Summary
Här beskriver vi ett protokoll för att mäta glomerulär filtrationshastighet (GFR) i medveten, fritt rörliga möss använder en transdermal GFR bildskärm.
Abstract
Transdermal analys av glomerulär filtrationshastighet (GFR) är en etablerad teknik som används för att bedöma njurfunktion hos mus och råtta modeller för akut njurskada och kronisk njursjukdom. Mätsystemet består av en miniatyriserade fluorescensdetektor som är direkt ansluten till huden på baksidan av medveten, fritt rörliga djur, och mäter utsöndring kineticsen av den exogena GFR tracer, fluorescein-fluoresceinisothiocyanat (FITC) konjugerade sinistrin (en inulin analog). Detta system har beskrivits i detalj i råttor. Dock på grund av sin mindre storlek presenterar mätning av transkutan GFR hos möss ytterligare tekniska utmaningar. I detta dokument ger vi därför den första detaljerade praktiska guiden till användning av transdermalt GFR monitorer i möss baserat på den kombinera erfarenheten av tre olika utredare som har utfört denna analys på möss under ett antal år.
Introduction
Användning av transkutan GFR monitorer i möss rapporterades först av Schreiber och kollegor i 2012 och validerades genom att jämföra GFR-mätningar som erhålls med hjälp av denna teknik, med resultat erhållna genom direkt mätning av FITC-sinistrin bolus clearance från seriell blodprov1. Hittills har 35 fackgranskade publikationer där transkutan GFR bildskärmar har använts i råttor och möss (en regelbundet uppdaterad lista över tidskriftsartiklar och conference abstracts som prekliniska GFR bildskärmen användes kan hittas på den MediBeacon webbplats (2). Transdermal GFR mätningar hos råttor och möss har beskrivits i ett antal publikationer1,3,4,5, och en video tutorial som visar dess användning i råttor har varit publicerade6. Mätning i möss presenterar emellertid ytterligare tekniska utmaningar. Här, ger vi den första detaljerade praktiska guiden till användning av transdermalt GFR monitorer i möss.
Det finns en mängd skäl varför utredare börjar att gynna användning av transdermalt GFR monitorer för att bedöma njurfunktion hos gnagare modeller. Transdermal mätning av FITC-sinistrin clearance har visat sig ge ett mer känslig och korrekt mått på njurfunktion jämfört med de traditionella parametrarna av njurfunktionen såsom serum kreatinin och blod urea kväve (BUN)7, 8. Genom att implementera en algoritm som utvärderingen förbättras, visade Friedemann och kollegor att systemet når precision jämförbara till guldmyntfoten, den konstanta infusion tekniken för GFR mätning3. Nyligen genomförda studier har också visat att sekventiell analys med transkutan GFR bildskärmar kan användas för att studera tidiga förändringar i njurfunktionen samt funktionell återhämtning efter induktion av akut njurskada (AKI) utan att störa djurens blod volym eller hemodynamik, blod eftersom analysen inte kräver sekventiella provtagning9,10. Förmågan att mäta GFR med hög precision och känslighet upprepade gånger på samma djur gör denna teknik attraktiv för en mängd olika forskningsdiscipliner. Transdermal GFR bildskärmar har använts av läkemedelsföretag för att bedöma toxiciteten av nya föreningar samt universitet för grundläggande och translationell forskning.
Protocol
Alla djurförsök har utförts i enlighet med lokala riktlinjer i Storbritannien och USA. Experiment som genomförts vid University of Liverpool utfördes under en licens som beviljats enligt UK djur (vetenskapliga förfaranden) Act 1986 och godkändes av den etiska kommittén som universitetet i Liverpool. Alla djurförsök som utförts vid Vanderbilt University Medical Center godkändes av Vanderbilt institutionella djur vård och användning kommittén.
1. förbereda den FITC-sinistrin
- Förbereda 40 mg/mL FITC-sinistrin i fosfatbuffrad saltlösning (PBS).
