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Behavior

においの風洞媒介昆虫行動アッセイ

Published: November 30, 2018 doi: 10.3791/58385

Summary

臭気媒介昆虫の行動のアッセイのためここでは、建設と風洞の使用を述べる。風洞の設計により視覚刺激といくつかの方法、臭いの源のリリース。風洞実験は、行動的にアクティブな揮発性化学物質を識別するために重要なメソッドです。

Abstract

嗅覚は、最も重要な感覚のメカニズム、多くの昆虫が彼らの環境と対話するための風洞は昆虫化学生態学を研究するための優れたツールです。昆虫は、感覚の相互作用と高度な動作を三次元環境で点源を見つけることができます。この行動の定量化は、ペスト コントロール、意思決定支援のための新しいツールの開発に重要な要素です。機内のフィードバックのため層流空気流でご希望のフライト セクションと風洞ビジュアル キューや様々 な悪臭のアプリケーションのオプションを使用して、魅力的な識別可能性がありますその後複雑な行動を測定できますか、撥の悪臭、昆虫の飛行特性、visual 臭相互作用および誘引物質と環境で背景匂いとして残留臭気の相互作用。風洞は、臭気を研究する利点を介した研究室で昆虫行動のレパートリーを保持します。制御された設定で行動措置は、昆虫生理学とフィールド アプリケーション間のリンクを提供します。風洞実験では、柔軟なツールをする必要があり、簡単にセットアップおよびさまざまな研究の質問に合わせてハードウェアへの変更をサポートする必要があります。ここで説明する風洞セットアップの主な欠点は、フィールド アプリケーションの合成の揮発性のブレンドを開発するときに特別な注意を要するきれいな臭い背景です。

Introduction

風洞は昆虫情報化学物質に対する検査ができる昆虫化学生態学の研究で重要なツールです。制御された風の流れに臭気を解放することによって、ソースに向かって彼らの風上の飛行を研究することによってこれら刺激に対する昆虫の行動反応を直接監視できます。嗅覚は、多くの昆虫は、その生物環境1と対話する最も重要な感覚のメカニズムです。昆虫では、交尾の適したパートナーを見つける臭気手がかりを使用します。同様に、ホストのリソースから臭気花束を使用して、自分自身、または子孫のための食糧を見つけます。植物は、昆虫受粉効率を確保するための花の蜜と花粉の報酬との組み合わせで花のにおいをリリースします。これらのすべての揮発性の手がかりは環境に受動的拡散し、昆虫を識別し、個々 の関連性を解釈する必要があります。揮発性物質が環境にリリースされると、分子は、フィラメント、最終的に分割し、乱流と拡散の2によって希釈される前に長い距離風下、初期濃度を保持として風と共に移動します。昆虫は、揮発性のわずかな変化は信号し、ソースに向かって風上、彼らの動きを直接検出できます。昆虫を表示、魅力的な匂いに接触すると高速風上サージと飛行行動と3,4をプルーム臭気を再配置する損失の時に横に鋳造。昆虫の触角の触角の嗅覚神経の共局在の配置することができます行動反応の発症と驚くべき高解像度5とプルームの接触の損失を容易にして類似を区別する昆虫を有効にします。匂い分子が異なるソース6発します。視 anemotaxis と呼ばれる、飛行しながら視覚的なフィードバックは、風の方向のオブジェクトおよび相対変位2,7の基本です。昆虫の感覚相互作用と高度な動作の使用は、三次元環境で、点光源が検索できます。

昆虫誘引物質と忌避剤の同定は、いくつかの重要な応用の側面を持つことができます。多くの害虫の性フェロモン (種内信号) を合成し、交尾行動8を混乱させる空気中に放出できます。フェロモンと刺激 (種間の信号) 捕獲に使用できます、誘致、害虫状態の直接的な情報を与えるためにトラップを監視で殺します。防虫剤は、このような蚊9は、風洞の生物検定で学ぶことができます。これらのメソッドは、農家の管理および意思決定サポート システム統合された害虫の重要な部分を再生します。

種の匂いを介した行動のレパートリーを監視可能風洞生物検定は、交換または殺虫剤の使用の影響を軽減する害虫駆除のための潜在的な新しいツールを識別するために強力な方法です。

