Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Journal Behavior
Click here for the English version

Behavior

En visuell Guide for å studere atferdsmessige forsvar til patogen angrep i Leaf-kutting maurene

Published: October 12, 2018 doi: 10.3791/58420
Automatic Translation
1, 1, 1
1Centre for Social Evolution, Section for Ecology and Evolution, Department of Biology, University of Copenhagen

Summary

Vi presenterer en visuell guide til sykdom forsvar atferd i blad-kutting maurene, med individuelle klipp og tilhørende definisjoner, illustrert i en eksperimentell infeksjon scenario. Vårt hovedmål er å hjelpe andre forskere gjenkjenne sentrale defensiv atferd og gi en felles forståelse for fremtidig forskning i dette feltet.

Abstract

Komplekse livsstil, evolusjonær historie avanserte samarbeid og sykdom forsvar av blad-kutting maurene er godt undersøkt. Selv om mange studier har beskrevet opptreden med sykdom forsvar, og tilknyttede bruk av kjemikalier og poesi aksent, er ingen felles visuell referanse gjort. Hovedformålet med denne studien var å spille korte klipp av involvert i sykdom forsvar, både prophylactically og direkte rettet mot en antagonist av kolonien etter infeksjon. Å gjøre så vi brukte en infeksjon eksperiment, med sub kolonier av blad-skjæring maur arten Acromyrmex echinatior, og den viktigste kjente sykdomsfremkallende trusselen mot maur fungal beskjære (Leucoagaricus gongylophorus), en spesialisert patogene sopp i slekten Escovopsis. Vi filmet og sammenlignet infisert og smittet kolonier på både tidlig og mer avanserte stadier av infeksjon. Vi kvantifisert sentrale defensiv atferd behandlinger og viser at de atferdsmessige respons på patogen angrep trolig varierer mellom ulike kastene av arbeideren maur, og mellom tidlig og sen deteksjon av en trussel. Basert på disse innspillingene har vi laget et bibliotek av atferdsmessige klipp, ledsaget av definisjoner av de viktigste personlige defensive atferd. Vi forventer at slik guide kan gi en felles referanseramme for andre forskere arbeider i dette feltet til å gjenkjenne og studere disse atferd, og også gir større spillerom for å sammenligne ulike studier for å hjelpe forstå rollen disse virkemåtene spille i sykdom forsvar.

Introduction

Blad-kutting maurene er avanserte sosiale insekter, dannet noen av de mest komplekse koloniene på jorden. De er en avledet gren av voksende sopp maurene (stamme Attini) som består av to slekter Acromyrmex og Atta1. De dyrker sopp beskjære arten Leucoagaricus gongylophorus (Basidiomycota: Agaricales), som de stoler på deres viktigste mat kilde2,3. Maurene leverer denne soppen med friske blad materiale for sin vekst, og soppen i retur gir næringsrike hovne hyphal tips (gongylidia) som brukes av maur og deres brood. Koloniene er bygget underjordiske fungal avlingen opprettholdes i eksterne hager4,5og maur bøndene beskytte sine beskjære monokultur potensielle patogener6,7,8 ,9,10,11,12. Kolonier dele arbeid mellom arbeidere av ulik størrelse (kaste) og alder13,14,15, som strekker seg til forsvaret av maur og Beskjær fra patogener.

Vi forventer at blad-skjæring maur kolonier skal være utsatt for sykdom. Gruppe levende forventes å lette spredningen av sykdommer mellom relaterte arbeidere på grunn av hyppige interaksjoner, og dermed enklere overføring16. Maurene er mottakelige for entomopathogenic fungal parasitter, som Metarhizium arter og Tolypocladium bassiana6. Disse parasittene er generalister og er ofte tilstede i jord nær reir7,8. Oppdrett av sopp beskjære en monokultur4,gjør5 det kan også være utsatt for sykdom17,18. Det kan være infisert av generalist fungal parasitter (inkludert Aspergillus niger og Trichoderma arter3); men den mest betydelig trusselen er en spesialist necrotrophic sopp i slekten Escovopsis (Ascomycota: Hypocreales)11. Gjennom utskillelsen av mycolytic enzymer og andre forbindelser, Escovopsis dreper og henter næringsstoffer fra den sopp beskjære12, med potensielt dødelig konsekvenser for maur kolonier11,19.

For å bekjempe sykdom trusler, er maurene bemerkelsesverdig forsvar på både individuelle og kolonien, kombinere biologisk kontroll, atferdsmessige og kjemiske forsvar å handle prophylactically og, når nødvendig, i respons på infeksjon. Samlet disse forsvarsverkene forhindre eller redusere virkningen av infeksjoner fra både generalist patogener og spesialister som Escovopsis. Bredt involverer de unngå sammentrekning av parasitter i miljøet20, forebygge parasitter inn reiret og begrense spredning av smitte i reir. De første linjene av forsvar inkluderer kjemikalier kjertel sekreter3,21,22,23,24,25,26, 27 å desinfisere anlegget underlag, gjennom arbeidere slikker dem før innlemmelse i sopp hage og maur utfører både selv- og allogrooming. Når grooming, spesielt ved å skrive inn reiret, gjelde arbeidere også surt avføring sekreter til deres kropp27. Disse forebyggende forsvar er påviselig viktig å unngå infeksjon av patogene trusler6,7,8,9,10,11, 12.

Hvis første forsvar mislykkes og en patogen som Escovopsis lykkes i redet og sopp hagen og infeksjon oppdages på et tidlig stadium, bruke maur sopp grooming fjerne spores25,28. Maurene kan bruke sekret fra kjertler metapleural eller overføre spores til infrabuccal lommen (en munnhulen), hvor de er blandet med en kjemisk cocktail som inneholder metapleural og labial kjertel sekreter26. Det er mer enn 20 kjente forbindelser i disse kjertlene, inkludert γ - keto-, karbonoxylsyre- og indoleactic syren3. Dette er aktivt brukt25, har antibiotikaresistens, fungistatic og fungicidal egenskaper29og kan hemme Escovopsis spore spiring30. Sporer lagret i infrabuccal lomme er senere utvist utenfor kolonien31,32. De fleste av denne soppen grooming etter tidlig stadium gjenkjenning er utført av mindre arbeidere28,33. Men hvis en patogen klarer å unngå deteksjon og sprer seg i sopp hagen, både små og store arbeidere Luke infiserte deler av sopp28, og dette fjernet materialet er avsatt utenfor de nest31. I tillegg arter i blad-skjæring slekten Acromyrmex bruke biologisk kontroll i form av antibiotika produsert av symbiotiske Actinobacteria34,35,36— vedlikeholdes på maur cuticle37hovedsakelig unge store arbeidere34,38,39,40— å produsere stoffer som hindrer mycelial veksten av Escovopsis 34 , 38 , 41. denne antibiotika produksjonen kan igjen svekkes av Escovopsis-produsert forbindelser i en infeksjon19.