Obs: Alikvoter kan förvaras vid-20 ° C under flera månader med ingen märkbar minskning av kvalitet. men flera frysning-tining cykler bör undvikas. FITC-sinistrin är ljuskänsligt - hålla röret skyddas från ljus. - Beräkna volymen av FITC-sinistrin krävs för varje mus:
- Väga varje mus på varje dag av mätning.
- Den rekommenderade dosen är 0,15 mg FITC-sinistrin per gram kroppsvikt.
2. mus förberedelse
- Förbereda separata burar för mössen samtidigt som genomgår GFR-mätningar. Tillhandahålla absorberande pappershanddukar och några pellets av mat.
3. ta bort hår från mus (1-2 dagar före GFR mätning)
- Söva musen med 3% isofluran och när musen är i viloläge, underhålla anestesi med 1,5 – 2% isofluran, beroende på andelen andning på musen. Placera musen benägna på en hetta madrassera.
- Använda en rakapparat, gå mot riktningen av pälsen, ta bort de flesta av päls från ena sidan av musens baksida. Raka från toppen av bakbenen upp till halsen och över revbenen.
- Applicera ett tunt lager av cellulite grädde till den rakade området med hjälp av en bomullspinne (figur 1A). Flytta bomullstuss mot riktningen av pälsen så att krämen är tillämpas så nära huden som möjligt.
- Ta bort krämen efter 1 – 3 min genom att tvätta bort det med bomullspinnar och varmt vatten. Utför inte mätningen om huden verkar väldigt röd och irriterad efter mätning, och upprepa inte avhårning inom 72 h för att undvika skada huden.
4. förbereda Transdermal GFR bildskärmen
- Använd någon av de två storlekarna av patchar som finns. Först är 2,5 x 3 cm2 i storlek och kan användas för mätningar i möss direkt. Andra patchar är 6 x 3 cm2 i storlek och är tänkt att användas i råttor eller större djur men kan kapas till en mindre storlek för användning i möss.
- Skala uppbackning av ena sidan av plåstret och hålla GFR enheten på den självhäftande sidan, positionering lysdioderna precis ovanför fönstret klar.
- Klipp överflödigt lim plåstret för att passa storleken på batteriet och hålla fast ena sidan av lappen till batteriet.
5. fästa Transdermal GFR bildskärmen
- Bedöva musen med isofluran som beskrivs i steg 3.1 och Placera musen benägna på en hetta madrassera. Söva möss bara för placering av transdermalt GFR monitor och injektion av FITC-sinistrin; tillåta att återhämta sig från anestesi för mätning av FITC förfall.
- Ren före rakade huden med 70% etanol. Placera ca 12 cm Allergivänligt silk tejp under musen (figur 1B; bredd på bandet bör minskas till 1,5 – 2 cm så att det inte är för bred för musen).
- Placera bandet så att endast ca 2 cm är på musens högra sida, och resten är till vänster. Vik över ena kanten på höger sida av tejp för enkel placering och borttagning efter mätningen. Vänster-höger bruksanvisning steg 5.3 och 5.6 är för enhet placering på höger sida av djuret och kan bytas för enheten placering på vänster sida av djuret om det behövs.
- Anslut batteriet till enheten, ta bort skyddspapperet från batteriet och säkert placera den ovanpå enheten. Enheten är klar att använda och datainsamling påbörjas när de blå lysdioder (LEDs) börjar blinka.
- Ta bort skyddspapperet från enheten och placera på rakade huden. Placera enheten så att fönstret utsätta lysdioderna är över revbenen – behöver inte det för nära ryggraden eller lemmar (figur 1 c).
- Mmans med vit tejp. Säkra höger sida först (figur 1 d), inslagning det tätt runt alla kanter av enheten och sedan wrap till vänster runt musen och enhet (figur 1E). Idealiskt, vänster sida av bandet omfattar endast enheten, och till höger slutar under musens buken.
- Fäst bandet genom att trycka längs omkretsen av musens kropp. Tejpen måste fästas ordentligt, men inte hårt. Om den är för lös då enheten kommer att flytta runt för mycket och orsaka rörelse artefakter. Dock bör det inte vara så snäva att det begränsar andning eller rörelse eller sätter för mycket press på huden.