風洞の設計の背後にある理論的な推論は徹底的に説明10です。ここでは、風トンネル工事、臭気アプリケーションおよび風洞実験生物検定のプロトコルを決定するいくつかの実験に使用されている飛行行動について述べる。独 (Ås は、ノルウェー) 風洞 (図 1) は、傷が付きにくいポリカーボネートから構成されます。飛行アリーナは 67 センチ、幅 88 cm、長さ 200 cm です。飛行アリーナの前に 30 cm 長い追加ポリカーボネート] セクションがあります。風洞のこの部分は、悪臭のアプリケーションのユーティリティ セクションとして機能します。ポリカーボネートと接触する揮発性物質を得る場合住宅フライト アリーナで彼ら後に再リリースされた可能性があり、セッション間を汚染します。したがってユーティリティ セクションの両端に穴があいた金属グリッドがあります。どちらのグリッドは空気の流れを制限し、風上側にわずかな重圧を作成します。風下側に増加流でこの結果します。風上のグリッド使った穴あき金属板から 8 mm の穴がトンネルの断面間に均等に分散して 54% の開放面積を提供します。風下のグリッド 3 mm の穴があり、51% の開放面積。これは削減、乱気流、臭気によりフライト アリーナの長さを集中的に旅行を噴煙します。臭羽毛狭い円錐形の形をしているが、煙の使用によって視覚化することができます。フライトの階にアリーナ、プラスチックまたは紙の円 (直径 15 cm 5) から様々 なサイズの飛行中に昆虫の視覚的なフィードバックを与えるに配置されます。飛行アリーナとユーティリティ] セクションで風上側 25 で 50 cm のアクセス ドアがあります。飛行アリーナの風下の端と排気フィルター セクションの間昆虫処理のため 60 cm オープン エリアがあります。このアクセス エリアは、虫部屋に脱出を防ぐために 0.8 mm のメッシュ生地の両側に覆われています。

空気は、ファンによって最初のフィルターのハウジングに描画されます。24 高容量アクティブ カーボン フィルターにより精製がトンネルのリリース前に、空気はほこりフィルターを通過します。トンネルを終了する空気は、部屋に戻って解放される前に似たようなフィルター住宅を通じて渡されます。ヒューム フードを通して建物の外に排気する有益なことがあります。両方のフィルターのハウジングのファンは、同じフローで実行されます。両方のファンは連続調光スイッチと流量計を使用して異なる風速に調整されています。空気速度は試験動物種に依存です。30 cm s-1は多くの場合、良い出発点です。小さな昆虫、理想的な空気速度が低下する可能性があります、および強力なチラシ、対気速度高めに相対的な飛行距離を高めたりすることができます。

風洞実験室の温度、湿度および光強度制御は容易します。LED ストリップは、上記の拡散光源を作成する 3 mm 不透明 poly(methyl methacrylate) ウィンドウの背後にあるとフライト アリーナの後ろに配置されます。両方の光源は個別に制御できます。

臭気のアプリケーションは、いくつかの手段によって実現できます。一般的に、においは、フライト アリーナの風上エンドの中心に空気の流れに解放されます。手で、研究・質問に応じてリリース ポイントを公開または覆われてできます。金属メッシュとガラス シリンダー (直径 10 cm、長さ 12.5 cm) (2 × 2 mm のメッシュ サイズ) 風下側に視覚的に臭気発生源をブロックでき、同時に昆虫の着陸のプラットフォームとして機能します。多くの実験で、臭気源やリリース ポイントの近くに視覚的な信号を提示するため水平ガラス プラットフォームを使用できます。また、同時に、サイド ・ バイ ・ サイドにあり、選択の試金を容易にする 2 つのにおいをリリースする機会です。リリース ポイントは、20 cm 間隔で設置し、トンネルの途中から臭気の羽毛を重ねます。選択は、どの気流による昆虫は風上次識別できます。

風洞の設計は多数の揮発性のリリース方法を促進します。たとえば、特定の匂いは、作物植物11,12によって放出されるようにバック グラウンド臭の前に解放できます。また、異なる視覚刺激はテスト13,14をすることができます。実験のセットアップは各種と研究の質問に適応する必要があります。

植物の部分などのディスペンサーから合成の香り、自然のにおいのソースは、フライト アリーナに直接導入できます。ビジュアルから臭気を介した動作を分離するための臭いの元を覆うことができる、または外側からの木炭フィルター研究室空気供給を介して飛行アリーナに揮発性物質を運んだ。臭気発生源はガラス瓶に閉じ込められたと空気がテフロン管・ ガラス管を介して風洞に瓶を押し込まれています。リリース時点で対気速度は、アリーナで風速を一致させてください。