Figure 1
Figur 1: maur morfologiske funksjoner. En skjematisk tegning av en maur viser morfologiske strukturer nevnt i protokollen. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Blad-skjæring maur forsvar dermed utgjør en integrert samling av atferdsmessige og kjemiske mekanismer som samlet gir disse maur svært effektiv mot sykdom42. Forstå disse forsvar er av bred interesse, og de har vært mye forsket16,20,42,43,44. Men er en visuell samling av defensiv atferd som ville hjelpe entydig definisjon og beskrivelse av dem for systematisk bruk av forskere, vi vet, ikke tilgjengelig. Selv om terminologien som brukes til å beskrive maur atferd er relativt standardisert, er det derfor ingen sikkerhet at samme atferdsmessige handlinger kalles konsekvent i forskjellige studier. Her er vårt hovedmål å bøte på dette ved å gi klarhet og standardisering gjennom en samling av video-opptak av individuelle forebyggende og defensiv atferd med tilhørende definisjoner. Vi filmet utklippene under en atferdsdata eksperiment, der vi observert og kvantifisert atferd i forbindelse med eksperimentell Escovopsis infeksjoner i Acromyrmex echinatior sub kolonier, kan resultatene som vi presenterer også her som et illustrerende eksempel på hvordan denne samlingen kan brukes for atferdsmessige studier.

Protocol

1. Escovopsis isolasjon

  1. Isolere Escovopsis stammer fra Acromyrmex echinatior laboratorium koloniene, ved å plassere sopp hage fragmenter, med maur fjernet, på en Petriskål fuktig vatt i flere dager før Escovopsis germinates og sporulates. Overføre spores til potet druesukker agar plater (PDA, 39 finans) og ruge på ca. 23° C i ca to uker.
    Merk: En stamme ble brukt i denne studien.
  2. Bruk en steril nål for å plukke ut moden spores fra disse første platene. Velg nok sporer å dekke spissen av nålen.
  3. Vaksinere spores på nye plater under sterile forhold og Inkuber på ~ 23 ° C i ca to uker.
  4. Når hyfer har dekket hele platen og vokst til modne brun sporer, gjentar du trinn 1.3, men denne gangen med spores fra den nye PDA-platen.
  5. Gjenta prosessen til en ren lager av Escovopsis for hver stamme er ervervet (ingen synlige urenheter vokser på eller under tallerken overflaten).

2. eksperimentelle set-up

  1. Bruk tre A. echinatior kolonier.
    Merk: Her koloniene Ae160b, Ae322 og Ae263 ble brukt.
  2. Fra hver kolonien, gjøre 12 sub kolonier. Gjøre seks sub koloniene for observasjon etter 0t og seks sub koloniene for observasjon etter 72 h. Dette gir totalt 36 sub koloniene; Merk halvparten av sub koloniene fra hver "parent" koloni som kontroll, og den andre halvparten som'Escovopsis behandling'.
    Merk: Mens overordnede kolonier tilstedeværelsen av dronning påvirker arbeidstaker oppførsel, vi forventer (selv om dette ikke garanteres), at dronningen mindre sub koloniene er sannsynlig å oppføre seg som queenright kolonier i den korte tidsrom som eksperimentet går.
  3. For hver sub-kolonien, bruke en firkantet boks lengde: ~ 3.15 i (8 cm), bredde: ~ 2.17 i (5,5 cm) og dybde ~ 1,77 i (4,5 cm).
    Merk: Det viktige poenget er å gi nok plass for maur utenfor sopp fragmentet grovfôr og dumpe avfall, men samtidig gjøre boksen liten nok at filming og atferd er mulig.
  4. For hver sub-kolonien, legge en-teskje størrelse (ca 2.2 cm3 og 1.2 g) del av den sentrale delen av sopp hagen (L. gongylophorus) fra den opprinnelige kolonien, et par bramble blader, og et stykke bomull dynket i vann.
    Merk: Bomull gir fuktighet. Det bør ikke være dryppende vann, og bør ikke berøres sopp hagen.
  5. For sub kolonier behandlet med Escovopsis, bruke en inokuleringen sløyfe og fylle åpningen så det er bare dekket av Escovopsis sporer. Vaksinere spores ved å trykke forsiktig en liten, lokalisert del av sopp hagen ti til tjue ganger slik at sporer ikke står for.
  6. For sub kolonier som styrer, etterlign anvendelse av Escovopsis til sopp hagen med en bakteriefri inokuleringen sløyfe.
    Merk: Selv om dette ikke ble gjort i nåværende forsøket, inoculation et sterilt pulver (som grafitt eller talkum) kan gjøres på dette stadiet å skille mellom en infeksjon med en patogen og en inert agent.
  7. 72 h observasjoner, la halvparten av sub koloniene (både kontroller og infisert) 72 h etter innføring av Escovopsis før legge maur eller starte videoinnspillingen.
    Merk: Venter på 72 h i fravær av maur gjør det sannsynlig at Escovopsis spores vil spire (upublisert i vitro data). Selv om dette øker også muligheten for andre infeksjoner (for eksempel fra en sopp allerede til stede i hagen sopp), er denne tidsperioden å foretrekke for denne behandlingen representerer tidlig stadium av en etablert infeksjon.
  8. For 0t observasjoner, rett etter trinn 2.6 og ca 30 min før opptak, legge til to brood, fire mindre arbeidere og fire store arbeidere samtidig fra overordnede kolonien i hver boks.
    1. Bruk to store arbeidere fra i hagen som ung med lys pigment, med Actinobacteria som dekker de fleste cuticle. Ta de to andre fra utenfor hagen, med mørk pigment og Actinobacteria bare dekker laterocervical platene.
  9. For 72 h observasjoner, Gjenta 2.8 og 2.8.1 30 minutter før innspillingen, i.e.71.5 h etter vaksinering med Escovopsis.
    Merk: Eksperimentell sub koloniene er betydelig mindre enn etablerte naturlig Acromyrmex kolonier. Dette er nødvendig for å registrere nøyaktig oppførsel. Mens dette kan påvirke frekvensen av noen atferd kvalitativt, ble sammensetningen av sub kolonier valgt for å reflektere blanding av arbeidere i naturlige kolonier mer sannsynlig kvalitativt gjenspeiler de atferdsmessige interaksjonene.