- Enheten stå orörd i 3 minuter innan FITC-sinistrin injektionen för att möjliggöra en stadig bakgrund läsning för att tas. I denna tid, varma svansen med en hetta madrassera eller handske fylld med varmt vatten för att förbereda svans ven injektionsvätska (om du använder denna rutt).
6. FITC-sinistrin injektion
- Förbereda en insulinspruta med Beräknad mängd FITC-sinistrin krävs för injektion (det kan avrundas till de närmsta 10 μL).
- Administrera FITC-sinistrin med svans ven eller retro-orbital injektion. FITC-sinistrin ska administreras i en smidig men snabb bolus att undvika flera toppar på clearance kurvan. Det är bättre att administrera endast en ofullständig dos än att ha flera försök till administrera den FITC-sinistrin.
7. mätning av GFR
- Placera musen i en bur på egen hand återställa från isofluran anestesi och under hela mätperioden.
- Observera musen i buren för 1,5 h och sedan ta bort enheten. Ta bort enheten från medvetna musen är snabb, effektiv och tolereras i allmänhet väl av musen, men nya användare kanske föredrar att bedöva musen för det här steget.
- Som ett alternativ, bedöva musen med isofluran.
- Som det andra alternativet, Placera musen på en tråd rack ovanpå buren, vilket gör att musen för att greppa metallstänger medan enheten tas bort.
- Dra bort vit puts tejpen från undersidan magen i en snabb, smidig rörelse och ta bort enheten och svart gips från huden. Var noga med att batteriet inte kopplar från enheten ännu.
- Återgå musen till dess buren.
8. läsning och utvärdering av Data
- Koppla försiktigt bort batteriet från enheten
- Ansluta enheten till USB-kabeln och Anslut sedan kabeln till datorn
- Öppna programvaran läsning (Sensor_ctrl_app.exe)
- Ordning, klicka på ”Anslut”, ”läsa”, ”nytt namn” och ”spara”, stäng sedan programmet
- Behandla och utvärdera data i programvaran analys som beskrivs i handboken för respektive
Representative Results
I detta avsnitt presenterar vi representativa resultat av användning av transdermalt GFR bildskärmen. Transdermal bildskärmen har använts i en mängd mus stammar och modeller av AKI och CKD2.
Figur 2 visar representativa FITC-sinistrin clearance kurvor hos BALB/c hanmöss före och efter ischemi reperfusionsskada (IRI) med samtidig kontralaterala nefrektomi. FITC-sinistrin försvinner snabbt från cirkulationen i friska möss (figur 2A), men clearance är kraftigt försenad i möss med AKI (figur 2B, C). I möss med mycket svår AKI, kan det inte finnas någon förändring i FITC-sinistrin fluorescens under 90 minuters mätperioden, som visar en total avsaknad av glomerulär filtration (figur 2 c).
Transdermal GFR mätning är minimalt invasiva och kan användas för att övervaka förändringar i njurfunktionen i samma möss över flera tidpunkter. Figur 3 illustrerar förändringar i GFR bestäms av sekventiell transdermal FITC-sinistrin clearance mätningar vid baslinjen, och 1, 2 och 4 dagar efter inducerande IRI (ensidiga ischemi med samtidiga kontralaterala nefrektomi). Data som visas inkluderar FITC-sinistrin clearance halveringstid (figur 3A) och GFR (figur 3B) beräknas från den uppmätta FITC-sinistrin clearance halveringstiden, som beskrivs av Schreiber et al1.
I figur 4förmåddes kronisk njursjukdom (CKD) hos hanmöss BALB/c genom att utföra långvarig ensidig IRI följt av fördröjd kontralaterala nefrektomi, som beskrev11. GFR bedömdes av transdermalt FITC-sinistrin clearance på dag 26 efter den inledande IRI. Ökningen av FITC-sinistrin halveringstid (figur 4A), och därför minskningen av GFR (figur 4B), indikerar försämrad njurfunktion hos dessa möss. Dessa data visar att transkutan GFR-mätning kan användas för att mäta förändringar i njurfunktionen hos möss med CKD.
