Neuroscience, Rutgers für technische Hilfe.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Magnets | Master Magnetcs, Inc., Castle Rock, CO | CD14C | 3800 G Magnetic force |
| Mice standard diet | PMI Nutrition International, Brentwood, MO | Standard Food Pellet | |
| Isoflurane | HENRY SCHEIN Animal Health | SKU 029405 | |
| ImageJ | NIH, Bethesda, MD | Image Analysis Software | |
| BETADINE Surgical Scrub | HENRY SCHEIN Animal Health | ||
| Ophthalmic Ointment | HENRY SCHEIN Animal Health | SKU 008897 | |
| NAIR-Hair Remover Lotion | Church & Dwight Co., Inc. Princeton, NJ | ||
| ELOXIJECT (meloxicam) Injection | HENRY SCHEIN Animal Health | SKU 049755 | 5 mg/mL, 10 mL |
| Cefazolin Sodium | HENRY SCHEIN Animal Health | SKU 054846 | 1 g, 10 mL bottle |
| Buprenorphine-SR | ZooPharm, Windsor, CO | - | - |
| 0.9% Sodium Chloride Injection USP | BRAUN, Irvine, CA | S8004-5384 | |
| 10% Neutral Buffered Formalin | VWR, Radnor, PA | 16004-130 | |
| BALB/C Male Mouse | Charles River Lab., Wilmington, MA | 28 | |
| Sterile Cotton Tipped Applicator | Puritan, Guilford, ME | SKU#: 25-806 | |
| Michel Suture Clips | Fine Science Tools (USA) Inc., Foster City, CA | 12040-01 | |
| Surgical Suture, U.S.P. | Henry Schein Animal Health | 101-2636 |
References
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