3. videoopptak og scoring atferd

  1. Bruk en USB endoskop knyttet til en bærbar PC (eller tilsvarende) og gi tilstrekkelig lys.
  2. For hver sub-kolonien, utføre videoopptak 4 h (starter på 0 h eller 72 h etter infeksjon).
  3. Etter innspillingen 36 sub koloniene, gjennom totalt 144 timer med opptak og score all atferd av interesse for alle individer i hvert sub koloni.
    Merk: I dagens eksperimentelle eksempel hadde vi utelate to sub kolonier (en kontroll fra kolonien Ae160b) og en behandling sub koloni fra kolonien Ae322 på grunn av infeksjon med sopp enn Escovopsis, redusere antall timer observasjoner for 136.
  4. Hver gang en atferd er observert, ta det som 1 forekomst.
    Merk: Problemet kan være for kort eller lang varighet, men bare score det > 1 Hvis det blir avbrutt av en annen atferd, eller hvis maur er passive for en periode.

4. atferd

Merk: Atferdsmessige definisjoner ble laget med en kombinasjon av beskrivelser fra tidligere studier23,27,28,31,45 og personlige observasjoner. For en detaljert illustrasjon utstillingsvindu viktig morfologiske strukturer i protokollen for anerkjennelse av atferd, se figur 1.

  1. Selv-Stell og antenne rengjøring (Video 1)
    1. Varsel om maur stopper beinet bevegelse for å starte selv-Stell. Sjekk at antenner trekkes gjennom antenne rengjøringsmidler på forbena (figur 1), en klemme-lignende struktur på tibia-tarsus felles bestående av et hakk vender en spore med ulike størrelse bust og kam45, 46.
    2. Etter rengjøring antennen, observere at maur vil rense bein og antenne rengjøringsmidler, ved å trekke bena gjennom munndelene, fjerner partikler og potensielle patogener med glossa (figur 1).
      Merk: Selv grooming kan bestå av antennen og senere antenne rengjøringsmidler (figur 1), men også bruker munndeler for å rengjøre bena. Når en maur er rengjøring sine ben, renser det oftest alle seks bein i rekkefølge.
  2. Sopp grooming (Video 2)
    1. Varsel om maur stopper beinet bevegelser på et bestemt sted på sopp hagen. Observere at antennene er urørlig og parallelle pekte mot sopp slik at mellom landskap og funiculus (figur 1) er ca 45 °, og spissen av antennene er nesten berører hverandre, nær tips av Accolade ( Figur 1).
    2. Merk at øvre (Nebbmunner) og lavere (labium) munndelene er åpen, med glossa (figur 1) nye slikke soppen.
  3. Allogrooming (Video 3)
    1. Støter på denne oppførselen når én eller flere maur har nærmet seg en annen (mottaker) maur eller omvendt. Under opptreden, maur stoppe og står tett sammen med fysisk kontakt. Den Stell ant(s) kan flytte litt til dekker et større område av mottakeren maur kroppen.
    2. Observere at antenner for den skuespiller (e) kan være urørlig og pekte mot et bestemt punkt på mottak mauren eller flytte og lett å peke på mottakeren. Vinkelen mellom landskap og funiculus (figur 1) er ca 45 ° avhengig av om de er fast på et bestemt tidspunkt eller tappe. Tips av skuespilleren antenner er vanligvis nær hverandre og tips av Accolade (figur 1).
    3. Merk at øvre (Nebbmunner) og lavere (labium) munndelene er åpen, med glossa (figur 1) nye slikke mottaker maur.
  4. Metapleural kjertel grooming (Video 4)
    1. Observere når maur stopper bevegelse for å starte metapleural kjertel (figur 1) grooming. Merk at maur lener seg til side blant ryggen forbena gni åpningen (kjøtt) av metapleural kjertel (for eksempel høyre beinet).
      Merk: Andre forsiden beinet er samtidig (i dette eksemplet til venstre foran beinet) slikket av glossa (figur 1).
    2. Kontroller at maur lener seg til motsatt side og slår beina og gjentar samme bevegelse med motsatt ben. Maur fortsetter å flytte forbena metapleural kjertler og senere glossa stadig bytter mellom bena (figur 1).
      Merk: I dette eksemplet maur vil nå bestå venstre foran beinet metapleural kjertel og høyre benet til glossa (figur 1). Etter metapleural kjertel (figur 1) grooming, starter maur ofte selv grooming (trinn 4.1).
  5. Spore Luke (Video 5)
    1. Støter på denne oppførselen når maur stopper beinet bevegelser på et bestemt sted på sopp hage. Observere at antennene er urørlig og parallelle, pekte mot sopp slik at mellom landskap og funiculus er ca 45°, og tips av antennene er nesten berører hverandre og tips av Accolade (figur 1).
    2. Kontroller at maur åpner sin Accolade (figur 1) å hente synlige Escovopsis sporer og koble dem fra sopp avlingen ved å trekke dem av. Maur bærer klyngen av sporer av reiret, mens de er forsiktig bevegelse for orientering. Antenner kan renses antenne rengjøringsmidler (figur 1, se Video 1) mens du holder klyngen av sporer. Maur drops spores en avfallet haug.
      Merk: Opptak av aktivitet rundt avfallet haug nede ikke ble gjort i gjeldende eksperimentet men ville være en passende utvidelse av gjeldende protokollen.
  6. Sopp Luke (Video 6)
    1. Støter på denne oppførselen når maur stopper beinet bevegelser på et bestemt sted av sopp. Antennene er løst pekte mot delen av soppen maur prøver å fjerne, mens peke litt sopp stykket.
    2. Observere at maur bruker sin Accolade til enten skjære gjennom fungal avlingen koble et angitt område, eller å ta en del av sopp brikken med sin Accolade (figur 1). Maur vil samtidig rock fra side til side på sine ben, mens det trekker av sopp stykket.
      Merk: Luke gjøres ved flere arbeidere og både mindreårige og majorer. Hvis så, gjør noen maur sopp skjæring, utføre andre av rock og trekke bevegelse. Den frittstående delen av soppen er båret utenfor reiret og slapp av i avfallet haug nede. Opptak av avfall innskudd ikke ble gjort i gjeldende eksperimentet, men ville være en passende utvidelse av gjeldende protokollen.
  7. Fecal væske grooming (Video 7)
    1. Støter på denne oppførselen når maur stopper beinet bevegelser på et bestemt sted på sopp hage. Maur bøyer sin og (figur 1) og hodet mot hverandre for å bruke et slippverktøy fecal væske munndelene.
    2. Observere at maur trekker forbena gjennom Accolade (figur 1), en om gangen. Deretter flytter maur antenner gjennom antenne rengjøringsmidler (figur 1) ligger på tibia-tarsus felles av forbena.
  8. Slippverktøy oppstøt (Video 8)
    1. Støter på denne oppførselen når maur stopper beinet bevegelser på et bestemt sted av sopp. Antennene er urørlig og parallelle, pekte mot sopp slik at mellom landskap og funiculus er ca 45°, tips av antennene berører nesten hverandre og tips av Accolade (figur 1).
    2. Observere at maur regurgitates en dråpe flytende på sopp, varierende fra å være gjennomsiktig for lys gul eller selv brun, fra dens munndeler.