特定のブレンド比率で臭気を解放するには、噴霧器を使用できます。噴霧器は、円錐形の先端と 10 μ L 分-1で液体の流れを容易にするために挿入されたメガボアカラム超音波ノズルです。ノズルは広帯域超音波ジェネレーター 120 kHz で動作しています。シリンジ ポンプは、スプレー ノズルに臭気サンプルを進めています。フッ素化エチレン プロピレン (FEP) チューブ内径 0.12 mm は、1 mL の気密性の注射器とノズルに接続されています。エタノールで膨張し、空気を圧縮するチューブ アダプターは、内部容積のないタイトなフィッティングを促進します。ノズルの振動から生成されたエアロゾルの粒径は、周波数に依存、使用特定の溶媒に依存します。小さい水滴は蒸発し、揮発性物質として風洞に倒されます。他の噴霧器のデザインも存在し、ガラスの毛細管を駆動ピエゾを利用した安価なバージョン同様ソリューション15を提供します。

合成ミックスやヘッド スペース コレクションは、噴霧器で使用できます。サンプルは、必要な濃度に純粋なエタノールで希釈しました。揮発性のコレクションとコレクションの時刻に対応するサンプルを希釈ことができます。これは、リリース 3 h に相当する 10 μ L 分-1で噴霧器から 1800 μ L に 3 h 以上をサンプリング揮発性コレクションを薄めるべきことを意味します。

手動観測による直接または事後のビデオ解析による飛行行動の同定を行うことができます。指向のフライトは、ランダム フライトと区別すべき。介した臭気の動作は、次の特性によって認識できる: においの間でジグザグ飛行噴煙、内部では、プルームまっすぐ風上のフライトと噴煙との接触が失われた場合に戻るループします。魅力的なプルームが失われる、昆虫も増加する失われたプルーム3,4への再接続をアーチとジグザグを開始できます。この動作は、次の魅力的な臭い虫が乱流と風の方向をシフトに対処する必要があるフィールドの設定の基礎です。フライト パターンが均一でないと、昆虫の間で異なります。例として、ハエなど強力なチラシがある蛾より広い鋳造パターンを持つ高速の風上方向と長く相対的な飛行経路を容易にする風速を増やす必要があります。

昆虫の飛行を撮影もすることができます。単一のカメラと x y 座標16をプロットすることによって単純な飛行特性を記述できます。同期フレーム キャプチャで 2 台のカメラを使用して、外部ソフトウェア17を使用して 3 D フライトを再建することができます。飛行速度と距離、風の方向に対して飛行角度臭羽毛と飛行特性の詳細についての情報を提供する飛行経路を分析できます。カスタム及び商業用設備、自動フレーム単位で追跡を有効にすると利用可能なソフトウェアの両方があります。校正フレームを使用すると、現実の空間を参照する必要があり、広角のレンズに直線的なレンズの歪みを最小限に抑えるために使用します。エッジや風洞アリーナでコーナーなどの視覚的バック グラウンド ノイズを低減して背景の差別に昆虫を最大化するには、注意が必要です。赤外の光源、反射を使用して (e.g。、夜行性蚊から) モノクロ CCD カメラ17で撮影することができます。

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Protocol

1. ガラス管の準備

  1. ガラス管を準備 (e.g。、直径 2.8 cm、長さ 13 cm) プラスチック製のスナップ キャップの一方の端を閉じます。
  2. 頂いたガラス管に 10 の昆虫を分けるし、ゴムバンドを用いたガーゼで残りの端をカバーします。温度、光の条件と少なくとも 2 h 風洞実験室の湿度に適応する昆虫を許可します。
    注: 各管内の昆虫の数は種と研究の質問に依存します。