Figur 5A visar att FITC-sinistrin halveringstid nära korrelerar med semikvantitativ histologisk utvärdering av tubulär skada över de fullständiga utbud av GFR-mätningarna i oskadd möss och hos möss med olika svårighetsgrader av IRI-inducerad AKI. Däremot serum kreatinin och blod kväve som urea (BUN) visade en positiv men svagare korrelation med FITC-sinistrin clearance (figur 5B, C), vilket indikerar att transkutan GFR-mätningar ger ett mer tillförlitligt mått på nedsatt skada (tubulär skada Poäng) efter IRI-inducerad AKI än antingen serumkreatinin eller bulle.
Figur 1: fästa transdermal GFR bildskärmen. Fotografier av hårborttagning (A), placering av bandet under musen (B), placering av enheten på musens hud (C) och säkra enheten genom att Linda tejp runt musen och enhet (D-E), vänligen klicka här för att Visa en större version av denna siffra.
Figur 2: exempel FITC-sinistrin clearance kurvor i BALB/c hanmöss före och efter ischemi reperfusionsskada (IRI) med samtidig kontralaterala nefrektomi. Clearance kurvor vid studiestart (A), och en dag efter IRI kirurgi (B) i samma mus, vilket indikerar nedsatt njurfunktion i denna mus. (C) Clearance kurvan från en mer allvarligt skadade mus en dag efter IRI kirurgi. Det fanns ingen clearance av FITC-sinistrin under mätperioden, som anger njursvikt. Svart datapunkter representera rådata, blå linjerna representerar 3-fack passar och gröna linjerna avser 95% konfidensintervall. Klicka här för att se en större version av denna siffra.
Figur 3: manliga BALB/c-möss, ålder 8-10 veckor genomgick ensidiga ischemi med samtidiga kontralaterala nefrektomi (n = 5). GFR var bedömas vid baseline och på dag 1, 2 och 4 efter operation, och jämfört med sham manövrerade kontroll möss (n = 5). FITC-sinistrin halveringstid (A) användes, tillsammans med möss, kroppsvikt för att beräkna GFR (B). Datapunkter representerar enskilda djur och felstaplar representera medelvärdet och standardavvikelsen. Klicka här för att se en större version av denna siffra.
Figur 4: manliga BALB/c möss ålder 8-10 veckor genomgick ensidiga ischemi med fördröjd kontralaterala nefrektomi vid dag 8 (n = 5). GFR bedömdes genom dag 26 och var jämfört med åldersmatchade friska kontroll möss (n = 5). FITC-sinistrin halveringstid (A) användes, tillsammans med möss, kroppsvikt för att beräkna GFR (B). Datapunkter representerar enskilda djur och felstaplar representera medelvärde och standardavvikelse. Tubulär skada gjorde var 0-50 baserat på graden av nekros och gjutna bildandet av en blindad observatör (L.R.) Perjodsyra-Schiff-färgade njure sektioner. Denna metod var anpassad från Wang och kollegor12. Klicka här för att se en större version av denna siffra.
Figur 5: korrelation av tre åtgärder av funktion/njurskada (Histologisk undersökning av tubulär skada (n = 39), serumkreatinin (n = 30) och blod kväve som urea (BUN) (n = 30)) med FITC-sinistrin clearance (halveringstid). BALB/c hanmöss genomgick olika perioder av ensidiga nedsatt BLOMSTJÄLK fastspänning (25 – 45 min) eller sham kirurgi, med samtidig kontralaterala nefrektomi att framkalla olika svårighetsgrad av AKI, och njurfunktionen parametrar och histopatologi bedömdes på dag 4 efter IRI. Tubulär skada poängen visade en stark positiv korrelation med FITC-sinistrin clearance (A; R2 = 0,88), medan serumkreatinin (B) och bulle (C) båda visade positiva men svagare korrelation med FITC-sinistrin clearance (R2 = 0,64 och 0,52, respektive). Klicka här för att se en större version av denna siffra.