Representative Results

Hovedmålet med dette studiet var opprettelsen av korte klipp som illustrerer opptreden forbundet med sykdom forsvar i blad-skjæring maur, generere en katalog som skal brukes som en referanse for fremtidige studier. I tillegg bruker studien et eksempel på en eksperimentelle oppsett som disse virkemåtene kvantifisert for å vise hvordan denne katalogen kan brukes i atferdsmessige studier, representant resultatene vi oppsummere her.

Sub-Colonies ble satt opp for observasjon på tidlig stadium (0 h) og sent Stadium (72 h) infeksjon. På grunn av tung infeksjoner med sopp enn Escovopsis etter 72 h, ble to sub koloniene (en kontroll for koloni Ae160b) og en behandling for koloni Ae322 utelatt, så vi fokusere presentasjonen av resultatene på tidspunktet 0t og legge mindre vekt virkemåtene som er observert etter 72 h. Etter filme alle sub kolonier og scoring defensiv atferd, fant vi forskjeller i atferdsmønstre forbundet med tid etter infeksjon og kontekst, inkludert de forskjellige måtene der de ble brukt av små og store arbeidere. Derimot ble selv-Stell utført på tiden både kontroll og smittet sub kolonier. Det var også vanlig da maur var søker, og forsøker å fjerne, Escovopsis hyfer eller spores. Fordi dette var så universelt observert og hyppige i alle situasjoner, vi ikke Sebelius.

Vi scoret alle andre virkemåter beskrevet i protokollen og nåværende beregnet total og gjennomsnittlig frekvenser for små og store arbeidere per sub koloni (tabell 1). Vi fant at kontroller, mindre arbeidere stelt hage beskjære mer enn store arbeidere (figur 2en), og anecdotally observert at de tilbrakte mer tid i sopp hagen. I koloniene infisert med Escovopsis var det en tendens til økt sopp grooming samlet i forhold til kontrollen kolonier, men dette var ikke signifikant (F1,23 = 2,80, p = 0.1077; Tabell 2; Figur 2 en). det var en ikke-betydelig økning i fecal grooming med infeksjon (F1,23 = 0,60, p = 0.4455; Tabell 1) men ingen forskjell mellom små og store arbeidere (figur 2b). Vi observerte fecal grooming når arbeidere angitt soppen, snarere enn da de var på eller helt fra soppen for lengre perioder.

Figure 2
Figur 2: frekvens av grooming hendelser. Mener nummer (± standardfeil (SE), n = 9) (a) sopp grooming og (b) fecal væske grooming hendelser innen fire timer etter vaksinasjon, sammenligne små og store arbeidere kontroller og Escovopsis behandlinger. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Adskillige opptreden var svært sjeldne. Vi bare observert metapleural kjertel grooming fire ganger, og alle forekomster skjedde etter 72 h; en gang i kontrollgruppen, og tre ganger i koloniene med Escovopsis infeksjon (tabell 1). Nesten like sjelden, fant vi at maur ville regurgitate en flytende dråpe på sopp hagen og noen ganger utenfor sopp (tabell 1). I 0t grupper skjedde dette en gang i en kontroll sub koloni og to ganger infiserte koloniene - i alle tre tilfeller virkemåten ble utført av en stor arbeidstaker. Ved en anledning regurgitated en mindre arbeider en dråpe i hjørnet av boksen og en gang en stor arbeider gjorde det samme på et bramble blad, både i Escovopsis behandling. I 72 h koloniene, var slippverktøy gulpe opp på soppen aldri observert i kontroll koloniene men skjedde sju ganger i infiserte kolonier. Seks av disse var av stor arbeidere og tre av disse av en enkeltperson som lagt dråper utenfor sopp hagen.

Spore Luke (Figur 3et) og sopp Luke (Figur 3b) var begge lave frekvenser. Mens det var ingen signifikant forskjell i frekvensen av sopp Luke mellom infiserte kolonier og kontroller, var det en tendens til å Luke for å øke med tiden siden infeksjon (F1,23= 2.91, p = 0.1014; Tabell 2). våre observasjoner fokusert på Escovopsis spore Luke, som ikke endres vesentlig med tid, men det var en tendens til en høyere frekvens i koloniene infisert med Escovopsis enn i infisert kontroller (F1,23 = 3,27, P = 0.0838; Tabell 2). færre sub kolonier infisert med Escovopsis hadde synlig sporer igjen etter observasjon perioden med en tidlig stadium infeksjon (når maur ble introdusert etter 0 h av spore inokulasjon), med maur fjerne alle sporene i nesten halvparten av sub koloniene (4 av 9; Figur 3 c). I senere trinn infeksjoner (hvor maur ble introdusert etter 72 timer med spore inokulasjon), maur var ikke i stand til å fjerne sporer helt i noen sub koloniene. Sammen foreslå disse observasjonene en tendens til maur å skifte fra spore Luke til sopp luke i løpet av en infeksjon.