2. 臭気ソースの準備

  1. 噴霧器のプロトコル。
    1. 希薄化後のヘッド スペース コレクションまたは合成臭いのミックスで 1 mL 気密性注射器を入力します。
      注: 希釈ヘッド スペースまたは合成臭いのミックスの内容は昆虫種と研究の質問に依存します。一般に、使用濃度は、本格的な臭気発生源の自然解放率に当たらなければなりません。
    2. シリンジの先端にチューブ アダプターを使用して FEP 管接続、シリンジをシリンジ ポンプに挿入します。
    3. ・ シリンジ ポンプを起動します。
    4. 広帯域超音波発生器を起動します。
      注: 噴霧器からエアロゾルのリリースは、リリース ポイントの下から松明を指摘することによって確認できます。
    5. 管およびノズルの内部をきれいにする治療の間を最低 10 分 96% エタノール スプレーを実行します。すべての使用純粋なエタノール専用個別注射器洗浄。
    6. 使用後の注射器と 96% のエタノールとノズルの先端をきれい。
  2. 本格的な臭気ソースのプロトコル。
    1. 風洞や 2 L ヘッド スペース コレクション jar は、本格的な臭いの源を挿入します。
    2. 研究室の空気の流れにヘッド スペース コレクション jar を接続し、風洞にリリースします。
      注: 収集植物材料として可能な限り実験の開始に近いし、切り口を水で小さな瓶に挿入すると、萎れを防ぐため。量と植物材料の種類やその他の本格的な臭いの元は、昆虫種と研究の質問に依存します。
  3. 位置ホルダー 180 cm に insect(s) とガラス管風下臭気/ビジュアル ソースから 30 cm 地面から。キャップの端は風上ポイントする必要があります。

3. プロトコルの開始

  1. 2 台のカメラを使用して、2 つの異なるビューをキャプチャします。飛行アリーナ上カメラをマウントし、角度の異なる 2 つのビューをキャプチャします。
  2. キャップを開けます。
  3. タイマーを開始します。
    注意: 別の種が必要に対応、例えば別のタイム フレーム、4 〜 5 分11日以内にアップル フルーツ蛾 (Argyresthia conjugella) が grapewine 蛾 (Lobesia botrana) 対応するまで 20 分。18
  4. フライト パターンを観察し、飛行特性と風上方向に特別な注意を払います。定義済みの行動分類、例えばに従って飛行性能のスコアします。 長い距離 (ソースからの < 5 cm) (最低 20 cm)、短距離指向指向のフライト フライトを引き継ぐ、着陸。
    注: 撮影と 2 台のカメラを使用して 3 D トラッキング飛行特性に関するより詳細な情報を提供する使用できます。一般に、カメラは飛行アリーナ上に取付けられる、角度の異なる 2 つのビューをキャプチャします。
  5. 臭羽毛外、風トンネルの壁に着陸昆虫を収集し、ホルダーに戻って交換します。
    注: 昆虫風上フライトによる悪臭物質に応答し、置き換えることはできません 1 つのチャンスを与えることができます。
  6. 治療間にハードウェア上のガラスをきれいにするを変更します。
    注: 頻繁にコントロール治療は可能な汚染源の特定実行する必要があります。
  7. 実験後の凍結によってまたは CO2と昆虫を安楽死させます。
    注: 研究の質問に応じて女性卵開発のため得点したり翼やアンテナの状態を確認する検査を視覚的に。

4. クリーニング

  1. エタノールと水ですべての金属とガラスのハードウェアを洗浄し、乾燥するまで残します。
  2. 300 ° C、6 h、汚染物質を除去する、すべての金属とガラスのハードウェアを熱します。

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Representative Results

吻は一時的な幼虫成長基板19,20を表す動物の死骸から悪臭に強く応答します。自然のにおいのソースとして死んだマウスを使用して、我々 は生後 15 日の飛翔行動の詳細を調査、女性c. についての有無、においリリース ポイント13横に視覚刺激を交配します。自然な視覚を排除するために、上記ガラス瓶システムを使用されます。30 cm s-1吻表示以上 80% 離陸と指向の飛行挙動風トンネルの風下の端とトンネル (の風上の部分に制御され指向の動きと高度なそれらの 60% 以上の風速で図 2)。重要な指向の飛行挙動に及ぼす視覚的な手掛かりはありませんでした。ただし、吻 (離陸と方向づけられた飛行、着陸) 死体に卵を預ける機会を提供自然条件下での動作の完全な範囲を効率的に表示する視覚的添加は臭気をマークする必要します。ソース。視覚的な合図の使用 14% から 40% のソースで着陸が増大。大きい風洞実験13のこの単純な抽出昆虫によってリソースの場所で使用される感覚モダリティの完全なアカウントの必要性および行動に関する拡張情報可能性があります結果を強化するそれを示していて、その後各実験から抽出するより多くの知識を許可します。