Discussion
Detta manuskript och den medföljande träningsvideo ge praktiska riktlinjer för användning av transdermalt GFR monitorer i möss. De mest kritiska steg i förfarandet är rätt fastsättning av enheten på djurets rygg och säkert inslagning tejp runt buken. Den bästa positionen är antingen något åt vänster eller höger om mittlinjen, över bröstkorgen. Lappen och enheten måste sättas fast på huden, men de bör inte vara så snäva att de begränsar andning, rörelse, eller påverka huden blodcirkulationen under enheten, eftersom detta skulle leda till felaktig/felaktiga mätningar. Dessutom, eftersom övervakning sker i medvetna möss när de har återhämtat sig från anestesi, korrekt placering av enheten från sida kroppen med lägsta störningar från rörelse resulterar i transdermal mätningar med lite rörelse artefakter. Därför är det viktigt att enheten inte är placerad för nära övre extremiteterna så att mössen kan flytta sina axlar fritt.
Det är viktigt att depilate möss en till två dagar före GFR mätning som hårborttagning påverkar beräkningen av FITC-sinistrin clearance, med preliminära data som visar att hårborttagning omedelbart före mätning av transdermalt GFR ökar den skenbara halveringstiden av FITC-sinistrin. Mekanismen för detta är okänd. Därför, för att erhålla pålitliga mätningar över flera tidpunkter och mellan experiment, är det lämpligt att depilate möss i förväg, för att låta huden att återhämta sig från denna process innan du fortsätter med GFR-mätningar. Cellulite grädde bör inte tillämpas på samma område av huden inom 72 timmar efter en tidigare ansökan, att undvika kemiska skador på huden. I många fall päls re-tillväxt tar flera dagar eller upp till en vecka, och så re-ansökan för cellulite grädde inom 72 h lätt kan undvikas.
Eftersom upp till 50% av serum kreatinin utsöndras av tubulär avsnitt i möss13, och eftersom det finns ökad reabsorption av karbamid från njurtubuli när möss är uttorkad14, är serumkreatinin och bulle dålig markörer av njurfunktionen. Dock på grund av sin bekvämlighet fortsättningsvis dessa analyser användas som det viktigaste måttet på njurfunktion i prekliniska studier med AKI och CKD i möss. Överensstämmer med stort bidrag av tubulär sekretion till kreatinin utsöndring hos möss med normal eller nära normal njurfunktion13, serumkreatinin visade dock liten korrelation med FITC-sinistrin clearance på hög clearance priser (låg FITC-sinistrin halveringstid), vilket indikerar att kreatinin är en okänslig mått på njurfunktion hos möss med mild njurskada. Även BUN korrelerar väl med FITC-sinistrin clearance hos möss med lätt nedsatt njurfunktion, finns det däremot dålig korrelation mellan BUN och FITC-sinistrin clearance hos möss med mer allvarlig njurskada (hög FITC-sinistrin halveringstid). Detta orsakas sannolikt av effekterna av urea reabsorption förknippas med uttorkning hos sjuka djur med allvarlig njurskada.
En stor fördel med transdermal GFR mätning, jämfört med alla andra bolus clearance eller konstant infusion tekniker för mätning av GFR, är att det inte kräver noggrant tidsinställda blod- eller urinprov samlingar. Dessa kan vara särskilt utmanande i möss eftersom de har låg total blod volymer och urinproduktion jämfört med råttor. Dessutom behöver möss hanteras endast för fastsättning av enhet och injektion, men inte för flera venpunktioner, som krävs för klassiska bolus clearance experiment15. Dessutom anestesi varar kort, och som sådan är det möjligt att utföra upprepade mätningar i enskilda möss över tid. Den frekvens där mätningarna kan utföras primärt beror på hälsotillståndet hos möss, forskarens fallenhet för intravenösa injektioner och lokala institutionella bestämmelser på upprepade anestesi sessioner. På frisk, oskadad möss, kan transdermal GFR mätningar utföras dagligen, med minimala eller inga effekter på musen. Dock skadade möss lider av AKI eller CKD är osannolikt att tolerera upprepade anestesi sessioner samt friska möss, och thus frekvensen av mätningar bör minskas.