Figure 3
Figur 3: frekvens av Luke hendelser. Mener frekvens (± standardfeil (SE), n = 9) (a) spore Luke (av Escovopsis sporer) og (b) sopp Luke (Escovopsis eller annen sopp) i en 4 h observasjon periode, sammenligne mindreårige og majorer fra behandlingsgrupper, og ((c)) Antall sub kolonier med synlige Escovopsis sporer i behandlingsgrupper på slutten av observasjon perioden. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Mindre arbeidstakere - kontroll Mindre arbeidstakere - behandling Store arbeidstakere - kontroll Store arbeidstakere - behandling
0h
Sopp grooming 84 (9.333) 131 (14.56) 37 (4.111) 66 (7.333)
Allogrooming 6 (0.6667) 14 (1.556) 5 (0.5556) 6 (0.6667)
Spore Luke 0 3 0 5 (0.5556)
Sopp Luke 0 0 0 0
Fecal væske grooming 46 (5.111) 69 (7.667) 27 (3.000) 48 (5.333)
Slippverktøy program 0 0 1 (0.1111) 2 (0.2220)
Metapleural kjertel grooming 0 0 0 0
72h
Sopp grooming 10 (1.429) 45 (5.000) 24 (3.429) 38 (4.222)
Allogrooming 2 (0.2857) 10 (1.111) 1 (0.1110) 4 (0.4440)
Spore Luke 0 0 0 1 (0.1110)
Sopp Luke 0 1 (0.1110) 0 2 (0.2220)
Fecal væske grooming 19 (2.714) 38 (4.222) 30 (4.286) 30 (3.333)
Slippverktøy program 0 1 (0.1110) 0 6 (0.6667)
Metapleural kjertel grooming 0 2 (0.2220) 1 (0.1429) 1 (0.1110)

Tabell 1 : Antall atferd i fire timer med observasjon på 0 og 72 h etter Escovopsis inoculation. Gjennomsnittlig antall observasjoner (med mener frekvenser per person i parentes), sammenligne små og store arbeidstakere fra kontroll og Escovopsis infeksjon sub kolonier, henholdsvis (n = 9).

Type 3 tester av fast effekter
Sopp grooming Allogrooming Fecal grooming Spore Luke Sopp Luke
Effekter NUM DF Den DF F-verdi PR > F NUM DF Den DF F-verdi PR > F NUM DF Den DF F-verdi PR > F NUM DF Den DF F-verdi PR > F NUM DF Den DF F-verdi PR > F
Kolonien 2 23 0.77 0.4733 2 23 0.52 0.5989 2 23 0.54 0.5903 2 23 0,51 0.6052 2 23 1.17 0.3272
Sub koloni (kolonien) 6 23 0.93 0.4892 6 23 0,51 0.7978 6 23 0,63 0.7067 6 23 1,67 0.1742 6 23 1,53 0.2127
Behandling 1 23 2.8 0.1077 1 23 1,85 0.1875 1 23 0,6 0.4455 1 23 3,27 0.0838 1 23 1 0.3275
Tid 1 23 6.53 0.0177 1 23 0,88 0.3574 1 23 0,97 0.3361 1 23 0.53 0.4742 1 23 2.91 0.1014

Tabell 2 : Statistiske resultater i blandet ANOVA tester på separat opptreden som statistiske analyser kan utføres. Fast effektene var kolonien, sub koloni (nestet i kolonien), behandling og tid. Klikk her for å laste ned denne tabell.

Video 1
Video 1: selv-Stell og antenne rengjøring. Vennligst klikk her å se denne videoen. Høyreklikk for å laste ned.

Video 2
Video 2: sopp grooming. Vennligst klikk her å se denne videoen. Høyreklikk for å laste ned.

Video 3
Video 3: Allogrooming. Vennligst klikk her å se denne videoen. Høyreklikk for å laste ned.

Video 4
Video 4: Metapleural kjertel grooming. Vennligst klikk her å se denne videoen. Høyreklikk for å laste ned.

Video 5
Video 5: Spore luking. Vennligst klikk her å se denne videoen. Høyreklikk for å laste ned.

Video 6
Video 6: sopp luking. Vennligst klikk her å se denne videoen. Høyreklikk for å laste ned.

Video 7
Video 7: Fecal væske grooming. Vennligst klikk her å se denne videoen. Høyreklikk for å laste ned.

Video 8
Video 8: dråpe oppstøt. Vennligst klikk her å se denne videoen. Høyreklikk for å laste ned.

Discussion

Det primære målet med denne studien var å observere og registrere karakteristiske blad-skjæring maur defensiv atferd i nærvær av sopp-hage infeksjon med Escovopsis, opprette referanse klipp for bruk av det større, vitenskapelig samfunnet. Det bør bemerkes at disse atferd ikke er eksklusivt til forsvaret av koloniene fra Escovopsis, men kan også spille en rolle i forsvaret mot andre forurensninger og infeksjoner6,7,8,9 ,10,11,12, og i forsvaret av maur seg42. Våre protokollen gir bakgrunn for bredere forskning på forsvar i sopp voksende maur. Dette er trolig særlig: (i) for unge forskere som ikke er kjent med disse atferd; (ii) å sikre konsekvent definisjoner og observasjoner av atferd; (iii) å lette sammenligninger over studier og maur arter; (iv) fordi noen av disse atferd kan oppstå så sjelden at selv opplevde kan forskere aldri har observert. (iv) fordi forstå og anerkjenne atferd i kontrollerte forhold i laboratoriet hjelp studier i situ der forhold er vanskeligere å kontrollere.

Resultatene fra vår atferdsdata studie er i samsvar med tidligere arbeid som viste at mindre arbeidere sopp brudgommen-avgjørende hvis en infeksjon er oppdaget tidlig, flere store arbeidere25,28,32. Her, økte store arbeidere mengden fungal grooming etter Escovopsis infeksjon (figur 2en). Dette tyder på at mindre arbeidere er det dominerende sopp groomers, men at store arbeidere kan hjelpe hindre spredning av mer etablerte infeksjoner. Større store arbeiderne kan fjerne sporer raskere, mens mindre arbeidere kan være mer egnet til å fjerne mindre tilgjengelig sporer. Vi fant også at arbeiderne fjernet sporer i rundt halvparten av infiserte sub koloniene (fire av ni) ble introdusert på tidspunktet for infeksjon, og dermed kunne oppdage patogen tidlig (Figur 3c). Total, denne peker til en serie av atferdsdata svar der maur først prøve å stoppe Escovopsis infeksjon fjerne sporer (og gjør så før en infeksjon sprer), i stedet for å fjerne deler av sopp hagen (Figur 3a, b. ). Dette endres over tid hvis infeksjonen utvikler seg, når maur er mer sannsynlig å fjerne deler av sopp hage28. Selv om våre utvalgene var for liten til å være avgjørende, og vi kan ikke utelukke at samtidige infeksjoner indusert luking atferd, støtter våre data denne trenden, med sopp Luke hovedsakelig å være tilstede ved senere stadier av infeksjon (Figur 3 en). De generelt lave nivåene av sopp Luke kan foreslå at maurene brukt andre forsvar (f.ekskjemikalier) å hemme videre vekst av Escovopsis, eller at ingen av vår eksperimentelle sub kolonier ble altfor alvorlig infisert (gjør mer ødeleggende forsvar unødvendige).