生育ステージが異なる (葉、芽、花、莢) 風洞14でエンドウ豆の植物へ 5 月 7 日古い交配雌の風上方向を行ったエンドウ蛾が産卵のため適切な宿主の植物を見つけることを使用してどの揮発性キューを答える、.風速は 30 cm s-1、照度 1000 ルクス、20-22 ° C の温度、RH の 60-70%。風洞アリーナの風上エンドに直接生きている植物を配置し、対応するヘッド スペース抽出液による行動の反応を比較することで視覚および嗅覚情報の組み合わせを使用しました。また、10 antennaly アクティブなエンドウ豆の植物揮発性物質の合成ブレンドをテストしました。エンドウ蛾 (図 3) の行動の反応は、雌成虫の交尾がはるか (58%) の花と葉 (10%) やポッド ステージ (24%) でエンドウ豆の植物により芽 (52%) とエンドウ豆の植物に魅了されたことを示した。対応するヘッドを使用する抽出と同様の応答が観察されました。雌成虫の交尾は開花のエンドウ豆の植物 (56%)、続いて芽 (42%) とエンドウ豆の植物から得られるヘッド スペース抽出に最も引き付けられた、低応答ポッド (28%) と葉期 (10%) を記録しました。テスト刺激として 10 antennaly アクティブなエンドウ豆の揮発性溶射ガンビエ ロールの合成ブレンド、34% のリンク先の応答結果になった

ホスト植物のフェノロジーと対応する間のリンク植物の挙動の影響と同様、匂い、結果ショーでは、 C. nigricana女性釣り合わせられます。雌成虫の交尾花開発中にエンドウ豆の植物の明確な好みがある、ホストの場所の重要な関連する臭気。さらに、この実験は、 C. nigricanaを交配するを示している女性がエンドウ豆の植物揮発性キューのみを検出時の生育ステージが異なるを区別できます。感覚統合は、ホストの場所の重要な percieve マイナーな違い、特に女性13,21,22にする能力を高めることがあります。それにもかかわらず、この風洞実験では視覚的な手掛かりが存在しなくても開花エンドウ豆の植物 (56%) からのヘッド スペース エキスに着陸反応で実プラント (58%) への応答と同じあった。ヘッド スペース エキスのみ、本物の植物を意味、臭気が交配基礎ホスト植物キュー間の類似性c. nigricanaの女性。

風洞行動アッセイからカイロモン ルアーを開発するときの主要な課題の 1 つはフィールド環境に完成したブレンドを翻訳します。風洞実験フィールドの条件は、化学物質の情報を変更するかもしれない周囲の植生から悪臭が浸透しているに対しきれいなにおいのバック グラウンドがあります。

30 cm s-1、5 ルクスの照度、19-20 ° C、55-65% の相対湿度の温度の風速で野外採集雌と風洞実験を行った。実験とアップル フルーツ蛾Argyresthia conjugella11の植物揮発性フィールド ルアーの開発支援の背景悪臭なし。結果表示、複雑な臭気ディスペンサー ブレンド (7 コンポーネント) と単純なブレンド (2 コンポーネント) (図 4 a) きれいな背景に単独で表示される場合と同様の風上の魅力があります。選択の分析では、ただし、アップル揮発性背景に埋め込まれたフィールド ディスペンサーとアップル フルーツ蛾女性優先、複雑ですが、単純ではないブレンド (図 4 b)。

ブレンドの複雑さが植物の背景の影響を克服するために重要なプレーヤーであり、この背景の相互作用がフィールドでの使用のための刺激を開発するときに考慮する必要があることを示した。

Figure 1
図 1。風洞実験の模式図はノルウェー、医薬基盤研究所として Ås - 位置しています。風洞は気候の制御室に配置されます。臭気のアプリケーションの前後に活性炭フィルターでフィルターされているし、部屋に戻って循環し、気流。この図の拡大版を表示するのにはここをクリックしてください