Den största begränsningen av transdermalt GFR mätning, jämfört med bolus clearance metoder att mäta GFR hos möss är att utsöndring kinetik endast mäts som förändring i relativ fluorescensintensiteten över tid, och inte som absoluta tracer koncentrationer. På grund av detta är det endast möjligt att mäta konstanten av utsöndring kinetic, som är en mycket nära uppskattning av GFR normaliserade på extracellulär volym16enda exponentiell förfall. För att uttrycka GFR i mL/min, har extracellulära volymen av djuret uppskattas med hjälp av en konverteringsfaktor som etablerades i tidigare studier där samtidiga mätningar av plasmakoncentrationerna av FITC-sinistrin utförs1. Men denna faktor kan inte korrekt uppskattning extracellulär vätska volymer lika bra i alla möss, eftersom flytande volym kan påverkas av en mängd yttre faktorer såsom ålder, kön, vätskestatus (som kan påverkas av kirurgiska interventioner samt njurskada), och vikt17. Men till skillnad från bolus dosering metod för att bedöma GFR hos möss, är transkutan GFR-mätning föremål för mindre operatörsberoende variabilitet eftersom den inte påverkas av dosering fel eller fel i timing av blod samlingar.
En annan begränsning av transkutan GFR mätning tekniken är att baslinjen signal förskjutningar kan uppstå under mätningen på grund av blekning av hud fluorophores och den anestesi krävs för enheten fastsättning och tracer injektion. Denna begränsning togs upp av Friedemann och kollegor genom att implementera en korrigering algoritm3. Genomförandet av denna algoritm som ledde till en förbättring av precisionen av transdermalt tekniken jämförbar med en konstant infusion teknik av GFR bedömning.
En vanliga fråga är huruvida hudpigmentering i olika mus stammar påverkar transdermalt FITC-sinistrin clearance. Hudens pigmentering minskar FITC-sinistrin signal intensiteten eftersom mörka pigment absorberar blå magnetiseringen och gröna utsläpp signaler från FITC-sinistrin mätningar. Men andelen utsöndring av FITC-sinistrin är oberoende av totalt signal intensiteten. Dessutom medan den uppmätta signalen är lägre, är bakgrunden signalen också lägre i pigmenterad möss. Eftersom bakgrunden signalen är en blandning av autofluorescens av hud fluorophores och reflektion av magnetiseringen ljuset, har vi funnit att bakgrunden till-högsta-signal förhållandet är jämförbara, eller ännu bättre, i pigmenterad djur. Dessutom rörelse artefakter, som orsakas av den omgivande huden exponeras för reflekterat ljus, reduceras i pigmenterad möss eftersom det reflekterade ljuset absorberas också av pigmenterad hud.
Sammanfattningsvis kan den teknik som vi har lagt fram exakt mätning av GFR i medveten, fritt rörliga möss för alla hudtyper. Eftersom tekniken är oberoende av blodprovstagning, kan det användas flera gånger på samma djur för longitudinella observationer i CKD modeller samt för mätning av snabba förändringar av GFR som inträffar efter induktion av AKI.
Disclosures
D S-K, JF och YS är anställda på MediBeacon GmbH tillverkare och distributör av transdermalt GFR bildskärmen.
D S-K och JF är uppfinnare på patent och patentansökningar för presenteras tekniken.