Våre funn tyder på at selv-Stell med fecal væske er karakteristisk for maur inn sopp hagen, og brukt som et forebyggende tiltak, i stedet for å være knyttet til en infeksjon. Lignende observasjoner har vært sett i dets grunnlegger kvinner som stelle seg selv og overføre fecal dråper med munnen til beina, når du angir reiret eller håndtere de beskjære27. En infeksjon bør i teorien øke aktiviteten av arbeiderne på kanten av sopp hagen, hvis fjernet infiserte materialet er utført og falt i avfall hauger. Derfor kan fecal væske grooming også indirekte øke under infeksjon å minimere sykdom spres. Vi forventer motsatt mønsteret for alvorlige infeksjoner, med redusert bevegelse på kanten av sopp hagen, som arbeiderne enten forlate soppen eller vedta flere ekstrem måler som kjemisk forsvar.

Mens fecal væsker kan tjene som en viktig forebyggende kjemiske for en person, brukes allogrooming av reir-kamerater på andre arbeidere hvis de oppdager fremmede partikler eller mikrober. Betydelig forskjellen vi observerte mellom (tabell 1) av fecal væske grooming (n = 304) og allogrooming (n = 48) kan indikere en aldersforskjell patogen gjenkjenning. Maur er ikke kjøpedyktig lett merker patogener selv med sine antenner; allogrooming er derimot gjort av reir-mates, som kan kontrollere hele kroppen av en maur og bare velge å groom om nødvendig. Siden Escovopsis er en parasitt sopp hagen i stedet for maur, kan dette også forklare den lave mengden allogrooming.

Vi observert sjelden metapleural kjertel grooming, og bare ved senere stadier av infeksjon. Arter av sopp voksende maur med rikelig Pseudonocardia bakteriell dekning stelle metapleural kjertler mindre enn arter med mindre eller ingen dekker25,47. Som A. echinatior har en overflod av symbiont47, kan dette forklare at lav til grooming frekvens. Metapleural kjertel utskillelsen er også dyrt å produsere30, og kan lagres i lommen infrabuccal for lengre perioder, betyr at behovet for Stell av metapleural kjertel kan være sjeldne. Under metapleural kjertel grooming, maur samtidig bytte ben og slikke beinet som hadde bare groomed kjertel; spores overføres dermed til infrabuccal lommen, hvor kjertel sekreter er avgjørende for å hemme Escovopsis' potensial for påfølgende spiring25. Mindre arbeidere er mer rikelig i redet og har større metapleural kjertler per enhet kropp masse30, antyder de er ansvarlig for fleste metapleural kjertel sekret. Dette kan også forklare hvorfor, i vår undersøkelse, det aller høyeste hyppigheten av sopp grooming var blant mindre arbeidere.

Vi forventet å observere behavior(s) indikerer aktiv bruk av antibiotika fra bakteriell symbiont Pseudonocardia, ofte observert på cuticle Acromyrmex arbeidere og kjent for å spille en rolle i forsvaret mot Escovopsis 36 , 39 , 40. den mest sannsynlige forklaringen for ikke å observere slik oppførsel, er at programmet disse antibiotika som kan innlemmes i andre atferd, som selv-Stell etterfulgt av sopp grooming og/eller Luke, som kan gjøre det vanskelig å observere som en tydelig oppførsel.

Vi observerte uvanlig virkemåte regurgitating væskedråper på sopp hagen. Oppgulp av mat til nestmates har tidligere blitt beskrevet i blad-kutting maurene22. I vårt eksperiment forskjellig dråper i farge fra gjennomsiktig til mørk brun, antyder de kan være en matkilde for andre maur og/eller gi vann. Vi observerte bare to anledninger hvor andre maurene drakk fra dråper, så vi ikke kan fastslå om dråpene nytte andre maurene eller tjene rehydrate soppen når luftfuktigheten er lav. De fleste observasjonene av dette var Escovopsis infeksjoner, som kan innebære en defensiv rolle, for eksempel immun grunning av gulpe opp antimikrobielle peptider16,48. Vi kan ikke trekke bastante konklusjoner på dette siden dette var sjeldne, men det ville være en interessant linje å undersøke videre, for eksempel ved å fastsette om dråper har antimikrobielle egenskaper.

Gitt at observasjonsstudier av komplekse defensiv atferd av blad-cutter maur, inkludert noen sammenligning med og uten sopp hage infeksjon, ville være svært vanskelig å gjøre innen, eksperimentelle data kan gi verdifull innsikt i disse virkemåtene under mer kontrollerte forhold. Mens observasjoner gjort under laboratorieforhold avvike fra opptreden fant under naturlige forhold, verktøy som vår katalog av sentrale defensiv atferd må utvikles, forbedre både eksperimentelle og feltet studier i fremtiden. Den eksperimentelle tilnærmingen kan imidlertid delvis forklare hvorfor noen atferd var svært sjeldne (f.eks allogrooming, metapleural kjertel grooming) i vår demonstrasjon for å bruke disse atferdsmessige definisjoner. Fremtidige studier kan derfor vurdere begrensningene i denne eksperimentelle oppsett, å finne måter å gjøre mer naturlig observasjoner. Flere faktorer kan også integreres i gjeldende protokollen, for eksempel skille mellom Actinobacteria-bærer (yngre) arbeidstakere og eldre arbeidstakere med mindre rikelig dekselet, som kan reagere forskjellig på trusselen om en Escovopsis infeksjon. Det er balansen mellom gjøre observasjoner mer nøyaktig (for eksempel etter scoring fokal individer), eller å ha større sub kolonien størrelse (større antall arbeidere), og tiden eller Antall sub kolonier eller enkeltpersoner som kan bli filmet i en gitt tidspunkt. Likevel, mens oppsettet kan utvides for større atferdsmessige studier med fokus på adressering opptreden mål, i dette tilfellet vi fokusert på vellykket utstillingsvindu en metode for registrering og definere spesifikk defensiv atferd.