Figure 2
図 2。平均自然のにおいのソースと視覚刺激なしにオオクロバエについての (±SE) パーセント行動応答します。ニオイ刺激に対するだったガラスの瓶に閉じ込め、チャコール フィルターの空気流によって風洞に導入します。この図は変更されました [痴ほう家族、A. & クヌーセン、吻と性別固有のトラップの結果は嗅覚を介した視力の g. k. (2011 年) 性の相違。Entomologia Experimentalis et Applicata 139 25-34]。有意差は、t-テストによって識別されます (有意水準: p = 0.05) 10 飛ぶ 5 つのテストの間でのレスポンダーの割合に基づいて平均値別の実験的な治療あたり 50 ハエの合計は、の日。この図の拡大版を表示するのにはここをクリックしてください

Figure 3
図 3。Cydia の nigricana応答 (±SE) の異なるフェノロジー ステージ、対応するヘッド スペース コレクション 10 antennaly 活性化合物の合成の揮発性のブレンドでエンドウ豆の植物に着陸パーセント。ヘッド スペースとシンセティック ブレンドは、超音波噴霧器からリリースされました。植物材料は、フライト アリーナに直接置かれました。この図から変更されている [Thöming、g. Norli、h. r. Saucke、h. ・ クヌーセン, g. k. (2014) エンドウ植物揮発性成分ガイド ホスト場所行動エンドウ蛾。節足動物植物の相互作用。8 (2)、109-122]。有意差は分散分析によって識別されます (有意水準: p = 0.05)。すべての治療のため、少なくとも 50 の女性を調べたし、蛾が臭気に対応する 6 分。この図の拡大版を表示するのにはここをクリックしてください

Figure 4
図 4。% Argyresthia conjugella簡体字および複雑な誘引に近づいて (< 5 cm).(A). 背景なしフィールド ディスペンサーに風上の魅力。(B). 植物揮発性背景に埋め込まれたフィールド ディスペンサーに風上の魅力。この図から変更されている [クヌーセン ・ g. k. m. Tasin (2015) スポッティング侵略者: リンゴの果樹園でリンゴ フルーツ蛾の攻撃を予測する植物の揮発性物質に基づく監視システム。基礎・応用生態学 16 (4) 354-364]。有意差は分散分析によって識別されます (有意水準: p = 0.05)。すべての治療のため、少なくとも 45 の女性を調べたし、蛾が臭気に対応する 5 分。この図の拡大版を表示するのにはここをクリックしてください

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Discussion

風洞は、多くの昆虫4,9の魅力的で撥の匂いを特定するために役立つツールです。生態学、生物学、昆虫研究の挙動に関する十分な知識、その飛行特性を簡単に識別できる、環境条件、風の速度は、視覚刺激と匂いアプリケーションことができますに合わせて調整します。可能な最も魅力的なソースを使用して風洞パラメーターを微調整するときに新しい種を始めてお勧め。刺激、これは通常ライブ ホスト植物材料または自然な食料源とフェロモン、ケージ、呼び出しの女性または男性 (昆虫研究) によって異なります。忌避剤を識別するためにまた対立9を測定する魅力的なソースの必要性があります。これらの初期の結果は、さらに実験のためのベースラインとしてもなります。

風洞寸法は、自由な動きと生来の飛行特性の表示のための部屋を与えるために考慮されなければなりません。強力なチラシと大きな昆虫、大きく飛行アリーナ必要があります。小さな昆虫のアリーナの部分は使用可能性があります。風の速度は、固有昆虫種の学び、飛行能力に合わせて調整する必要があります可能性があります。すべての匂いはフェロモンで特に汚染を避けるために注意が必要し、頻繁にコントロール治療は偽結論を避けるために行われる必要があります。

活性炭フィルターは、目的の臭気の適用のための空白のキャンバスを提供します。しかし、自然な背景のにおいが開発したフィールド ディスペンサー11,23にやり取りするため、フリップ側では研究室の条件をきれいにする可能性があります。少ないまっすぐ進むと風洞内の悪臭を考慮すべき背景を含めるオプション、フィールド条件にユビキタス揮発性風洞ブレンドの翻訳可能性がありますし。異なる揮発性物質であるフェロモンと圃場条件に翻訳が問題のより少しであります。これにも当てはまります揮発希少資源から死体刺激クロバエ科を用いてハエ24のよう。