Acknowledgments
Detta arbete stöds av Vanderbilt Center för njur sjukdom (VCKD) och finansierades delvis av de följande bidrag: DOD PR161028 och R01DK112688 (Mark de Caestecker)
Vi erkänner stöd till LS, PM och BW av MRC, EPSRC och BBSRC-finansierade UK regenerativ medicin plattform ”säkerhet och effekt, fokusering på Imaging teknik Hub” (herr/K026739/1).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Transdermal GFR monitor (comes with 1 device, 2 batteries and 1 charger) | MediBeacon GmbH | TDM-MH001 | Reading software: MPD Lab; Analysis software: MPD Studio |
| Additional Batteries | MediBeacon GmBH | PWR-BT0001 | |
| Attachment patches | MediBeacon GmbH | small: PTC-SM001; large: PTC-LG001 | |
| FITC-sinistrin | MediBeacon GmbH | FTC-FS001 | |
| Hypoallergenic silk tape | e.g. Durapore (1538-2), or Kendall (7138C), or Leukosilk (01032-00) | ||
| Anaesthesia chamber, isoflurane, oxygen | |||
| Heat pad | |||
| Electric shaver | |||
| Depilatory (hair removal) cream | e.g. Veet or Nair | ||
| Cotton buds | |||
| Cotton swabs | |||
| Timer | |||
| Scales | |||
| 70% ethanol wipes |
References
- Schreiber, A., et al. Transcutaneous measurement of renal function in conscious mice. American Journal of Physiology - Renal Physiology. 303 (5), F783-F788 (2012).
- MediBeacon. Related Publications. , Available from: http://www.medibeacon.com/preclinical/publications/ (2018).
- Friedemann, J., et al. Improved kinetic model for the transcutaneous measurement of glomerular filtration rate in experimental animals. Kidney International. 90 (6), 1377-1385 (2016).
- Schock-Kusch, D., et al. Reliability of transcutaneous measurement of renal function in various strains of conscious mice. PLoS One. 8 (8), e71519 (2013).
- Schock-Kusch, D., et al. Transcutaneous assessment of renal function in conscious rats with a device for measuring FITC-sinistrin disappearance curves. Kidney International. 79 (11), 1254-1258 (2011).
- Herrera Pérez, Z., Weinfurter, S., Gretz, N. Transcutaneous Assessment of Renal Function in Conscious Rodents. Journal of Visualized Experiments. (109), 53767 (2016).
- Cowley, A. W. Jr, et al. Progression of glomerular filtration rate reduction determined in conscious Dahl salt-sensitive hypertensive rats. Hypertension. 62 (1), 85-90 (2013).
- Scarfe, L., et al. Measures of kidney function by minimally invasive techniques correlate with histological glomerular damage in SCID mice with adriamycin-induced nephropathy. Scientific Reports. 5, 13601 (2015).
- Lazzeri, E., et al. Endocycle-related tubular cell hypertrophy and progenitor proliferation recover renal function after acute kidney injury. Nature Communications. 9 (1), 1344 (2018).
- Street, J. M., et al. The role of adenosine 1a receptor signaling on GFR early after the induction of sepsis. American Journal of Physiology - Renal Physiology. 314 (5), F788-F797 (2018).
- Skrypnyk, N. I., Harris, R. C., de Caestecker, M. P. Ischemia-reperfusion model of acute kidney injury and post injury fibrosis in mice. Journal of Visualized Experiments. (78), (2013).
- Wang, W., et al. Endotoxemic acute renal failure is attenuated in caspase-1-deficient mice. American Journal of Physiology - Renal Physiology. 288 (5), F997-F1004 (2005).
- Eisner, C., et al. Major contribution of tubular secretion to creatinine clearance in mice. Kidney International. 77 (6), 519-526 (2010).
- Bankir, L., Yang, B. New insights into urea and glucose handling by the kidney, and the urine concentrating mechanism. Kidney International. 81 (12), 1179-1198 (2012).
- Qi, Z., et al. Serial determination of glomerular filtration rate in conscious mice using FITC-inulin clearance. American Journal of Physiology - Renal Physiology. 286 (3), F590-F596 (2004).
- Peters, A. M. The kinetic basis of glomerular filtration rate measurement and new concepts of indexation to body size. European Journal of Nuclear Medicine and Molecular Imaging. 31 (1), 137-149 (2004).
- Chapman, M. E., Hu, L., Plato, C. F., Kohan, D. E. Bioimpedance spectroscopy for the estimation of body fluid volumes in mice. American Journal of Physiology - Renal Physiology. 299 (1), F280-F283 (2010).