Vi dokumentert atferd som bidrar til forsvar i blad-kutting maurene, og flere betydelig, har systematisk identifisert beskrevet og fanget defensiv atferd på film. Vår representant resultater forsterke andre forskning innen fagfeltet antyder at det er vanskelig for en patogen kunne ramme sopp-oppdrett maur kolonier, når mot en omfattende sett av defensiv atferd og tilhørende anvendelse av antimikrobielle forbindelser. Målet vårt var å gi et nytt verktøy for fremtiden i dette feltet, og vi håper at atferdsdata katalogen vil være verdifulle for å sikre konsensus og strømlinjeformet definisjoner, observasjoner og tolkninger av atferd, som en viktig ressurs for fremtidig forskning.

Disclosures

Forfatterne ikke avsløre.

Acknowledgments

Vi vil gjerne takke linje Vej Ugelvig og Kirsten Sheehy for nyttig diskusjoner om grooming mekanismer av antenne rengjøringsmidler og filming oppsett. Michael Poulsen støttes av en Villum Kann Rasmussen unge etterforsker fellesskap (VKR10101) og Tabitha Innocent av et Marie Curie enkelte europeiske fellesskap (IEF gi 627949). Vi vil også gjerne takke Smithsonian tropiske Research Institute for bruk av fasiliteter og logistisk støtte i Panama, og Autoridad Nacional del Ambiente om tillatelse til å samle og eksportere maur til Danmark.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Plastic boxes N/A N/A Transparent. Length: 3.15 in (8 cm), width: 2.17 in (5.5 cm), depth: 1.77 in (4.5 cm)
Petri dishes Sarstedt 82.1472 3.62x0.63 in (9.2x1.6 cm)
Inoculation loops Labsolute 7696431 Disposable 1uL. Length: 7.67 in (19.5 cm) 
Cameras DBPower NTC50HD_8.5mm USB Endoscope Camera
Holders for the cameras N/A N/A Old beaker clamp stand.
Laptop HP N/A Generic laptop for saving recordings.
Program used on the laptop Windows Movie maker N/A
Forceps Vermandel 50.054 Soft
Potato dextrose broth Sigma-Aldrich P6685-1KG 24 g/L