噴霧器は、既知濃度とブレンド比率で揮発性物質を解放するための優れたツールです。噴霧器は、すぐに変わる複雑な解放率を計算する問題を回避できます。溶射のヘッド スペースに生きている植物やそのままなプラント材料への魅力を比較することによって揮発性のヘッド コレクションの効率を比較する簡単です。揮発性のコレクションの内容は、ガスクロマト グラフ質量分析計を結合で識別できます。噴霧器は、溶剤の希釈サンプルを利用しています。昆虫の飛行性能と溶媒の対話し、影響を識別するために注意が必要があります。エタノールは、いくつかの昆虫の種、例えば誘引。、woodboring カブトムシ25。スプレー機能として超音波の周波数で振動してでも注意が必要コウモリ26を検出可能な特定の種の反略奪の応答を考慮します。

クロール昆虫の魅力は、27風トンネルのテストでした。調達プラットフォーム、平行に臭気プルームの中心部には、アリーナ28内部装備でした。ただし、特定の注意は、汚染問題を処理すべき。

風洞も変質カイロモン排出量比率と植物の遺伝子組み換えヴィティス ・ ヴィニヘラに関する研究と対応するl. botranaの魅力は29を示しているバイオ テクノロジー ソリューションを検証するための強力なツールをすることができます。遺伝子組換え植物は、ヘッド スペースを抽出し、合成ブレンドされた風洞・ l ・ botranaの魅力のためにテスト、 V. vinifera29の制御植物に比べて減少の魅力の結果します。

ただし、それぞれの特定のケースで慎重に考慮すべき風洞の使用にいくつかの制限があります。昆虫通常アリーナで一度だけ使用されて、長い生成時間を持つ種は少ない風洞実験に最適です。赤記載されている種は物議を醸す行動研究の実験室でテストすることができます。ただし、害虫、魅力的なルアーの相当な必要性があるが通常短い世代時間を持っており、フィールド コレクションまたは飼育プロトコルから十分な数を得ることができます。

風洞は、確かに化学生態行動の研究で、その場所をあります。予算に応じて、さまざまな方法で構築できる、様々 な研究の質問に合うように機能を追加できます。風洞は匂いと他の感覚刺激に対する昆虫の飛行行動の観察、測定可能になります。

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Disclosures

どれも

Acknowledgments

M. Tasin は、持続可能な開発 (Formas、グラント 2013年-934) のスウェーデン研究評議会によって支えられました。

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Flight arena any NA Construct to fit the filter housing
Filter housing x 2 Camfill Farr Contains the dust and charcoal filters
Fan x 2 Fischbach Model D640/E35 Silent fan with continous dimmer switch
Perforated grids any NA Two different open areas are needed, e.g. 54 and 51%
Flowmeter Swema air Swema air 300 Identifying the wind speed
Ultrasonic sprayer SonoTek Sprayer nozzle with conical tip and inserted microbore
Broadband ultrasonic generator SonoTek Function generator
Syringe pump CMA microdialysis CMA 102 Liquid delivery
FEP tubing CMA microdialysis 0.12 mm inner diameter
Tubing adaptors CMA microdialysis Connectors for zero internal volume
Gastight syringe any NA 1000 µL syringe for headspace collections and synthetic blends
Gastight syringe any  NA 1000 µL syringe for cleaning sprayer
Torch any NA Small light source for checking sprayer release
Timer any NA Timer with alarm function 
Holder for insect release any NA Metal construction
Lighting any NA LED is preferable due to low heat production
Moisturiser any NA Size depends on volume of wind tunnel room
Temperature control any NA Temperture range depends on species
Glass tubes any NA Tubes (2.8 cm diameter, 13 cm long) for  insects
Snap cap any NA Snap cap that fits the glass tube
Gauze any NA Fabric to close the glass tube
Rubber band any NA To hold gauze in place
Glass cylinder any NA Cylinder for odour containment and landing platform (10 cm diameter, 12.5 cm long)
Glass jars any NA Glass jars for dynamic headspace collection
Connectors and tubes any NA Tubes and connectors depends on type of glass jars
Air supply any NA From laboratory air or bottles
Charcoal filters any NA For cleaning the outside air sypply
Vial any NA Small vial with water to keep plant material fresh
Oven any NA Heat metal and glassware to 300 degrees to decontaminate

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

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Knudsen, G. K., Tasin, M., Aak, A.,More

Knudsen, G. K., Tasin, M., Aak, A., Thöming, G. A Wind Tunnel for Odor Mediated Insect Behavioural Assays. J. Vis. Exp. (141), e58385, doi:10.3791/58385 (2018).

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