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Hölldobler, B., Wilson, E. O. The ants. , Belknap Press of Harvard University Press. (1990).
  2. Weber, N. A. Gardening ants, the attines. , American Philosophical Society. (1972).
  3. Bot, A. N. M., Ortius-Lechner, D., Finster, K., Maile, R., Boomsma, J. J. Variable sensitivity of fungi and bacteria to compounds produced by the metapleural glands of leaf-cutting ants. Insectes Sociaux. 49 (4), 363-370 (2002).
  4. Poulsen, M., Boomsma, J. J. Mutualistic fungi control crop diversity in fungus-growing ants. Science. 307 (5710), 741-744 (2005).
  5. Mueller, U. G., Scott, J. J., Ishak, H. D., Cooper, M., Rodrigues, A. Monoculture of Leafcutter Ant Gardens. Plos One. 5 (9), (2010).
  6. Hughes, W. O. H., Thomsen, L., Eilenberg, J., Boomsma, J. J. Diversity of entomopathogenic fungi near leaf-cutting ant nests in a neotropical forest, with particular reference to Metarhizium anisopliae var. anisopliae. Journal of Invertebrate Pathology. 85 (1), 46-53 (2004).
  7. Samson, R. A., Evans, H. C., Latgé, J. -P. Atlas of entomopathogenic fungi. , Springer-Verlag; Wetenschappelijke Uitgeverij Bunge. (1988).
  8. Shah, P. A., Pell, J. K. Entomopathogenic fungi as biological control agents. Applied Microbiology and Biotechnology. 61 (5-6), 413-423 (2003).
  9. Hughes, D. P., Evans, H. C., Hywel-Jones, N., Boomsma, J. J., Armitage, S. A. O. Novel fungal disease in complex leaf-cutting ant societies. Ecological Entomology. 34 (2), 214-220 (2009).
  10. Andersen, S. B., et al. The Life of a Dead Ant: The Expression of an Adaptive Extended Phenotype. American Naturalist. 174 (3), 424-433 (2009).
  11. Currie, C. R., Mueller, U. G., Malloch, D. The agricultural pathology of ant fungus gardens. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 96 (14), 7998-8002 (1999).
  12. Reynolds, H. T., Currie, C. R. Pathogenicity of Escovopsis weberi: The parasite of the attine ant-microbe symbiosis directly consumes the ant-cultivated fungus. Mycologia. 96 (5), 955-959 (2004).
  13. Camargo, R. S., Forti, L. C., Lopes, J. F. S., Andrade, A. P. P., Ottati, A. L. T. Age polyethism in the leaf-cutting ant Acromyrmex subterraneus brunneus Forel, 1911 (Hym., Formicidae). Journal of Applied Entomology. 131 (2), 139-145 (2007).
  14. Hughes, W. O. H., Sumner, S., Van Borm, S., Boomsma, J. J. Worker caste polymorphism has a genetic basis in Acromyrmex leaf-cutting ants. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 100 (16), 9394-9397 (2003).
  15. Wilson, E. O. Caste and Division of Labor in Leaf-Cutter Ants (Hymenoptera, Formicidae, Atta). 2. The Ergonomic Optimization of Leaf Cutting. Behavioral Ecology and Sociobiology. 7 (2), 157-165 (1980).
  16. Schmid-Hempel, P. Parasites and Their Social Hosts. Trends in Parasitology. 33 (6), 453-462 (2017).
  17. Hamilton, W. D., Axelrod, R., Tanese, R. Sexual Reproduction as an Adaptation to Resist Parasites (a Review). Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 87 (9), 3566-3573 (1990).
  18. Zhu, Y. Y., et al. Genetic diversity and disease control in rice. Nature. 406 (6797), 718-722 (2000).
  19. Heine, D., et al. Chemical warfare between leafcutter ant symbionts and a co-evolved pathogen. Nature Communications. 9, (2018).
  20. Cremer, S., Pull, C. D., Furst, M. A. Social Immunity: Emergence and Evolution of Colony-Level Disease Protection. Annual Review of Entomology. 63, 105-123 (2018).
  21. Quinlan, R. J., Cherrett, J. M. Role of Substrate Preparation in Symbiosis between Leaf-Cutting Ant Acromyrmex octospinosus (Reich) and Its Food Fungus. Ecological Entomology. 2 (2), 161-170 (1977).
  22. Richard, F. J., Errard, C. Hygienic behavior, liquid-foraging, and trophallaxis in the leaf-cutting ants, Acromyrmex subterraneus and Acromyrmex octospinosus. Journal of Insect Science. 9, (2009).
  23. Reber, A., Purcell, J., Buechel, S. D., Buri, P., Chapuisat, M. The expression and impact of antifungal grooming in ants. Journal of Evolutionary Biology. 24 (5), 954-964 (2011).
  24. Poulsen, M., Bot, A. N. M., Boomsma, J. J. The effect of metapleural gland secretion on the growth of a mutualistic bacterium on the cuticle of leaf-cutting ants. Naturwissenschaften. 90 (9), 406-409 (2003).
  25. Fernandez-Marin, H., Zimmerman, J. K., Rehner, S. A., Wcislo, W. T. Active use of the metapleural glands by ants in controlling fungal infection. Proceedings of the Royal Society B-Biological Sciences. 273 (1594), 1689-1695 (2006).
  26. Fernandez-Marin, H., et al. Functional role of phenylacetic acid from metapleural gland secretions in controlling fungal pathogens in evolutionarily derived leaf-cutting ants. Proceedings of the Royal Society B-Biological Sciences. 282 (1807), (2015).
  27. Fernandez-Marin, H., Zimmermann, J. K., Wcislo, W. T. Nest-founding in Acromyrmexoctospinosus (Hymenoptera, Formicidae, Attini): demography and putative prophylactic behaviors. Insectes Sociaux. 50 (4), 304-308 (2003).
  28. Currie, C. R., Stuart, A. E. Weeding and grooming of pathogens in agriculture by ants. Proceedings of the Royal Society B-Biological Sciences. 268 (1471), 1033-1039 (2001).
  29. Ortius-Lechner, D., Maile, R., Morgan, E. D., Boomsma, J. J. Metaplural gland secretion of the leaf-cutter ant Acromyrmex octospinosus: New compounds and their functional significance. Journal of Chemical Ecology. 26 (7), 1667-1683 (2000).
  30. Poulsen, M., Bot, A. N. M., Nielsen, M. G., Boomsma, J. J. Experimental evidence for the costs and hygienic significance of the antibiotic metapleural gland secretion in leaf-cutting ants. Behavioral Ecology and Sociobiology. 52 (2), 151-157 (2002).
  31. Bot, A. N. M., Currie, C. R., Hart, A. G., Boomsma, J. Waste management in leaf-cutting ants. Ethology Ecology & Evolution. 13 (3), 225-237 (2001).
  32. Little, A. E. F., Murakami, T., Mueller, U. G., Currie, C. R. Defending against parasites: fungus-growing ants combine specialized behaviours and microbial symbionts to protect their fungus gardens. Biology Letters. 2 (1), 12-16 (2006).
  33. Abramowski, D., Currie, C. R., Poulsen, M. Caste specialization in behavioral defenses against fungus garden parasites in Acromyrmex octospinosus leaf-cutting ants. Insectes Sociaux. 58 (1), 65-75 (2011).
  34. Currie, C. R., Scott, J. A., Summerbell, R. C., Malloch, D. Fungus-growing ants use antibiotic-producing bacteria to control garden parasites. Nature. 398 (6729), 701-704 (1999).
  35. Scheuring, I., Yu, D. W. How to assemble a beneficial microbiome in three easy steps. Ecology Letters. 15 (11), 1300-1307 (2012).
  36. Worsley, S. F., et al. Symbiotic partnerships and their chemical interactions in the leafcutter ants (Hymenoptera: Formicidae). Myrmecological News. 27, 59-74 (2018).
  37. Currie, C. R., Poulsen, M., Mendenhall, J., Boomsma, J. J., Billen, J. Coevolved crypts and exocrine glands support mutualistic bacteria in fungus-growing ants. Science. 311 (5757), 81-83 (2006).
  38. Poulsen, M., et al. Variation in Pseudonocardia antibiotic defence helps govern parasite-induced morbidity in Acromyrmex leaf-cutting ants. Environmental Microbiology Reports. 2 (4), 534-540 (2010).
  39. Poulsen, M., Cafaro, M., Boomsma, J. J., Currie, C. R. Specificity of the mutualistic association between actinomycete bacteria and two sympatric species of Acromyrmex leaf-cutting ants. Molecular Ecology. 14 (11), 3597-3604 (2005).
  40. Andersen, S. B., Hansen, L. H., Sapountzis, P., Sorensen, S. J., Boomsma, J. J. Specificity and stability of the Acromyrmex-Pseudonocardia symbiosis. Molecular Ecology. 22 (16), 4307-4321 (2013).
  41. Currie, C. R., Bot, A. N. M., Boomsma, J. J. Experimental evidence of a tripartite mutualism: bacteria protect ant fungus gardens from specialized parasites. Oikos. 101 (1), 91-102 (2003).
  42. Cremer, S., Armitage, S. A. O., Schmid-Hempel, P. Social immunity. Current Biology. 17 (16), R693-R702 (2007).
  43. Schluns, H., Crozier, R. H. Molecular and chemical immune defenses in ants (Hymenoptera: Formicidae). Myrmecological News. 12, 237-249 (2009).
  44. Masri, L., Cremer, S. Individual and social immunisation in insects. Trends in Immunology. 35 (10), 471-482 (2014).
  45. Hackmann, A., Delacave, H., Robinson, A., Labonte, D., Federle, W. Functional morphology and efficiency of the antenna cleaner in Camponotus rufifemur ants. Royal Society Open Science. 2 (7), (2015).
  46. How ants use 'combs' and 'brushes' to keep their antennae clean. , Available from: https://www.youtube.com/watch?time_continue=65&v=AB4HoeloqZw (2015).
  47. Fernandez-Marin, H., Zimmerman, J. K., Nash, D. R., Boomsma, J. J., Wcislo, W. T. Reduced biological control and enhanced chemical pest management in the evolution of fungus farming in ants. Proceedings of the Royal Society B-Biological Sciences. 276 (1665), 2263-2269 (2009).
  48. Konrad, M., et al. Social Transfer of Pathogenic Fungus Promotes Active Immunisation in Ant Colonies. Plos Biology. 10 (4), (2012).

Tags

Atferd problemet 140 sosiale immunitet antimikrobielle forsvar profylakse grooming Luke sopp hage metapleural kjertel gulpe opp antenne rengjøring
En visuell Guide for å studere atferdsmessige forsvar til patogen angrep i Leaf-kutting maurene
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Nilsson-Møller, S., Poulsen,… More

Nilsson-Møller, S., Poulsen, M., Innocent, T. M. A Visual Guide for Studying Behavioral Defenses to Pathogen Attacks in Leaf-Cutting Ants. J. Vis. Exp. (140), e58420, doi:10.3791/58420 (2018).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter